PARTE I TOXICOLOGA GENERAL

CAPITULO I
Generalidades - Terminologa
1. DEFINICIONES Y TERMINOLOGA DE USO FRECUENTE EN TOXICOLOGA
A continuacin se presentan algunos de los conceptos introductorios al tema de la toxicologa veterinaria asi como la terminologa bsica que se utiliza en esta rea del conocimiento. El concepto ms general de lo que es la toxicologa lo expresa Radeleff cuando dice que es el estudio completo de los txicos [1]. Con esta visin, quedan includas las ramas que se han ido desarrollando de la toxicologa general: clnica, analtica, ambiental -ecotoxicologa-, industrial, diagnstica, forense, entre otras. De otra parte, el concepto de Eaton y Klaasen [2], presenta a la toxicologa como el estudio de los efectos adversos de agentes qumicos sobre los organismos vivos. Este ltimo ya considera los efectos sobre la salud, orientacin de evidente importancia para el mdico veterinario. 16 La toxicologa se apoya a su vez en otras reas de las ciencias bsicas y mdicas que le permiten una mejor comprensin de los fenmenos toxicolgicos. Por ello, recurre a conceptos de la siologa, farmacologa, patologa general y clnica, epidemiologa, qumica, fsico-qumica, etc. La toxicologa precisa de un trabajo multidisciplinario que le permita resolver y prevenir problemas debidos a los distintos principios qumicos, formas de energa, toxinas vegetales y animales que sean causa directa de enfermedad. La tarea de denir txico puede ser un tanto ms complicada. El concepto ha ido evolucionando con el tiempo y con el mayor entendimiento de la interaccin txico-clula u rgano blanco. Estos son algunos de los conceptos sobre txico: Un txico es cualquier slido, lquido gas que introducido aplicado sobre la supercie de un organismo puede alterar los procesos vitales de sus clulas, sin actuar mecnicamente y con independencia de la temperatura [3]. El txico es una sustancia que se disuelve en la sangre

que acta qumicamente sobre la misma, afectando la vida poniendo en peligro las funciones orgnicas, parcial totalmente (Diccionario Mdico de Blakiston) [4]. Para Ariens, el txico es un toxn potente y peligroso. Considerando a su vez que un toxn es un frmaco xenobitico con efectos nocivos y un xenobitico como todo compuesto ajeno extrao a los componentes normales de un ser vivo [4]. Spoo, ms recientemente, dene al txico como cualquier slido, lquido o gas que interere con procesos biolgicos, abarcando desde reacciones a nivel molecular hasta reacciones en el individuo a nivel poblacional [5]. Por su parte, McClellan arma que un txico es un material que cuando entra en contacto con ingresa a un organismo por ingestin, inhalacin, paso a travs de la piel inyeccin, interere con procesos biolgicos normales y causa efectos adversos en la salud [6]. Otros autores plantean deniciones basadas en lo expresado por Paracelso (Suiza, 1493), cuando arm que todo es txico y nada es txico ya que todo compuesto puede ser considerado como tal segn determinadas circunstancias. Dentro de stas, la dosis es determinante para diferenciar entre el efecto teraputico y el txico de cualquier compuesto. La clasicacin de los txicos puede hacerse considerando diferentes caractersticas de los mismos: origen (animal, vegetal, mineral), rganos afectados (hepatotxicos, nefrotxicos, neurotxicos), etc. Sin embargo, para el veterinario la clasicacin ms orientadora es la basada en el concepto de toxicidad relativa de los compuestos. La toxicidad relativa se dene como la cantidad de txico por unidad de peso animal que conduce a una toxicosis [5]. Segn este concepto se han establecido las siguientes categoras de txicos [3]: Extremadamente txicos: Inducen intoxicacin con una dosis menor a 1.0 mg/Kg de peso. Ejemplo: estricnina en el perro = 0.75 mg/Kg. Altamente txicos: Intoxicaciones con dosis entre 1 y 50 mg/Kg. Ejemplo: Talio (animales domsticos = 10-25 mg/Kg.). Moderadamente txicos: Dosis entre 50 y 500 mg/Kg. Por ejemplo:

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warfarina en perro = 50 mg/Kg y en rumiantes > 200 mg/Kg. Ligeramente txicos: Efecto txico con dosis que van desde 0.5 g hasta 5 g/Kg de peso. Ejemplo: Urea en rumiantes = 1 g/Kg y gosipol en porcinos: 0.5 g/Kg. Prcticamente no txicos: Requieren de una dosis entre 5 y 15 g/ Kg de peso. Relativamente inofensivos: Dosis mayores a 15 g/Kg se requieren para causar el efecto txico. El trmino toxicosis indica el estado de enfermedad resultante de la exposicin a un txico [5]. Intoxicacin aguda es el trmino para una toxicosis en la cual la exposicin al agente txico se da por una sola dosis varias subdosis suministradas durante un perodo inferior a 24 horas [3, 4]. En la intoxicacin subcrnica los periodos de exposicin al txico van de 1 a 90 das. En algunas ocasiones se establecen efectos a los 14 das u otro lapso de tiempo determinado. Por su parte, en la intoxicacin crnica se estudian los efectos producidos por una exposicin prolongada al txico durante un perodo de tres meses superior [3, 4].

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2. PRUEBAS PARA EVALUACIN DE TOXICIDAD

Permanentemente se deben evaluar los diferentes compuestos que entran a hacer parte del entorno del hombre y las especies animales. Es decir, nuevos frmacos, aditivos alimenticios, plaguicidas, etc. Por ello, se hace necesario contar con pruebas que evaluen los niveles de seguridad y de riesgo toxicolgico de esos nuevos principios. La dosis letal 50 (DL 50) es quizs una de las pruebas ms utilizadas en toxicologa. Permite averiguar la cantidad de principio activo requerida por unidad de peso animal para provocar la muerte al 50% de un grupo experimental. Ej. DL 50 del paratin en ratas = 5 mg/Kg. En algunas ocasiones se especicar la va de entrada del txico investigado y si no hay ninguna aclaracin adicional se asumir que ingres por la va oral [2, 5]. La DL50 es la prueba ms representativa de las pruebas de toxicidad aguda. Sin embargo, es una determinacin incompleta

ya que no valora todos los efectos que se dan entre la ausencia de sntomas y la muerte de los animales. Otras pruebas que se realizan para estudios de toxicidad son las que tratan con fenmenos a mediano y largo plazo, es decir, las que evaluan los efectos por una exposicin repetida al txico una retencin prolongada del mismo por parte del organismo. Para estos estudios de toxicidad diferida se hacen evaluaciones por 3 meses, 6 meses y an hasta por varios aos, particularmente en estudios de toxicologa ambiental ecotoxicologa. La DL50 (90) es una prueba que se basa en la administracin de un agente txico durante 1/10 del ciclo de vida de un animal. La denominacin 90 se da porque es el tiempo correspondiente aproximado en el caso de la rata de laboratorio. La tendencia actual en la experimentacin toxicolgica apunta a la utilizacin de las tcnicas in vitro. Como consecuencia de las campaas emprendidas por grupos de proteccin a animales de experimentacin y de la bsqueda de nuevas y ms econmicas alternativas, hoy se trabaja con estas metodologas innovadoras. Algunos de los puntos a destacar en esta rea de la toxicologa son: 19 Las ramas que ms aplicabilidad han tenido en un comienzo son las relacionadas con estudios farmacolgicos, toxicolgicos, teratolgicos y mutagnicos. El principal medio de trabajo son los cultivos celulares ya que al ser la clula el objeto nal de los efectos txicos, se est trabajando directamente sobre el blanco. Los grupos celulares ms utilizados son los hepatocitos de rata y lneas celulares de udo sinovial humano, asi como las clulas de rin bovino. Las correlaciones entre estos trabajos y los experimentos convencionales han sido buenas como lo registran algunos estudios (valores por encima del 80%). Sin embargo, se reconoce que es una ciencia en sus primeros albores y, por lo tanto, con muchas precisiones por establecer.

3. OTROS CONCEPTOS GENERALES

Tolerancia: es la capacidad del organismo para sufrir un efecto adverso menor causado por un txico gracias a la exposicin exposiciones previas

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al mismo. Ej.: acostumbramiento a nitratos a fuentes de nitrgeno no proteico (ej. rea). Variacin individual idiosincracia: respuesta individualizada a un compuesto por diferencias inherentes a la gentica, la actividad enzimtica, u otros factores propios del individuo. Un ejemplo caracterstico de esta variabilidad son los resultados que arroja una prueba de DL50. NOEL (Nivel de Efecto No Observado): La dosis ms alta a la cual no se observa un efecto txico.Dosis umbral: es la dosis mnima que origina sntomas de intoxicacin (convulsiones, diarrea, vmito, etc.). Biondicador: organismo que por sus caractersticas de manejo, susceptibilidad, representatividad de una regin cualquier otro aspecto, permite su utilizacin para evaluar la presencia de un agente txico en el medio que ste habita. Biomarcador: Es un cambio de naturaleza bioqumica, celular, histolgica siolgica que puede ser cuanticado valorado cualitativamente para determinar la exposicin el efecto causado por el txico sobre el organismo bioindicador [15]. 20

4. FACTORES QUE MODIFICAN LA TOXICIDAD DE LOS COMPUESTOS

Las dosis establecidas como DL50, DL50(90), dosis umbral, etc. sirven para dar una primera categorizacin de los txicos pero no siempre se conrman en los casos de campo cuando existen modicaciones en ciertas condiciones siolgicas y/o ambientales que afectan rodean al paciente intoxicado. Algunas de estas circunstancias que alteran la respuesta esperada, incluyen factores de ndole siolgico como especie, raza, gnero, peso, idiosincrasia, estado de salud, concurrencia de otras enfermedades, estado condicin del tracto gastrointestinal, regimen alimenticio, etc. Tambin afectan los factores asociados al agente txico como su naturaleza qumica, concentracin, grado de ionizacin, estado fsico y tamao de la partcula. Otros factores a tener en cuenta para explicar entender respuestas diferentes a lo esperado son de tipo ambiental como intensidad lumnica, temperatura ambiente, entre otros.

5. FUENTES DE INFORMACIN Y ORGANIZACIONES CIENTFICAS EN TOXICOLOGA

La actualizacin en los temas de la toxicologa se logra a travs de acceso y consulta permanentes a la informacin ofrecida por publicaciones peridicas, textos de referencia, el sistema de Internet y las organizaciones cientcas, entre otros. A continuacin se resumen algunas fuentes en cada una de estas categoras.

Publicaciones peridicas
Se calcula que ms de 120 journals relacionados con las diferentes reas de la toxicologa estn disponibles en versiones impresas electrnicas. El listado que aparece a continuacin reune a las publicaciones ms representativas por su impacto en estos temas. Muchas de stas ofrecen suscripciones on line. Algunas de estas revistas peridicas son: American Journal of Pharmacology & Toxicology Annual Review of Pharmacology & Toxicology Aquatic Toxicology Archives of Environmental Contamination and Toxicology Archives of Toxicology Basic and Clinical Pharmacology & Toxicology Bulletin of Environmental Contamination & Toxicology Comparative Biochemistry & Physiology (Part C: Toxicology & Pharmacology) Critical Reviews in Toxicology Environmental Toxicology Human & Experimental Toxicology In vitro Toxicology Journal of Medical Toxicology Journal of Environmental Contamination and Toxicology Journal of Toxicology & Environmental Health Toxicological Sciences

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Textos de referencia
Existe un nmero importante de textos de referencia en el tema de la toxicologa veterinaria. Algunos de stos son obras bsicas que dieron las primeras luces sobre descripciones de txicos y los efectos causados por los mismos en animales domsticos.

La toxicologa de Casarett y Doull (Casarett & Doulls Toxicology)

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es el texto de toxicologa general quizas ms referenciado. Sus temticas estn distribudas en toxicologa de sistemas corporales y los captulos estn organizados segn los diferentes tipos de txicos. Tambin incluye secciones en zootoxinas, totoxinas y otros agentes que pueden igualmente afectar a los animales domsticos [2]. Su edicin ms reciente es la 7 (ao 2008). En el grupo de textos bsicos y pioneros en el tema de la toxicologa veterinaria est Veterinary Toxicology de Radeleff [1]. Para quienes desean certicarse en Norteamrica como veterinarios y veterinarios toxiclogos, un texto muy utilizado para hacer estudio personalizado es el Osweiler [12]. Ms recientemente textos como los de Plumlee (Clinical Veterinary Toxicology) [5] y Gupta (Veterinary Toxicology: Basic and Clinical Principles) [6] ofrecen informacin actualizada y muy completa en el tema. La produccin de textos de toxicologa en el medio colombiano es desafortunadamente muy reducida. Recientemente fue publicado Introduccin a la Toxicologa Veterinaria de Daz y Lozano [13] amn del presente, que el amable lector tiene en sus manos.

Toxicologa en Internet
22 Numerosas pginas pueden ser consultadas en Internet relacionadas con el tema de la toxicologa [14]. A continuacin se presenta un listado de algunas de stas con el tipo de informacin ofrecida. PubMed (www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/). Base de datos desarrollada por la Biblioteca Nacional de Medicina de Estados Unidos (NLM). Permite acceso a informacin no slo relacionada con la toxicologa sino con ciencias mdicas en general. Toxnet (www.toxnet.nlm.nih.gov/). Sistema desarrollado tambin por la NLM con informacin en txicos, agentes qumicos de alto riesgo y el ambiente. Es una coleccin de bases de datos. Extoxnet (www.ace.orst.edu/info/extoxnet). Informacin detallada sobre los perles toxicolgicos y la informacin tcnica de pesticidas. Agencia de Sustancias Txicas y Registro de Enfermedades (ATSDR) (www.atsdr.cdc.gov). Informacin completa sobre agentes qumicos de alto riesgo.

Centro de Inocuidad para Alimentos y Nutricin Aplicada (www. cfsan.fda.gov). Base de datos de la FDA (Agencia de Drogas y Alimentos de Estados Unidos) en donde se presenta informacin sobre microoganismos patognicos presentes en el alimento y sus toxinas naturales. Base de Datos de Plantas Txicas (www.vm.cfsan.fda.gov). Generada por la Agencia de Control de Drogas y Alimentos de Estados Unidos (FDA, por sus siglas en ingls). Base de Datos para Prevencin de Residuos en Animales de Consumo (FARAD) (www.farad.org). Sistema de apoyo diseado en computador y destinado a productores, extensionistas y veterinarios con informacin prctica de como evitar presencia de drogas, pesticidas y residuos en alimentos de origen animal. Varias universidades han generado pginas en Internet con informacin valiosa en el rea de toxicologa. Entre estas se destacan: Departamento de Ciencias Animales de la Universidad de Cornell (www. ansci.cornell.edu/plants), Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de Pennsylvania (EUA) (www.cal. nbc.upenn.edu/poison), y el Departamento de Salud Ambiental de la Universidad Estatal de Oklahoma (www. pp.okstate.edu/ehs/ links/poison), entre otras. Para ampliar sobre informacin disponible en Internet sobre tpicos en toxicologa, se recomienda consultar el artculo de Poppenga y Spoo [14] adems de consultar los buscadores de informacin en la red.

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Organizaciones cientcas
Dentro de las principales organizaciones internacionales en el rea de la toxicologa se tienen: American College of Veterinary Toxicology (ACVT). Fundado en 1958. Ahora designado como American Academy of Veterinary and Comparative Toxicology (AAVCT). American Board of Veterinary Toxicology (ABVT). Organizacin especializada en certicar a los toxiclogos veterinarios a travs de la administracin de exmenes peridicos (www.abvt.org). Society of Toxicology (SOT). Creada en 1961. Es la de mayor nmero de aliados en el mundo. Organiza anualmente un congreso

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y tiene como journal ocial a Toxicological Sciences (www.sot.org). Academy of Toxicological Sciences (ATS). Acepta aliados segn las credenciales presentadas por los aspirantes. Fue creada en 1981 (www.acadtoxsci.org). Society of Environmental Toxicology and Chemistry (SETAC). Creada en 1979. Relacionada con aspectos ambientales y sus efectos en poblaciones (ecotoxicologa). Agrupa unos 5,000 miembros en el mundo. Tiene un captulo para Suramrica (www.setac.org).

6. TENDENCIAS EN LA TOXICOLOGA MODERNA Nanopartculas como agentes txicos

Las nanopartculas son una clase diversa de sustancias con dimensiones inferiores a los 100 nanmetros (nm). Estas partculas de la escala submicromtrica pueden formarse en la naturaleza, provenir de la combustin del carbono, ser liberadas a partir de plantas de energa de gases exostados. El momento presente ha dado paso a la era de los nanomateriales para la produccin controlada de nanopartculas. Esta nueva tecnologa conere propiedades nicas a los materiales en lo relacionado con aspectos de mecnica, ptica y magnetismo que estn siendo aplicadas a la produccin de bienes de consumo [7]. Adicionalmente a las bondades de los nanomateriales se ha empezado a discutir sus potencialidades y riesgos como agentes txicos. Tal y como ha sucedido con los agentes qumicos convencionales, la aproximacin al verdadero potencial toxicolgico de estas partculas depender de los adelantos en estudios de valoracin de riesgo para generar regulaciones y asi proteger la salud de humanos, animales y el ambiente. Los estudios preliminares indican que las nanopartculas no son inocuas y que por su naturaleza pueden acceder muy internamente en los rganos de los sistemas corporales. Un ejemplo claro de sto han sido las respuestas inamatorias y de tipo estrs oxidativo en sistema respiratorio tras exposiciones a nanopartculas [8]. Teniendo en cuenta que los alcances que puede tener la nanotecnologa al futuro pueden llegar a ser de proporciones tan importantes como los de la Revolucin Industrial [8], se hace previsible un desarrollo importante en el mbito de la toxicologa ligada a la misma. Para profundizar en este tema se recomiendan las lecturas de Pickrell y Nel & col. [7, 8].

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Toxicogenmica y Toxicoprotemica
Los avances en el rea molecular han permitido el desarrollo de tecnologas que facilitan la identicacin de los genes que se expresan por la exposicin a agentes txicos (toxicogenmica) asi como las protenas ligadas a la transcripcin de dichos genes (toxicoprotemica) [9]. En toxicologa ha sido siempre de inters la identicacin de respuestas cambios (tisulares, bioqumicos, etc) especcos ante la exposicn a txicos, tal y como se deni previamente en el concepto de biomarcador. Sin embargo, los biomarcadores no siempre expresan elmente dicha exposicin y adems son elementos de respuesta individual. Por ello con la revolucin de las ciencias en el rea de la biologa molecular se han empezado a disear ensayos que permitan identicar la expresin de mltiples genes y protenas que se maniestan por la exposicin al txico y/o por los efectos biolgicos causados por el mismo. Un ejemplo permitir expresar mejor este concepto. La deteccin de vitelogenina en organismos ovparos ha sido utilizada y estandarizada como la tcnica para diagnosticar exposicin a agentes estrogenizantes presentes en el medio (ej. xenoestrgenos como algunos pesticidas, plasticantes, compuestos industriales como el bisfenol, etc). Asi, las especies ovparas podrn expresar esta protena cuando machos hembras estn expuestos a este tipo de contaminantes ambientales. Un avance grande en el rea de la toxicoprotemica ha sido la identicacin de 13 protenas diferentes que se maniestan por la exposicin a estradiol en peces [10]. Es decir, con el desarrollo de la toxicoprotemica, las opciones para determinar exposicin a agentes estrogenizantes ya no slo dependen de la deteccin de una protena cuya respuesta no siempre es constante, la vitelogenina, sino que ahora se cuenta con un grupo mayor para tener una evaluacin ms integral de la respuesta de los organismos de inters ante estos agentes. Dentro de las tcnicas implementadas en las reas de la la toxicoprotemica y toxicogenmica estn la electroforesis de dos dimensiones (2DE) ligada a la espectrofotometra de masas (MS) [11], espectrometra de masas con desorpcin-ionizacin lser en matriz asistida (MALDI-TOF-MS) y la espectrometra de masas con desorpcin-ionizacin mejorada de supercie (SELDI-TOF-MS) [10]. La denominacin de las dos ltimas tcnicas en particular, da una idea del nivel tecnolgico alcanzado por stas y del grado de complejidad de los equipos que requieren as como del nivel de preparacin requerido en quienes las aplican.

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Referencias Captulo I
[1]. Radeleff RD. 1964. Veterinary Toxicology. Lea & Febiger. [2]. Eaton DL & Klaassen CD. 1996. Principles of toxicology. In CD Klaassen (ed) Casarett & Doulls Toxicology, The Basic Science of Poisons. McGraw-Hill. Pp. 13-33. [3]. Buck WB, Osweiler GD, Van Gelder GA. 1981. Introduccin. En Toxicologa Veterinaria Clnica y Diagnstica. Ed. Acribia. Zaragoza, Espaa. Pp. 3-11. [4]. Jurado-Couto R. 1989. Toxicologa Veterinaria. Salvat. Pp. 3-12. [5]. Spoo W. 2004. Concepts and terminology. In KH Plumlee (ed) Clinical Veterinary Toxicology. Mosby. Pp. 2-7. [6]. McClellan RO. 2007. Concepts in veterinary toxicology. In RC Gupta (ed) Veterinary Toxicology: Basic and Clinical Principles. Academic Press. Pp. 3-24. [7]. Pickrell JA. 2007. Biomedical responses and toxicity of nanoparticles. In RC Gupta (ed) Veterinary Toxicology: Basic and Clinical Principles. Academic Press. Pp. 305-312. [8]. Nel A, Xia T, Madler L, Ning L. 2006. Toxic potentials of materials at the nanolevel review. Science 311:622-627. [9]. Benninghoff AD. 2007. Toxicoproteomics The next step in the evolution of environmental biomarkers. Toxicol Sci 95:1-4. [10]. Walker CC, Salinas KA, Harris PS, Wilkinson SS, Watts JD. 2006. A proteomic (SELDI-TOF-MS) approach to estrogen agonist screening. Toxicol Sci 95:74-81. [11]. Ong SE & Pandey A. 2001. An evaluation of the use of two-dimensional gel electrophoresis in proteomics. Biomol Eng 18:195-205. [12]. Osweiler GD. 1996. Toxicology The National Veterinary Medical Series (NVMS). Lippincott Williams & Wilkins. 491 p.

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[13]. Daz GJ & Lozano MC. 2006. Introduccin a la Toxicologa Veterinaria. Universidad Nacional de Colombia, sede Bogot. 179 p. [14]. Poppenga RH & Spoo W. 2002. Internet resources for veterinary toxicologists. Toxicology 173:179-189. [15]. Newman MC. 2001. Introduction. In Fundamentals of Ecotoxicology. CRC Press. Pp. 21.

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