Microbiologa general.

Streptococcus spp.

Aislamiento e identificacin de Streptococcus spp. proveniente de hisopado de garganta. UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA CENTRO UNIVERSITARIO DE LA CIENEGA ALUMNA: Barreras Mndez Gabriela Karina ASESOR: Jairo crdenas Patio.

Introduccin:
El gnero Streptococcus incluye un grupo filogentica y fenotpicamente heterogneo de bacterias que pueden ser frecuentemente encontrados parasitando a humanos y animales. Algunas especies pueden ser patgenas y otras comensales a virulentos que forman parte de la flora normal del tracto respiratorio y tracto genital, colonizando adems piel y membranas mucosas. (1) Las especies del gnero Streptococcus son bacterias anaerobias facultativas esfricas u ovales. Mediante tincin de Gram se pueden observar como cocos Gram-positivos que se encuentran frecuentemente formando parejas o cadenas. Entre otras caractersticas importantes destacan su inmovilidad, carecen de flagelos y no forman esporas, adems de que todas las especies reaccionan negativamente a las pruebas catalasa y oxidasa. (1-2) Las especies del gnero Streptococcus son bacterias relativamente fastidiosas con requerimientos nutricionales que varan segn la especie. La mayora de las especies crecen adecuadamente en medios nutritivos enriquecidos con sangre o suero. Algunas cepas requieren de atmsferas elevadas en CO2 (5-10%), lo cual incrementa el crecimiento y la actividad hemoltica. Luego de 18-24 horas de incubacin a 35-37oC, las colonias aisladas miden menos de 2 m de dimetro, son opacas, blanquecinas, circulares, de bordes definidos y presentan hemlisis variable. Los Streptococos con importancia mdica se pueden dividir en funcin de su accin hemoltica en agar sangre. (1-3) Los Streptococos pueden clasificarse ampliamente de acuerdo por lo menos en tres esquemas. Un esquema lo coloca en divisiones fisiolgicas: pigeno, viridans, lctico y enterococico. En otro se divide segn sus reacciones hemolticas: -hemolticas, cepas que memorizan por completo los eritrocitos en agar sangre alrededor de sus colonias. -hemolticas, produccin de una hemolisis parcial. -hemolticas, no presentan hemolisis. En el tercer esquema se dividen de acuerdo con los carbohidratos serolgicamente activos (sustancia C) en el grupo de Lancefield. (3)

Objetivo:
Con la realizacin de este proyecto se pretende aislar e identificar Streptococcus spp, proveniente de hisopado de garganta, mediante diversas tcnicas microbiolgicas, as como ver la frecuencia con que podemos encontrarlos ya que son parte de la flora bacteriana normal.

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Streptococcus spp.

Metodologa para aislamiento e identificacin de Streptococcus spp proveniente de hisopado de garganta.

La identificacin de un organismo bacteriano puede ser sugerida por: La procedencia de la muestra, su aspecto microscpico., su patrn de crecimiento en medios selectivos, diferenciales, enriquecidos; sus propiedades hemolticas, metablicas y de fermentacin en los diversos medios de cultivo, as como pruebas bioqumicas para identificacin bacteriana.

Material:
Cristalera:
Porta objetos cajas Petri asas tubos de vidrio gradilla perilla pipetas

Reactivo:
Perxido de hidrogeno Reactivo PYR (p-dimetilaminocinnamaldehido al 0,01%).

Discos diferenciales de bacitracina Taxo A" Discos de SXT (trimetoprim-sulfametoxazol)

Medios de cultivo:
Caldo PYR (caldo Todd-Hewitt con 0,01% de L-pirrolidonil-P-naftilamida) Caldo esculina: Placas con agar sangre de carnero. Agar bilis esculina en tubos inclinado (pico de flauta)

Equipo de laboratorio:
Homogeneizador incubadora

Mtodo:
1- El proyecto se inici con la toma de muestra mediante un hisopado de garganta: Procedimiento: a) Bajo visin directa, con la ayuda de un baja lengua, hisopar en la parte posterior y superior de la faringe, lo ms cercano a la nasofaringe, EVITANDO el contacto del hisopo con mejillas, dientes y lengua, cuando se retira el mismo. colocar el hisopo en el tubo con el medio de transporte de Stuart

b)

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Streptococcus spp.

NOTA: transportar la muestra al laboratorio lo antes posible. Si el transporte se retrasa conservar la muestra a temperatura ambiente por 24hrs. 2- La muestra fue sembrada en nuestra placa de agar-sangre por medio de un estriado. 3- El medio de cultivo se incubado durante 24-48 horas a 35-37C. 4- Al retirar el medio de cultivo de la incubadora se observa el crecimiento de nuestro microorganismo, con este se determinaran las caractersticas morfolgicas de sus colonias. 5- Se prosigue con la realizacin de frotis y caractersticas microscpicas. 6- Se seleccionara una colonia para asignarle algunas pruebas bioqumicas. 7- Las pruebas bioqumicas elegidas para streptococcus spp. fueron: catalasa, oxidasa, solubilidad en bilis, PYR, hidrolisis de esculina y resistencia a bacitracina. Metodologa referenciada en: los artculos colonizacin de bacterias potencialmente patgenas en la faringe de adultos sanos y factores de riesgos asociados (Panorama Cuba y Salud 2011), Streptococcus betahemoliticos en la orofaringe de escolares asintomticos de dos instituciones del estado Zulia (Revista de la sociedad Venezolana de Microbiologa). (4-5) tincin de Gram, determinando

Resultados
Tabla 1.1 Morfologa macroscpica de las colonias en agar sangre y microscpicas en tincin de Gram. Morfologa de Streptococcus spp. Macroscpica (agar sangre).

Microscpica (tincin de Gram).

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Streptococcus spp.

Tabla 1.2 Resultados pruebas bioqumicas para identificacin de Streptococcus spp. Pruebas bioqumicas Streptococcus spp

Prueba bioqumica.

Dictamen.

Catalasa

Oxidasa

Solubilidad en bilis

PYR

Hidrolisis de esculina

Resistencia a bacitracina.

Conclucion:

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Bibliografas
1. Bacteriologa Diagnostica. Norman Rojas, Esteban CHaves, Fernando Garca Universidad de costa rica Facultad de microbiologa 2006 0 2. http://www.slideshare.net/Prymer/gua-micro-aplicada 3. http://www.slideshare.net/daniel122/apuntes-bacteriologa-medica-i 4. http://www.panorama.sld.cu/pdf/v7_no1/articulos_originales/colonizacion_d_bacteri as.pdf 5. http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S13155562002000100003&script=sci_arttext 6. diagnostico microbiolgico koneman texto y atlas en color 6 edicin.