INFORME DE LA PRCTICA NO.

5 DETERMINACIN DE HIERRO SRICO Y CAPACIDAD TOTAL DE FIJACIN DE HIERRO OBJETIVO: Conocer las tcnicas colorimtricas tiles para la determinacin de hierro efectuando una de stas, as mismo realizar una determinacin de la capacidad total de fijacin de hierro para determinar la capacidad libre de fijacin y el porcentaje de saturacin, completando as el estudio de la cintica del hierro. GENERALIDADES El hierro es un oligoelemento utilizado en la sntesis de la hemoglobina y otras heminas celulares. Su absorcin intestinal se realiza en el duodeno y en las primeras porciones del yeyuno, y es transportado por la transferrina y almacenado intracelularmente en forma de ferritina. La concentracin normal del hierro contenido en el plasma -unido a la transferrina- es de 80-150 microg/dl en el varn y de 60-140 microg/dl en la mujer. Sus concentraciones en plasma son variables segn el sexo -ya reflejado en los distintos valores de la normalidad-, la edad -ms alto en la pubertad-, el momento del da -mayor por la maana-, el tono vegetativo y el tipo de alimentacin. Obtenemos hierro de la dieta, y, normalmente, el cuerpo absorbe aproximadamente el 10% del hierro que se encuentra en los alimentos. Los lugares de depsito de hierro son los hepatocitos (depsitos parenquimatosos de hierro) y el sistema mononuclear fagoctico (depsitos reticulares de hierro). A partir del descubrimiento de Schade y Caroline por el que caracterizaron a la globulina plasmtica transportadora de Fe+3 (Transferrina (T), Siderofilina, se han desarrollado muchos mtodos para evaluar su concentracin y la capacidad del suero de combinarse con dicho metal, toda vez que uno de los factores limitantes de la eritropoyesis es la cantidad de hierro que llega a la mdula sea va transferrina (T), en especial de su grado de saturacin. Esta protena de transporte de Fe+3, de carcter glicoproteico y 1 globulnico, presenta un marcado polimorfismo gentico, conocindose ms de 21 variantes. Las concentraciones de ferritina srica reflejan los depsitos totales de hierro del organismo, pero ha de tenerse en cuenta que los procesos inflamatorios o las enfermedades causantes de necrosis hepatocelular producen una elevacin de la ferritinemia por encima de los valores que corresponderan a los depsitos del metal. La ferritina srica mide la cantidad de hierro en las clulas corporales y el hierro srico la cantidad de hierro en la sangre, por lo tanto tienen diferentes rangos "normales". El resultado del anlisis de ferritina srica estar expresado en nanogramos por mililitro y el valor normal es: 12 a 300 ng/ml en hombres y 12 a 150 ng/ml en mujeres. El anlisis de hierro srico debera ser realizado por la maana, cuando los niveles de hierro estn ms altos. Para el anlisis de ferritina no hay preferencia por un momento especfico, pero las enfermedades inflamatorias como el asma o la artritis pueden elevar tu nivel de ferritina. MATERIALES Equipo para la determinacin de Hierro (colorimtrico) = kit Ferrocine Kit para CTFH Espectrofotmetro

Tubos Pipetas Gradilla Suero (1.0 mL mnimo)

PROCEDIMIENTO a) Hierro srico

Prepara la serie de tubos indicada en la tabla 1

Mezclar y dejar reposar por 10 min a temperatura ambiente

Realizar los clculos necesarios

Leer las absorbancias A del patrn y la muestra frente al blanco a una 560nm(el color es estable por 30 min)

Blanco 100 L H2O bidestilada 100 L suero problema 100 L estndar 1 gota R2 500 L Rt

Standar

BlancoProblema

Problema

b) apacid C

ad Total de Fijacin de Hierro (CTFH)

Pipetear en los tubos 5mL de muestra y 1mL de sol. saturante (R5)

Mezclar bien e incubar por 10 min a temperatura ambiente.

Aadir a cada tubo 3 dosis de agente precipitante (70mg c/u)

Recoger sobrenadante cuidadosamente y tratar como muestra para determinacin de hierro

Centrifugar 15 min a 3000 r.p.m

Mezclar bien e incubar por 10 min a temperatura ambiente.

Determinar CTFH, CLFH y % de saturacin

PRECAUCIONES EN LA DETERMINACIN Tener el material limpio, libre de detergente e iones RESULTADOS Cintica de He (Ferrozine Colorimtrico) Nombre del paciente: Laura Gonzlez Jimnez Resultados Concentracin de He 116.9 g/dL Valores de Referencia Hombres: 65.0 175.0 g/dL Mujeres: 40.0 130.0 g/dL Hombres: 259.0 400.0 g/dL Mujeres: 220.0 360.0 g/dL Hombres: 200.0 300.0 g/dL Mujeres: 150.0 250.0 g/dL 18.0 48.0 %

Concentracin Total de Fijacin de Hierro (CTFH) Concentracin Libre de Fijacin de Hierro (CLFH) % Saturacin

305.4 g/dL

188.5 g/dL 38.27 %

Clculos Blanco = 0 Estndar = 0.165 B/P = 0.023 P = 0.216

[ Blanco = 0

] Estndar = 0.165 B/P = 0.023 P = 0.191

CONCLUSIN ALTERACIONES PATOLOGICAS Hipersideremia Puede observarse en:

Hemocromatosis idioptica: enfermedad gentica de herencia autosmica recesiva que se caracteriza por un incremento de la absorcin de hierro. Las personas con hemocromatosis absorben el doble de esa cantidad. Una vez absorbido, el exceso de hierro no sale del cuerpo. En su lugar, se almacena en la sinovial (articulaciones) y los rganos importantes como el hgado, el corazn, el cerebro, el pncreas y los pulmones. Durante muchos aos, el hierro se acumula a niveles txicos que pueden daar o incluso destruir un rgano. La sobrecarga de hierro puede causar muchos problemas de salud, con mayor frecuencia una forma de diabetes que es a menudo resistente a tratamiento con insulina. Debido a esto, la hemocromatosis hereditaria es a veces llamada "diabetes bronceada". Aporte exgeno excesivo de hierro, fundamentalmente administracin intramuscular o intravenosa (preparados farmacolgicos, transfusiones repetidas de hemates, etc.). La sobrecarga de hierro por aporte oral de suplementos no se suele producir, ya que cuando los valores de hierro en el organismo son adecuados disminuye su absorcin. Anemias hemolticas y anemias que cursan con hemolisis (megaloblsticas, sideroblsticas,talasemia) y aplasia medular intramedular

Hepatopatias parenquimatosas agudas y crnicas; no se observa en los procesos colestsicos (en las hepatopatas no colestsicas la relacin hierro/cobre es alta, mientras que la relacin se invierte en lascolestsicas). Porfiria hepatocutnea, tarda en algunos casos.

Hiposideremia

Se observa hiposideremia en: 1. Anemia ferropnica. Es la causa ms frecuente y puede originarse por: -Disminucin de la absorcin de hierro (gastrectoma, enfermedad celaca, etc.) -Aumento de la prdidas: hipermenorrea, (ulcus, hernia de hiato, tumores de colon, etc.) sangrado crnico digestivo

-Disminucin marcada de ingesta de hierro (dieta vegetariana estricta) -Aumento de las necesidades (por embarazo y lactancia) 2. Anemia inflamatoria crnica:infecciones, colagenopatas, procesos inflamatorios en general y neoplasias. Se distingue de la anterior por cursar con transferrina baja y ferritina normal o alta. No existe ferropenia real sino una mala utilizacin del hierro por secuestro en el sistema mononuclear fagoctico (antiguamente llamado sistema reticuloendotelial o SRE) 3. Sndrome nefrtico, por prdida renal de transferrina CONCLUSIONES Se logr determinar la concentracin de hierro srico mediante ayuda de kits, as mismo se determin la capacidad total de fijacin de hierro, la capacidad libre de fijacin de hierro y el porcentaje de saturacin en la paciente Laura Gonzlez Jimnez notando que no presenta patologas relacionadas a deficiencia de hierro. Debido a que cada anlisis determina los niveles de hierro desde diferentes fuentes, y por diferentes razones, los resultados anormales tambin tendrn diferentes causas. Por ejemplo, un resultado de ferritina srica superior a lo normal puede deberse a un linfoma de Hodgkin o a una enfermedad heptica. Un resultado de ferritina srica inferior a lo normal puede deberse a un sangrado prolongado del tracto digestivo, mientras que un resultado de hierro srico inferior a lo normal podra ser causado por un embarazo o un sangrado menstrual abundante. UTILIDAD DE LA PRUEBA La prueba sirve para determinar Los anlisis de ferritina y hierro sricos determinan los niveles de hierro de diferentes maneras. El valor de ferritina srica muestra la cantidad de hierro que hay en tu cuerpo, mientras que el valor de hierro srico muestra la cantidad de hierro que hay en tu sangre. El anlisis puede ser vital, ya que el hierro puede acumularse hasta llegar a niveles dainos antes de que aparezcan sntomas. BIBLIOGRAFIA De la Pea Adolfo. Hierro srico. 2009. (En lnea). Consultado el 9 de septiembre de 2013. Disponible en: http://adolfoneda.com/hierro-serico/ Kids Health. Hereditary Hemochromatosis. (En lnea). Consultado el 10 de septiembre de 2013. Disponible en: http://kidshealth.org/parent/general/aches/hh.html#