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Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.

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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
INTRODUO AO SISTEMA IMUNOLGICO
(Prof Karina Carla)
O si stema i munol gi co (do latim: imuunis =
insento de pagamento de impostos; logos = estudo,
conhecimento), tambm conhecido como si stema
i muni tri o, compreende todos os mecanismos pelos
quais um organismo multicelular se defende de
invasores internos, como bactrias, vrus ou parasitas.
Por tanto, a i munol ogi a a cincia que estuda o
sistema imunitrio: suas clulas e rgos, sua fisiologia
e patologia e suas reaes com os demais sistemas
orgnicos.
Existem dois tipos de mecanismos de defesa: os inatos ou no especficos (i muni dade i nata), como a
proteo da pele, a acidez gstrica, as clulas fagocitrias ou a secreo de lgrimas; e o sistema imunitrio
adaptativo (i muni dade adqui ri da), como a ao direcionada dos linfcitos e a sua produo de anticorpos
especficos.
Imuni dade Inata: primeira linha de defesa do nosso organismo, com a qual, j nascemos. Como
exemplo de um dos integrantes desse sistema tem-se os macrfagos e neutrfi l os, clulas
fagocitrias com receptores de baixa especificidade (MHC Complexo Principal de
Histocompatibilidade um complexo protico da clula fagocitria responsvel por apresentar o
antgeno ao linfcito).
Imuni dade Adqui ri da: sistema imunitrio que se potencializa a partir da exposio antgenos, sendo
ela mais especfica. Como exemplo de integrantes, tem-se os l i nfci tos com receptores CD (Classes
de Diferenciaes) muito mais especficos e seletivos. Esses receptores tambm determinam o grau de
maturidade da clula.
OBS: Antgeno toda partcula ou molcula capaz de iniciar uma resposta imune, a qual comea pelo
reconhecimento pelos linfcitos e cumula com a produo de um anticorpo especfico. Anticorpo
(imunoglobulinas) so glicoprotenas sintetizadas e excretadas por clulas plasmticas derivadas dos linfcitos
B, os plasmcitos, presentes no plasma, tecidos e secrees que atacam protenas estranhas ao corpo (
antgenos), realizando assim a defesa do organismo (imunidade humoral). Depois que o sistema imunolgico
entra em contato com um antgeno (proveniente de bactrias, fungos, etc.), so produzidos anticorpos
especficos contra ele.
OBS: Eptopo (determinante antigenico) so sequncias de aminocidos presentes na estrutura protica do
antgeno que reconhecida por receptores especficos nos anticorpos.
Histrico
Sculo XV: Chi neses e turcos tentam induzir imunidade atravs da variolao.
1546: Gi rol amo Fracastoro, Univ. Pdua, diz "O contgio uma infeco que passa de um para
outro...a infeco se origina de partculas muito pequenas - imperceptveis"
1798: Si r Edward Jenner, vacinao, o pai da i munol ogi a, observou que os fazendeiros que
contraram varola bovina ficavam protegidas da varola humana. Inoculou ento um menino de 8 anos
com a varola bovina e obteve resultados satisfatrios. A tcnica foi denominada de vacinao (de
vaca).
1879-1881: Loui s Pasteur, vacinas atenuadas. Estava estudando a bactria que causa a clera,
cultivando-a e injetando em galinhas. Ao voltar de frias, ele usou uma cultura velha para injetar e,
surpreendentemente, as galinhas adoeceram mas melhoraram. Pasteur concluiu: cultura velha, e fez
uma cultura fresca. Desta vez, como ele tinha poucas galinhas, resolveu usar algumas do experimento
anterior. Resultado: as galinhas do experimento anterior sobreviveram e as no inoculadas
previamente morreram. Pasteur reconheceu que o envelhecimento da cultura tinha enfraquecido a
bactria, a ponto de torn-la no letal, e aplicou este conhecimento para proteger outras doenas. Ele
chamou a linhagem atenuada de VACINA, de vaca. Pasteur ento produz vacinas para clera, anthrax,
e raiva.
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Elie Metchnikoff, teoria dos fagcitos. Observou a fagocitose de esporos de fungos por leuccitos e
antecipou a idia de que a imunidade era devido s clulas brancas do sangue. Partiu da a definio
de i muni dade cel ul ar.
1890: Emil von Behring e Ki tasato, antitoxina da difteria. Demonstram que o soro de animais imunes
difteria pode transferir a proteo. Esse componente, antitoxina, era capaz de neutralizar, precipitar
toxinas, aglutinar e lisar bactrias. Partiu da a definio de i muni dade humoral.
1974: Peter Doherty e Rolf Zinkernagel, descoberta da especificidade das respostas imunes mediadas
por clulas T (restrio das clulas T).
1989: Tim Mosmann e Robert Kopfman, descoberta dos subtipos de clulas Th1/Th2, atravs do
perfil de citocinas que produzem.
Sistema Imune e Homeostasia
Os sistemas imune, nervoso e endcrino so considerados os trs principais sistemas de contato entre
o indivduo e seu meio ambiente.
Sistema Nervoso origem embrionria: ectoderma; clulas: neurnios; substncias:
neurotransmissores.
Sistema Endcrino origem embrionria: endoderma; substncias: hormnios
Sistema Imunolgico origem embrionria: mesoderma; clulas: leuccitos; substncias: citocinas.
As clulas do sistema imune, diferentemente das clulas desses outros dois sistemas, exercem suas
funes circulando pelas mucosas e tecidos internos e identificando a entrada de molculas prprias. Essas
clulas utilizam como principais vias de entrada as mucosas e tecidos os vasos sanguneos e linfticos, que
seriam como estradas de acesso aos tecidos.
As respostas imunes adquiridas podem ser divididas em trs fases: o reconhecimento do antgeno, a
ativao dos linfcitos e a fase efetora. Todas as respostas imunes so iniciadas pelo reconhecimento do
antgeno especfico. Isso induz a ativao do linfcito que reconhece o antgeno e culmina na instalao de
mecanismo efetores que medeiam a funo fisiolgica da resposta, ou seja, a eliminao do antgeno. Depois
de eliminado o antgeno, a reao imune atenuada e a homeostase restaurada.
Reconheci mento dos Antgenos: todo indivduo possui numerosos linfcitos derivados clonalmente.
Cada clone origina-se de um precursor nico e capaz de reconhecer e responder a um determinante
antignico distinto e, quanto o antgeno entra, seleciona um clone especfico pr-existente, ativando-o.
Em um primeiro momento, a linha primordial de defesa imune imunidade inata entra em cena por
meio de clulas apresentadoras de antgenos (macrfagos), que fagocitam e digerem o antgeno
patognico, degradando-o a nvel de peptdeo (eptopo). Esse mesmo macrfago apresenta o eptopo
aos linfcitos por meio do seu MHC.
Ati vao dos Li nfci tos: a ativao dos linfcitos requer dois sinais distintos: o primeiro o antgeno
e o segundo, os produtos microbianos ou os componentes das respostas imunes inatas aos
microorganismos. A exigncia do antgeno (sinal 1) assegura que a resposta imune a seguir seja
especfica. A exigncia de um estmulo adicional, desencadeado pelos microorganismos ou por
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reaes imunes inatas (sinal 2), assegura que as respostas imunes sejam induzidas quando
necessrias (isto , contra microorganismos e outras substncias nocivas), e no contra substncias
incuas, incluindo os antgenos prprios. As respostas dos linfcitos aos antgenos e aos segundos
sinais constituem da sntese de novas protenas, proliferao celular e diferenciao em clulas
efetoras e de memria.
o Sntese de Novas protenas: os linfcitos comeam a transcrever os genes que anteriormente
estavam silenciosos e a sintetizar uma variedade de novas protenas (citocinas secretadas que
estimulam o crescimento e a diferenciao dos prprios linfcitos e de outras clulas efetoras;
receptores de citocinas; e outras protenas envolvidas na transcrio dos genes e na diviso
das clulas).
o Proliferao celular: em resposta ao antgeno e aos fatores de crescimento formados pelos
linfcitos estimulados pelos antgenos e por outras clulas, os linfcitos antgeno-especfico
sofrem diviso mittica. Isso resulta em proliferao e aumento de tamanho do clone antgeno-
especfico, a chamada expanso clonal.
o Diferenciao em clulas efetoras: parte da prognie de linfcitos estimulados por antgenos
diferenciam-se em clulas efetoras, cuja funo a de eliminar o antgeno. As clulas T
auxiliares diferenciadas secretam citocinas que ativam outras clulas.
o Homeostase declnio das respostas imunes: ao final de uma resposta imune, o sistema imune
retorna ao seu estado basal, em grande parte porque a maioria da prognie de linfcitos
estimulados por antgenos morre por apoptose (morte celular limpa, fisiolgica e regulada).
Uma grande frao dos linfcitos estimulados por antgenos sofrem apoptose, provavelmente
porque a sobrevivncia desses linfcitos dependente do antgeno, e dos fatores de
crescimento induzidos pelo antgeno e, como a resposta imune elimina o antgeno que a
iniciou, o linfcito fica privado do estimulo essencial para a sobrevivncia.
o Diferenciao em clulas de memria: parte da prognie dos linfcitos B e T estimulados por
antgenos no se diferenciam em clulas efetoras. Em vez disso, tornam-se linfcitos de
memria funcionalmente quiescentes, que so capazes de viver por longos perodos,
aparentemente na ausncia de antgenos.
Fase Efetora das Respostas Imunes eliminao de antgenos: Durante a fase efetora das
respostas imunes, os linfcitos que foram ativados especificamente por antgenos executam as
funes efetoras que induzem a eliminao dos antgenos. Os anticorpos e os linfcitos T eliminam,
respectivamente, os microorganismos extracelulares e os intracelulares. Essas funes dos anticorpos
e das clulas T exigem, muitas vezes, a participao de outras clulas no-efetoras e de mecanismos
de defesa que tambm operam na imunidade inata. Assim, os mesmos mecanismos inatos que
proporcionam as linhas de defesa iniciais contra agentes infecciosos podem ser usados pela resposta
adquirida subseqente para eliminar microorganismo. De fato, como mencionado anteriormente, uma
funo geral importante das respostas imunes adquiridas a de facilitar os mecanismos efetores da
imunidade inata e de focalizar esses mecanismos efetores sobre os tecidos e clulas que contenham
antgenos estranhos. A fase efetora, por tanto, necessita da participao de vrios mecanismos de
defesa, incluindo o sistema do complemento e os fagcitos, que tambm atuam na imunidade inata. As
respostas adquiridas facilitam os mecanismos de defesa da imunidade inata.
Mecanismos Inatos (No-Especficos)
O sistema inato composto por todos os mecanismos que defendem o organismo de forma no
especfica, contra um invasor, respondendo da mesma forma, qualquer que ele seja. Constituem as estratgias
de defesa mais antigas, sendo algumas destas formas encontradas nos seres multicelulares mais primitivos,
nas plantas e fungos.
BARREIRAS FSICAS
A pele a principal barreira fsica. A sua superfcie lipoflica constituda de clulas mortas ricas em
queratina, uma protena fibrilar, que impede a entrada de microorganismos. As secrees ligeiramente
cidas e lpidicas das glndulas sebcea e sudorpara criam um microambiente cutneo hostil ao
crescimento excessivo de bactrias.
O cido gstrico uma poderosa defesa contra a invaso por bactrias do intestino. Poucas espcies
so capazes de resistir ao baixo pH e enzimas destruidoras que existem no estmago.
A saliva e as lgrimas contm enzimas bactericidas, como a lisozima, que destroem a parede celular
das bactrias.
No intestino, as numerosas bactrias da flora normal competem com potenciais patognios por
comida e locais de fixao, diminuindo a probabilidade de estes ltimos se multiplicarem em nmero
suficiente para causar uma doena. por isso que o consumo de demasiados antibiticos orais pode
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levar depleo da flora benigna normal do intestino. Com cessao do tratamento, espcies
perigosas podem multiplicar-se sem competio, causando, posteriomente, diversas doenas.
O muco outra defesa, revestindo as mucosas. Ele sequestra e inibe a mobilidade dos corpos
invasores, sendo a sua composio hostil para muitos microorganismos. Alm disso, contm
anticorpos do tipo IgA.
FAGCITOS
Os fagcitos so as clulas, como neutrfilos e macrfagos, que tm a capacidade de estender
pores celulares (pseudpodes) de forma direcionada, englobando uma partcula ou microorganismo
estranho. Este microrganismo contido num vacolo, o fagossoma, que depois fundido com lisossomas,
vacolos ricos em enzimas e cidos, que digerem a particula ou organismo. Os fagcitos reagem a citocinas
produzidas pelos linfcitos, mas tambm fagocitam, ainda que menos eficazmente, de forma autnoma sem
qualquer estimulao. Naturalmente esta forma de defesa importante contra infeces
bactrianas, j que virus so demasiado pequenos e a maioria dos parasitas demasiado
grandes para serem fagocitados. A fagocitose tambm importante na limpeza dos detritos
celulares aps infeco ou outro processo que leve a morte celular nos tecidos. No entanto
os fagocitos morrem aps algumas fagocitoses, e se o numero de invasores e de detritos
for grande, podero ambos, fagocitos e bactrias, ficarem presos num liquido pastoso e
rico em protenas estruturais, que se denomina ps.
Alm disso estas clulas produzem radicais livres, formas altamente reativas de
oxignio, que danificam as bactrias e outros invasores alm dos tecidos a sua volta.
Neutrfilos: so granulcitos, fagocticos mveis, o mais abundante e sempre o
primeiro a chegar ao local da invaso e sua morte no local da infeco forma o pus.
Eles ingerem, matam e digerem patgenos microbianos. So derivados dos
mastcitos e basfilos.
Macrfago: clula gigante, sendo forma madura do moncito, tem capacidade de
fagocitar e destruir microorganismos intracelulares. A sua diferenciao
estimulada por citocinas. mais eficaz na destruio dos microorganismos , tem
vida longa ao contrrio do neutrfilo. So mveis e altamene aderentes quando em
atividade fagoctica.Macrfagos especializados incluem: clulas de Kupffer (figado),
clulas de Langerhans (pele) e micrglias (Sistema Nervoso Central).
Basfilo e Mastcito: so granulcitos polimorfonucleados que produzem citocinas
em defesa contra parasitas, tambm so responsveis pela inflamao algica
mediadas por IgE.
Eosinfilo: So granulcitos polimorfonucleados que participam na defesa contra
parasitas tambm participando de reaes de hipersensibilidade via mecanismo de
citotoxidade. Envolvido em manifestaes de alergia e asma, via espeficidade por
antgeno IgE.
SISTEMA COMPLEMENTO
O sistema complemento um grupo de protenas produzidas pelo fgado, presentes no sangue. Elas
reconhecem e ligam-se a algumas molculas presentes em bactrias(via alternativa), ou so ativados por
anticorpos ligados a bactrias (via clssica). Ento inserem-se na membrana celular do invasor e criam um
poro (chamdo de MAC, ou Complexo de Ataque a Membrana), pelo qual entra gua excessiva, levando lise
(rebentamento osmtico da clula).
Outras protenas no especificas incluem a protena c-reactiva, que tambm produzida no fgado e se
liga a algumas molculas comuns nas bactrias mas inexistentes nos humanos, ativando o complemento e a
fagocitose.
RESPOSTA INFLAMATRIA
A resposta inflamatria fundamentalmente uma reao inespecfica, apesar de ser na prtica
controlada pelos mecanismos especficos (pelos linfcitos). Caracteriza-se por cinco sintomas e sinais,
definidos na antiguidade greco-romana: calor, rubor, tumor (edema), dor e em ltimo caso (crcicos) perda da
funo.
A inflamao desencadeada por fatores libertados pelas clulas danificadas, mesmo se por danos
mecnicos. Esses mediadores (bradicinina, histamina) sensibilizam os receptores da dor, e produzem
vasodilatao local (rubor e tumor), mas tambm atraem os fagcitos, principalmente neutrfilos (quimiotaxia).
Os neutrofilos que chegam primeiro fagocitam invasores presentes e produzem mais mediadores que chamam
linfcitos e mais fagcitos. Entre as citocinas produzidas, as principais sao InterLeucina 1 (IL-1) e TNF (Fator
de necrose Tumoral).
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Mecanismos Adaptativos ou Adquiridos (Especficos)
Todo o sistema especfico se concentra na capacidade das clulas imunitrias distinguirem protenas
produzidas pelas clulas do prprio corpo (antignio "self" - ou seja do prprio organismo), e protenas
produzidas por invasores ou pelas clulas humanas sob o controle de vrus (antignio "non-self" - ou seja, que
no reconhecido como sendo do prprio organismo). Esta distino feita atravs de receptores, os TCR (T-
cell receptors) ou BCR (B cell receptors que so anticorpos presos membrana). Estes receptores, TCR ou
BCR, para serem eficazes tm de ser produzidos com milhes de conformaes. De outro modo no se
ligariam a muitos tipos de protenas de invasores, e no os reconheceriam.
Muitos dos TCR e BCR assim gerados vo reagir com pptidos prprios. Uma das funes do Timo e
Medula ssea manter os jovens linfcitos sequestrados at que seja possivel determinar quais reagem com
molculas do prprio organismo. Essa funo feita por clulas especializadas desses orgos que apresentam
aos linfcitos jovens molculas produzidas por elas (e portanto prprias). Todos os linfcitos que reagem a elas
so destruidos, e apenas aqueles indiferentes a prpria (mais possivelmente reativos a no-prprios) so
largados na corrente sanguinea.
Os linfocitos que no reagem a prpria so milhes, cada um com milhes de configuraes possiveis
de receptores e haver inclusive vrios, cada um com receptor para zonas diferentes de cada protena
microbiana possivel. A esmagadora maioria dos linfcitos nunca encontra uma proteina para a qual o seu
receptor seja especfico. Aqueles poucos que a encontram, so estimulados e multiplicam-se. So geradas
clulas efetoras com o receptor especfico (produtoras de anticorpos ou citotxicas, ou ainda coordenadoras) e
clulas memria. As clulas de memria so quiescentes, tm vida longa e so capazes de reconhecer esse
antgeno mesmo muito depois, multiplicando-se em maior numero e respondendo mais rapidamente a
infeces futuras.
LINFCITOS B E PRODUO DE ANTICORPOS
Os linfcitos B possuem um BCR (IgD e IgM), que em tudo semelhante ao anticorpo, mas est preso
na membrana. Os linfcitos B concentram-se nos ganglios linfticos, onde filtram a linfa, espera de uma
molcula que seja no-self e reaja especificamente com o seu receptor aleatrio. Para cada molcula possivel
h vrios linfcitos especficos. Logo assim que haja uma ligao especfica antignio-receptor e se o linfcito
for estimulado simultaneamente por citocinas produzidas pelos linfcitos T CD4
+
(reguladores,ou Helper), eles
multiplicam-se e diferenciam-se em plasmcitos e em clulas-memria. Estas, se a infeco se repetir muitos
anos depois, podem iniciar a reposta mais rapidamente. Os plasmcitos produzem ento grandes quantidades
BCR solvel e no preso membrana, ou seja, anticorpos especficos para aquela molcula.
Os anticorpos so assim proteinas receptoras livres no sangue, que so especificas e se ligam
molecula no-self e possivelmente invasora. Os anticorpos podem assim ligar-se a antgenos na superfcie de
bactrias, virus ou parasitas. Eles os eliminam de vrias formas. Podem neutralizar o invasor diretamente
(cobrindo a superficie de um virus e impedindo-o de se ligar aos seus receptores nas clulas por exemplo);
atrair fagcitos (que reconhecem e so estimulados por eles); ativar o sistema complemento de forma a lisa-
los; ou ainda estimular as clulas citotxicas (assassinas) para destruirem as clulas identificadas pelo
anticorpo.
H vrios tipos de anticorpos: IgM sempre o primeiro tipo a ser produzido; IgG o principal grupo de
anticorpos sangneos e h vrios subtipos, aparece mais tarde que IgMs, e tm maior afinidade aps
hipermutao; os IgAs so anticorpos secretados para as mucosas, como intestino, genitais e bronquios; as
IgE tm funes de luta contra parasitoses; os IgD estimula o sistema imunitrio.
LINFCITO T E CITOTOXICIDADE
Os Linfcitos T CD8
+
so os linfcitos citotxicos ou tambm chamado de Killers. Eles tm cada um,
um tipo de receptor especifico nas suas membranas, gerado aleatriamente numa fase de recombinao
gentica do seu desenvolvimento, denominado de TCR (T-cell receptor, semelhante aos anticorpos da clula
B, mas de localizao membranar). Esses receptores ligam-se a outros que todas as clulas humanas
possuem (complexo MHC I), e que apresentam peptdios (fragmentos de protenas) que elas estejam a
produzir superficie da clula. No caso que os complexos MHC I (Complexo de Histocompatibilidade) - pptido
seja reconhecidos por uma clula T CD8
+
, esta ltima desencadear a morte da clula que apresenta o pptido
atravz de enzimas citoliticas chamadas de perfurinas e granzimas que induzem a apoptose da clula alvo por
desequilbrio osmtico.
Todos os linfcitos T CD8
+
que tm receptores que reagem a substncias do prprio corpo morrem
durante o seu "estgio" no timo. Quando o linfcito T CD8
+
reconhece um antgeno no-self com o seu receptor
numa molcula MHC classe I de uma clula do organismo, ele liberta substncias (perforina) que criam um
poro na membrana, lisando (rompendo osmoticamente) a clula, ou ento libertam mediadores (granzima) que
induzem a clula a iniciar a apoptose (morte celular programada). H milhes de linfcitos CD8
+
em circulao
no organismo, cada um com receptores aleatrios para todos os pptidos possiveis no-self. Normalmente o
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linfcito T CD8
+
s destri as clulas se for estimulado por citocinas dos linfcitos T CD4
+
(reguladores). Se um
linfcito T CD8
+
com determinado receptor for estimulado dessa forma, ele divide-se em mais clulas
citotxicas e um pequeno grupo de clulas quiescentes e de longa esperana de vida, as clulas memria,
manter-se-o em circulao (entre o sangue e os gnglios linfticos). Estas clulas de memria podem ser
ativadas mais tarde de uma forma mais eficiente, mais rpida e independentemente da presena de citocinas
produzidas pelos linfcitos CD4
+
, aps reconhecimento do pptido para o qual so especficas apresentado por
uma molcula de MHC classe I.
FAGCITOS
Apesar de os fagcitos serem um mecanismo inato, j que respondem a qualquer corpo estranho, eles
tambm so efetores de primeira linha das decises dos linfcitos.
Os fagcitos, especialmente os macrfagos, respondem a citocinas geradas pelos linfcitos (IL-1). Os
moncitos so os precursores dos macrfagos e eles transformam-se em macrfagos se estimulados por
citocinas dos T4. Alm disso so atraidos por outras citocinas e fatores libertados de clulas em locais de
infeco activa.
Se estimulados apropriadamente pelas citocinas libertadas de forma localizada e controlada pelos
linfcitos T4, os macrfagos libertam suficientes quantidades de enzimas e radicais livres para destruir
totalmente uma regio localizada, matando ambos invasores e clulas humanas.
Alm disso, sob controle dos linfcitos, os macrfagos so responsveis por algumas reaes
imunolgicas especificas como o granuloma e o abcesso. O granuloma ocorre na invaso por micobactrias e
fungos, sendo o exemplo mais clebre a tuberculose. uma reao ordenada por citocinas dos T4, quando h
infeco intracelular dos prprios fagocitos. De forma a impedir a disseminao pelo sangue do invasor dentro
dessas clulas mveis, os linfcitos T4 secretam citocinas que chamam mais macrfagos, e os tornam mais
resistentes infeco ("alerta de bactria endocelular"). Alm disso as citocinas provocam a adaptao pelos
macrofagos de morfologia epitelial em volta do nucleo da invaso, com numerosas camadas de clulas
imobilizadas ligadas por conexes impermeveis, de forma a sequestrar o invasor.
Filogenia do Sistema Imune
Em nvel da escala evolutiva, o Sistema Imune Inato (sistema fagocitrio) muito mais antigo que o
Sistema Imune Adquirido (sistema linfide). A grosso modo, desde o surgimento dos invertebrados, j
apresentavam clulas fagocitrias. A partir do surgimento de peixes cartilaginosos, viu-se o surgimento do
sistema linfide e dos rgos linfides.
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
CLULAS DO SISTEMA IMUNE
(Prof Karina Carla)
As clulas que esto envolvidas nas respostas imunes adquiridas so os linfcitos antgeno-
especficos, clulas acessrias especializadas que participam na ativao dos linfcitos, e clulas efetoras que
atuam na eliminao de antgenos. As clulas do sistema imune esto, normalmente, circulando no sangue e
na linfa, como colees definidas anatomicamente nos rgos linfides e como clulas dispersas em
virtualmente todos os tecidos. A organizao anatmica dessas clulas e sua capacidade para circular e
permutar entre sangue, linfa e tecidos tm importncia essencial para a gerao das respostas imunes.
Hematopoiese
Hematopoiese o processo de formao, desenvolvimento e maturao dos elementos do sangue (eritrcitos,
plaquetas e leuccitos) a partir de um precursor celular comum e indiferenciado conhecido como clula hematopoitica
pluripotente, ou clula-tronco, unidade formadora de colnias (UFC), hemocitoblasto ou stem-cell. As clulas-tronco que no
adulto encontram-se na medula ssea so as responsveis por formar todas as clulas e derivados celulares que circulam
no sangue. A hematopoiese funo do tecido hematopoitico, que aporta a celularidade e o microambiente tissular
necessrios para gerar os diferentes constituintes do sangue. No adulto, o tecido hematopoitico forma parte da medula
ssea e ali onde ocorre a hematopoiese normal. A medula ssea o rgo mais importante da gnese das mais diversas
clulas sanguneas pois l esto as clulas-tronco que do origem a clulas progenitoras de linhagens mielocticas,
linfoctica, megacaricitos e eritroblastos.
As clulas-tronco so as clulas menos diferenciadas responsveis pela formao dos elementos figurados do
sangue; as clulas-tronco do origem as clulas progenitoras cuja prognie so as clulas precursoras.
Todas as clulas do sangue originam-se das clulas-tronco hematopoticas pluripotentes (CTHP), ou stem
cell, que passar a sofrer sucessivas mitoses e participar de um processo de diferenciao para dar origem as
duas principais linhagens: a mielide e a linfide.
Depois de sucessivas divises celulares, originam-se mais CTHPs e dois tipos de clulas-tronco
hematopoticas multipotentes (CTHM): a unidade formadora de colnias do bao (CFU-S) antecessoras das
linhagens de clulas mielides (hemcias, granulcitos, moncitos e plaquetas) e a unidade formadora de
colnia-linfcito (CFU-Ly) antecessoras das linhagens de clulas linfides (linfcitos T e linfcitos B). Estas
unidades formaro as clulas progenitoras.
As clulas progenitoras so unipotentes (esto comprometidas a formao de uma nica linhagem celular) e
tm uma capacidade limitada de auto-renovao.
As clulas precursoras originam-se das clulas progenitoras e no tem capacidade de auto-renovao. Com o
avano da maturao e diferenciao celular, passando por estgios intermedirios em que clulas
sucessivamente tornam-se menores, os nuclolos desaparecem, a malha da cromatina fica mais densa, e as
caractersticas citoplasmticas aproximam-se mais de clulas maduras (induzidos por citocinas). Estas clulas
passam por uma srie de divises e diferenciaes at se transformarem em uma clula madura. Todas as clulas
amadurecem na medula e so lanadas na corrente, com exceo dos linfcitos T, que se originam na medula,
mas amadurecem e se diferenciam no timo, para s depois cair na circulao.
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Citocinas
As citocinas so mediadores celulares do sistema imunitrio que permitem s clulas comunicar entre si e com outras
de outros orgos. So um sistema incrivelmente complexo e inteligente ainda pouco conhecido. Algumas citocinas mais
importantes:
IL-1: libertadas aquando de infeces. Produzem nos centros cerebrais regulatrios febres, tremores, calafrios e
mal-estar; promovem a inflamao, estimulam os linfcitos T. A sua ao responsvel por estes sintomas
comuns na maioria das doenas. No crebro h libertao de prostaglandina E2, que estimula o centro da
temperatura, aumentando a sua configurao. A aspirina inibe a formao da prostaglandina (bloqueia a enzima
que a produz) e por isso que diminui a febre e mal estar nas afeces virais.
IL-2: Estimula a multiplicao dos linfcitos T e B. Antes chamada de Fator de proliferacao de Linfocitos
IL-3: Estimula o crescimento e a secreo de histamina.
IL-4: Estimula multiplicao dos linfcitos B; produo de anticorpos, resposta do tipo TH2.
IL-5: Estimula multiplicao e diferenciao de linfcitos B; produo de IgA e IgE, alergias.
IL-6: Estimula a secreo de anticorpos.
IL-7: Induz a diferenciao em clulas B e T progenitoras.
IL-8: Quimiocina;induz a adeso ao endotlio vascular e o extravazamentoaos tecidos.
IFN-alfa: Interferon. Ativa as clulas em estado de "alerta viral". Produo diminuida de protenas, aumento de
enzimas anti-virais (como as que digerem a dupla hlice de RNA tipica dos virus) e aumentam tambm a
apresentao de pptidos internos nos MHC I aos linfcitos. Estimula os linfcitos NK e T8.
IFN-gama: Ativa os macrfagos, tornando-os mais eficientes e agressivos; promove a inflamao, e estimula a
resposta TH1, inibindo a TH2.
TNF-alfa: Induz a secreo da citocina e responsvel pela perda extensiva de peso associada com inflamao
crnica.
TNF-beta: Ativa os fagocitos. Estimula a resposta citotoxica (TH1).
Clulas do Sistema Imunolgico
Clulas do sistema imune so altamente organizadas como um exrcito. Cada tipo de clula age de
acordo com sua funo. Algumas so encarregadas de receber ou enviar mensagens de ataque, ou
mensagens de supresso (inibio), outras apresentam o inimigo ao exrcito do sistema imune, outras s
atacam para matar, outras constroem substncias que neutralizam os invasores ou neutralizam substncias
liberadas por eles. As clulas esto organizadas nos seguintes grupos:
Sistema Fagocitrio Mononuclear
Sistema Granulcito Polimorfonucleares
Sistema Linfocitrio
Sistema de Clulas Dendrticas (Clulas Apresentadoras Profissionais)
SISTEMA FAGOCITRIO MONONUCLEAR
Dessa famlia fazem parte clulas (monci tos e macrfagos) cujas caractersticas so: ncleo de
morfologia nica e capacidade de fagocitar partculas, degrad-las e express-las, na membrana, na forma de
pequenos peptdios associados a molculas do complexo principal de histocompatibilidade (MHC do ingls,
major histocompatibility complex). Alm de realizar fagocitose e opsonizao, os macrfagos podem
apresentar efeito citotxico sobre clulas tumorais mediado pelo mecanismo de ADCC.
1. Monci tos: Os moncitos esto presentes no sangue, constituindo-se de 3 a 8 % dos leuccitos
circulantes. Participam da formao dos granulomas (turbeculose, lepra, filariose). O granuloma o
antgeno rodeado por uma barreira de moncitos no processo de defesa. Realizam um mecanismo
denominado ci totoxi ci dade cel ul ar dependente de anti corpos (ADCC), que um mecanismo da
imunidade inata.
2. Macrfagos: So clulas teciduais e de grande poder fagoctico derivadas dos moncitos. Dentre
suas principais funes na imunidade destaca-se: Apresentao de antgenos (MHC-II); Clulas de
limpeza; Produo de citocinas inflamatrias e regulatrias. Podem ser encontradas: no SNC
(Micrglia); no Fgado (Clulas de Kupppfer); na pele (Clulas de Langehans); no Pulmo
(Macrfagos Pulmonares).
SISTEMA GRANULCITO POLIMORFONUCLEARES
Fazem parte dessa famlia as clulas que tm como caractersticas comuns: a presena de grnulos
no citoplasma, que apresentam diferentes afinidades por corantes cidos e bsicos, e um ncleo multilobulado
(2-4 lbulos) ou segmentado. Essas clulas, presentes sobretudo no sangue e nas mucosas, so os
neutrfi l os, os eosi nfi l os e os basfi l os.
1. Basfi l os: apresentam ncleo em forma irregular sem a diviso em lbulos e grnulos com
afinidade por corantes bsicos (se coram em azul-violeta). Sua principal funo a liberao de
diferentes mediadores, como a histamina (associada heparina), os leucotrienos, as
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
prostaglandinas e serotonina. O basfilo uma clula tpica do sangue, sendo o mastctio a clula
que exerce funes similares s do basfilo nas mucosas e no tecido conjuntivo.
2. Neutrfi l os: apresentam ncleo segmentado em 2 a 5 lbulos e grnulos que no tem afinidade
seletiva para corantes bsicos ou cidos. So, portanto, clulas inflamatrias que chegam mais
rapidamente ao local da injria. a classificao leucocitria mais populosa (65%). Tm como
funes: Fagocitose; Liberao de Mediadores (mieloperoxidase, fosfatase cida e alcalina,
colagenase e citocinas).
3. Eosi nfi l os: apresentam ncleo bilobulado e grnulos que tem afinidade por corantes cidos, como
a eosina, apresentando colorao avermelhada. O seu percentual entre os leuccitos no sangue
de 3%. Apresentam diminuda atividade fagocitria e como tm como principal funo: Protena
Bsica Principal (MBP); Peroxidase Eosinoflica; muito presentes em processos alrgicos em
infeces parasitrias. Sua funo principal a realizao de mecanismo denominado
ci totoxi ci dade cel ul ar dependente de anti corpos (ADCC), que um mecanismo da imunidade
inata.
SISTEMA LINFOCITRIO
H dois tipos principais de linfcitos clssicos: os linfcitos T (LT) e os linfcitos B (LB). Os linfcitos T
podem ser de dois tipos: linfcitos T auxiliares (LTh CD4) e linfcitos T citotxicos (LTc CD8). Os LTh atuam
ativando outras clulas para exercer suas funes:
Os macrfagos ativam a capacidade fagoctica e a produo de molculas (monocinas e outras);
Os LB induzem a maturao fazendo que se tornem plasmcitos, secretando anticorpos, ou LB de
memria;
Os LTc induzem a atividade citotxica contra clulas tumorais e infectadas por vrus e outros parasitas
intracelulares.
Por tanto, tem-se como clulas do sistema linfocitrio:
1. Li nfci tos T (LT): Apresentam um mecanismo de ativao onde fazem parte os receptores de
clulas T (TCR), responsvel por reconhecer o complexo MHC-peptdeo, expresso nas clulas
apresentadoras de antgenos. Podem ser do tipo T citotxico (CD8) ou T auxiliar (CD4, tambm
chamado de helper).
2. Li nfci tos B (LB): Apresentam receptores de clulas B (BCR). Quando produzem imunoglobulinas
ou anticorpos so chamadas de plasmcitos (principal produtor de anticorpos, em que h uma
diferenciao e amadurecimento do LB, com o aumento e desenvolvimento de suas organelas). O
antgeno tem a funo de se ligar e neutralizar o anticorpo ou a funo de facilitar a fagocitose
desse anticorpo (opsonizao).
OBS: O TCR um receptor altamente especfico com funo de
reconhecer o complexo peptdeo MHC, por meio da resposta adquirida.
Alm do TCR, h molculas presentes na membrana do linfcito que
tem com funo permitir uma co-estimulao, que so do tipo CD
(grupo de diferenciao), sendo elas CD8 ou CD4. Essas molculas
servem como caractersticos marcadores fenotpicos de cada respectivo linfcito: O LTc est marcado com
CD8 e o LTh com o CD4. Quando uma clula APC (Clula Apresentadora de Peptdeo), como uma clula
dendrtica, fagocita um antgeno, esta metaboliza o mesmo at degrad-lo a molculas de peptdeo. Para
degrad-lo totalmente, a APC necessita da ao de um linfcito. Simultaneamente degradao do antgeno,
outra organela sintetiza um receptor de membrana (MHC) e o une ao peptdeo. Em sua membrana, a APC
expe o complexo peptdeo-MHC aos linfcitos T, que por meio de seu receptor TCR, reconhece o peptdeo
antignico via MHC. Outras molculas, como o CD8 ou CD4 (em outra clula), amplia essa avidez de
reconhecimento da clula.
OBS: De um modo geral, o linfcito T citotxico (com CD8 na membrana) tem a capacidade de promover ao
sobre peptdeos intracelulares, uma vez que ele libera enzimas chamadas perfuri nas que perfuram a
membrana da APC para liberar nela outras enzimas presentes em seu citoplasma chamadas de granzi mas,
que penetram pelo poro produzidos pela perfurina para desempenhar uma citotoxicidade. Quando clulas
esto infectadas por protenas estranhas (como as tumorais), necessria a sua morte completa, sendo
importante a ao direta do LTc e de suas enzimas. J os LTh reconhecem
o complexo MHC-peptdeo vindo da APC, mas respondem a ameaas de
naturezas extra-celulares: parasitose, bactrias extra-celulares, etc.
OBS: Na resposta imune adaptativa, em alguns casos, ao reconhecer o
complexo MHC-peptdeo, o linfcito T libera citocinas que ativa o LB, o qual
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se diferencia em plasmcito, capaz de produzir imunoglobulinas (anticorpo) que neutralizam antgenos.
OBS
4
: Opsonina qualquer fator que auxilia a fagocitose de antgenos por clulas fagocitrias, como o prprio
anticorpo funciona. Esse processo de facilitao chamado de opsoni zao.
3. Cl ul as Natural Killers (NK Cel l s): As clulas assassinas naturas (NK de, natural killer), so
semelhantes aos linfcitos, mas no apresentam TCR. So de natureza linfide mas no tem a
especificidade dos linfcitos T e B, no fazendo parte ento da resposta imune adiquirida, mas sim, da
resposta inata. Tem como funes a lise de clulas infectadas por vrus, de clulas tumorais;
citotoxicidade celular dependente do anticorpo. Essa citotoxicidade se d por meio do mecanismo da
ADCC em que, devido a sua baixa capacidade de fagocitose, h a liberao de mediadores celulares,
ocorrendo uma fagocitose frustrada (uma vez que ela tenta fagocitar, mas por no conseguir, libera
esses mediadores qumicos). Esse processo ocorre quando o antgeno se liga ao anticorpo.
SISTEMA DE CLULAS DENDRTICAS
Essas clulas so assim chamadas porque apresentam expanses citoplasmticas em forma de
dendritos, assim como os neurnios. Apresentam como principal funo a fagocitose e a apresentao de
antgenos na sua membrana. As primeiras clulas dendrticas identificadas foram as clulas de Langerhans da
epiderme.
Acredita-se que essas clula migram da pele para os linfonodos regionais e bao, onde ocupam locais
diferentes e desempenham funes distintas. As clulas dendrticas que ficam nos folculos linfides, onde as
clulas predominantes so LB, so encontradas sob o epitlio da maioria dos rgos. Sua funo a captura
de antgenos estranhos e seu transporte para os rgos linfides secundrios.
OBS: ADCC: quando ocorre a infeco por microrganismos, j sabemos que ocorrer um processo de reao
em que anticorpos sero liberados para realizar a opsonizao, ocorrendo assim maior facilidade de fagocitose
do agente invasor. Contudo, se este for muito grande, as clulas efetoras como os macrfagos produziro
fatores de morte intra-celular (como o NO, O
2
-
, OCl
-
: intermedirios reativos do O
2
e N
2
). Ocorre, assim, um
processo de morte do microrganismo. As clulas NK passam a secretar substancias como perfurimas e
granzimas, causando a morte do microrganismo por apoptose.
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
RGOS DO SISTEMA IMUNE
(Prof Karina Carla)
As clulas do sistema imune esto organizadas em tecidos ou rgos
linfides. Essas estruturas so denominadas linfides porque as clulas que
predominam no estroma so linfcitos; no entanto, outras clulas do sistema
imune (macrfagos, clulas dendriticas e polomorfonucleares) e de outros
sistemas (clulas epiteliais, endoteliais, fibroblastos) esto presentes, nesses
rgos, em menor proporo.
Os rgos linfides, de acordo com sua funo, podem ser classificados
em pri mri os (geram e amadurecem clulas do sistema imune) ou secundri os
(local onde ocorre a reposta imune: encontro do antgeno com o anticorpo). Vale
ressaltar que, uma clula caracterizada fenotipicamente amadurecida quando
apresenta seus marcadores celulares (como o TCH para o LT e BCH para o LB).
Para isso, essas clulas precisam ser amadurecidos nos rgos linfides
primrios.
rgos l i nfi des pri mri os: os linfcitos passam por processos de
maturao e diferenciao. Os principais rgos linfides primrios nos
mamferos so: a medula ssea e o timo.
rgos l i nfi des secundri os: so os linfonodos (ou gnglios linfticos),
o bao, a prpria medula ssea e os tecidos linfides associados
mucosa (MALT, mucosal-associated lymphoid tissue).
rgos Linfides Primrios
MEDULA SSEA
A medul a ssea, popularmente conhecida
como "tutano", um tecido gelatinoso que preenche a
cavidade interna de vrios ossos e fabrica os
elementos figurados do sangue perifrico como:
hemcias, leuccitos e plaquetas. A medula ssea
constituda por um tecido esponjoso mole localizado no
interior dos ossos longos. nela que o organismo
produz praticamente todas as clulas do sangue:
glbulos vermelhos (Eritrcitos),
glbulos brancos (Leuccitos) e
plaquetas (Trombcitos). Estes
componentes do sangue so
renovados continuamente e a medula
ssea quem se encarrega desta
renovao. Trata-se portanto de um
tecido de grande atividade
evidenciada pelo grande nmero de
multiplicaes celulares.
No incio da gestao, a
hematopoiese funo do saco
vitelnico. Semanas depois, o
processo de gerao das clulas do
sangue passa a ser funo do bao e
fgado, para s depois, assumir a
medula ssea repleta de steam cells.
Ao nascer, a hematopoise acontece
predominantemente na medula ssea.
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TIMO
O ti mo um rgo linftico bilobulado que est localizado na
poro antero-superior da cavidade torcica. Limita-se, superiormente
pela traquia, a veia jugular interna e a artria cartida comum,
lateralmente pelos pulmes e inferior e posteriormente pelo corao.
Os lobos timicos so revestidos por uma cpsula de colgeno
frouxo, que invade o interior do rgo, delimitando estruturas
denominadas lbulos. Esses lbulos so formados por duas regies
distintas: a cortical e a medul ar. Na interseco entre essas duas
regies, delimita-se a juno corticomedular.
No ambiente lobular, pelo contato com clulas do epitlio tmico,
macrfagos e clulas dendrticas interdigitantes, percusores dos
linfcitos T oriundos da medula ssea (denominados ti mci tos) so
submetidos aos processos de maturao, seleo e diferenciao.
Durante o processo de maturao, os timocitos passam a
expressar receptores especficos de antgenos (TCR, do ingls, T cell
receptor) e outras molculas, denominadas co-estimuladoras (CD3, CD4
e CD8), importantes nos mecanismos de ativao dessas clulas.
O timo, que apresenta como funo principal a maturao do LT, possui uma cpsula de tecido
conjuntivo denso no modelado que dele partem septos que dividem os lobos em lbulos. Cada lbulo do timo
constitudo por crtex e medula.
o Crtex: composto por um grande numero de l i nfci tos T (timcitos) que migram da medula ssea
para a periferia do crtex, onde proliferam-se intensamente e tornam-se imunocompetentes. Alm
disso, o crtex possui macrfagos e clulas reticulares epiteliais.
o Medul a: caracteriza-se pela presena dos corpscul os de Hassal l (tmi cos), que consiste no
conjunto de clulas dendrticas e epiteliais dispostas de forma espiral. Todos os timcitos da medula
so clulas T imunocompetentes. A funo dos corpsculos tmicos pode ser associada ao local de
morte dos linfcitos T da medula. Encontra-se tambm, nessa regio, vasos linfticos e sanguneos.
A partir do momento em que os timcitos expressam os receptores de antgenos na membrana, esses
so selecionados de acordo com a afinidade e o tipo de molculas que reconhecem. Durante o processo de
seleo, os timcitos passam pelo processo de diferenciao e se tornam LT auxiliares (LTh) ou LT citotxico
(LTc).
OBS: O linfcito T imaturo marcado com CD44+. por meio desse marcador que o mesmo reconhecido
para entrar no timo. Vale ressaltar tambm que todo LT, quando maduro, apresenta o CD3, ou seja, quando ele
citotxico, apresenta CD3 e CD8, e quando ele auxiliar, CD3 e CD4.
1. Mecani smo de maturao do LT
Os precursores dos linfcitos T (clulas CD44+), provenientes da medula ssea, chegam ao timo e, sob a
influencia de fatores quimiotticos derivados do epitlio tmico, instalam-se na regio logo abaixo da cpsula
(regio subcapsular) e medida que se tornam maduros, migram do crtex para a medula. A transio atravs
dos vasos ocorre provavelmente pela associao da molcula CD44, presente nos precursores de LT, a
molculas de hialuronato.
Durante a migrao no timo, as clulas so submetidas aos efeitos de hormnios tmicos (timopoetina,
tomisina-1 e timosina-4, timulina e fator tmico humoral) e citocinas (IL-1, IL-2, IL-4 e IL-7) produzidos por
clulas epiteliais tmicas e passam a proliferar e expressar molculas de membrana.
Quando chegam da medula ssea, essas clulas precursoras no apresentam molculas de membrana
tpicas de LT, ou sejam CD3- CD4- CD8- (triplo negativas). As citocinas IL-7 e IL-2 parecem ser importantes na
proliferao dessa populao de timcitos imaturos, que do origem a clulas CD3+ CD4+ CD8+ (triplo-
positivas). Durante o progresso de maturao, as clulas CD3- CD4- CD8- deixam de expressar CD44 e
passam a expressar CD25, o que as leva a proliferar sob estmulo da IL-2 (fator de crescimento LT).
Alm disso, temos dois tipos de TCR conhedicos:
TCR-1: apresenta uma cadeia gama () e outra delta ()
TCR-2: apresenta uma cadeia alfa () e outra beta (), mais comum no sistema linftico.
As clulas que expressam TCR maturam antes das que expressam TCR e so menos dependente do
timo, podendo maturar em locais extratmicos. O TCR, como sabemos, o receptor de LT que reconhece
molculas do complexo de histocompatibilidade (MHC) de classe I ou II associadas a antgenos peptdicos. No
entanto, enquanto o TCR-2 reconhece o MHC-peptdio, o TCR-1, alm destes complexos, reconhece
fosfoacares, fosfosteres e outros antgenos no proticos. De acordo com a capacidade dos linfticos T
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
(expressam TCR-2) em reconhecer complexos MHC-peptdios, eles so selecionados e essa seleo
realizada em duas fazes: seleo positiva e seleo negativa.
Sel eo posi ti va: medida que os timcitos entram em contato com clulas epiteliais do crtex tmico
(que sintetizam molculas do MHC prprias associadas com peptdeos prprios oriundos das
membranas celulares ou dos liquidos corporais), eles so selecionados com a avidez dos seus TCRs
pelos complexos MHC-peptdeo. Os timcitos que apresentam TCR com um limite mnimo de avidez
por esses peptdeos prprios so selecionados positivamente, ou seja, sobrevivem. Os que
apresentam uma avidez alta morrem por apoptose para que, ao chegarem ao sistema, no ataquem
clulas do prprio organismo. Durante a seleo positiva, os LT CD3+ CD4+ CD8+ cujos TCR
reconhecem o complexo MHC classe I-peptdeo passam a expressar CD8 porque essa molcula adere
molcula de classe I e um sinal emitido nos sentidos do CD4 deixar de ser expresso e essas
clulas tornam-se linfcitos T citotxicos (CD3+CD8+). Da mesma forma, nos LT cujos TCRs
reconhecem MHC classe II-peptdeo, a molcula CD4 adere molcula de classe II e um sinal
emitido para que a CD8 deixa de ser expressa, e essas clulas tornam-se linfcitos T auxiliares
(CD3+CD4+).
Sel eo Negati va: os linfcitos que sobrevivem na fase de seleo positiva passam pela seleo
negativa. Esse tipo de seleo pode ocorrer pelo contato dos TCRs dos timocitos com peptdeos
apresentados tanto pelas clulas epiteliais tmicas quanto pelos macrfagos e clulas dendrticas
interdigitantes. Nessa seleo, os TCRs que reconhecem com alta afinidade os complexos MHC classe
I ou II e peptdeos morrem por apoptose; os que reconhecem com mdia afinidade, sobrevivem. Por
tanto, os timocitos CD4+CD8+selecionados apresentam TCR que reconhece com mdia afinidade
complexos formados pelas protenas MHC classe I ou II associadas com peptdeos. Aps o processo
seletivo, essas clulas migram, pelos vasos sanguneos e linfticos presentes na regio medular, para
os rgos linfides secundrios onde ocuparo regies especificas de linfcitos T, denominadas
regies timo-dependetes ou T-dependentes.
No timo, portanto, h tambm um ensinamento ao linfcito T quanto composio de peptdeos
estranhos e prprios do organismo, de modo que o LT, ao sair do timo, seja treinado a diferenciar protenas
estranhas das produzidas pelo prprio organismo.
rgos Linfides Secundrios
Os tecidos linfides secundrios so os que efetivamente participam da resposta imune, seja ela
humoral ou celular. As clulas presentes nesses tecidos secundrios tiveram origem nos tecidos primrios,
que migraram pela circulao e atingiram o tecido. Neles esto presentes os nodos linfticos difusos, ou
encapsulados como os linfonodos, as placas de Peyer, tonsilas bao e medula ssea. Devemos aqui destacar
a medula ssea, que rgo primrio e secundrio ao mesmo tempo.
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LINFONODO
Linfonodos so rgos pequenos em forma de feijo que
aparecem no meio do trajeto de vasos linfticos. Normalmente esto
agrupados na superfcie e na profundidade nas partes proximais dos
membros, como nas axilas, na regio inguinal, no pescoo, regio
estenal, etc. Tambm encontramos linfonodo ao redor de grandes
vasos do organismo. Eles filtram a linfa que chega at eles, e
removem bactrias, vrus, restos celulares, etc.
So caracterizados por concentrar os fol cul os l i nfi des (LB)
e as regi es i ntefol i cul ares (LT) ao longo dos vasos linfticos,
exercendo a funo de filtrao da linfa. Os linfonodos apesentam uma
cpsula de colgeno que se estende em forma de trabculas para o
interior do rgo e s quais se associam fibras reticulares. A linfa entra
nos linfonodos pelos vasos linfticos aferentes, percola pelos seios
subcapsulares, corticais e medulares e sai do linfonodo pelo vaso
linftico eferente. Ao longo dos seios, h um grande numero de macrfagos responsveis pela fagocitose das
partculas que entram no linfonodo com a linfa. Carreados pela linfa, tambm chegam aos linfonodos clulas
dendriticas ou macrfagos que capturam antgenos na pele e nas mucosas.
O parnquima do linfonodo constitudo pelas regi es corti cal (concentrado de LB) e medul ar
(concentrado de LT). A regio cortical subdividida em crtex superficial, onde esto os folculos linfides,
constitudos de LB e de clulas dendriticas foliculares, e em crtex profundo ou paracrtex (linfcitos T e
clulas dendriticas interdigitantes). Na regio medular esto presentes macrfagos, linfcitos, clulas
dendrticas e, quando o linfonodo foi recentemente ativado, so encontrados os plasmcitos, linfcitos B
secretores de anticorpos.
BAO
Diferentemente dos linfonodos (que captam antgenos
da linfa), o bao capta antgenos do prprio sangue. O bao
um rgo linfide secundrio presente no quadrante superior
esquerdo do abdome e responsvel pela remoo tanto de
partculas estranhas do sangue como de hemcias e plaquetas
envelhecidas.
O bao revestido por uma cpsula de colgeno da
qual se estendem fibras reticulares que formam o arcabouo do
parnquima esplnico. A maior parte do parnquima
composta por cordes esplnicos celulares e uma rede de
sinusides/seios vasculares, preenchidos de sangue. Essa regio denominada de pol pa vermel ha. A outra
parte do parnquima, que corresponde a 5-20% de massa esplnica, e est presente ao redor das artrias e
arterolas centrais, a poro linfide denominada de pol pa branca.
A polpa branca est disposta ao redor das arterolas formando o que se chama de bainha periarteriolar
(PALS), composta de linfcitos T e clulas dendriticas interdigitantes; entre os LT esto presentes os folculos
linfides primrios e secundrios, compostos, como j mencionado, de LB e clulas dendrticas foliculares.
Entre a polpa vermelha e a polpa branca, encontra-se uma regio denominada zona margi nal, onde esto os
macrfagos e os linfcitos. Os macrfagos presentes na zona marginal so importantes na resposta a
antgenos T-independentes, que so na sua maioria polissacardeos complexos.
TECIDOS LINFTICOS ASSOCIADOS A MUCOSAS (MALT)
So constitudos por infiltraes de linfcitos e ndulos
linfticos do trato gastrointestinal, respiratrio e urinrio.
GALT: est localizado no leo (onde formam agregados
linfticos denominados Placa de Peyer), sendo constitudos
por clulas B e T.
NALT: localizado na mucosa nasal.
SALT: localizado na pele.
DALT: localizados no ductos associados aos ganglios
linfticos.
BALT: localizados na parede dos brnquios.
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OBS: Em resumo, temos: ao entrar no epitlio, o
antgeno fagocitado por clulas fagocticas e o levam
em direo a vasos linfticos. Esses vasos se
encarregam de levar o antgeno fagocitado em direo
ao vaso aferente do linfonodo mais prximo. Neste
linfonodo, por meio da apresentao antignica, se inicia
a reposta imune: reconhecimento, proliferao das
clulas, sntese de protenas como citocinas (que ativam
e potencializam ainda mais a resposta para deletar o
antngeno) e a formao de clulas de memria (que no
reagiram resposta, mas que obtiveram outros
marcadores para responder futuras agresses).
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
IMUNIDADE INATA
(Prof Karina Carla)
Como j sabemos, a resposta imune divida em resposta imune inata e resposta imune adquirida que,
embora ambas aconteam simultaneamente, cada uma apresenta clulas especficas para cada tipo de
resposta.
O si stema i mune inato a forma de imunidade que nasce com a pessoa, sem precisar de
substncias ou estruturas exteriores, ou seja, a primeira resposta de defesa do organismo.
a imunidade fornecida pelos macrfagos (clulas fagocitrias); pela pele, que uma barreira de
proteo contra microorganismos invasores; por substncias qumicas presentes no corpo (na pele
principalmente); pelo sistema complemento (um complexo de protenas que atuam na imunidade). Portanto,
uma imunidade nativa, natural e inespecfica, ou seja, no tem preferencia de qual microorganismo invasor
esse tipo de sistema atua. Ele apenas defende o organismo de forma rpida, inespecfica e aguda.
Apesar de ser inespecfica e rpida (respostas agudas), a resposta imune inata ativa a imunidade
adaptativa. Podemos indentificar, por tanto, algumas diferenas entre esses dois tipos de resposta imune:
Especi fi ci dade: Os microorganismos apresentam estruturas comuns entre eles denominadas de
padres moleculares associados a patgenos (PAMPs), de modo que por meio desses padres que
as clulas da resposta imune inata os reconhece. por isso que no h diferena de especificidade
pelo sistema imune inato, uma vez que os PAMPs so estruturas em comum a todos os
microorganismos. Diferentemente da imunidade adaptativa, que reconhece peptdios especficos dos
microorganismos, que sero degradados e apresentados, para serem reconhecidos especificamente
por receptores dos linfcitos (TCR e BCR).
Receptores: os receptores das clulas dos dois tipos de respostas so codificadas de maneira
diferente. Os receptores da imunidade inata so representados por receptores da linhagem
germinativa (lipopolissacardeos, resduos de N-formil metionina, receptores de manose e de
scavenger), com uma diversidade limitada. J a produo dos receptores da resposta imune
adaptativa so sintetizados por recombinao somtica de genes para que haja uma alta
especificidade de receptores.
Di stri bui o dos receptores: clulas do sistema imune inato apresentam receptores no-clonais
(receptores idnticos em todas as clulas de uma mesma linhagem). J as clulas do sistema imune
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adpatativo so da srie clonal (clones de linfcitos com especificidades distintas expressam receptores
diferentes).
Discriminao entre peptdeos prprios e no-prprios: a imunidade inata capaz de diferenciar
as clulas do hospedeiro das do agente invasor, de modo que as clulas do primeiro no so
reconhecidas. Bem como ocorre no sistema imune adaptativo, sendo que nesta, a diferenciao
baseada na seleo contra-linfcitos auto-reativos (que quando falha, d origem a auto-imunidade).
Componentes da Imunidade Inata
BARREIRAS
Camadas epiteliais: impedem a entrada de microrganismos, atuando como barreira para entrada de
componentes estranhos para o organismo.
Defensinas: enzimas com funo microbicida (morte microbiana).
Linfcitos intra-epiteliais: linfcitos presentes no epitlio (que no tm caractersticas de resposta
adquirida) que causam a morte microbiana.
CLULAS EFETORAS CIRCULANTES
Neutrfilos: fagocitose inicial e morte de microrganismos.
Macrfagos: fagocitose eficiente de microrganismos, secreo de citocinas que estimulam a
inflamao. Caso seja necessrio, ele serve como um apresentador de antgeno, solicitando um outro
tipo de resposta imune.
Clulas NK: responsvel pela lise de clulas infectadas e ativao de macrfagos. um tipo de
linfcito que, como exceo, no participa da reposta imune adquirida por no possuir TCR ou BCR
(receptores de alta especificidade).
PROTENAS EFETORAS CIRCULANTES
Complemento: causam a morte de microrganismos, opsonizao (facilitao da fagocitose) e ativao
de leuccitos. Quando as clulas do complemento so ativadas, geram uma cascata de ativaes que
terminam na formao de um complexo de ataque membrana, que se liga ao microrganismo, na
tentativa de causar lise no mesmo.
Lectina de ligao manose (colectina): opsonizao de microrganismos, ativao do complemento
(via da lectina).
Protena C-reativa (pentraxina):
opsonizao de microrganismos e
ativao do complemento. A
presena da bactria ativa a PCR,
servindo como um fator facilitador
da fagocitose, se ligando a bactria
e eliminando cargas que repelem a
bactria e o macrfago. A PCR
mensurada em processos de
inflamao aguda.
Fatores da coagulao: bloqueio dos tecidos infectados.
CITOCINAS
TNF, IL-1, quimiocinas: inflamao
IFN-, IFN-: resistncia infeco viral
IFN-: ativao de macrfagos
IL-12: produo de IFN- pelas clulas NK e pelas clulas T
IL-15: proliferao de clulas NK
IL-10, TGF-: controle da inflamao.
Resistncia Natural Externa
PELE
A pele a principal barreira externa do sistema imune inato. A sua superfcie lipoflica constituda de
clulas mortas ricas em queratina, uma protena fibrilar, que impede a entrada de microorganismos. As
secrees ligeiramente cidas e lpidicas das glndulas sebcea e sudorpara criam um microambiente
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
cutneo hostil ao crescimento excessivo de bactrias. Podemos destacar alguns componentes da mesma,
como:
Queratincitos: clulas que formam uma placa protetora impedindo a entrada de agentes estranhos no
organismo por meio da pele.
Pelo: funo de controlar e limitar a entrada e contato de microrganismos com a superfcie epitelial.
Glandulas sebcias e sebo
Enzimas como defensinas, catalecidinas e lisosimas.
Microbiota da pele
EPITLIO RESPIRATRIO
Est em contato com o meio externo por meio da boca e nariz. Tem como mecanismos de resistencias
naurais:
Microbiota
Clios
Muco
Enzimas (amilase, lisozima)
EPITLIO GASTRO-INTESTINAL
Microbiota
Peristaltismo
c. Clordrico
Saliva/ Enzimas (amilase, lisozima)
SISTEMA UROGENITAL
Microbiota
Urina (pH e fluidez)
Muco (canal endocervical)
Enzimas (esperminas e espermidinas)
Resistncia Natural Interna Clulas do Sistema Imune Inato
A resistncia natural interna do sistema imune inato rene aquelas clulas que, sem uma avidez
especfica por antgenos, tm capacidade de fagocit-los, produzir citocinas (e outros mediadores), alm de
apresentar esses antgenos, ativando o sistema imune adaptativo.
MACRFAGOS (M)
So clulas de grandes dimenses do tecido conjuntivo, ricos em lisossomos,
que fagocitamelementos estranhos ao corpo. Os macrfagos derivam dos moncitos
do sangue (que se direcionam aos tecidos e se denominam como macrfagos) e de
clulas conjuntivas ou endoteliais. Intervm na defesa do organismo contra infeces.
Possuem duas grandes funes na resposta imunitria: fagocitose e destruio do
microrganismo; e apresentao de antignios a linfcitos T. Suas funes mais
relevantes so:
Fagocitose
APC (apresentao do antgenos para os linfcitos)
Secreo de citocinas e mediadores
NEUTRFILOS
Os neutrfi l os so uma classe de clulas sanguneas leucocitrias, que fazem parte
do sistema imunitrio do corpo humano. So leuccitos polimorfonucleados, tm um tempo de
vida mdio de 6h no sangue e 1-2 dias nos tecidos e so os primeiros a chegar s reas de
inflamao, tendo uma grande capacidade de fagocitose. Esto envolvidos na defesa contra
bactrias e fungos. Os neutrfilos possuem receptores na sua superfcie como os receptores de
protenas do complemento, receptores do fragmento Fc das imunoglobulinas e molculas de
adeso. Tem como funes:
Fagocitose: Ao fagocitar forma-se o fagossomo onde os microrganismos sero mortos pela liberao
de enzimas hidrolticas e de espcie reativa de oxignio. O consumo de oxignio durante a reao de
espcies de oxignio chamado de queima respiratria que nada tem a ver com respirao celular ou
produo de energia.
Secreo de Citocinas e Mediadores
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
Degranulao: liberam grnulos especficos ou "secundrios" (Lactoferrina e Catelicidina); Grnulos
azurfilos ou "primrios" (Mieloperoxidase, Protena de aumento da permeabilidade /bactericida (BPI),
Defensina e Serino protease neutrfilo elastase e Catepsina G); Grnulos tercirios (Catepsina,
Gelatinase)
CLULAS NK
As clulas exterminadoras naturais ou clulas NK (do ingls Natural Killer Cell) so um tipo de
linfcito (glbulos brancos do sangue) e naturais do sistema imunolgico de defesa. Elas so activadas em
resposta a vrios diferentes estmulos, nomeadamente por citocina produzidos por outros elementos do
sistema imunitrio, por estimulao dos receptores FcR, presentes na sua membrana celular, que reconhecem
a poro Fc das imunoglobulinas e pelos receptores de ativao ou inibio, especficos das clulas NK.
As clulas NK so citotxicas (txicas para a clula) e identificam as clulas que esto com vrus
(consequentemente comprometidas) e as destroem.
As clulas NK so componentes importantes na defesa imunitria no especifica. Partilham um
progenitor comum com os linfcitos T. So originrias da medula ssea e so descritos como grandes e
granulares. Estas clulas no destroem os microorganismos patognicos diretamente, tendo uma funo mais
relacionada com a destruio de clulas infectadas ou que possam ser cancergenas. No so clulas
fagocticas. Destroem as outras clulas atravs do enfraquecimento da membrana plasmtica, causando
difuso de gua e ons para o interior da clula e aumentando o seu volume interno at um ponto de ruptura no
qual ocorre a lise. So quimicamente caracterizadas pela presena de CD56 e ausncia de CD3.
Podemos destacar as seguintes funes:
Vigilncia
Apoptose
OBS: PAMPs e PRRs. Os patgenos
possuem molculas altamente
conservadas presentes em suas clulas.
Essas molculas so chamadas de
PAMPs (padres moleculares associados
aos patgenos). O S.I. Inato reconhece
esses PAMPs por meio dos PRRs
(receptores de reconhecimento de
padres; Ex: receptores Toll-like ou
TLRs).
Receptor Toll-like LPS, RAS,
bactrias GRAM negativas;
Receptor Manose manose
presente nos microrganismos.
Receptor Transmembrana 7 -
hlice peptdeos N-formil
metionil.
OBS: Funo microbicida dos fagcitos - Fagocitose
1. Reconhecimento: reconhecimento dos padres
(PAMPs) pelos PRRs.
2. Emisso dos pseudpodes para que ocorra o
envolvimento do microrganismos
3. Formao da vescula endoctica (fagossoma) ou
engolfamento.
4. Fuso do lisossomo com o fagossoma, formando o
fagolisossomo, no qual ocorre a liberao de enzimas
lisossmicas
5. Morte do microrganismos: os mecanismos de morte
interacelular, induzidos nos neutrofilos e nos
macrfagos, podem ser de dois tipos:
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Mecanismo de morte intracelular independente de oxignio: o microrganismo morre devido ao
acmulo de cido lctico produzido pela prpria clula hospedeira, proveniente do
metabolismo anaerbio da glicose. O acumulo desse acido causa diminuio do pH
intracelular, criando um abiente bactericida ou bacteriosttico, dependendo da bactria em
questo.
Mecanismos de morte intracelular dependente de oxignio: a endocitose de microrganismos
aumenta o consumo de oxigenio nas clulas fagocticas, o que desencadeia o chamado desvio
da hexose monofosfato (exploso respiratria) e a formao de intermedirios reativos de
oxignio (ROI, reactive oxygen intermediates). A ativao desses mecanismos envolve a
participao de duas enzimas principais:
o A NADPH oxi dase (fagcito oxidase), que remove um hidrogenio do NADPH para
formar NADP+, convertendo simultaneamente o O
2
e, radical superxido. O radical
superxido, pela presena de um eltron no partilhado, torna-se extremamente
reativo e toxico para vrias espcies bacterianas.
o A superxi do di smutase (SOD), que catalisa a reao na qual radicais de
superxidos so convertidos em perxido de hidrognio (H
2
O
2
) e O
2
. O H
2
O
2
,
produzido pela ao superxido dismutase, degradado pela mieloperoxidase, na
presena de ons cloro e iodo para produzir hipoclorito ou hipoiodeto, tambm txicos
para espcies bacterianas. Esses produtos gerados pela ao da mieloperoxidase so
txicos para uma srie de microrganismos incluindo bactrias, vrus, fungos,
Mycoplasma, Chlamydia, Leishmania donovani e Schistossoma mansoni.
Mecanismo de morte intracelular dependente de nitrognio (RNI): uma via de morte intracelular
dependente de oxigenio leva a produo de intermedirios reativos de nitrognio. A principal
molcula produzida por esta via o oxido ntrico (NO), uma molcula diatomica sintetizada e a
partir do aminocido L- arginina, txica para bactrias, protozorios e clulas tumorais. A
produo de NO por macrfagos depende da expresso da enzima iNOS (sintase induzida de
xido ntrico), cuja a produo estimulada por molculas como o LPS (em bactrias gram-
negativas). O iNOS catalisa a reao que remove de forma oxidativa o tomo de nitrogenio
guanidino terminal da L-arginina para formar o NO e L-citrulina. O NO, em meio lquido,
altamente reativo e instvel. Essa alta instabilidade faz essas molculas reagirem entre si, com
gua e oxigenio, gerando outro radial, o dixido de nitrogenio (NO
2
), nitrito e nitrato.
OBS: Funo das cl ul as NK. As NK cells so responsveis por eliminar clulas infectadas com vrus e
clulas tumorais. O macrfago infectado produz citocinas (como a IL-12) que servem como mediadores para as
clulas NK (que possuem receptores para a IL-12), que, quando estimuladas por esta interleucina, passam a
produzir o IFN-, que tem a funo de estimular a lise do macrfago. De forma mais detalhada, h duas formas
de as clulas NK reconhecerem macrfagos infectados e macrfagos normais:
Os macrfagos normais expressam um MHC de receptor de clulas prprias. A clula NK apresenta dois
receptores: um receptor que ativa e outro que inativa a sua ao. Quando ocorre a ligao NK-
macrfago, o receptor ativante se liga com o MHC especfico do macrfago e o receptor inativante se
liga com o MHC da classe I prprio (presente em organelas prprias do organismo). Agindo
simultaneamente, o receptor inibitrio predomina, realizando a remoo de fosfatos da NK, induzindo a
sua inibio.
Macrfagos infectados apresentam o seu MHC da classe I inativado, o que impede o reconhecimento
inibitrio pela NK, ativando a ao citotxica da NK.
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Protenas
PROTENAS DO SISTEMA COMPLEMENTO
So proteases que se tornam ativas na
presena do microorganismo, e passam a atuar em
cascata e culminam com a lise do mesmo,
formando uma estrutura protica chamada de MAC
(complexo de ataque membrana). Em sntese, o
sistema complemento formado por um conjunto
de protenas ativadas em cascata, sendo suas
funes: lise celular, a opsonizao, o
desenvolvimento do processo inflamatrio e a
retirada de complexos imunes (complexos antgeno-
anticorpo) da circulao. As molculas desse
sistema, produzidas na sua grande maioria no
fgado, esto presentes no plasma sanguneo na
forma ativa ou em baixo nvel de ativao
espontnea.
A ativao das molculas do sistema
complemento pode ocorrer pela via cl ssi ca
(ativada pela associao de antgenos a molcula
de IgG ou IgM), via al ternati va (ativada
diretamente por alguns tipos de antgenos sem a
participao de molculas de imunoglobulinas) e
via da l ecti na.
Com a presena do anticorpo, a via
clssica, de maneira especfica, ativada (por
tanto, faz parte do sistema imune adaptativo). J a
via alternativa se inicia sem ser necessria a
presena do anticorpo (inespecfica). O modo de
como se inicia a ativao de cada via a nica
diferena entre elas.
Cabe a ns iniciarmos a cascata de ativaes do sistema complemento a partir da via alternativa, que
est enquadrada no sistema imune inato, que mais antiga, em termos evolucionrios, que a via clssica. Na
ativao do complemento pela via alternativa, h algumas molculas comuns via clssica, como C3, C4, C5,
C6, C7, C8 e C9.
A ativao da via alternativa ocorre porque, no sangue, h sempre uma concentrao de C3, protease
que na forma ntegra, fica inativa, sendo classificada como uma pr-enzima. Ao dar-se incio na via alternativa,
ocorre hidrlise da C3, quebrando-a em duas proteases: C3b e C3a. A primeira responsvel por se depositar
na membrana da bactria, com funo de opsonizao e fagocitose. A segunda, est envolvida no processo de
inflamao. Quando a C3b se dissocia da membrana do microorganismo, esta se liga e ativa a enzima C5
convertase, que cliva outra protease C5 em C5a (tambm relacionada com o processo inflamatrio) e C5b
(associa-se s molculas C6, C7, C8 e C9, formando um poro na membrana celular chamado de MAC,
levando-a lise, de forma similar ao que ocorre na ativao pela via clssica).
PROTENAS DE FASE AGUDA
So protenas que se ativam na presena
de microrganismo (principalmente de bactrias, que
possuem em sua parede estruturas que ativam as
mesmas), aumentando a sua concentrao na
corrente sangunea. So sintetizadas normalmente
pelo fgado, determinando uma concentrao basal
no sangue. Mas na presena do microrganismo, o
fgado intensifica a produo das mesmas.
Todas elas servem como opsoninas que
facilitam a fagocitose.
Protena C Reativa: se liga, principalmente,
fosforilcolina presente na membrana das
bactrias, facilitando a fagocitose das
mesmas.
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Lectina (protenas que se ligam a manose): realizam a mesma funo da PCR, mas se ligam a manose
da membrana bacteriana.
Fibrinognio
Protena amilide do soro
OBS: As estruturas com as quais as protenas de fase aguda se ligam so classificadas como PAMPs, uma
vez que so estruturas comuns nas bactrias patognicas.
CITOCINAS
IFN- : infeco viral
IFN- : infeco viral
TNF- : inflamao; atua no hipotlamo para
desencadear a febre.
IL-1: inflamao; atua no hipotlamo para
desencadear a febre.
IL-6: estimula o fgado a produzir mais citocinas
IL-12: +NK
IFN- : +macrfagos; estimula o fgado a produzir
mais citocinas; induz o macrfago lise; estimula a
medula ssea para produzir mais clulas.
IL-6: +Proteinas C Reativa, PMN
IL-10: controle
OBS: Corticoides inibem a secreo
de algumas citocinas, diminuindo a
sintomatologia do processo
inflamatrio.
Inflamao
um mecanismo de defesa da imunidade inata, em que h o recrutamento de clulas e sntese de
mediadores sempre no intuito de proteger o organismo contra a invaso.
Frente a uma agresso ao organismo, esta pode ser do tipo infecciosa (causada por elementos
biolgicos) e no-infecciosa, que danificam o tecido ntegro. esse dano que desencadeia um processo
inflamatrio como resposta de defesa do organismo, em que as clulas do sistema imune participam
ativamente para reparar o tecido danificado (cicatrizao).
A inflamao (do Latim inflammatio, atear fogo) ou processo inflamatrio uma resposta dos
organismos vivos homeotrmicos a uma agresso sofrida. Entende-se como agresso qualquer processo
capaz de causar leso celular ou tecidual. Esta resposta padro comum a vrios tipos de tecidos e mediada
por diversas substncias produzidas pelas clulas danificadas e clulas do sistema imunitrio que se
encontram eventualmente nas proximidades da leso.
Como sabemos, a inflamao pode tambm ser considerada como parte do sistema imunitrio, o
chamado sistema imune inato, assim denominado por sua capacidade para deflagar uma resposta inespecfica
contra padres de agresso previamente e geneticamente definidos pelo organismo agredido. Esta definio
se contrape da imunidade adquirida, ou aquela onde o sistema imune identifica agentes agressores
especficos segundo seu potencial antignico. Neste ltimo caso o organismo precisa entrar em contato com o
agressor, identific-lo como estranho e potencialmente nocivo e s ento produzir uma resposta.
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FISIOPATOLOGIA (MECANISMO DE INSTALAO)
agresso tecidual se seguem imediatamente fenmenos
vasculares mediados principalmente pela histamina. O resultado um
aumento localizado e imediato da irrigao sangnea, que se traduz em
um halo avermelhado em torno da leso (hiperemia ou rubor). Em seguida
tem incio a produo local de mediadores inflamatrios que promovem
um aumento da permeabilidade capilar e tambm quimiotaxia, processo
qumico pelo qual clulas polimorfonucleares, neutrfilos e macrfagos
so atrados para o foco da leso. Estas clulas, por sua vez, realizam a
fagocitose dos elementos que esto na origem da inflamao e produzem
mais mediadores qumicos, dentre os quais esto as citocinas (como, por
exemplo, o fator de necrose tumoral e as interleucinas), quimiocinas,
bradicinina, prostaglandinas e leucotrienos. Tambm as plaquetas e o
sistema de coagulao do sangue so ativados visando conter possveis
sangramentos. Fatores de adeso so expressos na superfcie das clulas
endoteliais que revestem os vasos sanguneos internamente. Estes
fatores iro mediar a adeso e a diapedese de moncitos circulantes e
outras clulas inflamatrias para o local da leso.
Em resumo, todos estes fatores atuam em conjunto, levando aos eventos celulares e vasculares da
inflamao. Resulta em um aumento do calibre de capilares responsveis pela irrigao sangunea local,
produzindo mais hiperemia e aumento da temperatura local (calor). O edema ou inchao ocorre a partir do
aumento da permeabilidade vascular aos componentes do sangue, o que leva ao extravassamento do lquido
intravascular para o espao intersticial extra-celular. A dor, outro sintoma caracterstico da inflamao,
causada primariamente pela estimulao das terminaes nervosas por algumas destas substncias liberadas
durante o processo inflamatrio, por hiperalgesia (aumento da sensibilidade dolorosa) promovida pelas
prostaglandinas, mas tambm em parte por compresso relacionada ao edema.
MANIFESTAES CLNICAS
Classicamente, a inflamao constituda pelos seguintes
sinais e sintomas:
1. Calor: aumento da temperatura no local devido a atuao
de citocinas no hipotlamo
2. Rubor (hiperemia): causado por uma alterao vascular
local, aumentando o fluxo sanguneo na regio para
atender a demanda de clulas.
3. Edema (inchao): desencadeado pelo aumento do
espaamento entre as clulas endoteliais dos vasos,
causando o extravasamento de clulas e lquido para o
espao intesticial, aumentando o volume extracelular no
local.
4. Dor: compresso de nervos pelo edema e pela liberao de alguns mediadores responsveis pela
sensao de dor (como a bradicinina)
5. Perda da funo
OBS: No processo inflamatrio, secretado o Fator
XII (de Hangeman), que estimula vrios sistemas e
cascatas relacionados com o processo inflamatrio:
cascata da coagul ao, si stema fi bri nol ti co e
si stema das ci ni nas.
Cascata da coagulao: ativado no intuito de
formar um cogulo no objetivo de estancar o
sangue e evitar uma consequente perda de
sangue no local. H tambm a liberao de
mediadores como peptdeios quimiotticos, que
atraem, quimicamente, polimorfonucleares.
Sistema fibrinoltico: degrada o cogulo para
que o sangue flua normalmente e para que haja
reparo tecidual, ativando, simultaneamente, o
sistema complemento.
Sistema das cininas: d origem as
bradicininas, que autam estimulando a sensao de dor.
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ETAPAS DA MIGRAO CELULAR
Fase de rol amento: primeiramente, o macrfago, dentro dos tecidos, fagocita o agente invasor e inicia
a secreo de mediadores (como o TNF- e IL-1) que, alm de aumentar a viscosidade do sangue no
local fazendo com que as celulas fluam mais lentamente, estimulam clulas epiteliais e clulas do
sistema imune a expressar molculas de adeso. At a clula do sistema imune encontrar o local
prprio de adeso e penetrao no tecido, ela realiza um rolamento sobre o endotelio. No endotlio,
sob o efeito do TNF-, induzida a expresso de E-sel ecti na (E=endotlio) e L-sel ecti na
(L=leuccito), permitindo que estas clulas passem pelo rolamento sobre o endotlio. Esse tipo de
associao, de fraca afinidade, propicia um tipo de adeso temporria entre o endotlio e a clula,
fazendo-a rolar sobre o mesmo.
Fase de adeso cel ul ar: molculas que propiciam forte adeso, como as i ntegri nas, entre o endotlio
e as clulas sanguineas so expressas. Alm dessas molculas, citocinas quimiotticas (quimiocinas)
so produzidas por macrfagos ativados e outras clulas e se associam ao endotlio vascular.
Fase de di apedese (transmi grao): as clulas aderidas ao endotlio por meio dessas interaes
fazem a diapedese ou a transmigrao para o tecido por interao homloga entre as molculas CD31
(expressas pelo neutrofilo) e a clula endotelial. Durante esse processo, h a secreo intensa de
qui mi oci nas, fazendo com que haja uma mudana na conformao do citoesqueleto do leuccito e
este penetre em direo aos tecidos, por meio das fenestraes dos vasos.
OBS: Inicialmente, em uma resposta inflamatria, os neutrfilos so os
primeiros a aumentar em concetrao no local, aumentando o pico em 6h
aps o incio da inflamao. Por isso que em uma inflamao crnica, no h
presena de neutrfilo (como na asma), pois os neutrfilos so clulas que
respondem apenas no incio. Aps algumas horas, porm, cai a concentrao
de neutrfilos para aumentar de concentrao outras clulas como
eosinfilos e moncitos.
OBS: Protenas relacionadas no processo de migrao celular:
Sel ecti na: carboidratos que se ligam entre si, presente tanto
nos leuccitos quando no endotlio. Porm, essa ligao se
d de maneira fraca, o que permite que o leuccito circule ao
longo da parede endotelial procura de interaes mais
firmes.
Integri nas: confere a adeso da segunda fase da migrao.
Esta presente nos moncitos, macrfagos, clulas
dendrticas e neutrfios, ligando-as ao epitlio, que
apresenta ICAMs (molcula de adeso intercelular).
Imunogl obul i nas: apresentam-se lateralemnte nas clula do
SI e no endotlio.
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Colaborao Imunidade Inata x Imunidade Adquirida
A resposta imune inata se comunica
com a resposta adquirida, de forma que um
componente de uma resposta auxilia os
componentes da outra.
O macrfago, por exemplo, quando
no consegue por si s destruir agentes
invasores, ele libera citocinas e
coestimuladores que solicitam o auxlio de
clulas da resposta imune adquirida.
A prpria ativao do sistema
complemento, quando h a presena de
microrganismo, h a ativao simultnea de
linfcitos B, que apresentam receptores que
reconhecem protenas do sistema
complemento, estabelecendo uma
integrao das duas respostas.
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
ANTGENO E ANTICORPOS
(Prof Karina Carla)
Antgeno
Antgenos (Ag) so substcias particuladas (clulas, bactrias, esporos de fungos e vrus, entre outras)
ou molculas solveis (protenas, glicoprotenas, lipoprotenas, polissacardios) que apresentam duas
caractersticas principais: i munogeni ci dade (capacidade de ativar linfcitos T e/ou B) e anti geni ci dade
(capacidade de reagir com os produtos especficos dessas celulas, no caso os anticorpos (Acs) produzidos por
linfcitos B ou receptores de LT).
CARACTERSTICAS DA IMUNOGENICIDADE
O elemento deve ser estranho;
Peso molecular acima de 10 mil daltons;
Ter configurao espacial que propicie a resposta imune;
Ter determinantes antignicos acessveis;
Ser administrados em doses adequadas;
Ter um bom estado nutricional;
Idade funcional do sistema imune
Pelas suas caractersitcas fisico-quimicas, as proteinas e alguns polissacardios complexos so as
principais molculas que apresentam essas duas propriedades (imunogenicidade e antigenicidade). Essa
definio utilizada porque h molculas que, apesar de terem antigenicidade, no so imunognicas; essas
molculas so denominadas de haptenos. Haptenos so portanto moleculas de baixo peso molecular que no
tem poder imunognico, apesar de ter antigenicidade. As caractersticas fsico-quimicas de lipdios,
carboidratos simples e cidos nuclicos propiciam que estas molculas atuem como haptenos.
OBS: Os haptenos (como a insulina, penicilina, anilina) podem at serem fagocitados por macrfagos e
apresentados aos linfcitos, mas por j serem pequenos e ainda degradados (ficarem menor ainda), no so
capazes de apresentar imunogenicidade. J quando um hapteno se liga a uma protena carreadora, ao ser
fagocitado, degradado e apresentado, pode sim, de maneira sucinta, desencadear uma resposta imune.
DETERMINANTE ANTIGNICO
Determinantes antignicos (eptopos) so seqncias especficas de aminocidos capazes de
desencadear uma resposta imune. Quando ocorre a degradao de microrganismos pela APC, esta apresenta
apenas essa seqncia especfica chamada de eptopo ao linfcito, que inicia, por sua vez, a resposta imune.
Um anticorpo no apenas reconhece a seqncia dos aminocidos (estrutura primria) como tambm
a sua conformao espacial (estruturas secundria e terciria). Cada estrutura pode formar diferentes
determinantes antignicos, as estruturas reconhecidas pelos anticorpos.
Tem protenas que, por exemplo,
precisam ser desnaturadas ou clivadas para
desvendarem seu determinante antignico,
uma vez que este estava inacessvel. Outro
caso importante so aquelas protenas que
apresentam um eptopo especfico e quando
elas so desnaturadas, perdem essa
afinidade com o anticorpo.
OBS: Determinantes neoantignicos so
aquelas protenas que apresentam
sequencias tpicas que poderiam
desencadear uma resposta imune, mas esto
inacessveis na molcula peptdica. Da, ao
entrar em ao uma protease, o peptdeo
clivado dando origem a um novo
determinante.
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REAO CRUZADA
O reconhecimento dos determinantes antignicos por anticorpos, apesar de especfico, no to
rigoroso, podendo ocorrer reaes de maior ou menor avidez com diferentes antgenos. Quando o anticorpo
reage com outros antgenos, alem daquele que induziu a resposta imune, ocorre o que chamamos de reao
cruzada. A reao cruzada, no entanto, s ocorre quando os determinantes antignicos so similares queles
que induziram produo do anticorpo.
Por exemplo, uma gripe pode ser causada por um vrus A e a partir dele, so produzidos anticorpos
contra ele. No entanto, ao entrar em contato com um vrus B, com determinantes antignicos similares aos dos
vrus A, propicia-se que os anticorpos contra o vrus A associem-se ao vrus B. Isso uma das explicaes de
que as gripes serem to comuns.
Outro exemplo de reao cruzada o que ocorre com transfuses sanguneas com grupos ABO.
Observe a tabela abaixo que mostra a relao dos antgenos de cada grupo sanguneo e anticorpos presentes
no seu plasma:
TIPO
SANGUNEO GENTIPO
ESTRUTURA
DO GLICOCLIX
AGLUTINOGNIO
(antgenos na
membrana das
hemcias)
AGLUTININA
(anticorpos no
plasma)
A I
A
I
A
ou I
A
i
R Glc Gal NacGal Gal - NacGal
|
Fuc
A Anti-B
B I
B
I
B
ou I
B
i
R Glc Gal NacGal Gal - Gal
|
Fuc
B Anti-A
AB I
A
I
B
R Glc Gal NacGal Gal - NacGal
|
Fuc
R Glc Gal NacGal Gal - Gal
|
Fuc
AB -
O ii
R Glc Gal NacGal Gal
|
Fuc
- Anti-A e Anti-B
As transfuses desejadas so aquelas que acontecem entre o prprio grupo sanguneo, ou at mesmo
do grupo O para os outros grupos sanguneos (como a doao feita de apenas por concentrados de hemcia,
ou seja, sem o contedo plasmtico, o que significa que os anticorpos do O no entram na transfuso), sendo
assim determinado de doador universal. J quando se doa sangue do grupo B para o grupo A, por exemplo,
ocorre reao cruzada, aglutinando o sangue. A questo : onde os grupos sanguneos obtiveram seus
anticorpos se nunca entraram em contato com sangue de um grupo diferente? A resposta baseada em
bactrias existentes no trato gastro-intestinal, que apresentam em sua membrana carboidratos semelhantes ao
da membrana das hemcias do sistema ABO, o que determina a primeira exposio das hemcias a esses
antgenos, que formaram o fentipo do sangue. essa similaridade dos carboidratos da microbiota do TGI que
caracterizam a reao cruzada dos anticorpos do sangue do receptor para com as hemcias do doador,
quando estes so de grupos sanguneos diferentes.
INTERAO ANTGENO x ANTICORPO
Todas as ligaes entre o antgeno e o
anticorpo so do tipo no-covalentes (pontes de
hidrognio, eletrosttica, fora de Van der Waals,
interaes hidrofbicas), ou seja, a interao
intermolecular antngenoXanticorpo se d por uma
atrao de forma fraca.
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Anticorpos
Anti corpos (Ac), ou i munogl obul i nas (Ig), so glicoprotenas sintetizadas e excretadas por clulas
plasmticas derivadas dos linfcitos B, os plasmcitos,
presentes no plasma, tecidos e secrees que atacam
protenas estranhas ao corpo, chamadas de antgenos,
realizando assim a defesa do organismo (imunidade
humoral). Depois que o sistema imunolgico entra em
contato com um antgeno (proveniente de bactrias,
fungos, etc.), so produzidos anticorpos especficos
contra ele.
Apresentam como caractersticas:
Maior variedade de estruturas antignicas;
Maior habilidade de discriminaao;
Maior fora de ligao com o antgeno
OBS: A descoberta da presena de imunoglobulinas no sangue se deu a partir da injeo de antgenos no soro
de camundongos fazendo, logo depois, eletroforese do mesmo. Observou-se que, alm do pico eminente de
albumina, picos na frao de protenas. Concluiu-se que -protenas (-globulinas) corriam no plasma
sanguneo e aumentavam de concentrao diante de respostas imunes.
A maioria das imunoglobulinas sricas apresenta migrao do tipo gama (na eletroforese) e por isso
so consideradas imunoglobulinas. O termo anticorpo utilizado quando estamos nos referindo a molculas da
famlia das Igs que tm capacidade de reagir especificamente com um determinado antgeno.
LOCALIZAO DAS IMUNOGLOBULINAS
As imunoglobulinas podem ser de dois tipos: membranar (presentes na membrana do LB) ou
secretoras (livres no plasma). As Ig membranares so o prprio BCR, complexo receptor presente na mebrana
do LB. Os anticorpos presentes no fluido sanguneo so aqueles sintetizados pelos plasmcitos (uma
verdadeira industria de anticorpos), que a diferenciao do LB.
Os anticorpos membranares se diferenciam dos secretores por possuir uma cauda bem maior em sua
estrutura, responsvel por fix-lo firmemente membrana do LB.
Quando ocorre a ligao antgenoXanticorpo, pode-se diferenciar duas fases:
Fase i ni ci al (reconheci mento): realizado pelos Ig membranares (que apresenta AA hidrofbicos).
Fase efetora: funo dos Ig secretores presentes no plasma (com AA hidroflicos).
MECANISMO DE AO (DE MORTE)
O anticorpo, ao reconhecer o antgeno, passado a fase incial, tem incio a fase efetora, passando,
ento, pelos seguintes passos:
Ativao do sistema complemento atravs da interao antgenoXanticorpo. Esse sistema
responsvel por lisar o microrganismo por meio do MAC.
Opsonizao: o anticorpo se liga ao antgeno para facilitar a fagocitose.
Neutralizao espacial: o anticorpo se liga ao antgeno, fazendo com que aquele, ao ser modificado
estruturalmente, perca sua funo patognica.
Citotoxicidade dependente de anticorpo (ADCC): liberao de citocinas (principalmente pelas clulas
NK) se houver interao anticorpoXantgeno.
ESTRUTURA DAS IMUNOGLOBULINAS
A estrutura das Igs s foi estudada na dcada de 1970, com o uso das enzimas proteolticas pepsina e
papana. Esses experimentos levaram concluso de que as Igs so formadas por quatro cadeias
polipeptdicas de diferentes pesos molculares.
Duas dessas cadeias possuem PM mais alto, sendo compostas de 450 AA e denominadas cadei as
pesadas (H). As outras duas cadeias, as leves (L), apresentam PM menor e 212 resduos de aminocidos.
Estas cadeias esto associadas entre si por pontes de dissulfeto (ligao forte, de natureza covalente) que
ocorrem quando existem duas cistenas prximas, formando um tipo de estrutura globular caracterstico das
Igs. Essa estrutura tem forma globular porque cada ligao dissulfeto intracadeia forma uma ala peptdica de
60 a 70 AA.
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As pontes dissulfeto
intracadeia dividem as regi es
vari vei s e constantes
pertencenteas s cadeias pesadas e
leves em domnios especficos a
cada tipo de Ig. No pice de das
cadeias leve e pesada (na regio N-
terminal), tem-se a regio varivel (V)
que determina a alta especificidade
de cada tipo de Ig. Em outras
palavras, as regies contantes
apresentam funo meramente
estrutural, enquanto as regies
variveis so as responsveis pelas
caractersticas especficas de cada
Ig, sendo seus genes produtores
muito mais aleatrios que as outras
regies.
Nos ensaios utilizando a papana ocorre clivagem da molcula de Ig em regies acima da ponte de
dissulfeto que associa as duas cadeias pesadas originando trs fragmentos: dois que se unem ao antgeno e
so denominados de fragmentos Fab (esto sempre associados) e um que se cristaliza quando quebram, o
Fc. So as Fab que entram em contato com os antgenos (e em sua extremidade varivel est a associao
especfica do antgeno com os anticorpos) e a Fc, completamente composta de regio constante,
responsvel pela fixao da Ig.
OBS: Em relao regio varivel das Igs, h sequencias de
aminocidos hipervariveis complementares sequencia de
aminocidos dos determinantes atignicos presentes nos
antigenos. As regi es hi pervari vei s da cadeia pesada esto
presentes entre resduos de 30-35, 50-62 e 94-102 aminocidos,
formando o que se chama de CDR1 (complementarity determining
regions 1 = regio determinante de complementariedade), CDR2
e CDR3, respectivamente. Os domni os das i munogl obul i nas
so duas camadas -laminadas pregueadas distribudas em 3 a 5
camadas de cadeias polipeptdicas antiparalelas. Essas regies
conferem ao anticorpo:
Superfcie especfica de ligao com o antgeno;
Mltiplos contatos com o antgeno;
Superfcie complementar a estrutura tridimensional do antgeno
TIPOS DE IMUNOGLOBULINAS (ISOTIPOS)
Os anticorpos podem existir em
diferentes formas conhecidas como isotipos ou
classes. Nos mamferos existem cinco isotipos
diferentes de anticorpos, conhecidos como IgA,
IgD, IgE,IgG e IgM. Eles possuem o prefixo "Ig"
que significa imunoglobulina, um outro nome
utilizado para anticorpo. Os diferentes tipos se
diferenciam pela suas propriedades biolgicas,
localizaes funcionais e habilidade para lidar
com diferentes antgenos, como mostrado na
tabela ao lado.
O fragmento Fab (mais especificamente,
a sua regio varivel) das Igs confere a essas
molculas o reconhecimento especfico dos
determinantes antignicos enquanto o fragmento
Fc, que distingue as classes de Igs, confere
funes efetoras distintas, de acordo com a
capacidade dessas regies em se associar a
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diferentes receptores ou outras molculas do sistema imune.
IgA (IgA1, IgA2): imunoglobulina dimrica (mais comum, podendo ser monomrica e trimrica)
encontrado em grandes concentraes nas mucosas e em secrees externas (saliva, colostro,
lgrimas, secrees urogenitais). Sua meia vida em torno de 6 dias. Tem como funo a imunidade
das mucosas; ativa o sistema complemento pela via alternativa.
IgD: encontrada apenas na BCR, no estando presente nos lquidos sanguneos. Responsvel
apenas por servir como receptor de antgenos das clulas B. Tem meia vida de 3 dias.
IgE: imunoglobulina presente nos liquidos internos do corpo em concentraes inferiores a 1%. Tem
meia vida de 2 dias. Esta relacionado com as reaes de hipersensibilidade; combate a helmintos;
estimula a secreo de histamina pelos basfilos e moncitos.
IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4): imunoglobulina monomrica (uma nica unidade bsica) presente nos
liquidos internos do corpo, correspondendo a 70-75% do total das Igs sricas. Sua meia vida longa:
23 dias. As molculas das subclasses da IgGs apresentam capacidade de interagir com antgenos de
diversos tipos de estruturas quimicas e ativam diferentes mecanismos de eliminao antignica. Tem
como funes: opsonizao, ativao do complemento, citotoxicidade celular dependente de anticorpo,
imunidade neonatal, inibio por feedback das clulas B (tem capacidade de atravessas a barreira
placentria).
IgM: imunoglobulina pentamrica (cinco unidades bsicas) presente nos liquidos internos do corpo e
nas secrees externas. Suas cadeias (como em todos os Ig polimricos) so ligados pela cadeia J.
Tem media vida de 5 dias. Tem como funes: receptor de antgenos das clulas B inativas, ativao
do complemento pela via clssica.
OBS: A IgG faz parte de respostas secundrias (respostas de memria muito mais rpida e eficiente), j a IgM
est relacionada a respostas primrias (fase aguda). Caso a criana tenha IgG sem nunca ter contato com uma
infeco, por exemplo, a explicao o fato da IgG da me ter atravessado a barreira placentria e imunizado
a criana. Mas se for identificado IgM na criana, significa que a mesma est desenvolvento imunidade para
uma doena que est se iniciando ainda.
OBS: O que classifica a imunoglobulina ser IgA, IgD, IgE, IgG ou IgM o gene que codificou a cadeia Fc de
cada uma: , , , , . Com isso, a Fc das Ig no s tem carater estrutural, mas classificatrio.
SNTESE E EXPRESSO DA
IMUNOGLOBULINA
A clula tronco (precursora
linfide) na medula ssea d origem a
uma clula pr-B, que aps completa a
sntese de suas Ig, dar origem a clula B
madura. Essa, ao se diferenciar em
plasmcito, secreta os Igs.
Sntese: Ribossomos do R.E.R.
Montagem: Chaperonas
(Calnexinas)
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Expresso: Via Complexo de Golgi
CARACTERISTICAS DAS IMUNOGLOBULINAS
Especi fi ci dade: Capacidade de distinguir pequenas
diferenas na estrutura qumica do antgeno.
Afi ni dade/ Avi dez: Capacidade de se ligar ao
antgeno.
Di versi dade: grande nmero de imunoglobulinas que
se ligam a diferentes antgenos, dando origem ao
repertrio de anticorpos.
Repertri o de Anti corpos: Coleo de anticorpos
com especificidade diferente (recombinao gentica
aleatria).
ANTICORPOS MONOCLONAIS
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
IMUNIDADE ADQUIRIDA RESPOSTA IMUNE HUMORAL
(Prof Karina Carla)
A resposta imune didaticamente dividida em
resposta imune inata (resposta mais ampla e abrangente,
sendo, portanto, inespecfica) e resposta imune
adquirida. Esta, por sua vez, mediada por anticorpos
secretados e sua funo fisiolgica a defesa contra
microrganismos extracelulares e toxinas microbianas,
sendo por tanto, solicitada previamente para agir de
maneira mais especfica.
A resposta imune adquirida dividida ainda em
dois subtipos de resposta: resposta imune adquirida
humoral (o contedo da resposta os anticorpos
localizam-se livres no plasma) e celular. Este captulo
trata-se de enfatizar o primeiro subtipo.
A resposta imune adquirida (adaptativa), como j foi visto, mediada pelos linfcitos T e linfcitos B,
sendo este responsvel pela produo de anticorpos e aquele, aps ser apresentado ao antgeno por uma
APC, se prolifera e desempenha a sua funo (produo de citocinas). As funes efetoras dos anticorpos so
as de neutralizao e eliminao dos microrganismos infecciosos e das toxinas microbianas.
Esta resposta imune adquirida apresenta algumas
particularidades que a difere da resposta imune inata:
especificidade (devido presena de receptores
especficos dos linfcitos como o TCR e o BCR),
diversidade (presena de inmeros tipos de anticorpos),
tolerncia (capacidade da resposta imune de no responder
contra protenas do prprio), autolimitao (todas as
respostas imunes desaparecem com o decorrer do tempo
aps cada estimulao antignica), especializao e
memria (presena de clulas que foram expostas ao
peptdeo antignico, mas no respondem a ele, deixando a
fase madura para serem classificadas como clulas de
memria).
importante lembrar tambm que a resposta imune adquirida divida em fases: fase de
reconhecimento, fase de ativao (proliferao dos linfcitos), fase efetora (diferenciao dos linfcitos B e
produo de anticorpos pelos mesmos; auxlio dos linfcitos T com a produo de citocinas) e o fim da
resposta (declnio ou homeostase), na qual resta apenas clulas de memria.
Na fase efetora da imunidade adquirida divide-se, como j vimos, as repostas imune humoral e celular.
A imunidade humoral acontece, por tanto, quando o microrganismo apresenta uma natureza de ao
extracelular (microrganismos extracelulares), sendo esta resposta mediada pelos linfcitos B. J a resposta
imune celular, a qual apresenta uma participao muito intensa dos linfcitos T com a secreo de citocinas,
est relacionada com a defesa do corpo contra microrganismos intracelulares (vrus e bactrias).
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A funo, por tanto, da resposta i mune
humoral a mesma funo desempenhada pelos
anticorpos: neutralizao do antgenos (ligao ntima
do anticorpo com o antgeno fazendo com que este
perca sua constituio espacial elementar, eliminando
a sua antiga afinidade por um receptor alvo),
opsonizao (facilitao da fagocitose), citotoxicidade
dependente de anticorpo e ativao do sistema
complemento (responsvel por realizar a lise de
microrganismos, fagocitose de microrganismos
opsonizados com fragmentos do complemento e
inflamao), sendo este ativado mediante o anticorpo
ou no.
Neutralizao dos Microrganismos e das Toxinas Microbianas
Os anticorpos contra microrganismo e toxinas microbianas bloqueiam a ligao destes aos receptores
celulares, impedindo a ao patognica dos mesmos. Dessa forma, os anticorpos inibem ou neutralizam a
infecciosidade dos microrganismos, bem como os efeitos lesivos potenciais da infeco.
Os anticorpos se ligam a estruturas
especficas microbianas e interferem com a
sua capacidade de interagir com os receptores
celulares: desse ponto de vista, as anticorpos
agem como obstcul o estri co. Em alguns
casos, poucas molculas do anticorpo podem
se ligar a um microrganismo e induzir
alteraes de conformao nas molculas de
superfcie que impedem o microrganismo de
interagir com os receptores celulares; essas
interaes so exemplos de efei tos
al stri cos.
Opsonizao e Fagocitose Mediada por Anticorpo
por meio da ligao do
microrganismo ao anticorpo que os
receptores Fc dos fagcitos so
capazes de reconhec-los e destru-
los.
Os anticorpos do isotipo IgG
revestem (osponizam), por exemplo,
os microrganismos e promovem a
sua fagocitose pela ligao aos
receptores Fc nos fagcitos. Os
microrganismos podem tambm ser
opsonizados por um produto da
ativao do sistema complemento
chamado C3b e so fagocitados pela ligao a um receptor leucocitrio para o C3b.
Os receptores Fc dos leuccitos promovem a fagocitose das partculas opsonizadas e liberam sinais
que estimulam as atividades microbicidas dos leuccitos. Dentre esses receptores Fc, os que so mais
importantes para a fagocitose das partculas opsonizadas so os receptores para as cadeias pesadas dos
anticorpos IgG, designados receptores Fc. O principal receptor Fc de fagcito de alta afinidade chamado
FcRI (CD64). A fagocitose das partculas revestidas de IgG mediada pela ligao das pores Fc dos
anticorpos opsonizantes aos receptores Fc nos fagcitos. J os microrganismos opsonizados com IgE, so
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facilmente fagocitados pelo FcRI, presente nos mastcitos, basfilos e eosinfilos, com a funo principal de
ativao celular (degranulao). Em resumo, temos:
FcRI (reconhece microrganismo opsonizado por IgE): presente nos eosinofilos, mastcitos, basfilos.
Tem a funo de ativao celular (degranulao).
FcRI (reconhece microrganismo opsonizado por IgG): presente nos neutrfilos e macrfagos. Tem a
funo de estabelecer a fagocitose e ativao de fagcitos.
CITOTOXICIDADE CELULAR DEPENDENTE DE ANTICORPOS ADCC
O receptor Fc das clulas NK,
chamado FcRIII (CD16), liga-se aos
anticorpos IgG ligados s clulas, e o
resultado a lise das clulas revestidas do
anticorpo. Esse processo desiginado
citotoxicidade celular dependente de
anticorpo (ADCC).
O fato da FcRIII ser um receptor de
baixa afinidade que se liga a molculas de
IgG, a ADCC s ocorre quando a clula-alvo
est revestida de anticorpo, e a IgG livre do
plasma no ativa as clulas NK, nem
compete efetivamente com a IgG ligada
clula pela ligao com o FcRIII. A
incorporao do FcRIII por clulas alvo
revestidas de anticorpos, ativa as clulas
NK para sintetizarem e secretarem citocinas, tais como o IFN-, bem como descarregarem o contedo dos
seus grnulos, que so mediadores da funo citotxica desse tipo de clulas. Essa funo citotxica destri
as clulas previamente infectadas (por vrus ou tumorais) por apoptose.
Os eosinfilos medeiam um tipo especial de ADCC dirigido contra alguns parasitas helmnticos. Os
helmintos so muito grandes para serem engolfados pelos fagcitos, e seu tegumento relativamente
resistente aos produtos microbicidas dos neutrfilos e dos macrfagos, mas eles podem ser mortos por uma
protena bsica principal presente nos grnulos dos eosinfilos. A IgE reveste os helmintos, e os eosinfilos
podem ento se ligar IgE pelo seu FcRI. Os eosinfilos so ativados por sinais emitidos pelo FcRI e liberam
o contedo de seus grnulos, o que resulta na mortes dos helmintos.
Sistema Complemento
O sistema complemento um dos principais efetores da imunidade humoral e tambm um importante
mecanismo efetor da imunidade inata. Consiste em um grupo de protenas plasmticas que quando ativadas
atuam como enzimas (proteases) de uma maneira altamente regulada. Estas protenas interagem entre si e
com outras clulas do sistema imune de modo balanceado.
O sistema complemento, em resumo, responsvel pelas seguintes funes: opsonizao e
fagocitose; lise do microorganismo; participao na inflamao.
Vrias caractersticas da ativao do complemento so essenciais para sua funo normal:
A ativao do complemento envolve a protelise seqencial de protenas para gerar enzimas com
atividade proteoltica.
Os produtos de ativao do complemento inserem-se covalentemente s superfcies celulares dos
microrganismos e a outros antgenos.
A ativao do complemento inibida pelas protenas regulatrias que esto presentes nas clulas
normais do hospedeiro e ausentes nos microrganismos.
As duas principais vias de ativao do complemento so via clssica (necessita da presena do
antgeno e do anticorpo), que ativada por certos istipos de anticorpos ligados a antgenos, e a via
alternativa (necessita apenas da presena do antgeno), que ativada nas superfcies das clulas dos
microrganismos na ausncia de anticorpo. Outra via menos conhecida a via da lectina, ativada quando a
lectina presente no plasma se liga manose da membrana do microrganismo. As vias alternativas (e a da
lectina) so mecanismos efetores da imunidade inata, enquanto que a via clssica um mecanismo da
imunidade humoral.
O evento central na ativao do complemento a protelise da protena C3 para gerar produtos
biologicamente ativos e a subseqente insero covalente de um produto da C3, chamado C3b, s superfcies
das clulas microbianas ou de um anticorpo ligado a um antgeno. Os passos iniciais da ativao, que diferem
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entre as vias, geram uma enzima chamada C3 convertase,
que cliva a C3 e d origem a dois produtos proteolticos,
C3a (a=fragmento menor) e C3b (b=fragmento maior). A
reunio das protenas do complemento na C3b resulta na
formao de outra enzima chamada C5 convertase, que
cliva C5 e inicia os passos tardios da ativao do
complemento. As vias clssica e alternativa diferem no
modo pelo qual a C3b produzida, isto , nos primeiros
passos, porm compartilham os mesmo passos tardios. Os
componentes terminais do sistema complemento, cuja
ativao dependente da C3b, geram um complexo
protico lipossolvel macromolecular, designado complexo
de ataque membrana (MAC), que causa lise osmtica das
clulas. Os peptdeos produzidos pela protelise de C3 (e
de outras protenas do complemento) estimulam a
inflamao.
VIA ALTERNATIVA
A via alternativa de ativao do complemento resulta na
protelise de C3 e na insero estvel do seu produto de
degradao C3b s superfcies microbianas, sem um papel para o
anticorpo. Normalmente, a C3 no plasma esta inativa quando
apresenta um grupo tioster oculto em sua estrutura. Na presena
do microrganismo, o C3 clivado em dois fragmentos: C3a (com
menor peso molecular) e C3b (com um maior peso molecular), de
modo que este apresentar a exposio do grupo tioster, o qual
instvel. O C3b, por tanto, torna-se ativo quando esse grupo tioster
se liga hidroxilas ou grupos amino expostas na membrana de
microrganismos (pois essas molculas no esto disponveis nas
membranas das clulas do hospedeiro) para formar pontes de
amido ou de ster. Caso essas pontes no se formarem, o C3b
persiste na fase fluida, seu tioster rapidamente hidrolisado,
tornando-se inativo e detm a ativao do complemento. O C3a
parte para o fluido plasmtico para participar do processo
inflamatrio, funcionando como a primeira anfilo toxina.
O C3b ligado une-se a uma protena plasmtica chamada
Fator B e, depois que est ligado, o fator B clivado por uma
protease de serina do plasma, o fator D, para gerar um fragmento,
o Bb, que permanece inserido ao C3b (e libera um pequeno
fragmento chamado Ba). O complexo formado C3bBb a
convertase C3 da via al ternati va, responsvel por clivar mais
molculas C3, desse modo determinando uma ampliao da
seqncia. Assim, a convertase C3 da via alternativa aumenta a
ativao do complemento quando inciada pela via alternativa ou
pela via clssica. Ocorre ativao estvel da via alternativa apenas
nas superfcies celulares microbianas e no nas do hospedeiro.
Algumas das molculas C3b geradas pela convertase C3
da via alternativa ligam-se prpria convertase. Isto resulta na
formao de um complexo C3bBb3b, que atua como a convertase
C5 da via alternativa, que cliva a C5 e iniciar os passos tardios do
complemento.
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VIA CLSSICA
A via clssica inciada pela ligao da protena C1 do complemento
aos domnios constantes C
H
2 das molculas IgG ou dos domnios C
H
3 das
molculas IgM que fixaram antgenos.
C1 um grande complexo protico multimrico, que consiste de seis
subunidades idnticas arranjadas formando um ncleo central com braos
radiais projetados simetricamente, sendo composto das subunidades C1q,
C1r e C1s: C1q liga-se ao anticorpo, e C1r e C1s so as proteases. Esse
hexmero executa a funo de reconhecimento da molcula
e liga-se especificamente com as regies Fc das cadeias
pesadas e com algumas da . Cada regio Fc da
imunoglobulina tem um nico stio de ligao de C1q, e cada
molcula C1q deve ligar-se a duas cadeias pesadas
adjacentes de Ig para ativar a C1r e C1s, ativando, assim, a
parte funcional da molcula.
C1r e C1s so esterases da serina que funcionam
como um tetrmero contendo duas molculas de cada. A
ligao de duas ou mais cabeas globulosas da C1q s
regies Fc da IgG ou da IgM induz ativao enzimtica da
C1r associada, que cliva e ativa a C1s. Esta ativada cliva a
prxima protena da cascata, a C4, para formar C4b e C4a
(este liberado e tem atividades biolgicas que sero
descritas mais adiante). A C4 homloga de C3, e C4b
tambm tem uma ponte tioster interna, assim como na C3b,
que forma ligaes covalentes com amidas ou steres com o
complexo antgeno-anticorpo ou com a superfcie adjacente
de uma clula qual est ligado o anticorpo. Essa ligao de
C4b assegura que a via clssica de ativao processa-se em
uma superfcie celular ou em um complexo imune.
A prxima protena do complemento, C2, forma ento
um complexo com C4b ligada superfcie celular e clivada
por uma molcula C1s da vizinhana, para gerar um
fragmento C2b solvel de importncia desconhecida, e um
fragmento maior, C2a, que permanece fisicamente associado
C4b na superfcie da clula (note que, por motivos
histricos, na C2, o fragmento menor chamado de C2b e o
maior de C2a uma exceo a regra). O complexo resultante
C4b2a a convertase C3 da via cl ssi ca e tem a
capacidade de se ligar e de clivar proteoliticamente a C3.
A clivagem de C3 resulta na remoo de um pequeno fragmento C3a, que sai de C3b; a C3b ento
hidrolisada ou forma pontes covalentes com as superfcies celulares ou com o anticorpo na qual foi iniciada a
ao do complemento. Uma vez depositada a C3b, poder ligar-se ao Fator B e gerar mais convertase C3 pela
via alternativa. O efeito final desses mltiplos passos enzimticos e de amplificao que uma nica molcula
de convertase C3 poder induzir a deposio de centenas ou milhares de molculas de C3b na superfcie
celular onde o complemento ativado. Os passos-chaves iniciais da via alternativa e da clssica so anlogos:
C3 da via alternativa homloga C4 da via clssica, e o fator B homlogo a C2.
Algumas das molculas C3b geradas pela convertase C3 da via clssica ligam-se convertase (como
na via alternativa) e formam um complexo C4b2a3b. Esse complexo funciona como a convertase C5 da via
clssica, que cliva C5 e inicia os passos tardios da ativao do complemento.
OBS: A via da l ecti na de ativao do complemento desencadeada na ausncia de anticorpo pela ligao
dos polissacardeos microbianos s lectinas circulantes, tais como a MBL plasmtica. A MBL liga-se aos
resduos de manose dos polissacardeos e, como estruturalmente semelhante ao C1q, desencadeia o
sistema complemento pela ativao do complexo enzimtico C1r-C1s (tal como o C1q) ou pela associao com
a serina esterase associada protena de ligao de manose, que cliva C4. Fora o fato de ser ativada na
ausncia de anticorpo, o restante dessa via o mesmo que o da via clssica.
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PASSOS TARDIOS DA ATIVAO DO COMPLEMENTO
As convertases C5 geradas pela
via alternativa ou pela clssica iniciam a
ativao dos componentes tardios do
sistema complemento, que culmina na
formao da MAC ci torci da. As
convertases C5 clivam a C5 em um
pequeno fragmento C5a (exerce potentes
efeitos biolgicos em vrias clulas), que
liberado, e um fragmento C5b de duas
cadeias que permanece ligado superfcie
celular. O C5b, gradativamente, atrai outras
protenas do complemento: C6, C7, C8 e
C9, de modo que C5b se une a C6
(formando o complexo inicial C5b,6), para
se ligar, em seguida, a C7 e a C8, em que
estas duas ltimas se inserem na bicamada lipdica da membrana. Forma-se o complexo C5b,6,7,8 (C5b-8)
estavelmente inserido na membrana, com capacidade ainda limitada para lisar clulas.
A formao de uma MAC (complexo de ataque a membrana) completamente ativa obtida pela ligao
de C9, componente final da cascata do complemento, ao complexo C5b-8. Esta protena C9 uma protena
srica que se polimeriza no local da C5b-8 formando poros nas membranas plasmticas que permitem a
entrada de gua (resultando na tumefao osmtica) e ons (causando apoptose) no microrganismo.
FUNO DO SISTEMA COMPLEMENTO
Aps ativado, o sistema complemento exerce funes complexas como:
Opsonizao e fagocitose do microrganismo
Estimulao das reaes inflamatrias: as
anfilotoxinas liberadas nas reaes durante a
ativao do complemento vo se ligar a clulas
polimorfonucleares participando do processo
inflamatrio ativando estas clulas (as quais
passam a exercer a degranulao).
Citlise mediada pelo complemento: formao
do MAC e apoptose direta do microrganismo.
REGULAO DA ATIVAO DO COMPLEMENTO
A ativao da cascata do complemento e a estabilidade dos produtos ativos do complemento so
rigidamente regulados para evitar a ativao do complemento nas clulas normais do hospedeiro e limitar a
durao da ativao do complemento mesmo nas clulas microbianas e nos complexos antgeno-anticorpo.
A regulao do complemento mediada por diversas protenas circulantes e de membrana celular
pertencentes a uma famlia chamada reguladores da atividade do complemento (RCA) e so codificadas por
genes homlogos adjacentes. Paciente com inibio desses inibidores podem desenvolver certas patologias.
A atividade proteoltica de C1r e C1s inibida por uma protena plasmtica chamada i ni bi dor C1 (C1
INH).
A reunio dos componentes das convertases C3 e C5 inibida pela ligao das protenas reguladoras
a C3 e C4 depositadas nas superfcies celulares.
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
A C3b (e a C4b) associadas clula so proteoliticamente degradadas por uma serina protease do
plasma chamada Fator I, que ativa somente na presena de protenas reguladoras (MCP e CR1, que
atuam como co-fatores para a clivagem proteoltica de C3b), produzindo iC3b e C3f.
As protenas DAF (protena de membrana expressa nas clulas endoteliais e eritrcitos), MCP, CR1
so inibidores da C4b2a (C3 convertase da via clssica), pois deslocam C2a de C4b.
DAF e CR1 inibem a C3bBb (convertase C3 da via alternativa), pois deslocam Bb de C3b.
A formao da MAC inibida por uma protena de membrana chamada CD59, inibindo a adeso de
molculas C9 na membrana.
A protena S inibe a insero de C5b-C7 na membrana, influenciando diretamente na insero futura
do complexo C9.
Deficincia de C1INH gera edema angi oneurti co heredi tri o, que consiste no acmulo intermitente de
edema fluido na pele e nas mucosas, causando dor abdominal, vmitos, diarria e obstruo das vias reas,
potencialmente ameaadora para vida.
Deficincia na enzima que liga tais inibidores (DAF, MCP e CR1) causa Hemogl obi nri a Paroxsti ca
Noturna, caracterizada por crises recidivantes de hemlise intravascular, atribuvel, pelo menos
parcialmente, a uma ativao desregulada do complemento na superfcie dos eritrcitos. A hemlise
intravascular recorrente, por sua vez, induz anemia hemoltica e trombose venosa crnicas.
OBS: Com base nesses estudos, admitida uma hierarquia de importncia para a inibio da ativao do
complemento como sendo CD59 > DAF > MCP, e essa hierarquia pode refletir a relativa abundncia dessas
protenas nas superfcies celulares.
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
IMUNIDADE ADQUIRIDA RESPOSTA CELULAR
(Prof Karina Carla)
A imunidade mediada por clulas (IMC) a funo efetora dos linfcitos T e atua como um mecanismo
de defesa contra os microrganismos que sobrevivem dentro dos macrfagos ou que infectam clulas no-
fagocticas. Assim como a resposta humoral, a resposta celular um tipo de imunidade especfica (imunidade
adquirida ou adaptativa). Porm, esses dois tipos de respostas apresentam diferenas peculiares:
IMUNIDADE HUMORAL IMUNIDADE CELULAR
A fase efetora se caracteriza pela
neutralizao dos antgenos
extracelulares por meio do complexo
Ag-Ig;
H uma transferncia de anticorpos no
intuito de realizar a neutralizao ou a
opsonizao.
A fase efetora se caracteriza pela destruio de
antgenos intracelulares (como vrus e bactrias com
ciclo intracelular) por meio do complexo APC
MHC

LT
TCR.
H uma transferncia de clulas T para desencadear
a resposta celular.
A resposta imune adquirida contra microrganismos residindo dentro dos fagossomas dos fagcitos
mediada pelos linfcitos T, que reconhecem os antgenos microbianos e produzem citocinas que ativam os
fagcitos e estimulam a inflamao. As clulas T responsveis pela ativao
dos macrfagos so as clulas T CD4+ auxiliares (LT
a
) diferenciados, bem
como os linfcitos T CD8+, cuja caracterstica compartilhada seria a
capacidade de secretar a citocina interferon-gama (IFN-) que ativadora de
macrfagos.
O linfcito T auxiliar a principal clula da resposta imune celular.
Ele apresenta como principais protenas de membrana: TCR (receptor de
linfcito T), CD4+ (marcador fenotpico exclusivo de linfcito T auxiliar), CD3+
(marcador de linfcito T em geral) e molculas co-estimuladoras (CD28 e
CD40Ligante).
O TCR o receptor de linfcito T que caracteriza a resposta imune adquirida, uma vez que ele
apresenta ampla especificidade, encaixando-se perfeitamente com o eptopo apresentado pelo MHC da clula
apresentadora de antgeno (APC). A apresentao bsica TCR-PEPTDEO-MHC o sinal 1, que ocorre
depois que a APC fagocita o antgeno. Porm, apenas estes participantes no so capazes de desencadear a
resposta imune. Para isso, entra em ao dos co-estimuladores: o CD40L (L=ligante) se liga ao CD40 da APC
e o CD28 ao B7.
Aps a fagocitose, o macrfago (representando a APC) pode apresentar o eptopo oriundo do antgeno
para os dois tipos de linfcitos T: tanto para o linfcito T CD4+ quanto para o linfcito T CD8+. Ambas se
proliferam, produzem citocinas e desempenham as suas funes. A imunidade adquirida celular entra em cena
quando este macrfago, oriundo de respostas inatas no-especficas, no consegue destruir por si s o
antgeno. Ser necessrio ento a interveno citotxica celular dos linfcitos, por meio da apresentao
antignica. O linfcito T auxiliar, ao ser ativado, produz citocinas como o IFN-, responsvel por fazer do
macrfago que apresentou o eptopo capaz de destruir este antgeno por si s. Por tanto, o linfcito T auxiliar
no o responsvel direto por dar fim ao antgeno (funo esta desempenhada pela prpria APC), mas a
clula que realiza esta funo s ser capaz de sofrer influncia deste leuccito. Se o macrfago apresentar o
eptopo ao linfcito T citotxico (o que normalmente acontece com infeces virais ou clulas tumorais), este se
responsabilizar por secretar citocinas que lisam a APC (apoptose) para gerar a morte do antgeno e eliminar
os reservatrios de infeco.
Desenvolvimento dos LT Efetores
O processo de desenvolvimento das clulas T pode ser dividida em quatro fases:
Fase de reconhecimento: fase na qual as clulas T virgens reconhecem os antgenos (apresentao
antignica) nos linfonodos perifricos e so preparadas, ou estimuladas, para proliferarem e se
diferenciarem em efetoras.
Fase de ativao: eventos bioqumicos fazem com que a clula se prepare para os prximos estgios.
Fase de expanso clonal: fase de proliferao de clulas T para que haja um nmero suficiente de
clulas capazes de desencadear a resposta celular.
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Di ferenci ao cel ul ar de LT CD4 e LT CD8 em subpopul aes: o linfcito T CD4+ auxiliar (Th0)
pode se diferenciar em duas subpopulaes de linhagens: Th1 e Th2. Essa diferenciao depende do
microambiente gerado pelas citocinas previamente liberadas pela APC.
Fase efetora: ativao dos macrfagos para destruir o antgeno por meio de radicais livres (quando a
APC estimulada pelo LT CD4+); ou apoptose dos macrfagos (quando a APC estimulada pelo LT
CD8+).
Fases da Imunidade Celular
A induo da imunidade mediada por clulas consiste no reconhecimento do antgeno pela clula T
nos rgos linfides perifricos e na sua diferenciao em linfcitos efetores. O MHC de classe I apresenta o
antgeno ao LT citotxico, enquanto que o MHC de classe II apresenta o antgeno ao LT auxiliar.
Aps a apresentao, h ativao dos linfcitos e a expanso clonal dos mesmos, saindo, logo depois,
dos rgos linfides em direo aos tecidos, onde ocorre, de fato, o mecanismo de morte do antgeno: ou a
clula infectada vai ser eliminada (por apoptose) ou vai ser ativada para destruir antgenos sem sua auto-
destruio.
FASE DE RECONHECIMENTO
Nessa fase, ocorre os dois sinais: o si nal 1 (TCR-PEPTDEO-MHC) e o si nal 2 (presena dos co-
estimuladores: CD28 e CD40L). Lembrando que o LTa apresentado para MHC de classe II e o LTc
apresentando para o MHC de classe I.
FASE DE EXPANSO CLONAL
Fase de proliferao dos linfcitos em resposta a secreo de IL-2 (citocina ativadora de linfcito) pelo
prprio linfcito.
DIFERENCIAO CELULAR EM SUBPOPULAES E FASE EFETORA
O LT CD4+ pode dar origem a duas subpopulaes: Th1 e Th2, que se
diferenciam entre si pelos perfis de citocinas a serem secretadas por eles: os
LT Th1 secretam IFN-; os LT Th2 secretam IL-4 e IL-5. A preferncia pela
diferenciao de algum subtipo se d a partir da natureza do antgeno.
Essa diferenciao dos LT auxiliares responde pelo termo de
pol ari zao, isto porque quando o LT se diferencia para um determinado
subgrupo pr-citado, este tem a funo de inibir o outro, de modo que o LT, em
suma, opte apenas pela preferncia de um subgrupo, para cada resposta
celular. Isso faz com que, a cada resposta, haja sempre um dos subgrupos em
nmero bem maior que o outro. Esses subgrupos se diferenciam por tanto:
Perfil de citocinas
Mecanismo efetor
Propri edades da resposta Th1: se manifesta com microrganismos
intracelulares: bactrias intracelulares (Lysteria); parasitas
Intracelulares (Leishmania); micobactrias; vrus. A APC apresenta
estes antgenos a um linfcito LT Th0, o qual vai se diferenciar em LT
Th1. As citocinas liberadas por esta resposta so potentes ativadores
de macrfagos, o qual se encarrega de destruir o antgeno.
Citocinas clssicas: IFN- e IL-12. Quando as clulas
dendrticas (ou macrfagos) durante a interao com o LT
secretam IL-12, essa citocina ativa clulas NK presentes no local,
que passam a secretar IFN-. Esta citocina secretada aumentar a
sntese de IL-12 e atuar sobre as clulas T que esto interagindo
com a clula apresentadora de antgeno e que ainda no tem um
padro de diferenciao (LTh0). A ativao do Th0 pelo IFN-
induz a produo de mais IFN- e IL-12 nessas clulas, citocinas
que definem o padro de LTh1.
Fatores de transcrio (responsvel por transcrever mais
citocinas): STAT-4 e T-bet (este secretado pela estimulao
daquele).
Istopo: IgG2.
O LTh0 naive (linfcito T virgem), ao ser apresentado ao antgeno
intracelular pela APC, sofre interao com a citocina IL-2. Alguns
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
microrganismos podem ativar diretamente os macrfagos para secretar IL-12, e outros podem
desencadear a IL-12 de modo indireto. Por exemplo, os vrus e algumas bactrias estimulam as
clulas NK para produzirem IFN-, que por sua vez atua sobre os macrfagos para induzir a secreo
de IL-12. A IL-12 liga-se a receptores das clulas T CD4+ antgeno-estimuladoras, ativa a STAT4 e
promove a diferenciao das clulas T em clulas Th1 (alm de retornar e influenciar a outros
linfcitos T a produzir o T-bet). Os interferons, tal como o IFN-, promovem o desenvolvimento da Th1
por estimularem a produo de IL-12 pelos macrfagos e a expresso de receptores funcionais sobre
os linfcitos T.
A principal funo das clulas Th1 a defesa, mediada pelos fagcitos, contra as infeces,
especialmente por microrganismos intracelulares. O IFN- produzido pelas clulas Th1 estimula as
atividades microbicidas dos fagcitos, produzindo desse modo a destruio intracelular dos
microrganismos fagocitados por meio de radicais livres (H
2
O
2).
Recruta, por meio da TNF, neutrfilos.
Note que neste fase efetora no h ao da IL-12, apenas na ativao.
Propri edades da resposta Th2: esta diferenciao ocorre em resposta a parasitas extracelulares
(helmintos) e a alergenos, que causam estimulao crnica das clulas T, muitas vezes com pouca
ativao dos macrfagos.
Citocinas: IL-4, IL-5 (recruta eosinfilos), IL-13, IL-10;
Fatores de Transcriao: GATA-3, STAT-6;
Istopo: IgE e IgG.
A diferenciao das clulas T antgeno-estimuladoras em subpopulao
Th2 dependente de IL-4, que funciona ativando STAT6, um fator que
estimula, por sua vez, a transcrio de mais IL-4 e de outros genes de
citocina Th2. Essa secreo de IL-4 pelas LTh0 antes de seu
desenvolvimento possvel pois as clulas T CD4+ antgeno-
estimuladas podem secretar pequenas quantidades de IL-4 a partir de
sua atividade inicial. Depois da apresentao pela clula APC ao LTh0,
que produz altas concentraes de IL-4, que por sua vez, ativa a
transcrio de GATA-3 (fator de transcrio que aumenta a secreo de
IL-4) e estimula ainda a produo de STAT6 por esses linfcitos,
responsvel por polarizar, de fato, a resposta Th2. Este IL-4 secretado
responsvel por estimular, ainda, os Linfcitos B a produzirem IgE,
facilmente dosado em casos de alergia ou verminoses.
A principal funo efetora das clulas Th2 ocorre nas reaes imune
mediadas pela IgE e pelos eosinfilos/mastcitos. As citocinas
produzidas durante esta resposta estimula a degranulao dos
eosinfilos para a destruio dos parasitos. Alm disso, as citocinas IL-
4, IL-5 e IL-13 antagonizam as aes do IFN- e inibem a ativao da
resposta Th1, assim como o IFN- inibe a resposta Th2.
Se a resposta for para um helminto, o eosinfilo solicitado a degranular e secretar a protena
bsica principal, responsvel por quebrar as membranas do verme.
Se a resposta for alrgica, mastcitos, eosinfilos ou basfilos sero solicitados para a
degranulao de histamina, leucrotrienos e prostraglandinas
Produz anticorpos IgE por meio dos linfcitos B ativados pela IL-4.
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
OBS: Como foi descrito anteriormente, essas duas respostas pr-citadas acontecem de forma polarizada, em
que uma inibe a outra. Esse fato se faz verdade quanto a hipteses que defendem que: pases muito
higinicos, a resposta Th2 mais exacerbada, aumentando a incidncia de asma nos mesmos, uma vez que a
resposta Th1 praticamente inibida pela carncia de microrganismos.
OBS: Esse fato tambm observado em crianas super-protegidas: geralmente, crianas que no tem muito
contato com sujeira ou cepas microbiotas presentes nos locais mais comuns onde elas comumente brincam,
tendem a desenvolver mais facilmente alergias, uma vez que a resposta Th1 permanece em estado basal e a
resposta Th2, facilmente excitvel.
Ativao do Macrfago
Os macrfagos ativados so as clulas efetoras da imunidade celular que atuam na eliminao dos
microrganismos e outras fontes de antgenos. Os moncitos recrutados do sangue para os tecidos so
expostos a sinais emitidos pelas clulas efetoras Th1 que esto respondendo aos antgenos nos tecidos. Essa
interao resulta em converso dos moncitos em macrfagos ativados que so capazes de matar
microrganismos. A ativao consiste de alteraes quantitativas na expresso das vrias protenas que
conferem aos macrfagos a capacidade de executar algumas funes que no podem ser assumidas pelos
moncitos em repouso.
As clulas Th1 CD4+ ativam os macrfagos por sinais mediados pelo contato liberados pela interaes
CD40-CD40L e pela citocina IFN-. Esta a principal citocina ativadora de macrfagos. CD40L liga ao CD40
nos macrfagos que esto apresentando antgenos s clulas T e ativa. A necessidade das interaes CD40-
CD40L para a ativao do macrfago assegura que os macrfagos que esto apresentando antgenos s
clulas T sejam tambm os mais eficientemente ativados pelas clulas T.
A ativao dos macrfagos tem como
caractersticas:
Aumento da motilidade celular;
Aumento da motilidade membranar;
Aumento das enzimas lisossomais;
Aumento da produo de NO e ROIS
(intermedirios reativos do oxignio),
em um processo denominado de
exploso respiratria;
Aumento da produo de citocinas;
Aumento da capacidade de
apresentao antignica;
Aumento da capacidade fagocitica e
microbicida
Diferenciao Celular de LCD8+ em LTc
Enquanto o LT CD4+ efetivo a partir da estimulao do macrfago, para que este mesmo, por si s,
destrua o microrganismo, o LT CD8+ o responsvel direto, por meio de sua efetividade, por destruir o
microrganismo (inclusive a APC), por meio da liberao de perfurinas e granzimas.
A diferenciao entre as clulas T CD8+ virgens em linfcitos T citotxicos funcionais requer o
conhecimento de peptdeos associados molculas de classe 1 do MHC (sinal 1) e de co-estimuladores e/ou
de citocinas (sinal 2).
As clulas T CD8+, como j foi visto, amadurecem no timo, mas, quando saem do timo para entrar nos
rgos linfides perifricos, ainda no esto completamente diferenciadas e so incapazes de lisar clulas
alvo.O primeiro sinal para a ativao das clulas T CD8+ virgens o reconhecimento de antgenos, que
sempre so peptdeos derivados de protenas que foram degradadas no citosol associados a molculas de
classe I. A natureza do segundo sinal se d por meio das APCs profissionais, que podem ento fornecer co-
estimulao para as clulas T pelas mesmas molculas B7 que co-estimulam as clulas CD4+. Este processo
chamado de instruo cruzada e implica em que um tipo celular (as APCs) possa ativar (ou preparar) as
clulas T CD8+ virgens especficas para os antgenos de outras clulas (como por exemplo, uma clula
infectada por vrus ou uma clula tumoral).
As clulas T CD4+ auxiliares podem estimular ainda a diferenciao das clulas T CD8+ por diversos
mecanismos. As clulas T auxiliares podem secretar citocinas, tais como a IL-2, que estimulam a expanso
clonal e a diferenciao das clulas T CD8+. Alternativamente, as clulas T auxiliares expressam CD40L, que
se liga ao CD40 nas APCs para torn-las mais eficientes na estimulao da diferenciao das clulas T CD8+.
A ativao das clulas T CD8+ pelos antgenos e pelos segundos sinais induz a sua proliferao e
diferenciao em clulas T efetoras capazes de funes citotxicas. O aspecto mais especfico da
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
diferenciao dessas clulas o desenvolvimento de grnulos citoplasmticos ligados membrana e que
contm protenas, incluindo a perfori na e granzi mas, cuja funo lisar outras clulas. Alm disso, os
linfcitos T CD8+ diferenciados adquirem a capacidade de transcrever e de secretar citocinas, na sua maioria
IFN-, linfotoxina (LT) e TNF, que atuam na ativao dos fagcitos e induzem inflamao.
O mecanismo de citlise
mediado por linfcitos T citotxicos
totalmente guiado pela interao das
granzimas e perforinas com enzimas
prprias da clula. As perforinas so
responsveis por perfurar a membrana
celular da APC e criar a espcie de um
poro, permitindo assim a passagem
das granzimas. Estas, por sua vez,
ativam as enzimas celulares
denominadas caspases, que
consistem em um grupo de enzimas
que existem nas clulas, normalmente
na sua forma inativa. Quando estas
so ativas e so estimuladas pelas
granzimas, elas so responsveis por
realizar delees em cadeia na clula e
causarem a inevitvel apoptose da
mesma.
Como um segundo
mecanismo, h tambm a interao das molculas de membrana do LT com protenas expressas por clulas
tumorais ou outras infectadas que tambm devem sofrer apoptose que so denominadas de Fas. Essas
protenas Fas so literalmente denominadas de protenas de morte e so reconhecidas pela FasL (ligante
Fas) expresso na membrana dos linfticos T CD8+ ativos, induzindo a apoptose dessas clulas.
Hipersensibilidade Tardia
A seqncia de eventos na imunidade mediada por clulas
tem sido em grande parte definida pela anlise das DTHs em
experincia com animais.
O homem pode ser sensibilizado para DTHs por infeco
microbiana, por sensibilizao de contato com substancias qumicas
ou antgenos ambientais, ou pela injeo intradrmica ou subcutnea
de antgenos proticos. A exposio subseqente ao mesmo
antgeno (tambm chamada provocao) desencadeia a reao.
Por exemplo, o derivado protico purificado (PPD), um antgeno
protico de Mycobacterium tuberculosis, provoca uma reao de
DTHs quando injetado em indivduos que esto sofrendo ou que
curaram de tuberculose, ou que foram vacinados contra esta doena
(BCG). A resposta positiva caracterstica desenvolve-se em 24 a 48
horas. Depois de 4 horas da injeo do antgeno, acumulam-se
neutrfilos em volta das vnulas ps-capilares no local da injeo.
Com cerca de 12 horas o local da injeo torna-se infiltrado por
clulas T e moncitos sangneos, tambm organizados em uma
distribuio perivenular. O fibrinognio escapa dos vasos sanguneos
em volta dos tecidos, onde convertido em fibrina. A deposio de
fibrina e, em menor extenso, o acmulo de clulas T e de moncitos
dentro do espao tecidual extravascular em torno do stio da injeo
faz com que o tecido fique edematoso e torne-se duro (endurecido).
O endurecimento, que a marca da DTH, detectvel cerca
de 18 horas depois da injeo do antgeno e atinge o mximo depois
de 24 a 48 horas. Este hiato para o incio do endurecimento palpvel
a razo para se designar a resposta como de tipo tardio. O
desenvolvimento do endurecimento depois de 24 a 48 horas da
injeo intradrmica do PPD um indicador clnico amplamente
usado quanto na evidncia de infeco tuberculosa anterior ou ativa.
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
MHC E APRESENTAO ANTIGNICA
(Prof Karina Karla)
O termo compl exo pri nci pal de hi stocompati bi l i dade (MHC) designado para a protena de
membrana das APC responsvel por exibir os antgenos dos microrganismos ligados s clulas, para o
reconhecimento dos linfcitos T. So protenas especializadas, codificadas por genes altamente polimorfos, da
a sua complexidade. Abaixo, esto listados os termos e significados que denominam tal estrutura:
Compl exo: molcula codificada por vrios genes altamente polimrficos cujos produtos so expressos
nas superfcies de uma variedade de clulas.
Pri nci pal : dentre as protenas geradas do MHC, as principais so as geradas nas superfcies
celulares- MHC I e MHC II.
Hi stocompati bi l i dade: funo de compatibilidade nos transplantes esta foi a primeira funo
associada a esta protena, durante transplantes de tecidos.
As molculas do MHC so componentes integrais dos ligantes que a maioria das clulas T reconhece,
porque os receptores de antgenos das clulas T so realmente especficos para os complexos dos antgenos
peptdicos estranhos e as molculas do prprio MHC. Existem dois tipos diferentes de produtos do gene MHC
chamados mol cul as do MHC de cl asse I e mol cul as do MHC de cl asse II, que contm diferentes
antgenos proticos (antgenos extracelulares que sofreram endocitose e antgenos intracelulares citoslicos) e
apresentam peptdeos a diferentes subpopulaes de clulas T clulas T CD4+ auxiliares e linfcitos T CD8+
citotxicos.
Descoberta do Complexo de Histocompatibilidade
O MHC foi descoberto como um locus gentico cujos produtos eram
responsveis pela rpida rejeio dos enxertos de tecidos transplantados entre
espcies isognicas de camundongos.
Quando um tecido ou um rgo, tal como uma rea de pele, enxertado
de um animal para outro, podem seguir-se dois resultados: em alguns casos, a
pele enxertada sobrevive e funciona como uma pele normal. Em outros casos, o
sistema imune destri o enxerto, produzindo uma rej ei o. As experincias com
enxertos cutneos mostram que os enxertos entre animais de uma linhagem
endocruzada so mais aceitos, enquanto que os praticados entre animais de
linhagens no aparentadas (ou de outras linhagens) so rejeitados. Por isso, o
reconhecimento do enxerto como prprio ou estranho um trao hereditrio. Os
genes responsveis por fazer com que um tecido enxertado seja semelhante aos
prprios tecidos foram chamados de genes de hi stocompati bi l i dade, e as
diferenas entre estranho e prprio foram atribudas a polomorfismo genticos
entre diferentes alelos de histocompatibilidade.
A regio gentica que controlava a rejeio dos enxertos e continha vrios genes ligados foi designada
ento como compl exo pri nci pal de hi stocompati bi l i dade ou MHC (major histocompatibility complex).
Caractersticas e Funes do MHC
Pelas anlises clssicas feitas em animais e no homem, foram deduzidas vrias e importantes
caractersticas dos genes do MHC e dos seus produtos:
Os dois tipos de genes MHC so polomrficos, ou seja, os genes de classe I e de classe II, codificam
dois grupos de protenas estruturalmente distintas, porm homlogas.
Os genes MHC so os genes mais polimrficos presentes nos genomas de todas as espcies.
Os genes MHC so codominantemente expressos em cada indivduo, ou seja, todo indivduo expressa
alelos MHC em ambos os cromossomos que so herdados de ambos os pais. Para o indivduo, isso
maximiza o nmero de molculas do MHC disponvel para ligar peptdeos para apresentao s
clulas T.
Quanto as funes gerais, podemos destacar as seguintes:
Rejeio de tecidos em transplantes;
Apresentao de peptdeos prprios (que no ativaro os LT pois estes aprenderam a no reagir com
molculas do prprio durante a sua seleo no timo) e no-prprios ao TCR do Linfcito T;
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Induo da resposta imune adquirida: depois da apresentao pelo MHC ao linfcito T, este ativa o
macrfago para que a prpria APC destrua o microrganismo.
Gentica do MHC Humano: HLA
As molculas do MHC humanas so chamadas antgenos leucocitrios humanos (HLA) e so
equivalentes s molculas H-2 encontrada nos camundongos durante as experincias. O gene codificante
desta molcula est presente no cromossomo 6.
O MHC humano muito grande (3.500 kb) e complexo, sendo geneticamente organizado da seguinte
ordem:
Genes que transcrevem o MHC de classe II: HLA-DP, HLA-DQ, HLA-DR;
Genes do complemento;
Genes das protenas do choque trmico e de algumas citocinas (TNF, LT e LT-B);
Genes que transcrevem o MHC de classe I: HLA-B, HLA-C e HLA-A.
Como pode-se observar ento, os genes MHC so os mais polimrficos do genoma humano. Esses
genes MHC, como j foi dito, so expressos de forma co-dominante no indivduo (utilizou parte do gene
materno e parte do gene materno, formando um haplotipo materno e o paterno). Isso significa que mais difcil
haver rejeies de transplantes quando o tecido doado do pai para o filho. J o contrrio no verdadeiro:
uma vez que o filho apresenta um segmento gentico no-semelhante com o do pai (que o segmento cedido
pela me), indesejvel esse transplante.
OBS: Complexo MHC-Peptdeo + TCR: o esquema ao lado
mostra uma molcula do MHC ligando e exibindo um peptdeo e
um receptor de clula T reconhecendo dois resduos polimrficos
da molcula do MHC e um resduo do peptdeo. Quando o MHC
vai ser expresso pelos genes da APC ele j estrategicamente
moldado para a conformao espacial do peptdeo a ser
apresentado clula T, a qual tambm deve ter regies
compatveis com a interao. Depois dessa apresentao, d-se
incio fase efetora da resposta imune adaptativa.
Estrutura das Molculas do Complexo Principal de Histocompatibilidade
Toda molcula do MHC possui uma fenda especfica ou sulco extracelular de ligao de peptdeo (na
poro mais apical) acompanhada por um par de domnios semelhantes imunoglobulina (Ig) e est ancorada
clula pelos domnios transmembrana e citoplasmtico. As molculas de classe I so compostas de uma
cadeia polipeptdica no MHC e de uma segunda cadeia no codificada no MHC, enquanto que as molculas de
classe II so constitudas de at duas cadeias polipeptdicas codificadas do MHC.
Os resduos de aminocidos polimrficos das molculas do MHC esto localizados na e adjacentes
fenda de ligao do peptdeo. Os domnios semelhantes Ig no polmrficos das molculas do MHC contm
stios de ligao para as molculas das clulas T CD4 e CD8.
ESTRUTURA DO MHC DE CLASSE I (MHC-I)
As molculas de classe I consistem de duas cadeias
polipeptdicas ligadas no-covalentemente: uma cadeia- codificada
no MHC (ou cadeia pesada) e uma subunidade no codificada no
MHC, designada
2
-microglobulina.
A regio da fenda peptdica, que se liga especificamente ao
eptopo, dividida em
1
e
2
, sendo ambas as regies mais
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
polimrficas do MHC-I, por ser ela a responsvel por se ligar especificamente seqncia dos aminocidos do
eptopo. J a regio
3
e a regio
2
-microglobulina so produzidos por genes estveis, no-polimrficos, por
terem apenas a funo estrutural de Ig para o MHC. A regio
3
apresenta um stio de ligao para o co-
estimulador CD8.
Uma molcula de classe I completa , por tanto, um heterotrmero consistindo de uma cadeia , uma

2
-microglobulina e de um peptdeo antignico, sendo que a expresso estvel das molculas de classe I nas
superfcies celulares requer a presena de todos os trs componentes do heterotrmero.
O MHC-I est presente em todas as APCs nucleadas e so responsveis por apresentar eptopos aos
linfcitos T CD8+. A clula T citotxico recebe o MHC-I da clula infectada por meio de seu TCR, utilizando o
marcador CD8+ como co-estimulador durante a apresentao na regio
3
da cadeia .
ESTRUTURA DO MHC DE CLASSE II (MHC-II)
Diferentemente do MHC-I, o MHC de classe II
apresenta uma fenda peptdica bem mais ampla e larga. As
molculas do MHC de classe II so compostas de duas cadeias
polipeptdicas associadas no-covalentemente, uma cadeia
(geralmente mais pesada ou de mesmo peso da outra) e uma
cadeia . Outra diferena do MHC-I, ambas as cadeias do
MHC-II so codificadas por genes MHC polimrficos.
Os segmentos aminoterminais
1
e
1
das cadeias de
classe II interagem para formar a fenda de ligao peptdica,
que estruturalmente semelhante fenda das molculas de
classe I. Os segmentos
2
e
2
das molculas de classe II, tais
como o
3
e a
2
-microglobulina de classe I, so enovelados no
domnio de Ig e so no-polimrficos entre os vrios alelos de
um gene particular de classe II. Uma ala no segmento
2
das
molculas de classe II o stio de ligao para o CD4. As
extremidades carboxiterminais dos segmentos
2
e
2
continuam em curtas regies de conexes seguidas por
aproximadamente 25 prolongamentos de aminocidos de
resduos hidrofbicos transmembrana.
A molcula de classe II completa um heterodmero consistindo de uma cadeia , uma cadeia e um
peptdeo antignico ligado, e a expresso estvel das molculas de classe II nas superfcies celulares requer a
presena de todos os trs componentes do heterodmero.
O MHC-II da APC, por sua vez, apresenta o peptdeo antignico ao linfcito T CD4+ auxiliar. A clula T
auxiliar recebe o MHC-II tambm por meio de seu TCR, e seu grupo de diferenciao CD4 participa co-
estimulando um segmento da cadeia
2
. As clulas que expressam o MHC-II so as APCs profissionais
(clssicas): macrfagos, clulas dendrticas e os linfcitos B.
OBS: O macrfago uma clula da resposta imune inata. Ela reconhece o microrganismo por meio de seus
receptores (PRRs que reconhecem os PAMPs). Ao reconhecerem o microrganismo, englobam o mesmo,
processam e apresentam apenas um segmento peptdico do antgeno para os linfcitos T.
DIFERENAS ENTRE MHC-I E MHC-II
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Apresentao Antignica
Os linfcitos exercem papis centrais nas respostas imunes adaptativas contra os antgenos proticos.
Porm, para os linfcitos serem ativados, se proliferarem e desempenharem a sua funo preciso que uma
cl ul a apresentadora de antgeno (APC) leve ao encontro desses linfcitos um pequeno segmento de
aminocidos (eptopo) do antgeno invasor.
Vale lembrar os passos at o momento dessa apresentao: as APCs geralmente so clulas
fagocticas de vigilncia imunolgica. Estas fazem a funo de fagocitar os invasores, representando a
resposta imune inata. Ao percebem que no possvel concluir essa misso protetora sozinha, elas sinalizam
aos linfcitos a presena desse antgeno e integram as respostas inatas com a resposta adquirida.
O linfcito, por si s, no reconhece a configurao espacial do antgeno ntegro. A maioria dos
linfcitos T reconhece somente peptdeos,
enquanto as clulas B podem reconhecer
especificamente peptdeos, protenas,
cidos nuclicos, polisscardeos, lipdeos e
pequenas substancias qumicas. Porm,
as clulas T reconhecem e respondem aos
antgenos peptdeos estranhos somente
quando os antgenos esto ligados s
superfcies das APCs, enquanto que as
clulas B e os anticorpos secretados ligam
antgenos solveis dos fluidos corporais,
bem como os antgenos das superfcies
celulares.
A APC, antes da apresentao, engloba o antgeno, processa-o e expressa apenas um fragmento do
mesmo ao linfcito T por meio do seu MHC. O linfcito s reconhece com eficcia este complexo: MHC-
Peptdeo. Lembremo-nos agora que o LT CD4+(auxiliar, responsvel por ativar a APC por meio de citocinas:
expanso do retculo endoplasmtico do MHC, liberao de radicais livres e crescimento da prpria APC)
reconhece MHC de classe II e o LT CD8+(citotxico, responsvel por efetivar, por meio das perforinas e
granzimas, a destruio do antgeno) reconhece MHC de classe I.
CLULAS APRESENTADORAS DE ANTGENOS (APCs) PROFISSIONAIS
Cl ul as dendrticas: sua principal funo capturar e transportar os antgenos para a drenagem nos
linfonodos. a principal clula apresentadora de antgeno, sendo esta a sua maior
funo. As clulas dendrticas amadurecem para se tornarem eficientes na
apresentao do antgeno. A maturao ocorre em resposta aos produtos
microbianos ou aos sinais omitidos pela clula T ativada. Constituem-se de 1% das
clulas circulantes no sangue perifrico. Localizam-se nos tecidos: Pele, TGI, e no
sistema respiratrio (porta de entrada para os microorganismos). Capturar e
transportar antgeno para o linfonodo onde esto os linfcitos.
o Funo principal: incio de respostas das clulas T aos antgenos proticos
(instruo).
Macrfagos: clulas de grandes dimenses responsveis por processar antgenos
captados na circulao e apresentares pequenos fragmentos destes aos linfcitos.
Estes linfcitos, aps a demonstrao antignica, ativam o macrfago, o qual
comporta-se dos seguintes modos: expressando um maior nmero de MHCs na
sua membrana; produzindo uma grande concentrao de radicais livres para
destruir os antgenos; aumento no nmero e tamanho de organelas; aumento da
prpria clula.
o Funo principal: induo e fase efetora das respostas imunes mediadas
pelas clulas.
Li nfci to B: o prprio linfcito B apresenta protenas especficas em sua
membrana que realizam o englobamento do antgeno, que ser processado e
apresentado para os linfcitos T. Vale lembrar que esta clula no fagocita (pois
no projeta pseudpodes), mas endocita o antgeno atravs de seus receptores de
imunidade inata (PRRs receptores dos padres moleculares).
o Funo principal: apresentao de antgenos s clulas T CD4+auxiliares
nas respostas imunes humorais (cognata nas interaes clulas B-clulas
T).
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FUNES DAS APCs
Endocitose ou fagocitose dos
microrganismos.
Apresentao antignica para
clulas efetoras da imunidade
adquirida.
Ativao dessas clulas
efetoras.
Clulas dendrticas: fagocitam
o antgeno, processa-o e
apresenta seus fragmentos
para que os linfcitos
destruam o invasor.
Macrfago: fagocita, processa
e apresenta o antgeno e
pode, por si s (atravs de
estmulos do LT CD4+)
destruir este invasor.
Clula B: endocita o antgeno, apresenta e se diferencia em plasmcito para produzir anticorpos. Esses
anticorpos neutralizam o antgeno.
VIAS DE PROCESSAMENTO E APRESENTAAO ANTIGNICA
As vias de processamento de antgenos convertem os antgenos proticos derivados do espao celular
ou do citosol em peptdeos e conduzem peptdeos at as molculas do MHC para exibi-los aos linfcitos. E
como j sabemos, h duas classes de MHC e, por tanto, duas vias de processamento diferentes:
Via do MHC-II (antgenos proticos de origem extracelular) Apresenta ao LT CD4+auxiliar
produz citocinas que ativam a prpria APC.
Via do MHC-I (antgenos proticos com origem j intracelular) Apresenta ao LT CD8+
citotxico produz citotoxicidade (perforinas e granzimas).
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Processamento dos antgenos endoci tosados para apresentao ao MHC de cl asse II: a gerao
de peptdeos associados aos MHC de classe II a partir de antgenos endocitosados envolve a
degradao proteoltica das protenas internalizadas nas vesculas endocticas e a ligao dos
peptdeos s molculas do MHC de classe II nessas vesculas.
1. Captura de protenas extracelulares para os compartimentos vesiculares das APCs: a maioria dos
peptdeos associados classe II derivada de antgenos proticos que, por APCs especializados,
so capturados e internalizados nos endossomos.
2. Processamento das protenas internalizadas nas vesculas endossmicas e lisossmicas: as
protenas internalizadas so degradas enzimaticamente nos endossomos e nos lisossomos para
gerar peptdeos, muitos dos quais tm as propriedades estruturais que os capacitam para se ligar
s fendas de ligao dos peptdeos das molculas do MHC de classe II.
3. Biossntese e transporte das molculas do MHC de classe II para o endossomo: as molculas de
classe II do MHC so sintetizadas no RE e transportadas para os endossomas com uma protena
associada designada cadeia invarivel (Ii), que ocupa as fendas de ligao de peptdeos das
molculas de classe II recm-sintetizadas. As duas cadeias ( e ) so geradas no RE e
associadas essa cadeia invarivel (Ii) com duas funes: (1) proteger a fenda de ligao do MHC
recm-formado para que nenhuma molcula se ligue a ela; (2) fornecer estabilidade a esta
molcula.
4. Associao entre os peptdeos processados e as molculas do MHC de classe II nas vesculas: a Ii
removida das molculas do MHC de classe II pela ao combinada de enzimas proteolticas e da
molcula HLA-DM, e os peptdeos so ento capazes de ligarem-se s fendas de ligao de
peptdeos nas molculas de classe II que estiverem disponveis. Pacientes com deficincia de
HLA-DM no apresentam uma resposta imune eficiente.
5. Expresso dos complexos peptdeoMHC II na superfcie da APC: as molculas do MHC de classe
II so estabilizadas pela ligao aos peptdeos, e os complexos peptdeo-classe II estveis so
liberados para a superfcie das APCs, onde so exibidos para reconhecimento pelas clulas T
CD4+. Um nmero muito pequeno de complexos peptdeo-MHC so capazes de ativar os linfcitos
T especficos. Esses complexos, uma vez expressos, podem ser reconhecidos pelas clulas T
CD4+ antgeno-especficas, com o co-receptor CD4 exercendo um papel essencial na ligao s
regies no-polimrficas das molculas de MHC de classe II.
Processamento dos antgenos ci tosl i cos para apresentao associ ados MHC de cl asse I: os
peptdeos associados classe I do MHC so produzidos pela degradao proteoltica das protenas
citoslicas, pelo transporte dos peptdeos gerados no RE e pela ligao s molculas de classe I
recm-sintetizadas. Vale lembrar que toda clula nucleada do organismo possui MHC-I, apresentando
protenas prprias constantemente (sem ativar uma resposta imune). Do mesmo modo, o MHC-I
apresenta protenas estranhas, sendo que estas sero reconhecidas e desencadearo uma resposta
imune porque no so semelhantes quelas com as quais o LT so selecionados no timo.
1. Produo de protenas antignicas no citosol: os peptdeos que so apresentados ligados s
molculas do MHC de classe I so derivados de protenas citoslicas (diferentemente do que
acontece na via pr-citada), a maioria das quais sintetizada endogenamente nas clulas
nucleadas infectadas por microrganismos intracelulares durante o seu ciclo vital.
2. Degradao proteoltica das protenas citoslicas: o mecanismo principal para a gerao de
peptdeos a partir dos antgenos proticos e citoslicos a protelise pelo proteassomo
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
(megacomplexo protico de forma cilndrica com capacidade proteoltica). Este executa a funo
de administrao interna bsica nas clulas degradando diferentes protenas protoplasmticas.
Portanto, os mecanismos proteolticos que geram antgenos peptdicos s molculas do MHC de
classe I so muito diferentes dos mecanismos anteriormente descritos quanto s associaes de
peptdeos s molculas do MHC de classe II. Antes da ao do proteossomo, os antgenos sofrem
ubiquitinizao ( adicionada pequena protena chamada de ubiquitina) para que sejam marcadas
dentro do citosol para que ela se torne linear e seja degradada de fato pelo proteossomo.
3. Transporte de peptdeos do citosol para o retculo endoplasmtico: os peptdeos gerados no citosol
so translocados por um transportador especial para o RE, onde as molculas do MHC de classe I
recm-sintetizadas esto disponveis para ligar peptdeos. Nesse momento, h a produo do
MHC-I por seus respectivos genes.
4. Reunio de complexos peptdeoMHC I no RE: os peptdeos translocados para o RE ligam-se s
molculas do MHC de classe I que esto ligadas ao dmero TAP (molculas transportadoras
associadas ao processamento de antgenos). Esses TAPs so importantes por transportar os
pequenos peptdeos at a fenda do MHC-I. Os peptdeos transportados dessa maneira para o RE
ligam-se, preferentemente, s molculas MHC de classe I e no as de classe II.
OBS: Papel do TAP na apresentao e expresso do antgeno
associ ado ao MHC de cl asse I. Em uma clula que carece de
TAP funcional, as molculas de classe I no so eficientemente
carregadas com peptdeos e so degradadas na sua maioria ainda
no RE. Quando um gene TAP funcional transfectado na
linhagem celular, so restauradas a unio e a expresso do
peptdeo associado s molculas do MHC de classe I. Note-se
que o dmero TAP pode estar ligado s molculas de MHC de
classe I por uma protena ligadora chamada tapasina, que no
mostrada na figura ao lado.
5. Expresso de superfcie dos complexos peptdeoclasse I: as molculas do MHC de classe I com o
peptdeo inserido so estruturalmente estveis e so expressos na superfcie celular. Esses
complexos, uma vez expressos, podem ser reconhecidos pelas clulas T CD8+ antgeno-
especficas, com o co-receptor CD8 exercendo um papel essencial na ligao s regies no-
polimrficas das molculas de MHC de classe I.
OBS: Conclui-se, ento, definitivamente as seguintes diferenas:
As clulas T CD4+ auxiliares reconhecem os peptdeos ligados s molculas do MHC de classe II,
enquanto que as LT CD8+ reconhecem os peptdeos ligados s molculas de classe I.
As clulas T CD4+ restritas classe II reconhecem os peptdeos derivados principalmente das
protenas extracelulares que so internalizadas nas vesculas das APCs, enquanto que as clulas T
CD8+ reconhecem os peptdeos derivados das protenas citoslicas, em geral sintetizadas
endogenamente.
PARTICIPAAO DOS CO-ESTIMULADORES NA ATIVAO DOS LT
Durante a apresentao antignica, como j foi discutido, h dois sinais: o sinal 1, que consiste no
contato direito entre o MHC (com peptdeo estranho) e o TCR do linfcito que ir realizar a resposta imune; e o
sinal 2, com o envolvimento dos co-estimuladores, importantes nesse caso para especificar ainda mais a
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interao entre essas duas clulas. Indo mais
alm, a afinidade dos LTa e LTc com os MHC-II
e MHC-I, respectivamente.
Os co-estimuladores so protenas
expressas tanto na APC quanto nos LT. Quando
este 2 sinal acontece, os linfcitos T expressam
ainda mais co-estimuladores (em resposta
interao de citocinas), ficando cada vez mais
excitvel e se ativando de maneira mais efetiva.
O CD-28, por exemplo, que outro marcador dos LT, se liga especificamente aos receptores B7-1 e
B7-2 da APC; o CD-40, este expresso na membrana da APC, se liga ao CD40Ligante presente nos linfcitos T.
Nesse caso, alm da ativao da resposta imune pelos linfcitos T, h a induo diferenciao dos linfcitos
B (que tambm so APCs) para a produo de anticorpos.
OBS: Co-adj uvantes so substancias que podem ser administradas no indivduo para que haja uma maior
expresso dos co-estimuladores dos linfcitos, aumentando exponencialmente a eficincia da resposta imune
realizada por estas clulas. Vacinas com moldes bacterianos, por exemplo, so administradas com cpsulas de
bactrias e co-adjuvantes, aumentando a eficcia da reposta imune.
FUNES EFETORAS DOS LT
Depois que ocorre a captura do antgeno pelas APCs, processamento e apresetano, os linfcitos T
so induzidos ativao (fase efetora), realizando ento as seguintes funes:
Se o macrfago apresentar o antgeno
extracelular ao LTa, ocorrer a sua
ativao por meio de citocinas
produzidas pelo LTa CD4+, o que
fazem com que esta APC cresa em
tamanho e em funcionalidade para dar
conta desse antgeno.
Quando o LB o responsvel pela
apresentao do antgeno
extracelular, o LTa CD4+ ativa esta
clula para produzir anticorpos, sendo
estes os responsveis pela
opsonizao e neutralizao dos
antgenos.
Se a APC apresentar o antgeno
intracelular ao LTc CD8+, este se
encarregar pela produo de
citocinas (perforinas e granzimas) para
gerar a apoptose (deleo) desta
clula.
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FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
ATIVAO DE CLULAS B E PRODUO DE ANTICORPOS
(Prof Karina Carla)
J sabemos que, na resposta humoral, os linfcitos B tm uma participao essencial, pois so eles
que, quanto ativados, se diferenciam em plasmcitos e produzem anticorpos. Sabemos tambm que a funo
fisiolgica dos anticorpos neutralizar e eliminar os antgenos que induziram sua formao. O sistema imune
humoral s possui a capacidade de responder a diferentes tipos de antgenos por meio da produo de
diferentes classes de anticorpos.
Progeni tor
Li nfi de
Pro B
Precoce
Pro B
Tardi a
Pr B B
Imatura
B
madura
CD10 (LLA)
CD19 CD19 CD19 CD19 CD19 CD19
CD45R CD45R CD45R CD45R CD45R CD45R
MHCII MHC II MHCII MHCII MHCII MHCII
CD38 CD38 CD38 CD38
CD40 CD40 CD40 CD40 CD40
CD20 CD20 CD20
CD21 CD21 CD21
IgM IgM,IgD
(BCR)
Desde a medula ssea, com a presena da precursora Steam cell, tem-se a origem e maturao dos
linfcitos B: esta steam cell dar origem a duas linhagens: a linhagem mielide e linfide. Esta linhagem linfide
dar origem aos LB, LT e clulas NK. A designao dos LB assim dada devido a sua origem e maturao ser
realizada em nvel de medula ssea.
O progenitor linfide uma clula tronco menos diferenciada que apresenta, assim como as demais fases de
maturao das clulas B, marcadores especficos que caracterizam esta fase: CD10, CD19, CD45R, MHCII e
CD38. Todos estes esto ancorados na membrana dos LB ainda nessa fase progenitora, mas alguns desses
marcadores direcionam a diferenciao para a clula B. Em leucemias, comum a presena de clulas CD10 no
plasma, o que caracteriza a presena de clulas imaturas na corrente sangunea.
O progenitor linfide ento passa para um outro estgio de evoluo, perde o marcador CD10 e ganha um
marcador CD40, passando a se chamar pro B precoce, diferenciando-se fenotipicamente da primeira clula. Esta
se diferencia do pro B tardio apenas por uma questo de tempo, e no por marcadores fenotpicos.
O pro B tardio, ao receber dois marcadores (o CD20 e o CD21), passa a ser designado como Pr B, sendo
praticamente uma clula B quase madura, diferenciando-se desta devido a presena do marcador CD38.
Ao passo que o Pr B perde este marcador CD38 e ganha o como primeiro isotipo o IgM, passa a ser designado
como Clula B imatura.
Quando esta clula recebe o isotipo IgD que, juntamente ao IgM (e s imunoglobulinas e ), entraro na
composio do marcador prprio do LB o BCR diz-se que a clula B imatura evoluiu para a Clula B madura,
que j pode ser designada como linfcito B, sendo capaz de responder a antgenos.
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Teoria da Seleo Clonal (Expanso Clonal)
Os linfcitos, de uma forma geral, devido a
presena de seus marcadores tpicos (o BCR para
os LB e o TCR para os LT), so clulas altamente
capacitadas em reconhecer peptdeos, sendo
justificada esta capacidade pela teori a da sel eo
cl onal : existe um clone de linfcitos responsvel
por pinar determinadas seqencias de
aminocidos antignicos e se proliferar. Isso
acontece devido grande variedade (ou clone) de
conformaes espaciais apresentadas pelas
fendas dos receptores dos linfcitos (BCR e TCR).
Este variado repertrio de receptores de
extrema importncia para a especificidade da
resposta imune humoral, uma vez que, por meio
deles, os linfcitos sero capazes de reconhecer
qualquer tipo de aminocido antignico.
A expanso clonal , portanto, a
proliferao de linfcitos que reconheceram uma
determinada seqncia de aminocidos e sero
responsveis de responder apenas a ela e, para
cada seqncia estranha de aminocidos, haver
uma expanso clonal especfica.
Fases da Resposta Imune Humoral
As respostas imunes humorais,
iniciadas nos rgos linfides perifricos
(como o bao ou linfonodos), apresentam
uma participao bastante significante do
LB.
O processo de ativao das clulas
B e a gerao de clulas produtoras de
anticorpos consiste de distintas fases
seqenciais. A fase de reconheci mento
iniciada pela interao dos antgenos com
um pequeno nmero de linfcitos B
maduros expressando IgM e IgD
especficas para cada antgeno. Os
linfcitos B maduros responsivos a
antgenos desenvolvem-se na medula
ssea antes da estimulao antignica. Essas clulas entram nos tecidos linfides perifricos, que so os stios
de interao com os antgenos estranhos. O antgeno, via APC, liga-se IgM e IgD de membrana nas clulas
B especficas (ou por meio da ativao de sinais via LT auxiliares) e assim se inicia a fase de ati vao. A
ativao da clula B consiste de uma srie de respostas que induzem a prol i ferao, resultando na expanso
clonal das clulas, e em di ferenci ao, resultando na produo de clulas efetoras que secretam anticorpos
ativamente e clulas B de memria.
A funo dos plasmcitos oriundos da diferenciao dos LB so responsveis, ento, por produzir e
secretar anticorpos; mudar o isotipo do anticorpo (como por exemplo, alternar IgM em IgE); promover um
amadurecimento da afinidade; produo de clulas de memria (clulas que no secretaram anticorpos).
OBS: Uma clula que produziu anticorpo no poder se tornar uma clula de memria: ou o LB efetor ou
de memria.
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Receptor da clula B (BCR)
A ativao dos linfcitos B antgeno-especficos iniciada pelo contato
do antgeno com as molculas Ig de membrana, que so os receptores de
antgenos das clulas B maduras (BCR). A IgM e a IgD de membrana na
superfcie das clulas B maduras esto associadas a molculas invariveis de
Ig e Ig, que contm ITAMs (immunoreceptor tyrosine-based activation motif =
motivos de ativao de imunoreceptores baseado em tirosina) nas suas caudas
citoplasmticas e que medeiam as funes citoplasmticas de sinalizao.
Esses pequenos complexos transmembranares (o Ig e o Ig)
associados ao BCR so os reais transdutores de sinal para as regies mais
internas da clula: o BCR reconhece o antgeno, interage com estes pequenos
complexos e eles, por sua vez, transduzem o sinal transmembranamente por
meio das ITAMs, domnios ancorados na cauda citoplasmtica das Ig e Ig. A
Ig e a Ig s so capazes de transduzirem o sinal devido a presena de uma
cauda citoplasmtica considervel, diferentemente da BCR (Lis, Val, Lis).
Os receptores de antgenos dos LB exercem dois papis
importantssimos na ativao da clula B: (1) a agregao de receptores
induzida pelo antgeno libera sinais bioqumicos para as clulas B, que do incio ao processo de ativao; (2)
o receptor liga-se ao antgeno e o internaliza nas vesculas endossmicas, e, se uma protena, o antgeno
ser degradado em peptdeos a serem apresentados na superfcie da clula B para reconhecimento pelas
clulas T auxiliares.
Transduo de Sinal pelo Complexo Receptor de Antgeno do Linfcito B
Estudaremos agora o
mecanismo pelo qual o complexo
antgeno-receptor de linfcito B se
torna capaz de ativar esta clula.
O receptor de antgenos da
clula B (BCR) libera sinais de
ativao para a clula quando duas
ou mais molculas receptoras so
postas em conjunto ou estabelecem
uma ligao cruzada por antgenos
multivalentes.
A IgM e a IgD de
membrana, que so os receptores
de LB em repouso, possuem curtas
caudas citoplasmticas consistindo
de apenas trs aminocidos (lisina,
valina e lisina). Essas caudas so
pequenas demais para a
transduo de sinais gerados pela
agregao da Ig. Os sinais
mediados pela Ig so realmente
transduzidos por duas outras
molculas, designadas Ig e Ig
que so ligadas no
covalentemente Ig de membrana.
Desse modo, Ig e Ig exercem nas clulas B as mesmas funes que as protenas CD3 e (zeta) tm
nos linfcitos T (o que veremos no prximo captulo).
Os domnios citoplasmticos da Ig e Ig contm motivos ricos em tirosinas (j conhecidos por ns e
chamados de ITAMs), que tambm so encontrados nas protenas CD3 e e so necessrios para a
transduo de sinais. A ligao cruzada da Ig de membrana mantm vrios ITAMs em proximidade, e este fato
desencadeia subseqentes eventos de sinalizao.
Minutos aps a ligao cruzada da Ig de membrana, a tirosina dos ITAMs da Ig e Ig fosforilada,
provavelmente pela ao das protenas tirosina-quinases da famlia Src, tais como Lyn, Blk e Fyn, que so
associadas ao BCR citoplasmaticamente e facilitam a transduo de sinal. A tirosina-quinase Syk liga-se, em
seguida, via seus domnios Src de homologia-2 (SH2) aos resduos de fosfotirosina da Ig e da Ig
(equivalente ao ZAP-70 do LT). A Syk ativada somente quando fosforilada em um resduo de tirosina em
particular; esta fosforilao pode ser catalisada por quinases associadas ao receptor de antgenos da clula B
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(como o caso da prpria Lyn, Blk ou da Fyn). Os ITAMs, fosforilados pelas protenas tirosina-quinases, esto
ativados e so capazes agora de desencadear uma srie de sinais que recrutam novas protenas tirosina-
quinases clssicas na ativao do LB.
Syk, e talves ouras tirosina-quinases associadas ao receptor da clula B, por sua vez, ativam vrias
molculas de sinalizao consecutivamente. Uma dessas ativaes a da fosfolipase C- (PLC), que
degrada bifosfato de fosfatidilinositol (PIP
2
) para gerar trifosfato de inositol (IP
3
) e diacilglicerol (DAG). O IP
3
mobiliza o Ca
2+
inico das reservas intracelulares, induzindo uma rpida elevao de Ca
2+
citoplasmtico, que
poder ser ainda aumentado pelo influxo deste mesmo on originrio do meio extracelular. Outra ativao que
ocorre concomitantemente a pr-citada, a ativao da Grb-2
Sos
, responsvel pela produo de outros
intermedirios bioqumicos (MAP-quinases) indispensveis para a transduo do sinal. H tambm a ativao
da SLP-65, protena adaptadora que, quando ativada, responsvel por ativar cada vez mais protenas
transdutoras de sinal (inclusive a PLC e a Grb-2
Sos
), formando uma rede de comunicaes que, mesmo
localizadas rente membrana plasmtica, sero responsveis por atingir o ncleo da clula por meio de
fatores de transcrio, ativando, de fato, o LB.
Essas cascatas de sinalizao finalmente ativam os fatores de transcrio (NF-B, NFAT e AP-1) que
induzem a expresso de genes cujos produtos so necessrios para a ativao funcional das clulas B.
SEGUNDO SINAL DA ATIVAO DOS LB RECEPTORES DO COMPLEMENTO
A ativao das clulas B requer, alm do contato com o
antgeno, a emisso de um segundo sinal, que pode ser fornecido
pelas protenas do complemento. Um produto de degradao do
complemento liga-se ao receptor do complemento tipo 2 (CR2) das
clulas B e serve como importante segundo sinal para ativao do
LB. O CR2 um receptor para a protena C3d do complemento,
que gerada pela protelise do componente principal do
complemento, o C3b. O complexo formado de C3d e antgeno liga-
se s clulas B, com a membrana Ig reconhecendo o antgeno e o
CR2 reconhecendo o C3d ligado. O CR2 expresso nas clulas B
maduras como um complexo composto de trs protenas integrais
de membrana (CR2, CD19 e o CD81), servindo como um co-
receptor (co-estimuladoes) da clula.
A ligao do C3d ao receptor do complemento da clula B
recruta o CD19 para o complexo, e a cauda citoplasmtica do CD19
(que tambm apresenta ITAM) torna-se rapidamente fosforilada
pelas protenas tirosina-quinase associadas ao complexo receptor
de antgenos das clulas B. Essa fosforilao ativa outra protena, a PI-3 quinase. Isso induz aumento das vias
de sinalizao iniciadas pela ligao do antgeno Ig de membrana, e a resposta da clula B grandemente
facilitada.
CONSEQUNCIAS FUNCIONAIS DA SINALIZAO PELO COMPLEXO RECEPTOR DE ANTGENOS DOS
LB
Os eventos celulares iniciais, que so induzidos pela ligao cruzada do complexo receptor da clula B
mediada pelo antgeno, preparam as clulas B para a subseqente proliferao e diferenciao. Esses eventos
so:
Entrada de clulas, previamente em repouso, no estgio G1 do ciclo celular;
Aumento de tamanho da clula, do RNA citoplasmtico e da biossntese de organelas;
Favorecimento da sobrevivncia dos LB como resultado da induo de vrios genes antiapoptcos;
Aumento da expresso das molculas de MHC de classe II e dos co-estimuladores, primeiro o CD86
(B7-2) e mais tarde o B7-1.
Aumento da expresso dos receptores para diversas citocinas derivadas das clulas T, que capacitam
os linfcitos B antgeno-especficos a responderem s clulas T auxiliares.
Eventos da Resposta Imune Humoral para Antgenos Proticos (TD)
A resposta de anticorpo aos antgenos proticos requer o reconhecimento do antgenos pelas clulas
T auxiliares e a cooperao entre os linfcitos B antgeno-especficos e os LT. Quando o antgeno apresenta
uma natureza de carboidrato ou lipdica, o LB pode resolver por si s, mas quando se tratar de antgenos
proticos, deve haver uma resposta mais qualificada, sendo necessria a interao LB e LT auxiliar (sendo
este o responsvel por ativar o LB).
A interao das clulas T com os linfcitos B envolve seqencialmente a apresentao do antgeno aos
LT auxiliares diferenciados, ativao dos mesmos e expresso das molculas de membrana e secretadas
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
pelos LT auxiliares que se ligam aos LB. O resultado final
a estimulao da expanso clonal das clulas B, troca
de istipos, maturao da afinidade e diferenciao em
clulas B de memria.
No folculo primrio dos linfonodos (poro onde
se concentra mais LB), o LB reconhece peptdeos
ancorados na superfcie do antgeno. Fora do folculo
(regio onde se concentra mais LT), o LT auxiliar
apresentado ao mesmo peptdeo por uma APC. Depois
dessas apresentaes, acontece uma interao entre as
clulas T e B nos limites entre os folculos linfides e as
zonas de LT. Aps essa interao, o LB se torna capaz
de se diferenciar em plasmcito e de produzir Ig,
terminando assim, os eventos iniciais.
Na fase mais tardia, que acontece dentro do folculo, acontece a troca de isotipo e o amadurecimento
de afinidade do anticorpo.
Os eventos seqenciais nas interaes clulas B-T e os mecanismos pelos quais as clulas T
auxiliares estimulam os linfcitos B so os que seguem:
Interao LTa x LB (1 etapa): os
linfcitos B antgeno-especficos
ligam o antgeno nativo s molculas
de Ig de membrana, interiorizam e
processam o antgeno nas vescula
endossmicas e apresentam
fragmentos peptdicos do antgeno
associados s molculas do MHC de
classe II nas suas superfcies.
Assim, as prprias clulas B
funcionam como APCs. Isso
acontece para o LT produza
citocinas que induzem a proliferao
dos LB. Dessa forma, os dois
linfcitos cooperantes reconhecem o
diferentes eptopos do mesmo
complexo antignico.
o Parti ci pao dos Co-esti mul adores: a ligao do antgeno Ig de membrana favorece a
expresso dos co-estimuladores que aumentam a capacidade do linfcito B para ativar as
clulas T. Os principais co-estimuladores que so expressos nas clulas B ativadas so o B7-2
e B7-1, ambos ligando-se ao CD28 na clulas T. As clulas T auxiliares podem ento
reconhecer os complexos peptdeo-MHC (sinal 1) e os co-estimuladores (sinal 2, como o que
ocorre com o CD40 do LB com o CD40L do LT), sendo assim estimuladas para executar a sua
funo efetora, que a de promover o crescimento e diferenciao do LB.
Di ferenci ao de cl ul as B em cl ul as secretoras
de anti corpos (2 Etapa): os anticorpos secretados
so as molculas efetoras da imunidade humoral, e a
diferenciao das clulas B, desde o reconhecimento
do antgeno at a condio de clula efetora, envolve
uma mudana na expresso da Ig de membrana para
a forma secretada. As molculas de Ig de membrana
e as secretadas diferem no seu carboxiterminal. A
transio da Ig de membrana para a Ig secretada
reflete uma mudana no processamento do RNAm da
cadeia pesada. O que acontece uma no expresso
da seqncia TM (transmembranar) do gene produtor
das Ig. Uma vez carente da sua poro hidrofbica
transmembranar, o anticorpo passa de uma forma
membranar para uma forma secretora.
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
Mudana de Isti po (cl asse) de cadei a pesada (3 etapa): em resposta ao comprometimento com o
CD40 e com as citocinas, algumas clulas B ativadas expressando IgM e IgD passam pelo processo
de troca de isotipos (classe) das cadeias pesadas, induzindo a produo de anticorpos com cadeias
pesadas de diferentes classes, tais como , e . Os mecanismos pelos quais os sinais do CD40
induzem a troca de isotipos no esto bem definidos. As diferentes citocinas que regulam a troca de
isotipos das cadeias pesadas so constitudas de diferentes subpopulaes de clulas T auxiliares que
so geradas em resposta a distintos tipos de microrganismos. Para que haja alterao no isotipo
mediante citocinas (e natureza do antgeno), deve haver uma alterao na cadeia pesada (Fc),
ocorrendo a chamada recombi nao de troca, processo no qual um segmento do gene VDJ
rearranjado recombina-se com um gene da regio C e o DNA interposto deletado.
Resposta Primria x Resposta Secundria
Primeiramente, na resposta primria, h
uma grande produo de IgM, o qual vai sendo
gradativamente trocado por IgG, sendo
predominante da resposta secundria. Isso acontece
porque na resposta primria h uma secreo basal
de IgM. J na resposta secundria, devido ao
grande nmero de clulas de memria que reagiram
mas no secretaram anticorpos durante a resposta
imune, h uma grande produo de IgG por estas
clulas.
Eventos Tardios da Resposta Imune Dependente de Clulas T
Os eventos tardios nas respostas anticorpos dependentes de clulas T auxiliar, incluindo a maturao
da afinidade e a gerao de clulas B de memria, ocorrem nos centros germinativos dos rgos linfides. O
centro germi nati vo uma regio levemente corada no folculo determinada por uma regio em que h grande
proliferao de LB. O tempo de duplicao dessas clulas B em proliferaa no centro germinativo estimado
em 6 a 12 horas, de modo que dentro de 5 dias um nico linfcito poder dar origem a uma prognio de quase
5000.
A formao dos centros germinativos depende da presena de clulas T auxiliares e das interaes
CD40 com o CD40L, e por isso observada apenas nas respostas de anticorpo aos antgenos proticos
dependentes de clulas T auxiliares.
Nessa fase tardia, acontece dois eventos fundamentais para uma efetiva resposta humoral:
Maturao da afi ni dade dos anti corpos: ocorre
mutaes somticas nos genes da Ig e seleo de
clulas de alta afinidade. Esta maturao o
processo que induz o aumento da afinidade dos
anticorpos para um antgeno particular medida que
a resposta humoral T-dependente progride e
resultado da mutao somtica dos genes de Ig,
seguida da sobrevivncia seletiva de clulas B que
esto produzindo anticorpos com a mais alta
afinidade.
Gerao de cl ul as B de memri a e respostas
i munes humorai s secundri as: algumas das
clulas B ativadas por antgenos no se desenvolvem
em clula secretoras de anticorpos. Em vez disso,
adquirem a capacidade de sobreviver durante longos
perodos aparentemente sem estimulao antignica,
formando as cl ul as de memri a. possvel dizer
que as clulas de memria sejam continuamente
geradas e mantidas por um baixo nvel de
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
estimulao pelos antgenos, que so exibidos pelas clulas dendrticas foliculares durante meses ou
anos.
Resposta de Anticorpos para Antgenos T-Independentes
Todos os mecanismos estudados neste captulo at agora se tratava de respostas a antgenos
dependentes de clulas T, sendo estes antgenos de natureza protica. Porm, muitos antgenos no
proticos, tais como polissacardeos e lipdeos, estimulam a produo de anticorpos na ausncia de clulas T
auxiliares, esses antgenos so designados ti mo-i ndependentes ou T-i ndependentes.
Ao contrrio das repostas descritas anteriormente, os anticorpos que so produzidos na ausncia das
clulas T auxiliares so em geral de baixa afinidade, consistem principalmente de IgM, com limitada troca de
isotipos para alguns subtipos de IgG, e tm pouca memria nas situaes experimentais.
A resposta aos antgenos proticos uma resposta mais qualificada. J os antgenos constitudos de
natureza no-protica so menos patognicos, de tal modo que o LB sozinho capaz de destrulos. Os mais
importantes antgenos TI so polissacardeos, glicolipdeos e cidos nuclicos.
Ag TIMO DEPENDENTE Ag TIMO INDEPENDENTE
NATUREZA QUIMICA Protenas Polissacardeos , Glicolipdios
MUDANA DE ISOTOPO SIM ( Ig M, IgG, IgE, IgA) POUCO (IgM)
MATURAAO DA
AFINIDADE
SIM POUCO
RESPOSTA SECUNDARIA SIM POUCOS CASOS
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
ATIVAO DOS LINFCITOS T
(Prof Karina Carla)
Da mesma forma que acontece com a clula B, os linfcitos T tambm participam da resposta imune,
seja ela humoral ou celular. A ativao e fases efetoras das respostas imunes adquiridas medidas pelas clulas
T so desencadeadas pelo reconhecimento do antgeno especfico pelos LT.
Estgio de Maturao do Linfcito T
Assim como os LB, o LT oriundo da linhagem linfide originada a partir de uma stem cell, presente na
medula ssea, que apresenta marcadores fenotpicos prprios que a caracterizam como uma clula
imatura e indiferenciada: presena do CD44 e ausncia do CD25.
Em um prximo passo do desenvolvimento, j no timo, h um ganho do CD25, diferenciando-se na
chamada Cl ul a Pr-T que, com o passar de um certo tempo, diferencia-se em Cl ul a Pr-T. Se a clula
apresenta CD25 (que um receptor de IL-2, principal citocina de ativao de LT), significa dizer que esta
se encontra no timo.
No timo, inicia a expresso das molculas co-estimuladoras nessas clulas (que eram previamente duplo
negativa) e passam a ser designadas como cl ul as T dupl o-posi ti vo, apresentando CD8 e CD4. Esse
carter duplo positivo determina a sua semi-maturao. Nesta fase, h o incio da expresso do TCR e do
CD3.
Em seguida, com os processos de seleo
positiva e negativa do timo, h a perda de um
dos grupos de diferenciao do LT, tornando-o
LT uno-posi ti vo ou Li nfci to T i maturo (LT
citotxico: CD8+CD4-; ou LT auxiliar: CD8-
CD4+).
No momento em que o LT imaturo cai na
corrente sangunea, ele sofre sua maturao
final, tornando-se Li nfci to T maduro. Estando
maduro, j como LTc ou LTa, estas clulas
seguem na corrente sangunea. A ativao
destas clulas necessita somente do
reconhecimento dos complexos peptdeo-MHC
pelo receptor da clula T (TCR ou TCR,
sendo o primeiro mais comum) e as interaes
das molculas acessrias das clulas T com
seus ligantes nas APCs.
OBS: A maturao dos timcitos (LT) pode ser seguida de alteraes na expresso dos
co-receptores CD4 e CD8. A figuda ao lado mostra a anlise de fluxo citomtrico (FACS)
de duas cores do timcito pelo uso de anticorpos anti-CD4 e anti-CD8, cada um deles
marcado com um diferente flurocromo. As porcentagens de todos os timcitos que
contriburam para cada populao principal so mostradas nos quatro quadrantes e as
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
porcentagens das subpopulaes so indicadas nos colchetes. A subsrie menos madura a das clulas CD4-
CD8- (duplo negativas). Esses timcitos amadurecem em CD4+CD8+ (duplo-positivas) que representam a
populao mais numerosa do timo, e essas clulas amadurecem em clulas CD4+CD8- uno-positivas ou em
CD4-CD8+.
Receptores e Co-Estimuladores dos Linfcitos
TCR: sintetizado por genes altamente polimrficos. O TCR
responsvel pelo reconhecimento do antgeno restrito ao MHC.
CD3: molcula que caracteriza os LT e est ligada no-
covalentemente ao TCR. Compe o complexo TCR juntamente a
cadeia e TCR e particpa da transduo do sinal.
Cadeia (zeta): tambm est ligada ao TCR, assim como o CD3, por
meio de uma ponte de dissulfeto. Tambm responsvel em parte
pelos eventos bioqumicos que induzem a ativao funcional dos LT.
CD4/CD8: so co-receptores envolvidos na ativao de clulas T
restritas ao complexo de histocompatibilidade principal (MHC).
CD28: co-estimulador de membrana que transduz sinais que
funcionam em conjunto com os sinais liberados pelo complexo TCR
para ativar as clulas T virgens.
Integrinas: so protenas heterodimricas expressas nos leuccitos,
cujos domnios citoplasmticos ligam-se com o citoesqueleto da outra
clula que compe a sinapse imunolgica, aumentando assim a
durao do tempo de interao.
Ativao de LT Virgem e LT Efetor
Aps ser produzida na medula, amadurecida no timo
e chegar aos tecidos perifricos e linfonodos, a clula T
virgem encontra-se pronta e com os marcadores adequados
para ativar-se por meio da interao com antgenos. Para
isso, a APC, aps captar e processar o antgeno, realiza a
apresentao antignica, via MHC-peptdeo, apresenta e
ativa o LT. Essa apresentao deve ter o mximo de eficcia
possvel, uma vez que o LT ainda virgem. Para tanto, a
APC mais qualificada para esta tarefa a clula dendrtica
que, de fato, realiza esse papel.
Aps este processo de apresentao e ativao no
linfonodo, o LT ativo deve migrar para os possveis focos de
infeco por este antgeno e sofre outra
apresentao ao agente invasor, mas esta
apresentao no necessita ser to eficaz,
podendo ser realizada por qualquer tipo de APC
(macrfago, clula dendrtica ou LB), ativando
ainda mais o LT o qual exercer a sua funo
efetora.
O fato do LT estar ativo, faz com que
ele possa seguir duas funes distintas: (1) agir
e realizar a sua funo citotxica (LT CD8+) ou
sua funo auxiliar e ativadora de LB e
macrfagos (LT CD4+); (2) reconhecer e
diferenciar-se em clulas de memria para que,
na prxima infeco por este antgeno, haja
uma resposta de forma mais rpida e eficaz.
Na ativao da clula T, h uma
transduo do sinal que tem como uma de suas
respostas efetoras, uma maior expresso do
CD25, receptor de IL-2 (esta citocina tambm
passar a ser produzida pelo prprio LT). Isso gera, cada vez mas, uma maior e mais eficaz ativao desses
linfcitos T, desencadeando uma expanso clonal, para uma resposta mais eficaz contra o agente invasor.
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PAPAEL DOS CO-ESTIMULADORES NA ATIVAAO DOS LT
A proliferao e diferenciao das clulas T requer sinais que as molculas co-estimuladoras enviam
para as APCs, alm dos sinais induzidos pelo antgeno. H, como j vimos, um mecanismo envolvendo dois
sinais: (1) o primeiro sinal expedido pelo MHC-peptdeo e TCR (e ao co-receptor CD4 ou CD8), culminando
no si nal 1; (2); o segundo sinal para a ativao da clula T fornecido por molculas chamadas co-
esti mul adoras, porque funcionam em conjunto com o antgeno para estimular as clulas.
A via co-estimuladora mais bem caracterizada na ativao da clula T envolve o CD28, uma molcula
de superfcie das clulas que se liga s molculas co-estimuladoras B7-1 (CD80) e B7-2 (CD86), expressas
nas APCs ativadas. O CD28 libera sinais que facilitam muitas respostas das clulas T ao antgeno, incluindo a
sobrevivncia da clula, a produo de citocinas (tais como a IL-2 que vai ativar a mesma clula que o
produziu via CD25), e a diferenciao das clulas T virgens em clula efetoras.
Quando o LT ativado, h a expresso de CD40L por ele, que se liga ao CD40 que j estava expresso
na APC. Quando ocorre a interao
do CD40-CD40L, h um sinal para a
APC para que ela expresse mais co-
estimuladores, como o B7, que
interage com o CD28 pr-existente no
LT, aumentando ainda mais a
interao na sinapse imunolgica.
Este conjunto de interaes, somado
secreo de IL-2 e citocinas (que
ativam ainda mais o LT), o
suficiente para a ativao extrema e
efetiva das clulas T.
Transduo de Sinal na Ativao dos LT
A transduo de sinais pelo TCR estabelece a relao entre o antgeno e as repostas funcionais. O
reconhecimento do antgeno inicia uma seqncia de sinais bioqumicos nas clulas T que resultam na
ativao transcricional de genes especficos e a entrada das clulas no ciclo celular.
A resposta celular das clulas T aos antgenos consiste de distintos estgios: eventos de membrana,
que ocorrem dentro de segundos aps o reconhecimento do antgeno; vias de transduo de sinais
citoplasmticas, que so ativadas dentro de minutos; e transcrio de novos genes, que detectvel dentro de
algumas horas.
Inicialmente, h a apresentao
antignica: MHC-peptdeo-TCR. O CD4/CD8,
por sua vez, liga-se a uma regio especfica
no-polimrficas do MHC da APC por sua
extremidade extra-citoslica, ao passo em que
a sua extremidade citoslica (cauda) apresenta
uma protena tirosina-quinase (representada na
figura pela Lck, da famlia da Src). Esta Lck
colocada ento na proximidade dos ITAMs nas
cadeias CD3 e da , fosforilando as tirosinas
desses ITAMs.
A tirosina fosforilada das ITAMs na
cadeia torna-se local de ancoramento
especfico para uma tirosina quinase chamada
de ZAP-70 (semelhante ao Syk os LB), uma
protena tirosina-quinase diferente da famlia da
Src. Esta ZAP-70 contm dois domnios
conservados, designados como domnios Src
de homologia-2 (SH2), que podem se ligar s
fosfotirosinas. Cada ITAM da cadeia deve
possuir pelo menos dois resduos de tirosina
fosforilada para servir de doca para uma
molcula de ZAP-70. Ao sofrer interao por
estes resduos fosforilados, a ZAP-70 se fosforila e adquire sua prpria atividade de tirosina-quinase e ento
capaz de atuar sobre um certo nmero de molculas citoplasmticas sinalizadoras. Dentre elas, a ZAP-70 ativa
fosforilando duas protenas adaptadoras que serviro como chave para vrias outras cascatas de sinalizaes
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dentro da ativao dos LT: a LAT e a SLP-76. Do-se incio, ento, as cascatas bioqumicas intermedirias
para a produo dos fatores de transcrio:
Vias da protena quinase C (PKC): a sinalizao do TCR induz a ativao da isoforma 1 da enzima
fosfolipase C (PLC1), e os produtos da hidrlise dos lipdeos de membrana mediada pela PLC1
ativam enzimas que geram fatores de transcrio adicionais nas clulas T. Dentre os produtos finais,
temos o IP
3
(que produz um rpido aumento do Ca
2+
citoslico livre, dentro de minutos de ativao de
ativao do LT) e o DAG (segundo produto da degradao do PIP
2
, ativa a enzima PKC, que tambm
participa na gerao de fatores de transcrio ativos).
Via das MAP-quinases: tambm denominada da via de sinalizao Ras e Rac nos linfcitos T. Esta
via nas clulas T ativada depois da ligao da protena Ras s molculas adaptadoras que foram
fosforiladas pela agregao do TCR, e a ativao de Ras finalmente leva ativao dos fatores de
transcrio.
VIA DA MAP-QUINASE NA ATIVAAO DO LT
A protena adaptadora LAT fosforila e ativa, inicialmente,
a Grb-2, segunda protena adaptadora presente na cascata da
MAP-quinase. Esta Grb-2, uma vez ativada, recruta e ativa uma
protena Sos, responsvel por trocar uma molcula inativa
(RasGDP) em uma molcula ativa (RasGTP). A Ras, uma vez
ativa (na forma de RasGTP), atua em outras protenas que
entram no ncleo e atuam em fatores de transcrio.
O RasGTP age, indiretamente, sobre a protena ERK
citoslica que, quando fosforilada, tem a capacidade de entrar
no ncleo da clula. Esta ERK tem a capacidade de fosforilar
outra protena denominada ELK. Uma vez fosforilada, a ELK
entra no ncleo da clula e ter e funo de atuar diretamente
sobre o gene da protena Fos. Esta Fos, quando transcrita,
compe (juntamente a protena Jun, oriunda da cascata da
RacGTP) o fator de transcrio chamado de AP-1. Esta AP-1 se associa com outros fatores de transcrio
(NFAT e NF-B, associados a Via da PKC) para transcrever IL-2 (ver mais adiante: FATORES DE
TRANSCRIO NA ATIVAAO DO LT).
VIA DA PLC NA ATIVAO DE LT
A protena adaptadora LAT recruta
protenas citoslicas para suas redondezas no
intuito de dar incio a esta via de ativao por
meio da PLC. Inclusive esta, a PLC1,
recrutada na forma inativa, fosforilada (tanto pela
LAT quanto pela ZAP-70) e ativada.
Uma vez ativa, a PLC (como o prprio
nome j indica: fosfo-lipase C) quebra lipdios
PIP
2
(bifosfato inositol) da prpria membrana
plasmtica, gerando como subprodutos o IP
3
(trifosfatidilinositol) e o DAG (diacilglicerol).
O IP
3
, depois de se dirigir ao citoplasma,
responsvel por ativar o retculo
endoplasmtico celulares e faz-lo liberar
ons Ca
2+
, aumentando a concentrao
desse on no meio citoslico, importante
para a ativao da clula.
O DAG lipoflico, permanecendo na membrana lipdica, para ativar a PKC. O DAG capaz de ativar a
PKC quando se liga ao Ca
2+
citoplasmtico, o que demonstra a importncia da interao dessas duas
vias. Quando o PKC est ativo, torna-se responsvel pela estimulao de outras vias (como as que
foram vistas previamente) que, em conjunto, auxiliam na ativao do LT.
Esta via da PLC de extrema importncia para a sntese dos fatores de transcrio NFAT e NF-B,
responsveis por formarem um complexo com o AP-1 (que j foi estudado anteriormente) para a formao do
fator de transcrio da IL-2.
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
FATORES DE TRANSCRIO NA ATIVAAO DO LT
Via AP-1: como vimos previamente, a AP-1 produzida por meio da via das MAP-quinases.
Via NF-B: Existe uma protena citoslica
inativa chamada de iNF-B (=kappa), sendo
constituda de um trade: o IB (inibidor de
B+NF-B). Com a ao de uma PKC, que
fosforila o inibidor da B, a NF-B torna-se
capaz de se desprender de seu inibidor e se
tornar ativo. Dessa forma, o NF-B capaz
de atravessar a membrana nuclear e
alcanar o ncleo para tambm constituir
(juntamente ao AP-1) o fator de transcrio
da IL-2, responsvel pela ativao efetiva do
LT.
Via NFAT: por esta via, h a formao do
NFAT, o terceiro fator de transcrio da IL-2.
A protena citoplasmtica NFAT encontra-se
inativa quando fosforilada. Com isso, ela
deve ser desfosforilada pela enzima
calcineurina (que ativa quando associada
ao complexo Ca
2+
-Calmodulina) formando a
NFAT ativa. Esta capaz de penetrar no
ncleo do LT, se unir ao AP-1 e ao NF-B,
para constituir o fator de transcrio do IL-2.
A maioria dos medicamentos
imunossupressores atua inibindo esta via
(inativando a ao desfosforiladora da calcineurina).
OBS: A trade de transcrio da IL-2 composta:
NF-B + NFAT + AP-1 (Fos e Jun)
Arlindo Ugulino Netto IMUNOLOGIA I MEDICINA P3 2008.2
FAMENE
NETTO, Arlindo Ugulino.
IMUNOLOGIA I (DESATUALIZADO)
VACINAS E SOROS
(Prof Karina Carla)
Os mecanismos de imunidade podem ser de dois tipos: (1) resi stnci a natural (inata, ou seja,
geneticamente herdada como por meio do leite materno ou placenta e sua funo protetora no
especfica); (2) i muni dade adqui ri da (induzida e especfica).
Porm, a imunidade pode ser naturalmente adquirida de duas formas: ativa e passiva. Na i muni dade
ativa, as clulas do indivduo so ativadas pelos microrganismos, ocorrendo proliferao de clones especficos
de linfcitos T e B, que so mantidos no organismo, durante anos, como clulas de memria. Na i muni dade
passi va, as clulas do indivduo no so ativadas, mas os produtos da ativao dos LB, ou seja, os anticorpos,
so recebidos prontos.
A aquisio da imunidade passiva ocorre apenas na fase inicial da vida,quando os anticorpos da classe
IgG passam pela placenta e os da classe IgA, pelo leite materno. A criana tem apenas capacidade de,
ativamente, produzir IgM (sendo que este no apresenta ainda capacidade de alterar seu isotipo).
Tendo em vista esses dois conceitos de imunidade ativa e passiva, podemos induzi-las de duas
formas:
Ativa, pelo uso de vaci nas, que so formas modificadas, menos virulentas, do agente causador da
infeco, o que faz com que o nosso sistema imune, de maneira ativa, crie seu prprio mecanismo de
defesa (como a produo de clulas de memria para uma futura resposta mais veloz e eficaz);
Passiva, pelo uso de soros ou imunoglobulinas, especficos ou no.
Vacinas
Por meio das vacinas, aplica-se o patgeno atenuado em um paciente sadio, o qual ativar seu
sistema imunolgico, passando a produzir clulas de memria que vo previnir uma futura infeco desse
patgeno. Baseia-se, portanto, em um mecanismos de preveno.
As vaci nas (cujo nome advm de vaccinia, o agente infeccioso da varola bovina, que, quando
injectado no organismo humano, proporciona imunidade varola no ser humano) so substncias, como
protenas, toxinas, partes de bactrias ou vrus, ou mesmo vrus e bactrias inteiros, atenuados ou mortos, que
ao serem introduzidas no organismo de um animal, suscitam uma reao do sistema imunolgico semelhante
que ocorreria no caso de uma infeco por um determinado agente patognico, desencadeando a produo de
anticorpos que acabam por tornar o organismo imune ou, ao menos mais resitente, a esse agente (e s
doenas por ele provocadas).
So, geralmente, produzidas a partir de agentes patognicos (vrus ou bactrias), ou ainda de toxinas,
previamente enfraquecidos. Ao inserir no organismo esse tipo de substncias, fazemos com que o corpo
combata o agente levando estimulao a sntese de anticorpos, que protegem o nosso organismo, alm de
desenvolver a chamada memria imunolgica, tornando mais fcil o reconhecimento do agente patognico em
futuras infeces e aumentando a eficincia do sistema imune em combat-lo. Quando o corpo atacado por
algum agente patognico o organismo encontra-se protegido.
HISTRICO
430 a.C.: o historiador Tucdides observou que as pessoas recuperadas da praga de Atenas (peste
bubnica, causada por Yersina pestis) ficavam protegidas de uma segunda infeco fatal.
2 mil anos depois, no final do sculo XVII: a idia da imunizao artificial comeou a se delinear,
resultando numa das maiores conquistas da imunologia: a vacina.
1720 Variolao: preveno da varola em indivduos por meio do uso de secrees oriundas das
pstulas de pacientes acometidos pela doena, porm de maneira branda.
1721: na Inglaterra, usava-se clinicamente a variolao pelo contato com o material proveniente de
indivduos com uma forma mais branda da doena.
1796: O mdico ingls Edward Jenner, observando ordenhadeiras, aps o contato com a varola bovina
(cowpox-vacnia), ficavam protegidas da varola humana (smallpox), iniciando uma prtica que um
sculo mais tarde viria ser chamada vaci nao, por Louis Pasteur. O criador da primeira vacina, contra
a varola, foi, de fato, Edward Jenner. Em 1796 Jenner observou que as vacas tinham nas tetas feridas
iguais s provocadas pela varola no corpo de humanos. Os animais tinham uma verso mais leve da
doena, a varola bovina. Ao observar que as moas responsveis pela ordenha, que comumente
acabavam infectadas pela doena bovina, quando expostas ao vrus humano tinham uma verso mais
suave da doena, ele recolheu o lquido que saa destas feridas e o passou em cima de arranhes que
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ele provocou no brao de um garoto. O menino teve um pouco de febre e algumas leses leves, tendo
uma recuperao rpida.
Os trabalhos de Pasteur apresentaram uma lgica similar de J enner, mas fundamentada em trabalho
laboratorial. Ele observou que bacilos da clera aviria (Pasteurella septica) tornavam-se menos
virulentos por envelhecimento ou aumento de temperatura e induziam a uma resposta protetora diante
de uma infeco virulenta; baseado nessas observaes, ele comeou a cultivar diferentes agentes
infecciosos atenuados com a finalidade de produzir vacinas.
OBS: Datas de Introduo das vacinas mais comuns: 1798 Varola; 1885 Raiva; 1923 Difteria; 1927
Tuberculose; 1927 Ttano; 1935 Febre amarela; 1955 Polio injectavel (VIP); 1962 Polio oral (VAP); 1964
Sarampo; 1970 Rubola; 1981 Hepatite B.
TIPOS DE VACINA
As primeiras vacinas produzidas por J enner e Pasteur foram provenientes de mi crorgani smos vi vos
atenuados. Alm dessas, h atualmente vacinas que utilizam mi crorgani smos mortos ou i nati vados. Ambos
os tipos apresenta vantagens e desvantagens.
Vaci nas com mi crorgani smos atenuados: podem ser produzidas por meio de diversas tcnicas. Este
tipo de vacina produzida com microrganismos de baixa virulncia indutores de reao cruzada (por
eio de um vrus que apresenta determinantes antignicos semelhantes ao vrus que se deseja prevenir,
o que leva ativao de clones de linfcitos T e B que propiciam uma reao cruzada), Ex: vacina
contra febre tifide; bem como podem ser produzidas com microrganismos virulentos atenuados em
cultura (consiste na atenuao do agente infeccioso por passagens sucessivas em meios de cultura),
Ex: BCG (vacina contra a tuberculose). Em resumo, podemos destacar duas tcnicas distintas:
o Mtodo de Pasteur: o objetivo deste mtodo seria atenuar em cultura para que haja a perda da
patogenicidade e a ativaao do sitema imune, no intuito de evitar a infeco. A tcnica se baseia
no tipo de agente a ser inoculado: (1) bactrias: passagens sucessivas do meio de cultura com o
microorganismo por um longo perodo; (2) vrus: manuteno em clulas no-humanas, fazendo
com que ele perca a sua patogenicidade.
o Mtodo de Jenner (reao cruzada): uso de microorganismos de espcies diferentes (e
preferencialmente, no patognica) que compartilham determinantes antignicos dos
patognicos, o que gera uma reao cruzada do organismos que, ao mesmo tempo que fabrica
anticorpos para lutar contra um peptdeo no patognico, produz meios de defesa contra
peptdeos semelhantes, mas patognicos. Ex de vacinas virais: sarampo, rubola, caxumba,
poliomielite, febre amarela. Ex de vacinas bacterianas: tuberculose.
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Vaci nas produzi das com peptdeos si ntti cos: por meio da identificao e isolamento dos
determinantes antignicos de um agente infeccioso, fazendo uso da tecnologia do DNA recombinante,
tem-se propiciado que peptdeos sintticos sejam produzidos em grande quantidade. Para que um
peptdeo sinttico seja produzido, o seu gene precisa ser clonado e inserido em clulas de inseto ou
bactrias para que estas secretem grande quantidade desses antgenos. Esses peptdeos sintticos
so, em geral, compostos de 10 a 20 aminocidos e quando so inoculados, se no forem degradados
totalmente dentro das APCs, muito pouco provvel que um nmero suficiente de molculas se acople
diretamente a molcula do MHC-II. Para superar este problema, os peptdeos so associados a
mol cul as carreadoras proti cas (lipossomos) e administrados com adj uvantes (como citocinas),
que aumentam a resposta inflamatria por estimular o sistema imune.
Vaci nas de DNA recombi nantes i nseri do em vetores de bai xa vi rul nci a: os genes indutores da
expresso de peptdeos antignicos devem ser reconhecidos e clonados. Esses genes so ento
introduzidos em microrganismos de baixa virulncia natural, como o BCG e o vrus da vacnia. Esses
microrganismos nos quais o gene introduzido so chamados de qui mri cos, pois expressam
determinantes antignicos no normalmente presentes em sua estrutura. Os microrganismos
quimricos so inoculados e fagocitados, processados e apresentados pelas molculas de MHC.
Dessa forma, esse tipo de vacina reproduz vias naturais de infeco e propiciam que as respostas
celulares (MHC-I apresentam aos LT citotxicos) e humorais (MHC-II apresentam aos LT auxiliares).
Vaci nas baseadas em toxi des (vaci nas com antgenos puri fi cados): as toxinas tambm podem
ser inativadas tornando-se formas atxicas (perde sua antigenicidade, mas ainda preserva sua
imunogenicidade) denominadas toxi des ou anatoxi nas, como no caso das vacinas antitetnicas e
antidiftrica. Faz-se uso das toxinas inativas de microrganismos patognicos cujo mecanismo de
patogenicidade se d por essas toxinas. E esta forma como elaborada, faz com que o organismo crie
mecanismos imunes para atenuar estas toxinas. Ex: vacina contra difteria e ttano.
Vaci nas de DNA: faz-se uso de plasmdios contendo cDNA codificando protenas importantes na
induo imunidade. Genes de citocinas e de molculas co-estimuladoras podem ser associados ao
DNA, aumentando a resposta imune.
Vaci nas com mi crorgani smos i nati vados: microrganismos podem ser inativados pelo calor, por
agentes qumicos (formaldedo, fenol) ou pela radiao. Mesmo com o microrganismo atenuado, seus
determinantes antignicos continuam capaz de desencadear uma resposta imune. Ex de vacinas virais:
poliomielite, raiva, hepatite A, inflenza.
VANTAGENS E DESVANTAGENS
FATORES IMPORTANTES NA ADMINISTRAO DA VACINA
Doses da vaci na: dependendo de como a vacina foi produzida e de sua capacidade de produzir
respostas imunes, a vacina pode ser administrada em uma nica dose ou em doses reforadas. Uma
nica dose de vacina suficiente no caso de microrganismos vivos atenuados. J no caso da
administrao de poliovruos, caso ocorra infeco enteroviral intercorrente ou a administrao de trs
tipos de vrus, devem ser repetidas as imunizaes, pela reduo na atividade da vacina. Em relao
ao intervalo entre a primeira e as doses de reforo, este depende tanto de consideraes tericas
quanto de observaes clnicas.
Mi crosgani smos Vi vos Atenuados:
o Vantagens: so administrados por
meio de uma nica e forte dose
(mas, dependendo do paciente,
pode haver a necessidade de
novas doses); ativam a R.I. tanto
humoral quanto a celular.
o Desvantagens: pode haver
reaes Inflamatrias locais e
sistmicas; pode haver mutao
do microorganismo e este se
tornar mais virulento.
Mi crosgani smos Inati vados
o Vantagens: por desencadear uma
fraca R.I. humoral e celular,
praticamente ausente a incidncias
de reaes inflamatrias.
o Desvantagens: Doses repetidas.
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Vi as de admi ni strao: quando os antgenos presentes na vacina so vivos atenuados e a infeco
natural ocorre pela mucosa, estes podem ser administrados pela via oral. As vacinas com vrus e
bactrias que infectam as vias respiratrias podem ser administradas via i ntranasal ou por aerossol ,
estimulando o sistema imune das mucosas das vias areas. As vacinas com adjuvantes, como o
hidrxido de alumnio, devem ser administradas por via i ntramuscul ar profunda (de preferncia, na
poro antero-lateral da parte superior da coxa) e no pela via subcutnea, porque podem causar
necrose tecidual.
Adj uvantes: so formulaes diversas que permitem a
liberao lenta dos antgenos, o que propicia maior
migrao celular e resposta imune mais eficiente.
Alguns tipos de adjuvantes tambm apresentam a
capacidade de ativar os macrfagos induzindo
produo de citocinas pr-inflamatrias, o que aumenta
a resposta imune. Entre os adjuvantes de depsito usa-
se hidrxido de alumnio, fosfato de alumnio, sulfatos
duplos de potssio e de alumnio (almen), fosfato de
clcio e tartaratos de alumnio e de potssio. O
complexo formado entre a adjuvante+antgeno
apresenta as seguintes funes:
Fazer com que o antgeno seja liberado de
forma lenta e, quanto mais tempo o antgeno
permanece exposto ao organismo, favorecendo
uma efetiva resposta imune.
Ativa macrfagos;
Induz citocinas pr-inflamatrias
Resposta Imune mais eficiente
Estado de sade do paci ente: a ocorrncia de efeitos
adversos aps a administrao de vacinas muito rara
na maioria das pessoas com sistema imune saudvel. Podem ocorrer problemas no caso de reaes
alrgicas a componentes antignicos, os adjuvantes e conservantes, a protenas da gema de ovo
(sarampo, caxumba, influenza e febre amarela) ou aos antibiticos presentes nas vacinas. Como
efeitos adversos mais comuns, relatam-se:
Reaes alrgicas com componentes da vacina (conservantes, adjuvantes, antibiticos)
DPT: febre, irritabilidade, edema, dor local
SABIN: paralisia (quando o antigeno sofre mutao: forma avirulenta forma virulenta)
DIFICULDADE DA PRODUAO DE NOVAS VACINAS
Existncia de reservatrios animais: o fato de um microrganismo apresentar como reservatrio natural
um animal, dificulta bastante a produo de vacinas;
Alta infectividade;
Complexos ciclos de vida do microorganismo;
Variabilidade Antignica: quanto maior o nmero de determinantes antignicos, maior a dificuldade na
produo.
Custo
Soro
O soro uma forma de imunizao passiva de efeito rpido, em que se administra diretamente o
anticorpo ao paciente doente no intuito de inativar o patgeno, obtendo como resultado a recuperao da
infeco. Baseia-se, portanto, em um mecanismo de tratamento.
A imunizao passiva usada em casos de imunodeficincias primrias de linfcitos B, e quando o
paciente apresenta quadro de infeco por no ter sido vacinado.
Esse tipo de imunizao pode ser realizado com i munogl obul i na humana normal (gamaglobulina
normal ou comercial), com i munogl obul i nas humanas especfi cas e com soros especficos. As
imunoglobulinas podem ser administradas por via intramuscular ou endovenosa.
IMUNOGLOBULINAS
A i munogl obul i na humana normal (IHN) obtida de plasma de doadores de sangue em geral. A
tecnologia empregada para a purificao das Ig propicia a precipitao de IgG, que consiste em 85% das
imunoglobulinas; as concentraes menores so de IgM (10%) e de IgA (5%). A via de escolha intramuscular
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ou endovenosa e a concentrao de imunoglobulinas depende da qualidade do doador. Os inconvenientes da
administrao so: dor no local, mal-estar, febre, reaes anafilticas. Esse tipo de imunoglobulina pode ser
usado na profilaxia da hepatite A e B, rubola, sarampo, varicela.
As i munogl obul i nas especfi cas so obtidas de plasma de doadores selecionados: pessoas
submetidas recentemente vacinao contra determinado microrganismo ou convalescentes da doena que
se quer evitar. Faz uso da Tcnica de Purificao e purificao Ig especfica e escolha da via intramuscular ou
endovenosa. Esse tipo de imunoglobulina usado nos casos de Hepatite B, raiva, ttano, varicela.
SOROS ESPECFICOS
Os soros utilizados de forma teraputica na espcie humana so produzidos, na maior parte das vezes,
em cavalos e por isso so soros heterl ogos. Esses soros, por apresentarem molculas diferentes em
relao s humanas, podem induzir resposta imune e causar choque anafiltico ou hipersensibilidade do
complexo imune em casos de administraes consecutivas.
A tcnica utilizada a transferncia do soro (pool de anticorpos) para um animal de outra espcie
(como de um cavalo para o homem), sendo tratados previamente com enzimas proteolticas.
Desvantagens: Choque Anafiltico, Imunocomplexos (inflamao)
Uso: Antidiftrica, antirbica, antitetnica