AR1ICO ORICIAAL / ORICIAALAR1ICLE

TELMEROS, TELOMERASE E CANCER

Henrique A. Parsons*
54
seqncias extremamente simples - repeties
26, 32
RESUMO TTAGGG, que so caracteristicamente regies de
32
heterocromatina. Suas Iunes incluem a
Ha muito os telmeros e sua enzima
manuteno da integridade cromossmica, a garantia
mantenedora so ligados a gnese dos processos
da replicao completa das extremidades dos
neoplasicos. O presente artigo tem por objetivo
cromossomos e o estabelecimento da estrutura
32
explorar o Iuncionamento dos telmeros e sua
tridimensional do nucleo celular.
participao nos processos neoplasicos, bem
Os telmeros garantem a integridade
como suas aplicaes na pratica clinica, como
cromossmica atraves da manuteno da
Iatores prognosticadores do cncer, como
estabilidade, uma vez que os terminais
auxiliares no diagnostico e como Ierramenta
cromossmicos desnudos so Ireqentemente
para alvoteraputico Iuturo.
envolvidos com eventos recombinatorios no
32
esperados ou simples degradao.
Descritores: neoplasias, telmero, telomerase,
Apresena da seqncia telomerica garante o
imortalidade celular.
anelamento da telomerase que, por sua vez, garante a
replicao completa do cromossomo em
Rev. Fac. Cinc. Md. Sorocaba, v. 5, n. 1, p. 54-59, 2003
determinadas situaes, conIorme sera discutido
32
mais adiante.
Nota-se que, nas celulas somaticas, e INTRODUO
natural que o telmero diminua de tamanho
durante seu ciclo de vida, numa taxa de cerca de 30 O cncer resulta da tetrade que inclui a
a 120 pares de base por replicao, sendo sinal de perda da regulao do ciclo celular, a perda do
30
senescncia. controle sobre invaso e metastases, Ialha dos
A regio telomerica e a responsavel pelo mecanismos apoptoticos e o sobrepujamento do
20
ancoramento dos cromossomos a membrana envelhecimento.
nuclear, garantindo a estrutura tridimensional do Desde 1971, quando Olovnikov e Watson
nucleo e, portanto, garantindo a correta distribuio demonstraram que os cromossomos jamais
espacial dos cromossomos, sugerindo uma Iuno duplicam completamente seus terminais, essas
no posicionamento cromossmico para a replicao regies vm sendo relacionadas com a evoluo
32
celular. dos cnceres.
O surgimento de uma enzima especiIica, a
TELOMERASE telomerase, solucionava o chamado 'problema
dos terminais, instigando ainda mais as pesquisas
23
O DNA e duplicado com o auxilio da
de sua relao com a imortalidade neoplasica.
enzima DNA Ligase de Iorma semiconservativa,
A presente reviso pretende sumarizar o
tendo cada nova molecula-Iilha de DNA, uma Iita
conhecimento atual sobre a importncia dos
oriunda da molecula-me e uma Iita recem-
telmeros, da telomerase e de sua aplicao na
1
sintetizada. A DNA Polimerase e eIicaz em oncologia, Iocalizando em duas das bases da
grande parte do cromossomo, porem, e totalmente oncologia: o sobrepujamento da senescncia e a
inutil no Iinal dos terminais telomericos devido a perda de regulao do ciclo celular.
impossibilidade de ao da Ligase por total Ialta
26, 35
de sitio para o seu anelamento a seqncia-me TELMEROS
gerando o encurtamento dos telmeros.
Telmeros so estruturas de DNA situadas
nos terminais dos cromossomos. So compostas por
* Medico Residente do Hospital Sirio Libans - SP/SP, Medico
Clinico Geral do Hospital Metropolitano - SP/SP.
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E no ponto de impossibilidade de ao do repetitiva apenas na Iita conservada da molecula-
complexo DNAPolimerase-RNAPolimerase- me, maior do que a original, permitindo a atuao
Helicase-Ligase que a telomerase atua, impedindo do complexo RNAPolimerase-DNAPolimerase-
o encurtamento telomerico. Ligase, que alonga, por Iim, a Iita neoIormada.
A telomerase e um complexo enzimatico O alongamento Iinal que permite o
13, 27
surgimento do telmero na nova molecula de DNA terminal transIerase ribonucleoproteico cuja
deixa uma seo no duplicada que sera Irao de RNA e complementar a seqncia
perdida sem eIeito nocivo para a molecula como telomerica, permitindo o seu anelamento a
1, 26, 35
um todo, deixando ento a nova dupla-Iita com o
molecula neoIormada. Apos o anelamento, a
mesmo comprimento telomerico da molecula que
telomerase permite o alongamento da molecula,
26, 35
a originou (Figura 1). Iormando uma extenso telomerica tipicamente
13
A telomerase encontra-se ativa nas celulas geneticamente determinada. Por alteraes
5, 34
germinativas, progenitoras e tumorais.Nas celulas varias, a celula escapa do ciclo celular normal,
25
aumentando o tempo de vida e o tempo de somaticas, a telomerase encontra-se reprimida. A
7
ativao da telomerase leva a imortalizao celular, permanncia em replicao celular.
enquanto a represso leva a uma continua reduo do Oconceito de imortalidade esta intimamente
tamanho cromossmico que acaba por levar a morte ligado ao conceito da existncia de um 'relogio
25
celular, um 'replicmetro, capaz de contar o celular.
numero de replicaes celulares e determinar sua
cessao. Celulas no neoplasicas tm um numero CANCER E IMORTALIDADE CELULAR
limite de divises que e determinado pelos
13
Uma caracteristica marcante das celulas telmeros.
neoplasicas e a sua imortalidade, que e
Revista da Faculdade de Cincias Mdicas de Sorocaba
Figura 1. Representao esquematica da ao da telomerase. Na Iase 1, v-se a molecula-Iilha de DNAcom o
Iragmento neoIormado com seu terminal no duplicado. Na Iase 2, esta realada a Irao
neoIormada. Na Iase 3, v-se o complexo da telomerase com seu motivo RNA complementar a
repetio telomerica. A telomerase, na Iase 4, ja ampliou a seqncia da Iita conservada. Com o
segmento conservado alongado, a DNA Polimerase pode atuar (seta) normalmente, permitindo a
duplicao do segmentotelomerico na Iita neoIormada.
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2, 17
Ja as celulas neoplasicas perdem esse limite e desenvolveram mais Ireqentemente carcinomas.
isto se da pela expresso da telomerase. Cerca de Nos carcinomas intestinais, a disIuno
90 de todas as neoplasias humanas estudadas telomerica promove a instabilidade genetica
apresentam altos niveis de expresso de Iundamental para a carcinognese inicial, mas a
5,13
telomerase. Pode-se concluir, ento, que os ativao pos terior da telomerase permite a
13
estabilidade genmica necessaria para a progresso telmeros Iazem o papel de 'replicmetro.
24
O comprimento telomerico das linhagens tumoral. Em neoplasias de pele, o aumento da
celulares imortais varia com o tempo tanto para expresso da telomerase contribui para a
10
mais quanto para menos, revelando uma atividade transIormao maligna.
31
compensatoria reativa da telomerase. Dentre os tumores ginecologicos, estudo
Ieito em celulas metastaticas de neoplasias ovarianas
CANCER, TELOMERASE E demonstrou telmeros mais curtos do que em celulas
INSTABILIDADE GENTICA isognicas no neoplasicas, porem, com atividade
aumentada da telomerase, demonstrando um
Ainstabilidade genetica e outra caracteristica provavel inicio da atividade telomerasica apos varias
das neoplasias, que cursam com Iormao de divises celulares. Esse resultado leva a crer em uma
recombinaes, Iuses levando a ampliIicaes Iuno da telomerase na perpetuao do processo
gnicas e ate a alteraes de segregao neoplasico e no somente como um iniciador do
6,12
cromossmica que podem causar aneuploidias. processo.
Quebras cromossmicas nas regies telomericas Em estudo realizado com pacientes
30
podem ser a gnese de varios desses problemas. portadoras de neoplasias ovarianas do cordo sexual
As aneuploidias levam a instabilidade (neoplasia de celulas da granulosa e de celulas de
genetica com reteno na Iase G1 do ciclo celular, Leydig-Sertoli), aquelas com tumores com alta
18, 31
atividade de telomerase apresentaram sobrevida que pode paralisa-lo ou levar a quebras e Iuses.
media de 66,5 meses, enquanto as pacientes cujos Nesses casos, o que ocorre so quebras
tumores apresentavam atividade baixa da enzima, a cromossmicas proximas aos telmeros, causando a
9
Iormao de alteraes citogeneticas. Nota-se que a sobrevida media era de 90 meses. Dentre as
despeito do papel imortalizador, os telmeros tm neoplasias endometriais, um estudo realizado na
importante papel na gnese de outras alteraes China revelou aumento da atividade da telomerase
18
em 81,8 dos casos e dentre as cervicais, esse moleculares que causam o cncer. Ainabilidade na
aumento ocorreu em 100 dos casos. Esse mesmo manuteno telomerica em algumas neoplasias e to
estudo procurou provar alteraes do comprimento importante quanto a habilidade de manuteno em
30
dos telmeros e correlaciona-las com prognostico e
outras.
33
estadiamento, sem sucesso. Outro estudo, porem, Ioi
capaz de demonstrar relao do prognostico com a EVIDNCIAS DEALTERAO
atividade da telomerase com rapida progresso dos TELOMRICA/TELOMERSICA
adenocarcinomas endometrioides do utero com alta EMNEOPLASIAS
4
atividade da enzima.
Sabe-se que os carcinomas em geral ocorrem Quanto as neoplasias de mama, ha relao
em pacientes mais idosos (sabidamente os telmeros comprovada entre a atividade da telomerase e o
diminuem de comprimento nos pacientes idosos), estadiamento TNM com 68 de neoplasias com
enquanto os pacientes mais jovens (com telmeros telomerase ativa no estadio I e 95 de atividade no
15, 21
em media mais longos) costumam apresentar mais estadio IV.
2
linIomas e sarcomas. Um grande estudo realizado sobre as
Em estudo realizado em camundongos neoplasias da tireoide conseguiu provar elevao
nulizigotos para o gene supressor de tumor p53, da atividade da telomerase nesses tumores, porem,
19
aqueles com telomerase Iuncionante apresentaram sem relao com o tipo histologico.
maior incidncia de sarcomas e linIomas, num A atividade da telomerase esta aumentada
comportamento semelhante aos jovens. Ja os em metade dos casos de retinoblastoma, nos casos
11
camundongos com telomerase no Iuncionante
com telmeros curtos.
57
Nas tumoraes prostaticas, o comprimento laboratorial da telomerase e tambem conIirmaram
telomerico (menor que o habitual) e a atividade alta que a presena de processo inIlamatorio local leva a
29 16
da telomerase so indicadores de malignidade. O Ialso-positivos em estudos de lisados celulares.
conteudo telomerico permite a diIerenciao dos
pacientes de alto risco para doena metastatica MANUTENO TELOMRICACOMO
daqueles que evoluiro de Iorma indolente, ALVO TERAPUTICO
8
permitindo evitar tratamentos agressivos.
Uma das mais importantes questes que
envolvem o tratamento oncologico e a Ialta de DETERMINAO LABORATORIAL
especiIicidade do tratamento. DATELOMERASE
Atualmente, muitas pesquisas voltam seus APLICAES DIAGNSTICAS
esIoros na tentativa de desenvolver drogas capazes
de atingir a neoplasia sem grandes destruies A determinao laboratorial dos niveis de
celulares extraneoplasicas. A telomerase e um telomerase e Ieita atraves de uma PCR (Reao em
potencial alvo para tais terapias. Sabendo-se que a Cadeia da Polimerase), usando iniciadores
ao telomerasica esta presente em praticamente especiIicos para o mRNA de hTERT, gene ativador
todos os cnceres, este pode ser o 'tendo de da telomerase, permitindo o estudo do grau de
Aquiles da neoplasia. A inibio da telomerase expresso que e diretamente relacionado a
20
levaria a celula neoplasica a uma reentrada no ciclo
quantidade de mRNA. E possivel determinar
celular normal que, por sua vez, a levaria a constantes
dosagens de telomerase muito baixas ate mesmo em
20
eroses telomericas com evoluo para a morte
tecidos somaticos adultos.
3
celular.
Outro metodo geralmente usado e o TRAP
Ainibio da telomerase esta sendo estudada
(Telomerase Repeat Amplification Protocol), atraves
atraves de, pelo menos, dois prismas basicos
do qual um extrato tecidual suspeito e exposto a um
distintos. Como a telomerase Iunciona como uma
pequeno primer de DNA, sendo esperado que na
transcriptase reversa, os agentes inibidores da
presena da telomerase no extrato haja extenso de
transcriptase reversa esto sendo testados, entre eles,
uma seqncia telomerica a partir do primer.
o AZT (azidotimidina-triIosIato, zidovudina), o Ara-
Para deteco da atividade telomerasica, o
GTP (arabinoIuranil-guanosina triIosIato) e o ddITP
conjunto e, ento, ampliIicado por PCR e separado
(dideoxi-inosina triIosIato). Foi provado que o uso
em gel de poliacrilamida. Para conIirmarmos a
dessas drogas inibe, in vitro, a ao da telomerase
presena de atividade telomerasica, o gel deve
com importante reduo dos terminais telomericos
revelar um crescendo de bandas diIerindo de seis
3
rapidamente. pares de bases cada uma (equivalente as repeties
14, 20
Estudos em neoplasias humanas provaram
TTAGGG). E possivel determinar o volume de
uma diminuio importante da atividade
cada banda por densitometria, deIinindo-se, ento, o
14
telomerasica e, portanto, do comprimento
grau de expresso.
3, 22
telomerico. O segundo prisma atraves do qual a
Como e possivel haver telomerase atuando
terapia antitelomerasica esta sendo estuda e a terapia
em tecidos somaticos de algumas origens especiIicas,
com DNA anti-sense (complementar a uma
atualmente, a tendncia e preIerir os ensaios que
seqncia), usando sondas contra o RNAm de uma
mantm a estrutura tecidual para o estudo da
proteina celular Iundamental para a ao da
telomerase in situ. Esses metodos incluem a
16
telomerase, hTERT, impedindo sua ao. Com os
hibridizao in situ e a imunohistoquimica.
recentes avanos em terapia anti-sense, inclusive
Adeteco dos niveis de telomerase pode ser
com alguns sucessos, pesquisas sobre essas terapias e
util em algumas neoplasias para o diagnostico de
3
telomerase vm sendo desenvolvidas.
malignidade e prognostico, como nas neoplasias de
28
mama com 93 de especiIicidade.
CONCLUSO
Estudos em neoplasias de bexiga, trato biliar,
pulmo (estudo de lavados bronco-alveolares e do
Do exposto, pode-se veriIicar que os
liquido pleural) e cerebro (estudo do liquor)
telmeros e a telomerase com Iuno Iisiologica
permitiram conIirmar a eIicacia da determinao
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