Investigar sobre Thiobacillus ferroxidans Clasificacin biolgica Bacterias Proteobacterias Betaproteobacterias Hydrogenophilales Hydrogenophilaceae Thiobacillus Thiobacillus ferroxidan

Dominio Filo Clase Orden Familia Genero Especie

1. Bacterias lixiviantes de minerales. Thiobacillus thiooxidans es una bacteria Gram negativa quimiolitotrofica obligada, cosmopolita. Existe informacin sobre tcnicas de aislamiento e identificacin. Adems su potencial en biohidrometalurga para la extraccin de minerales de: cobre, oro, plata, uranio y radio, se limita por inhibicin por metales que lixivia. Otras especies de Thiobacillus son sensibles a la acidez como T. thioparus y T. novellus no oxidan azufre elemental, pero si sus sales adems de compuestos orgnicos como la glucosa. T. denitrificans crece en anaerobiosis con nitrato como aceptor final de electrones. T. ferrooxidans oxida sales de azufre con hierro, T. novellus es quimiolitotrofic facultativo con un pH ptimo de crecimiento de 7.0. el que permite separar cada especie: T. thiooxidans y T. ferrooxidans crecen a pH de entre 2.0 y 3.5, T. denitrificans, T. thioparus y T.novellus de entre 7.0 y 7.3 .

2. Thiobacillus spp y bacterias lixiviantes de minerales Las tcnicas de aislamiento para Thiobacillus y las herramientas moleculares revelan su distribucin en ambientes de mina y suelo. Existen otros procariotes que lixivian minerales sulfurados metlicos de baja ley (SMBL), investigacin "in situ" en minas para extraccin de oro generan resultados similares Thiobacillus, estas bacterias nativas de minas, toleran concentraciones sub-letales del metal que lixivian, de esa forma aumentan el rendimiento del metal que se extrae sin elevar el costo del proceso, es ambientalmente seguro, investigacin sobre la ecologa de stas bacterias las clasifica en base a su temperatura de lixiviacin de SMBL. Se reporta que bacterias termfilas y mesfilas lixivian minerales "in situ" en minas para la extraccin oro en Sudfrica. De la naturaleza es posible aislar archeabacteria hipertermofilas y adaptadas a elevada temperatura para la lixiviacin bacteriana (LB) de SMBL con cobre, plata y oro, y aquellas bacterias empleadas donde la temperatura es un factor limitante para la extraccin de metales. El cuadro 1 muestra las principales caractersticas fisiolgicas y bioqumicas de Thiobacillus requeridas para su explotacin. T. ferrooxidans crece por oxidacin de in ferroso y azufre inorgnico forma sulfato como producto derivado del cido sulfrico y asimila CO2 como fuente de carbono, su morfologa es semejante a T. thiooxidans, no oxida el in ferroso, ni lixivia SMBL insolubles. Las variables fisiolgicas del cuadro 1 se adaptan para optimizar la actividad lixiviante de T. ferrooxidans en funcin del mineral.

Cuadro 1. Condiciones de crecimiento para el cultivo de Thiobacillus ferrooxidans y Archeabacterias adaptables al mineral sulfurado concentrado refractario. Variable Temperatura Potencial de hidrgeno (pH) Eh 35o C, 100 C* 2.3 -500 mV Valor recomendado

Concentracin del in ferroso (Fe2+) 10 g-1 Concentracin sulfuro metlico (%) Densidad de inculo bacteriano Fuente de Nitrgeno (N) Fuente de Carbono (C) Fuente de Oxgeno Fuente de energa y/ azufre 10-25 5-7 % (v/v) (NH4)2SO4 3.0 g-1 (p/v), inclusive N2 (molecular) CO2 0.2% (v/v), inclusive carbonatos. O2 intensivo. Azufre mineral, con tamao menor que 32 micras

3. Fuente de carbono, energa y nitrgeno para Thiobacillus. Esta especie utiliza como fuente de energa para crecer la oxidacin de compuestos reducidos de azufre, que incluye el in ferroso soluble y cobre.

4. Composicin qumica del medio de cultivo para Thiobacillus. T. ferrooxidans fija de dixido de carbono o carbonatos, para suplir su demanda de carbono, comn en quimiolitotroficos por inyeccin de aire para proveer de CO2 y O2. La demanda de nitrgeno se satisface con N o con formas reducidas de N como amonio y/o nitratos incluye N2.

5. Oxidacin de ion ferroso. La oxidacin del ion ferroso a frrico no es conocida, se sugiere que Thiobacillus posee dos sitios de transferencia de electrones en la clula, uno para el sistema de oxidacin del azufre y otro para hierro localizados en sitios distintos de la membrana celular. El mecanismo de oxidacin del ion ferroso en Thiobacillus se inhibe con bloqueadores de electrones, en la parte externa de su membrana celular. La rusticianina en la bacteria se controla por la composicin qumica del medio de cultivo, cuando el ion ferroso est en elevada concentracin, si T. ferrooxidans crece slo con azufre elemental como fuente de energa, la rusticianina acta en la primera etapa de la cadena transportadora de electrones, involucra tres citocromos dos tipos C, uno de clase Al y una coenzima Q est protena depende de que la bacteria reduzca el sulfato asimilatoriamente, l cual despolariza su

membrana para permitir al in ferroso enlazar a sitios de transporte de la protena, funciona como ligando para la sntesis de complejos susceptibles de oxidacin a pH menor de 3.5. La sntesis disminuye con rapidez a un pH superior de 2.2, est reaccin biolgica es 500 veces ms rpida que la oxidacin qumica. el proceso requiere pH menor de 3.5 para mantener un gradiente de protones en la membrana celular en el acoplamiento del ion ferroso con la fosforilacin oxidativa.

6. Lixiviacin de pirita (FeS3) por Thiobacillus ferrooxidans. T. ferrooxidans se cultiva en pirita como fuente de energa, el anlisis de microscopio electrnico de transmisin indica cambios en la superficie de la pirita, asociado con modificacin de su morfologa. T. ferrooxidans sintetiza un mucopolisacrido (MPS), cuando est ntimamente adherido al mineral, ello favorece la oxidacin de azufre para solubilizar el metal del mineral, este sufre corrosin en el sitio especfico de mayor concentracin de azufre, esto se detecta en la topografa de la pirita en el sitio del ataque bacteriano zona de concentracin del sulfuro. La investigacin con tcnicas de espectroscopia electrnica y fluorescencia de rayos X demuestran la existencia de una capa de MPS que cubre la superficie del sulfuro como se ilustra en la Figura 1.

Figura 1. Mecanismo de interaccin bacteria-sulfuro. A) Formacin de una "cpsula" en la regin de lixiviacin por que contiene un transportador/del sulfuro. B) Corrosin del sulfuro en la capa orgnica de absorcin que disuelve el sulfuro, este es un complejo soluble de azufre que ingresa en la clula.

7. Extraccin de metales por lixiviacin bacteriana.

Los metales se liberan del mineral por solubilizacin con el cido sulfrico derivado de la oxidacin del azufre en la membrana Thiobacillus, al igual que la del hierro, al igual que en los minerales de uranio que existen como xidos insolubles aunque no se sabe a detalle el mecanismo de la LB; el uranio se asocia a pirita y se disuelve por actividad indirecta de Thiobacillus al formar sulfato frrico, como se expresa en la siguiente ecuacin. El sulfato de uranio se recupera de la solucin lixiviante por intercambio inico o con solventes orgnicos. Bacteria UO2 + Fe2(SO4)3 UO2SO4 + 2FeSO4

8. Mecanismo directo de lixiviacin bacteriana por Thiobacillus. Existen bacterias quimiolitotroficas oxidan directamente minerales sulfurados concentrados. Investigacin por microscopio electrnica de transmisin y barrido revela que estas bacterias se adhieren a la zona de concentracin del azufre para usarlo como fuente de energa y generan el MPS con el que se asegura la unin fsica cpsula-mineral para la oxidacin del azufre inorgnico que produce el cido sulfrico, en consecuencia se causa la solubilizacin del metal del mineral y la desintegracin de su estructura cristalina. Estas observaciones al microscopio electrnico probaron que Thiobacillus disuelve la superficie del cristal del mineral en la zona de concentracin del azufre. Se sabe que la naturaleza qumica de cpsula de Thiobacillus es clave cuando atacan SMBL pues durante est accin se sucede simultneamente la oxidacin del hierro y el azufre. Se sabe que Thiobacillus oxida hidrxidos metlicos mediante dos mecanismos para solubilizar el mineral sulfurado de baja ley. Una implica el ciclo frrico-ferroso o mecanismo indirecto. La otra depende del contacto fsico bacteria-cristal del mineral independiente del ciclo frrico-ferroso. Los SMBL se solubilizan por la oxidacin de Thiobacillus en ausencia de ion frrico, aerobiosis estricta. Investigacin reciente sugiere que Thiobacillus oxida paralelamente el azufre y el hierro reducido ello facilita la lixiviacin del metal de inters. Se reporta que Thiobacillus detecta el lugar exacto de oxidacin y por quimiotaxis se dirige a ese sitio donde se concentra el azufre del mineral. Por la oxidacin del sulfuro causa perforaciones en la superficie del cristal del SMBL cuya profundidad depende del mineral y varia de acuerdo con su composicin qumica. El proceso se resume como sigue: a) Oxidacin de Fe2+ a Fe3+ (ferroso a frrico) para la sntesis de energa. b) Solubilizacin del azufre de la superficie del mineral por el cido sulfrico derivado de su oxidacin para mantener su crecimiento. c) Unin directa de la bacteria con la superficie del mineral sulfurado. La actividad de Thiobacillus sobre la superficie de la pirita se explica en las siguientes reacciones: FeS2 + 3 02 + H20 FeS04 + H2SO4 Bacteria

2FesO4 + 02 + H2SO4 Fe(SO4)3 + H20 FeS2 + 302 +2H2O 2H2SO4 + 2S Bacteria 2S + 3O2 + 2H2O 2H2SO4 (Reaccin 1) Mientras que la actividad quimiolitotrofica de Thiobacillus sobre la calcopirita se expresa: Bacteria 2CuFeS2 +8 O2 + H2SO4 2CuSO4 + Fe(S04) + H2O CuFeS2 + 2Fe2(SO4)3 CuSO4 + 5FeSO4 + 2S= (Reaccin 2) El sulfuro (S=) producido por Thiobacillus durante la lixiviacin de la pirita (reaccin 2), se oxida por la bacteria y libera cido sulfrico (reaccin 1). Se conoce el papel cataltico de Thiobacillus en est transformacin del SMBL. La actividad de los metabolitos derivados de la oxidacin del azufre requiere un nmero suficiente de Thiobacillus en la superficie del SMBL.

9. Mecanismo indirecto de minerales por Thiobacillus. El sulfato frrico en solucin y la concentracin de oxgeno son bsicos en la SMBL por Thiobacillus como: galena (PbS), calcopirita (CuFeS2), bodrnita (Cu5FeS4) y esfalerita (ZnS), pirita, marcasita (Fe2S), covelita (CuS), calcocita (Cu2S) y molibdenita (MoS2) como lo reportan Tuovinen et al., (1991). En general se reporta que el ion frrico slo en mezcla es la especie qumica de la lixiviacin de SMBL por Thiobacillus. El ion frrico influye indirectamente acta sobre SMBL. Las reacciones siguientes representan el mecanismo en fases aerbica/anaerbica por Thiobacillus en minas. (Aerbica) MeS + 2Fe3+ + H2 + 202 Me2+ + 2Fe2+ + S04= + 2H+ (Anaerbica) Fe(S04)3 + FeS2 3FeS04 + 2S= Cuando Thiobacillus oxida el ion ferroso a frrico es cclico por: 1) la interaccin del ion frrico con SMBL y 2) Por regeneracin del ion frrico a ferroso por el cido sulfrico liberado, disminuye el pH el ion frrico se reduce a ion ferroso para mantener el ciclo en acidez extrema.

10. Lixiviacin Bacteriana de CuFeS2. Thiobacillus lixivia directa e indirectamente minerales por reduccin de ion frrico. Normalmente ambos fenmenos son simultneos en la naturaleza. De los minerales los de cobre la calcopirita se lixivia biolgicamente. Se reporta que T. ferrooxidans oxida cobre monovalente el hierro y el azufre. La bacteria oxida directamente estos elementos que son parte de la calcopirita con valencia reducida con hierro ferroso o sulfato ferroso.

Thiobacillus oxida hierro ferroso y azufre elemental, durante la fase inicial de la oxidacin consume sulfato y el pH aumenta lo que provoca la precipitacin del sulfato frrico y las sales de cobre como la anterita. El sulfato frrico se disocia en una reaccin lenta secundaria el hierro forma compuestos como la jarosita con la regeneracin del sulfato de acuerdo con la siguiente reaccin: 2Fe2 (SO4) + 12H2O 4Fe (OH)3 + 6H2SO4 La lixiviacin de calcopirita por T. ferrooxidans para lixiviar cobre en columna es pobre en condicin esttica con una recuperacin del 25% en 60 das, un 40% en 70 das, del 60% en 470 das. En condicin de agitacin se recuper 35% en 33 das, del 72% al 100% en 12 das, el 59% en 4 das, el 60% en 5 das, el 79% en 6 das, el 50 al 60% de cobre de calcopirita en 4 a 6 das en un tanque con oxigenacin continua, lo que muestra que una elevada tensin de oxigeno en el bioreactor es necesaria para la mxima extraccin de metales.

11. Factores que afectan la lixiviacin bacteriana. La LB por T. ferrooxidans de SMBL depende de la concentracin del in ferroso y del hierro soluble que afecta el sistema de transporte de electrones en la membrana, cuando oxida azufre. El pH es un factor critico T. ferrooxidans requiere acidez para que el metal del mineral facilite la oxidacin del azufre y sntesis de energa con calcopirita. Depende del sulfuro de zinc de calcocita y covelita que necesitan hierro soluble. El carcter acidoflico de T. ferrooxidans lo comparte con T. thooxidans con hongos del suelo, levaduras y protozoarios en esa condicin fisicoqumica el hierro es disponible para la vida. 12. Temperatura optima de lixiviacin bacteriana. Dos factores crticos afectan la LB de Thiobacillus, el primero el aumento de temperatura por la bacteria al oxidar el azufre, lo que genera calor durante su crecimiento. El intervalo de temperatura ptimo para Thiobacillus est entre 25 y 35C, para mxima oxidacin de ion ferroso a temperatura no mayor de 35C y disminuye a 45C Thiobacillus luego muere, se propone usar. Archaeabacteria hipertermofilica acidofilica usan como fuente de energa, SMBL a temperatura mayor de 80C, estas bacterias viven en la naturaleza en ambientes extremos. Por ello se le asocia con la oxidacin de compuestos inorgnicos de S en zonas volcnicas terrestres y marinas. Estas bacterias representan una nueva posibilidad para la explotacin de SMBL. 13. Adosamiento Bacteriano Y Mejoramiento De Cepas Los siguientes factores deben tomarse en cuenta para un proceso de biolixiviacin eficiente en el tratamiento de minerales complejos. 1. El adosamiento bacteriano en reas selectivas de los sulfuros y el ataque directo. 2. Uso de cepas especialmente adaptadas a minerales especficos y tolerantes a metales. 3. Uso de bacterias genticamente preparadas. El adosamiento bacteriano a superficies minerales ha sido estudiado ampliamente,

microfotografas demuestran que la mayor parte de las bacterias se encuentran en el sustrato slido fuertemente adosadas. Tratamiento De Minerales Refractarios De Oro Minerales refractarios o ms apropiadamente, minerales problema, se presentan en diferentes formas. Estas incluyen al oro qumicamente combinado (teluros), oro encapsulado o finamente diseminado en minerales sulfurados: pirita y principalmente arsenopirita; y el oro lixiviable pero que es readsorbido en materiales carbonosos que contiene el mineral. El oro encapsulado o finamente diseminado en minerales sulfurados es el mas comn existiendo numerosos depsitos alrededor del mundo con esta problemtica: Campbell Red Lake Mines, The Giant Yellowknife Mines, Dickenson Joint Venture y The Kerr Addison Mines en Canad, otros depsitos incluyen Cortez, Getchell, y McLaughlin, Carlin, Bald Mountain, Jardine y Mercur Mines en U.S.A., Dacasun, Mindyak y Kazakhstan en U.S.S.R., Barberton, Eastern Transval y Witwatersrand en South Africa, Prgera en Pagua New Guinea, y otros depsitos en Australia, Brasil y Per. Cuando el oro es encapsulado o asociado con sulfuros, su procesamiento generalmente comienza con flotacin de un concentrado. Actualmente existen tres alternativas para el tratamiento de estos productos: tostacin, lixiviacin a presin y lixiviacin bacteriana 14. Tamao de la partcula y el rea superficial del mineral en la lixiviacin bacteriana. En soluciones acuosas las partculas slidas del mineral son una fuente de iones. El tamao es clave pues se rea de contacto facilita la oxidacin lenta o rpida, los que tienen dimensin cercanas bacterias son ideales para su lixiviacin. Investigacin al respecto sugiere que el MPS de la bacteria es necesario para su adhesin al mineral, con relacin inversamente proporcional entre la actividad lixiviante de Thiobacillus sobre SMBL y el tamao de la partcula a medida de que est es menor la velocidad de oxidacin del azufre es mayor en consecuencia la extraccin del metal es rpida lo anterior se reporta para mineral de sulfurado de plata.

SNCHEZ, Juan Y. Monografas, Biolixiviacin, [archivo en lnea]. Disponible en: http://www.monografias.com/trabajos15/biolixiviacion/biolixiviacion.shtml [consultado el 18 de junio de 2012] PEREZ, Jorge M. Monografas, Lixiviacin bacteriana o biolixiviacin, [archivo en lnea]. Disponible en : http://www.monografias.com/trabajos7/liva/liva.shtml [consultado el 18 de junio de 2012]