Laboratorio de Mtodos Instrumentales I

Prctica No. 1 Determinacin de fsforo en bebidas de cola por Espectrofotometra UV- Vis

Equipo 1 Candy Lara Rentera Jessica Torres Gmez

Saln 1

Mrida, Yucatn a 23 de Agosto de 2012

ndice Pg. Antecedentes.........1

Objetivo....2

Metodologa....2

Resultados..4

Discusiones5

Conclusiones.6

Referencias6

Antecedentes La espectrofotometra es un mtodo colorfico que es utilizado para medir las concentraciones de las sustancias. Para realizar estas mediciones se usan aparatos llamados espectrofotmetros, estos aparatos miden la absorcin de luz monocromtica de una longitud de onda conocida. La cantidad de luz que absorbe una sustancia est relacionada con la concentracin de la misma.1 Esta ecuacin corresponde a la ley de Beer 2. Donde la A es la obsorbancia o densidad ptica medida por el aparato. C es la concentracin de la sustancia que se analiza. La l es el espesor de disolucin atravesada por la luz o paso ptico. La es el coeficiente de absorcin caracterstico de cada sustancia medible colorimtricamente. Las cubetas deben ser de plstico o vidrio ptico para las mediciones en el espectro visible y de cuarzo para las mediciones en la regin de ultravioleta (debajo de 360nm).1 La espectrofotometra es

especialmente til para analizar cromforos que se presentan naturalmente. La sensibilidad del mtodo depende del coeficiente de extincin implicado.2 En espectrofotmetro se compone por un foco luminoso, un monocromador que dispersa la radiacin continua y trasmite la longitud de onda que se desee, una cubeta para la muestra y un detector para medir e indicarla cantidad de energa radiante recibida. Existen espectrofotmetros de solo un haz de luz y tambin los hay de doble haz3. Los espectrofotmetros son aparatos complejos, ya que el moncromador que usa permite la variacin en la seleccin de longitud de onda y esto permite que la regin espectral sea muy amplia. Como sistema de deteccin usa fototubos o fotomultiplicadores4

Figura 1-.diagrama esquemtico de un espectrofotmetro de barrido de doble haz5. Para la determinacin de fosforo en refresco de cola se usa el mtodo del azul de molibdeno. Este mtodo se basa en agregar molibdato de amonio a una solucin de fosfato para producir un compuesto de color azul intenso as este puede detectarse, en un espectrofotmetro en el rango visible a 830nm. Para el anlisis de fosfatos se elije el mtodo espectrofotomtrico ya que por su sensibilidad permite trabajar con las bajas concentraciones de fosfato en los refrescos de cola. De igual manera este mtodo es adecuado para el anlisis de fosfatos porque es un mtodo rpido y muy sensible6.

Objetivos Conocer las partes y el manejo de un espectrofotmetro de uv-vis. Realizar una curva de calibracin para cuantificar, por uv-vis, el contenido de fsforo en una muestra de refresco de cola.

Metodologa Se preparo una solucin stock a partir de fosfato monobsico de potasio, de dicha solucin se prepararon 100 mL de 100 ppm, de la cual se tomo una alcuota de 1 mL para una solucin de P2 O5 de 25 mL de 4ppm.

Posteriormente se prepararon 3 soluciones, en la primera se pesaron 0.1562 g

de molibdato de amonio y se disolvi en 15 mL de agua destilada, en la segunda solucin se pesaron 0.2114 g de acido ascrbico y se disolvieron en 15 mL de agua destilada, para la ltima solucin se tomaron 2.2 mL de acido sulfrico y se diluyo en 15 mL de agua destilada; dichas soluciones se mezclaron y se aforaron a 50 mL con agua destilada. Despus de preparar la solucin reductora se dejo reposar mientras se preparaban las soluciones estndar. Se tomaron alcuotas de 1, 2, 3,4 y 5 mL de la solucin de P2 O5 4ppm, a estas alcuotas se les agrego 4 mL de solucin reductora y se aforaron a 10 mL; al igual se preparo un blanco extrayendo 4 mL de solucin reductora y aforando a 10 mL con agua destilada. Dichas soluciones se utilizaron para la curva de calibracin. El procedimiento para las muestras fue tomar 10 mL de la muestra (refresco de cola) y desgasificarla por medio de un bao de ultrasonido. Se tomo un mililitro de la muestra y se aforo a 50 mL, de la cual se tomo un mililitro y se aforo a 10mL, de esta muestra se preparo un duplicado. Se tomaron las soluciones estndar, el blanco y las muestras y se incubaron en bao Mara por 30 min a 50 C. Se realizo un barrido de exploracin con la solucin de mayor concentracin (el estndar de 5 mL de P2 O5) con una longitud de onda de 700 a 850 nm usndose el blanco para la lnea base. Despus de encontrar la longitud de onda mxima se realizo la curva de calibracin con las soluciones estndares para despus analizar las muestras.

Resultados Se realiz un barrido con la finalidad de encontrar la longitud mxima, este barrido se realiz con la solucin de mayor concentracin. Barrido de la muestra de mayor concentracin [ 2 ppm] Absorbancia 0.754

Longitud mxima 826 nm

Se realiz el anlisis de 5 soluciones estndares para conocer la absorbancia de cada solucin. Dichas soluciones tenan diferentes concentraciones. Las absorbancias obtenidas se muestran en la tabla 1, as como la curva de calibracin obtenida (grfica 1). Tabla 1. Absorbancia de las soluciones estndares. Nmero de estndar 1 2 3 4 5 Concentracin (ppm) 0.4 0.8 1.2 1.6 2 Absorbancia 0.211 0.343 0.462 0.651 0.816

1 Absorbancia 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 0.5 1 1.5 2 2.5 Concentracin y = 0.3795x + 0.0412 R = 0.9923

Grfica 1. Curva de calibracin de las soluciones estndares

Al igual se realiz el anlisis de las muestras de Coca- Cola para conocer sus concentraciones, el resultado se muestra en la tabla 2. Tabla 2. Concentracin de la muestra de Coca- Cola por duplicado Muestra 1 2 Absorbancia 0.655 0.463 Concentracin (ppm) 1.617 1.111

Promedio: 1.364 ppm de P2O5 Desviacin estndar: 0.358 Ppm de P= x ppm de P2O5 (25) (10) (62 g de P/ 142 g de P2O5) Ppm de P= 1.364 ppm de P2O5 (25) (10) (62 g de P/ 142 g de P2O5) Ppm de P= 149 Discusiones Para conocer la longitud mxima se realizo un barrido con la solucin de mayor concentracin esto se debe a que la cantidad de luz absorbida por la muestra es directamente proporcional a la concentracin de la muestra (a mayor concentracin mayor absorcin y menor transmisin)7. Podemos verificar que esto se cumple observando los resultados de la tabla numero 1. El contenido de fosforo en la muestra fue de 149 ppm, de acuerdo a la literatura el contenido de fosforo en Coca Cola es de 215 ppm. La diferencia se puede deber a longitud de onda utilizada ya que en el primer caso fue de 826 nm y en el segundo fue de 830 nm. Otra posible interferencia pudo ser la solucin reductora, ya que en el resultado de la literatura dicha solucin se almacen una semana antes de utilizarla. Al igual se debe tomar en cuenta las diluciones

realizadas a la muestra, ya que fueron el mismo nmero de diluciones pero a diferentes volmenes y esto pudo afectar. 8 En la tabla 2 se ven los resultados de longitud de onda y absorbancia para las muestras donde los datos obtenidos tienen una considerable variacin, esto se puede deber a un error de lectura del equipo. Conclusiones Para realizar el barrido y saber la longitud de onda mxima se usa la solucin estndar de mayor concentracin. Para la determinacin de fosforo la espectrofotometra es el mtodo adecuado por la sensibilidad del equipo y la rapidez del anlisis. Para obtener datos confiables se debe tener un adecuado conocimiento del equipo y su manejo, ya que de lo contrario puede haber errores en los datos obtenidos. Referencias 1. Macarulla, J.; Bioqumica humana. 2 Ed Revert; Espaa. 1994. Pp. 4840. 2. Fersht, A.; Estructura y mecanismo de los enzimas. Ed Revert; Espaa. 1980. Pp. 150 -160. 3. Brown, G.; Sallee, E.; Qumica cuantitativa. Ed. Revert; Espaa. 1967. Pp. 465. 4. Pino, F.; Prez, D.; Anlisis de elementos traza por espectrofotometra de absorcin molecular UV Visible. Ed. San Pablo; Espaa. 1983. Pp. 123- 124. 5. Harris, D.; Anlisis qumico cuantitativo. 6 Ed Revert; Espaa. 2007, Pp. 462.

6. Qumica

analtica.

Determinacin

de

fosfatos

en

bebidas

cola.

http://es.scribd.com/doc/50816175/Determinacion-de-fosfatos-enbebidas-cola (consultado agosto 2012) 7. Quesada, S.; Manual de experimentos de laboratorio para bioqumica. Ed. EUNED; Costa Rica. 2007. Pp. 10 8. Cavazos, N.; Zrate, L.; Torres, E.; Determinacin de fsforo y cafena en bebidas de cola. Educacin Qumica. 2001, 12, 2. Pp. 116-120