Facultad de Ciencia

GUA DE TRABAJOS PRCTICOS LABORATORIO DE BIOLOGA DBIO1012

2014

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GENERALIDADES

La asistencia a los trabajos prcticos es OBLIGATORIA. Toda inasistencia debe ser justificada dentro de los plazos establecidos por la universidad. Los trabajos prcticos bajo ninguna circunstancia son recuperables, por lo que la inasistencia justificada no implica una nueva oportunidad para su realizacin. Cada trabajo prctico, se evaluar a travs de una interrogacin escrita previa a la realizacin del laboratorio y/o por medio de un informe, el cual se entregar UNA SEMANA despus. Las normas de evaluacin y aprobacin son aquellas determinadas por el reglamento de la Universidad.

1.

Ser OBLIGACIN DE CADA ALUMNO estar al tanto de su horario as como de

la fecha que le corresponde asistir al laboratorio. No se aceptaran alumnos despus del comienzo de la actividad, siendo este motivo de ausencia injustificada. 2. Los alumnos debern presentarse al laboratorio con delantal blanco y

mantenerlo durante todo el tiempo de trabajo. 3. Los alumnos debern tener una conducta apropiada durante todo el desarrollo

del trabajo prctico y acatar las normas e instrucciones que le entreguen el profesor a cargo del grupo. El profesor se reserva el derecho de SOLICITAR LA SALIDA del laboratorio a cualquier alumno que no respete estas normas. 4. Cada alumno debe disponer de una gua de trabajo prctico que posee las

instrucciones de cada ensayo a realizar. Tanto esta gua como los antecedentes tericos y metodolgicos que sustentan el trabajo prctico debern de ser ESTUDIADOS por alumno previo a la realizacin del trabajo.

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Finalizado el trabajo deber confeccionar un informe (ver anexo Cmo elaborar un informe de una actividad experimental realizada en laboratorio?). INTRODUCCIN: Indicar los objetivos y fundamentos tericos del trabajo que realiz. Mximo 1 pgina y media. MATERIALES Y MTODOS: Describir los mtodos y materiales. Incluir todo lo necesario para que su informe sirviera de base a una tercera persona que realizare el prctico. Mximo 1 pgina. RESULTADOS: Debe incluir las observaciones realizadas as como dibujos de las preparaciones, datos experimentales, y si es necesario un ejemplo de los clculos realizados. Cada vez que se describa la observacin de una preparacin al microscopio, debe utilizar el siguiente esquema: a) Objetivo: referido al porque se realiza la observacin (Ej. observacin de ncleo) b) Material: es el rgano o tejido del que se obtuvo la preparacin (Ej. rin de rata) c) Mtodo: se refiere a la tcnica histolgica usada para elaborar la preparacin (a fresco o permanente) y a la tincin utilizada. (Ej. Preparacin a fresco de clulas catfilo de cebolla) d) Aumento: la amplificacin del objeto observado y depende del ocular y del objetivo. Aumento = aumento del objetivo x aumento del ocular. e) Observaciones: considere describir la forma celular; relacin con otros elementos presentes, tamao celular; forma, nmero y posicin del ncleo y algunas caractersticas del citoplasma. Mximo 1 pgina y media DISCUSIN: Debe de analizarse los resultados obtenidos. Adems, incluir si fuera necesario las limitaciones de las tcnicas y procedimientos utilizados.

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CONCLUSIONES: Indicar las conclusiones ms relevantes derivadas del trabajo realizado BIBLIOGRAFIA: Sealar del material bibliogrfico utilizado ttulo, autor, edicin, editorial y pginas. Todos los informes deben ser confeccionados segn el formato y nmero de hojas indicado (10 hojas mximo). En el caso de no cumplir con estas normas o de un atraso en su entrega, el informe ser calificado con NOTA 1,0, sin apelacin.

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Cmo elaborar un informe de una actividad experimental realizada en laboratorio? El fondo:

Seccin Construccin Ttulo de la investigacin Encabezado Autores Seccin y Subseccin Fecha Orientaciones Debe ser especfico. Informe de laboratorio o Trabajo prctico no son vlidos. Solo poner nombre del practico Deben anotarse los autores del informe y no los miembros del grupo asistentes el da del laboratorio. Nombre y dos apellidos y en orden alfabtico. Para facilitar el orden de los informes por parte del profesor Debe anotarse la fecha de entrega del informe Debe incluir los aspectos tericos que respaldan la hiptesis y el diseo experimental. No se trata de escribir un ensayo sobre el tema, sino de introducir al lector en el tema y explicarle en qu nos basamos para suponer la hiptesis. Debe ir siempre de lo general a lo especfico. Hacia el final del marco terico debe incluirse la pregunta que motiva la investigacin. Otra posibilidad es que quede expresada dentro de los objetivos. Deben ser similares a los entregados por el profesor en la gua de laboratorio, siempre referidos a lo que se intenta probar con el procedimiento experimental. Por ejemplo, Pretendemos averiguar cmo afecta la contaminacin del agua en la germinacin de las semillas (menciona el objetivo y la pregunta que se intenta responder) No corresponde anotar como objetivo ideas como queremos aprender ms sobre este tema Vale decir, se trata de objetivos especficos y bien concretos. Debe estar redactada de forma aseverativa es decir contener una afirmacin de lo que se piensa que ocurrir. Se tienen que anotar en una lista de todos los materiales utilizados para llevar a cabo el procedimiento experimental. Debe discriminar entre los materiales irrelevantes y relevantes para su estudio. Se describen pormenorizadamente los procedimientos que efectivamente se llevaron a cabo durante la investigacin. Se indican los resultados obtenidos tras la puesta en prctica de los procedimientos. Normalmente se debe un dibujo de lo observado. No se deben explicar o analizar los resultados. Slo se describen. Es la parte ms importante del informe porque bsicamente es el anlisis de los resultados. Debe redactarse como si se estuvieran respondiendo las siguientes preguntas: Cmo se explican los resultados obtenidos? Los resultados son los esperados de acuerdo a nuestra hiptesis? Si lo son: significa que el diseo estuvo perfecto? (rara vez es as) Si no lo son: a qu se podra deber? Normalmente al redactar la discusin, se descubren aspectos que deberan incluirse en el marco terico. Es la respuesta a la pregunta de investigacin planteada en el objetivo o bien, lo que se saca como conocimiento objetivo tras la discusin. Por ejemplo, ante el objetivo antes ejemplificado, una conclusin podra ser: el agua contaminada no tendra efectos significativos en la germinacin de las semillas. Se refiere a la fuente de informacin que permite elaborar el marco terico y la discusin. Por ms simple que sea la investigacin, SIEMPRE se requiere contrastar lo desarrollado en el laboratorio respecto a lo que dicen los cientficos que escriben los libros. En el caso de referencias bibliogrficas se pueden usar libros, revistas cientficas y eventualmente, enciclopedias especializadas. En cualquiera de estos casos, debe sealarse: ttulo, autor (o editor), editorial, pas y ao de publicacin. Este ltimo dato es vital, pues publicaciones muy antiguas pueden tener datos errneos o parciales. No se recomienda. Slo se acepta, si se incluye la direccin completa, el nombre de la pgina y la fecha en que se visit. Debe tenerse presente que en ciencias, es difcil encontrar sitios de internet en castellano que no merezcan dudas en su contenido. Ptje.

Marco terico

1,5

Introduccin Objetivos

Hiptesis Materiales Mtodo Resultados

Diseo experimental

1,0

2,0

Discusin

1,0

Conclusiones

Bibliogrficas Referencias

0,5

De internet

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La Forma: El encabezado no debe utilizarse como portada. Se anota el encabezado en la

parte superior de la primera hoja del informe y se contina inmediatamente con la introduccin. Asimismo, cada seccin no debe ir una hoja independiente. Por ejemplo, si los resultados se acaban en la mitad de la pgina 3 del informe, dos lneas ms abajo, en la misma pgina 3, se comienza con la discusin. Slo las secciones se titulan. Ej. No es necesario subtitular marco terico Se debe usar letra Times New Roman de 12 puntos Se deben usar sangras y los mrgenes deben ser de 2 cm a cada lado La redaccin puede hacerse usando verbos en pretrito para la 3 persona

plural, por ej. Pusimos a calentar el agua. Las pginas debe venir numeradas desde el mismo archivo electrnico. El

informe no puede exceder las 5 pginas, usando hoja de tamao carta. No deben incluirse figuras o imgenes decorativas. Solo lo que requiere la

entrega del marco terico o los resultados. Los grficos si corresponde incluirlos deben estar insertos en el informe. Debe atenderse la ortografa y la redaccin. Lo primero es fcil con los

correctores automticos. Para lo segundo, van algunas indicaciones: o Utilizar frases cortas. Un mismo prrafo puede contener 3 o 4 ideas

relacionadas, separadas por puntos seguidos. o o o o o No repetir verbos, adverbios o adjetivos en el mismo prrafo. Tampoco repetir ideas. Mantener la misma forma verbal de principio a fin. Buscar siempre la forma ms corta de decirlo. Pedirle a otra persona que lo lea y lo corrija. Aunque sea obvio: el informe debe estar ordenado y limpio. Por todos los aspectos aqu sealados, se asigna 0,5 puntos por presentacin

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TRABAJO PRCTICO N 1. APLICACIN DEL MTODO CIENTFICO A LA INVESTIGACIN PRCTICA. INTRODUCCIN Ciencia es el conocimiento adquirido tras la realizacin de una investigacin que puede ser verificado. Para realizar esta verificacin usamos el mtodo cientfico, que se basa principalmente en el diseo de una investigacin que permite el contraste de la hiptesis con la realidad. Es la forma de realizar la prueba que supone toda investigacin cientfica, tanto en la disposicin y enlace de los elementos que intervienen en ella, como en el plan a seguir para la obtencin y tratamiento de los datos necesarios para verificar la hiptesis. Reconocemos tres tipos diferentes de estudios cientficos: 1.-DESCRIPTIVOS. Estudios diseados nica y exclusivamente para describir la distribucin de las variables existentes, sin considerar hiptesis causales o de otro tipo. En ciertas circunstancias son la nica evidencia disponible (fenmenos evolutivos pasados, impacto ambiental, epidemias). Son estudios que responden a preguntas referidas a caractersticas de los sujetos, lugar y tiempo en que ocurren los fenmenos estudiados. Por ejemplo: a) Estudio descriptivo diseado para conocer las caractersticas y distribucin de los pacientes ingresados a hospitales debido a accidentes de trnsito en los que est involucrado el consumo de alcohol. b) Estudio descriptivo diseado para conocer el ndice de mortalidad por enfermedad coronaria debida al consumo per cpita de cigarrillos. c) Estudio que relaciona los datos demogrficos y el consumo de diferentes productos con el nmero de casos de cncer y registros de mortalidad en diferentes servicios sanitarios. Estos estudios pueden ser el primer paso en la investigacin para relacionar una enfermedad con una exposicin determinada. Su gran ventaja reside en que se realizan muy rpidamente, prcticamente sin costo y con informacin que suele estar disponible. Los estudios cientficos descriptivos constituyen un importante punto de partida para la generacin de hiptesis de trabajo al proveer informacin que podr ser verificada recurriendo a otros diseos de investigacin. 2.-CORRELACIONALES. Algunos autores los incluyen en los descriptivos. Estos estudios se basan principalmente en establecer cmo se comporta una variable conociendo el comportamiento de otra variable relacionada. Es decir, permiten encontrar relaciones entre variables, comprender las posibles causas que desencadenan ciertos efectos o respuestas y evaluar el grado de relacin entre dos variables. Se dice que dos variables estn relacionadas positivamente si a valores altos de una de ellas le corresponden valores altos en la otra, por el contrario se dice

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que estn relacionadas negativamente si a valores altos de una de ellas le corresponden valores bajos en la otra. Para establecer si estas correlaciones tienen algn valor cientfico deben someterse a pruebas estadsticas. Por ejemplo: a) Analizar la relacin entre la motivacin laboral y la productividad en un grupo de trabajadores, para lo cual se medira a cada uno de esos trabajadores su motivacin y su productividad, y despus analizara si los trabajadores con mayor motivacin son o no los ms productivos. Los estudios correlacionales, al igual que los descriptivos, introducen elementos tiles para la formulacin de hiptesis en estudios posteriores que involucran otras observaciones o bien diseos experimentales. Estos estudios son los grandes proveedores de hiptesis con los que cuenta la epidemiologa y han contribuido al estudio de importantes problemas de salud. 3.-EXPERIMENTALES. Se efecta una manipulacin o control de alguna(s) variable(s). La variable manipulada se llama variable independiente y se halla bajo control directo del investigador. Su variacin dentro del grupo estudiado origina cambios en la variable dependiente, y sta relacin es la que se pretende demostrar. Otra forma de exponerlo sera decir que un estudio experimental implica la realizacin de un experimento, entendiendo como tal la situacin que el investigador crea controlando y manipulando deliberadamente las condiciones que determinan la aparicin del fenmeno. Esto supone provocar un cambio en la variable independiente y observar el efecto que este cambio produce en la variable dependiente. OBJETIVOS a) Realizar un experimento aplicando los pasos del mtodo cientfico. b) Comunicar los resultados obtenidos mediante grficos y tablas. Materiales y Reactivos Reloj o cronmetro. Calculadora.

A) Aplicacin de un Diseo Experimental. 1.- Experimento sobre la frecuencia cardaca. A partir de observaciones anteriores, reflexione sobre el efecto que tiene a largo plazo el incremento del ejercicio (actividad fsica) sobre la frecuencia cardaca. Qu efecto piensa usted que tendr el aumento del ejercicio sobre el pulso cardaco en este momento? Escrbalo en forma de hiptesis: ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ___________

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Lleve a cabo el siguiente experimento para probar su hiptesis: 1. Forme un equipo de dos personas. Tome el pulso a su compaero por 15 segundos y multiplique por cuatro para obtener la frecuencia por minuto; previamente mantngase en reposo sentado durante 5 minutos. Este ser el valor de la frecuencia cardaca basal. 2. Ejecute con su compaero el siguiente ejercicio en diferentes turnos subiendo y bajando a una silla en 5, 10 y 15 oportunidades, alternando las mediciones de uno y otro entre ejercicios. Entre cada ejercicio obtenga datos contando el pulso por 15 segundos y multiplicndolo por cuatro. 3. Consulte a su compaero sobre el grado de entrenamiento fsico que posee y establezca tres categoras segn el nivel de entrenamiento: 1. Sin entrenamiento, 2. Poco entrenamiento, 3. Mucho entrenamiento. 4. Registre sus datos en la siguiente tabla: Tabla de frecuencia cardaca (pulso/minuto) / cantidad de ejercicio (pasos) Alumno 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Nivel de entrenamiento Gnero Pulso reposo Pulso 5 pasos Pulso 10 pasos Pulso 15 pasos 5. Usando los datos registrados, y recopilando la informacin del resto de sus compaeros, elabore una tabla que incluya la siguiente informacin para cada nivel de entrenamiento: promedio de la frecuencia cardaca de los hombres, promedio de la frecuencia cardaca de las mujeres, promedio de la clase para las distintas situaciones de estrs. Analice como afecta el ejercicio a la frecuencia cardaca y cmo influyen otros parmetros como la condicin fsica, el gnero o algn otro que a usted le pueda interesar. Represente sus datos en tablas y grficos.

B) Anlisis de datos. 1.- Elabore una tabla donde se consigne la siguiente informacin de sus compaeros de clase: edad, altura y peso y su representacin por gnero. 2.- Grafique estos datos.

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3.- Existe alguna relacin entre edades, la estatura y el peso de los alumnos del curso? Existen diferencias por gnero? Tabule y grafique estos datos. 4.- Qu conclusiones puede obtener de los datos analizados?

La investigacin en biologa se apoya fuertemente en la obtencin y anlisis de datos cuantitativos, a partir de los cuales se realizan inferencias y se obtienen conclusiones. El primer paso, la obtencin de datos experimentales, se puede lograr utilizando una multitud de mtodos diferentes. En general, la evaluacin de los datos obtenidos se realiza matemticamente utilizando medidas de tendencia central y de dispersin. Sin embargo, adems de la evaluacin de los datos, la presentacin de estos es de fundamental importancia. La presentacin de los datos debe ser tal que estos sean reconocidos claramente por el lector. Las formas ms comunes de presentar los datos son en forma de tablas y/o grficos. Ambos tipos de presentaciones deben ser claras, incluyendo de qu tipo de datos se trata, las unidades, etc. La eleccin del tipo de representacin grfica depender de los datos y de qu manera se presentan ms claramente las relaciones entre las variables, de manera de maximizar la comprensin por parte del lector. 1.- A continuacin detallaremos algunas formas de presentacin y evaluacin de datos, utilizando como ejemplo el peso de los huevos presentes en 24 nidos, 48 h. despus de ser depositados por el ave.

Nid o

Tabla I. Peso de los huevos presentes en 24 nidos. Peso (g.) Huevos Peso /nido promedio/ni

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do 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 47.6 47.4 48.5 47.1 48.3 48.1 49.0 46.0 47.5 47.6 46.9 47.1 49.3 48.6 48.3 46.2 48.0 50.4 46.8 46.2 49.2 47.5 48.6 49.7 47.0 46.9 48.3 49.3 49.9 47.3 49.0 47.5 47.0 48.8 46.9 49.7 48.8 47.6 46.2 46.6 48.9 47.6 45.8 47.7 46.2 46.6 47.7 49.5 46.6 47.3 49.0 49.5 48.5 2 4 1 3 5 3 2 6 2 3 4 2 3 1 2 4 2 1 4 0 5 1 3 2

47.1

46.9

46.9

46.7

46.8

46.7

46.1

47.1

48.6 46.2

47.3 46.3

a) Completar la siguiente tabla: En la Tabla II realizaremos un resumen de los datos de la tabla I, mostrando en forma ascendente el nmero de huevos presentes en los diferentes nidos. Use como gua el ejemplo para los nidos con 0 huevos. Tabla II. Nmero de huevos presentes en 24 nidos. Nmero de Nmero Peso Huevos de Nidos promedio 0 1 0

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b) Elabore tres representaciones grficas de la distribucin del nmero de huevos presentes en 24 nidos. Cul de ellas permite una mejor interpretacin de los resultados? Tenga especial atencin de reconocer cuales son las variables independiente y dependiente. Grfico 1 Grfico 2 Grfico 3

c) Calcule el peso promedio de los huevos en cada nido y establezca correlaciones en relacin al nmero de huevos por nido (anlisis que relacione el nmero de huevos/nido y el peso promedio). Realice un grfico con el resultado de sus correlaciones.

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TRABAJO PRCTICO N2 MICROSCOPA I. INTRODUCCION La gran mayora de las clulas son demasiado pequeas como para ser observadas a simple vista, ya que nuestro ojo slo puede ver un objeto que sobrepase el tamao de 0,1 mm de dimetro. El microscopio es un instrumento especialmente diseado para el estudio de objetos tan pequeos que estn fuera del poder de resolucin del ojo humano. II. OBJETIVOS 1. Conocer los componentes estructurales de este instrumento 2. Adquirir conocimientos y prctica en el uso del microscopio (compuesto) de luz. III. ACTIVIDADES A) CONSTITUCIN DEL MICROSCOPIO OPTICO COMPUESTO Est formado por los siguientes sistemas: 1. Sistema Mecnico o estativo. 2. Sistema de iluminacin 3. Sistema ptico 1. Sistema Mecnico: Es la armazn metlica que sostiene al sistema ptico y al sistema de iluminacin, dndoles la posicin adecuada y permitiendo los movimientos necesarios para una correcta coordinacin entre ambos. Est formado por:

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a) Base o pie: Da la base de sustentacin al microscopio. Generalmente tiene forma de herradura y es pesada. A veces sostiene a la lmpara de iluminacin. b) Columna: Es el pilar que sostiene al tubo, platina, condensador, y sobre el cual estn montados los tornillos focalizadores macro y micromtrico. La columna puede ser articulada al pie, para permitir inclinar el instrumento o puede ser curva hacia adelante, dndole de esta manera una inclinacin estable al tubo y dejando la platina en posicin horizontal permanente. c) Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central que permite el paso de los rayos luminosos. Sobre ella se coloca el objeto a observar montado sobre un portaobjetos (lmina de vidrio rectangular). Posee pinzas destinadas a sujetar la preparacin o bien un sistema de tornillos y el carro que permite desplazarla con movimientos horizontales o verticales y que generalmente esta graduada con un vernier. d) Tubo: Cilindro metlico hueco con su superficie interna completamente negra para evitar reflexin de la luz. En su extremo superior va el ocular y en su extremo inferior el revlver. e) Revlver o tambor: Mecanismo situado en el extremo inferior del tubo, que lleva los diferentes objetivos que posee el microscopio. Por simple rotacin del revlver se coloca en posicin el objetivo deseado. En el revlver, los objetivos estn construidos de manera tal, que estando en foco uno de ellos, todos los dems quedan en foco al rotar el revlver, esto se conoce como Sistema Parafocal. f) Tornillos para la focalizacin: La platina junto con parte del sistema de iluminacin, se deslizan verticalmente por medio de dos tornillos adaptados sobre una cremallera. Uno para los movimientos rpidos o de enfoque aproximado (tornillo macromtrico) y el otro para movimientos lentos destinados al enfoque de precisin (tornillo micromtrico). 2. Sistema de iluminacin:

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Se encuentra ubicado bajo la platina y consta de Diafragma, anillo portafiltros y un condensador. Se utiliza la luz artificial proveniente de una ampolleta adecuada. a) Condensador: Sistema de lentes ideado por Abb, colocado bajo la platina y que puede moverse verticalmente mediante un tornillo. Este sistema de lentes concentra los rayos luminosos, por lo cual el trmino de condensador es impropio ya que no se produce condensacin de los rayos luminosos sino un aumento de la seccin del cono luminoso de lo que resulta una imagen ntida. b) Diafragma-iris: Esta formado por una serie de lminas de acero imbricadas que se cruzan y que pueden moverse libre o simultneamente por un extremo, estando fijas por el otro. El movimiento se ejecuta por medio de una pequea palanca. El diafragma-iris esta adosado al condensador y se mueve verticalmente junto con ste. Tiene por funcin regular el haz luminoso ensanchndolo o disminuyndolo, por lo cual es complemento indispensable del condensador. c) Anillo Portafiltro: Es un anillo ubicado bajo el diafragma-iris que puede moverse lateralmente mediante palanca y sobre el cual se colocan el o los filtros que se deben usar. Los filtros son discos de vidrio de diferentes colores. 3. Sistema ptico: Est montado en el tubo y est formado por el sistema de lentes que forman la imagen. El ocular est montado en el extremo superior del tubo y el Objetivo en el extremo inferior. a) Objetivo: Est formado por asociaciones de lentes positivas o convergentes que van montadas en el revlver. Generalmente el revlver lleva 3 o 4 objetivos. Estas asociaciones de lentes que constituyen un objetivo forman un sistema centrado que acta en su conjunto como si fuera una sola lente. Estos objetivos pueden ser acromticos o apocromticos, propiedades de las cuales depende su condicin ptica. Los lentes

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acromticos dan focos distintos para los diversos colores, apareciendo la imagen irisada dando la llamada aberracin cromtica. En la prctica se distinguen 2 tipos de objetivos segn sea el medio que separa la lente frontal del objetivo y la preparacin. Cuando este medio es el aire cuyo ndice de refraccin es 1 (n=1) diferente al del portaobjeto de vidrio que es 1,5 el objetivo es a seco. Si el medio es un lquido, que tiene un ndice de refraccin semejante o igual al del vidrio, generalmente aceite de cedro, el objetivo es a inmersin. En este ltimo se suprime, en parte, la refraccin de los rayos perifricos y se aprovecha aquellos que de otra manera se perderan por reflexin total, como ocurre en los objetivos a seco, al pasar los rayos luminosos de un medio ms denso a uno menos denso (del aire al vidrio). En consecuencia una mayor cantidad de luz entra al objetivo aumentando su poder de resolucin. Esto se conoce como Inmersin Homognea. Cuando el lquido que separa la lente frontal y el objeto tiene un ndice de refraccin distinto al del vidrio (agua por ejemplo) se conoce como Inmersin Ordinaria. b) Ocular: Son sistemas pticos centrados colocados en el extremo superior del tubo, al cual el observador aplica el ojo. Estn formados por dos lentes planas convexas: -Lente Ocular propiamente tal -Lente colectora o de Campo Entre ambas lentes hay discos perforados que suprimen los rayos marginales (evitan aberraciones). La lente inferior o colectora de campo recibe la imagen real dada por el objetivo, la refracta, y origina en el plano focal de la lente ocular la imagen libre de aberraciones. La lente ocular propiamente tal, acta como una lupa y forma una imagen virtual y definitiva del objeto que en relacin a la imagen real dada por el objetivo es mayor y derecha. Por lo tanto LA IMAGEN DEL MICROSCOPIO OPTICO ES MAYOR QUE EL OBJETO, VIRTUAL E INVERTIDA.

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B) MANEJO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO La manipulacin de este instrumento debe realizarse con el mximo cuidado, para ello proceda de la siguiente manera: 1. Tmelo de la columna o brazo (estativo) con una mano y coloque la otra bajo la base (asa o pie). Deposite el microscopio sobre el mesn de trabajo. Retire la funda protectora con cuidado. 2. Limpie las lentes (oculares y objetivos) con un pao de lienzo o papel adecuado. 3. Identifique las distintas partes del microscopio. Reconzcalas utilizando las figuras que se incluyen. 4. acomode en su posicin adecuada: El interruptor (encender la luz de la ampolleta) El tubo ptico El revlver, grelo para que el objetivo de menor aumento (el ms corto) quede en lnea recta con el tubo. Tiene un tope que Usted debe sentir al llegar al lugar debido. El diafragma, dejndolo completamente abierto. Observe a travs del ocular que el campo est uniformemente iluminado. 5. El alumno debe sentarse cmodamente frente al instrumento. Cuerpo erguido y cabeza inclinada sobre los oculares. Mientras observa, una mano maneja el tornillo macro o micromtrico y la otra desplaza el portaobjeto con los tornillos de movimiento de la platina. 6. Enfoque de la preparacin: Se coloca la preparacin con el cubreobjetos hacia arriba, sobre la platina y sujeto con las pinzas. Se desplaza de tal modo que la muestra quede ubicada en el eje ptico del microscopio. Baje el tubo, mirndolo por el lado hasta que la lente frontal casi toque el cubreobjeto. Luego, observando por el ocular suba lentamente el tubo con el tornillo macromtrico hasta que aparezca la imagen del objeto. Puede afinar el enfoque girando el tornillo micromtrico. Acomode el condensador, el diafragma, filtros o intensidad de la fuente luminosa para un mejor enfoque si es necesario.

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7. Para cambiar objetivos, de menor a mediano, o de mediano a mayor, se debe girar el revlver en sentido contrario a los punteros del reloj, hasta que calce el objetivo respectivo en el retn, luego se realiza nuevamente el enfoque fino con el micromtrico. 8. Conviene acostumbrarse a observar manteniendo ambos ojos abiertos para as evitar el cansancio. 9. Infrmese acerca de la importancia de la utilizacin del objetivo de inmersin y su utilizacin. ACTIVIDADES PREVIAS AL LABORATORIO: infrmese sobre tipos de lentes que existen, cmo se forma la imagen en ellos y sobre conceptos como distancia focal. c) ACTIVIDADES: El material a estudiar en el microscopio servir para poner en prctica sus conocimientos sobre manejo del instrumento. PARA EVITAR DAAR LAS MUESTRAS Y/O EL MICROSCOPIO, UTILICE EL SIGUIENTE PROCEDIMIENTO PARA LA OBSERVACIN DE PREPARACIONES HSITOLGICAS: 1 COMENZAR SIEMPRE SU OBSERVACIN UTILIZANDO EL AUMENTO MENOR DE SU MICROSCOPIO AJUSTANDO CON LOS TORNILLOS MACRO Y MICROMTRICO. 2 SEGUIDAMENTE UTILIZAR EL LENTE DE AUMENTO MEDIANO ENFOCANDO CON LOS TORNILLOS MACRO Y MICROMTRICO. 3 POR LTIMO COLOCAR EL AUMENTO MAYOR ENFOCANDO

EXCLUSIVAMENTE CON EL MICROMTRICO. 1) Observacin N1 -Corte un fragmento de peridico, impreso donde se encuentre la letra e. -colquelo sobre un portaobjetos limpio y con un gotario ponga en l una gota de agua. con letras pequeas, de 1 cm de lado,

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-Cuando est bien humedecido coloque sobre l un cubreobjeto, evitando que se formen burbujas. Para ello, tome el cubreobjetos con los dedos haciendo un ngulo de 45 respecto al portaobjeto y djelo caer (puede ayudarse de pinzas), las burbujas pueden eliminarse presionando suavemente el cubreobjetos con las pinzas o con la parte posterior del lpiz. Esta es la forma de hacer una preparacin en fresco. -Enfoque con el aumento menor, desplace el portaobjetos de derecha a izquierda y viceversa. Observe. - Cambie el objetivo a mediano y despus a mayor, enfoque y desplace el portaobjeto igual que en el caso anterior. 2) Observacin N2 -Al igual que la observacin anterior, corte un fragmento de papel milimetrado de 1 cm2 de superficie. -Mida el dimetro del campo visual observado con los tres lentes objetivos. -Comprelos y explique las diferencias medidas. Dibujos y Preguntas: a) Dibuje lo observado con cada uno de los tres objetivos. Calcule en cada caso el aumento total utilizado. b) Describa las caractersticas que tiene la imagen observada. Si es virtual o real, derecha o invertida, de mayor o menor tamao que el objeto. c) Cuando mueve la preparacin hacia la izquierda hacia donde se mueve la imagen? d) Al mover la preparacin hacia arriba (enfrente) hacia donde se mueve la imagen? e) El cambio de un aumento a otro cambia la posicin de la imagen? f) El cambio de un aumento a otro permite un campo visual mayor o menor? SIEMPRE AL TERMINAR CADA TRABAJO PRCTICO RECUERDE: -Colocar nuevamente el objetivo de menor aumento en recta con el tubo. -Subir el tubo a 1 cm de la platina. -Apagar la fuente luminosa del microscopio -Retirar las preparaciones utilizadas, desde la platina de su microscopio. -Guardar el instrumento en el lugar destinado a tal efecto.

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INFORMACION ADICIONAL UUNIDADES DE MEDIDA USADAS EN MICROSCOPIA 1 metro (m) = 10 decmetros (dm) 100 centmetros (cm) 1000 milmetros (mm) 1.000.000 micrmetros (m) 1.000.000.000 nanmetros (nm) 10.000.000 Angstrom (A) 1.000.000.000.000 picmetros (pm) 1 dm = 10P-1P m 1 cm = 10P-2P m 1 mm = 10P-3P m 1 m = 10P-6P m 1 nm = 10P-9P m 1 A = 10P-10P m 1 pm = 10P-12P m

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Complete el siguiente esquema, rotulando cada uno de los componentes del microscopio ptico:
1)______________________________ 2)______________________________ 3)______________________________ 4)______________________________ 5)______________________________ 6)______________________________ 7)______________________________ 8)______________________________ 9)______________________________ 10)_____________________________ 11)_____________________________ 12)_____________________________ 13)_____________________________ 14)_____________________________ 15)___________________________

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TRABAJO PRCTICO N3 DIVERSIDAD CELULAR

INTRODUCCIN Tanto los organismos unicelulares como los pluricelulares, ya sean de origen vegetal o animal, tienen en comn el estar constituido de clulas. Aun cuando, estas son unidades fundamentales de todos los seres vivos y poseen funciones bsicas comunes, presentan diferentes tanto estructurales como funcionales, dependiente del organismo que se encuentren formando parte. Existen muchos tipos celulares distintos. En una gota de estanque es probable encontrar varias decenas de tipos diferentes de protistas, y una variedad an ms grande de procariontes. Nuestros propios tejidos y rganos estn compuestos por al menos doscientos tipos distintos de clulas somticas. Las plantas estn compuestas por clulas de aspecto muy distinto a las de nuestro cuerpo, los insectos pueden tener muchos tipos de clulas que no se encuentran ni en las plantas ni en los vertebrados. Existe por lo tanto una gran diversidad celular, que hace imposible la descripcin de una clula tipo, que no existe. Sin embargo, en la mayora de las clulas existen diversas estructuras que estn siempre presentes y que permiten elaborar un plan celular bsico. Existen fundamentalmente dos tipos celulares bsicos de organizacin

estructural: Clulas procariotas: con una organizacin estructural relativamente simple, no presentan compartimientos intracelulares limitados por membranas, el material nuclear se encuentra disperso en el protoplasma ocupando una porcin ms o menos central. Ejemplo: clula bacteriana.

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Aunque existen miles de especies de bacterias, en forma individual presentan tres formas: elipsoidal o esfrica (Cocos), cilndrica o en forma de bastn (Bacilos) y en espiral o helicoidal (Espirilos). Los cocos presentan modelos de agrupacin en pares (diplococos), cadenas, racimos, ttradas, en cubos y sin distribucin especial. Los bacilos se pueden agrupar en cadena, en letras chinas o empalizada y sin distribucin especial. Los espirilos se presentan en general como clulas independientes.

Clulas eucariotas: con una mayor complejidad estructural, presentan el citoplasma compartimentalizado por membranas, el compartimiento nuclear, que contiene el material gentico, es el ms evidente al microscopio ptico y da lugar al llamado ncleo verdadero, estructura siempre presente en este tipo celular. En torno a l, se encuentra el citoplasma que presenta una multiplicidad de estructuras membranosas denominadas organelos. Ejemplo: cualquier clula de mamfero a excepto del eritrocito maduro.

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TAMAO CELULAR Para un tipo particular de celular que ha alcanzado su completo desarrollo y diferenciacin es raro encontrar variaciones muy amplias de tamao. Sin embargo, el volumen para un mismo tipo celular es constante e independiente del tamao del individuo. Por ejemplo: las clulas renales del caballo, la ballena o del ratn tienen un tamao casi siempre igual; la diferencia del volumen total del rgano se debe al nmero de unidades celulares que lo forman. El tamao de las clulas se expresa en micrones o micrmetros

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(m=1/1000 mm) y puede variar desde algunos micrones (7m para el glbulo rojo), hasta varios centmetros (como en el caso de los ovocitos de algunas aves). Al igual que la forma celular, el tamao de la clula est en relacin con la funcin que dicha clula debe cumplir; por ejemplo el glbulo rojo tiene el tamao indicado, ya que el cilindro ms pequeo por el que circula (capilar sanguneo), tiene un dimetro pequeo. El ovocito de las aves ha alcanzado un gran tamao por la cantidad de sustancias de reserva que debe contener. UNIDADES DE LONGITUD Y EQUIVALENCIA

FORMAS CELULARES Las formas que presentan las clulas son mltiples, en los organismos pluricelulares el tamao y forma celular estn relacionadas con la funcin especfica que cada clula desempea, como tambin con la disposicin de una clula con respecto a otra. En general, la forma celular est determinada primordialmente por la informacin gentica. Por razones didcticas se pueden clasificar en: Forma variable: como Amebas y leucocitos. Forma semejante a cuerpos geomtricos: -Esfricas: algunos unicelulares y la mayor parte de los gametos femeninos.

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-Cbicas: clulas de los tbulos renales. -Prismticas: clulas epiteliales de las vellosidades intestinales. -Polidricas: hepatocitos. Forma asimilable a otras estructuras conocidas: -Estrelladas: como el soma (cuerpo) de las neurona motoras del asta anterior de la mdula espinal. -Fusiformes: en forma de huso, como las clulas del tejido muscular liso. -Aracniforme: clulas de la neurogla OBJETIVOS - Identificar la morfologa celular procarionte y eucarionte - Discriminar clulas animales y vegetales

ACTIVIDADES Observacin de clulas procariontes a.- Elabore una preparacin de lactobacterias. Para ello coloque una pequea cantidad de yogurt sobre un portaobjeto y adale una gota de azul de metileno, deje reposar un minuto y enseguida cubra la preparacin y observe al microscopio. Enfoque la preparacin de lactobacterias con aumento lupa. b.- Cambie gradualmente de aumento hasta llegar a inmersin. c.Dibuje y describa lo observado, segn: formas, tamao, colores, agrupaciones, etc. Observacin de clulas eucariontes animales y vegetales

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a.- Coloque la preparacin asignada en la platina. b.- Enfoque la preparacin con el aumento necesario. c.- Dibuje y describa lo observado, segn: forma, agrupacin, tamao y estructuras observables en las clulas.

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TRABAJO PRCTICO N4 RECONOCIMIENTO DE BIOMOLCULAS Toda materia viva est compuesta por un grupo reducido de molculas combinadas entre s: el agua y las sales minerales, los hidratos de carbono (o carbohidratos), los lpidos, las protenas, los cidos nucleicos, las enzimas, las vitaminas y las hormonas. Algunas de estas molculas funcionan como parte estructural de las clulas y los tejidos del cuerpo de los organismos. CARBOHIDRATOS Los carbohidratos tpicos son azucares, almidones y celulosa. Los almidones y azucares sirven de combustible para la clula (proveedores de energa), y la celulosa es un componente estructural de las plantas. Los carbohidratos se clasifican como: Monosacridos o azucares simples, los cuales pueden tener de tres a siete tomos de carbono en su estructura. La glucosa es el ejemplo ms conocido de las hexosas (azcar de seis tomos de carbono). Disacridos o azucares dobles, los cuales estn constituido por dos monosacridos, como por ejemplo la sacarosa que est conformada por una glucosa unida a una fructosa. Polisacridos los cuales forman largas cadenas de monosacridos como es el caso del almidn que se encuentran en los vegetales. LIPIDOS Son grupos heterogneos de compuestos que poseen una consistencia grasosa o aceitosa, siendo ms o menos insolubles en agua y saludables en disolventes orgnicos (como por ejemplo: ter, cloroformo, benceno, etc.).Entre los lpidos de importancia biolgicas se encuentran las grasa neutras, fosfolipidos,

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esteroides, carotinoides y ceras. Estas molculas son combustibles biolgicos importantes, sirven de componentes estructurales de las membranas celulares y algunas son importantes. Los lpidos ms abundantes en los seres vivos son las grasas neutras. Ellos producen ms doble de energa por gramo, que los carbohidratos por lo que son una forma econmica de almacenar reservas alimenticias. PROTEINAS Las protenas son molculas complejas formadas por unidades ms simples llamadas aminocidos, los cuales estn unidos por enlaces pepiticos. Estos compuestos son esenciales en la qumica de la vida y son componentes estructurales de las clulas y tejidos. El crecimiento adecuado, la restauracin y el mantenimiento del organismo dependen del abastecimiento de estas sustancias. Las protenas son especficas de cada especie, varan un poco de una especie de otra, es el principal factor de las diferencias que median entre una especie y otra.

ACIDOS NUCLEICOS Las clulas contienen dos variedades de molculas conocidas como acido nucleicos: el cido desoxirribonucleico (ADN) y el cido ribonucleico (ARN). Ambos participan en la transmisin, de informacin gentica y en la determinacin de las protenas que una clula debe producir. El ADN es el material hereditario de las clulas y contienen instrucciones para la produccin de todas las protenas que le organismo necesita. Los cidos nucleicos son polmeros de nucletidos. Los nucletidos son unidades moleculares que constan de un azcar de cinco carbonos (pentosa), ya sea ribosa o desoxirribosa; un grupo fosfato; y una base nitrogenada, que puede ser una purina de doble anillo una pirimidina de anillo simple.

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II. OBJETIVOS 1. Identificar diferentes hidratos de carbono. 2 Identificar protenas mediante el reactivo de Biuret. 3. Identificar el ADN presente en una clula. III. ACTIVIDADES Y OBSERVACIONES a) Deteccin de polisacridos mediante la solucin de Lugol: Se utilizar una solucin de Lugol preparada con 5% de Yodo elemento y un 10% de Ioduro de Potasio en solucin. El test de Yodo se usa para distinguir el almidn de los monosacridos, disacridos y otros polisacridos. Debido a su configuracin molecular el almidn reacciona con el Yodo produciendo un color azul negro en un test positivo. Cuando el test es negativo se produce un color caf amarillento. En una gradilla encontrar 5 tubos que contienen: TUBO N CONTENIDO 1 Jugo de papa 2 Jugo de cebolla 3 Agua 4 Solucin de almidn 5 Solucin de glucosa Agregue con una pipeta 10 gotas de Lugol a cada uno de los tubos, agite bien. Observe y registre en su Informe sus resultados.

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b) Deteccin de protenas mediante mtodo de Biuret: La experiencia se realizar con albmina de huevo disuelta en agua (tambin puede usarse un macerado hecho a base de harina de porotos y agua). Del lquido sobrenadante tomar 3 ml en un tubo de ensayo, agregar 1 ml de NaOH 0,1 N y gotas de CuSO4 al 1%. Qu observa y a qu se debe? El resultado que indica presencia de protenas se reconoce porque el tejido toma color azul verdoso. La presencia de enlaces peptdicos puede reconocerse con esta reaccin, en que se trata la protena o el polipptido con una solucin de Hidrxido de Sodio y Sulfato de Cobre. El nombre de ella proviene de un compuesto muy simple llamado Biuret, que puede originarse por la unin de dos molculas de urea con desprendimiento de amonaco, da tambin la reaccin. El resultado es la formacin de una solucin violeta debido a la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos. c) Extraccin del ADN de un vegetal: Materiales: 1 pltano., 1 trozo de tela para poder filtrar, 1 pipeta de Pasteur, 1 tubos de ensayo, Alcohol de 96, 1 probeta, 1 varilla de vidrio, 1 embudo, Agua destilada, Vaso de precipitados de 500 ml, Lavalozas (lquido). 1. En un tubo de ensayo vierte cierta cantidad de alcohol etlico y luego deja enfriar,si es necesario rodalo de hielo. 2. vierte 500 ml de agua destilada y luego pon el pltano, la idea es que prepares una papilla. 3. En el vaso de precipitados se mezclan una cucharada de lavalozas y luego se le agregan 200 ml de agua destilada. 4. Ahora agrega tres cucharaditas de la papilla de pltano a la mezcla en el vaso de precipitados.5. Revuelve la segunda mezcla durante diez minutos. (No formar espuma) 6. Deja filtrar en un pao o toalla de papel gruesa durante unos 5 minutos. 7. Extrae parte del filtrado con la pipeta Pasteur y gurdalo en el tubo de ensayo que contiene el alcohol frio.8. Deja reposar durante 3 minutos.

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TRABAJO PRCTICO N 5 PERMIABILIDAD CELULAR

A nivel molecular, los organismos pueden ser considerados como sistemas qumicos complejos que contienen toda la informacin necesaria para crecer y reproducirse a expensas de la energa y materias primas del medio ambiente. La composicin qumica, estado fsico, forma, distribucin y otros caracteres de los materiales que constituyen un sistema, son los factores que fundamentalmente determinan los procesos fsicos y fsico-qumicos que en l pueden desarrollarse.

La mayor parte de los fenmenos fsicos que ocurren en el protoplasma son consecuencia de dos condiciones o caractersticas fundamentales de este sistema: a.- dimensiones coloidales de una gran parte de las molculas protoplasmticas. b.- movimiento vibratorio u oscilatorio de las molculas protoplasmticas. Este movimiento aumenta hasta un lmite al aumentar la temperatura, sobre este umbral ocurre una denaturalizacin. Las caractersticas sealadas anteriormente son responsables a su vez de una variedad de efectos, como por ejemplo difusin, permeabilidad selectiva de la membrana, osmosis, reversibilidad del estado coloidal, movimiento Browniano, etc. La mayora de los fenmenos mencionados tienen roles de vital importancia en la economa de los sistemas vivientes y sin exagerar se puede afirmar que la vida es el resultado de reacciones fsico-qumicas especficas. GRADIENTES El trmino concentracin se refiere al nmero de molculas (o iones) de una sustancia en un volumen dado. En ausencia de otra fuerzas, las molculas tienden a moverse desde las roas de mayor concentracin haca las zonas de menor concentracin, es decir existe un gradiente de concentracin. Esta orientacin se debe a que ellas estn colisionando unas con otras millones de veces por segundo. Las colisiones al azar envan las molculas hacia atrs y hacia adelante, pero el movimiento neto es hacia afuera de la regin de mayor concentracin. El movimiento al azar de las molculas o iones hacia un gradiente de concentracin menor es llamado difusin simple. La direccin de difusin de una sustancia depende de su propio

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gradiente de concentracin. En otras palabras cada sustancia difunde independiente de otra sustancia que este presente. DIFUSIN Difusin de gases, es el movimiento neto de molculas de una regin de mayor presin de difusin (presin parcial de un gas) a otra de menor presin de difusin. La difusin slo es posible cuando la concentracin de la sustancia difusible no es uniforme en todo el sistema. La velocidad de difusin de un gas depende de la densidad del gas, temperatura, gradiente de difusin-presin y concentracin del medio donde se produzca la difusin. Difusin de soluto, es el movimiento de molculas de soluto de una regin de mayor concentracin a una de menor concentracin. Las molculas poseen energa cintica que les permite desplazarse de un lado a otro en la solucin. La direccin de difusin de un soluto depende de sus propias diferencias de presin de difusin, independiente de la velocidad o direccin de cualquier otro soluto del sistema La velocidad de difusin de los solutos depende de la temperatura, gradiente de difusinpresin, tamao y masa de las partculas en difusin, solubilidad del soluto en el solvente.

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Diagrama de una difusin simple de molculas de colorante en una solucin.

OSMOSIS Es el movimiento neto de un solvente a travs de una membrana permeable y selectiva en respuesta a gradientes de concentracin de soluto, gradientes de presin o ambos. En los seres vivos, el agua es el nico solvente que se desplaza por osmosis. TONICIDAD Es la concentracin relativa de soluto en un medio (solucin) con respecto a otro. Si las concentraciones son iguales en ambos medios, vale decir no hay un movimiento osmtico de agua en ninguna direccin, se habla de una solucin isotnica. Cuando las concentraciones de soluto

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no son iguales, un medio es hipotnico (el que tiene menos soluto) y el otro es hipertnico (posee ms soluto). Las molculas de agua tienden a moverse de un medio hipotnico a otro hipertnico. DILISIS Similar al concepto de osmosis, se refiere a la difusin de partculas disueltas (soluto) a travs de una membrana semipermeable.

Relacionados con los conceptos de osmosis y dilisis est el concepto de permeabilidad, que es una propiedad de las membranas y no de las sustancias que difunden. Como membranas pueden actuar capas de diferentes sustancias, como por ejemplo goma, papel pergamino, celofn, gelatina, ferrociariuro de cobre, etc. Segn la capacidad de permitir la difusin, las membranas se clasifican en : a) Permeables: permiten que difundan a travs de ellas todas o casi todas las sustancias. b) Semipermeables o de permeabilidad selectiva, permiten el paso de unas sustancias ms fcilmente que otras, es decir, son impermeables a algunas sustancias y permiten el paso de otras sin dificultad. Un ejemplo en este caso son las membranas biolgicas. c) Impermeables, impiden el paso de sustancias a travs de ellas

DESARROLLO DEL PRCTICO

1- Difusin 1a) En un tubo de ensayo lleno de agua deje caer algunos cristales de MnO4K. Djelo sobre la gradilla y espere aproximadamente 30 minutos. OBSERVE y ESQUEMATICE al comienzo y al trmino de la experiencia. 1b) Llenar un vaso de precipitado de 250 mL con agua hasta unos 2 cm. ms abajo del borde. Luego caliente el vaso hasta alcanzar los 90C, es importante tener la precaucin de no hervir el agua. El otro vaso fue enfriado previamente en el refrigerador por un par de horas. Finalmente adicionar a cada uno de los vasos, lo ms cerca posible de la superficie del agua, tratando de evitar cualquier agitacin y de ser posible al mismo tiempo, 2 mL de tinta china.

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b1) Observe que pasa con la difusin de la tinta en ambos vasos. Mida el tiempo que tarda en difundir completamente la tinta en cada uno de los vasos. Anota sus observaciones y formule una explicacin para este fenmeno en base a ellas. b2).- Explique cmo afecta al fenmeno de difusin las diferentes temperaturas.

2a. Comportamiento de clulas vegetales frente a soluciones hipertnicas: plasmlisis. A una hoja de Egeria densa o epidermis de Remolacha (Beta bulgaris) agregue gotas de solucin de sacarosa 0,5 M. En un borde del cubreobjetos ponga un trozo de toalla nova y en el borde opuesto agregue la solucin hipertnica. De esta manera se extrae el agua haciendo penetrar la solucin a la preparacin. OBSERVE y ESQUEMATICE el protoplasma de las clulas.

2b. Comportamiento de una suspensin de glbulos rojos en medios de igual o menor tonicidad. Para el organismo humano y en general para los mamferos, la presin osmtica de sus clulas es equivalente a la de una solucin de NaCl 0,9%. Esta es por lo tanto una solucin isotnica para las clulas humanas. Experiencia con soluciones hipotnicas: Una solucin de NaCl hipotnica para las clulas humanas es aquella con una concentracin inferior al 0,9%. Para la experiencia rotular 3 tubos de centrfuga: uno para la solucin 0,9% de NaCl, otro para la solucin 0,45% y otro para la solucin 0,22% de NaCl. a) Solucin isotnica: colocar en el primer tubo 8 ml de NaCl 0,9%. b) Solucin hipotnica 0,45%: colocar en el segundo tubo 4 ml de NaCl 0,9% ms 4 ml de agua destilada.

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c) Solucin hipotnica 0,22%: colocar en el tercer tubo 2 ml de NaCl 0,9% ms 6 ml de agua destilada. d) Agregar a cada tubo una gota de sangre oxalatada (o preferiblemente glbulos rojos lavados). Dejar en reposo una hora. e) Observar, esquematizar y analizar los resultados.

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TRABAJO PRCTICO N 6 CITOESQUELETO Y ORGANELOS I. INTRODUCCION. Una de las caractersticas de los organismos es su complejidad estructural, la cual refleja la gran diversidad de funciones que realizan los organismos vivos. Por otro lado, toda la actividad de los organismos parece estar dirigida a la formacin, mantencin, regulacin y perpetuacin de sus estructuras. La clula es la unidad estructural y funcional de los seres vivos, es a este nivel que ocurren procesos tan importantes como la reproduccin y el metabolismo, productos de la actividad coordinada e interdependiente de organelos y complejos macromoleculares como el citoesqueleto. Muchos organismos estn formados por una sola clula; sin embargo, las clulas de los organismos multicelulares presentan especializaciones tanto estructurales como funcionales. Entre las estructuras especializadas presentes en una clula eucaritica podemos encontrar: A. NCLEO Las clulas eucariticas presentan el contenido interno localizado en diferentes compartimientos internos. El compartimiento nuclear que contiene el material gentico es el ms evidente a microscopia ptica, y da lugar al llamado ncleo verdadero, el cual puede presentar diversas formas: esfricos, ovoides, planos, lobulados, etc. Durante la interfase, perodo entre dos divisiones celulares, el ncleo presenta una organizacin tpica: 1.- Envoltura nuclear, llamada tambin membrana nuclear o carioteca, que lo limita y separa del citoplasma. Constituida por una doble membrana que delimita un espacio perinuclear, cada cierta distancia las dos membranas se fusionan y delimitan una abertura denominada complejo de

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poro nuclear, cuya funcin es regular el paso de sustancias entre ncleo y citoplasma. La membrana nuclear externa se contina con la membrana del Retculo endoplasmtico, y al igual que el RE rugoso est tapizada en su superficie externa por ribosomas que sintetizan protenas. En la superficie interna de la carioteca existe un engrosamiento proteico llamado lmina nuclear, que es una capa electrondensa. 2.- Nucleoplasma, este corresponde a una solucin acuosa de protenas, iones y metabolitos que ocupan el espacio existente entre cromatina y los nuclolos. En la cariolinfa estn suspendidos: La cromatina: est constituida por ADN y protenas bsicas, llamadas histonas. Estas se agrupan formando unidades globulares, en torno de las cuales se enrolla una fibra de ADN dando dos vueltas, formando grupos conocidos como nucleosomas, que dan a la cromatina una estructura similar a las cuentas de un collar. Al microscopio electrnico la cromatina se presenta como un conjunto de filamentos dispersos, que se tien dbilmente con colorantes nucleares y se denomina eucromatina. Pero otras zonas se presentan ms compactas, condensadas y se tien con mayor intensidad, esta se denomina heterocromatina. La cromatina se compacta por enrollamiento de los nucleosomas, hasta formar una estructura que recibe el nombre de cromosomas. Segn la relacin cariolinfa y cromatina, el ncleo puede clasificarse en: - Ncleo vesiculoso: mayor cantidad de cariolinfa, con baja densidad ptica. - Ncleo intermedio: regular cantidad de cariolinfa, con densidad ptica media - Ncleo macizo: escasa cantidad de cariolinfa, con gran densidad ptica.

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El nuclolo: es un cuerpo ms o menos esfrico u ovoide, de tamao variable, que no presenta membrana. Est compuesto por ribonucleoprotenas, es decir, ARN asociado a protenas. En el nuclolo se realiza el primer armado de las subunidades de los ribosomas que luego migran al citoplasma, en donde se completar su armado. B. RETCULO ENDOPLASMICO (RE) En un conjunto de membranas derivadas de la envoltura nuclear que se extiende a travs del citoplasma. Dichas membranas delimitan un espacio central denominado lumen; la superficie de la membrana que limita con el lumen se denomina superficie luminal o cisternal y la que limita con el citoplasma, citoplasmtica o citoslica. Estructural y funcionalmente es de dos tipos: rugoso (RER) y liso (REL), ambos presentan continuidad estructural y estn formados por una nica membrana. La cara externa del RER o cara citoplasmtica esta tapizada por mltiples ribosomas, lo que ha llevado a denominarlo rugoso, de manera bsica se le puede definir como una fbrica de glicoprotenas, debido al rol que desempea en este sentido. Las funciones principales del REL son la detoxificacin, sntesis de lpidos y esteroides, por lo tanto, se encuentra muy desarrollado en clulas especializadas. C. COMPLEJO DE GOLGI Estructuralmente est constituido por una serie de sacos aplanados y apilados (cisternas), en torno al cual se disponen una serie de vesculas. En el Golgi se pueden distinguir tres zonas o dominios bien definidos: -Golgi cis o zona de formacin: conjunto membranoso ms cercano al ncleo. A esta zona llegan vesculas del R.E.R. cargadas con glicoprotenas. La fusin de estas vesculas con el Golgi cis incorporar membranas y

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glicoprotenas modificaciones.

este

compartimiento,

las

cuales

sufrirn

diversas

-Golgi medial o zona media: recibe las vesculas del Golgi cis, conteniendo glicoprotenas. En esta zona se producen nuevas glicosilaciones y desglicosilaciones de estas glicoprotenas. -Golgi trans o zona de maduracin: recibe las vesculas provenientes del Golgi medial, las que sern nuevamente modificadas. Desde esta zona se desprenden vesculas que tendrn distintos destinos (otros organelos, membrana plasmtica, etc.) segn un proceso de segregacin determinado por el Complejo de Golgi. En base a sus funciones fundamentales el Aparato de Golgi se podra definir como el centro de destinacin de glicoprotenas de la clula. Es precisamente este organelo el que decide, el destino final de cada una de las glicoprotenas que pasan a travs de sus cisternas. D. MITOCONDRIA Este organelo est constituido por dos unidades de membranas (externa e interna). La membrana externa da la forma al organelo, mientras la interna se pliega formando mltiples crestas, dndole una forma caracterstica a este compartimiento. La funcin principal de la mitocondria es la respiracin celular, para lo cual cuenta con un sistema de macromolculas altamente especializado. A travs de este proceso es capaz de obtener un gran rendimiento til para la clula. Es importante destacar que es un organelo semiautnomo, tiene su propio material gentico, es duplicable, y es capaz de sintetizar la mayor parte de sus protenas. Por ltimo, el nmero de mitocondrias en un tipo celular determinado depender de las necesidades energticas que tengan estas clulas. E. LISOSOMAS

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Son vesculas polimrficas, dado que difieren en estructura y composicin. Estn delimitadas por una unidad de membrana y su contenido est conformado por enzimas hidrolticas o hidrolasas, cuya principal funcin es la degradacin de compuestos orgnicos. Es por ello que a estas estructuras se les atribuye la funcin de digestin, ya sea de elementos que provienen de afuera de la clula (heterofagia) o que estn dentro y pueden ser reutilizados sus componentes (autofagia).

F. PLASTOS Son orgnelos celulares eucariticos, propios de las plantas y algas. Su funcin principal es la produccin y almacenamiento de importantes compuestos qumicos usados por la clula. As, juegan un papel importante en procesos como la fotosntesis, la sntesis de lpidos y aminocidos, determinando el color de frutas y flores, entre otras funciones. Cloroplastos (generalmente en las clulas de plantas y algas). Realizan la fotosntesis. Los cloroplastos son los orgnulos celulares que en los organismos eucariontes fotosintetizadores se ocupan de la fotosntesis. Estn limitados por una envoltura formada por dos membranas concntricas y contienen vesculas, los tilacoides, donde se encuentran organizados los pigmentos y dems molculas que convierten la energa lumnica en energa qumica. Cromoplastos (slo en las clulas de plantas y algas). Sintetizan y almacenan pigmentos. Su presencia en las plantas determina el color rojo, anaranjado o amarillo de algunas frutas, hortalizas y flores. El color de los cromoplastos se debe a la presencia de ciertos pigmentos; como los carotenos, de color rojo y las xantofilas, de color amarillo. Por ejemplo, el tomate y las zanahoria contienen muchos pigmentos carotinoides.

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Leucoplastos: estos plastos son incoloros y se localizan en las clulas vegetales de rganos no expuestos a la luz, tales como races, tubrculos, semillas y rganos que almacenan almidn. G. CITOESQUELETO Formado por una red compleja de tres tipos de estructuras proteicas: los microfilamentos, los filamentos intermedios y los microtbulos. Esta red permite que se lleven a cabo importantes y multifacticas funciones celulares, las cuales implican variadas reorganizaciones, ensamblajes y desensamblajes de los componentes moleculares. Ejemplos al respecto son: desplazamiento celular (cilios y flagelos), movimiento ameboideo, movimientos intracelulares (corrientes citoplasmticas, como la ciclosis en vegetales) y la divisin celular (huso acromtico), todos ellos relacionados con la dinmica celular. No se podra entender el complejo comportamiento y la alta organizacin de las clulas eucariticas, sin considerar el rol que desempea el citoesqueleto en ellas. Los cilios y flagelos son apndices que sobresalen de la superficie celular, constituidos por microtbulos y prolongaciones de la membrana plasmtica, cuya funcin tiene relacin con la locomocin de organismos unicelulares o con el desplazamiento de partculas en la superficie de los tejidos. Presentan diversos tipos de movimiento: ondulante, helicoidal, pendular, etc. Los flagelos son menos numerosos por clula, tienen una longitud de 150 m. En cambio, los cilios son ms abundantes y ms cortos, miden aproximadamente 5-10 m. Ambos se originan a partir de los cuerpos basales y poseen una estructura similar, denominada 9+2, es decir, 9 pares de microtbulos centrales y un par central. II. Objetivos

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-Describir los distintos tipos de ncleos -Relacin del origen del cloroplasto y la mitocondria con la teora endosimbionte -Relacionar los componentes del citoesqueleto con su funcin III. Actividades

1a) Observacin: Morfologa nuclear Material: Ovario de mamfero Tincin: Hematoxilina-eosina o Tricrmico a.- Enfoque la preparacin con aumento menor e individualice folculos (asociacin de clulas germinales y clulas somticas). b.- Con aumento mayor centre su atencin en la clula germinal (ovocito) e identifique citoplasma y ncleo, en este ltimo reconozca: carioteca, nucleoplasma, cromatina y nuclolos. c.- Dibuje y describa lo observado. 1b) Observacin: Morfologa nuclear Material: Frotis de sangre humana Tincin: May-Grunwald-Giemsa a.- Enfoque la preparacin con aumento lupa, pase a aumento menor y ubique las regiones que contienen elementos (clulas) separados. b.- Luego pase gradualmente hasta inmersin, diferencie glbulos rojos (anucleados) y glbulos bancos (nucleados). En estos ltimos reconozca: forma nuclear y posicin del ncleo en la clula. c.- Diferencie por las caractersticas del ncleo (forma, posicin en la clula, densidad ptica y cantidad) los distintos tipos de glbulos blancos d.- Dibuje, rotule y describa los distintos tipos de glbulos blancos en relacin a las caractersticas de sus ncleos.

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2.-Observacin: Cilios Material: Corte transversal de trquea Tincin: Hematoxilina-eosina a.- Enfoque la preparacin con aumento lupa, pase a aumento menor y ubique el lumen de la trquea. Observe el tejido que reviste sta estructura (epitelio) b.- Luego pase a aumento mayor y observe las clulas del epitelio, ponga especial atencin en la superficie apical de las clulas ms altas. c.- Dibuje, rotule y describa lo observado, segn: forma, distribucin, coloracin y clasificacin. 3.- Observacin: Grnulos de almidn (polisacrido). Material: Papa Tincin: Lugol a.- Con un bistur raspe la superficie del pltano, coloque la muestra, extendindola sobre un portaobjeto limpio. b.- Agregue lugol, coloque el cubreobjeto y proceda a observar al microscopio. c.- Con aumento mayor observe las clulas y en su interior estructuras de color morado que corresponden a grnulos de almidn contenidos en los amiloplastos (que corresponden a un tipo de plastidios incoloros o leucoplastos cuya funcin es el almacenamiento de sustancias de reserva). d.- Dibuje, rotule y describa las estructuras reconocidas. 4.- Observacin: cloroplastos Material: hojas de Elodea a.- Seleccione una hoja de Elodea y colquela en un portaobjetos b.- Agregue una gota de agua y coloque el cubraobjetos c.- Observar con objetivo 10X y luego con 40X d.- Dibuje y rotule el cloroplasto e indique si observa movimiento (ciclosis)

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TRABAJO PRCTICO N 7 DIVISIN CELULAR I. INTRODUCCION. As como los seres superiores cumplen con un ciclo de vida en el que nacen, crecen, se reproducen y mueren, las clulas en crecimiento pasan por el llamado Ciclo Celular. ste comprende dos etapas fundamentales, la interfase y la divisin propiamente tal, que ocurre por los procesos de mitosis o meiosis (Fig. 1). La interfase es el perodo ms largo del ciclo celular y corresponde al tiempo que toma una clula entre una divisin mittica y la siguiente, o sea que puede entenderse como un perodo en el cual la clula se prepara para dividirse. Durante este tiempo, la clula aumenta lentamente su tamao y duplica su material gentico en una secuencia ordenada de eventos que pueden subdividirse en tres etapas principales, G1, S y G2. Despus de una divisin celular, las clulas hijas resultantes comienzan la interfase de un nuevo ciclo celular en la etapa G1. Durante esta etapa la clula retoma su actividad biosinttica que durante la mitosis es muy baja, llevndola nuevamente a sus niveles normales. Luego pasa a la fase S. Esta es una etapa de sntesis, en la cual la clula sintetiza DNA y termina cuando el contenido de DNA se ha duplicado y los cromosomas se han replicado. La etapa siguiente es G2, en ella se condensan los cromosomas ya duplicados en espera para la divisin celular.

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Despus de esta serie de etapas la clula se encuentra lista para una nueva divisin, entrando en la fase M (mitosis).

FIGURA 1: Ciclo celular completo.

MITOSIS Durante la mitosis una clula se divide y da origen a dos clulas hijas genticamente iguales entre s. Lo que ocurre con el material gentico es una separacin equitativa de dos conjuntos cromosmicos iguales entre s y al de la clula original. Esto es posible gracias a que en la fase S de la interfase el material gentico y las protenas que constituyen la cromatina han sido duplicados. La mitosis completa de una clula demora aproximadamente una hora, durante la cual ocurren muchos eventos diferentes, los que se han agrupado en 4 etapas:

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1. Profase: Dentro del ncleo la cromatina se condensa para formar los cromosomas. Al principio estos se ven como filamentos largos y finos, pero al trmino de la profase son ms cortos y gruesos, ubicndose cerca de la envoltura nuclear. Los centrolos se han duplicado y se encuentran en polos opuestos de la clula. Finalmente, la envoltura nuclear se rompe y la profase termina. 2. Metafase: Los cromosomas condensados al mximo se ubican en el

centro o ecuador de la clula gracias a la ayuda del huso mittico que es un complejo conjunto de microtbulos que se orientan de polo a polo de la clula cerca de los centrolos. Los microtbulos los cromosomas al insertarse en el cinetocoro de se unen a cada centrmetro.

Durante la metafase cada cromosoma est compuesto por dos cromtidas, cada una de las cuales posee un cinetocoro (Fig. 2).

FIGURA 2: Esquema de un cromosoma metafsico.

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3. Anafase: La caracterstica principal de

de esta etapa es el movimiento

los cromosomas hacia los polos de la clula. Esto ocurre gracias al

acortamiento de los microtbulos del huso mittico. 4. Telofase: Sobre los cromosomas que estn en los polos de la clula se forma la envoltura nuclear. Los cromosomas se condensan y el ncleo aumenta de tamao por hidratacin y descondensacin de la cromatina. El ncleo resultante es esfrico y en l se puede observar el nuclolo. Citodiresis: En clulas animales esta etapa ocurre por un estrangulamiento del sector del citoplasma que se encuentra entre los dos ncleos nuevos gracias a una gran concentracin local de microfilamentos, lo que implica un gasto de energa. En clulas vegetales existe la pared celular, y esta etapa ocurre por la formacin de un tabique entre los dos ncleos nuevos. Este se forma por vesculas del sistema de Golgi, y finalmente se forman las dos membranas plasmticas a cada lado del tabique, quedando completa la divisin celular.

MEIOSIS En todos los ciclos de reproduccin sexual la nueva generacin de individuos se origina por la organismos reproduccin fusin de dos clulas haploides que provienen de los progenitores. sexual. La Estas clulas son los gametos, y se obtienen meiosis implica la produccin de clulas

mediante el proces de Citodiresis que ocurre en todos los organismos con haploides, las que se mantienen como tales hasta el momento de la fecundacin, en el que los gametos se fusionan y el nuevo organismo obtiene un estado diploide. La meiosis ocurre slo en las clulas germinales de las gnadas y da como resultado gametos, ya sean vulos o espermios, segn el sexo del organismo.

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La

meiosis

implica

una

etapa

de

duplicacin original eventos

del a

DNA, partir

y de

dos cada

divisiones celulares sucesivas para formar as cuatro clulas haploides que contienen la mitad del material gentico clula que entra en este proceso. Los ms destacados de la

meiosis son: duplicacin del DNA nuclear, apareamiento de los cromosomas homlogos, dos divisiones celulares sucesivas y, finalmente, la formacin de clulas hijas haploides. Durante protenas este proceso hay una activa transcripcin y sntesis de

celulares, producindose una gran variabilidad gentica que se

obtiene gracias a los fenmenos de crossing-over y permutacin de los cromosomas, lo que asegura una muy baja posibilidad de obtener gametos genticamente adaptarse a iguales. un medio Lo anterior es en una ventaja al momento y otorga de la dinmico constante cambio

individualidad de los organismos. Un ncleo diploide contiene dos versiones muy similares de cada cromosoma, cada una de las cuales proviene de uno de los padres. Estas dos versiones de cada cromosoma son los llamados cromosomas homlogos. Cuando los cromosomas se duplican por replicacin de DNA, las copias del cromosoma replicado en un principio permanecen fuertemente asociadas y se llaman cromtidas hermanas. En una divisin meitica en que las clulas que se forman son haploides, cada clula hija debe contener slo un miembro de cada cromosoma homlogo, el de origen materno o el de origen paterno, obtenindose as slo la mitad del nmero original de cromosomas.

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Despus de la replicacin del DNA cada par de cromosomas duplicados se empareja con su homlogo y forman una estructura llamada bivalente que posee cuatro cromtidas. Cuando la primera divisin celular ocurre, cada clula hija contiene dos copias de uno de los cromosomas homlogos. En la segunda divisin celular, los cromosomas no se duplican; se ubican en el centro de la clula en el huso mittico y las cromtidas hermanas se dividen como en una mitosis normal. La meiosis se divide en varias etapas, stas se nombran de la misma forma que las etapas de la mitosis, pero se les agrega un nmero I o II segn se trate de la primera o segunda divisin celular, as, la meiosis se divide en:

Profase I: esta es la primera etapa de la meiosis y tambin es la de mayor duracin. En ella ocurre el proceso de crossing-over en el que los cromosomas homlogos intercambian parte de su DNA por un proceso denominado recombinacin gentica. Esto cambia el contenido del DNA de los gametos respecto al del organismo progenitor y ocurre cuando los cromosomas homlogos se encuentran muy juntos. Los lugares en los que ocurre recombinacin se llaman quiasmas. La profase est dividida en 5 etapas. En el Leptoteno cada cromosoma se condensa, permaneciendo unido por sus extremos a la envoltura nuclear. Los cromosomas ya se han replicado y consisten en dos cromtidas hermanas que se encuentran muy juntas. En el Cigoteno los cromosomas por homlogos comienzan a aparearse

sus extremos en puntos muy cercanos a la envoltura nuclear. Luego,

como en una especie de cierre, los cromosomas continan aparendose para

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alinearse en toda su extensin, quedado los genes homlogos enfrentados. Esta estructura se llama complejo sinaptonmico (Fig. 4), donde los cromosomas homlogos as apareados son un bivalente que en realidad es una tdrada ya que cada uno de los dos cromosomas est duplicado.

FIGURA 4: Complejo Sinaptonmico. En el Paquiteno, que puede durar varios das, ocurren las recombinaciones en que se intercambia el material gentico de cada cromosoma con su homlogo. En el Diploteno los cromosomas homlogos se desaparean, el complejo sinaptonmico se separados, aunque deshace y los cromosomas a travs de homlogos los quedan En permanecen unidos quiasmas.

esta etapa los cromosomas se descondensan y ocurre sntesis de RNA. En la Diacinesis la sntesis de RNA cesa, los cromosomas se condensan

intensamente y se sueltan de la envoltura nuclear que comienza a desaparecer. Los cromosomas homlogos siguen unidos a travs de los quiasmas en los lugares donde ha ocurrido recombinacin.

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En este punto termina la Profase I y comienzan las etapas de divisin celular propiamente tal: Metafase II: En esta etapa desaparecen los quiasmas. Los centrolos se encuentran duplicados y se mueven hacia los polos de la clula. Se organiza el huso mittico y los cromosomas se ubican por pares homlogos en el centro de la clula, de modo que cada cromosoma de un par homlogo se orienta hacia un polo diferente de la clula, sin importar si es paterno o materno, lo que genera diferentes distribuciones posibles de cromosomas, aumentndose la variabilidad

gentica del proceso. Anafase II: ILos cromosomas migran hacia polos opuestos de la clula, segregndose los cromosomas homlogos en los extremos opuestos de ella, gracias a aldepolimerizacin y polimerizacin de los microtbulos del huso mittico. Telofase II: alrededor de los cromosomas en cada extremos de la clula se reconstituye la envoltura nuclear. La cromatina se descondensa y, casi simultneamente, ocurre la divisin del citoplasma o citodiresis. Despus de la primera divisin cada clula resultante tiene la mitad del nmero de cromosomas original, pero cada cromosoma se encuentra duplicado y compuesto por dos cromtidas hermanas. Ahora comienza la segunda divisin celular, sin que se produzca una nueva duplicacin del DNA. Profase II: la cromatina se condensa nuevamente en cromosomas y la envoltura nuclear desaparece.

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Metafase II: los cromosomas se ubican en el centro de la clula y el huso mittico se une a ellos de modo que cada cromtida hermana se orienta hacia un polo distinto de la clula. Anafase II: cada cromtida hermana migra hacia un polo distinto de la clula. Telofase II: alrededor de los cromosomas en cada polo de la clula se reconstituye la envoltura nuclear, se descondensan los cromosomas y ocurre la divisin del citoplasma. Cada clula resultante despus de la segunda divisin meitica es haploide ya que tiene la mitad de los cromosomas originales de la especie, y cada cromosoma tiene slo una cromtida.

III. ACTIVIDADES Y OBSERVACIONES. a) Observacin de mitosis en meristemas (tincin Feulgen- Fastgreen): El meristema primario de raz de cebolla, es uno de los tejidos mas utilizados para el estudio de la mitosis. Razones: es un material abundante, se realizan preparaciones histolgicas con relativa facilidad, clulas relativamente grandes y por ello fciles de estudiar, posee clulas en activa proliferacin. Observe con aumento menor para ubicar hileras celulares, reconozca

citoplasma y ncleo, figuras mitticas, su coloracin, etc. Cambie a aumento mediano o mayor. Analice la interfase y las diferentes etapas de la mitosis (Profase, metafase, anafase, telofase) presentes en la muestra. Las fibras del huso estn presentes para la metafase, pero pueden verse muy bien en la anafase. El huso est formado por lo menos por tres grupos de fibras (microtbulos). No es posible observar fibras del ster en estos preparados porque las clulas de vegetales superiores carecen de centro celular.

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Dibuje lo observado a aumento mediano y/o mayor (dependiendo cmo se visualice mejor en su preparacin). Haga esquemas de cada etapa (Interfase, Profase, Metafase, Anafase, Telofase), rotule e indique en cada dibujo los cromosomas, cromtidas, centrmeros, placa ecuatorial, pared celular, ncleo y nuclolo. Haga un conteo de 300 clulas, registrando en su Informe el nmero de clulas que estn en cada una de las etapas de la Mitosis y en Interfase. A continuacin, calcule el ndice Mittico (IM) de su muestra utilizando la siguiente frmula: IM = Nmero de clulas en mitosis Nmero total de clulas contadas Registre todos estos datos en su Informe de Prctico. Tabla N1: ETAPA # de Clulas INTERFASE PROFASE METAFASE ANAFASE TELOFASE TOTAL

b) Observacion de preparacin de gametognesis femenina y masculina en tejido ovrico y testicular de Rattus norvegicus (Berkenhout), respectivamente. Identifique en la preparacin observada clulas en distintas etapas de maduracin, describiendo sus caractersticas principales en un dibujo simple, esquemtico y claro.

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TRABAJO PRCTICO N 8 GENTICA I.- INTRODUCCION. Las caractersticas de un organismo proceden de la herencia y de la interaccin de los genes. Los principios de la gentica establecidos por Mendel, Morgan y otros investigadores se aplican, tanto a los seres humanos como a otros microorganismos. De la misma manera que en otros organismos, algunos rasgos humanos son determinados por genes dominantes y otros por genes recesivos. Los rasgos debidos a genes dominantes, generalmente, se encuentran con mayor frecuencia que los que se deben a genes recesivos. Despus de descubrir de nuevo los trabajos de Mendel, los investigadores han encontrado muchos factores que influyen en la herencia y en la expresin de los genes. En algunos casos, los genes estn unidos unos a otros, por estar en el mismo cromosoma. Los factores ambientales pueden alterar los genes y la expresin de un gen puede depender de la presencia o ausencia de otros genes. En este prctico, har un estudio de unas cuantas caractersticas humanas conocidas, para demostrar la herencia Mendeliana.

II. OBJETIVOS. Se estudiarn los siguientes caracteres hereditarios en el hombre: A). Capacidad de percibir el sabor de la Feniltiocarbamida. La feniltiocarbamida (FTC) (Phenylthiocarbamide=PTC) es una sustancia qumica muy amarga que posee una caracterstica excelente para estudios genticos de poblaciones humanas. La gran mayora de las poblaciones gustan el sabor amargo de PTC, en cambio, una escasa proporcin de ella, no acusan

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sabor alguno. En base a esta caracterstica es posible separar a los seres humanos en gustadores y en no gustadores para la PTC. El carcter gustador parece estar determinado por un gen dominante autosmico.

Gen R = Gustador

gen r = No gustador

B). Algunas personas tienen la aptitud de enrollar la lengua en forma de U cuando la sacan de la boca (Figura 1). Esta aptitud, conocida como enrollamiento de la lengua, es causada por un gen dominante E. La gente que no posee este gen, slo puede curvar la lengua ligeramente hacia abajo. Con la ayuda de un compaero de laboratorio determine cul es su caracterstica y antela.

C). Un gen dominante L determina que los lbulos de las orejas estn separados. En algunas personas los lbulos de las orejas se encuentran adheridos directamente a la cabeza (Figura 1). El que estn los lbulos de las orejas adheridos es una condicin homocigota, determinada por un gen recesivo l. Observe los rasgos de las orejas e sus compaeros y anote sus observaciones.

D). Algunas personas pueden separar el dedo pulgar hasta formar un ngulo de unos 90. Esto se llama pulgar en escuadra. Un gen recesivo p determina esta cualidad (Figura 1). Un gen dominante P, que se encuentra en la mayora de las personas evita que esta separacin sea mayor de 45. Determine si usted y sus compaeros tienen esta cualidad y anote sus observaciones.

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E). Algunas personas muestran la caracterstica de que su lnea del pelo baja hasta un punto definido en la mitad de la frente. Esto se conoce como pico de viuda. Este rasgo resulta de la accin de un gen dominante V. El gen recesivo v determina la caracterstica de una lnea continua en el pelo (Figura 1). Determine su fenotipo observaciones. de usted y de sus compaeros y anote sus

F). Note la presencia o ausencia de vello en la falange de los dedos. La presencia de vello se debe al gen dominante D, y la ausencia al gen recesivo d. Determine su fenotipo y el de sus compaeros, y anote sus observaciones.

G). Extienda su mano hacia delante con sus dedos juntos. Su dedo anular es ms largo o ms corto que su dedo ndice?. Determine su fenotipo y el de sus compaeros, y anote sus observaciones.

H). Indique su mano dominante. Determine el nmero de individuos diestros y zurdos y anote el resultado en la tabla.

Prueba para descubrir la ceguera de los colores.

El Daltonismo es una variedad de discromatopsia caracterizada por la ceguera para ciertos colores, especialmente el rojo y el verde. Es un trastorno gentico ligado al sexo, dependiente del cromosoma X. Esta falta de genes para el color es de carcter recesivo, por lo tanto, la ceguera para los colores no aparece mientras otro cromosoma X lleve los genes necesarios para el desarrollo de los respectivos conos receptores del color.

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Como en la especie humana el varn tiene slo un cromosoma X, los tres genes del color deben hallarse en este cromosoma nico para que no sea ciego de colores. Una vez de aproximadamente 50, el cromosoma X carece del gen rojo, y una vez cada 16 carece del gen verde; y raramente carece del gen azul. Esto significa que el 2% de todos los varones son ciegos para el rojo (protanopes) y el 16% son ciegos para el verde (deuteranopes) y que hay un total de un 8% de todas las personas que son ciegas para el rojo-verde. Como a mujer tiene dos cromosomas X, la ceguera para rojo verde es rara en el sexo femenino; slo ocurre en una mujer cada 250 Cuando falta en el ojo un solo grupos de conos receptores de colores el individuo es incapaz de distinguir ciertos colores de otros. Por ejemplo, si faltan los conos rojos, la luz de longitud de onda entre 525 a 625 nm slo puede estimular conos sensibles al verde.

ACTIVIDADES 1) RASGOS MENDELIANOS Forme un grupo de 6 personas y complete el siguiente cuadro de frecuencias. Incluya en su Informe de Practico los datos que se pide a continuacin:

Caracterstica Lbulo de la oreja

Variantes Suelto Fusionado Iguales

Frecuencia %

Relacin dedo Indice-anular

> el ndice > el anular

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Zurdos Modo de escritura Diestros Ambi-diestros

Lnea del pelo

Recta Con entradas

Capacidad para enrollar la lengua Angulo entre dedo ndice y pulgar

En forma de U No puede Angulo agudo Angulo recto Rojo

Ceguera para los colores

Verde No tiene Percibe No percibe Presencia Ausencia

TioUrea

Bello en la falange de los dedos

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2) CARIOTIPO

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Utilizando el material entregado por el profesor, recorte y pegue de manera ordenada el cariotipo y luego interprtelo; determinando el nmero de cromosomas, el sexo y las posibles anormalidades presentes en ste. 3) DETERMINACIN DE GRUPOS SANGUNEOS ABO Divida un portaobjetos en 3 partes, identificando cada parte con las letras A, B y AB. Coloque una gota de los antisueros: anti A, anti B y anti AB en los respectivos sectores. Coloque una gota de sangre en cada sector, mezcle bien y observe aglutinacin. Identifique su grupo sanguneo Indique cules seran sus posibles genotipos Determine los probables grupos sanguneos de sus padres

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