Texto Completo

JOS RICARDO DE CARVALHO
OTIMIZAO DA METODOLOGIA DE DETERMINAO DE MOLIBDNIO

EM SOLOS E PLANTAS POR VOLTAMETRIA DE ONDA QUADRADA
COM REDISSOLUO CATDICA ADSORTIVA

Dissertao apresentada
Universidade Federal de Viosa,
como parte das exigncias do
Programa de Ps-Graduao
em Agroqumica, para obteno
do ttulo de Magister Scientiae.
VIOSA
MINAS GERAIS BRASIL
2008
JOS RICARDO DE CARVALHO
OTIMIZAO DA METODOLOGIA DE DETERMINAO DE MOLIBDNIO
EM SOLOS E PLANTAS POR VOLTAMETRIA DE ONDA QUADRADA
COM REDISSOLUO CATDICA ADSORTIVA
Dissertao apresentada
Universidade Federal de Viosa,
como parte das exigncias do
Programa de Ps-Graduao em
Agroqumica, para obteno do
ttulo de Magister Scientiae.
APROVADA: 10 de outubro de 2008.
Prof. Csar Reis
(Coorientador)
Prof. Jos Roberto da Silveira Maia
(Coorientador)
Prof. Reinaldo Francisco Tefilo Prof
a
. Gilmare Antnia da Silva
Prof. Efraim Lzaro Reis
(Orientador)
AGRADECIMENTOS
A Deus, por tudo que sou e por tudo que conquistei...
A minha esposa Elenice e filhas Larissa e Raissa pelo amor, pelo
companheirismo, pela compreenso, pela pacincia e ajuda constante.
Ao meu orientador Dr. Efraim Lzaro Reis, pelos ensinamentos,
discusses, sugestes, pacincia e confiana no decorrer deste trabalho.
Ao Dr. Csar Reis e Dr. Jos Roberto da Silveira Maia, pela
coorientao, amizade e ensinamentos, que muito contriburam para o
fechamento deste trabalho.
banca examinadora, por ter aceitado o convite para avaliar este
trabalho.
A todos os amigos do LINQ pela amizade, companheirismo e
incentivo ao longo destes meses.
A Universidade Federal de Viosa e ao Departamento de Qumica
pela oportunidade e apoio incondicional, sem os quais este trabalho no
teria o mesmo xito.
queles que embora no foram citados nominalmente, mas que
contriburam se no com aes, mas com exemplos e incentivo.
iv
NDICE
LISTA DE FIGURAS.................................................................................. vii
LISTA DE TABELAS.................................................................................. x
RESUMO................................................................................................... xii
ABSTRACT................................................................................................ xiv
1. INTRODUO....................................................................................... 1
1.1. Introduo....................................................................................... 1
1.2. Objetivos......................................................................................... 2
2. REVISO BIBLIOGRFICA.................................................................. 3
2.1. Molibdnio...................................................................................... 3
2.2. Mtodos analticos para a determinao de molibdnio................ 7
2.3. O complexante 8-hidroxiquinolina (oxina)...................................... 9
2.4. Introduo voltametria................................................................. 10
2.4.1. Voltametria de onda quadrada.............................................. 12
2.4.2. Voltametria de redissoluo.................................................. 14
2.4.3. Voltametria de redissoluo adsortiva.................................. 17
2.4.4. Voltametria de redissoluo catdica adsortiva.................... 20
2.5. Interferentes em anlises voltamtricas por redissoluo.............. 21
2.6. Quimiometria.................................................................................. 22
2.6.1. Planejamento experimental.................................................. 23
2.6.2. Planejamento fatorial............................................................ 24
2.6.3. Metodologia de superfcie de resposta................................. 25
2.6.4. Significncia e confiabilidade nos experimentos.................. 28
2.7. Validao dos mtodos analticos tcnicas e conceitos.............. 29
2.7.1. Sensibilidade......................................................................... 29
2.7.2. Limite de deteco e quantificao....................................... 30
2.7.3. Seletividade.......................................................................... 30
2.7.4. Preciso................................................................................ 30
2.7.4.1. Repetitividade........................................................... 30
2.7.4.2. Preciso intermediria.............................................. 31
2.7.4.3. Preciso instrumental............................................... 31
2.7.5. Exatido................................................................................ 31
2.7.5.1. Linearidade de uma curva analtica.......................... 31
2.7.5.2. Ensaio de recuperao............................................. 32
v
2.8. Ambiente computacional................................................................. 32
3. MATERIAL E MTODOS...................................................................... 33
3.1. Limpeza do material....................................................................... 33
3.2. Aferio de material volumtrico.................................................... 33
3.3. Reagentes......................................................................................
3.4. Preparo de solues.......................................................................
34
34
3.4.1. Solues para calibrao multivariada................................. 35
3.4.2. Outras solues.................................................................... 35
3.5. Instrumentao............................................................................... 35
3.5.1. Instrumentao para anlises voltamtricas......................... 35
3.5.2. Espectrofotmetro de absoro atmica.............................. 38
3.6. Aquisio e tratamento de dados................................................... 38
3.7. Parmetros eletroanalticos............................................................ 38
3.8. Estudo Inicial da composio do eletrlito..................................... 39
3.9. Planejamento experimental............................................................ 40
3.10. Estudos iniciais para determinaes voltamtricas de Mo(VI)..... 41
3.11. Otimizao da resposta voltamtrica........................................... 41
3.12. Preparo das amostras.................................................................. 42
3.12.1. Solos................................................................................. 42
3.12.2. Vegetais............................................................................ 43
3.13. Aplicao da tcnica de recuperao........................................... 43
4. RESULTADOS E DISCUSSO............................................................. 45
4.1. Otimizao da concentrao de oxina e o eletrlito para a
deteco de Mo(VI)........................................................................ 45
4.1.1. Estudos dos parmetros voltamtricos................................ 45
4.1.2. Planejamento fatorial escolha dos fatores........................ 45
4.2. Otimizao da resposta voltamtrica.............................................. 53
4.2.1. Metodologia para a superfcie de resposta........................... 53
4.2.1.1. Superfcie de resposta............................................. 56
4.3. Aplicabilidade da tcnica otimizada............................................... 58
4.3.1. Linearidade........................................................................... 58
4.3.2. Repetitividade....................................................................... 59
4.3.3. Limite de deteco................................................................
4.3.4. Preciso intermediria..........................................................
4.4. Estudo de interferentes para a anlise de Mo(VI) em solos e
plantas............................................................................................
60
60
60
vi
4.5. Aplicabilidade da tcnica otimizada................................................ 62
4.5.1. Anlise de amostras............................................................. 62
5. CONCLUSES...................................................................................... 67
6. RECOMENDAES FUTURAS........................................................... 68
7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS...................................................... 69
8. APNDICE............................................................................................ 77
vii
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Representao esquemtica de uma zona hipottica de solo
e de vrios processos qumicos que ocorrem numa soluo
de solo..................................................................................... 5
Figura 2. Estrutura do 8-hidroxiquinolina (oxina)................................... 9
Figura 3. Estrutura do complexo com molibdnio (8-hidroxiquinolinato
de molibdnio)......................................................................... 9
Figura 4. (A) Sinais de excitao para voltametria de pulso diferencial.
(B) Voltamograma tpico para a determinao quantitativa
de uma espcie eletroativa empregando a tcnica de pulso
diferencial. Ep: potencial de pico; Ip: corrente de pico............ 11
Figura 5. Sequncia de pulsos (1 4) aplicados em determinado
perodo de tempo, a corrente amostrada usada sempre
i
2
i
1
em voltametria de onda quadrada.................................. 13
Figura 6. Voltamogramas de onda quadrada com pulsos direto
(corrente catdica), reverso (corrente andica) e a corrente
resultante, (1) representa um processo redox de um sistema
reversvel e (2) de um sistema irreversvel.............................. 14
Figura 7. (A) Forma de aplicao do potencial durante a etapa de
deposio e redissoluo empregando DPASV para
quantificao de dois metais. (B) Voltamograma obtido para
a determinao simultnea de dois metais por DPASV.......... 16
Figura 8. Representao esquemtica do procedimento usado na
voltametria adsortiva por redissoluo mostrando as etapas
para a acumulao e redissoluo na determinao de um
metal M
n+
em presena de um ligante(L).................................
18
Figura 9. Estratgia Inicial....................................................................... 23
Figura 10. (A) planejamento composto central para dois fatores (k=2 e
= 2 ). (B) planejamento composto central para trs fatores
(k=3 e = 3 )...........................................................................
27
Figura 11. (A) Instrumento voltamtrico 797 VA Computrace (B)
Montagem completa do sistema.............................................. 36
viii
Figura 12. Clula voltamtrica do analisador polarogrfico 797 VA
Computrace, destacando os trs eletrodos e o agitador no
magntico................................................................................ 36
Figura 13. Medidor de pH adaptado ao aparelho 797 VA Computrace... 37
Figura 14. Representao grfica dos efeitos de segunda ordem.......... 52
Figura 15. (A) Grficos de valores observados vs. valores estimados.
(B) Grfico dos resduos..........................................................
Figura 16. Superfcie de resposta com a varivel tempo de deposio
fixa no nvel (0), 80 segundos. X
1
= AM (V), X
2
= FR (Hz) em
termos de variveis codificadas. A legenda mostra os
valores da corrente em nA, obtidos no ensaio........................
55
57
Figura 17. Superfcie de resposta com a varivel tempo de deposio
fixa no nvel (0), 80 segundos. Amplitude = AM (V),
freqncia = FR (Hz) em termos de variveis codificadas. A
legenda mostra os valores da corrente em nA, obtidos no
ensaio..................................................................................... 57
Figura 18. (A) Voltamograma referente ao estudo do comportamento
da corrente para avaliao da faixa de trabalho. (B) Curva
analtica do comportamento da resposta voltamtrica em
funo da variao da concentrao do molibdnio por
SWV, na faixa de 1,0 g L
-1
a 6,0 g L
-1
................................. 59
Figura 19. Efeito da adio de interferentes sobre a corrente de pico
em 0,54 V. Mo(VI) 2,0 g L
-1
. SWCSV, E: 125 mV; Edep:
0,50 V; Tdep: 80 s; Teq: 10 s e E: 20 mV s
-1
. (Unk =
desconhecido, interferentes)................................................... 61
Figura 20. Anlise por adio padro da amostra referncia (1) com
deteco 1,28 g mL
-1
............................................................. 62
Figura 21. Anlise por adio padro da amostra referncia (2) com
deteco 1,20 g mL
-1
............................................................. 63
Figura 22. Anlise por adio padro da amostra referncia (3) com de
deteco 1,06 g mL
-1
............................................................. 63
Figura 23. Anlise por adio padro da amostra (1) folha de banana... 64
Figura 24. Anlise por adio padro da amostra (2) folha de caf........ 64
Figura 25. Anlise por adio padro da amostra (3) folha de
pimento.................................................................................. 64
ix
Figura 26. Anlise por adio padro da amostra (5) solo...................... 65
Figura 27. Anlise por adio padro da amostra (6) solo...................... 65
x
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Tabela com os clculos matemticos utilizados na
Anlise de Varincia (ANOVA)................................... 29
Tabela 2. Fatores e nveis escolhidos para o planejamento
fatorial fracionrio
IV
4 8
2

de resoluo IV..................... 45
Tabela 3. Planejamento fatorial fracionrio saturado
IV
4 8
2

,
definida por I = 1248, I = 1358, I = 2368 e I = 1237....
46
Tabela 4. Efeitos e erros para os fatores estudados no
planejamento fatorial fracionrio saturado
IV
4 8
2

e para
a SWV.........................................................................
46
Tabela 5. Otimizao dos parmetros utilizados na composio
do eletrlito de suporte................................................ 47
fatorial completo.......................................................... 48
Tabela 7. Coeficientes de contrastes para um fatorial 2
3
.............. 48
planejamento fatorial completo 2
3
para a SWV .......... 48
do eletrlito de suporte................................................ 49
fatorial completo 2
5
...................................................... 49
Tabela 11. Planejamento fatorial completo e respectivas
respostas instrumentais para a SWV.......................... 50
planejamento fatorial para a SWV.............................. 51
CCD para a SWV........................................................ 54
Tabela 14. Resultado do Planejamento CCD com k=3.............. 54
Tabela 15. Coeficientes e erro puro para o modelo da superfcie
de resposta................................................................. 55
Tabela 16. ANOVA do planejamento CCD.................................... 55
xi
Tabela 17. Parmetros otimizados para a anlise do molibdnio
por voltametria de redissoluo adsortiva com onda
quadrada.....................................................................
Tabela 18. Resultados relativos s determinaes efetuadas por
ICP-AES e pelo mtodo voltamtrico para o
molibdnio......................................................................
58
66
xii
RESUMO
CARVALHO, Jos Ricardo de, M. Sc., Universidade Federal de Viosa,
outubro de 2008. Otimizao da metodologia de determinao de
molibdnio em solos e plantas por voltametria de onda quadrada com
redissoluo catdica adsortiva. Orientador: Efraim Lzaro Reis.
Coorientadores: Csar Reis e Jos Roberto da Silveira Maia.
O molibdnio um elemento trao essencial vida e pode ser encontrado
praticamente em toda biosfera. Presente no cofator da enzima nitrase
responsvel pela reduo da molcula de N
2
e sua fixao na crosta
terrestre. Em outras enzimas atua nas reaes de transferncias de tomos
de oxignio entre os mais diversos substratos. Participa da composio de
ligas metlicas e lubrificantes, considerado essencial para a nutrio de
animais e plantas, entretanto, os nveis de concentrao encontrado nestas
matrizes so muito baixos, o que t orna difcil seu monitoramento e
deteco. Neste caso, isso possvel, quando se faz uso de mtodos
analticos sensveis, associados procedimentos que envolvem um grande
nmero de etapas onde, a sensibilidade da tcnica empregada justifica o uso
de reagentes com grau de pureza analtico e, a necessidade de
procedimentos contra possveis contaminaes durante as determinaes. O
presente trabalho descreve o desenvolvimento de um mtodo para a
determinao direta de Mo em solos e plantas utilizando a tcnica de
voltametria adsortiva catdica com onda quadrada. Foi utilizada a otimizao
multivariada dos parmetros envolvidos na composio do eletrlito de
suporte, sendo que a juno de KNO
3
e soluo tampo de cido e acetato
de sdio forneceu parmetros significativos atravs de grficos de Paretos
que foram otimizadas num planejamento fatorial fracionrio saturado
IV
4 8
2

.
Aps a otimizao dos parmetros eletroanalticos realizou-se um
3
, sendo obtidos como timos a quantidade
e concentrao do eletrlito de suporte KNO
3
, a soluo tampo cido
actico/acetato de sdio e o complexante oxina. A corrente de pico de
reduo do Mo(VI) foi otimizado por planejamento experimentais. As
variveis envolvidas na otimizao da voltametria com onda quadrada foram
xiii
o incremento de voltagem, a amplitude, a frequncia, o tempo de deposio
e o tamanho da gota de mercrio. Um estudo dos nveis de fatores foi
realizado anteriormente etapa de triagem, ento foi empregado neste
ltimo um planejamento fatorial 2
5
completo para a voltametria de onda
quadrada. Das respostas obtidas foram selecionados os trs fatores mais
significativos, as variaes selecionadas foram estudadas com o
planejamento composto central (Central Composite Design CCD) para o
estudo da superfcie de resposta. Os resultados obtidos nas condies
otimizadas, apresentaram uma resposta linear no intervalo entre 1,0 a 6,0 g
L
-1
e limites de deteco e de quantificao, respectivamente iguais a 0,02
g L
-1
(20 ppt) e 0,08 g L
-1
(80 ppt). Valores de recuperao entre 96% e
102% foram encontrados para amostras de solos e plantas enriquecidas
com molibdnio (VI). As condies ideais encontradas para se chegar a
melhor resposta voltamtrica foram para a SWV foram 1,0 mVs
-1
, 110 mV e
100 Hz para os fatores: incremento de voltagem, amplitude e frequncia. A
voltametria de redissoluo catdica de Mo(VI) no complexante 8-
hidroquinoleina (oxina) em soluo tampo cido actico/acetato de sdio
em pH 4,65 e KNO
3
2,0 mol L
-1
como eletrlito suporte possibilitou a
determinao de molibdnio em solos e plantas sem qualquer tratamento
prvio das amostras. A otimizao de parmetros voltamtricos para a
determinao de metais traos em solos e plantas, atravs de tcnicas de
redissoluo, foi planejada neste trabalho, considerando fatores como custo
de equipamentos, sensibilidade, seletividade e baixos limites de deteco.
xiv
ABSTRACT
CARVALHO, Jose Ricardo de. M. Sc., Universidade Federal de Viosa,
October of 2008. Optimization of the molybdenum determination in soils
and plant methodology by cathodic adsorptive stripping square-wave
voltammetry. Adviser: Efraim Lazaro Reis. Co-advisers: Cesar Reis and
Jos Roberto da Silveira Maia.
Molybdenum is an element essential to life that can be found practically in
the whole biosphere. It is present in the nitrase enzyme cofactor and is
responsible for the reduction of the N
2
molecule and its fixation in the
terrestrial crust. In other enzymes, molybdenum acts in reactions of
transference of atoms of oxygen to a lot of sub-stratums. Molybdenum also
participates in the composition of metallic alloys and lubricating, and it is
considered essential to the nutrition of animals and plants. However, the
concentration levels found in these matrices are very low, what makes
difficult for monitoring and detection and is possible when sensitive analytical
methods associated to procedures that involve a great number of stages are
used. The sensibility of the employed technique justifies the use of reagents
with analytical grade and procedures against possible contaminations during
the determinations. This present work describes the development of a
method used for the direct determination of Mo in soils and plant using the
cathodic adsorptive stripping square-wave voltammetry technique. The
multivariate optimization of the parameters involved in the support electrolyte
composition was used, and the use of KNO
3
and acetic acid/sodium acetate
buffer solution provided significant parameters through the Pareto graphics
that were optimized in a factorial planning
IV
4 8
2

. After the optimization of the
eletroanalytical parameters, a complete factorial planning 2
3
was used,
where the support electrolyte KNO
3
, the acetic acid/sodium acetate buffer
solution and the complexant oxine concentrations with best results were
obtained. The Mo(VI) reduction stream peak was optimized by experimentals
planning. The parameters involved in the optimization of the square-wave
voltammetry were: increment of voltage, amplitude, frequency and the
deposition time and mercury drop size. A study of the factor levels was
xv
accomplished previously to the selection phase, and then a complete
factorial planning 2
5
was used for the square-wave voltammetry. Three most
significant factors were selected and the selected variations were studied
with the central composite design (CCD) to obtain the response surface. The
results obtained in the optimized conditions showed a linear response in the
range of 1.0 to 6.0 g L
-1
, the detection and quantification limit were 0.02 g
L
-1
(20 ppt) and 0.08 g L
-1
(80 ppt), respectively. Recovery values within
96% and 102% were obtained to Mo enriched samples of soil and plant. The
optimum conditions found to achive the best voltammetric answer were 1.0
mVs
-1
, 110 mV and 100 Hz, to increment of voltage, amplitude and
frequency, respectively. The Mo(VI) cathodic stripping voltammetry of in the
complexant 8-hydroquinoline (oxine) in acetic acid/sodium acetate buffer
solution with pH 4.65 and KNO
3
2.2 mol L
-1
as support electrolyte made
possible the molybdenum determination in soils and plants without any
previous treatment of the samples. The optimization of voltammetric
parameters for the determination of trace metals in soils and plants by
stripping techniques was planned in this present work and factors as
equipments cost, sensibility, selectivity and low detection limits were
considered.
Introduo 1
1. INTRODUO
1.1. Introduo
O nome do elemento qumico molibdnio (Mo) vem do grego
molybdos como o chumbo, o qual no encontrado na natureza na forma
livre e est sempre ligado a outros elementos, principalmente, na forma de
molibdenita (MoS
2
), powellita Ca(MoW
4
)O
4
, molibdita (Fe
2
O
3
.3MoO
3
.8H
2
O) e
a wulfenita (PbMoO
4
). Essencial na nutrio de diferentes formas de
organismos vivos, principalmente, vegetais nos quais encontrado na faixa
de 0,1 a 3,0 mg kg
-1
de matria seca (AGRI-FAX, 1998).
O molibdnio contribui no transporte de eltrons, nos processos
bioqumicos e indispensvel no metabolismo das plantas, pois favorece a
fixao do nitrognio atmosfrico. A falta deste elemento no solo em que a
concentrao adequada deve estar entre 0,01 a 0,70 mg kg
-1
, acarreta
menor sntese da enzima nitrogenase nas plantas, reduzindo a fixao
biolgica do nitrognio, consequentemente, tornando o solo menos produtivo
(ALMEIDA, 2003).
O estabelecimento de metodologias apropriadas de alta sensibilidade
e seletividade para quantificao deste elemento a nveis trao so
necessrias, tendo em vista que os nveis de concentrao do mesmo nas
vrias matrizes ambientais so muito baixos.
A espectroscopia de absoro atmica (Atomic Absorption
Spectroscopy AAS) tem sido um dos mtodos analticos mais indicados na
literatura para a determinao de molibdnio em amostras de solo
(YAGODIN, 1982; TISDALE et al., 1985; HOENIG et al., 1986;
SASHALSCHA et al., 1987). Esta tcnica recomendada pela elevada
sensibilidade, baixo limite de deteco e alta qualidade analtica (BAUCELLS
et al., 1985), porm, uma das desvantagens de maior relevncia que em
forno de grafite tem-se necessidade de uma elevada temperatura de
atomizao que pode gerar maior desgaste e consumo de tubos de grafite.
Devido a estas questes torna-se importante o desenvolvimento e
aperfeioamento de tcnicas e mtodos que permitam a determinao de
molibdnio em variados tipos de matrizes.
Introduo 2
A qumica eletroanaltica compreende um conjunto de mtodos
analticos quantitativos baseados nas propriedades eltricas de uma soluo
do analito quando ele faz parte de uma clula eletroqumica. Envolve
medidas de parmetros eltricos tais como: corrente, potencial e carga, tm
ampla faixa de aplicao em reas de conhecimento to distintas como na
medicina, bioqumica, biologia molecular, qumica ambiental e fsico-qumica.
(SKOOG et al., 1992).
As tcnicas eletroanalticas so capazes de fornecer limites de
deteco excepcionalmente baixos e uma abundncia de informaes que
caracterizam e descrevem eletroquimicamente determinados sistemas. Uma
de suas mais importantes caractersticas relaciona-se com o fato destas
tcnicas possibilitarem o estabelecimento de relaes diretas entre a
concentrao do analito e alguma propriedade eltrica como: corrente,
potencial, condutividade, resistncia ou carga (SOUZA et al., 2003).
A tcnica escolhida para o desenvolvimento desse trabalho foi
voltametria de onda quadrada.
1.2. Objetivos
O objetivo deste trabalho foi a otimizao de uma metodologia
eletroanaltica, para a determinao direta do molibdnio em solos e plantas,
utilizando a tcnica de voltametria de onda quadrada com redissoluo
catdica adsortiva e planejamentos experimentais.
RevisoBibliogrfica 3
2. REVISO BIBLIOGRFICA
2.1. Molibdnio
Em 1778 o qumico sueco Carl Wilhelm Scheele estudava as
propriedades de um mineral conhecido como molibdenta (do grego
molybdos como o chumbo). Fazendo reagir este mineral com cido
ntrico observou o aparecimento de uma nova substncia, um composto
branco e insolvel em gua que se dissolvia em solues alcalinas e poderia
ser re-precipitado destas solues mediante a adio de cido ntrico. Ele
denominou esta nova substncia de cido molbdico, reconhecendo-o como
um derivado de um elemento at ento desconhecido, o qual denominou de
Molybdenum. Quatro anos depois, em 1782, Peter Jacob Hjelm isolou pela
primeira vez o elemento na sua forma metlica atravs da reduo do cido
molbdico com grafite. Aps esta descoberta o elemento foi pouco estudado,
talvez pela sua inrcia (VRUBEL, 2007).
O molibdnio um elemento trao encontrado na crosta terrestre com
estimada abundncia na escala de 0,05 a 40,0 g g
-1
com valor mdio de 1,5
g g
-1
. O teor de molibdnio na litosfera situa-se em torno de 2,0 mg g
-1
,
enquanto que nos solos, o molibdnio total encontra-se na faixa de 0,11 a
5,0 g g
-1
. O molibdnio tem sete ocorrncias naturais de istopos, Mo
92
,
Mo
94
, Mo
95
, Mo
96
, Mo
97
, Mo
98
e Mo
100
com relativa abundncia (9,2 a 24,2 %)
(ARABINDA et al., 2007).
Um enorme interesse em se obter uma forma de monitoramento deste
elemento se d pela grande necessidade das plantas em retirar o molibdnio
do solo garantindo agricultura o desenvolvimento satisfatrio das lavouras.
H um aumento na demanda por alimentos no mundo e uma crescente
competio pelo uso das terras agricultveis; por isso o aumento da
produtividade das culturas e a melhoria da eficincia de produo com a
preservao dos recursos naturais so aspectos importantes na agricultura
moderna. A quantidade de molibdnio requerida pelas plantas pequena e
sua aplicao via semente no plantio constitui-se uma das formas mais
prticas e eficazes de adubao (MARCONDES et al., 2005). Para aumentar
a concentrao de molibdnio nas prprias sementes necessrio que as
plantas cresam em solos com alta disponibilidade do elemento.
No Brasil h o predomnio de solos ricos em xidos de ferro e de
alumnio, mas com pouca disponibilidade de molibdnio. A adio direta do
adubo contendo Mo ao solo muitas vezes ineficaz devido a sua adsoro
matria orgnica e aos xidos de ferro e de alumnio, tornando-se assim
indisponvel s plantas. Isto faz com que a produo de sementes quase
sempre seja com baixo teor de molibdnio. Os nutrientes boro e molibdnio
adicionados soluo de cobertura da semente contribuem para
desenvolvimento das plantas (BATISTA et al., 2005). A aplicao de
molibdnio e cobalto nas sementes tem sido uma prtica comum para o
cultivo de soja no Brasil (PRESTES et al., 2005), pois sendo associado ao
nitrognio, s bactrias diazotrficas, e bactria Herbaspirillum
seropedicae em diferentes cultivares de arroz proporcionam aumento de 33
a 37% na produo de gros, dependendo da cultivar utilizada bem como
maior acmulo de nitrognio nos gros (GUIMARES et al., 2007).
Na realizao do processo de fixao biolgica de nitrognio o
molibdnio um micronutriente essencial (ENSAFI et al., 2005) cujas
funes nas plantas esto relacionadas com o sistema de transferncia de
eltrons para a reduo do nitrato e na fixao biolgica de nitrognio. Est
tambm relacionado ao transporte de eltrons em diversas reaes
bioqumicas e na fixao de nitrognio pelas plantas no processo das
enzimas nitrogenase, redutase de nitrato e oxidase de sulfato (ALMEIDA,
2003).
A concentrao de minerais como o molibdnio nas plantas, depende
de quatro fatores bsicos inter-relacionados: genticos (gnero, espcie e
variedade de planta), tipo de solo, clima e, por fim, estgio de maturidade
das forrageiras e sua inter-relao com o clima (PRADA et al., 1998).
A gua do solo contm pequenas e variveis quantidades de sais
minerais, oxignio e gs carbnico, formando uma soluo diluda, sendo
que o tipo e as quantidade dos elementos que se encontram dissolvidos
nesta chamada soluo do solo, dependem diretamente dos elementos que
esto adsorvidos nos colides, os quais funcionam como reservatrio. Entre
estes e a soluo do solo existe um equilbrio que mantido graas
capacidade de troca de ctions (LEPSCH, 1977).
Os colides tm origem orgnica e inorgnica e so superfcies
carregadas eletricamente, tais como as argilas (REICHARDT, 1985).
Os elementos minerais e orgnicos constituintes da frao coloidal do
solo possuem cargas de superfcie, as quais so neutralizadas por ons.
Dependendo do pH do solo e do tipo de material as cargas das partculas
podem ser negativas ou positivas. Na neutralizao de cargas eletrostticas
os ons so trocados por outros da soluo, em processos fsico-qumicos
que dependem da concentrao relativa dos ons, carga eltrica, raio inico
hidratado, etc. (TEDESCO, 1995).
O molibdnio pode ser encontrado dissolvido na soluo do solo
(Figura 1), adsorvido na frao coloidal, retido na rede cristalina de minerais,
ou ainda complexado com a matria orgnica.
Figura 1. Representao esquemtica de uma zona hipottica
de solo e de vrios processos qumicos que ocorrem
numa soluo de solo. (GUPTA, 1997).
O molibdnio existente na soluo do solo encontra-se
predominantemente como molibdato (MoO
4
2-
). Considerando um valor mdio
de pH para a soluo do solo de 5,5 e as sucessivas ionizaes do cido
molibdco (H
2
MoO
4
), temos as equaes 1, 2 e 3.
1,8 pK HMoO H MoO H
1
-
4 4 2
= +
+
(1)
4,1 pK MoO H HMoO
1
- 2
4
-
4
= +
+
(2)
| | | |
| |
| |
| |
25
HMoO
MoO
HMoO
H MoO
Kr
,
,
-
4
- 2
4
-
4
- 2
4
~ =
+
5 5
1 4
10
10
(3)
Portanto, a concentrao da forma desprotonada de
aproximadamente 25 vezes a da forma protonada.
O comportamento do molibdato assemelha-se mais ao dos fosfatos e
sulfatos (macronutrientes), do que aos micronutrientes. Normalmente as
concentraes de molibdnio no tecido das plantas decrescem medida que
aumentam as concentraes de sulfato no solo, pois ocorre uma competio
direta entre os ons sulfato e molibdato por stios de absoro da raiz devido
aos seus tamanhos semelhantes (ANDRADE, 2005).
O tipo de material originrio do solo tambm pode afetar a
concentrao de molibdnio na soluo do solo. O molibdnio ocorre
normalmente em feldspatos e minerais ferro-magnesianos como a biotita e a
olivina. As rochas sedimentares por serem formadas aps a intemperizao
e transporte do material originrio retm uma pequena frao de molibdnio
originalmente existente na rocha matriz. O molibdnio facilmente liberado
dos minerais primrios pela intemperizao e comparado com outros
macronutrientes, relativamente mvel como molibdato solvel, entretanto,
esses molibdatos so adsorvidos nas superfcies de minerais primrios e da
frao coloidal fazendo com que a disponibilidade do molibdnio no solo seja
dependente do pH (ANDRADE, 2005). O molibdnio tambm usado em
di versos processos i ndustri ai s sendo empregado na produo de aos
e ligas especiais base de nquel com elevada resistncia a altas
temperaturas e corroso (JIANGUO et al.,1999). Aos de elevada
resistncia em quase sua totalidade tm molibdnio em propores de 0,25
a 8,00%. A produo mundial de molibdnio gira em torno de 100000
toneladas por ano (ARABINDA et al., 2007), em mdia a indstria do ao
consome 75% da produo (VRUBEL, 2007).
Diversos compostos de molibdnio so tambm utilizados como
agentes catalisadores no refino do petrleo (para remover compostos
orgnicos de enxofre) e na produo de gasolina de elevada octanagem
(SERAFIM et al., 2008). Assim como, so utilizados em camadas condutivas
de alguns tipos de transistores, eletrodos para fornos de aquecimento
eltrico, em filamentos para componentes eltricos e eletrnicos, em
reatores nucleares, em partes de avies e msseis. O molibdnio ainda
muito utilizado na indstria de corantes e pigmentos inorgnicos (ANDRADE,
2005).
Complexos contendo molibdnio so tambm ministrados no
tratamento de algumas doenas como a do mal de Wilson, que se
caracteriza pelo aumento de cobre no organismo devido a ausncia da
enzima ATPase que atua na eliminao de cobre (ALMEIDA et al., 2006).
O molibdnio um componente da sulfito-oxidase, uma enzima do
fgado humano e de outros rgos de animais e pssaros. A enzima catalisa
a oxidao do on sulfito (SO
3
2-
), que txico, para o on sulfato (SO
4
2-
) que
no txico, logo um agente desintoxicante importante. A deficincia da
sulfito-oxidase pode causar no ser humano perturbaes neurolgicas,
retardamento mental e morte (GMEZ et al., 2005).
Nos ltimos 20 anos, vrias tcnicas de voltametria de redissoluo
catdica adsortiva tm sido desenvolvidas para determinao de
molibdnio (ADELOJU et al., 1995) (SAFAVI, et al.1999; SUN et al., 2000;
ENSAFI et al., 2002; ENSAFI et al., 2004; ENSAFI et al., 2005; SANTOS et
al., 2008). Todos estes mtodos so baseados na acumulao adsortiva de
molibdnio no complexo.
2.2. Mtodos analticos para a determinao de molibdnio
Embora exista um nmero considervel de mtodos que possibilitam
a determinao de molibdnio nos mais diferentes tipos de matrizes, o
desenvolvimento de mtodos para quantificar metais traos relevante e
desafiador, pois em procedimentos comuns para determinar baixas
concentraes de metais, a etapa de pr-concentrao necessria, alm
disso, a maioria dos mtodos mais sensveis recentemente avaliados como
espectrometria de emisso atmica com fonte de plasma induzido (Ion
Coupled Plasma - Atomic Emission Spectroscopy ICP-AES),
espectrometria de massas com fonte de plasma induzido (Inductively
Coupled Plasma - Mass Spectrometry ICP-MS) e espectrometria de
absoro atmica em forno de grafite (Graphite Furnace Atomic Absorption
Spectrometry GFAAS), tm custos elevados para serem utilizados em
anlises rotineiras. (ALMEIDA et al., 2006) (PYZYNSKA, 2007).
Outros mtodos de determinao de molibdnio so os que utilizam a
propriedade cataltica do metal para uma dada reao em que a reao
entre iodeto e perxido de hidrognio catalisada por molibdnio e pode-se
proceder por determinao espectrofotomtrica (IVANOV et al., 2002)
(ALMEIDA et al., 2006). Tais mtodos catalticos rendem alta sensibilidade,
contudo necessitam de uma separao prvia do metal por no serem
seletivos, alm disso, o tempo de medida deve ser muito bem controlado,
da o interesse no uso de mtodos por injeo em fluxo para a execuo da
metodologia.
Valores de concentrao em diferentes tipos de matrizes so da
ordem de ppm ou ppb (IVANOV et al., 2002), a maioria destes mtodos
requer etapas de separao e pr-concentrao por diversos meios. Alguns
casos fazem uso de reagentes complexantes especficos e grande parte dos
mtodos espectroanalticos utiliza mascarantes para evitar a ao de ons
interferentes (STADLOBER et al., 1997) (ALMEIDA et al., 2006). Essas
etapas tornam os mtodos espectrofotomtricos muito trabalhosos.
Dentre os mtodos eletroqumicos destacam-se os voltamtricos que
englobam um conjunto de mtodos, nos quais a informao sobre as
caractersticas do analito obtida atravs da medida de intensidade da
corrente em funo do potencial aplicado. Dentre os mtodos voltamtricos,
destacam-se as tcnicas voltamtricas de redissoluo ("Stripping"), que
podem ser efetuadas de trs formas: andica, catdica e adsortiva, sendo
que a adsortiva a que mais se adapta s determinaes para elementos
que se apresentam em baixos teores, em diferentes matrizes, como o caso
do molibdnio (ALMEIDA et al., 2006).
A anlise de amostras com matrizes complexas ou com material
orgnico como plantas e solos, exige pr-tratamento para destruir a matriz,
pois h componentes que podem interferir na anlise. J a anlise de
amostras aquosas mais simples pela ausncia de interferentes e pode ser
realizada em dois passos (oxidao/destruio da matriz e quantificao).
As separaes so importantes sempre que existirem interferentes,
que podem interferir na etapa de quantificao como o que ocorre quando o
cobalto interfere na determinao voltamtrica de molibdnio quando no h
adio de complexantes.
2.3. O complexante 8-hidroxiquinolina (oxina)
O complexante 8-hidroxiquinolina (oxina) (Figura 2) tem sido
extensivamente estudado e largamente utilizado em qumica analtica como
complexante de ons metlicos em soluo. A oxina forma complexos com
vrios ons metlicos em soluo, pois possui dois pontos de coordenao.
Isto confere aos complexos metlicos formados grande inrcia e estabilidade
devido ao forte efeito quelante. um reagente seletivo para o molibdnio,
sendo utilizado por vrios pesquisadores na extrao de molibdnio em
guas (SUN et al., 2000) solos (GIROUSI et al., 2001) plantas
(NAVRTILOV et al., 1991) e alimentos (GAO et al., 1996).
Figura 2. Estrutura do 8-hidroxiquinolina (oxina).
A oxina o complexante mais comumente utilizado para a
determinao voltamtrica de molibdnio, pois apresenta uma faixa linear
mais ampla nas curvas analticas (STADLOBER et al., 1997; GAO et al.,
1996; SUN et al., 2000). A figura 3 apresenta a estrutura 8-hidroxiquinolina e
a estrutura do complexo formado com molibdnio (VI).
Figura 3. Estrutura do complexo com molibdnio (8-hidroxiqui-
nolinato de molibdnio).
O complexo molibdato-oxina apresenta um sinal caracterstico utilizado
em determinaes de ons metlicos em quantidades trao na adsoro de
O H
N
redissoluo catdica (SUN et al., 2000), por este motivo, escolheu-se a
oxina para ser o agente complexante utilizado no decorrer deste trabalho.
A etapa de quantificao de molibdnio pode ser efetuada com
utilizao de diversas tcnicas analticas, tais como: a eletroqumica,
espectroscopia, fluorescncia de raios-X, por serem sensveis e de alta
preciso atingindo um nvel de deteco de mg Mo/kg amostra. As tcnicas
de espectrometria de absoro atmica e voltametria so as mais utilizadas
(ARABINDA et al., 2007).
2.4. Introduo voltametria
A voltametria um mtodo analtico fundamentado em medidas de
corrente e potencial em clulas eletroqumicas. Permite a obteno de
informaes qualitativas e quantitativas de uma espcie qumica. Para a
obteno das medidas de corrente utiliza-se um sistema potenciosttico de
trs eletrodos, um eletrodo de trabalho, um eletrodo de referncia e um
auxiliar, estes so posicionados na clula voltamtrica e imersos em um
eletrlito de suporte contendo o analito. O potencial aplicado e a corrente
resultante so registrados, concomitantemente, obtendo-se uma curva
corrente versus potencial, chamada de voltamograma. O sinal analtico a
corrente faradaca que flui pela clula durante a reao do analito em um
eletrodo de trabalho com uma pequena superfcie (SOUZA et al., 2003).
Dentre as tcnicas voltamtricas a polarografia aquela em que uma
curva de corrente versus potencial obtida usando um eletrodo de trabalho
lquido, cuja superfcie pode ser renovada periodicamente ou continuamente,
que o clssico eletrodo gotejante de mercrio (Dropping Mercury Electrode
- DME) e o eletrodo de gota esttica de mercrio (Static Mercury Drop
Electrode SMDE) (SANTOS et al., 2008).
A voltametria inclui todos os mtodos nos quais as medidas de
corrente e potencial so realizadas em eletrodos de trabalho estacionrios e
fixos de acordo com o material de sua composio. Estes incluem o eletrodo
de mercrio de gota pendente (Hanging Mercury Drop Electrode HMDE)
que apresenta a vantagem de evitar os chamados envenenamentos de
superfcies por ser um eletrodo de superfcie renovvel (JAIN et al., 2007),
bem como o eletrodo de filme fino de mercrio (Thin Mercury Film Electrode
TMFE). empregado tambm o eletrodo de carbono vtreo (Glassy
Carbon Electrode GCE) o eletrodo de pasta de carbono (Carbon-Paste
Electrode CPE) e eletrodos de trabalho feitos de metais nobres.
Entre as tcnicas voltamtricas utilizadas pode-se citar a polarografia
clssica de corrente contnua, sendo esta uma tcnica muito limitada, pois
no satisfatria para determinar espcies com concentraes abaixo de
10
-4
mol L
-1
(SOUZA et al., 2003).
Para a voltametria de pulso diferencial aplicam-se pulsos de potencial
de amplitude definida sobre uma rampa de potencial linearmente crescente.
O pulso aplicado de pequena amplitude, 10 a 100 mV durante 50 a 60 ms
(Figura 4 A). De modo geral, recomenda-se 25 mV de amplitude para
sistemas com transferncia de um eltron e 50 mV para sistema com dois
eltrons (SOUZA et al., 2003). A corrente amostrada em dois tempos
(cerca de 15 ms cada um) S
1
corrente amostrada no inicio do pulso e S
2
corrente amostrada no fim do pulso, S
F
= S
2
- S
1
durante o tempo de vida
dos pulsos nos quais a corrente capacitiva mnima. O valor final da
corrente a diferena entre esses valores medidos.
Um voltamograma tpico para voltametria de pulso est representado
na figura 4 B onde a corrente de pico ou limite proporcional concentrao
da espcie eletroativa do meio. O potencial de pico caracterstico da
substncia eletroativa, geralmente independe da concentrao do analito, e
das caractersticas do eletrodo.
Figura 4. (A) Sinais de excitao para voltametria de pulso
diferencial. (B) Voltamograma tpico para a determinao
quantitativa de uma espcie eletroativa empregando a
tcnica de pulso diferencial. Ep: potencial de pico; Ip:
corrente de pico (SKOOG et al., 1992).
O limite de deteco em diferentes tipos de matrizes com a aplicao
das tcnicas de pulso so da ordem de 10
-7
a 10
-8
mol L
-1
. A maior
sensibilidade da voltametria de pulso diferencial pode ser atribuda a duas
fontes. A primeira a corrente faradaica e a segunda um decrscimo na
corrente de carga capacitiva (SKOOG et al., 1992).
2.4.1. Voltametria de onda quadrada
A voltametria de onda quadrada (Square Wave Voltammetry SWV)
uma das tcnicas voltamtricas de pulso mais rpida e sensvel entre
todas as tcnicas de pulso. Os limites de deteco obtidos com sua
utilizao podem ser comparados ao obtido pela tcnica espectroscpica.
Foi desenvolvida em 1953 por Geoffery Barker quando estudava uma
maneira de compensar a corrente capacitiva obtida nas anlises
polarogrficas. Barker aplicou pulsos de potencial em um eletrodo gotejante
de mercrio e chegou polarografia de onda quadrada (SOUZA et al.,
2003), entretanto, a tcnica desenvolvida por Barker possua uma
sensibilidade limitada pela reversibilidade do sistema e, principalmente,
pelos rudos originrios de vrias fontes captadas pelo capilar de mercrio,
influenciando intensamente as respostas de corrente.
Em 1969, Ramaley e Krause utilizaram eletrodos estacionrios
eliminando a influncia dos rudos intensificados pelo uso do capilar de
mercrio; alm disso, eles substituram a rampa linear de potencial por uma
variao na forma de escada, assim surgiu a SWV que utilizava uma
variao de potencial na forma de onda aliada a uma rampa de potencial na
forma de escada, gerando um pico simtrico que poderia ser utilizado com
sucesso para determinaes analticas (SOUZA et al., 2003), contudo, com
esta forma de aplicao de potencial, a medida de corrente era realizada
prximo ao centro do pulso e as varreduras de potenciais eram limitadas
para pequenos valores de amplitude, consequentemente eram obtidas
baixas velocidades de varredura, o que provocava uma perda de
sensibilidade analtica (SKOOG et al.,1992; SOUZA et al., 2003).
Em 1977 Christie, Turner e Osteryoung desenvolveram um estudo no
qual a medida de corrente era feita ao final do pulso de potencial; isso
possibilitou que as varreduras de corrente em funo dos pulsos de
potenciais aplicados fossem efetuadas em velocidades superiores a 100
mV s
-1
, chegando ao modelo atual da SWV (SOUZA et al., 2003).
Com o progresso da tecnologia analgica e digital, a SWV passou a
ser incorporada aos polargrafos a partir dos anos 80, principalmente, na
sua forma de varredura rpida. Nessa forma ela tambm chamada de
voltametria de onda quadrada de Osteryoung, atribuda ao nome da
pesquisadora americana, Janet G. Osteryoung (SOUZA et al., 2003). Esta
tcnica pode ser usada para realizar experimentos de um modo bem mais
rpido se comparado tcnica de pulso diferencial, com sensibilidade
semelhante ou um pouco melhor, pois neste caso tambm ocorrem
compensaes da corrente capacitiva. Um experimento tpico que requer
cerca de trs minutos para ser feito pela voltametria de pulso diferencial
pode ser executado em segundos pela voltametria de onda quadrada
(ALEIXO, 2007).
Na SWV independente do sentido da varredura a corrente
amostrada duas vezes, uma ao final do pulso direto quando a direo do
pulso igual direo da varredura e outra ao final do pulso reverso, onde a
direo do pulso contrria direo da varredura (SOUZA et al., 2003).
Isto resulta em corrente determinada a partir da diferena entre valores
obtidos nos dois pontos (Figura 5).
Figura 5. Sequncia de pulsos (1 4) aplicados em
determinado perodo de tempo, a corrente amostrada
usada sempre i
2
i
1
em voltametria de onda quadrada
(ALEIXO, 2007).
O processo de amostragem de corrente apresenta a vantagem de
eliminar a corrente capacitiva considerando a corrente de fundo no
faradaica. De modo semelhante tcnica de pulso diferencial, a voltametria
de onda quadrada produz picos para processos faradaicos cuja altura
proporcional concentrao da espcie eletroativa.
A partir da aplicao destes pulsos pode ocorrer uma resposta
catdica ou andica correspondente a reao redox de carter reversvel ou
quase reversvel, dependendo do sentido da varredura de potencial quando
a reao apresenta carter de irreversibilidade (SKOOG et al.,1992; SOUZA
et al., 2003; SOUZA et al., 2004; HENZE, 2003).
Alternativamente, pode-se colocar em grfico a diferena entre as
correntes andica e catdica como funo da rampa linear de potencial.
Neste caso, como as correntes possuem sinais opostos os picos se
sobrepem gerando um sinal maior de corrente denominada de resultante, o
que pode ser observado na figura 6. A subtrao da corrente catdica (-) e
corrente andica (+) responsvel pela maior sensibilidade da tcnica
quando aplicada a sistemas reversveis (SOUZA et al., 2003).
Figura 6. Voltamogramas de onda quadrada com pulsos direto
(corrente catdica), reverso (corrente andica) e a
corrente resultante, (A) representa um processo redox
de um sistema reversvel e (B) um sistema irreversvel
(SOUZA et al., 2003).
Os voltamogramas obtidos em forma de picos oferecem excelente
sensibilidade e rejeio s correntes residuais. Embora a sensibilidade
diminua com a diminuio da reversibilidade do processo, a SWV mais
sensvel do que a voltametria de pulso diferencial.
2.4.2. Voltametria de redissoluo
A considervel sensibilidade das tcnicas de redissoluo na
deteco de metais trao atribuda combinao de uma etapa de pr-
eletrlise, com procedimentos de medio que geram sinais de correntes de
oxidao ou reduo com relao sinal/rudo favorvel analiticamente.
Considerando que os metais so pr-concentrados na superfcie do eletrodo
de trabalho por fatores de 100 a 1000 vezes, os limites de deteco podem
sofrer diminuies de 2 a 3 ordens de magnitude, o que permite chegar-se a
determinaes analticas com limites abaixo da ordem de 10
-7
a 10
-8
mol L
-1
(MELLO, 2003).
Uma das tcnicas que utiliza processos de pr-concentrao a
voltametria de redissoluo andica (Anodic Stripping Voltammetry ASV)
muito empregada na determinao de metais pesados, uma vez que vrios
deles podem ser depositados no eletrodo de trabalho atravs de eletrlise de
solues de seus ons. A etapa de pr-concentrao consiste na deposio
feita eletroliticamente na superfcie do eletrodo aplicando-se um potencial de
deposio (Ed) pr-estabelecido durante um determinado tempo e com
agitao da soluo. O tempo de deposio escolhido em funo da
espcie eletroativa e de sua concentrao, estando geralmente entre 30 e
300 s (ZAREI et al., 2006; ENSAFI et al., 2004). Podem ser usados eletrodos
de gota pendente ou filme de mercrio, alm de eletrodos slidos ou
quimicamente modificados. Os eletrodos de mercrio podem ser
considerados mais vantajosos para a determinao de metais pesados, pois
muito deles formam amlgamas, produzindo sinais mais repetitveis do que
os depsitos metlicos formados na superfcie de eletrodos slidos.
A concentrao do metal no eletrodo de mercrio, aps certo tempo
de pr-concentrao, pode ser obtida aplicando-se a equao 4:
.
. .
l d
Hg
i t
C
n FV
= (4)
sendo il a corrente limite para a deposio do metal; td o tempo de deposio;
VHg o volume do eletrodo de mercrio; n o nmero de mols de eltrons
envolvidos no processo e F a constante de Faraday. Tempos muito longos de
deposio devem ser evitados, pois podem produzir correntes que no
tenham uma relao linear com a concentrao. A agitao constante e
controlada faz com que o transporte de massa por conveco mantenha a
concentrao da espcie eletroativa junto superfcie do eletrodo igual a do
resto da soluo. Deste modo, a quantidade de metal depositado na
superfcie do eletrodo maior do que a do processo de transporte de massa,
quando este governado apenas por difuso.
Na etapa de deposio ocorre a reduo da espcie eletroativa, em
particular, o metal (M
n+
), formando a amlgama M(Hg) para um eletrodo de
mercrio (Equao 5) ou para eletrodos slidos, depositando-se na
superfcie do eletrodo formando um filme metlico (M).
M(Hg) Hg ne M
concentro - pr
o redissolu
- n
+ +
+
(5)
Aps a deposio do metal, em quaisquer casos, a agitao
interrompida e a soluo mantida em repouso por alguns segundos para
que a concentrao do metal depositado entre em equilbrio na superfcie do
eletrodo.
Na etapa de redissoluo, faz-se a varredura de potencial na direo
andica, na qual os metais depositados so oxidados em potenciais
definidos. Ao promover a redissoluo da espcie, registra-se um
voltamograma cuja corrente de pico (Ip) proporcional concentrao da
espcie previamente depositada na superfcie do eletrodo. Pode-se observar
um esquema ilustrando a etapa de deposio e redissoluo (Figura 7A) e
um voltamograma tpico para a determinao simultnea de dois metais com
a tcnica de voltametria de redissoluo andica de pulso diferencial
(Differential Pulse Anodic Stripping Voltammetry DPASV) (Figura 7B).
Figura 7. (A) Forma de aplicao do potencial durante a etapa
de deposio e redissoluo empregando DPASV para
quantificao de dois metais. (B) Voltamograma obtido
para a determinao simultnea de dois metais por
DPASV (ALEIXO, 2007).
A ASV, empregando eletrodo de mercrio, apesar de ser uma tcnica
muito sensvel e conveniente para a anlise de traos restrita a metais que
apresentem solubilidade no mercrio, sendo aplicvel cerca de 30
elementos (ALEIXO, 2007).
A voltametria de redissoluo catdica (Cathodic Stripping
Voltammetry CSV) usada para a determinao de substncias que
formam sais pouco solveis no mercrio do eletrodo de trabalho. A tcnica
consiste na polarizao andica do eletrodo em cuja superfcie se deposita
uma camada de um composto pouco solvel, formada por nions da espcie
e ctions do eletrodo, seguida da eletroreduo da camada depositada
atravs da varredura de potencial no sentido catdico. Entre as espcies que
podem ser determinadas em nvel de traos, pode se exemplificar os
elementos: As, Mn, Se, Mo, cloreto, brometo, iodeto, sulfeto, cianeto, entre
outros.
2.4.3 Voltametria de redissoluo adsortiva
As limitaes apresentadas pela ASV e CSV podem ser eliminadas
atravs da tcnica voltamtrica chamada de voltametria adsortiva por
redissoluo em anlises de traos. Nesta tcnica, a pr-concentrao
feita pela adsoro da espcie eletroativa na superfcie do eletrodo. No caso
de metais, isto feito atravs de seus ons complexos. Adiciona-se
soluo contendo o on metlico um complexante adequado e o complexo
formado (metal-ligante) que ser acumulado junto superfcie do eletrodo.
A pr-concentrao no depende da solubilidade do metal no mercrio como
no caso da voltametria de redissoluo convencional, e metais pouco
solveis no mercrio podero ser determinados (ALEIXO, 2007; SOUZA et
al., 2003)
As tcnicas de voltametria de redissoluo e de adsoro quando
associadas s de pulso diferencial ganham muito em sensibilidade. Neste
caso, a instrumentao foi desenvolvida de tal modo que as medidas de
corrente e as aplicaes de potencial e pulsos de potencial fossem
realizados em intervalos de tempo muito pequeno, permitindo a
determinao de concentraes de diversos ons metlicos na ordem de 10
-9
a 10
-12
mol L
-1
(ALEIXO, 2007) (GARBELLINI et. al., 2008). O esquema de
pr-concentrao utilizado na voltametria adsortiva por redissoluo
(Adsortive Stripping Voltammtry AdSV) semelhante ao da voltametria de
redissoluo andica.
Os parmetros usados na etapa de pr-concentrao so
basicamente os mesmos j discutidos para a ASV, sendo apenas diferentes
os processos de acumulao e de redissoluo. Na figura 8, est
representado esquematicamente o procedimento usado na voltametria
adsortiva por redissoluo para a determinao de um metal M na presena
do ligante L, formando o complexo a ser adsorvido ML
n
.
Figura 8. Representao esquemtica do procedimento usado
na voltametria adsortiva por redissoluo mostrando as
etapas para a acumulao e redissoluo na
determinao de um metal M
n+
em presena de um
ligante(L) (ALEIXO, 2007).
Na voltametria de redissoluo adsortiva pode-se usar um potencial
anlogo ao potencial de deposio da ASV, o potencial de acumulao (E
ac
),
para obter-se uma pr-concentrao mais seletiva, embora isso no seja
necessrio em muitos casos. Aqui tambm existir um tempo de
acumulao (t
ac
), anlogo ao t
d
da ASV, que tambm cronometrado,
durante o qual a espcie de interesse ser adsorvida sobre a superfcie do
eletrodo. As reaes envolvidas nesta etapa so exemplificadas pelas
equaes 6 e 7:
+ +
+
n n
MLn nL M (6)
( ) ads
n
MLn MLn
+ +
(7)
O processo envolvido na interface eletrodo-soluo a adsoro, no
havendo necessidade de um tempo de repouso ou de equilbrio, como no
caso da ASV, onde ocorre eletrodeposio de metais e difuso dos mesmos
no mercrio. Deste modo, aps terminar a pr-concentrao, pode-se
proceder a redissoluo executando a varredura usualmente na direo
catdica pela tcnica voltamtrica adequada, obtendo-se um pico, como no
caso da ASV. A reao eletrdica pode ser representada pela equao 8.
( ) nL M e n MLn
0 -
ads
n
+
+
(8)
Como o metal foi adsorvido, ele ser reduzido a partir do ponto onde o
potencial atingir o valor do potencial de decomposio e o valor de potencial
de pico E
p
, tambm correspondente ao E
1/2
da onda polargrafica; assim, a
varredura de potencial ser catdica e no andica como no caso da ASV,
onde o metal pr-concentrado ser reoxidado (SOUZA et al., 2003; ALEIXO,
2003).
De acordo com a equao 9, a quantidade de composto adsorvido ,
que aps um tempo de acumulao t
ac
cobre a superfcie A do eletrodo,
determina a sensibilidade do sinal medido (CRUZ, 2007).
- Corrente de pico em um voltamograma de redissoluo adsortiva:
1 2
. . . . . 2 .
p a ac ac
D D
i k A k A c t t
r t
| |
= I = +
|
|
\ .
(9)
Sendo:
i
p
= corrente de pico; t
ac
= tempo de acumulao;
k = constante
2 2
n F
k
4 R T
v
=

;
n = nmero de eltrons trocados;
A = rea da superfcie do eletrodo; F = constante de Faraday;
= quantidade de composto
adsorvido; = velocidade de varredura;
c
a
= concentrao do analito; R = constante dos gases; e
D = coeficiente de difuso do
analito; T = temperatura absoluta.
r = raio da gota de mercrio;
At que a superfcie do eletrodo se torne saturada (
max
aps
1 2 /
ac(max)
t )
a corrente de pico aumenta linearmente com t
ac
e atinge um mximo
(Equao 10).
(max) (max)
. .
p
i k A = I (10)
Para que uma substncia possa ser determinada pela AdSV ela
precisa apresentar propriedades de adsoro (superfcie ativa) junto
superfcie do eletrodo de trabalho alm de ser, evidentemente, eletroativa
em uma dada regio de potencial. Isto pode ser feito usando-se um
complexante na soluo associado tcnica de voltametria de pulso
diferencial e de onda quadrada.
Se for feita a varredura no sentido catdico em vrios tempos de
"espera", ou seja, de acumulao, e o pico do voltamograma de pulso
diferencial ou onda quadrada aumentar a cada vez, tem-se o indicativo de
que o complexo est sendo adsorvido. Aumentando-se o tempo de
acumulao, aumenta-se a adsoro e a concentrao do complexo na
superfcie do eletrodo, aumentando-se ento a corrente de pico a cada etapa
enquanto no houver saturao da superfcie.
Se no houver alterao da altura do pico voltamtrico antes de uma
eventual saturao, o on complexo formado no estar sendo adsorvido e
no apresentar coeficiente de adsoro apropriado ao uso desta tcnica.
2.4.4. Voltametria de redissoluo catdica adsortiva
A voltametria de redissoluo catdica adsortiva (Adsorptive Cathodic
Stripping Voltammetry AdCSV) um mtodo que detecta um complexo
eletroquimicamente ativo formado pela reao do metal e um ligante
adicionado amostra. Consiste na acumulao ou pr-concentrao do
analito na forma de um complexante apropriado para adsorver a espcie de
interesse sobre a superfcie do eletrodo (Equao 11) e subsequente,
redissoluo do material adsortivo por varredura catdica do potencial
(SAFAVI et al, 1999; JUGADE et al., 2005; ZAREI et al 2006).
M
n+
+ L ML
n+
(11)
A redissoluo ocorre atravs de uma variao de potencial para
regio mais catdica, ou seja, em direo a potenciais mais negativos. A
medio feita aps ser atingido o equilbrio entre o ligante adicionado e o
metal ligado ao analito (Equaes 12 e 13):
ML
n+
+ n e
-
M + L (12)
M + Hg M(Hg) (13)
Tempos de adsoro curtos resultam em acumulao mais efetiva do
complexo formado. A combinao desse fator com uma reduo eficiente
pode resultar na diminuio dos limites de deteco (de 10
-10
a 10
-11
mol L
-1
).
essencial para o sucesso das anlises que se faa uma escolha criteriosa
dos agentes complexantes para que o complexo resultante tenha superfcie
ativa e seja eletroativo (MELLO, 2003).
O potencial de pr-concentrao aplicado sobre o eletrodo de
trabalho com a finalidade de proporcionar a deposio da espcie de
interesse na superfcie do eletrodo; este um parmetro que deve ser
controlado. aconselhvel averiguar, experimentalmente, o efeito do
potencial de pr-concentrao sobre a corrente de pico a fim de obter
elevadas correntes (ALEIXO, 2003).
O tempo de pr-concentrao selecionado de acordo com a
concentrao da espcie de interesse. Quanto maior o tempo de pr-
concentrao maior a quantidade de analito disponvel no eletrodo durante a
etapa de redissoluo; entretanto, elevar o tempo de pr-concentrao pode
resultar em interferncias devido formao de compostos intermetlicos ou
saturao da superfcie da gota de mercrio.
A sensibilidade e preciso da voltametria de redissoluo so
largamente dependentes do equilbrio hidrodinmico, o qual controla a
quantidade de analito transportado durante a etapa de deposio. O
emprego da agitao da soluo conduz no somente ao transporte por
difuso, mas tambm por conveco, o que proporciona maior sensibilidade
tcnica voltamtrica de redissoluo (SUN et al., 2000; JUGADE et
al.,2005).
Durante a etapa de pr-concentrao e deposio a concentrao do
analito no eletrodo assume distribuio parablica com maior concentrao
em direo soluo. Para permitir a formao de uma concentrao
uniforme da espcie de interesse sobre o eletrodo, um perodo de repouso
empregado entre a etapa de deposio e a medida (SOUZA et al., 2003).
2.5. Interferentes em anlises voltamtricas por redissoluo
De modo geral, os principais interferentes em voltametria de
redissoluo incluem a formao de compostos intermetlicos, sobreposio
de picos de redissoluo, adsoro de compostos orgnicos e complexao.
Compostos intermetlicos podem-se formar no eletrodo de mercrio
quando altas concentraes de certos metais esto presentes. Como
resultado, os picos de redissoluo para os constituintes metlicos podem
ser drasticamente extinguidos ou deslocados e picos adicionais podem ser
observados devido a redissoluo de compostos intermetlicos.
So aconselhveis alguns procedimentos para minimizar a formao
de compostos intermetlicos: usar o eletrodo de mercrio de gota pendente
em lugar de um eletrodo de filme de mercrio; aplicar um potencial de pr-
concentrao suficientemente negativo para reduzir o metal desejado, mas
no o interferente; utilizar perodos de pr-concentrao relativamente curtos
seguidos por uma modulao relativamente grande do pulso (50 mV)
durante o estgio da redissoluo (SUN et al., 2000; ALEIXO ,2007). A
separao de picos de redissoluo sobrepostos inclui a escolha apropriada
do tampo e do eletrlito. Tais recursos podem combinar um pr-tratamento
adequado com a adoo de parmetros eletroqumicos eficientes.
recomendado tambm que se faa uma limpeza eletroqumica ao final de cada
varredura.
Por conseguinte, para reduzir as interferncias a partir de ons em
anlise de amostras naturais recomenda-se que seja utilizado mascarantes
(surfactantes) para aumentar o limite de tolerncia (ANDRADE et al., 2003).
2.6. Quimiometria
A tecnologia dos processadores evoluiu muito nos ltimos anos,
graas as pesquisas para desenvolver os melhores "hardware" e "software".
A qumica analtica ganhou muito com o desenvolvimento da instrumentao
qumica, pois permite o interfaceamento de aparelhos aos computadores
produzindo uma enorme quantidade de informaes, entretanto, essas
informaes que relacionam os sinais obtidos com os resultados desejados
na maioria das vezes so complexas e variadas fazendo-se necessrio
tratamento mais sofisticados de dados, como os providos pela quimiometria
(FERREIRA et al., 1999).
A quimiometria surgiu nos anos oitenta e pode ser definida como a
cincia que relaciona medies realizadas num sistema ou processo qumico
como o estado do sistema, atravs da aplicao de mtodos matemticos ou
estatsticos, permitindo a previso ou seleo de procedimentos de medida
timos ou experincias a realizar para retirar a mxima informao dos
dados adquiridos (NETO et al., 2006).
Uma de suas contribuies foi apresentar aos qumicos o modo de
pensar multivariado. Isso se aplica aos dados da qumica analtica
instrumental, os quais so por natureza multivariados, mas tambm ao
planejamento de experimentos, tradicionalmente dominado pela mentalidade
de variar um fator de cada vez (VALDERRAMA, 2008).
Aplicaes rotineiras de mtodos quimiomtricos afluem da literatura
em qumica analtica, mas apenas uma pequena parte desta literatura tem-
se dedicado ao campo da eletroqumica e eletroanaltica (CORREIA et al.,
2007).
2.6.1. Planejamento experimental
O planejamento experimental uma tcnica que vem sendo usada em
grande escala, onde uma srie de ensaios experimentais pr-estabelecidos
determinam mudanas nas variveis de entrada de um processo ou sistema
de modo que se possa observar e identificar os fatores que modificam a
resposta (FERREIRA et al., 1999; BRASIL et al., 2007).
Aplicando planejamentos experimentais, pesquisadores podem
determinar as variveis que exercem maior influncia no desempenho de um
determinado processo tendo como resultado a reduo da variao do
processo e a melhor concordncia entre os valores medidos e os valores
preditos, reduo do tempo de anlise, do custo operacional e a melhoria
dos resultados.
A figura 9 apresenta um exemplo de estratgia inicial de uma tcnica
de planejamento experimental.
Figura 9. Estratgia Inicial.
Planejamentos experimentais so eficientes quando fornecem uma
quantidade suficiente de informaes com menos esforo. Aps selecionar
as variveis possveis de serem estudadas e que provavelmente interferem
no sistema preciso avaliar a metodologia experimental (tempo, custo, etc.).
As variveis que no foram selecionadas devem ser fixadas durante todo o
experimento (TEFILO et al., 2006).
Tem se encontrado em muitas reas e em diversas metodologias a
aplicao do planejamento experimental, de fato, pode se visualizar a
Planejamento
Objetivos
Modelo (s)
Planejamentos
de
experimentos
Anlise de
resultados
e reviso do
modelo
e do planejamento
experimentao como parte de um processo cientfico bem como uma das
maneiras de descrever sobre como os sistemas e processos se comportam
(NETO et al., 2002; TEFILO et al., 2006). Em uma etapa seguinte deve-se
escolher qual planejamento usar para estimar a influncia das diferentes
variveis no resultado. No estudo de triagem, as interaes entre as
variveis, as interaes principais e as de segunda ordem, obtidas
normalmente pelos planejamentos fatoriais completos ou fracionrios, so
de extrema importncia para a compreenso do comportamento do sistema.
2.6.2. Planejamento fatorial
O planejamento fatorial tem sido muito aplicado em pesquisas bsicas
e tecnolgicas. classificado como um mtodo do tipo simultneo em que
as variveis de interesse que realmente apresentam influncias significativas
na resposta, so avaliadas ao mesmo tempo (NETO et al., 2002) (AOUADA
et al., 2008). Deve ser realizado na fase inicial do procedimento experimental
e quando h necessidade de se definir os fatores mais importantes, bem
como estudar os efeitos sobre a varivel resposta-escolhida. Um
planejamento fatorial requer a execuo de experimentos para todas as
possveis combinaes de nveis dos fatores. Observa-se que, quando se
tem vrios fatores, o nmero de experimentos pode ser imenso (ROSRIO
et al., 1999).
O planejamento fatorial pode ser representado por b
, em que o
nmero de variveis e b o nmero de nveis escolhidos. Os planejamentos
2
so os mais comuns.
Nos planejamentos experimentais onde as variveis so exploradas
em 2 nveis comum codific-los usando os sinais (+) e (-). A atribuio
destes sinais aos nveis superiores ou inferiores feita de forma arbitrria e
no interfere na realizao dos experimentos ou interpretao dos
resultados. Um exemplo de um planejamento mais simples quando num
planejamento fatorial todas as variveis so estudadas em apenas dois
nveis. Havendo k fatores, o planejamento de dois nveis ir requerer a
realizao de 2
k
ensaios diferentes, sendo chamado por isso de fatorial 2
k
(TEFILO, 2003).
A interao de um fator definida como sendo a mudana na resposta
produzida no nvel do outro fator. Este frequentemente chamado de efeito
principal, pois ele se refere aos fatores primrios de interesse do
experimento. Em certos experimentos possvel constatar que a diferena
na resposta entre os nveis de um fator no igual a todos os nveis de
outros fatores. Quando isto ocorre, h uma possvel interao entre estes
fatores. Se o efeito de uma varivel depende do nvel de outra, pode-se dizer
que as duas variveis interagem e possvel calcular o valor do efeito de
interao entre elas. Muitos experimentos envolvem o estudo dos efeitos de
dois ou mais fatores.
Dados sobre interao um fator importante na procura das condies
ideais, desde que sua existncia, implique que o valor assumido por um dos
fatores tenha influncia no efeito da resposta de outro fator. Com esta
tcnica o experimento evolui em estgios pr-planejados.
A anlise de dados pode ser realizada utilizando softwares estatsticos
como MINITAB
, EXCEL
e o STATISTICA
, que proporcionam a utilizao

de tcnicas de planejamento e anlise de experimentos (NETO et al., 2002).
Aps a realizao dos experimentos de triagem, os fatores
significativos so selecionados e uma metodologia de anlise de superfcie
de resposta pode ser executada para a otimizao do experimento. Sendo
que nesta situao, otimizar significa encontrar os valores das variveis que
iro produzir a melhor condio desejada, isto , encontrar a regio tima na
superfcie definida pelos fatores.
2.6.3. Metodologia de superfcie de resposta
A metodologia de superfcie de resposta (Response Surface
Methodology RSM) baseia-se na construo de modelos matemticos
empricos que geralmente empregam funes polinomiais lineares ou
quadrticas para descrever o sistema estudado (TEFILO et al., 2006) e
consequentemente, oferecer condies de explorar o sistema at a sua
otimizao. Em experimentos planejados a utilizao RSM permite que se
faa a otimizao de produtos ou processos atravs da modelagem das
variveis de interesse sendo constituda de duas etapas distintas, a
modelagem e o deslocamento. Estas etapas podem ser repetidas quantas
vezes forem necessrias, com o objetivo de atingir uma regio tima
(mxima ou mnima) da superfcie investigada.
A modelagem feita ajustando-se os modelos lineares ou quadrticos
a resultados experimentais obtidos a partir de planejamentos fatoriais, onde
o deslocamento se processa sempre ao longo do caminho de mxima
inclinao de um determinado modelo, que a trajetria na qual a resposta
varia na forma mais pronunciada (NETO et al., 2002).
De maneira geral, consiste em tcnicas de anlise e planejamentos
de experimentos empregados na modelagem matemtica de respostas, que
procuram relacionar e identificar a relao existente entre fatores
controlveis (variveis independentes) e as respostas como variveis
dependentes do sistema analisado. A superfcie de resposta demonstra em
um grfico o comportamento da resposta em funo de fatores tomados dois
a dois, permitindo analisar os fatores que afetam o sistema.
A funo matemtica que descreve a superfcie de resposta (NETO et
al., 2002) dada pela equao 14 onde x
1
, x
2
,..., x
k
so os fatores
experimentais e c o resduo ou erro experimental.
= | (x
1
, x
2
,..., x
k
) + c (14)
A escolha de um planejamento experimental adequado fundamental
na otimizao e construo da superfcie de resposta (NETO et al., 2002).
Muitos sistemas exibem respostas que so funes no de um, mas de dois
ou mais fatores. A aplicao de modelos empricos para o caso de dois
fatores so os mais simples, alm de ser possvel mostr-los em um grfico
em trs dimenses. Em vrios casos um modelo de primeira ordem (linear)
ou de segunda ordem (quadrtico) usado.
Os polinmios de primeira ordem geralmente so a primeira funo que
utilizada para se aproximar o conjunto de resultados (Equao 15). Neste
caso procura-se verificar se a variao da resposta em funo dos fatores
bem modelada por uma superfcie plana, sendo que |
0,
|
1,
|
2,,
|
k,
representam os coeficientes do polinmio; x
1
, x
2
,..., x
k
so os fatores
experimentais e c o erro experimental.
y = |
0
+ |
1
x
1
+ |
2
x
2
+... + |
k
x
k
+ c (15)
Se o teste estatstico aponta que o modelo linear no satisfaz as
condies de operao do sistema, porque existe uma curvatura na
superfcie de resposta ento, o planejamento composto central (Central
Composite Design - CCD) apropriado para ajustar o modelo polinomial
completo de segunda ordem. A funo a ser aproximada no conjunto de
resultados um polinmio de ordem maior como um modelo quadrtico
(Equao 16) sendo que |
0,
|
1,
|
2,,
|
k
representam os coeficientes do
polinmio de 2 grau; x
1
, x
2
,..., x
k
so os fatores experimentais e c o erro
experimental.
2
0
1 1
k k
i i ii i ij i j
i i i j
y x x x x | | | | c
= =
= + + + +
_ _ __
(16)
O planejamento estrela feito fora de duas combinaes de
tratamento axial nos nveis baixo e alto para cada fator mantendo todos os
outros fixos nos pontos centrais acrescidos de um ponto unitrio no nvel
central para todos os fatores (TEFILO et al., 2006).
O CCD, introduzido por Box e Wilson no incio da dcada de 1950, so
construes sem o correspondente planejamento fatorial completo (nveis
baixos e altos), apresenta uma grande sobreposio do planejamento estrela
(Figura 10 A) dando a ele uma forma esfrica (Figura 10 B).
(A)
(B)
Figura 10. (A) planejamento composto central para dois fatores
(k=2 e = 2 ). (B) planejamento composto central para
trs fatores (k=3 e = 3 ) (TEFILO et al., 2006).
O CCD na verdade o planejamento fatorial clssico em dois nveis
(2k), utilizado para ajuste em equao de primeira ordem, acrescido de
alguns pontos experimentais que permitem a estimao dos coeficientes de
uma superfcie de 2 ordem. No CCD comum codificar os nveis das
variveis. Geralmente, assumem-se trs nveis igualmente espaados, de
forma que assumam os valores de 1 e +1, respectivamente para o valor
inferior, intermedirio e superior. A atribuio dos sinais de codificao aos
nveis superiores ou inferiores feita de forma arbitrria e no interfere na
realizao dos experimentos ou na interpretao dos resultados, alm de
permitir esquematizar o planejamento na forma de matrizes de
planejamento. As matrizes de planejamento so tabelas utilizadas para
organizar as informaes relacionadas ao desenvolvimento de um
planejamento fatorial.
O CCD apresenta notvel superioridade sobre o planejamento fatorial
para se estimar os parmetros do modelo, pois proporciona o teste para a
varincia da estabilidade, alm disso, o modelo de segunda ordem completo
pode ser ajustado com o nmero de graus de liberdade fornecido pela
combinao de tratamentos do CCD (TEFILO et al., 2006).
2.6.4. Significncia e confiabilidade nos experimentos
Ao realizar os experimentos podem-se estimar alguns parmetros que
reduzem a probabilidade de errar nas decises ou chegar a uma concluso
incerta sobre os fatores que influenciam o sistema investigado (NETO et al.,
2002).
A probabilidade de se cometer um erro ao se rejeitar a hiptese nula
quando ela verdadeira identificada como nvel de significncia (o) do
teste estatstico, o qual controlado e definido decidindo o nvel de risco o
que se est disposto a tolerar, sendo recomendvel selecionar os nveis de
o em torno de 0,1 ou menos. O complemento da probabilidade de um erro
de rejeio da hiptese nula sendo verdadeira denominado de confiana,
que identificado com (1 - o). Se este termo for multiplicado por 100%,
temos o nvel de confiana do experimento. O problema consiste ento na
comparao de mais de duas mdias. Neste caso a tcnica indicada a
anlise de varincia.
A Anlise de Varincia (Analisys of Variance ANOVA) foi
desenvolvida e utilizada pela primeira vez por Ronald A. Fischer. Box,
Yates, Bose, Cochran e Kempthorne posteriormente contriburam para a
evoluo da tcnica (DEMING et al., 1987; NETO et al., 2002). ANOVA
uma ferramenta para comparao de vrios grupos ou estratos de interesse,
permitindo investigar a existncia de diferenas significativas entre os grupos
estudados. Concluses obtidas a partir da ANOVA apresentam um nvel de
confiana determinado pelo analista.
Na anlise de varincia (ANOVA) a variao total da resposta
definida como a soma quadrtica de dois componentes: a soma quadrtica
da regresso e a soma quadrtica dos resduos (TEFILO et al., 2006).
A soma quadrtica da variao total, corrigida para a mdia (SQ
Tot
)
pode, assim, ser escrita como mostra a tabela 1.
Tabela 1: Tabela com os clculos matemticos utilizados na
Anlise de Varincia (ANOVA)
2.7. Validao dos mtodos analticos tcnicas e conceitos
A utilizao de um mtodo analtico exige confiabilidade, assim os
resultados apresentados devem ser precisos e o valor obtido para a
concentrao do analito deve ser verdadeiro dentro da faixa do erro
experimental. Para analisar o desempenho de mtodos analticos e para
constatar se os resultados so consistentes entre si e prximos aos valores
verdadeiros de concentrao do analito na amostra, avalia-se a preciso e a
exatido dos mesmos, respectivamente, a partir de parmetros como a
linearidade, seletividade, limite de deteco e a sensibilidade.
2.7.1. Sensibilidade
A sensibilidade indica quanto um mtodo pode diferenciar amostras
com concentraes parecidas de analito (RIBANI, 2004), de acordo com a
equao 17 pela inclinao da curva analtica.
sin
[ ]
valor do al dacorrente
Sensibilidade
analito
A
=
A
(17)
2.7.2. Limite de deteco e quantificao
O limite de deteco (LD) o valor de concentrao do analito que
corresponde ao menor sinal que pode ser detectado com certeza razovel
em um dado mtodo analtico. O valor recomendado para o limite de
deteco obedece equao 18.
3
B
S
LD
b
= (18)
sendo S
B
a estimativa do desvio padro da mdia aritmtica e o b o valor do
coeficiente angular da reta de calibrao obtida da curva.
O limite de quantificao (LQ) corresponde menor quantidade de um
analito que pode ser quantificada com exatido. O valor recomendado para o
limite de quantificao obedece equao 19.
10
B
S
LQ
b
= (19)
2.7.3. Seletividade
A seletividade de um mtodo o quanto esse mtodo livre da ao
de potenciais interferentes. O grau de seletividade do mtodo pode ser
avaliado atravs de um estudo determinando o analito na presena de
possveis interferentes.
2.7.4. Preciso
A preciso de um mtodo caracteriza-se pela reprodutibilidade e
repetibilidade das medidas feitas com o analito. A repetibilidade se refere ao
grau de reproduo do sinal analtico em relao s medidas feitas com
replicatas nas mesmas condies experimentais, enquanto que a
reprodutibilidade associada ao grau de reproduo do sinal ao usar
diferentes amostras do mesmo ponto amostral e ou diferentes calibraes.
Os valores de desvio padro e de varincia obtidos a partir dos dados
experimentais so indicadores de preciso (RIBANI, 2004).
2.7.4.1. Repetitividade
A repetitividade caracteriza-se pela concordncia entre os resultados
de medies sucessivas por um mesmo mtodo. Itens como, procedimentos
analista e aparelhos usados sob as mesmas condies de trabalho em
intervalos curtos de tempo so observados e avaliados.
2.7.4.2. Preciso intermediria
A preciso intermediria indica o efeito de variaes dentro do mesmo
laboratrio devido diferentes circunstncias como diferentes dias,
equipamentos ou analistas. O objetivo da validao intermediria verificar
que num mesmo laboratrio o mtodo fornecer os mesmos resultados
(RIBANI, 2004).
2.7.4.3. Preciso instrumental
Este parmetro tem como objetivo verificar a variao da resposta do
equipamento atravs de sucessivas injees de uma mesma amostra.
2.7.5. Exatido
A exatido da anlise indicada pela diferena entre o resultado
analtico e o valor verdadeiro associado amostra (RIBANI, 2004). Existem
vrias formas de se determinar a exatido de um mtodo, avaliando fatores
como a seletividade, a linearidade da curva analtica e comparando
resultados obtidos por um novo mtodo com os obtidos por um mtodo
padro.
2.7.5.1. Linearidade de uma curva analtica
A linearidade da curva expressa pelo coeficiente de correlao (r),
calculado atravs de regresso linear. Quanto mais esse valor estiver perto
da unidade, maior a linearidade da curva. Para concentraes acima do
limite da faixa linear o sinal medido menor que o sinal interpolado a partir
da curva de calibrao. A faixa linear da curva analtica definida como a
regio da curva onde h uma boa correlao linear (r = 0,999) entre os
sinais analticos registrados e as concentraes correspondentes ao analito.
Dentro dessa faixa a sensibilidade do mtodo estvel.
2.7.5.2. Ensaio de recuperao
O ensaio de recuperao avalia a poro do analito que estava
originalmente na matriz em estudo pelo mtodo voltamtrico proposto.
2.8. Ambiente computacional
O software Statistica
uma linguagem computacional dotada de

variadas metodologias utilizadas em grande escala em tratamentos
estatsticos. tambm largamente utilizado por profissionais de qumica.
excelente para analisar dados, pois este mdulo estrutural possui todas as
ferramentas grficas de integrao e produo de relatrios, dispe de
processos apropriados para recolher, organizar, classificar, apresentar e
interpretar conjuntos de dados. Oferece estatsticas essenciais com clareza
de anlise, facilidade de benefcio de uso, alm de conter ferramentas para
estatstica descritiva, regresso linear, anlise de varincia, testes de
hipteses e testes no-paramtricos.
O software Statistica
possui todas as tcnicas para anlise descritiva

de dados como intervalos de confiana, desvio-padro, erro-padro, mdia
harmnica, testes t para uma e duas amostras e teste t pareado. Inclui
desde medidas de posio, a teste de estimativas e regresso.
Em todos os mdulos do Statistica
h uma diversidade de grficos

que ajudam na explorao dos dados e visualizao dos resultados
histogramas, grficos, scatterplots, grfico de superfcie, entre outros. O
software Statistica
fornece tcnicas para extrair informaes relevantes de

bancos de dados, os quais so muitas vezes incompletos, na medida em
que so expostos. O objetivo do sistema extrair informaes teis sobre
problemas em estudo, realando aspectos importantes at ento
desconhecidos.
Material emtodos 33
3. MATERIAL E MTODOS
3.1. Limpeza do material
Antes de iniciar o processo experimental todo o material a ser
utilizado passou por um procedimento de limpeza, com o intuito de
assegurar a ausncia de quaisquer resduos que pudessem interferir nas
medidas. A vidraria utilizada foi lavada com detergente, mergulhada em
soluo de HNO
3
6,0 mol L
-1
por 72 horas, posteriormente, lavada com gua
destilada e em seguida com gua deionizada. O tratamento com HNO
3
foi
realizado para evitar a contaminao da soluo em contato com a vidraria
atravs da troca de ons metlicos, possivelmente adsorvidos em sua
superfcie, que poderiam ser liberados para a soluo por ons H
+
, enquanto
que, os recipientes de polietileno utilizados para armazenamento das
solues foram tratados com soluo HNO
3
20% por 72 horas e em seguida,
lavados com gua deionizada.
Para reduzir os riscos de contaminao, a cela de medidas foi lavada
com soluo de HNO
3
1:1 e em seguida com gua deionizada a cada final
de anlise. Durante as anlises os materiais necessrios tais como, clulas
de vidro, frascos com gua deionizada, reagentes e amostras foram
manuseados com o auxlio de luvas de polietileno descartveis.
3.2. Aferio de material volumtrico
Foram utilizadas micropipetas volumtricas de 10, 50, 100 e 200 L;
todas com ponteiras descartveis de polietileno. Todo material volumtrico
foi calibrado ou aferido a fim de verificar se os volumes neles indicados
correspondiam aos volumes reais. A calibrao ou aferio foi realizada
mediante a pesagem da quantidade de gua neles contida a uma
temperatura prxima a 25 C.
O volume real calculado (V) foi obtido atravs da multiplicao da
massa de gua (m) obtida pelo fator de converso tabelado (f),
correspondente temperatura de trabalho (25
o
C), conforme a expresso da
equao 20:
Material emtodos 34
V = m . f
(20)
Foram realizadas a aferio de bales de 50 e 100 mL, pipetas de 5,
10 e 20 mL, como tambm as pipetas automticas de 10, 50, 100 e 200 L.
As variaes encontradas foram em mdia 0,20% e 0,10% para os bales;
1%; e 3% para as pipetas volumtricas e 0,20%, 0,10%, 1%, 3% para as
pipetas automticas.
3.3. Reagentes
Todos os compostos e reagentes qumicos utilizados neste trabalho
foram de grau analtico e no sofreram etapas prvias de purificao. A gua
ultra-pura utilizada para o preparo de todas as solues foi deionizada pelo
aparelho da BAUMER
(CIRURTEC HOSPITALAR TKA DI 800 / 1900).

O complexante 8-hidroxiquinolina foi obtido da Vetec
e os diversos
reagentes utilizados para se preparar o eletrlito de suporte foram cido
actico glacial (Merck
), acetato de sdio (Vetec
) e nitrato de potssio
(Vetec
). Os diversos cidos utilizados na digesto das amostras foram:

cido clordrico (Merck
), cido ntrico (Merck
), cido perclrico (Reagen
),
cido fluordrico (Vetec
) e perxido de hidrognio (Vetec
). Os reagentes
nitrato de sdio (Vetec
) e hidrxido de sdio (Vetec
) foram utilizados em
alguns testes durante o trabalho de otimizao. O gs nitrognio utilizado na
clula voltamtrica foi da White Martins, com teor de pureza de 99,996%. O
mercrio utilizado em todo o trabalho foi proveniente da Merck
.
3.4. Preparo de solues
As solues foram preparadas com gua deionizada, sendo que as
solues dos ons metlicos foram preparadas em HNO
3
0,001 mol L
-1
.
Todas as solues e misturas foram armazenadas em frascos de polietileno
ou vidro previamente descontaminados em banho de cido ntrico 6,0 mol L
-1
por um dia e em seguida lavados com gua deionizada.
A soluo estoque padro de molibdnio (1g L
-1
) foi preparada
dissolvendo-se 1,8402 g de (NH
4
)
6
Mo
7
O
24
4H
2
Oem 1 L de HNO
3
0,1 mol L
-1
.
Atravs desta soluo foram preparados todos os padres diludos utilizados
no experimento. A soluo padro de trabalho Mo(VI) 200 mg L
-1
foi
Material emtodos 35
preparada e acondicionada na geladeira e foi usada por um perodo de uma
semana.
3.4.1. Solues para calibrao multivariada
A soluo estoque 0,1 mol L
-1
de oxina (8-hidroxiquinolina) em HCl
0,5 mol L
-1
foi preparada dissolvendo-se 0,56 g de (8-hidroxiquinolina ) em
100 mL de HCl 0,5 mol L
-1
. Por diluio, obteve-se semanalmente, uma
soluo 0,01 mol L
-1
de oxina enquanto que a soluo 2 mol L
-1
de KNO
3
foi
preparada dissolvendo-se 20,22 g de KNO
3
em gua deionizada e
transferindo-se para um balo volumtrico de 100,0 mL, o qual foi
completado o volume com gua deionizada. A soluo tampo cido
actico/acetato de sdio (CH
3
COOH/CH
3
COONa) 0,5 mol L
-1
, pH = 4,7 foi
preparada atravs de quantidades necessrias de soluo acetato de sdio
2,0 mol L
-1
e soluo cido actico 2,0 mol L
-1
; o pH da soluo tampo foi
ajustado quando necessrio usando solues de NaOH 1,0 mol L
-1
e HCl
2,0 mol L
-1
padronizadas.
3.4.2. Outras solues
A soluo de Triton X-100 10% (m/v) foi preparada dissolvendo-se
10,0 g de Triton X-100 em gua deionizada e o volume foi completado para
100 mL em balo volumtrico aferido. Esta soluo foi utilizada no teste de
interferentes.
3.5. Instrumentao
3.5.1. Instrumentao para anlises voltamtricas
As determinaes voltamtricas foram executadas em um analisador
voltamtrico da Metrohm
modelo 797 VA Computrace (Figura 11), operando

com um eletrodo de mercrio foi utilizado no modo de eletrodo de mercrio
de gota pendente (HMDE). Assim toda a varredura de potencial foi realizada
em uma gota estacionria, em geral com o passo de pr-concentrao. O
sistema foi mantido bem fechado para evitar entrada de ar no interior do
capilar.
Material emtodos 36
(A) (B)
Figura 11. (A) Instrumento voltamtrico 797 VA Computrace
(B) Montagem completa do sistema.
A principal vantagem desse eletrodo sua excelente faixa de
potencial de reduo associada a uma corrente residual baixa. Sua
importncia prtica reside na facilidade com que reproduz novas gotas de
mercrio no final de cada anlise. As desvantagens incluem velocidades de
agitao baixas, a fim de evitar o desprendimento da gota de mercrio
durante a deposio e uma razo rea superficial/volume relativamente
pequena que leva a formao de picos mais largos provocando perda da
resoluo. Entretanto, eletrodos de mercrio so muito utilizados em
tcnicas de redissoluo devido ao fato de apresentarem ampla faixa de
potencial em regio catdica e elevada sobretenso em relao reduo
H
+
/H
2
. O eletrodo de referncia foi o eletrodo de prata/cloreto de prata
Ag/AgCl (3,0 mol L
-1
KCl). Foi empregado um eletrodo auxiliar de platina,
como mostrado na figura 12.
Figura 12. Clula voltamtrica do analisador polarogrfico 797
VA Computrace, destacando os trs eletrodos e o
agitador no magntico.
Material emtodos 37
Um pHmetro Orion-Jundilab, modelo 720 A (Figura 13) com eletrodo
de vidro de dupla juno foi adaptado ao polargrafo da Metrohm
, para
verificao do pH das amostras na clula voltamtrica durante a realizao
das varreduras.
Figura 13. Medidor de pH adaptado ao aparelho 797 VA
Computrace.
O sistema voltamtrico 797 VA Computrace requer para o seu
funcionamento um computador Pentium III acima de 1GHz, um sistema
operacional Windows
2000 ou Windows
XP Professional, com espao livre

no disco rgido de 20 MB para arquivos do programa e recomenda-se 100
MB de espao para arquivos de dados, memria RAM de 256 MB, resoluo
grfica 1024768 ou mais e uma conexo USB para o interfaceamento.
A manipulao dos dados, o armazenamento e a sada para
visualizao dos resultados foram controlados pelo software VA
Computrace 1.2 (METRODATA, 2005).
De acordo com o objetivo, o software 797 VA Computrace verso 1.2
pode ser usado em dois modos de operaes diferentes:
- Modo Exploratrio: utilizado para anlises qualitativas. adequado
para prticas orientadas de voltametria no treinamento de operao do
instrumento. Este modo permite ao usurio aplicar dez diferentes tcnicas
voltamtricas de medidas e comparar seus resultados.
- Modo de Determinao: usado para anlises quantitativas de
substncias orgnicas e inorgnicas. A calibrao pode ser feita via adio
Material emtodos 38
de padro ou curvas de calibrao. A avaliao do sinal e o clculo das
concentraes so automticos. Ao final da medida, um relatrio pode ser
gerado e impresso. A maioria dos mtodos importantes para determinao
de metais ou outras substncias podem ser acessados diretamente. Todas
as informaes numricas e grficas podem ser visualizadas. Os
voltamogramas, curvas de calibrao e os resultados numricos podem ser
transferidos para outras aplicaes do Windows via Windows Clipboard.
Tambm possvel importar e exportar os dados em formato ASCII.
3.5.2. Espectrofotmetro de absoro atmica
A determinao das concentraes do metal em estudo para efeito de
comparao foi realizada em um espectrmetro de emisso de plasma da
Perkin Elmer modelo Optima 3300 DV.
3.6. Aquisio e tratamento de dados
Os dados voltamtricos foram registrados atravs do programa 797
VA Computrace que foram processados com o prprio programa do
polargrafo e tambm por programas comerciais que operam dentro do
ambiente Windows, como o OriginPro 7.5
e o Statistica 7.0
.
3.7. Parmetros eletroanalticos
Obedecendo aos parmetros voltamtricos da literatura pesquisada,
foi colocada em prtica a metodologia de voltametria para se determinar
molibdnio em nveis traos em solos e plantas usando amostra padro de
200 g L
-1
de Mo(VI). A partir dos resultados obtidos foi feita a otimizao do
eletrlito de suporte e dos parmetros voltamtricos para se melhorar as
respostas instrumentais. A partir de estudos iniciais foram definidos os
valores dos parmetros escolhidos para o planejamento fatorial.
Em anlise voltamtrica, um fator que certamente interferir na
resposta a natureza do eletrlito de suporte e sua concentrao. A escolha
de um eletrlito de suporte em voltametria exige uma seleo entre muitas
solues, portanto, este fator no pode ser includo em um planejamento
experimental sem um prvio conhecimento. O mtodo qualitativo uma
opo para selecionar bons eletrlitos a serem includos em um
planejamento experimental. Para a situao em questo, estudos anteriores
Material emtodos 39
realizados com molibdnio mostraram ser o meio cido o melhor meio para
anlise deste tipo de composto. Desta maneira, o eletrlito de suporte
escolhido para ser includo no planejamento fatorial deste estudo foi a
soluo acetato de sdio/cido actico e KNO
3
, sendo avaliado no
planejamento qual a melhor concentrao do mesmo para se obter a melhor
resposta. A presena de eletrlito de suporte na cela eletroqumica, no caso
a soluo acetato de sdio/cido actico e KNO
3
, garante um decrscimo na
resistncia da soluo e permite que as espcies eletroativas movam-se
principalmente por difuso (LI HONG et al, 1997); alm disso, o eletrlito de
suporte tambm ajuda a manter o pH em um valor desejado. Dessa forma, o
uso de solues tampo altamente difundido para estas situaes.
3.8. Estudo inicial da composio do eletrlito
O eletrlito de suporte uma soluo inica cuja concentrao deve
estar tipicamente entre 10 a 100 vezes maior que as das espcies a serem
estudadas. Este deve ser eletroinativo na faixa de potencial do eletrodo onde
os estudos com o analito de interesse so realizados. Tambm deve ser
neutro no reagindo com o analito eletroativo ou nenhum de seus
subprodutos. A principal funo do eletrlito de suporte ser responsvel
pela totalidade da corrente inica da cela, uma vez que ele est em excesso
em relao s demais substncias em soluo. A alta concentrao do
eletrlito de suporte mantm baixa a resistncia da cela, tambm mantm a
fora inica da soluo constante impedindo que a composio da interface
entre a soluo e o eletrodo mude significativamente com a corrente
proveniente da reao. Como a composio desta regio influi nas medidas
eltricas necessrio que ela se mantenha constante durante todo o tempo
da anlise. Finalmente, o eletrlito de suporte suprime a contribuio da
corrente de migrao (formao de um gradiente de carga eltrica) no
transporte do analito para a superfcie do eletrodo.
A primeira etapa dessa otimizao foi encontrar a melhor composio
do eletrlito de suporte, visando obter um sinal eletroanaltico relevante da
soluo padro de molibdnio. Estabeleceram-se como caractersticas para
escolha da composio do eletrlito: correntes faradaicas estveis,
reprodutveis e de maior intensidade para o molibdnio.
Material emtodos 40
Para iniciar a otimizao da composio do eletrlito de suporte para
a determinao de Mo(VI) empregou-se uma mistura de KNO
3
1,0 mol L
-1
,
soluo tampo cido actico/acetato de sdio (CH
3
COOH/CH
3
COONa) 1,0
mol L
-1
e o complexante 8-hidroxiquinolina (oxina) 0,01 mol L
-1
.
3.9. Planejamento experimental
Os fatores estudados foram: o tamanho da gota (rea) de mercrio a
ser formada (mm
2
), o tempo de deposio (s), freqncia (Hz), amplitude
(mV) e o incremento de varredura (V) e a mistura da composio do
eletrlito tambm foram escolhidos como parmetros a serem analisados no
planejamento fatorial. As medidas foram feitas utilizando um tempo de
deposio de 80 s. A primeira leitura na ausncia de molibdnio foi gravada
como branco. Em seguida foi adicionada uma alquota de 100 L de uma
soluo padro contendo ons Mo(VI) na concentrao de 200 g L
-1
.
Quando se analisa oito variveis em dois nveis em um planejamento
fatorial completo, o tempo gasto muito longo, pois 2
8
correspondem a 256
ensaios. Para fazer a triagem identificando as variveis realmente
significativas, comparando os efeitos e as interaes entre elas, foram
executados ensaios utilizando o planejamento fatorial fracionrio, utilizando
oito fatores com dois nveis para cada fator; logo, um planejamento fatorial
fracionrio
IV
4 8
2

de resoluo IV (ROSRIO et al., 1999). O procedimento em
todos os experimentos realizados para a otimizao da resposta voltamtrica
foi feito pela adio de 10 mL de gua deionizada acidificada com HNO
3
0,01 mol L
-1
(pH 2,0), 70 L de complexante oxina, 1,30 mL de soluo
tampo de cido actico/acetato de sdio, 2,00 mL de nitrato de potssio e
100 L de soluo de Mo(VI) em uma clula voltamtrica. Foi feita a
desoxigenao desta mistura por borbulhamento de nitrognio ultra puro por
10 minutos nesta etapa. Depois do tempo de equilbrio (10 s), uma varredura
catdica foi aplicada de -0,2 a -0,7 volts. Em seguida foi adicionado um
volume de 100 L da soluo da molibdnio 200 g L
-1
. Procedeu-se a
desoxigenao por 90 segundos e realizou-se nova varredura na mesma
faixa de potencial.
O analisador voltamtrico foi programado para realizar trs varreduras
em cada experimento registrando a mdia das correntes de pico mximo no
potencial de determinao do molibdnio. Cada ensaio no planejamento
Material emtodos 41
fatorial foi realizado em triplicata e os resultados foram anotados para o
estudo dos nveis dos fatores a serem empregados posteriormente no
tratamento quimiomtrico.
O planejamento experimental, tambm denominado delineamento
experimental, foi utilizado com o objetivo de determinar a influncia de
diversas variveis nos resultados de um dado sistema ou processo para se
conseguir o mximo de informao til a partir de poucos ensaios. Isso
proporciona economia de tempo e de reagentes, produzindo resultados mais
satisfatrios.
3.10. Estudos iniciais para as determinaes voltamtricas de
Mo(VI)
Aps ter sido encontrado os parmetros otimizados do eletrlito de
suporte como KNO
3
2,0 mol L
-1
, complexante 8-hidroxiquinolina (oxina) 0,01
mol L
-1
, tampo de cido actico/acetato de sdio (CH
3
COOH/CH
3
COONa)
0,5 mol L
-1
(pH 4,65), foram realizadas varreduras com medida da corrente
de pico no potencial de -0,54 V.
Este procedimento foi executado em todos os experimentos
realizados para a otimizao da resposta voltamtrica, composta por 10 mL
de gua deionizada acidificada com HNO
3
0,01 mol L
-1
(pH 2,0), 1,3 mL de
soluo tampo cido actico/acetato de sdio (CH
3
COOH/CH
3
COONa) 0,5
mol L
-1
(pH 4,65), 2,0 mL de KNO
3
2,0 mol L
-1
e 70 L do complexante 8-
hidroxiquinolina (oxina) 0,01 mol L
-1
. Estes foram desoxigenados por
borbulamento de gs nitrognio ultra puro por 10 minutos em uma primeira
etapa e por 90 segundos nas sucessivas etapas, como anteriormente.
Depois do tempo de equilbrio (10 s) uma varredura catdica foi aplicada
entre -0,2 e -0,7 V. A adio de 100 L de amostra padro de Mo 100 g L
-1
foi feita aps a execuo do voltamograma do branco.
3.11. Otimizao da resposta voltamtrica
Ao se desenvolver uma metodologia eletroanaltica de extrema
importncia fazer a otimizao dos parmetros que possam influenciar na
resposta do eletrodo, buscando desta forma o maior sinal analtico do
eletrodo. Deste modo foi realizado o estudo dos parmetros descritos no
item 3.7. disponibilizados pelo software VA Computrace 1.2 (METRODATA,
Material emtodos 42
2005). Outros parmetros como purga inicial, tempo de purga adicional e
tempo de equilbrio foram fixados em 600, 90 e 10 s respectivamente. O
planejamento fatorial completo apresentou cinco fatores com dois nveis
para cada fator.
3.12. Preparo das amostras
As amostras de solos e plantas utilizadas no experimento foram
gentilmente cedidas pelo Departamento de Solos da Universidade Federal
de Viosa. Estas estavam devidamente selecionadas, secas e trituradas.
3.12.1. Solos
O solo modo foi peneirado com malha de 1 mm (16 mesh). Pesou-se
0,25 g com preciso de 1 mg da amostra em bqueres de teflon. Foi
utilizada a metodologia da digesto total de quatro cidos (HNO
3
, HClO
4
,
H
2
SO
4
e HF) para efetuar a abertura da amostra, adicionou-se algumas
gotas de gua deionizada para umedecer a amostra. Foi realizado um
pr-tratamento com perxido de hidrognio (H
2
O
2
, 30% V) para eliminao
da matria orgnica. Logo em seguida foi adicionado 5 mL de HNO
3
e
aqueceu-se elevao gradual da temperatura at 140 C em bloco
digestor.
A amostra foi digerida at restar cerca de 1 mL de cido, onde foram
acrescentados 3 mL de HF, 1 mL de HClO
4
e 1 mL de H
2
SO
4
, deixando-se
aquecer no banho de areia at que a cor da suspenso ficasse clara. Depois
que o volume baixou apresentando suspenso clara adicionou-se 1 mL de
HClO
4
. Foi feito o aquecimento em bloco digestor at a digesto total.
Recomenda-se quando a amostra no estiver completamente dissolvida que
se acrescente 3 mL de HF e proceda o aquecimento, repetindo este
processo at que haja digesto total. Aps digesto total deixou-se evaporar
todo o HF restando no bquer um gel de cor amarela. Foi adicionado 5 mL
de HNO
3
(1:1) e aqueceu-se at a solubilizao do gel. Em seguida, os
extratos foram retirados do banho de areia e resfriados a temperatura
ambiente. Estando a amostra completamente dissolvida, lavou-se com
cuidado o bquer utilizando gua deionizada vertendo todo o liquido atravs
do filtro rpido (membrana celulsica com 0,45 m de dimetro). Completou
se o volume para 50 mL e reservou se o extrato para leitura.
Material emtodos 43
A digesto de cada amostra foi realizada em triplicata e um branco foi
preparado a partir dos respectivos volumes dos cidos utilizados.
3.12.2. Vegetais
A combinao de um cido oxidante e outro agente oxidante tem sido
bastante utilizada na abertura de amostras vegetais, pois o agente oxidante
potencializa o poder de oxidao do cido. Em geral, se emprega o perxido
de hidrognio como oxidante devido ao seu alto poder de oxidao e ao seu
alto grau de pureza, resultando em baixos valores das amostras em branco,
alm disso, o produto final da sua decomposio a gua.
Para a abertura da amostra pesou-se 0,25 g em bqueres de teflon
com preciso de 1 mg da amostra de vegetal triturado, peneirado com malha
de 1 mm (16 mesh). Adicionou-se algumas gotas de gua deionizada para
umedecer a amostra e em seguida adicionou-se 3 mL de perxido de
hidrognio (H
2
O
2
, 30% V) e 5 mL de HNO
3
. Aqueceu-se com elevao
gradual da temperatura at a fervura, mantendo-se no bloco digestor at que
a cor da suspenso ficasse clara. Recomenda-se quando a amostra no
estiver completamente dissolvida que se acrescente 3 mL de HNO
3
e
proceda o aquecimento, repetindo este processo at que haja digesto total.
Os extratos foram retirados do banho de areia e resfriados a temperatura
ambiente. Estando completamente dissolvidas, lavou-se com cuidado o
bquer utilizando gua deionizada, vertendo todo o lquido atravs do filtro
rpido de membrana celulsica com 0,45 m de dimetro. Completou-se o
volume para 50 mL e reservou o extrato para leitura. A digesto das
amostras foi realizada em triplicata e um branco foi preparado a partir dos
respectivos volumes dos reagentes utilizados.
3.13. Aplicao da tcnica de recuperao
As amostras foram validadas utilizando medidas obtidas com
espectrometria de emisso atmica, com fonte de plasma induzido (ICP-
AES) e com determinaes conhecidas como teste de recuperao
utilizando-se o teste de dopagem das amostras com 2,0 ppb de Mo(VI) e
verificando o sinal recuperado para cada uma. Estas determinaes
consistem no enriquecimento da amostra com uma quantidade conhecida do
padro utilizado. O resultado obtido para a concentrao do analito com a
Material emtodos 44
amostra enriquecida foi subtrado do resultado obtido da amostra natural
sem o enriquecimento. A diferena deve resultar no valor da concentrao
do padro adicionado para o enriquecimento da amostra dentro do erro
experimental. O resultado expresso em termos de porcentagem de
recuperao do padro adicionado (SKOOG et al., 1992).
Nestas condies, obtiveram-se os resultados exibidos na tabela 18,
evidenciando que o mtodo voltamtrico possibilita a determinao de
molibdnio nas amostras de solos e plantas, visto que no se utilizou
nenhuma etapa de separao ou pr-concentrao das amostras, e que
bons resultados foram obtidos nas determinaes diretas, sendo que estes
so compatveis com os resultados do ICP-AES e com os resultados dos
testes de recuperao.
ResultadoseDiscusso 45
4. RESULTADOS E DISCUSSO
4.1. Otimizao da concentrao de oxina e o eletrlito para a
deteco de Mo(VI)
4.1.1. Estudo dos parmetros voltamtricos
No estudo do planejamento como no se conhece as variveis que
afetam significativamente a resposta e para no excluir de forma arbitrria
fatores potencialmente importantes conveniente incluir neste estgio o
maior nmero possvel de variveis (MASSART et al., 1978) as quais foram
relatadas no item 3.7.
4.1.2. Planejamento fatorial escolha dos fatores
Para se evitar um nmero excessivo de ensaios foram realizados
estudos utilizando o planejamento fatorial fracionrio saturado
IV
4 8
2

de
resoluo IV, ao invs do fatorial completo. Os fatores escolhidos e os
respectivos nveis esto expostos na tabela 2, enquanto que na tabela 3
encontram-se respostas para a SWV.
fatorial fracionrio
IV
4 8
2

de resoluo IV.
Nveis
Smbolo Fatores
___________________________________
- +
1 AM Amplitude (mV) 50 150
2 FR Freqncia (Hz) 25 150
3 IV Incremento de varredura (V) 0,0001 0,01
4 TG Tamanho da gota (mm
2
) 0,2 0,6
5 TD Tempo de deposio (s) 30 180
6 CK Concentrao de KNO
3
(mol L
-1
) 0,5 3,0
7 ST Soluo tampo (mol L
-1
) 0,5 3,0
8 CO Concentrao de oxina (mol L
-1
) 0,005 0,1
Tabela 3. Planejamento fatorial fracionrio saturado
IV
4 8
2

,
definida por I = 1248, I = 1358, I = 2368 e I = 1237.
Experimento Fatores Resposta X
AM FR IV TG TD CK ST CO nA
01 - - - + + + - + 155
02 + - - - - + + + 262
03 - + - - + - + + 107
04 + + - + - - - + 119
05 - - + + - - + + 679
06 + - + - + - - + 381
07 - + + - - + - + 392
08 + + + + + + + + 286
09 + + + - - - + - 366
10 - + + + + - - - 472
11 + - + + - + - - 498
12 - - + - + + + - 523
13 + + - - + + - - 307
14 - + - + - + + - 208
15 + - - + + - + - 259
16 - - - - - - - - 209

Os efeitos das variveis foram obtidos utilizando o software Statistica
7.0
. Os resultados esto expostos na tabela 4.

planejamento fatorial fracionrio saturado
IV
4 8
2

para a
SWV.
Estimativa dos efeitos erro padro Relao t(23)
Mdia 323,72 15,06 21,50
Principais
AM -28,94 30,11 -0,96
FR -88,44 30,11 -2,94
IV 246,81 30,11 8,19
TG 15,81 30,11 0,52
TD -25,19 30,11 -0,83
CK 5,06 30,11 0,17
ST 16,06 30,11 0,53
CO -60,69 30,11 -2,01
Os efeitos destacados foram significativos pelo teste t. ( = 0,05).
De acordo com os resultados dispostos na tabela 4, os efeitos
principais FR e IV foram significativos. Os demais efeitos no foram
significativos.
O efeito principal da soluo tampo (ST) no se apresentou
significativo, analisando-se isoladamente, a funo do tampo manter o pH
timo constante e sua concentrao nos nveis estudados por este
planejamento mostrou-se adequada. Alm disso, os fatores (AM), (TD) e
(CO) apresentaram maior valor nas respostas quando estudado em seu
nvel negativo.
Tendo em vista os resultados obtidos, o fator tamanho da gota (TG)
foi fixado em seu valor mdio 0,4 mm
2
. O fator frequncia (FR) foi fixado em
um valor baixo, portanto, 50 Hz, devido a sua influncia negativa sobre a
simetria dos picos para o valor de 150 Hz. O fator amplitude (AM) foi fixado
em um valor baixo, 100 mV, devido a sua influncia negativa sobre a
simetria dos picos para o valor de 150 mV, e o tempo de deposio (TD) foi
tambm fixado no valor da mdia 90 s. Os valores otimizados esto
dispostos na tabela 5.
Tabela 5. Parmetros otimizados utilizados na composio do
eletrlito de suporte.
Parmetro operacional Intervalo estudado Valor otimizado
AM Amplitude 50 a 150 m V 100 mV
FR Freqncia 25 a 150 Hz 50 Hz
IV Incremento de varredura 0,001 a 0,01 V 0,001 V
TG Tamanho da gota (mm
2
) 0,2 a 0,6 0,4 mm
2
TD Tempo de deposio (s) 30 a 180 90 s
CK Concentrao de KNO
3
0,5 a 3,0 mol L
-1
1,0 mol L
-1
ST Soluo tampo HOAc/Acet. 0,5 a 2,0 mol L
-1
1,0 mol L
-1
CO Concentrao de oxina 0,005 a 0,1 mol L
-1
0,05 mol L
-1
Entre os fatores da tabela 5 foram escolhidos: (CK) concentrao de
KNO
3
, (ST) soluo tampo HOAc/Acet. e (CO) concentrao de oxina,
dispostos em um novo planejamento fatorial completo com trs variveis
(Tabela 7), tendo como objetivo otimizar o eletrlito de suporte. A tabela 6
mostra os fatores escolhidos e seus respectivos nveis: concentrao KNO
3
,
soluo tampo e concentrao da oxina, a fim de mais especificamente
avaliar a ao do eletrlito versos complexante.
fatorial completo.
Nveis
Smbolo Fatores
___________________________________
- +
3
mol L
-1
0,5 3,0
ST Soluo tampo mol L
-1
0,05 1,0
CO Concentrao da oxina mol L
-1
0,005 0,050
Tabela 7. Coeficientes de contrastes para um fatorial 2
3
.
Ensaios Fatores Resposta
CK ST CO CKxST CKxCO STxCO CKxSTxCO Mdia
nA
01 - - - + + + - + 139,6
02 + - - - - + + + 92,75
03 - + - - + - + + 47,14
04 + + - + - - - + 70,80
05 - - + + - - + + 50,47
06 + - + - + - - + 22,70
07 - + + - - + - + 244,8
08 + + + + + + + + 279,5

Os efeitos das variveis foram obtidos utilizando o software Statistica
7.0
. Os resultados foram expostos na tabela 8.

3
para a SWV.
Estimativa dos efeitos erro puro Relao t(16)
Mdia 118,45 2,76 42,91
Principais
CK -4,07 5,52 0,74
ST 84,21 5,52 15,25
CO 61,79 5,52 11,19
Interao 2 ordem
CK x ST 33,23 5,52 6,02
CK x CO 7,52 5,52 1,36
ST x CO 141,39 5,52 25,61
Os efeitos destacados foram significativos pelo teste t.
De acordo com os resultados dispostos na tabela 8, os efeitos
principais (ST) e (CO) foram significativos positivamente e o efeito (CK) no
foi significativo no efeito principal; porm, os fatores escolhidos interferem
diretamente na resposta voltamtrica devido as interaes nos nveis
estudados.
Tendo em vista os resultados obtidos, o fator concentrao de KNO
3
(CK) foi fixado em 2,0 mol L
-1
. O fator soluo tampo (ST) foi fixado em um
valor intermedirio, portanto, 0,5 mol L
-1
e o fator concentrao da oxina
(CO) foi fixado em um valor baixo 0,01 mol L
-1
. Os valores otimizados esto
dispostos na tabela 9.
do eletrlito de suporte.
Smbolo Fatores Intervalo estudado Valor otimizado
3
0,5 a 3,0 mol L
-1
2,0 mol L
-1
ST Soluo Tampo HOAc/Acet 0,05 a 1,0 mol L
-1
0,5 mol L
-1
CO Concentrao de oxina 0,005 a 0,5 mol L
-1
0,01 mol L
-1
Com os valores otimizados da tabela 9 realizou-se um planejamento
fatorial completo com cinco variveis (Tabela 11), tendo com objetivo a
realizao de uma triagem dos fatores que apresentam influncia sobre a
resposta voltamtrica, que ser otimizada. Os fatores escolhidos e os
respectivos nveis esto expostos na tabela 10.
fatorial completo 2
5
.
Smbolo Fatores nvel - nvel +
IV Incremento de varredura (V) 0,0005 0,005
AM Amplitude (mV) 75 150
FR Freqncia (Hz) 50 125
TD Tempo de deposio (s) 30 180
TG Tamanho da gota (mm
2
) 2,0 6,0
Tabela 11. Planejamento fatorial completo e respectivas
respostas instrumentais para a SWV.
Fatores Experimento
IV AM FR TD TG
Resp. nA
01 - - - - - 167,167
02 + - - - - 220,867
03 - + - - - 178,767
04 + + - - - 454,733
05 - - + - - 179,200
06 + - + - - 33,053
07 - + + - - 280,600
08 + + + - - 450,467
09 - - - + - 226,067
10 + - - + - 233,367
11 - + - + - 122,200
12 + + - + - 752,833
13 - - + + - 480,000
14 + - + + - 142,400
15 - + + + - 588,767
16 + + + + - 1109,00
17 - - - - + 220,267
18 + - - - + 254,200
19 - + - - + 177,267
20 + + - - + 652,700
21 - - + - + 309,812
22 + - + - + 72,867
23 - + + - + 559,867
24 + + + - + 911,433
25 - - - + + 331,167
26 + - - + + 219,267
27 - + - + + 269,733
28 + + - + + 1046,33
29 - - + + + 450,867
30 + - + + + 197,000
31 - + + + + 772,367
32 + + + + + 1146,00
Os dados referentes tabela 11 foram processados pelo software
Statistica 7.0
, onde se realizaram os clculos para obter os efeitos das

variveis.
De acordo com os resultados dispostos na tabela 12, todos os efeitos
principais foram significativos mostrando que os fatores escolhidos
interferem positivamente na resposta voltamtrica nos nveis estudados.
planejamento fatorial para a SWV.
Estimativa dos efeitos erro padro Relao t(70)
Mdia 412,83 5,08 81,22
Principais
IV 161,39 10,16 15,87
AM 358,46 10,16 35,26
FR 134,80 10,16 13,26
TD 185,25 10,16 18,22
TG 123,23 10,16 12,12
Interao 2 ordem
IVxAM 285,34 10,16 28,07
IVxFR -106,31 10,16 -10,46
IVxTD 39,23 10,16 3,86
IVxTG 14,65 10,16 1,44
AMxFR 135,69 10,16 13,35
AMxTD 82,42 10,16 8,11
AMxTG 76,56 10,16 7,53
FRxTD 75,88 10,16 7,46
FRxTG 21,36 10,16 2,10
TDxTG -25,97 10,16 -2,55
Interao 3 ordem
IVxAMxFR 13,95 10,16 1,31
IVxAMxTD 89,30 10,16 8,78
IVxAMxTG 32,91 10,16 3,23
IVxFRxTD -18,72 10,16 -1,84
IVxFRxTG -11,16 10,16 -1,09
IVxTDxTG -19,16 10,16 -1,88
AMxFRxTD 9,88 10,16 0,97
AMxFRxTG 19,05 10,16 1,87
AMxTDxTG -8,41 10,16 -0,82
FRxTDxTG -57,11 10,16 -5,62
Interao 4 ordem
IVxAMxFRxTD -16,71 10,16 -1,66
IVxAMxFRxTG -27,64 10,16 -2,80
IVxAMxTDxTG -28,56 10,16 -2,45
IVxFRxTDxTG -0,05 10,16 -0,01
AMxFRxTDxTG -38,41 10,16 -3,91
Interao 5 ordem
IVxAMxFRxTDxTG -34,30 10,16 -3,32
Os efeitos destacados foram significativos pelo teste t.
A figura 14 mostra a representao grfica dos efeitos de interao de
segunda ordem significativos destacados na tabela 12. A interao (IVxAM)
indica que ao variar os nveis do fator amplitude (AM) para o maior valor
dentro do nvel (-) negativo do fator incremento de voltagem (IV), a mdia
das respostas mnima e que a mesma variao dos nveis de (AM) dentro
do nvel positivo de (IV) ocorre um aumento significativo na resposta. Este
aumento na resposta, provavelmente acontece devido ao aumento no valor
do pulso aplicado; conseqentemente contribui para a polarizao brusca no
eletrodo e uma troca efetiva de eltrons no complexo Mo-oxina. Enquanto
que a interao (IVxFR) indica que ao variar os nveis do fator frequncia
(FR) para o maior valor dentro do nvel (+) positivo do fator incremento de
voltagem (IV) ocorre um aumento na resposta de corrente, com a
consequente melhoria na sensibilidade da anlise.
- +
IV
100
200
300
400
500
600
700
800
900
n
A
AM +
AM -
IV xAM
- +
IV
100
200
300
400
500
600
n
A
FR -
FR +
IV xFR
- +
AM
100
200
300
400
500
600
700
800
900
n
A
AM xFR
FR -
FR +
- +
AM
100
200
300
400
500
600
700
800
900
n
A
TD -
TD +
AM xTD
Figura 14. Grficos de Efeitos de Interao, representao
grfica dos efeitos de segunda ordem.
A interao (AMxFR) indica que a variao da frequncia (FR) no
nvel (+) positivo do fator amplitude (AM) apresenta uma resposta melhor do
que no nvel (-) negativo, enquanto que a interao (AMxTD) indica que a
variao do tempo de deposio (TD) no nvel (+) positivo do fator amplitude
(AM) apresenta uma mdia maior do que no nvel (-) negativo. Este aumento
na resposta provavelmente deve-se ao aumento do tempo de deposio do
complexo Mo-oxina na superfcie (rea) da gota.
A amplitude (AM) foi o fator estatisticamente mais importante, tanto no
efeito principal, onde apresentou o maior valor, como nas interaes de
segunda ordem.
As interaes negativas IVxFR, IVxAMxFRxTG, IVxAMxTDxTG, e
IVxAMxFRxTDxTG destacam a incompatibilidade do aumento do incremento
de varredura (IV) com o aumento na polarizao em uma gota com grande
rea, nos nveis estudados.
Portanto o fator tamanho da gota (TG) foi fixado em seu valor mximo
e o fator incremento de varredura (IV) no seu nvel mais baixo. Os fatores
frequncia (FR), tempo de deposio (TD) e amplitude (AM) foram fixados
em seus valores mdios: 80 Hz, 80 s e 110 mV, respectivamente, sendo
estes os fatores escolhidos para a metodologia de superfcie de resposta.
4.2. Otimizao da resposta voltamtrica
4.2.1. Metodologia para a superfcie de resposta
Foi utilizado o planejamento composto central (CCD) para estudar
como a determinao dos ons Mo(VI) depende dos trs fatores mais
significativos no planejamento anterior: amplitude (AM), frequncia (FR) e
tempo de deposio (TD).
Para a elaborao do planejamento CCD, os nveis -1 e +1 foram os
mesmos utilizados no planejamento fatorial, os outros nveis (Tabela 13)
foram calculados a partir da equao 21:
2
X
X Xi
Z
A
=
(21)
sendo Z o valor codificado do planejamento composto central (CCD), Xi
representa o valor procurado para o nvel, X o valor mdio entre os nveis
+1 e -1, que o prprio valor para o nvel 0 e X o valor da diferena entre
o nvel +1 e -1.
A tabela 14 mostra o planejamento composto central (com = 1,682)
construdo para os trs fatores nas condies descritas.
CCD para a SWV.
Nveis Fatores
-1,682 -1 0 +1 +1,68
A (mV) 76 90 110 130 144
F (Hz) 46 60 80 100 114
TD (s) 63 70 80 90 97
Tabela 14. Resultado do Planejamento CCD com k = 3.
Os coeficientes do modelo (Tabela 15) e seus erros foram obtidos por
planilhas eletrnicas da Microsoft
Excel 2003 (TEFILO et al. 2006).

A tabela 16 mostra os resultados obtidos da anlise de varincia
(ANOVA). A regresso foi significativa, enquanto a falta de ajuste no, o que
garante um modelo de segunda ordem bem ajustado para o planejamento
proposto.
Ensaio A (X
1
) F (X
2
) TD(X
3
) A (mV) F (Hz) TD (s) Resposta
nA
01 -1 -1 -1 90 60 63 176,52
02 1 -1 -1 130 60 63 409,38
03 -1 1 -1 90 100 63 296,85
04 1 1 -1 130 100 63 585,05
05 -1 -1 1 90 60 90 301,67
06 1 -1 1 130 60 90 504,06
07 -1 1 1 90 100 90 291,89
08 1 1 1 130 100 90 396,45
09 -1,682 0 0 76 80 80 171,51
10 1,682 0 0 144 80 80 525,12
11 0 -1,682 0 110 46 80 355,28
12 0 1,682 0 110 114 80 490,25
13 0 0 -1,682 110 80 63 381,49
14 0 0 1,682 110 80 97 445,69
15 0 0 0 110 80 80 495,57
16 0 0 0 110 80 80 511,57
17 0 0 0 110 80 80 535,43
18 0 0 0 110 80 80 519,73
Tabela 15. Coeficientes e erro puro para o modelo da
superfcie de resposta.
Smbolo Coeficientes Erro* Relao t(3) **t
tab
b
0
516,412 8,293 62,270 3,18
AM 104,170 4,494 23,177
FR 29,698 4,494 6,608
TD 9,829 4,494 2,187
AMxAM -62,879 4,669 -13,466
FRxFR -36,563 4,669 -7,83
TDxTD -39,806 4,669 -8,525
AMxFR -5,311 5,872 -0,904
AMxTD -26,763 5,872 -4,557
FRxTD -51,676 5,872 -8,799
** Os coeficientes em destaque foram significativos pelo teste t.
*t
tab
com 3 graus de liberdade e 5% de probabilidade.
Tabela 16. ANOVA do planejamento CCD.
SQ GL QM Fcalc. P
Regresso* 253122 9 28125 34,062 2E-05
Resduos 6605,46 8 825,68
Falta de ajuste 5777,74 5 1155,5 4,1882 0,1340
Erro puro 827,725 3 275,91
Total 259728 17
% da varincia explicada 97,46
% Mxima da varincia 99,68
*Coeficientes significativos.
Uma indicao grfica da qualidade do modelo pode ser visualizada
nas figuras 15A e 15B.
Observadosvs. Estimados
y = 0,9746x + 10,446
R
2
= 0,9746
0
100
200
300
400
500
600
700
100 200 300 400 500 600
ValoresObservados
E
s
t
i
m
a
d
o
s
GrficodosResduos
-50
-40
-30
-20
-10
0
10
20
30
40
100 200 300 400 500 600
Valoresobservados
R
e
s
d
u
o
s
A B
Figura 15. (A) Grficos de valores observados vs. valores
estimados. (B) Grfico dos resduos.
A equao do modelo ajustada para os coeficientes significativos e
seus respectivos erros apresentada pela equao z.
(FRxTD) 51,67 (AMxTD) 26,76
TD) ( 39,81 FR) ( 36,56 (AM) 62,88 - FR) ( 29,70 AM) ( 104,17 516,41 Z
5,872 5,872
4,669 4,669 4,669 4,494 , 8,293

+ + =
2 2 2
494 4
De acordo com o modelo obtido para a voltametria de onda quadrada,
o fator amplitude e frequncia se destacam como os dois termos de maior
influncia sobre a resposta voltamtrica. O fator tempo de deposio no foi
significativo, entretanto, duas de suas interaes com dois fatores, AMxTD e
FRxTD so significativas. A superfcie de resposta no pode ser obtida
diretamente do modelo, neste caso fixou-se um dos fatores independentes e
outros dois valores, estes fixados de acordo com as melhores respostas
correspondentes ao nvel estudado.
4.2.1.1. Superfcie de resposta
Os fatores significativos para a composio dos parmetros
voltamtricos foram: a amplitude (AM), com um coeficiente quadrtico
negativo e um coeficiente linear positivo, isto , quanto maior a amplitude,
melhor a resposta obtida dentro do intervalo estudado e a freqncia (FR),
que apresentou efeito positivo para o coeficiente linear e efeito negativo para
o coeficiente quadrtico, isto , quanto maior a freqncia, melhor a resposta
obtida dentro do intervalo estudado.
O fator tempo de deposio (TD) significativo somente para o
coeficiente quadrtico negativo. As interaes entre os fatores presentes
neste planejamento se apresentaram significativos, exceto (AMxFR), todas
as interaes que apresentaram coeficientes nos nveis negativo, sendo
todos os parmetros voltamtricos com um intervalo de confiana de 95%.
As melhores respostas foram obtidas ao fixar o valor da varivel (TD)
no nvel 0 (tempo de deposio = 80 s). O modelo construdo para
determinao voltamtrica do Mo(VI) representado pela equao ip .
) FR AM ( 3 , 5 - 36,56(FR) - 29,7(FR) ) AM ( 8 , 62 - 104,17(AM) 4 , 516
2 2
x ip + + =
Este modelo mostra que a amplitude (AM) e a frequncia (FR)
apresentam efeitos significativos para a resposta da corrente e o termo
cruzado (AMxFR) mostra que h interao entre amplitude e frequncia na
resposta da corrente obtida nos ensaios.
A superfcie de resposta gerada pela equao ip , representadas nas
figuras 16 e 17, mostra que a interseo do nvel 0 (freqncia = 80 Hz) e o
nvel +1,682 (amplitude = 144 mV) apresentaram um melhor valor da
corrente voltamtrica para a determinao do molibdnio.
Figura 16. Superfcie de resposta com a varivel tempo de
deposio fixa no nvel (0), 80 segundos. X
1
= AM (V),
X
2
= FR (Hz) em termos de variveis codificadas. A
legenda mostra os valores da corrente em nA, obtidos
no ensaio.
Figura 17. Superfcie de resposta com a varivel tempo de
deposio fixa no nvel (0), 80 segundos. Amplitude =
AM (V), frequncia = FR (Hz) em termos de variveis
codificadas. A legenda mostra os valores da corrente em
nA, obtidos no ensaio.
Os resultados da superfcie de resposta mostram que os fatores
utilizados no planejamento so potencialmente capazes de aumentar a
resposta voltamtrica. Os melhores resultados encontrados no fator
amplitude variaram entre os nveis (0) e (1). No fator tempo de deposio os
melhores resultados encontrados tambm variaram entre os nveis (0) e (1).
Nos nveis mais baixos e nos nveis mximos os resultados no foram
satisfatrios devido aos valores das respostas serem baixos.
Para os modelos estudados , quando ajustados no nvel mais alto dos
valores codificados na superfcie de resposta, a maior corrente prevista foi
praticamente a mesma, mostrando que o modelo foi bem ajustado e que os
parmetros no se interagem neste nvel de estudo.
Os parmetros otimizados esto dispostos na tabela 17, os quais
apresentam as condies de trabalho em que foram executados, alm do
erro relativo referente s correntes estimadas e observadas nas mesmas
condies estabelecidas. Tal erro mostra o quanto o modelo matemtico foi
bem ajustado ao sistema voltamtrico e o quanto foi valiosa a contribuio
deste modelo para o aumento da corrente para uma mesma concentrao
de molibdnio na clula voltamtrica.
Tabela 17. Parmetros otimizados para a anlise do molibdnio
por voltametria de redissoluo adsortiva com onda
quadrada
Parmetros Valores timos Corrente estimada*
Potencial Inicial -0,2 V 523,89 nA
Potencial Final -0,75 V
Incremento de voltagem 0,025 V
Amplitude 110 mV Corrente observada*
Freqncia 100 Hz 525,72 nA
Velocidade de varredura 1,0 mVs
-1
Tamanho da gota 0,60 mm
2
Tempo de deposio 80 s *Erro relativo: +0,34 %
4.3. Aplicabilidade da tcnica otimizada
4.3.1. Linearidade
A capacidade do mtodo para fornecer resultados diretamente
proporcionais concentrao do analito dentro de uma faixa de aplicao
(RIBANI, 2004) foi estabelecida para a determinao do molibdnio
utilizando a metodologia proposta. A curva analtica foi construda
-0.40 -0.45 -0.50 -0.55 -0.60 -0.65
0
200n
400n
600n
800n
1
E (V) vs Ag/AgCl
I

(
n
A
)
adicionando-se alquotas de 100 L da soluo padro de molibdnio 200
g L
-1
em 10 mL de gua deionizada acidificada com HNO
3
0,01 mol L
-1
(pH
2,0), 1,3 mL de soluo tampo cido actico/acetato de sdio
(CH
3
COOH/CH
3
COONa) 0,5 mol L
-1
(pH 4,65), 2,0 mL de KNO
3
2,0 mol L
-1
e
75 L do complexante 8-hidroxiquinolina (oxina). A figura 17 mostra os
voltamogramas de onda quadrada e curva analtica. A equao da reta
obtida foi i(A) = 1,82 + 1,34x10
-5
.[Mo(VI)], com um coeficiente de
correlao de 0,997. O potencial de meia onda para o molibdnio utilizando
os parmetros otimizados para a SWV (Tabela 17) foi de - 0,54 Volt.
A figura 18 mostra que as correntes de pico em funo da
concentrao apresentaram uma boa linearidade no intervalo de 1,0 at 6,0
g L
-1
de Mo(VI) que demonstrado pelo valor de R
2
igual a 0,997.
-1 0 1 2 3 4 5 6
0
200n
400n
600n
800n
1
1
[Mo] g L
-1
I

(
n
A
)
Y = A + B * X
A = 1.82 E-7
B = 1.34 E-7
R = 0.997
SD = 2.91 E-8
N = 7
(A) (B)
Figura 18. (A) Voltamograma referente ao estudo do
comportamento da corrente para avaliao da faixa de
trabalho. (B) Curva analtica do comportamento da
resposta voltamtrica em funo da variao da
concentrao do molibdnio por SWV, na faixa de 1,0 g
L
-1
a 6,0 g L
-1
.
4.3.2. Repetitividade
A repetitividade do mtodo de determinao de molibdnio foi
avaliada realizando-se sete leituras em um mesmo dia, para amostras de
gua deionizada fortificada com Mo(VI) a uma concentrao de 2,0 g L
-1
.
Os clculos da estimativa do desvio padro relativo obedeceram s
recomendaes do INMETRO 2003 (RIBANI, 2004). Verificou-se nestas
condies a repetibilidade do sinal analtico na concentrao de 1,35 g L
-1
na clula polarogrfica.
Efetuou-se sete determinaes para este valor, obtendo-se como
resultado a seguinte mdia: 1,335 0,008 g L
-1
, com um RSD de 0,60%.
Este resultado indicou uma boa repetibilidade e um baixo desvio entre uma
determinao e outra, sendo portando, confiveis.
4.3.3. Limite de deteco
O desvio padro do branco do mtodo voltamtrico de determinao
de molibdnio foi avaliado realizando-se dez leituras em um mesmo dia, sob
as mesmas condies de anlise para amostras livres de qualquer resduo
de molibdnio. Os clculos da estimativa do desvio padro relativo
obedeceram s recomendaes do INMETRO 2003 (RIBANI, 2004).
Nas condies da faixa linear estimou-se o limite de deteco usando
o critrio LD=3S
B
/b para o mtodo proposto em 20,0 ng L
-1
(20,0 ppt),
considerando-se o valor de trs vezes o desvio padro da medida de uma
amostra branco, o limite de quantificao LQ=10S
B
/b obtido
experimentalmente foi de em 80,0 ppt na clula polarogrfica. Estes
resultados mostraram que o mtodo proposto provou ter um baixo limite de
deteco e quantificao, semelhante a outros mtodos voltamtricos,
estando apto a ser empregado em anlises de rotina.
4.3.4. Preciso intermediria
A preciso intermediria indica o efeito de variaes dentro do mesmo
laboratrio devido a diferentes circunstncias como diferentes dias,
equipamentos ou analistas. O objetivo da validao intermediria verificar
que num mesmo laboratrio o mtodo fornecer os mesmos resultados
(RIBANI, 2004). Foram preparadas trs amostras de gua deionizada
fortificadas com as concentraes de Mo em 2,0 g L
-1
, 5,0 g L
-1
e 10,0
g L
-1
. Estas foram submetidas tcnica voltamtrica, em trs dias
diferentes. As amostras foram fortificadas nos respectivos dias de avaliao.
4.4. Estudo de interferentes para a anlise de Mo(VI) em solos e
plantas
As interferncias causadas pela sobreposio de picos ou pela
presena de determinada concentrao de um elemento junto ao
complexante limitam a aplicao do mtodo a um grupo de matrizes.
Amostras de plantas apresentam valores de concentrao na grandeza de
ppb para Mo(VI) e os demais componentes como zinco, ferro, cobre e
mangans (micronutrientes) so encontrados na ordem de ppm e os
macronutrientes (nitrognio, fosfato, enxofre, potssio, clcio e magnsio)
so encontrados em mmol kg
-1
de material seco (AGRIFAX, 1998).
Uma varredura foi efetuada para melhor observar a interao dos ons
e a interferncia destes na determinao Mo(VI) nas condies otimizadas e
descritas para o mtodo (Figura 19). Verificou-se a interferncia dos ons
Fe
3+
, Ca
2+
, Zn
2+
, Cd
2
+, Pb
2+
, Cu
2+
, AI
3+
, Ni
2+
, Cr
2
O
7
2-
, PO
4
3-
, SO
4
2-
, WO
4
2-
,
VO
3-
para uma concentrao do metal de 500 - 1000 vezes superior a de
Mo(VI) na clula polarogrfica. Comparando o resultado do voltamograma
observou-se que o mtodo muito mais resistente a ao dos interferentes,
e que as razes dos (micronutrientes) mg kg
-1
/Mo(VI) e dos macronutrientes
mmol kg
-1
/Mo(VI) no afetam a determinao de molibdnio na faixa de
varredura estudada. Os experimentos de recuperao mostraram a
potencialidade da tcnica eletroanaltica frente aos possveis interferentes
contidos nas amostras de solo e plantas analisadas.
-0.3 -0.4 -0.5 -0.6 -0.7
-200.0n
0.0
200.0n
400.0n
600.0n
800.0n
1.0
1.2
1.4
Unk
Unk
Unk
I
(
A
)
U (V)
Mo
Unk
Unk
Unk Unk Unk Unk
Unk
Unk
Unk Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Unk
Figura 19. Efeito da adio de interferentes sobre a corrente de
pico em 0,54 V. Mo(VI) 2,0 g L
-1
. SWCSV, E: 125
mV; Edep: 0,50 V; Tdep: 80 s; Teq: 10 s e E: 20 mV s
-1
.
(Unk = desconhecido, interferentes)
Desta forma, optou-se pela aplicao e uso do mtodo nas
determinaes de molibdnio em solos e plantas sem a preocupao da
interferncia de micronutrientes e macronutrientes e sem a necessidade do
uso de procedimento de pr-concentrao ou separao. Foi tambm
elaborado um protocolo analtico descrito no apndice para a determinao
de Mo(VI) em plantas e solos.
4.5. Aplicabilidade da tcnica otimizada
4.5.1. Anlise das amostras
Para a determinao de Mo(VI), uma alquota da amostra de planta
(100 L) foi transferida para a cela voltamtrica contendo 10 mL de gua
deionizada acidificada com HNO
3
0,01 mol L
-1
(pH 2,0), 1,3 mL de soluo
tampo cido actico/acetato de sdio (CH
3
COOH/CH
3
COONa) 0,5 mol L
-1
(pH 4,65), 2,0 mL de KNO
3
2,0 mol L
-1
e 70 L do complexante 8-
hidroxiquinolina (oxina) 0,01 mol L
-1
. Estes foram desoxigenados por
borbulamento de gs nitrognio ultra puro, por 10 minutos em uma primeira
etapa e por 90 segundos nas sucessivas etapas, como anteriormente.
Depois do tempo de equilbrio (10 s) uma varredura catdica foi aplicada
entre -0,2 e -0,7 volts. A adio de 100 L de amostra padro de Mo 100 g
L
-1
foi feita aps a execuo do voltamograma do branco.
As amostras foram lidas e o voltamograma registrado (Figuras 20, 21
e 22) usando-se o mtodo proposto com as condies descritas no item
4.2.1.1. (Tabela 17).
-0.4 -0.5 -0.6 -0.7
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)
E (V) vs Ag/AgCl
AMOSTRA
1 ADIO
2 ADIO
-1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
0
100n
200n
300n
400n
500n
I
(
A
)
[Mo] g L
-1
Y = A + B * X
A= 1.97306E-7
B= 1.5356E-7
R= 0.99771
N= 3
1,28 g L
-1
Figura 20. Anlise por adio padro da amostra referncia (1)
com deteco 1,28 g L
-1
-0.4 -0.5 -0.6 -0.7
0
100n
200n
300n
400n
500n
600n
I

(
A
)
E (V) vs Ag/AgCl
AMOSTRA
1 ADIO
2 ADIO
-1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)
[Mo] g L
-1
Y = A + B * X
A= 1.99949E-7
B= 1.6698E-7
R= 0.99875
N= 3
1,20 g L
-1
com deteco 1,20 g L
-1
.
-0.4 -0.5 -0.6 -0.7
0
100n
200n
300n
400n
500n
I
(
n
A
)
E (V) vs Ag/AgCl
AMOSTRA
1 ADIO
2 ADIO
-1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)

[Mo] g L
-1
Y = A + B * X
A= 1.73989E-7
B= 1.64607E-7
R= 0.99854
N= 3
1,06 g L
-1
com de deteco 1,06 g L
-1
.
A concentrao prevista amostra de gua deionizada fortificada a
ser encontrada na clula era de 1,25 g L
-1
e a concentrao mdia
encontrada foi de 1,18 0,093 g L
-1
, portanto, uma recuperao de 94,4%
com um erro relativo de -5,93%.
O mtodo validado foi aplicado para deteco de Mo(VI) em 4
amostras de plantas, as quais foram numeradas de acordo com a ordem da
abertura da amostra. O molibdnio foi encontrado apenas em trs amostras
da alquota de 0,1 mL. Os resultados esto dispostos nas figuras 23, 24 e
25.
-0.4 -0.5 -0.6 -0.7
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)
E (V) vs Ag/AgCl
AMOSTRA
1 ADIO
2 ADIO
-1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)
[Mo] g L
-1
Amostra 1
Y = A + B * X
A= 1.84295E-7
B= 1.60552E-7
R= 0.99922
N= 3
1,147 g L
-1
banana.
-0.4 -0.5 -0.6 -0.7
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)
E (V) vs Ag/AgCl
AMOSTRA
1 ADIO
2 ADIO
-2.0 -1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)
[Mo] g L
-1
Amostra 2
Y = A + B * X
A= 2.1733E-7
B= 1.452E-7
R= 0,99417
N= 3
1,496 g L
-1
caf.
-0.4 -0.5 -0.6 -0.7
0
100n
200n
300n
400n
500n
I

(
A
)
E (V) vs Ag/AgCl
AMOSTRA
1 ADIO
2 ADIO
-1.5 -1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
0
100n
200n
300n
400n
0,756 g L
-1
I

(
A
)
[Mo] g L
-1
Amostra 3
Y = A + B * X
A= 1.16348E-7
B= 1.53722E-7
R= 0.99728
N= 3
pimento.
Na amostra 4 (folha de cana) no foi encontrado o elemento
molibdnio. As concentraes de Mo(VI) nas amostras 1, 2 e 3 so de
1,147 g L
-1
, 1,496 g L
-1
e 0,756 g L
-1
, respectivamente.
O mtodo validado foi aplicado para deteco de Mo(VI) em 4
amostras de solos, as quais foram numeradas de acordo com a ordem da
abertura da amostra.
O molibdnio foi encontrado apenas em duas amostras da alquota de
0,1 mL. Os resultados esto dispostos nas figuras 26 e 27.
-0.4 -0.5 -0.6
0
200n
400n
600n
800n
1
1
1
I

(
n
A
)
E(V) vs Ag/AgCl
-1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
0
200n
400n
600n
800n
1
1
1
2
Amostra 5
Y = A + B * X
A = 2.675
B = 67.177
R = 0.99908
SD = 4.088
I
(
A
)
[Mo] g L
-1
0.04 g L
-1
Figura 26. Anlise por adio padro da amostra (5) solo.
-0.4 -0.5 -0.6 -0.7
-200n
0
200n
400n
600n
800n
1
I

(
n
A
)
E (V) vs Ag/AgCl
-0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
200.0n
400.0n
600.0n
800.0n
1.0
1.2
0,134 g L
-1
Amostra 6
Y= A+ B* X
A= 6.322
B= 47.351
R= 0.99278
SD= 8.090
I

(
n
A
)

[Mo] g L
-1
Figura 27. Anlise por adio padro da amostra (6) solo.
Na amostra 7 (solo) e 8 (solo) no foi encontrado o elemento
molibdnio. As concentraes de Mo(VI) nas amostras 5 e 6 so de
0,04 g L
-1
e 0,134 g L
-1
, respectivamente.
Efetuaram-se determinaes por voltametria adsortiva de
redissoluo e por ICP-AES para as amostras de plantas e solos. Na tabela
18 so comparados os resultados obtidos para o Mo(VI) por voltametria e
ICP-AES.
Tabela 18. Resultados relativos s determinaes efetuadas
por ICP-AES e pelo mtodo voltamtrico para o
molibdnio.
Concentrao de molibdnio (g L
-1
)
Amostras
Presente mtodo ICP-AES
1 1,147 0,031 1,156
2 1,496 0,035 1,515
3 0,756 0,08 0,845
4 ND* ND*
5 0,04 0,003 0,045
6 0,134 0,03 0,155
7 ND* ND*
8 ND* ND*
* No Detectado.
Os resultados obtidos para a determinao de Mo(IV), utilizando a
ICP-AES e a tcnica eletroqumica proposta so bastante prximos para
algumas amostras. Os resultados mostraram que o mtodo proposto
bastante preciso, pois o teor de molibdnio determinado aproximou do
encontrado por ICP-AES.
Concluses 67
5. CONCLUSES
O mtodo proposto para a deteco e determinao de Mo(VI) para
as diferentes matrizes, as quais foi aplicado, mostrou-se simples, preciso e
reprodutvel com a vantagem de no necessitar de etapas de separao ou
pr-concentrao.
O planejamento fatorial possibilitou a otimizao da tcnica
voltamtrica utilizando-se da voltametria de onda quadrada com
redissoluo catdica adsortiva com o uso do eletrodo de mercrio de gota
pendente (HMDE). Os procedimentos de otimizao foram eficazes devido
fatores como: o uso do eletrlito de suporte adequado ao agente
complexante 8-hidroxiquinolina e o uso de estudos multivariados. A partir
dos parmetros voltamtricos obtidos na utilizao da tcnica de SWV foram
determinados os limites de deteco e realizada a validao da metodologia.
Desta forma, conclui-se que os resultados alcanados so bastante
promissores para a deteco do on Mo(VI), visto a rapidez, a sensibilidade,
a exatido, o custo beneficio e a simplicidade da metodologia de SWV.
Concluses 68
6. RECOMENDAES FUTURAS
A partir dos procedimentos e condies analticas desenvolvidos
neste trabalho surgem novas perspectivas que devero ser aprofundadas
em estudos posteriores para testar outros eletrodos de trabalho e eletrlitos
de suporte, bem como o uso de outros agentes complexantes e diferentes
parmetros voltamtricos, visando aperfeioar a determinao por
voltametria de onda quadrada com redissoluo catdica adsortiva e a
validao do mtodo por outras tcnicas, explorando as diversas
possibilidades de tcnicas disponveis e oferecidas pelo software VA
Computrace 1.2 no analisador voltamtrico da Metrohm
modelo 797 VA
Computrace, que foi o aparelho utilizado.
Poder-se-o empregar outros planejamentos experimentais para
misturas e tambm testar a aplicao de outras tcnicas quimiomtricas, que
podero auxiliar na obteno de melhores resultados de grande importncia
na determinao do on Mo(VI) em amostras de guas naturais, vegetais,
solos e guas residuais de indstrias.
RefernciasBibliogrficas 69
7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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Apndice 77
8. APNDICE
Protocolo analtico: Determinao de Mo(VI) em amostras de
plantas e solos utilizando voltametria de onda quadrada com
redissoluo catdica adsortiva.
Visando o maior entendimento do mtodo e sua utilizao por parte
do usurio, este ser descrito seguindo a ordem de execuo, a saber:
Abertura de amostras, seguido do preparo das solues para uso dirio e
padres, utilizao correta do equipamento, utilizao do software e ajustes
necessrios para uma boa determinao em amostras reais do analito.
I Abertura das amostras
As amostras que sero submetidas a anlise devem obedecer aos
parmetros do item 3.12.
II - Preparo das solues estoque e dos padres
O preparo das solues deve obedecer aos parmetros do item 3.3. e
3.3.1.
III - Cuidados operacionais obrigatrios antes de ligar o equipamento
Limpeza da clula polarogrfica: A clula polarogrfica deve ser limpa
antes e nos intervalos entre as determinaes das amostras, para tanto
procede-se a uma limpeza com gua deionizada em abundncia, seguida
por uma lavagem com uma soluo de HNO
3
10% e finalizando com
lavagens sucessivas com gua deionizada em abundncia.
Limpeza dos eletrodos: Lavar os eletrodos com gua deionizada em
abundncia utilizando uma piceta, sec-Ios bem com lenos de papel, que
devem ser descartados aps o uso, esta limpeza deve ser efetuada com
extremo cuidado.
Apndice 78
Sequncia de operaes do software 797 VA Computrace 1.2
As vrias etapas de funcionamento do programa so:
Iniciar o programa: o programa acionado por um duplo clique no
cone 797 VA Computrace (Figura 1).
Figura 1. cone de inicializao do programa 797 VA
Computrace.
Ao clicar no cone de inicializao aparecer a tela da figura 2. Para
abrir o programa necessrio entrar com nome e senha, caso esta opo
esteja habilitada, escolher a opo desejada Start measurements para
comear a realizar medidas ou Recalculate only para refazer clculos de
determinaes anteriores.
Figura 2. Tela inicial do programa 797 VA Computrace.
Janela principal: o centro do software 797 VA Computrace 1.2.
Seus elementos so a barra de menu, a barra de ferramentas e a barra de
status (Figura 3).
Apndice 79
Figura 3. Janela principal do 797 VA Computrace.
Menu da janela principal:
File: carregar, salvar e exportar arquivos de mtodos, determinao e
sinal; imprimir resultados e curvas; carregar e salvar determinaes com o
Autodatabase.
Mode: alternar entre os modos exploratrio e de determinao.
Utility: controle do VA Computrace, controle de dosagem, controle de
bomba, deposio de filme e procedimento de limpeza para eletrodos de
estado slido.
User: login, identificao e visualizao de usurio.
Settings: ajustes gerais para salvar, automao, dispositivos de dosagem,
controle remoto.
Window: abre e fecha janelas do programa.
Help: ajuda do programa.
cones da janela principal: de acordo com o modo selecionado
(exploratrio ou determinao) os seguintes cones so mostrados ou no
na janela principal.
Sair do programa VA Computrace;
Imprimir resultados e curvas;
Mudar para o modo exploratrio;
Mudar para o modo de determinao;
Carregar parmetros para modo exploratrio ou de determinao;
Abrir arquivos de mtodos ou sinais existentes;
Salvar arquivo de mtodo ou sinal;
Abrir um arquivo de determinao existente;
Salvar um arquivo de determinao;
Apndice 80
Controle manual do 797 VA Computrace;
Controle manual do dispositivo de dosagem conectado ao 797 VA
Computrace;
Controle manual de bombas;
Abrir ou fechar a janela Working Method Specifications ou
Exploratory Specification (Figura 4);
Figura 4. Tela Working Method Specifications.
Abrir ou fechar a janela DeterminationCurves (Figura 5);
Apndice 81
Figura 5. Tela Determination Curves. Voltamograma obtido
atravs da tcnica de Voltametria de redissoluo
catdica e onda quadrada.
Abrir ou fechar a janela Monitor para determinaes (Figura 6);
Figura 6. Tela Monitor.
Apndice 82
Abrir ou fechar a janela Exploratory Curves (Figura 7);
Figura 7. Tela Exploratory Curves.
Abrir ou fechar a janela Results para determinaes (Figura 8);
Figura 8. Tela Results arquivo texto salvo em bloco de notas.
Apndice 83
Abrir ou fechar a janela Sample Table;
Iniciar medida;
Parar medida;
Pausar medida;
Continuar medida;
Ir para o prximo passo na seqncia de operaes; e
Ajuda.
Ajustes gerais para o modo exploratrio e, ou, de determinao:
Eletrodos: O eletrodo multi-modo (MME) o eletrodo de trabalho
comumente utilizado no 797 VA Computrace. Ele combina os mais
importantes eletrodos de mercrio para polarografia e voltametria em uma
nica construo:
- DME: eletrodo gotejante de mercrio;
- SMDE: eletrodo de gota esttica de mercrio;
- HMDE: eletrodo de gota pendente de mercrio.
Modos de medidas voltamtricas:
DP Pulso diferencial;
SqW Onda quadrada;
DC Amostragem direta de corrente;
NP Pulso normal (apenas para modo exploratrio);
CV Voltametria cclica;
PSA Anlise potenciomtrica por redissoluo;
CCPSA Anlise potenciomtrica por redissoluo com corrente constante;
AC Voltametria de corrente alternada;
CVS Voltametria cclica de redissoluo;
CPVS Voltametria de redissoluo com pulsao cclica.
Apndice 84
Sequncia de operaes:
A sequncia geral de operaes para medidas idntica para os
modos exploratrio e de determinao, e incluem os seguintes passos:
1. Teste do eletrodo
Testam-se os eletrodos apenas se o eletrodo MME for utilizado. Este
procedimento controlado atravs do comando Computrace control cuja
tela mostrada na figura 9. necessrio selecionar o tipo de eletrodo de
mercrio a ser testado e clicar na opo Electrode test.
Figura 9. Tela Computrace control.
2. Agitao
A agitao da soluo da amostra opcional durante os
procedimentos de preparao at iniciar o tempo de equilbrio. Atravs da
tela Computrace control (Figura 9) tambm possvel testar o
mecanismo de agitao com um clique na opo Stirrer/RED.
3. Desoxigenao
Desoxigenao opcional da soluo da amostra durante o tempo de
purga inicial. Atravs da tela Computrace control (Figura 9) tambm
Apndice 85
possvel testar o procedimento de desoxigenao com um clique na opo
Purge.
4. Deposio
Deposio eletroqumica opcional para voltametria de redissoluo
por aplicao de um potencial de deposio durante o tempo de deposio.
5. Tempo de equilbrio
Aguarda-se um tempo antes de iniciar a varredura com o potencial
inicial aplicado aos eletrodos.
6. Varredura de voltagem
Inicia-se a varredura de voltagem que depende do modo de medida
selecionado na tela Working Method Specifications figura 4. Para ajustar os
parmetros do mtodo de trabalho clica-se na opo Edit parameters.
A janela que se abre contm as opes Determination,
Voltammetric, Substances, Calculations e Documentation que
podem ser observadas nas figuras 10 (a), (b), (c), (d), e (e),
respectivamente. A tela da figura 10(a) visualiza a opo Determination
que contm as especificaes gerais a serem utilizadas na determinao.
Figura 10. (a) Tela Determination da janela Edit working
method parameters.
Apndice 86
Na figura 10(b) observa-se a opo Voltammetric que contm os
parmetros voltamtricos a serem ajustados para as determinaes no
modo de medida selecionado.
Figura 10. (b) Tela Voltammetric da janela Edit working
method parameters.
A opo Substances, visualizada na figura 10(c), contm os
parmetros para a definio e reconhecimento de substncias, para a
definio de solues de adio, para avaliao de picos e para clculo de
resultados.
Figura 10. (c) Tela Substances da janela Edit working
method parameters.
Apndice 87
A figura 10(d) visualiza a opo Calculations que contm todas as
frmulas usadas para o clculo do resultado final para uma substncia. A
opo Edit acionada quando uma nova frmula adicionada ou se uma
frmula existente editada.
Figura 10. (d) Tela Calculations da janela Edit working
method parameters.
Na opo Documentation (figura 10(e)) so definidos os elementos
para documentao automtica no final da determinao.
Figura 10. (e) Tela Documentation da janela Edit working
method parameters.
Apndice 88
Clique em OK, o programa voltar tela Working Method
Specifications figura 4.
Feche a janela e em seguida salve o mtodo. Verifique se todas as
outras condies do equipamento esto em ordem, em caso afirmativo
clique sobre o cone Monitor para iniciar a determinao (figura 6).
Caso j tenha iniciado a determinao e perceba que algo est errado clique
na opo "Hold" parando imediatamente a anlise e reiniciando o
procedimento assim que o erro esteja corrigido.

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JOS RICARDO DE CARVALHO

OTIMIZAO DA METODOLOGIA DE DETERMINAO DE MOLIBDNIO

, que proporcionam a utilizao

uma linguagem computacional dotada de

possui todas as tcnicas para anlise descritiva

h uma diversidade de grficos

fornece tcnicas para extrair informaes relevantes de

(CIRURTEC HOSPITALAR TKA DI 800 / 1900).

), acetato de sdio (Vetec

). Os diversos cidos utilizados na digesto das amostras foram:

), cido ntrico (Merck

), cido perclrico (Reagen

) e perxido de hidrognio (Vetec

) e hidrxido de sdio (Vetec

modelo 797 VA Computrace (Figura 11), operando

XP Professional, com espao livre

. Os resultados esto expostos na tabela 4.

. Os resultados foram expostos na tabela 8.

, onde se realizaram os clculos para obter os efeitos das

Excel 2003 (TEFILO et al. 2006).

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