PROBLEMAS DE BIOQUMICA Bioqumica I Ano Letivo de 2013/2014 Folha 8 ENZIMAS 1.

Qual das seguintes classes no se encontra entre as 6 classes de enzimas mais usuais?
A) B) C) D) E) Hidrolases Ligases Oxidoreductases Polimerases Transferases

2. As enzimas so catalizadores potentes porque: A) So consumidas nas reaes que catalizam. B) So muito especficas e impedem a converso dos produtos de novo nos substratos. C) Levam as reaes sua extenso completa. D) Aumentam as constants de equilbrio das reaes que catalizam. E) Diminuem a energia de ativao das reaes que catalizam. 3. Qual das seguintes frases sobre um catalizador enzimtico correta? A) A sua atividade cataltica independente do pH. B) So geralmente igualmente ativas sobre os ismeros D e L do substrato C) Conseguem aumentar a constante de equilbrio 1000 vezes ou mais. D) Conseguem aumentar a velocidade de reao 1000 vezes ou mais. E) Para funcionar, tem de estar presente na mesma concentrao que o substrato 4. Qual das frases seguintes falsa? A) Uma reao pode no ocorrer a uma velocidade detetvel mesmo para reaes termodinamicamente muito favorveis B) Aps a reao, a enzima volta a estar disponvel para catalizar a reao de novo. C) Para S P, um catalizador desvia o equilbrio para a direita. D) Diminuir a temperature da reao leva a uma diminuio da velocidade da reao E) O substrato liga-se ao centro ativo da enzima 5. A vantagem de se medirem velocidades iniciais V0 que, no incio da reao: A) [ES] pode ser medido com preciso. B) Alteraes em [S] so desprezveis por isso [S] pode ser tratado como constante. C) Alteraes em Km so desprezveis por isso Km pode ser tratado como constante. D) V0 = Vmax. E) Variando [S] no afeta V0. 6. Qual das frases seguintes sobre a variao de V0 vs. [S] para uma enzima que segue a cintica de Michaelis-Mentem falsa? A) Quando [S] aumenta, V0 tambm aumenta B) Para altos valores de [S], a curva torna-se horizontal e interseta o eixo dos y em Km. C) Km agual a [S] para a qual V0 = 1/2 Vmax. D) A forma da curva uma hiprbole E) O eixo dos y exprime velocidade em unidades de concentrao/tempo.

7. Michaelis e Menten assumiram que a velocidade global de uma reao enzimtica pode ser representada na forma de: k1 k2 E+S ES E + P k-1

Usando esta representao, a velocidade de gasto de ES pode escrever-se como:

A) B) C) D) E) k1 ([Et] [ES]) k1 ([Et] [ES])[S] k2 [ES] k-1 [ES] + k2 [ES] k-1 [ES]

8. A condio de estado estacionrio, aplicada cintica enzimtica, implica que: A) Km = Ks (constante de solubilidade) B) A enzima regulada por cofatores. C) O complexo ES complex formado e gasto a velocidades idnticas D) Km equivalente concentrao de substrato E) A velocidade maxima atingida quando a enzima se encontra saturada 9. Os dados seguintes foram obtidos para uma enzima que obedece cintica de Michaelis-Menten: [Substrato] V0 (mol/min) (mmol/L) 217 0.8 325 2 433 4 488 6 647 1,000 O valor de Km para esta enzima aproximadamente igual a: A) 1 mM. B) 1,000 mM. C) 2 mM. D) 4 mM. E) 6 mM. 10. O grfico de Lineweaver-Burk dado por: 1/V0 = Km /(Vmax[S]) + 1/Vmax. Para determiner Km deve-se: A) multiplicar o inverso da abscissa na origem por -1 B) multiplicar o inverso da ordenada na origem por -1 C) considerar o inverso da abcissa na origem D) considerar o inverso da ordenada na origem E) considerar a abcissa para a qual V0 = 1/2 Vmax. 11. Num grfico de l/V vs 1/[S], apresena de um inibidor competitivo vai alterar: A) a forma da curva B) a interseo no eixo de l/[S] C) a interseo no eixo de l/V D) o logaritmo dos valores E) Vmax.

12. Na inibio competitiva, o inibidor: A) Liga-se em diferentes stios da enzima B) Liga-se covalentemente enzima C) Liga-se apenas ao complexo ES D) Liga-se reversivelmente ao centro ativo E) Diminui o valor caracterstico de Vmax da enzima 13. Considere uma reao que pode ocorrer tanto na ausncia como na presena de enzima. Qual o efeito da enzima sobre cada um dos parmetros seguintes: (a) variao de energia livre padro da reao? (b) energia de ativao da reao? (c) velocidade inicial da reao? (d) constante de equilbrio da reao? 14. Escreva a representao da reao enzimtica que serve de base deduo da equao de MichealisMenten. Liste as aproximaes que so feitas na deduo desta equao. 15. Uma determinada enzima possui um resduo de alanina no local onde se liga o substrato. Uma mutao que substitua este resduo por um resduo de glicina no tem qualquer efeito na atividade da enzima, no entanto, uma mutao que troque o resduo de alanina por um resduo de cido glutmico leva perda completa de atividade. D uma possvel explicao para estas observaes. 16. Assumindo que o comportamento da enzima E obedece ao modelo cintico de Michaelis-Menten, represente graficamente: c) [ES] = f ( t ) a) v = f ( [S] ) b) v = f ( [E]0 ) d) [S] = f ( t ) e) [P] = f ( t ) 17. Atendendo cintica de Michaelis-Menten, indique justificando, qual o valor da razo [S]/KM quando a velocidade de uma reao catalisada enzimaticamente 50% da velocidade mxima. 18. a) Os dados cinticos de uma reao enzimtica na presena ou ausncia de inibidores encontram-se registados na Figura. Identifique a curva 0.5 que corresponde a: 0.4 1 i) Sem inibidor; 3 2 0.3 ii) Inibidor anti-competitivo; 4 iii) Inibidor competitivo; 0.2 iv) Inibidor misto (no competitivo). 0.1
v

b) Esboce os grficos de Lineweaver-Burk para cada um dos tipos de inibio.

0 0 5 10 15 20

[S]

19. A tabela apresenta os valores da velocidade inicial de uma reao catalizada enzimaticamente na presena de diferentes concentraes de substrato, na ausncia de inibidor e na sua presena. Com os dados da tabela foram construdos os grficos de v=f([S] e de 1/v=f(1/[S]). [S] (nmol/mL) 2,50 1,25 0,85 0,60 0,50 v (nmol/min) s/ inibidor c/ inibidor 3,75 1,44 2,61 0,99 2,01 0,75 1,62 0,60 1,35 0,51

4,0 3,5 s/ inibidor

2,0 y = 0,7828x + 0,3869

1/v (min/mmol)

v (nmol/min)

3,0 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 0,0

c/ inibidor

1,5

1,0

0,5 y = 0,29x + 0,1506 0,0

0,5

1,0

1,5

2,0

2,5

0,0

0,4

0,8

1,2

1,6

2,0

[S] (nmol/mL)

1/[S] (mL/nmol)

a) Indique os valores de Vmx e de KM para a reao enzimtica na ausncia e na presena do inibidor. Justifique a resposta. b) Indique qual a velocidade da reao na presena de 0,6 x 10-6 mol/L de substrato na ausncia e na presena do inibidor. Justifique a resposta. c) Indique o tipo de inibio. Justifique a resposta. d) Se a quantidade de substrato for de 100 nmol/mL podemos afirmar que, independentemente da presena de inibidor, a enzima atingiu a velocidade mxima? Justifique a resposta. 20. O salicilato inibe a ao cataltica da enzima glutamato desidrogenase que catalisa a reao: + Glutamato + NAD+ + H2O -cetoglutarato + NADH + NH4 a) Determine pela anlise grfica dos dados seguintes se a inibio competitiva ou no competitiva. [Glu] (mM) 1,5 2,0 3,0 4,0 8,0 16,0 mg -cetoglutarato / min. sem salicilato [salicilato] = 40 mM 0,21 0,08 0,25 0,10 0,28 0,12 0,33 0,13 0,44 0,16 0,40 0,18

b) Calcule o KM e Vmx para as duas situaes.