SALIVA

Las glndulas salivales elaboran un jugo comn: la saliva. La composicin de la misma vara en relacin con la estructura secretoria y de una especie a otra. En el ser humano la secrecin salival es producida principalmente por tres pares de glndulas: partidas, submaxilares y sublinguales. Las mismas, denominadas glndulas salivales mayores poseen conductos excretores largos. Dentro de las cavidades bucal y farngea se encuentran, tambin, otras glndulas ms pequeas que contribuyen a la produccin de saliva y se las agrupa como glndulas salivales menores. Definimos saliva como el fluido producido por las glndulas salivales, siendo parte del primer jugo digestivo que se pone en contacto con el alimento. A este ltimo se lo denomina saliva total, este material est representado por la suma de secreciones de las glndulas salivales mayores y menores, como as tambin lquido gingival, que es un transudado seroso. Esta saliva es un lquido turbio ya que posee, adems, partculas en suspensin provenientes del medio bucal, como por ejemplo bacterias, leucocitos, clulas descamadas del epitelio bucal, restos alimenticios, etc. La saliva parcial es el material obtenido a travs de un dispositivo especial colocado en la desembocadura del conducto glandular, lo que posibilita recolectar saliva parotdea o una mezcla de saliva submaxilar y sublingual, sin contaminacin con el medio bucal, por lo tanto es un lquido lmpido y estril. En reposo, las glndulas parotdeas contribuyen con el 25% del fluido, las submaxilares con el 60%, las sublinguales con el 7-8% y las glndulas menores con el 7-8% del total. Debido a que la saliva llega a la boca desde diferentes lugares segn la glndula que la secreta, nunca est bien mezclada, ni an durante la masticacin. Por lo tanto, los diferentes sitios de la boca estn expuestos a diferentes ambientes. La produccin y excrecin salival constituyen una funcin compleja, producto de la interaccin simultnea y sinrgica del sistema nervioso autnomo a travs de sus ramas, parasimptica y simptica. El volumen salival secretado por da es de aproximadamente 1-1,5 litros, la mayor parte es secretado durante la ingesta de comidas ya que en reposo el volumen es de 0,2 - 0,4 ml / min, mientras que el estimulado es mayor que 1 ml / min. Se calcula que en la cavidad oral hay siempre 1ml de saliva que forma una pelcula no mayor de 100 m de espesor que recubre toda la superficie dentaria, lo que facilita el intercambio inico entre la saliva y el esmalte.

Estructura Glandular

La unidad funcional de las glndulas salivales mayores est representada por la sialona, compuesta por acinos y conductos (intercalares, granulares, estriados y excretorios) (figura 1).

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Los conductos de las glndulas salivales cumplen una funcin primordial en el transporte de agua y electrolitos, siendo de poca relevancia su participacin en el aporte cuantitativo de protenas y macromolculas a la saliva.

Figura 1: Componentes de la unidad secretoria salival -Sialona-

Control de la secrecin salival

Las glndulas salivales estn inervadas por nervios de ambas ramas del sistema nervioso autnomo (SNA): parasimptico (SNP) y simptico (SNS). La activacin de los nervios autonmicos es el principal estmulo fisiolgico que produce secrecin de saliva. Los terminales nerviosos secretorios inician la formacin de saliva primaria en el acino, modificndola a travs de la absorcin y excrecin de ciertos iones durante su paso por los conductos. La cantidad y composicin de la saliva, dependen del tipo de estmulo (simptico o parasimptico) y de la intensidad y duracin del mismo. As, cuando se estimula el nervio parasimptico correspondiente o se administra un agente parasimptico, el volumen de secrecin evocado es alto: 6 al 15 % del peso de la glndula por minuto. Por otra parte, el estmulo con

agentes adrenrgicos o de los nervios simpticos de las mismas glndulas, producen un flujo mximo de saliva que alcanza solo al 2-4 % del peso de la glndula por minuto. La saliva evocada por agentes adrenrgicos es ms rica en componentes orgnicos que la inducida por agentes colinrgicos. El alto contenido orgnico de la saliva producida por estmulo simptico se refleja en niveles elevados de amilasa, glicoprotenas y otras macromolculas. Por el contrario, la saliva que se origina en el reflejo parasimptico es siempre ms rica en K+, Ca2+ y en CO3H-. La estimulacin simptica producira menos flujo primario y menor control sobre la composicin de saliva final en su paso por el sistema tubular.

Factores que modifican el flujo y composicin salival

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La velocidad de flujo salival est influenciada por numerosos factores, y tiene un marcado efecto sobre la composicin. Aumenta no solo por estimulacin directa de los receptores del gusto y el olfato sino tambin por otras formas de estimulacin oral, tales como la masticacin y el tratamiento odontolgico. Tambin depende del grado de hidratacin, la posicin corporal, la exposicin a la luz, la estimulacin previa. El mayor flujo salival se produce durante las comidas. La salivacin iniciada por sensores gestatorios, visuales, olfatorios, orofarngeos o esofgicos, mecnicos o trmicos, produce la llamada saliva estimulada. El flujo salival presenta un ritmo circadiano (24 hs) de secrecin, as durante el sueo el flujo es mnimo o ausente. Existen otros factores que afectan tambin la velocidad de flujo: las nuseas (asociada al vmito) causan incremento de la salivacin, mientras que el miedo, la deshidratacin y la anestesia general provocan sequedad bucal. Pavlov observ trabajando con perros que la composicin de saliva variaba segn la naturaleza del estmulo, as la comida seca y la arena provocaron una secrecin profusa y acuosa; la carne induce una secrecin espesa y rica en substancias mucosas. Dietas de alto contenido en hidratos de carbono, elevan el contenido de alfa-amilasa en saliva mixta. Es probable que diferentes estmulos puedan alterar la composicin de la saliva de una glndula en particular sin afectar la velocidad de flujo.

Composicin salival

La saliva es un lquido acuoso ya que el 99 % es agua y menos del 1 % corresponde a material slido. Como hemos visto, la saliva elaborada por las clulas acinares sufre importantes modificaciones en su trayecto por el sistema tubular. Del anlisis de la siguiente tabla de composicin salival podemos deducir que la saliva es un producto activo de elaboracin de las clulas glandulares ya que las concentraciones individuales de sus componentes no guardan relacin alguna con las del plasma. As las concentraciones de sodio y cloruro son menores que las del plasma, en cambio las de fosfatos y potasio son varias veces ms elevadas con respecto a las concentraciones plasmticas. Con respecto al contenido proteico salival adems de ser significativamente menor que el del plasma es cualitativamente diferente al mismo, caracterstica que la distingue de aquellos fluidos que se forman pasivamente a partir del plasma.

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Tabla 1: Composicin de saliva total humana comparada con la sangre

Componente

Saliva completa No estimulada Estimulada 1.0 6.8-7.5 15-50 26 20 1.5-3 0.15-0.2 30-100 4 2-20 1.0 4-8 13-22 280-300 132.0

Suero,

plasma

sangre completa -7.35-7.45 23-32 135-145 3.5-5.5 2-2.5 1-1.5 95-105 1-1.5 10-20 70-100 0.08-0.11 14-40 6500-8200 296.0

Flujo (ml/min) pH Bicarbonato (mM) Sodio (mM) Potasio (mM) Calcio (mM) Magnesio (mM) Cloruro (mM) Fsforo inorg. (mM) Fluoruro (g%) Glucosa (mg%) Amonaco (mg%) Urea (mg%) Protenas (mg%) Osmolaridad (mOsm/kg)

0.011 6.7 5 4-6 22 1.5-4 0.2 15 6 8-25 0.5-1.0 12 20 225-350 87.7

Funciones de la saliva

La saliva desempea un papel importante en: Digestin y fonacin: las mucinas actan como lubricantes en la formacin del bolo alimenticio y en la fonacin. El agua acta como agente disolvente en la percepcin del gusto (degustacin). En el proceso digestivo la saliva tiene un rol secundario debido a que la alfa amilasa salival no alcanza a cumplir su funcin ya que el tiempo que el alimento transcurre en la boca es muy breve. Otra enzima de la saliva es la lipasa lingual que adquiere importancia en el recin nacido, debido a la inmadurez pancretica fisiolgica que presentan. Mantenimiento del equilibrio hdrico: a travs de la sensacin de la llamada boca seca que desencadena el mecanismo de la sed. Otra funcin importante de la saliva es la accin antimicrobiana ya que a pesar de la presencia constante de bacterias, las heridas de la boca raramente se infectan.

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Como ya hemos visto, la saliva total humana contiene factores antimicrobianos, algunos de los cuales son sintetizados en las glndulas salivales y otros llegan a la boca desde la sangre va el fluido gingival. Ejemplos de productos antimicrobianos son Ig A secretoria, peroxidasa salival, y polipptidos ricos en prolina mientras que lisozima, lactoferrina e Ig M pueden originarse tanto en las glndulas salivales como en el fluido gingival. Ig G salival es de origen enteramente crevicular. Adems clulas fagocitarias, principalmente leucocitos polimorfonucleares, dentro de la cavidad oral pueden liberar considerables cantidades de mieloperoxidasa, lisozima y lactoferrina, lo que contribuye al total de protenas antimicrobianas en saliva total. Con excepcin de las inmunoglobulinas, lactoferrinas y mieloperoxidasas, los factores

antimicrobianos salivales no inmunoglobulnicos parecen estar en boca desde nios, cuando el sistema de anticuerpos es an inmaduro. En resumen, la accin antimicrobiana la ejerce de diversos modos: 1. accin fsico-mecnica por barrido de las bacterias de la boca que al llegar al estmago son destruidas por el jugo gstrico. 2. posee inmunoglobulinas (Ig) A, G, M (aunque presentan menor actividad que en el plasma) y ciertos elementos del complemento del plasma. 3. enzimas: lisozima (hidroliza las uniones acetilglucosamina, 1-4 entre el cido N-acetil murmico y N-

de las paredes bacterianas), peroxidasa (reacciona con el peroxido de

hidrgeno producido por el metabolismo bacteriano y se libera oxgeno, letal para las bacterias anaerobicas), lactoferrina (quela Fe, elemento nutritivo esencial para las bacterias). La saliva es primordial en el mantenimiento de la integridad de las mucosas y de las piezas dentarias a travs de la limpieza fsico-mecnica.

Sobre las mucosas, las mucinas y glucoprotenas de la saliva lubrican y protegen. Las glndulas submaxilares (GSM) estn integradas a la red de intercomunicacin neuro-inmunoregulatoria, producen cantidades significativas de factor de crecimiento nervioso (FCN), factor de crecimiento epidrmico (FCE), factor transformante-beta de crecimiento y calicrena, los cules son secretados a la saliva y afectan la inmunidad de los tejidos epiteliales de las mucosas y las terminaciones nerviosas del tracto gastrointestinal. Estos factores desempean un papel

importante en la respuesta inmuno-inflamatoria de las mucosas, en su regeneracin y curacin. Derivados de las GSM como FCN; FCE y calicrena son liberados al torrente sanguneo donde actuaran como inmunoreguladores sistmicos y tambin tendran mayor influencia sobre el sistema neuroendcrino central. Por todo esto las glndulas salivales han sido propuestas como rganos endcrinos.

La saliva es primordial en el mantenimiento e integridad de las piezas dentarias, a travs de sus propiedades buffer o amortiguadora, en la regulacin del ambiente inico para una potencial

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remineralizacin sin precipitacin espontnea, y adems interviene en la maduracin post-eruptiva del esmalte, y en la formacin de la pelcula adquirida sobre la superficie adamantina. Regulacin del pH salival

En los organismos vivos se estn produciendo continuamente cidos orgnicos que son productos finales de reacciones metablicas; esto modifica la concentracin de protones del medio. El pH de los medios biolgicos es una constante fundamental para el mantenimiento de los procesos vitales. La saliva es efectiva en el mantenimiento relativo del pH neutral de la cavidad oral, en la placa bacteriana y en la deglucin en el esfago. Tanto en la cavidad oral como en el esfago la mayor regulacin del pH es durante la ingesta de alimentos slidos y lquidos. El responsable es el bicarbonato salival, cuya concentracin vara directamente con la velocidad de flujo salival. En reposo el contenido de bicarbonato es bajo (tabla 1), entonces los pptidos ricos en histidina y los fosfatos, contribuyen a la accin buffer de la saliva. En la placa bacteriana la produccin de cidos es la secuela natural del catabolismo de carbohidratos por las bacterias. El bicarbonato, el fosfato, y los pptidos ricos en histidina actan directamente como buffers y ellos difunden dentro de la placa. La capacidad "buffer" de la saliva es debida fundamentalmente a 2 parejas inicas: CO3H2 / CO3Hy H2PO4- / HPO42- , en orden de importancia. En la saliva estimulada se incrementa la composicin relativa de las bases de ambos sistemas buffer (CO3H- y HPO42-). Regulacin del ambiente inico

La concentracin de calcio en saliva total es ligeramente menor de la que aparece en plasma. Un 75% se encuentra como calcio libre (inico), otro 15% ligado a protenas y a otras macromolculas salivales y el 10% restante formando parte de fosfato monocido o dicido de calcio, de carbonato cido de calcio, de fosfato cido de calcio dihidratado y de fosfato octaclcico pentahidratado Ca8H2(PO4)6.5H2O (figura 2). La concentracin de las distintas sales clcicas vara con el pH salival pues se transforman unas en otras, aunque siempre sumando el 10 % del calcio salival. A un pH por encima del promedio comienza a predominar la forma de fosfato octaclcico. Los fosfatos presentan una concentracin mayor que en plasma (aproximadamente 10 veces ms). Un 10% aparece como ATP, fosfolpidos, y steres de glucosa, un 60% en formas inicas salinas (excluyendo las sales clcicas), un 10% como pirofosfato y un 20% en las sales clcicas antes descriptas (figura 2). La distribucin de ambos iones en la saliva no es homognea. La concentracin de calcio en la saliva submandibular es significativamente ms alta que en la saliva de la partida, lo que puede ser la razn de la mayor aparicin de clculos en la superficie lingual de los dientes

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anteriores inferiores. Por el contrario el fosfato inorgnico est en una concentracin ms alta en la saliva de la partida que en la submandibular. Es importante sealar que las concentraciones de calcio inico y fosfatos en saliva parotdea no estimulada superan el producto de solubilidad de la hidroxiapatita, y en la saliva estimulada el del fosfato octaclcico y an el del fosfato diclcico (brucita). El calcio y el fsforo salival son por lo tanto potencialmente capaces de precipitar para producir la calcificacin de la placa bacteriana en el proceso de formacin del clculo dental. En saliva mixta encontramos tambin un fosfopptido de 47 aminocidos llamado estaterina, que junto con trazas de pirofosfato evita la formacin de cristales de fosfato clcico en glndulas y conductos salivales, an cuando la saliva est saturada de calcio y fosfato. La

estructura de la estaterina permite interactuar con iones por una parte, y presentar una zona hidrfoba por otra, impidiendo la poliinteraccin inica.
Figura 3: Distribucin de los iones calcio y fosfatos en la saliva

CALCIO
15%
20%

FOSFATOS
10%

10%

10% Unido a protenas y macromolculas Sales clcicas Libre

Esteres orgnicos Pirofosfatos No clcicos Sales clcicas

75%
60%

PELICULA ADQUIRIDA
Introduccin

Cuando se cepillan los dientes con un agente abrasivo es posible remover todo el material orgnico depositado sobre la superficie dental quedando de esta manera expuestos los cristales de hidroxiapatita (HA). Si luego se deja interactuar al diente con la saliva, en pocos minutos se forma un film delgado acelular conocido como pelcula adquirida (PA). Mientras cualquier bacteria se puede unir inespecficamente por interaccin electrosttica a los cristales de HA, la presencia de PA provee una nueva superficie. sta ltima, en funcin de su composicin qumica, va a modificar la adhesin bacteriana tanto cuali como cuantitativamente durante las etapas iniciales de formacin del biofilm de placa bacteriana. La colonizacin inicial de la superficie dentaria es llevada a cabo por un nmero limitado de bacterias, las que, a travs del metabolismo, crecimiento e interacciones entre especies, forman un biofilm que provee el hbitat para el desarrollo de otras especies asociadas a caries y enfermedad
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periodontal. Por lo tanto, la adhesin de las primeras bacterias colonizadoras es un paso fundamental en la patogenia de las mismas. La PA se diferencia de la placa por la ausencia relativa de microorganismos. Est

compuesta principalmente por protenas, glicoprotenas y pptidos propios de la saliva. Sin embargo, no todas las protenas presentes en saliva se encuentran en la PA, ni en las mismas concentraciones, lo que sugiere una adsorcin selectiva sobre las superficies dentarias. La composicin y estructura de la PA presenta variaciones segn la composicin de la saliva, el tipo de dieta, tipo de pieza dentaria, tiempo transcurrido entre limpiezas sucesivas de los dientes, etc. Con respecto a su composicin inorgnica, la PA contiene concentraciones mucho ms altas de calcio y fosfatos que la saliva. Esta pelcula forma una interfase de proteccin entre la superficie dental y el entorno oral, actuando como una barrera de permeabilidad selectiva que regula los procesos de mineralizacin y desmineralizacin, amn de determinar la composicin microbiolgica del biofilm. El mayor conocimiento del mecanismo de formacin del biofilm de placa dental y de los principios moleculares que regulan estos procesos podr conducir al desarrollo de intervenciones que reduzcan y/o modifiquen la colonizacin de bacterias asociadas al desarrollo de caries y enfermedad periodontal. Para determinar su composicin se ha recurrido a modernas tcnicas inmunolgicas, electroforticas y espectroscopa de masa que permitieron el aislamiento in vivo de protenas inmovilizadas en la PA, ya que los mtodos in vitro han arrojado algunos resultados falsos. Composicin orgnica

Estudios in vitro, han mostrado que muchas protenas salivales, como la albmina, amilasa, cistatina, histatina, IgA, IgG, lactoferrina, lactoperoxidasa, lisozima, protenas ricas en prolina (PRP) y estaterinas poseen una alta afinidad por la HA. Sin embargo, como ya mencionamos, an queda por dilucidar si todas estas protenas forman parte de la pelcula in vivo. Las PRP son un conjunto de protenas caracterizadas por la presencia inusualmente elevada de prolina en su secuencia de aminocidos. La concentracin de prolina representa entre un 25 y 40% de su contenido de aminocidos. Tambin es elevada la presencia de glicina y glutamina / cido glutmico. Se clasifican segn su punto isoelctrico (inferior o superior a 7) y los oligosacridos presentes en su estructura. Por lo tanto, hay tres subgrupos denominados PRP cidas, bsicas o glicosiladas. Las acdicas son las que estn relacionadas con la PA. Todas las protenas ricas en prolina cidas que han sido secuenciadas, presentan en su extremo -NH2 terminal un alto contenido de cidos asprtico y glutmico, as como dos fosfatos unidos a serinas que le dan carga negativa.

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cido asprtico

cido glutmico

Serina

La estaterina es una protena mucho ms pequea, rica en prolina, tirosina y glutamina con slo 47 residuos aminoacdicos. Es una protena no glicosilada, que est fosforilada en dos serinas situadas en las posiciones 8 y 22. En su extremo -NH2 terminal tiene algunas secuencias ricas en cido glutmico y asprtico, siendo este extremo el directamente implicado en su unin con la HA. Las histatinas son otra familia de protenas de tamao an menor que las anteriores. Tienen, al igual que las otras protenas, un resto de seril fosfato que se cree que es un factor importante en la alta afinidad que poseen por la HA. La IgA secretoria es parte integrante de la PA e inhibe la adherencia del S. mutans. La proteasa del S. sanguis es capaz de degradar la IgA interfiriendo en su accin antibacteriana. Pero las histatinas y cistatinas de la PA inhiben a las proteasas bacterianas, modulando el efecto antes mencionado. Enzimas relacionadas con la formacin y composicin de la PA

La PA se encuentra en permanente remodelamiento por modificaciones qumicas y enzimticas de las protenas constituyentes. Las enzimas tienen un alto impacto en la formacin, modificacin y actividad biolgica de la PA, ya sea como integrantes de la misma o participando desde el entorno oral. Las fuentes de enzimas pueden ser muy diversas: la secrecin de las glndulas salivales, fluido crevicular y gingival, bacterias, mucosas y clulas epiteliales. Tambin pueden incorporarse a travs de la dieta y de productos de higiene oral. Cuando las protenas se adsorben a una superficie slida sufren una serie de cambios conformacionales en su estructura secundaria y terciaria; por lo tanto cambiarn sus propiedades fsicas y qumicas. De igual modo, cuando se trata de enzimas, al adsorberse a la superficie de la pieza dentaria sufrirn una serie de cambios conformacionales que afectarn su sitio activo. En muchos estudios se han encontrado diferencias tanto en la actividad como en la cintica de enzimas libres y adheridas a la PA (inmovilizadas). Estas enzimas se adhieren en forma selectiva al igual que otras protenas (solo una fraccin de las encontradas en el fluido oral se han detectado en la PA). Algunas presentan actividad enzimtica bacterias.
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beneficiosa para el husped y otras para las

La amilasa y la lisozima son integrantes de la PA; esto explica que se las encuentre en forma activa inmovilizadas en la pelcula. Como ejemplo de interaccin entre una protena constituyente de la PA y una enzima presente en el entorno podemos mencionar la elastasa. Es liberada por los leucocitos del hospedero durante la inflamacin periodontal. Las PRP acdicas presentes en la saliva son suceptibles a la hidrlisis por parte de esta enzima, mientras que las que estn dentro de la PA son resistentes. El producto de esta reaccin (PRP residual) tiene una afinidad reducida por la HA, afectndose de esta forma la colonizacin primaria y por ello se dice que la elastasa tiene un efecto antibacteriano. En cuanto a la neuraminidasa, cataliza la hidrlisis del resto de cido silico de las glicoprotenas (figura 3). Esta enzima es de origen bacteriano est presente en saliva. Se adsorbe al esmalte in vitro conservando su actividad. Antes se pensaba que esta enzima, por ser capaz de clivar el cido silico de las glicoprotenas salivales, aumentaba la afinidad por la HA, pero no hay evidencia de su presencia in vivo en la PA. Sin embargo, en pelculas tratadas con neuraminidasa se reduce la adhesin de S. sanguis y S. mitis, lo que implica que ellos se adhieren a molculas sensibles a esta enzima.

Figura 3: Desnaturalizacin de una sialoprotena elongada por remocin enzimtica de la carga negativa o por neutralizacin a bajo pH. Slo el ltimo proceso es reversible.

Formacin

La formacin de la PA se debe a que algunas protenas, que parecen proceder de la saliva, son adsorbidas a la HA formando una delgada lmina de espesor entre 0,1 y 0,7 m. La pelcula puede aumentar de tamao y llegar a tener un grosor muy elevado en salivas con bajo contenido en fosfato. Algunas de las protenas que aparecen en la pelcula estn all en forma modificada, debido a la accin enzimtica. Esta modificacin puede servir para una mejor unin de la protena a la pelcula y estar relacionada con la posterior unin de las bacterias a la pelcula dental, facilitando la asociacin de determinadas bacterias e impidiendo la unin de otras. En cuanto al mecanismo qumico responsable de la adsorcin podran estar implicadas interacciones electrostticas entre los aminocidos cidos y bsicos de las protenas y los iones que forman parte de la HA. Algunos de los grupos fosfato de los cristales de HA ubicados en la superficie del esmalte se encuentran polarizados lo que confiere carga neta positiva a dicha
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superficie. Como consecuencia de esta diferencia de carga se produce la precipitacin de las protenas salivales sobre la superficie del esmalte y el consiguiente cambio de la carga neta de la superficie, la que resultar entonces negativa. Como ya sealamos, el anlisis de los aminocidos de las protenas relacionadas con estas interacciones no indican la existencia de la gran heterogeneidad que cabra esperar de la deposicin al azar de cualquier tipo de protena salival; por cuanto parece tratarse de la adsorcin selectiva de protenas especficas. Esta pelcula no slo es altamente afn a la HA, sino tambin es insoluble. A medida que las protenas se adsorben sobre la superficie del esmalte ocurren fenmenos de desnaturalizacin que provocan su precipitacin (insolubilizacin), proceso que contribuye a la formacin de la pelcula. El hecho de que las protenas pasen de una fase soluble (saliva) a otra insoluble (pelcula) debe suponer una capacidad de interaccin de las protenas con la pelcula que supere las fuerzas que mantienen a esas protenas en disolucin en la saliva. Este paso podra deberse a alguna transformacin de las protenas que las convierten en insolubles, lo que facilitara su precipitacin sobre la pelcula en crecimiento. La prdida de grupos azcares de las glicoprotenas por accin de enzimas (glicosidasas) bacterianas podran provocarles cambios conformacionales, los cuales a su vez, son capaces de alterar sus propiedades fsico-qumicas con cambios en la solubilidad. Las glicoprotenas son solubles a pH 7,0, sin embargo, si de estas protenas se escinde el cido silico por tratamiento con neuraminidasa, hay un desplazamiento de sus puntos isoelctricos que las tornan menos solubles a pH prximo a la neutralidad. Se puede deducir, por lo tanto, que la insolubilidad se origina en procesos post-secretorios, ya sea antes o despus de la adsorcin, que incluyen adems la formacin de enlaces cruzados (crosslinkings). Los crosslinkings son generados enzimticamente por la transglutaminasa. Esta enzima forma un -glutamil--lisil isopptido entre un residuo de glutamina y uno de lisina de diferentes cadenas polipeptdicas. Se ha encontrado que casi todas las lisinas presentes en las PRP acdicas y estaterinas y algunas de las presentes en las histatinas participan en la formacin de los enlaces cruzados. Por lo tanto, la transglutaminasa oral cataliza puentes de entrecruzamiento entre las protenas predominantes de la pelcula (figura 4). La formacin de estos enlaces permitira tanto a las protenas salivales como a las no-salivales, que no tienen afinidad por la HA, incorporarse a la pelcula.

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Figura 4: Formacin de un puente de entrecruzamiento entre un resto de glutamina y uno de lisina de dos cadenas polipeptdicas.

Reconocimiento y adhesin bacteriana

El reconocimiento de los receptores salivales por parte de los primeros colonizadores representa uno de los primeros pasos en la patognesis de las enfermedades asociadas a placa. Se ha demostrado en trabajos experimentales que si se agrega un cultivo de estreptococos en KCl a una superficie pura de HA, a pH 6.5, se observa una adhesin muy fuerte pero no selectiva de las bacterias a la superficie del diente. Si se realiza una incubacin previa del diente con saliva, no slo se reduce la adhesin bacteriana en un 90%, sino que bacterias con superficies hidrofbicas, como el S. sanguis y S. mitis, se depositan mejor que aquellas con superficies hidroflicas, como S. mutans y S. salivarius. La HA, que a pH 6.5 presenta carga neta positiva, atrae rpidamente a las bacterias, que en su mayora presenta carga neta negativa en la superficie debido al cido teicoico. Cuando se forma la PA, la superficie pasa a tener carga neta negativa. En este momento, la adhesin bacteriana va a depender del balance entre la repulsin electrosttica, las fuerzas de Van der Waals y las interacciones hidrofbicas. Cuando el acercamiento de la bacteria es exitoso, la misma se mantiene en un estado de mnima energa (a 10nm de la superficie). Luego esta unin se estabiliza a travs de material polimrico, apndices bacterianos, o mediante la formacin de puentes de calcio. La adhesin es estimulada por componentes agregantes que posee la saliva. Sin embargo, este ltimo tipo de agregacin promueve la unin de bacterias de la flora normal e impide la adhesin de las patgenas (figura 5). Para facilitar la colonizacin de las superficies dentales, algunos receptores de molculas salivales se exponen una vez que la molcula se adsorbi a la superficie. Algunos de estos componentes han sido identificados como zonas de reconocimiento para la unin de determinadas bacterias a la pelcula dental. Por ejemplo, las PRP son reconocidas por actinomices y estreptococos. Las estaterinas son reconocidas por fusobacterias y actinomices. Los estreptococos
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se unen a la amilasa, la cual interviene en la hidrlisis del almidn dietario que provee glucosa para el metabolismo de la placa. El esmalte, una vez colonizado, a diferencia de otras superficies epiteliales como la lengua o la mucosa oral, es incapaz de desprenderse de la carga bacteriana por descamacin. Por lo tanto, el biofilm quedar adherido a menos que sea desorganizado y removido por fuerzas mecnicas. Muchos microorganismos orales parecen no ser capaces de adherirse de modo directo a los componentes epiteliales, bacterianos o salivales, ni a los polmeros extracelulares o a las superficies dentarias. Aparentemente, estos microorganismos se hallan retenidos en las fosas y fisuras de los dientes, alrededor de los aparatos dentales, en lesiones cariosas en el surco gingival, en bolsas periodontales y en la propia matriz de la placa.

a)

b)

Figura 5: a) Modelo de adherencia bacteriana mediada por las glucoprotenas salivales sobre la pelcula adquirida u otros microorganismos. a) Unin de la bacteria a la PA por interaccin electrosttica; se forma un puente catinico divalente de calcio entre los receptores especficos negativamente cargados de la pared celular bacteriana y los grupos laterales, igualmente cargados, de las glucoprotenas salivales de la PA. b y c) Enlaces de especies bacterianas similares o diferentes bacteriana que carece del adecuado enlace receptor. b) Esquema mediante puentes de calcio. d) Una especie

Funciones

Esta pelcula representa la primera etapa en la formacin de la placa bacteriana. Su estructura favorece y condiciona cuali y cuantitativamente la colonizacin bacteriana de las superficies dentales (figura 5). Sin embargo, actuando como un obstculo para la difusin de sustancias, protege al esmalte de la accin disolvente del cido lctico proveniente de la placa
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dental u otros tipos de cidos como el cido clorhdrico del estmago o el cido ctrico proveniente de la dieta. En experimentos en donde se midi la solubilidad del esmalte sumergido en soluciones de cido lctico, se comprob que la solubilidad era mayor cuando estaba desprovisto de la PA. Adems podra impedir la salida de iones calcio y fosfatos de la zona donde el esmalte est siendo disuelto por accin del cido, favoreciendo la mayor concentracin de los mismos y con ello su reprecipitacin (remineralizacin). Provee proteccin contra la erosin dental, ya que se ha observado una correlacin directa entre el espesor de la PA y el grado de erosin.

PELCULA ADQUIRIDA SUBGINGIVAL

La composicin de la pelcula subgingival es diferente a la supragingival, ya que aquella depende de la composicin del fluido gingival y crevicular (que posee una alta concentracin de protenas sricas) y no de la saliva. La pelcula subgingival puede tambin jugar un rol en la colonizacin bacteriana inicial de la superficie radicular. Albmina e IgG son las principales protenas sricas del fluido gingival. Sin embargo, el orden decreciente de composicin de la pelcula subgingival es albmina, IgA, IgG, e IgM lo que indicara una adsorcin selectiva de las protenas del fluido gingival a la superficie dentaria, al igual que en la PA supragingival. Las propiedades inmunolgicas del fluido gingival se han atribuido al contenido de inmunoglobulinas, que se sabe poseen actividades especficas contra microorganismos presentes en el surco gingival. La presencia de Ig en la pelcula puede ser de importancia para prevenir la recolonizacin de la superfice subgingival de la raz luego del tratamiento periodontal. El estudio de los factores que afectan la formacin de la pelcula subgingival constituyen un tema central en periodoncia, ya que los microorganismos de esta placa directa o indirectamente participan en la inflamacin del periodonto de sostn. Tales inflamaciones pueden contribuir al fracaso de muchos implantes dentales as como en la recuperacin de los procesos que siguen a la terapia periodontal. PELCULA ADQUIRIDA SOBRE PRTESIS COMPLETA

La retencin prottica es la capacidad de la prtesis de resistir las fuerzas que tratan de desalojarla en el mismo sentido de su insercin (arriba que no se caiga y abajo que no se levante). Los principales factores involucrados en la retencin de una prtesis bien adaptada son la fuerza relacionada con la humectacin de la dentadura y de las superficies mucosas y las

caractersticas cohesivas e intermoleculares de la saliva. Las propiedades de humectacin de las bases de las dentaduras son importantes ya que constituyen un ndice de la facilidad con que la saliva se desliza sobre su superficie. Existe una correlacin entre humectacin (alta energa libre) y propiedades adhesivas de las bases de las dentaduras: mejor retencin a mayor humectacin de la
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superficie. Como vemos, la saliva es un componente de gran importancia a la hora de buscar retencin prottica porque est relacionado con la adhesin, capilaridad y cohesin. La pelcula salival es un factor importante en determinar las caractersticas finales de humectacin de los materiales protticos. Si bien tiene un efecto homogeneizador, sus propiedades adhesivas se ven influidas por el tipo de material utilizado (la saliva no produce los mismos componentes energticos sobre diferentes sustratos en la superficie). Las resinas de acrlico foto curado se encuentran entre las ms humectables y dan lugar a una mejor adhesin comparadas con los sustratos Titanio y Cromo-Cobalto.

Finalmente, la siguiente figura resume el papel de la saliva en la ecologa bucal, a nivel de hospedero (diente), microorganismo y medio ambiente (dieta).

PRP Estaterinas Ca y P Glucoprotenas Mucinas

Mucinas Lisozima Lactoferrina Lactoperoxidasa Histatina Aglutinina Cistatina

Inhibe la Remineralizacin desmineralizacin

Lubricacin viscoelasticidad

DIENTE SALIVA MICROORG.

Antibacteriana

Capacidad CO3Hbuffer Fosfatos Protenas Digestin Amilasa Lipasa Proteasa Zinc Gusto

DIETA

Antimictica Ig Mucinas Estatinas

Bolo Mucinas

Antiviral Ig Mucinas Cistatinas

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FLUIDO GINGIVAL
El fluido gingival que emerge entre el diente y el epitelio, en condiciones de salud es un transudado de fluido intersticial del tejido gingival, ultrafiltrado del plasma debido a la existencia de un gradiente osmtico. El resultado es un lquido con menor cantidad de protenas que el plasma. En cambio, en las patologas gingivoperiodontales se produce una reaccin inflamatoria con aumento de la permeabilidad vascular; pasaje de protenas de alto peso molecular de la sangre al tejido, y este lquido se transforma en un verdadero exudado inflamatorio. En condiciones de salud, posee una mezcla compleja de sustancias derivadas del plasma (protenas, inmunoglobulinas, iones, interleuquina 1 , prostaglandinas, enzimas y algunas hormonas), leucocitos, clulas estructurales del periodonto y bacterias orales y, por lo tanto, es rico en protenas. Acta como arrastre mecnico, mantiene la estructura del epitelio de unin, mejora la adhesin del epitelio al diente, y debido a su composicin posee propiedades antimicrobianas e inmunolgicas.

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