Quiles,
Goiri, A.
I.; Oregui, L.M.; García-Rodríguez; A.
Uso del quitosano
como modulador
de la fermentación ruminal
PONENCIA PRESENTADA EN EL I CONGRESO INTERNACIONAL SOBRE ALIMENTACIÓN ANIMAL
kResumen
El objetivo del presente trabajo fue
determinar el efecto del quitosano sobre
la degradación y fermentación ruminal en
ovejas. Se utilizaron 4 ovejas secas de raza
latxa fistuladas en el rumen, alojadas indivi-
dualmente, y alimentadas con una ración a
base de heno de alfalfa y concentrado (1:1)
diseñada para satisfacer 1,2 veces sus nece-
sidades de energía. Los animales recibieron
uno de los dos tratamientos (placebo: CTR;
136 mg de quitosano / kg peso vivo: CHI),
administrándose el quitosano a través de
la cánula en una única dosis. Se realizó un
diseño en “cross-over” 2x2 AB/BA de 19 días
de duración. La degradación en el rumen
de la materia orgánica (MO), proteína bruta
(PB) y fibra neutro detergente (FND) de la
dieta se realizó mediante la técnica in sacco.
Además se estimó la degradación efectiva
ruminal (DER) suponiendo una tasa de paso
68
Goiri, I., Oregui, L.M., García-Rodríguez, A.
NEIKER-TECNALIA- Apartado 46, 01080 Vitoria-Gasteiz
Autor para correspondencia: Idoia Goiri (igoiri@neiker.net)
de 0,025, 0,05 y 0,075. Se extrajeron mues-
tras de contenidos ruminales a intervalos
regulares durante 12 h, determinándose
inmediatamente después el pH. Además, se
tomaron muestras para la determinación
de ácidos grasos volátiles (AGV) y NH3-N.
La dosificación de CHI no afectó de forma
significativa a la ingestión total, la fracción
rápida o lentamente fermentable de la dieta,
pero disminuyó la tasa fraccional de degra-
dación del FND (9,0 vs. 6,0 %/h; P=0,07). La
adición de CHI no redujo significativamente
el DER del FND para ninguna de las tasas
de paso consideradas. La suplementación
con CHI no afectó de forma significativa a
la concentración total de AGV o a la pro-
porción molar de acético, pero incrementó
la proporción molar de propiónico (12,1 vs.
14,7 mmol / 100 mmol ; P<0,05) y la relación
propiónico : acético (0,17 vs. 0,22; P<0,05), y
disminuyó las proporciones molares de AGV
ramificados (4,9 vs. 3,9 mmol / 100 mmol;
P<0,05) y la concentración de amoniaco
en el rumen (41,7 vs. 35,2 mg / 100 ml). En
conclusión, la inclusión de quitosano modi-
ficó el patrón de fermentación en el rumen
hacia rutas energéticamente más favorables
sin disminuir la producción total de AGV.
Palabras clave: quitosano, antimicro-
biano, modulador ruminal.
kIntroducción
El Reglamento del Parlamento y el
Consejo de la UE número 1831/2003 es-
tableció la prohibición del uso de los an-
tibióticos como aditivos en alimentación
animal a partir del 1 de Enero de 2006
(UE, 2003), debido al potencial desarrollo
de resistencias a los antibióticos. Se ha
estimado que la eliminación de los anti-
bióticos incrementará los costes de pro-
ducción en un rango del 3,5 al 5% (Cardo-
zo, et al., 2005), e implicará un aumento
de los problemas medioambientales (Te-
deschi, et al., 2003). Por lo tanto, se hace
necesario buscar nuevas estrategias ali-
mentarias que permitan mantener la efi-
cacia productiva de los animales y reducir
la emisión de contaminantes, sin que ello
implique un aumento de los costes de
producción o de trastornos digestivos en
estos animales.
La quitina (poli- -(1 4)-N-acetil-D-
glucosamina), biopolímero de fácil obten-
ción, no tóxico, biodegradable y renova-
ble, puede ser parcialmente desacetilada,
de manera que cuando el producto resul-
tante presenta un grado de acetilación
menor del 50% se denomina quitosano.
La acción antimicrobiana contrastada del
quitosano en ensayos in vitro (Goiri et al.,
2009), plantea la posibilidad de que es-
tas moléculas puedan ser utilizadas para
modular la fermentación ruminal. Por lo
tanto, el objetivo del presente trabajo fue
determinar el efecto del quitosano sobre
la degradación y fermentación ruminal
en ovejas.

kMaterial y métodos
Animales y dietas
Para la realización del ensayo se utili-
zaron 4 ovejas secas de raza latxa fistula-
das en el rumen, alojadas individualmente,
y alimentadas con una ración a base de
heno de alfalfa y concentrado (1:1) dise-
ñada para satisfacer 1,2 veces sus necesi-
Uso del quitosano como modulador de la fermentación ruminal
maron muestras de la oferta y del recha-
zo para su posterior análisis.
Para estudiar la degradación en el
rumen de la materia orgánica (MO), pro-
teína bruta (PB) y fibra neutro detergen-
te (FND) de la dieta se utilizó la técnica
in sacco descrita por Mehrez y Orskov,
(1977). Para ello, 3 g de la dieta, seca-
da en estufa a 60ºC durante 48 h y mo-
lida a 2 mm, se incubaron en duplicado
en sacos de poliéster (ANKOM, Co, Fair-
nº 27
Análisis estadístico
Los resultados obtenidos de la prue-
ba de degradación in sacco se analizaron
utilizando el procedimiento MIXED del pa-
quete estadístico SAS, en el que se consi-
deró el efecto de la secuencia (AB, BA), del
tratamiento (CTR, CHI), y del periodo (1, 2).
Para el análisis de los parámetros fermen-
tativos se utilizó el procedimiento MIXED
para medidas.
dades de energía. La ración total se dividió PORT.9XCM«MDETAMA×ODE
en dos partes iguales que se ofertaron en poro) en la zona ventral del rumen du-
horario de mañana y tarde. Los animales se rante 2, 4, 8, 16, 24, 48 y 72 horas. Tras kResultados
distribuyeron aleatóriamente en dos lotes la incubación las bolsas se lavaron y se
para recibir uno de los dos tratamientos congelaron. Los parámetros de degrada-
(placebo: CTR; 136 mg de quitosano / kg ción se estimaron por regresión no lineal, No se encontró un efecto significativo
peso vivo: CHI). El quitosano se administró utilizando el modelo descrito por Orskov de la secuencia sobre ninguna de las varia-
a través de la cánula en una única dosis y McDonald (1979), y la degradabilidad bles estudiadas. Por lo tanto, se utilizó la
antes de la distribución de la ración de la efectiva ruminal (DER) se calculó para un información obtenida de los dos periodos
mañana. ritmo de paso de 0,025, 0,05 y 0,075, uti- del “cross-over”. La dieta se diseñó para
lizando la fórmula propuesta por Orskov permitir un consumo total de la ración.
Diseño experimental y McDonald (1979). Así, la dosificación de quitosano no afectó
de forma significativa a la ingestión de la
Se realizó un diseño en “cross-over” En los días 17 y 18 de cada periodo ración (Tabla 1).
2x2 AB/BA. Cada periodo constó de 9 días se extrajeron muestras de contenidos
de adaptación a la dieta y 10 días de me- ruminales a intervalos regulares duran- Efecto del quitosano sobre la degrada-
didas. Entre periodos las ovejas se alimen- te 12 horas, determinándose inmediata- ción ruminal
taron durante 7 días a base de ensilado de mente después el pH. Además, se toma-
hierba para evitar un efecto de arrastre del ron muestras para la determinación de El efecto de la suplementación con
tratamiento con quitosano. ácidos grasos volátiles (AGV) y NH3-N. El quitosano sobre la degradación de la MO,
contenido en AGV se determinó por cro- PB y FND puede verse en la Tabla 1. La do-
Determinaciones y medidas matografía y el contenido en NH3-N por sificación de CHI no afectó de forma sig-
colorimetría. nificativa a la degradación de la fracción
Las cantidades ofertadas y rechaza- rápida (a) o lentamente fermentable (b)
das de la ración se registraron diariamen- El contenido en MS, MO y PB de las de la MO, FND o PB. Igualmente, el trata-
te, estimándose la ingestión diaria como muestras se determinó según las normas miento con CHI no modificó significativa-
la diferencia entre ambas. De los días 10 A.O.A.C. y el contenido en FND según la téc- mente la tasa fraccional de degradación
al 19 de cada uno de los periodos se to- nica propuesta por Van Soest et al., (1991). (c) de la MO o de la PB, pero redujo la
del FND (9,0 vs. 6,0 %/h; P=0,07). El tra-
Tabla 1. Efecto del quitosano sobre la degradación in sacco de una ración a base de heno de tamiento con CHI no afectó significati-
alfalfa y concentrado. vamente al DER de la FND para ninguna
de las tasas consideradas. No obstante,
Tratamiento1 se observó una reducción del DER de la
MO cuando se asumió una tasa de paso
CTR CHI e.s.m. Nivel de significación de 0,075 (64,6 vs. 63,1 %; P<0,05), y de la
MO PB cuando se asumieron tasas de paso de
a, % 49,5 49,5 0,80 ns 0,05 (74,8 vs. 71,8 %; P<0,05) y de 0,075
b, % 30,1 30,9 1,37 ns (70,8 vs. 67,6 %; P=0,09).
c, %/h 7,81 6,57 0,72 ns
DER, %
kp = 2.5 % 72,1 71,3 0,62 ns Efecto del quitosano sobre los productos
kp = 5 % 67,6 66,2 0,22 ns de la fermentación
kp = 7.5 % 64,6 63,1 0,06 *
PB
a, % 50,2 50,4 3,50 ns
El efecto de la suplementación con
b, % 40,8 41,4 4,65 ns quitosano sobre los productos de fermen-
c, %/h 8,1 5,3 0,55 ns tación puede verse en la Tabla 2. El pH
DER, % medio observado fue de 7,0 no encontrán-
kp = 2.5 % 80,8 78,6 0,69 ns
kp = 5 % 74,8 71,8 0,15 * dose significativamente afectado por la
kp = 7.5 % 70,8 67,6 0,31 † suplementación con CHI. La dosificación
FND de CHI no afectó a la producción total de
a, % 6,59 8,5 3,11 ns
b, % 47,2 48,3 4,99 ns
AGV (54,3 vs. 62,2 mmol / l; P>0,1) o a la
c, %/h 9,0 6,0 0,37 † proporción molar de ácido acético (70,5 vs.
DER, % 67,6 mmol / 100 mmol; P>0,1). Sin embar-
kp = 2.5 % 43,0 42,5 1,42 ns go, la adición de CHI conllevó un aumento
kp = 5 % 36,3 34,8 0,88 ns
kp = 7.5 % 31,7 30,0 0,41 ns de la proporción molar de ácido propiónico
(12,1 vs. 14,7 mmol / 100 mmol; P<0,05)
1
CTR: control; CHI: quitosano. y de la relación propiónico : acético (0,17
a: fracción rápidamente degradable; b: fracción lentamente degradable; c: tasa fraccional de degradación de la fracción b.
DER: degradabilidad efectiva ruminal; kp: tasa de paso ruminal.
vs. 0,22; P<0,05), y disminuyó las propor-
MO: materia orgánica; PB: proteína bruta; FND: fibra neutro detergente. ciones molares de AGV ramificados (4,9 vs.
e.s.m.: error estándar de la media. 3,9 mmol / 100 mmol; P<0,05) y la concen-
ns: P>0,1 ; †: P<0,10 ; *: P<0,05.
69
Goiri, I.; Oregui, L.M.; García-Rodríguez; A.

Tabla 2. Efecto del quitosano sobre los productos finales de la fermentación. for predicting the nutrient requirements and
feed biological values for sheep. J. Anim. Sci.
Tratamiento 82: 149-169.
CTR CHI e.s.m.
Ingestión (g MS/d) 1134 1140 18 #ARDOZO 07 #ALSAMIGLIA 3 &ERRET ! Y
Kamel, C. 2005. Screening for the effects
pH 7,05 6,99 0,08
of natural plant extracts at different pH on
NH3 (mg/100ml) 41,7 35,2* 2,72
in vitro rumen microbial fermentation of a
AGV totales (mmol/l) 54,3 62,2 4,52 high-concentrate diet for beef cattle. J. Anim.
AGV individuales (mmol/100mmol) Sci. 83:2572-2579.
Acetato 70,5 67,6 1,48
Propionato
Butirato
BCFVA
C3:C2
CTR: control; CHI: quitosano; MS: material seca; AGV: ácidos grasos volátiles; BCVFA: ácidos grasos volátiles ramificados;
C3:C2: relación propiónico:acético.
e.s.m.: error estándar de la media; *: P<0,05.
tración de amoniaco en el rumen (41,7 vs.
35,2 mg / 100 ml; P<0,05).
En relación a los cambios en la evolu-
ción diaria de las concentraciones de ácido
acético y propiónico, y de la relación pro-
piónico: acético debidos a la suplementa-
12,1 14,7* 0,67 #HIANG 97 7ANG 4( Y ,EE 7# 
11,3 12,5 0,93 Chitosan coating for the protection of
4,9 3,9* 0,33 amino acids that were entrapped withing
hydrogenated fat. Food Hydrocolloid. 23:
0,17 0,22* 0,02
1057-1061.
Goiri, I., Garcia-Rodriguez, A., y Oregui, L.M.
2009. Effect of chitosans on in vitro rumen
digestion and fermentation of maize silage.
Anim. Feed Sci. Technol. 148:276-287.
blemente debido a una menor producción
de calor (Baldwin et al., 1980). Horton, G.M.J. 1980. Use of feed additives
to reduce ruminal methane production and
Los contenidos de NH3-N observados re- deaminase activity in steers. J. Anim. Sci. 50:
flejarían el balance entre la degradación de la 1160-1164.
proteína y la absorción de NH3-N para la sín-
tesis microbiana. En el presente ensayo, de- Hungate, R.E. 1966. The rumen and its
ción con CHI, mientras que la adición de
CHI no causó una modificación significa-
tiva de la concentración de ácido acético
en ninguna de las horas consideradas, la
concentración de ácido propiónico se vio
aumentada desde antes de la distribución
de la ración hasta 9 h después de la distri-
bución de la misma.
kDiscusión
En este ensayo no se determinó la tasa
de paso de la dieta a través del rumen, pero
considerando las ecuaciones propuestas por
Cannas et al., (2004) se puede estimar que la
tasa de paso fue de 4,2 %/h. La suplementa-
ción con CHI solamente afectó a la DER de la
MO y PB asumiéndose tasas de paso supe-
riores a 5 %/h. Por lo tanto, a diferencia de lo
observado por este mismo grupo en ensayos
in vitro (Goiri et al., 2009), la suplementación
con CHI no supuso una disminución signifi-
cativa de la degradación de la MO.
En línea con estos resultados, la adi-
ción de CHI no afectó a la producción
total de AGV en el rumen, pero sí causó
una modificación del perfil de AGV. Así,
considerando las conversiones teóricas de
la energía contenida en unidades de hexo-
sa en energía contenida en ácido acético,
propiónico y butírico (Hungate, 1966), se
podría estimar que la suplementación con
CHI supuso un aumento del 3 % en la can-
tidad de energía retenida en los productos
finales de la fermentación. Por otra parte,
la mayor relación propiónico: acético obte-
nida con la adición de CHI podría aumen-
tar el potencial gluconeogénico de la dieta.
Además, a nivel tisular, la eficiencia de uti-
lización del ácido propiónico es mayor que
la del ácido acético (Smith, 1971), proba-
70
bido a la actividad antimicrobiana de CHI, se
podría pensar que la menor concentración de
NH3-N observada al suplementar con CHI, no
se debería a un aumento de la absorción para
la síntesis microbiana. Además, reducciones
en las proporciones molares de AGV rami-
ficados y en las concentraciones de NH3-N
pueden estar asociadas a una reducción de
la degradación de los aminoácidos (Horton,
1980). En las condiciones de pH del rumen,
los grupos -NH2+ del quitosano podrían inte-
ractuar con los grupos carboxilo de los ami-
noácidos protegiéndolos de la degradación
ruminal (Chiang et al., 2009).
kBibliografía
Baldwin, R.L., Smith, N.E., Taylor, J., y Sharp,
M. 1980. Manipulating metabolic parameters
to improve growth rate and milk secretion. J.
Anim. Sci. 51: 1416-1428.
Cannas, A., Tedeschi, L.O., Fox, D.G., Pell, A.N.,
y Van Soest, P.J. 2004. A mechanistic model
MICROBES!CADEMIC0RESS.EW9ORK
Mehrez, A.Z., and E.R. Orskov. 1977. A study of
artificial fibre bag technique for determining
the digestibility of feeds in the rumen. J.
Agric. Sci. (Camb) 88: 645-650.
Orskov, E.R., y McDonald, I., 1979. The
estimation of protein degradability in the
rumen from incubation measurements
weighted according to rate of passage. J.
Agric. Sci. (Camb) 92 : 499-503.
Smith, G.E. 1971. Energy metabolism and
metabolism of the volatile fatty acids. In:
D.C. Church (ed.) Digestive physiology and
nutrition of the ruminant. O.S.U. Boockstores,
Inc, Corvallis.
Tedeschi, L.O., Fox, D.G., y Tylutki, T.P.
2003. Potential environmental benefits of
ionophores in ruminat diets. J. Environ. Qual.
32:1591-1602.
Van Soest, P.J., Robertson, J.B., y Lewis, B.A.
1991. Methods for dietary fiber, neutral
detergent fiber and nonstarch polysaccharides
in relation to animal nutrition. J. Dairy Sci. 74:
3583-3597.