CONTAJE DE RETICULOCITOS Los reticulocitos son eritrocitos juveniles que contienen

remanente de cido ribonucleico ribosomal, el cual est presente en grandes cantidades en el citoplasma de los eritrocitos. El nmero de reticulocitos en sangre perifrica es un reflejo del grado de actividad eritropoytica. Los ribosomas tienen la propiedad de reaccionar con ciertos tintes tales como azul brillante de cresilo, azure B o nuevo azul de metileno, formando un precipitado azul de grnulos o filamentos. Esta reaccin se produce solo en preparaciones vitales no fijadas. El reticulocito, mientras ms inmaduro, va a presentar mayor cantidad de material precipitado. De acuerdo a la cantidad del material, se clasifican los eritrocitos en 4 grupos de maduracin. El recuento se puede realizar por tincin y examen microscpico o contadores hematolgicos. La muestra que se utiliza es sangre total con EDTA. Este examen debe ser realizado dentro de las 6 horas de trabajo en el laboratorio. Contaje Manual: Se mezclan volmenes iguales de sangre con EDTA y tres gotas del colorante (azul brillante de cresilo). La exacta cantidad de sangre que se utiliza, depende del estado de salud del paciente (en anemia, requiere mayor cantidad de sangre, paciente poligloblicos requiere menor cantidad de sangre. Colocar a 37 c, por 5 min (establece laboratorio el tiempo) Resuspendo las clulas con una ligera agitacin Se realiza un frotis, en el portaobjetos Dejar secar el frotis. Observar con lente 40 x y 100x (inmersin).
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Para el contaje se ubica un rea donde las clulas no estn distorsionadas. Es incorrecto realizar frotis delgados donde las clulas estn muy separadas. En un frotis adecuado buscamos campos donde las clulas no estn demasiado sobremontadas. Se cuentan 10 campos de 100 glbulos rojos bien distribuidos y dentro de esos 10 campos cuntos reticulocitos fueron contados?? Se saca por regla de tres: 1000 GR 100 70 X = 7%

El valor referencia de reticulocitos en recin nacido de 2-6 % y en adulto 0.5 a 2.0 %. Cuando disminuye el nmero de eritrocitos tal como sucede en una anemia, el valor porcentual debe corregirse segn el hematocrito empleando la siguiente frmula: Hct paciente / Hct normal x valor de reticulocitos observados en % = reticulocitos corregidos %. En caso de anemia intensa, el nmero de reticulocits circulantes suele ser superior al que corresponde al grado de regeneracin eritroblstica. Ello obedece a que la anemia se acompaa siempre de un estmulo eritropoytico compensador, que facilita una salida precoz de reticulocitos desde la mdula a sangre perifrica, y un acortamiento de su periodo de maduracin intramedular, lo que supone un aumento del periodo de maduracin perifrica. Con esto se observar en sangre

perifrica

con

tincin

Wright,

glbulos

rojos

grandes

(macrocitos) y de una tonalidad azulada (policromasia). Como se observa existe una relacin inversa, aproximadamente lineal, entre el hematocrito y el periodo de maduracin perifrica de reticulocitos. De esta forma puede calcularse otra magnitud de inters clnico denominada ndice de produccin reticulocitaria (IPR) o ndice de maduracin reticulocitaria (IMR) Cuanto ms severa es la anemia ms inmaduro es el reticulocito liberado, por tanto el IPR es el indicador ms preciso de una adecuada respuesta medular frente a la anemia.

HEMATOCRITO

DAS DE EN MO

MADURACIN

DAS DE EN SP

MADURACIN

15 25 35 45

1 2 2 3

3 2 1 1

IPR = % reticulocitos corregidos/tiempo de maduracin de los reticulocitos en mo. Un IPR > 3 indica aumento de actividad eritropoytica medular (anemia regenerativoa), mientras que un IPR < 2 indica escasa actividad eritropoytica. CAUSAS DE ERROR EN UN RECUENTO VISUAL DE

RETICULOCITOS. Relacin sangre/colorante insuficiente Realizar un recuento sobre un mnimo reducido de eritrocitos.
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 Realizar el recuento en reas donde los eritrocitos se hallan mal distribuidos o mal inidvidualizados. Confundir los precipitados de ARN con cuerpos de Heinz, cuerpos de Howell.Jolly, precipitados del propio colorante. En casos de esplenectoma, confundir las inclusiones intraeritrocitarias con reticulocitos. Fuente: Tern Ivette, Dra. Documentos de Laboratorio de Hematologa. PUCE. Vives Joan, Aguilar Josep. (2000) Manual de Tcnicas de

laboratorio de hematologa. Masson: Espaa