Universidad Nacional autnoma de Mxico Facultad de estudios superiores Cuautitln Departamento de Ciencias Biolgicas Seccin de Bioqumica y Farmacologa Humanas

Asignatura Anatoma e Histologa Humanas Grupo 1302 Bioqumica Diagnostica Microscopia ptica, sus tcnicas y la aplicacin en Anatoma e Histologa Humana Integrantes
Celaya Daz Andrea Flores Prez Luis ngel Rodrguez Gmez Luca

Equipo No 1 Profesoras:
M en C, Tais Nopal Guerrero Mara Vernica Vzquez Cianca

12 / febrero / 2014 19 / febrero / 2014

Objetivos
Conocer y poner en prctica los fundamentos de la microscopia ptica mediante la observacin de laminillas histolgicas previamente preparadas. Aprender el manejo y cuidado adecuado del microscopio como parte importante de nuestro trabajo en laboratorio.

Introduccin
El estudio detallado de los componentes de clulas y tejidos animales o vegetales, por el tamao que poseen, requiere el uso de instrumentos que permitan ampliar muchas veces ms la imagen de las estructuras que los constituyen. El instrumento que fue empleado por los primeros bilogos para estudiar la clula y los tejidos, es el microscopio. El nombre deriva etimolgicamente de dos races griegas: mikrs, que significa pequeo y skopoo, que significa observar. Es decir el microscopio es un instrumento que sirve para observar objetos o estructuras pequeas. (Montalvo Arenas, 2010) El microscopio es el instrumento ms utilizado en el estudio de clulas y tejidos. Se fue perfeccionando, tanto en su parte ptica como en su parte mecnica, gracias a los adelantos tecnolgicos aplicados a los componentes antes mencionados. Se denominan compuestos porque la imagen se forma mediante la utilizacin de tres sistemas de lentes, cada uno de ellos constituidos por lentes convergentes y divergentes. Los sistemas de lentes son el condensador, los objetivos y los oculares. En la actualidad, el microscopio fotnico (ptico) es un instrumento de uso cotidiano en los laboratorios de investigacin y de diagnstico as como en las aulas de enseanza de Biologa, Embriologa, Histologa, Microbiologa y Patologa. (Montalvo Arenas, 2010) El microscopio ptico est conformado por tres sistemas: El sistema mecnico est constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque. El sistema ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que produce el aumento de las imgenes que se observan a travs de ellas El sistema de iluminacin comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observacin a travs del microscopio. (VIZCARRA MARTINEZ, 2008)

Existen varios tipos de Microscopios como. Los microscopios simples: Son lentes de aumento de 8 a 20 aumentos, como las lupas que es un instrumento ptico cuya parte principal es una lente cncava que se emplea para ampliar la visin de un objeto. Los microscopios compuestos: Llamados tambin pticos o fotnico, porque se utiliza una fuente de luz que atraviesa la muestra, entre stos tenemos los microscopios que utilizamos en nuestro laboratorio de biologa, Utilizan uno o mas lentes para aumentar los objetos se utilizan para observar clulas vivas y organismos pequeos, estos microscopios pueden agrandar la imagen hasta 1500 veces. El microscopio Electrnico: Utiliza una fuente de electrones para observar la muestra y se clasifican en dos: 1) De Transmisin lineal porque los electrones atraviesan la muestra y la reflejan en una pantalla fluorescente, aumentando la imagen a unas 200,000 veces ms que el ojo humano. 2) De Barrido Superficial porque los electrones no atraviesan la muestra, solamente recorren la superficie como si la barrieran, proyectndola en una pantalla de televisin, aumentando la imagen hasta 1,000,000 de veces. Microscopio de fluorescencia: El microscopio de fluorescencia se utiliza para observar sustancia fluorescentes denominadas fluorforos. Una molcula fluorescente es aquella que es capaz de captar radiacin electromagntica con una longitud de onda determinada y emitir otra radiacin electromagntica con otra longitud de onda diferente, normalmente dentro del espectro de la luz visible. Microscopio de contraste de fases: Realiza modificaciones en la trayectoria de los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la preparacin. (VIZCARRA MARTINEZ, 2008)

Observaciones y resultados

ORGANO: Bazo TINCION: Hematoxilina-Eosina AUMENTO: 10x 10X AUMENTO TOTAL: 100X DESCRIPCION: Podemos observar una vista panormica de los ndulos conectivos, arterias, senos venosos que conforman la estructura del Bazo.

ORGANO: Bazo TINCION: Hematoxilina-Eosina AUMENTO: 10x 40X AUMENTO TOTAL: 400X DESCRIPCION: Aqu se puede observar la imagen de un ndulo (en color morado y lila) mucho mas detallado y con alguna otras clulas presentes.

ORGANO: Bazo TINCION: Hematoxilina-eosina AUMENTO: 10x 100x (aceite de inmersin) AUMENTOTOTAL: 1000X DESCRIPCION: En esta imagen se observan algunas clulas que creemos son sinusoides y cordones de Billroht.

MUESTRA: Corazn de Pollo OBSERVACIONES: La muestra se observo en un microscopio estereoscpico, el cual hace que la imagen se observe tridimensional. El color es caf claro y en algunas partes rojo este color debido a la sangre que aun contena.

Anlisis de resultados Los mtodos para la obtencin de preparaciones histolgicas ocupadas en los estudios de microscopia ptica, se engloban en la Tcnica Histolgica. La Tcnica Histolgica abarca varios procedimientos a los que se somete un tejido para proporcionar los cortes como se conocen, montados bajo un cubre objeto con imgenes de estructuras contrastadas, para su estudio bajo microscopia ptica o electrnica. El ojo humano tiene una capacidad de resolucin de 0,2 mm, lo que significa que no podemos diferenciar como separados y diferentes dos puntos que estn separados menos de 200m. Para poder que podamos ver a un nivel ms all del de la simple vista deberemos utilizar instrumentos que tengan mayor resolucin como son los microscopios. En esta prctica y a lo largo del semestre utilizaremos el microscopio ptico y el estereoscpico. Para poder observar la muestra a travs del microscopio ptico est debe de ser preparada mediante un proceso especfico. Todos estos pasos se conocen como procesamiento de la muestra. Los cuatro primeros corresponden a la inclusin, el quinto a la seccin, los nmeros 6-9 a la "deshidratacin y tincin y el resto al montaje de la preparacin. El microscopio ptico posee un sistema de lentes (condensador, objetivos y oculares) a travs de los cuales se amplifica y dirige la imagen de los objetos. La calidad de imagen que proporciona depende del lmite de resolucin. Su valor depende, fundamentalmente, de la longitud de onda de la luz y de la apertura

numrica del objetivo. En los microscopios pticos actuales, el lmite de resolucin es de 0.2 m cuando se utiliza luz blanca. La mayora de los tejidos son incoloros, lo que dificulta su observacin al microscopio. Por ello se introdujeron mtodos para la coloracin, que se efecta usando mezclas de sustancias llamadas colorantes. Los colorantes son compuestos qumicos naturales o artificiales que se caracterizan por tener uno o ms grupos atmicos generadores de color, as como uno o ms grupos con afinidad qumica hacia sustratos coloreables. Ambos son colorantes denominados panpticos: aquellos que tien de forma general, y no especfica, todos los componentes celulares. La ms popular de estas tinciones es la tincin doble de hematoxilina-eosina, siendo la ms popular debido a su capacidad de teir un enorme nmero de diferentes estructuras tisulares, a su simplicidad y a su aplicabilidad a diferentes tejidos de procedencias diferentes. La hematoxilina es un contraste bsico y por lo tanto se unir a las estructuras cidas. La eosina es un colorante cido y se unir a las estructuras bsicas. Aquellas estructuras con un pH intermedio se teirn con ambos colorantes. Esencialmente la hematoxilina tie los ncleos de color azul negro, con buen detalle intracelular, mientras que la eosina tie el citoplasma celular y la mayora de las fibras del tejido conectivo con distintas tonalidades de rosa. En esta prctica observamos la laminilla del bazo con la tincin ya mencionada, el objetivo era aprender a usar correctamente el microscopio ptico con distintos objetivos. Tambin observamos un corazn de pollo con un corte transversal en un microscopio estereoscpico el cual se utiliza para ofrecer una imagen estereoscpica o tridimensional de una muestra. Para ello, y como ocurre en la visin binocular convencional, es necesario que los dos ojos observen la imagen con ngulos ligeramente distintos. Obviamente todos los microscopios estereoscpicos, por definicin, deben ser binoculares, por lo que a veces se confunden ambos trminos. El microscopio estereoscpico es apropiado para observar objetos de tamaos relativamente grandes, por lo que no es necesario modificar los objetos a ver, (laminar) ni tampoco lo es que la luz pase a travs de la muestra.

- Conclusiones Mediante el de uso practico del Microscopio se identifico cada una de los sistemas en que esta compuesto como lo es el sistema ptico, Luminoso y Mecnico. As como tambin se comprendi cada una de las funciones en que esta especializado cada sistema. Se Manipulo al microscopio con las precauciones debidas para dicho material ya que no se tubo ninguna ninguna falla o dificultad tcnica. Al Enfocar la muestra se llevo a cabo cada uno de los pasos debidos para tener una la Iluminacin ptima de Kohler ya que nuestra imagen en todos los casos fue muy clara y detallada. AL utilizar el microscopio Estereoscpico fue notable la diferencia de imagen que nos brinda en comparacin con el microscopio ptico ya que la imagen es tridimensional esto se debe a que es un microscopio compuesto doble (binocular) es aqu donde las imgenes conservan su relieve que pueden observarse con los dos ojos.

Bibliografa - Sobbota, Hammersen (1988) Histologa, atlas en color de anatoma microscpica. 3 edicin Mxico. Editorial Salvat. - Williams, P., Warwick R. y Gray. (1985). Anatoma. Tomo I. Espaa. Salvat Editores. -Tortora, G.J. Introduccin al cuerpo humano: fundamentos de anatoma y fisiologa. 7 ed. Mjico: Editorial Mdica Panamericana; 2008.