Protocolo de muestreo de la vegetacin y los suelos Proyecto CYTED

1) Muestreo de la vegetacin 1.1) Establecimiento de las parcelas Cada grupo debe muestrear un mnimo de 6 parcelas de 30 30 m situadas a lo largo de un gradiente de precipitacin. Aquellos grupos que tengan ms capacidad o que quieran muestrear ms parcelas, pueden muestrear tantas parcelas como deseen. En los casos en los que sea factible pueden utilizarse gradientes adicionales (p. ej. degradacin o herbivora) a los de precipitacin. No obstante, y tal como discutimos en la reunin de San Luis Potos, es muy importante no mezclar gradientes (p. ej. precipitacin y herbivora)! Si bien ser difcil de controlar, hay que evitar que la presin por pastoreo difiera de forma notable entre parcelas situadas a lo largo del gradiente de precipitacin. Las parcelas deben establecerse en zonas de vegetacin abierta y con el mismo tipo de suelo. Lgicamente puede haber cambios en la abundancia de determinados grupos de especies a lo largo del gradiente (p.ej. mayor cobertura de leosas conforme aumente la precipitacin) pero hay que evitar que las parcelas lleguen a estar en zonas de bosque cerrado. En todos los casos las parcelas deben estar en zonas de cobertura vegetal discontinua (menor del 100%). Las parcelas deben establecerse en zonas con orientacin similar (SE-SW en el hemisferio N y NE-NW en el hemisferio sur).

Figura 1. Algunas de las parcelas establecidas en Espaa, sobre formaciones de Stipa tenacissima.

1.2) Muestreo de la vegetacin En cada parcela se establecern 4 transectos de 30 m de longitud, separados 8 m cada uno, segn el esquema presentado en la Figura 2, y se realizarn tres muestreos de vegetacin: A) Muestreo de patches e interpatches con el mtodo de interceptacin de la lnea. B) Muestreo de cobertura y diversidad. C) Muestreo de facilitacin

30 m

8m 30 m

8m

8m

Figura 2. Esquema de los transectos a muestrear dentro de la parcela de 30 x 30 m.

A) Muestreo de patches e interpatches Mediante este muestreo se registran todas aquellas caractersticas del paisaje que contribuyen a interrumpir, desviar o absorber la escorrenta superficial y los materiales transportados, denominados sumideros (ramas secas depositadas en el suelo, arbustos, especies herbceas perennes, etc.). A partir de aqu, se diferencian zonas de ganancia relativa de recursos (sumideros) y zonas de prdida relativa (zonas situadas entre sumideros), y se evala su importancia relativa (consultar el manual del LFA para una descripcin en detalle de este tema). Utilizando el mtodo de interceptacin de la lnea se estimar la cobertura de los distintos tipos de manchas (especies de plantas perennes, acumulaciones de hojarasca y troncos que acumulen) e intermanchas (en principio yo diferenciara nicamente suelo desnudo y afloramientos rocosos), tal como figura en la Figura 3 y vimos en el campo. Cada vez que se intercepta una mancha se estima su anchura (perpendicular al transecto), tal como se muestra en la Figura 4. Recordad que cuando tenemos estructuras en anillo (Fig. 4), la anchura de estas manchas se registra una nica vez. Los datos de este muestreo se introducen en una hoja de clculo que se encuentra en el CD que os pasamos en San Luis Potos (Figura 5), que realiza una serie de clculos descriptivos (cobertura total, cobertura de cada tipo de mancha, anchura media de manchas, n de manchas.) de forma automtica. Para una descripcin en detalle de este muestreo, as como sobre la introduccin de datos en la hoja de Excel, vase el manual del LFA.

Figura 3

Figura 4

Figura 5 B) Muestreo de cobertura y diversidad utilizando cuadrados contiguos de 1.5 m de lado En cada cuadrado, dispuesto a lo largo de cada uno de los transectos muestreados para el muestreo de manchas/intermanchas (Figura 6), se anotar la cobertura de cada especie perenne que aparezca en el cuadrado (en %, de 0 a 100). En total se muestrearn 80 cuadrados por parcela. Tambin se anotarn todas aquellas especies perennes que aparezcan dentro de la parcela de 30 x 30 m pero que no hayan sido muestreadas en los transectos (para as tener una estima de la riqueza especfica total de la parcela).
30 m

30 m

Figura 6

C) Muestreo de facilitacin Este muestreo permitir evaluar la intensidad de la facilitacin de una manera observacional y comparable entre parcelas, de modo que luego se puedan evaluar algunas de las teoras y modelos conceptuales ms comnmente utilizados, y que se evale si existen generalidades a lo largo de los distintos gradientes que proporcionar el proyecto CYTED. Para este muestreo se seleccionarn 25 manchas de vegetacin de las 3 especies dominantes en cada parcela. En cada mancha se evaluar la cobertura (y el nmero de individuos en los casos en que sea posible) de todas las especies perennes que aparecen dentro de cada mancha. Posteriormente se muestrear el mismo rea en una zona de suelo desnudo adyacente localizada al azar (evaluando la cobertura y nmero de individuos de todas las especies perennes que aparezcan), pero situada al menos a 25 cm del borde de la mancha (si la especie es herbcea) o a 50 cm si hemos muestreado una mancha de una especie arbustiva (Figura 7).

Mancha

Claro

Figura 7. Ejemplo de disposicin de las zonas de muestreo en una mancha y claro adyacente. En ocasiones podemos encontrarnos con la situacin presentada en la Figura 8, donde una de las especies forma manchas de gran tamao y no es factible encontrar un rea de suelo desnudo del mismo tamao y forma adyacente. En este caso se muestrearn cuadrados situados en zonas de suelo desnudo adyacente (a unos 50 cm del borde si es arbustiva o 25 cm si es herbcea) hasta que la suma de su superficie sea la misma que la superficie de la mancha. Por ejemplo, si la Mancha 1 de la Figura 8 tiene un rea de 10 m2, muestrearamos un total de 40 cuadrados de 50 x 50 cm situados en zonas de suelo desnudo adyacentes.

Mancha 1

Mancha 2

Claro

Figura 8

2) Muestreo de los suelos 2.1) Establecimiento de las parcelas de muestreo En cada parcela se establecern 10-15 cuadrados de muestreo de 50 x 50 cm situados al azar (10 en el caso de que tengamos una situacin de una especie dominante y suelo desnudo, Figura 7, y 15 en el caso de que tengamos una situacin de dos especies dominantes y suelo desnudo, Figura 8). 5 de los cuadrados se situarn en zonas de suelo desnudo (zonas con cobertura vegetal inferior al 10% de la superficie del cuadrado) y 5 debajo de cada especie dominante (en el caso de arbustos el cuadrado de 50 x 50 se situar debajo de la copa del arbusto, aproximadamente a mitad de camino entre el tronco y el borde de la copa; en el caso de especies herbceas de bajo porte el cuadrado se situar de modo que la mayor parte de su superficie quede cubierta por la vegetacin, Figura 9). En el caso de que haya una vegetacin de grano muy fino, como la que vimos en San Luis Potos, los cuadrados situados en zonas de suelo desnudo deben de tener menos del 30% de cobertura total.

Figura 9. Representacin de dnde ira el cuadrado para el muestreo de los ndices LFA y los suelos en distintos tipos de cubierta vegetal. El cuadrado debe estar en contacto con el suelo en todos los casos.

2.2) Clculo de los ndices LFA Una vez establecidas las parcelas y antes de colectar ningn tipo de suelo, se calcularn los ndices LFA de acuerdo al manual del LFA (ver el CD) y tal como vimos durante la demostracin prctica en San Luis. La combinacin de estos indicadores para obtener los ndices LFA se realizar con una hoja de clculo desarrollada por David Tongway (disponible en el CD, carpeta Data Entry). Los valores de estos ndices se presentan en forma de porcentaje y su valor es inversamente proporcional al estado de deterioro de una determinada funcin del ecosistema. En el manual del LFA se encuentra una descripcin detallada de cmo estimar los indicadores en campo y utilizar posteriormente la hoja de clculo, as como plantillas para tomar los datos en campo. Es aconsejable antes de ir al campo a muestrear hacer alguna prueba con el LFA para coger soltura con la determinacin de los ndices y poder as resolver los problemas/dudas que pudieran aparecer durante los muestreos. 2.3) Recoleccin de suelo para anlisis enzimticos Este muestreo se har preferiblemente durante la estacin seca en todos los cuadrados donde se han estimado los ndices LFA. Despus de estimar los ndices LFA, as como la cobertura de las distintas especies de costra biolgica (en el caso de que las haya; vase el protocolo de Isabel para ms detalles), se recolecta aproximadamente 700 gr de suelo (0-7.5 cm de profundidad) utilizando un muestreador como el que vimos en San Luis Potos (nucleador de hierro con dimetro de 5 cm y profundidad de al menos 20 cm). Se hace una muestra compuesta por cuadrado. Si hay hojarasca superficial sta debe ser retirada previamente a la toma de muestras. Una vez recolectado, el suelo se tamiza a 2 mm y se deja secar en laboratorio al aire. Una vez seco se envan las muestras a la URJC para su anlisis a la siguiente direccin: Fernando T. Maestre Universidad Rey Juan Carlos Departamento de Biologa y Geologa, ESCET Departamental I, Despacho 217 C/ Tulipn s/n, Mstoles, 28933 Espaa Importante: antes de enviar las muestras ponerse en contacto con Fernando Maestre (fernando.maestre@urjc.es) para que desde Espaa nos aseguremos de que no hay problema con la importacin de suelo y os digamos la cantidad exacta de suelo que necesitaremos. En cada muestra se evaluarn los siguientes indicadores de funcin del ecosistema: respiracin edfica, porcentaje de agregados estables, nitrgeno y fsforo totales y las actividades de tres enzimas claves involucradas en los ciclos del carbono (B-glucosidasa), nitrgeno (ureasa) y fsforo (fosfatasa). Si ponemos a punto la metodologa en la URJC (estamos en ello en la actualidad), en estas muestras tambin se evaluar la diversidad microbiana mediante extraccin del DNA del suelo y posterior amplificacin utilizando PCR. 2.4) Recoleccin de suelo para anlisis microbiolgicos y de micorrizas

En cada una de las parcelas donde se ha evaluado el LFA (y donde se ha recolectado el suelo para los anlisis a realizar en Espaa) tomar 3 muestras de suelo (100 g aprox. cada una) entre los 0 y 7.5 cm de profundidad utilizando un muestreador cilndrico metlico semejante al usado en SLP. Si hay hojarasca superficial sta debe ser retirada previo al muestreo. La muestra debe depositarse en una bolsa de papel inmediatamente sin ningn tipo de manipulacin y rotular debidamente. Si la muestra est hmeda, secar al aire antes de enviar definitivamente a Chile. Enviar muestras a: Profesor Lorgio E. Aguilera Departamento de Biologa Universidad de La Serena Ral Bitrn S/N, La Serena Chile Antes de enviar las muestras contactar con Lorgio Aguilera (laguiler@userena.cl) por si hubiera alguna restriccin a la entrada de suelos en Chile desde algn pas concreto. 2.5) Recoleccin de suelo para anlisis de races (opcional) 2.5.1) Objetivo El objetivo de muestrear races en los diferentes sitios geogrficos y regionales es el de evaluar 1) los aspectos relacionados a la estabilidad del suelo (distribucin vertical = en diferentes profundidades y distribucin horizontal = en micrositios sin y con cubierta de plantas) y 2) los aspectos relacionados a la distribucin de almacenes y fuentes de C en suelo de c/ sitio. Los dos aspectos seria interesante de estudiarlos, a lo largo de gradientes de precipitacin y tambin en respuesta a la degradacin de la tierra por sobre pastoreo u otros factores de perturbacin dentro de un nivel de precipitacin. La idea general es la de extraer ncleos de suelo debajo de plantas, de las especies ms abundantes, as como en nterespacios asociado a esta especie. El tipo de muestreo debe ser un poco distinto entre pastizales y matorrales. En el caso de pastizales, el ncleo se debe obtener dentro del macollo de la gramnea dominante y a los 12-15 cm de la base del macollo (y tambin de cualquier otra planta en la vecindad). En el caso de los matorrales, el muestreo se debe realizar bajo el dosel y en zonas sin cubierta de dosel y suelo desnudo. Tarea de cada grupo Extraer los ncleos segn este protocolo y enviar las muestras completas a la siguiente direccin: Elisabeth Huber-Sannwald IPICYT Camino a la Presa San Jos 2055 Col. 4ta Seccin San Luis Potos, C.P. 78216 Mxico Procesamiento de muestras en el IPCIYT

Nosotros extraemos las races y determinamos la biomasa, el contenido de C y quiz tambin el contenido de lignina (como fuente recalcitrante de C). 2.5.2) Sitios En cual parcela o sitio muestrear los ncleos de suelo para la determinacin de races? En cada parcela de 30 x 30 m esta planeado muestrear en 15 parcelas de 50 x 50 cm para examinar la riqueza de costras, cobertura vegetal, etc. (ver protocolo general). Una vez que todas estas variables superficiales y visuales sean medidas y ANTES de colectar las costras biolgicas del suelo, por favor tomar las muestras para la determinacin de las races. Para este muestreo, seleccionar 10 parcelas de 50 x 50 cm donde exista vegetacin e nterespacio. 2.5.3) Extraccin de ncleos de suelo Material: - Nucleador de hierro con dimetro de 5 cm y profundidad de al menos 20 cm - Martillo - Regla - Desarmador - Tijeras - Bolsas gruesas de papel (20 x 10 cm) - Marcador permanente - Cuchara - Cinta masquin o duct - Bolsa grande de plstico Proceso En pastizales: Dentro de la parcela de 50 x 50 cm se selecciona una planta de la especie dominante. Dentro del macollo (centro de la planta) se remueve el material vegetal en un rea de 5 cm de dimetro (dejando la corona), esto facilitar la insercin del nucleador. El nucleador lleva una marca a los 7.5 cm (es la misma profundidad que se pide en el protocolo general de los LFT) y a los 15 cm de la base. El nucleador se inserta con el martillo hasta la marca de 7.5 cm. Es importante sacar el nucleador cuidadosamente para no perder suelo, para esto se recomienda sacar el tubo mediante giros. Es muy importante que no se pierda nada de la muestra porque queremos medir la densidad aparente (peso de suelo por volumen). En caso de que se pierda material (no ms de un 1 cm del ncleo) se puede rescatar este del ahujero con una cuchara. En caso de que se pierda ms material, es recomendable repetir el proceso de nuevo. El ncleo se deposita en una bolsa de papel ya etiquetada, la cual se cierra y guarda en una bolsa de plstico. Posteriormente, el procedimiento se repite para obtener la muestra a los 15 cm. En el caso de los interespacios (suelo desnudo o costra), se mide una distancia de al menos 12-15 cm de la base de un macollo de la especie mas abundante y se procede igual que en el caso de la planta. Tambin se tomaran muestras en las dos profundidades. En matorrales: En este caso se les pide muestrear bajo el dosel (a la mitad entre el tronco y la orilla del dosel). Esta correspondera al muestreo bajo planta, mientras que en el caso de los inter espacios (suelo desnudo) se tomarn muestras en espacios abiertos que se encuentren fuera del dosel (0.5 m) y se procede igual como en el caso anterior.

2.5.4) Tiempo de muestreo Preferentemente despus del tiempo de crecimiento mximo (despus que termina la poca de las lluvias) para alcanzar el mximo de la biomasa de las races. Es importante que las muestras sean secas (ambiente) antes de enviarlas.

2.5.5) Diseo experimental: En cada parcela de 30 x 30 m: Cobertura Profundidades Repeticiones Numero de bolsas 2 2 10 40
PASTIZAL
Bajo
Planta

planta (gramneas / matorrales) e interespacios 0-7.5 cm, 7.5-15 cm

Interespaci

10-15 cm
0-7.5 7.5-

10-15 cm Interespacio

MATORRAL
Bajo dosel En interespacio

Mitad dosel

Mnimo 50 cm fuera del borde del dosel

0-7.5 cm 7.5-15cm