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UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS CAMPUS ARAPIRACA LICENCIATURA EM BIOLOGIA

ERIKA CAMILA BARBOSA SILVA

AULA PRTICA: MTODOS DE ESTERILIZAO E ISOLAMENTO DE BACILLUS ENTOMOPATOGNICOS

ARAPIRACA - AL 2013

Erika Camila Barbosa Silva

AULA PRTICA: MTODOS DE ESTERILIZAO E ISOLAMENTO DE BACILLUS ENTOMOPATOGNICOS

Relatrio apresentado disciplina de Controle Microbiano, Universidade Federal de Alagoas, como requisito parcial para aprovao na disciplina. Professora: Carla Ruth de Carvalho Barbosa Negrisoli.

ARAPIRACA 2012

SUMRIO

INTRODUO ............................................................................................... 4 OBJETIVO GERAL ........................................................................................ 5 OBJETIVOS ESPECFICOS .......................................................................... 5 MATERIAIS E MTODOS ............................................................................. 6 RESULTADOS E DISCUSSO ..................................................................... 9 CONCLUSO ................................................................................................ 9 REFERNCIAS BIBLIOGRAFICAS .............................................................. 10

INTRODUO A Esterilizao de materiais de suma importncia para a total eliminao da vida microbiolgica dos materiais. Quanto as pipetas de vidro que so utilizadas no laboratrio estas devem ser imersas numa proveta de plstico grande contendo liquido desinfectante, e posteriormente lavadas e autoclavadas, quanto aos instrumentos de disseco como tesouras, pinas podem ser esterilizadas mergulhando em 70% de lcool. Considerado um recurso natural, o solo, essencial para que haja o funcionamento do ecossistema terrestre. necessrio o conhecimento da populao de microrganismos presentes no solo para avaliar suas condies, saber se determinada rea vivel ou no receber algum tipo de cultura, ou se nesta rea h a existncia de algum tipo de contaminao de patgenos. Umas das principais etapas para a formulao de bioinseticidas o isolamento de microrganismos, tendo como potencial substituir ou amenizar o uso de agrotxicos na agricultura. Segundo Tortora et al( 2006) os meios de cultivo podem ser classificados em: meios sintticos (quimicamente definidos) e meios complexos. Os meios sintticos so aqueles em que a composio qumica exata conhecida. Alguns microrganismos necessitam de um meio definido com muitos fatores necessrio para o crescimento e so denominados fastidiosos ou muito exigentes em termos nutricionais. Meios quimicamente definidos so utilizados normalmente em trabalhos experimentais em laboratrios ou para o crescimento de seres autotrficos. Os Bacillus so bactrias de grande importncia em controle biolgico de insetos. Estes so bastonetes gram positivos, da famlia Bacillaceae, que produzem no momento de sua esporulao incluses proticas cristalinas.

OBJETIVO Relatar as atividades realizadas na aula prtica da disciplina Controle Microbiano de Insetos, tendo as prticas em questo o conhecimento dos mtodos de esterilizao e o isolamento de fungos e bactrias entomopatognicos.

OBJETIVOS ESPECFICOS

Conhecer os procedimentos de esterilizao dos materiais Preparar e elaborar os meios de cultura para o cultivo e repicagem de fungos e bactrias; Executar a tcnica de isolamento de bactrias entomopatognicas do solo.

MATERIAIS E METODOS Para o isolamento de bactrias e fungos entomopatognicos foi utilizado 1g de solo da cultura de milho localizada no municpio de Arapiraca, prximo Universidade Federal de Alagoas, do qual essa amostra foi peneirada,(figura 1) devidamente pesada ( Figura 2 ) e colocada em um microtbulo com soluo salina, depois de agitada por 30 segundos a mistura foi colocada em um bquer com gua a 80C ( figura 3) com durao de 10 minutos e em seguida a mistura foi colocada por 5 minutos em gelo. Aps a mistura foi transferida para placa de Petri em meios de culturas NYSM ou BDA( figura 4). Figura 1: Peneiramento do solo

Fonte: Erika Camila

Figura 2: Pesando o solo

Fonte: Erika Camila

Figura 3: Bquer com agua 80

Fonte: Erika Camila

Figura 4: Mistura submersa em gelo

Fonte: Erika Camila

Figura 4: Transferncia para placa de Petri em meios de culturas

Fonte: Erika Camila

Posteriormente a esses procedimentos deve-se imcubar em temperatura ambiente por 48h. Materiais utilizados: Placa de Petri; Meios de culturas NYSM ou BDA; Microtbulos com soluo salina; Bquer; Pinas; Peneira; gua; Placa de aquecimento. Para o estudo das tcnicas de isolamento foram utilizados os seguintes equipamentos: Cmeras fotogrficas e/ou celular para fotografar os passos dos procedimentos Caderno de campo para redigir as observaes necessrias; Pesquisa bibliogrfica para complementar a construo dos conhecimentos a cerca das tcnicas de isolamento aplicadas no procedimento.

RESULTADOS E DISCUSSES Os resultados obtidos demonstraram a presena de bactrias com eficincia, aps um perodo de 48 horas a partir de ter sido isolado em placa de Petri slida enriquecida com nutrientes.(Figura 5) Figura 5: Surgimento de colnia de bactria

Fonte: Erika Camila CONCLUSO Conclu-se que o solo um dos ambientes que h uma enorme diversidade de microrganismos e alguns fatores influenciam na quantidade e na diversidade desses organismos e, nas suas atividades no solo, tais como, pH, temperatura e clima.

REFERNCIAS SANTOS, Nelida et al.Isolamento de Fungos do solo.Acesso em : < de http://www.trabalhosfeitos.com/ensaios/Isolamento-De-Fungos-DoSolo/958198.html> TORTORA, G. J.; FUNKE, B. R.; CASE, A. L. Microbiologia. 8 edio, 1 reimpresso, Artmed, Porto Alegre, 2006, 894 p. UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN, Isolamento de Microrganismos. Curitiba, 2008.