Secretara de Educacin Pblica Subsecretaria de Educacin Media Superior Direccin General de Educacin Tecnolgica Industrial Centro de Bachillerato Tecnolgico

industrial y de servicios No. 137 Gral. Maclovio Herrera Cano

Manual de prcticas de Qumica Clnica

Submdulo.- Procesar Tcnicas del Metabolismo. Sexto Semestre

QFB ANTONIA ZAMANO GARZA Abril 2014. Nuevo Laredo Tamaulipas.

Introduccin

El laboratorio clnico es un ambiente dinmico que est continuamente cambiando para a satisfacer las necesidades de salud pblica. El presente manual ser de mucha utilidad como recurso informativo en la formacin de los alumnos en el rea de Bioqumica Clnica. El aspecto valioso de la informacin es que tiene un enfoque actual de los procesos habituales de laboratorio como la tendencia tecnolgica de la automatizacin, lo que permite enfrentar el reto de manejar pruebas ms sensibles, especficas y efectivas en el monitoreo de la salud y la enfermedad. Adems, la posibilidad de obtener resultados a tiempo y el costo-beneficio que representa.

Es recomendable la introduccin de la terminologa actual, completar la informacin acerca de los organismos y guas de regulacin de las buenas prcticas de laboratorio La elaboracin de ste manual estuvo a cargo de la Q.F.B Rosalinda Velzquez Salgado a travs de su seccin de Bioqumica Aplicada y solo se ha extractado las tcnicas que sern necesarias para los alumnos de sexto semestre de la especialidad de Laboratorista Clnico del CBTis 137.

Criterio para el rechazo de especmenes Para evitar el reporte de resultados falsos, cada laboratorio debe establecer el criterio para el rechazo de especmenes. Un espcimen debe ser rechazado cuando los resultados obtenidos en su anlisis no representan el estado del paciente. La causa ms comn de rechazo de un espcimen se origina por una identificacin inadecuada. Los especmenes deben tener el nombre del paciente y nmero de identificacin tanto en la muestra como en la requisicin. Los especmenes que no son extrados por el personal del laboratorio debern ser cuidadosamente revisados antes de ser aceptados en el laboratorio. En especmenes que requieren manejo especial, las causas ms comunes de rechazo son la colecta y/o transporte inadecuado. Cada laboratorio deber tener una lista de muestras alternativas aceptables para cada prueba; por ejemplo, el manual del laboratorio puede sugerir la colecta de suero para una prueba en particular, pero una muestra de plasma heparinizado puede ser una alternativa aceptable. Si las muestras contienen otros anticoagulantes o preservativos, deben ser rechazadas (aunque sean tiles para otros anlisis). Cuan las muestras se manejen en tubos que contienen anticoagulantes o preservativos, se indicar la proporcin hay entre los mismos. Esto es ms crtico con preservativos en soluciones lquidas, pero puede ocurrir tambin con anticoagulantes en polvo. Los tubos que no tengan la proporcin apropiada no deben ser aceptados para anlisis. Para pruebas que requieren una preparacin especial del paciente y si sta no se llev a cabo, las muestras deben ser rechazadas. Si una prueba es afectada por hemlisis, los especmenes hemolizados deben rechazarse. As mismo, si el resultado de una prueba es afectado por lipemia (y la muestra no puede ser clarificada por ultra centrifugacin antes del anlisis), este resultado de la prueba no deber ser reportado. Aunque muchos mdicos se quejen cuando el laboratorio no les reporta el resultado de las pruebas que solicitaron para sus pacientes, si hay alguna duda acerca de la validez de un resultado este no debe ser reportado. Los resultados errneos pueden conducir al tratamiento inadecuado del paciente.

ETAPA ANALTICA En la fase analtica se realizan las mediciones y observaciones en funcin de los procesos o protocolos que cubre el laboratorio. Cada procedimiento de anlisis describir no slo las mediciones y observaciones implementadas en el laboratorio, sino tambin la verificacin de las caractersticas de ejecucin, que pretende la persona que elabor el procedimiento o el fabricante del sistema analtico. Los procedimientos, materiales de sistema de control, varan segn la especialidad. Algunas veces los valores obtenidos son variables continuas
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(Mtodo cuantitativo), en otros casos las variables son discretas (semicuantitativas y cualitativas), pero en todos los casos, en la fase analtica se debe considerar la medicin u observacin y un procedimiento de control. La seleccin del procedimiento se basa en los criterios de practicabilidad y confiabilidad. Los aspectos de practicabilidad incluyen la educacin y el entrenamiento requerido, disponibilidad de reactivos, los requerimientos instrumentales, el tiempo de ejecucin, el costo y la seguridad.

La etapa o fase analtica en qumica clnica, tambin incluye otros aspectos como son: la calibracin, los estndares de calibracin, los mtodos de medicin, la capacidad de rastrear los resultados para validarlos, los clculos para los resultados, la utilizacin de curvas de medicin, el uso de relaciones tericas para algunas magnitudes, las transformaciones de resultados para hacerlos ms informativos al mdico, el uso de computadoras y analizadores, los procedimientos que permiten monitorear la ejecucin de un procedimiento de medicin con el propsito de una accin correctiva, el uso de materiales o sueros control y la preparacin del mismo, el establecimiento de los lmites de control, la realizacin de grficas de control, la interpretacin de las mismas, el uso de reglas de control, el archivo de todo lo relativo al control de calidad para posteriores requerimientos, entre otros aspectos.

POST-ANALTICA La preservacin de la calidad post-analtica es el proceso para verificar la calidad en todos los procedimientos que se llevan a cabo cuando el reporte sale del laboratorio y queda en manos del mdico o profesional al cuidado de la salud. Adems de utilizar intervalos de referencia correctos, las reas de preservacin de la calidad post-analtica incluyen: Verificacin de los clculos en los reportes finales. Revisin de los resultados de la prueba para detectar posibles errores de trascripcin. Que los reportes sea fciles de leer e interpretar. Procedimientos para informar al mdico de resultados que requieran de atencin inmediata. Vigilar que se reporten en el momento preciso los valores en el expediente de paciente. Verificar que el medico interprete en forma correcta las pruebas de laboratorio.

Mantener una interaccin constante con el personal responsable de la institucin, con el fin de asegurar que el paciente reciba cuidados directos de buena calidad como resultado de las pruebas de laboratorio.

En general, la vigilancia de esta parte de la preservacin de la calidad se realiza de dos maneras. Estas observaciones suelen relacionarse con reportes de laboratorio incorrectos o con que transcurre demasiado tiempo, desde que se solicita la prueba de laboratorio hasta que se reciben los resultados finales. El otro tipo de vigilancia de la calidad en esta rea, se practica mediante la valoracin continua del impacto de los resultados y procedimientos del laboratorio dentro de la institucin en la cual brinda sus servicios.

CONDICIONES DE LA TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA Es necesario que la persona que vaya a tomar la muestra adopte actitud de confianza, auto-seguridad y equilibrio. Conocer y realizar los procedimientos necesarios para minimizar los errores en la toma de muestras. Debe explicar brevemente al paciente las maniobras que vaya a realizar para obtener la mayor colaboracin posible. Debe tranquilizarse al paciente para disminuir el estado de estrs. Revisar que todo el material est listo (tubos rotulados, torundas de algodn, alcohol, ligaduras, jeringa, gradilla, tapones). El paciente y el operador deben estar en posicin confortable y en sitio con buena iluminacin. El paciente debe estar sentado en una silla y debe extender el brazo sobre el borde de una mesa, encima de una toalla desechable, para tener acceso fcil y cmodo a la fosa ante-cubital. Evitar el uso de bancos altos sin respaldo. Es necesario tener en cuenta el tipo de anlisis, el volumen de la muestra y la edad del paciente. En los pacientes obesos las venas que se observan azulosas son demasiado superficiales y pequeas y es mejor no utilizarlas.

CRITERIOS DE LABORATORIO PARA ESPECMENES INACEPTABLES

Las causas ms frecuentes de rechazo de especmenes sanguneos son:

1. Identificacin inadecuada. Cada laboratorio debe determinar la cantidad mnima de informacin del paciente que debe ser incluida en la solicitud de laboratorio y en el recipiente de la muestra. Esta informacin incluye generalmente nombre, direccin, habitacin, nmero de identificacin, sexo, edad. El flebotomista debe verificar visual y verbalmente la identidad del paciente, comparando su nombre con el de la pulsera de identificacin, la prueba requerida y las etiquetas. El tubo y la solicitud de laboratorio deben volverse a controlar para verificar su identidad luego de ser recibidos. Las diferencias entre el nombre de la solicitud del laboratorio y el envase de la muestra es causa de rechazo de sta.

2. Volumen de sangre inadecuado recogido en tubos o jeringas con aditivo. La cantidad de aditivo adicionada a un tubo al vaco presupone que ste se llenar totalmente con sangre. Si se extrae menos sangre de la requerida, la cantidad excesiva de aditivo tiene el potencial de afectar adversamente la exactitud de los resultados de las pruebas. El EDTA y citrato de sodio para hematologa y coagulacin son inaceptables con menos del 100% del llenado del tubo.

3. Utilizacin de tubos de recoleccin inadecuados. En general, el suero es la muestra preferida para la mayora de los anlisis bioqumicos. Los tubos de fluoruro de sodio diseados para la muestra de glucosa son inapropiados para la mayor parte de los otros procedimientos.

4. Hemlisis. La hemlisis puede ser el resultado de una venipuntura difcil o de un manejo impropio del espcimen recolectado. La hemlisis tambin puede resultar de un proceso de la enfermedad que causa la destruccin intravascular de los eritrocitos.

OBJETIVOS Proporcionar resultados de anlisis con exactitud y con precisin, de tal manera que se puedan obtener conclusiones y tomar decisiones basadas en una informacin que tenga niveles aceptables de error. Realizar 20 repeticiones de una muestra control comercial determinando protena o cualquier analito en condiciones de rutina y determinar el coeficiente de variacin que
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debe ser menor a 5%. El analito a evaluar se le informar al alumno antes de la prctica. analizar estadsticamente los resultados obtenidos de la misma muestra para establecer el grado de precisin y exactitud. Determinar las fuentes de variacin analtica ms frecuentes en el trabajo del laboratorio. Manejar e interpretar adecuadamente las cartas control de Levey-Jennings.

METODOS Y PROCEDIMIENTOS ANALITICOS PARA QUIMICA CLINICA.

CIDO RICO Mtodo enzimtico colorimtrico

INTRODUCCIN El cido rico en los mamferos es el metabolito final del catabolismo de las bases pricas y su elevacin est asociada a la gota, es decir, los reumatismos hiperuricmicos. En los pacientes con tal disfuncin, aparecen cristales de cido rico en las articulaciones y en los tendones, lo que origina las manifestaciones reumticas caractersticas. Niveles altos de cido rico estn tambin asociados a patologa renal por retencin de productos nitrogenados, asocindose en estos casos a valores tambin altos de urea y de creatinina.

OBJETIVO Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de cido rico en una muestra biolgica. Establecer los valores de referencia de cido rico y comparar con el valor de nuestra muestra problema analizar. Definir cules son las principales patologas que se presentan si tenemos valores altos o bajos de cido rico en una muestra biolgica.

FUNDAMENTO DEL MTODO El cido rico es oxidado por la uricasa a alantona y perxido de hidrgeno que en presencia de POD y 4-AF y DCPS forma un compuesto rosceo.

Uricasa c. rico + 2H20 + 02 POD 2H202 + 4AF + DCPS Quinona + 4H20 Alantona + CO2 + 2H202

4-AF = 4 aminofenazona DCPS = 2,4,diclorofenol sulfonato

Guardar en refrigeracin a 2-8 C. Estos productos son, solamente, para uso de laboratorio y pruebas "in vitro".

PREPARACIN.- MUESTRA CLNICA

MUESTRA Suero, plasma u orina.

Standard Sol. c. rico 6.0 mg/dL PREPARACION Y ESTABILIDAD Disolver, con agitacin suave, el contenido del vial de enzimas R.2 con un poco de R.1 tampn, una vez disuelto el liofilizado retornar al frasco original de tampn, homogeneizar la solucin. Esta solucin es estable 1 mes a 2-8C o 10 das a temperatura ambiente, protegida de la luz.

PROCEDIMIENTO TECNICA Longitud de onda: . . . . . . . 520 nm (490-550)

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Temperatura : . . . . . . . . . . 25/30/37C Paso de luz : . . . . . . . . . 1 cm paso de luz Ajuste del cero con blanco de reactivo.

Blanco Estndar Muestra Reactivo 1.0 mL

Estndar 25 L

Muestra

25 L 1.0 mL 1.0 mL

Mezclar e incubar durante 5 min a 37C 10 min a temperatura ambiente. Efectuar las lecturas de las densidades pticas del estndar y de la muestra frente al blanco del reactivo. Coloracin estable como mnimo 30 min. Conc. Muestra mg/dL = D.O. Muestra / D.O. Estndar X Conc. estndar

Estndar= 6.0 mg/dL mg/dL x 59 485 = mol/L

Lmite de Seguridad Biolgica Mujeres Suero o plasma mg/dL mmol/L 2.5 - 6.0 148 - 357 3.4 -7.0 202 416 Hombres

Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia, considerando edad, sexo, estado nutricional y dems factores.

CREATININA Mtodo colorimtrico-cintico

INTRODUCCIN La creatinina es un producto final del metabolismo muscular. Se origina a partir de la creatina por prdida de una molcula de agua. A su vez, la creatina se produce por hidrlisis del fosfato de creatina, por accin de la creatin-fosfo-kinasa (CPK), apareciendo como metabolitos de dicha reaccin el fosfato energtico y la creatina. El radical fosfato puede aportar energa directamente por dicha reaccin o a travs de su acoplamiento a una molcula de ADP para formar ATP y posterior hidrlisis por accin de ATPasa. La eliminacin de creatinina en el cuerpo humano tiene lugar casi exclusivamente a travs de la filtracin glomerular, siendo un importante ndice del funcionalismo renal. A diferencia de la urea, la eliminacin de creatinina por la orina no viene afectada por la diuresis, al mismo tiempo que para una misma persona es muy constante su eliminacin diaria con casi independencia de la dieta alimenticia, siendo la masa muscular el factor condicionante ms directo de su excrecin total por da. En resumen, podemos decir que la eliminacin de creatinina en un intervalo de 24 horas es un valor constante, dependiente principalmente de la masa muscular del individuo, y que por otro lado el clculo del aclaramiento de la creatinina ser un parmetro directo del funcionalismo renal.

OBJETIVOS

Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de creatinina en una muestra biolgica. Establecer los valores de referencia de la creatinina y comparar con el valor de nuestra muestra problema a analizar. Definir cules son las principales patologas que se presentan si tenemos valores altos o bajos de creatinina en una muestra biolgica

FUNDAMENT0 DEL MTODO

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La reaccin qumica aplicable para fotometra es la descrita por Jaffe, basada en el color anaranjado que se produce al reaccionar la creatinina con el picrato alcalino. Hay varias substancias en el suero y orina que actan como cromgenos inespecficos, lo que es un problema principalmente para el clculo del aclaramiento. Por este motivo tiene una gran importancia la adecuacin de todas las variables de la reaccin, muy especialmente el pH, con el fin de obtener la mxima sensibilidad para la creatinina y la mnima interferencia de cromgenos. Adaptando la reaccin a una medida cintica, se logra una gran especificidad debido a que la creatinina reacciona con el picrato alcalino con ms rapidez que los cromgenos (metilguanidina, picramato,), por lo que la medida del incremento de color en un breve perodo de tiempo inicial de la reaccin valorarn principalmente creatinina, con poca influencia de los cromgenos inespecficos, por esto es recomendable, de ser posible, la determinacin cintica.

PREPARACIN Suero o plasma heparinizado. La creatinina en suero y plasma tiene una estabilidad de al menos de 24 horas a 2-8C.

EQUIPO Fotmetro termostable a 37C con filtro de 490-510 nm. Centrfuga CONTENIDO DEL EQUIPO Reactivo 1 Ac. pcrico 17.5 mmol/L Reactivo 2 Hidrxido sdico 0.29 mol/L Estndar Sol. Creatinina 2.0 mg/Dl

PREPARACIN Y ESTABILIDAD Los reactivos estn listos para su uso. Son estables a temperatura ambiente hasta la fecha de caducidad indicada en el envase. Mezcla reactiva:

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Mezclar ambos reactivos a partes iguales segn necesidades. Esta mezcla es estable 10 das a temperatura ambiente.

TCNICA Longitud de onda: . . . . . . . 490 nm (490-510) Temperatura : . . . . . . . . . . 25/30/37C Paso de luz : . . . . . . . . . 1 cm paso de luz Ajuste del cero con blanco de reactivo.

Blanco Estndar Muestra Reactivo 2.0 mL

Estndar 200 L

Muestra

200 L 2.0 mL 2.0 mL

Mezclar e incubar 5 min a 37C 10 min a temperatura ambiente. Mezclar y poner en marcha el cronmetro. Anotar la D. ptica a los 30 segundos (E1) y a los 90 segundos (E2). Lectura a 492 nm (490-510)

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UREA MTODO CINTICO "UREASA-GLDH".

INTRODUCCIN Urea y amonaco La concentracin sangunea de amoniaco es superior en los infantes que en los adultos, debido a que el desarrollo de la circulacin heptica se termina despus del nacimiento. La hiperamonemia es una entidad que se presenta con frecuencia debido a defectos congnitos en el ciclo de la urea. El error innato del metabolismo ms comn es la deficiencia en ornitina transcarbamilasa. La hiperalimentacin es una causa mucho ms frecuente de hiperamonemia en infantes. Con frecuencia, se diagnostica el sndrome de Reye por un amoniaco sanguneo elevado en ausencia de otra causa demostrable. Los pacientes adultos muestran elevadas concentraciones de amonaco sanguneo en las etapas terminales de: la cirrosis heptica, la falla heptica y la necrosis del hgado aguda y subaguda. Se presagia el comienzo de la encefalopata heptica por una elevacin en el amonaco sanguneo. Se ha demostrado que la medicin en lquido cefalorraqudeo (LCR) de la glutamina, correlaciona bien con el desarrollo de la encefalopata heptica. Tambin se puede utilizar la medicin de la glutamina en el LCR, para diferenciar la encefalopata heptica de la sptica. Sin embargo, no es comn la medicin de la glutamina en el LCR. La excrecin de amonaco urinario se eleva con la acidosis y se disminuye en la alcalosis, puesto que la formacin de sales de amonio es un mecanismo importante para excretar el exceso de iones hidrgeno. Daos en los tbulos renales distales, tal como ocurre en la falla renal, la glomerulonefritis, el hipercorticoidismo y la enfermedad de Addison, conllevan a una excrecin de amonaco disminuida sin presentar cambios en los niveles sanguneos de amonaco. Puesto que la urea se sintetiza en el hgado, en la enfermedad heptica sin dao en la funcin renal, se presenta nitrgeno ureico srico bajo, aunque la relacin urea a creatinina se puede conservar normal. La elevacin en el nitrgeno ureico srico no implica necesariamente dao renal, puesto que la deshidratacin puede llevar a concentraciones de nitrgeno ureico tan altas como 600 mg/L. En los infantes que reciben una frmula alta en protenas pueden tener niveles de nitrgeno ureico de 250 a 300 mg/L. Naturalmente, enfermedades como la glomerulonefritis aguda, la nefritis crnica, el rin poliqustico y la necrosis renal elevan el nitrgeno ureico.

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OBJETIVOS Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de urea en una muestra biolgica Establecer los valores de referencia de la urea y comparar con el valor de nuestra muestra problema a analizar. Definir cuales son las principales patologas que se presentan si tenemos valores altos o bajos de urea en una muestra biolgica.

FUNDAMENTO DEL MTODO La ureasa cataliza la hidrlisis de la urea dando amonio y CO2. El amonio formado se valora mediante una reaccin enzimtica (GLDH), pasando NADH a NAD+. La disminucin de la absorbancia frente al tiempo es proporcional a la concentracin de urea.

Ureasa Urea + H2O +2H+ 2 NH3 + CO2

GLDH 2NH3 + -cetoglutarato + 2NADH H2O + NAD+ + 2L-glutamato

PREPARACIN MUESTRA CLNICA Suero o plasma heparinizado.

PROCEDIMIENTO.- TCNICA Termperatura: 25/30/37C Longitud de onda: 340 nm. /334 nm Paso de luz: 1 cm Lectura: frente a agua destilada
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Blanco Estndar Muestra Reactivo 1.0 mL

Estndar 10 L

Muestra

10 L 1.0 mL 1.0 mL

Pipetear en un tubo: Muestra o _estndar . . . . . . . . . . . . . . . 0.01 mL Reactivo al uso. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.00 mL Mezclar y anotar la disminucin de extincin entre los 30 y los 90 segundos ( Extincin)

RESULTADOS Clculo Con las diferencias de extincin anotadas, aplicar la siguiente ecuacin:

. Extincin muestra/ . Extincin estndar x conc. estndar = conc. muestra

Factor de conversin : mg/dL x 0.1665 = mmol/L

Linealidad

Lmite de Seguridad Biolgica Suero: de 15 a 45 mg/dL Orina: de 20 a 35 g/24 horas

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METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS GLUCOSA Mtodo enzimtico (GOD-PAD)

INTRODUCCIN Los carbohidratos se definen como aldehdos y cetonas polihidroxlicos (aldosas y cetosas, respectivamente). Los carbohidratos simples como la glucosa se denominan monosacridos. Dos monosacridos ligados por un puente llamado glucosdico forman un disacrido. Ms de dos monosacridos unidos por puentes glucosdicos se denomina polisacrido. Los carbohidratos de la dieta consisten de monosacridos tales como la glucosa, fructosa y galactosa; de disacridos tales como la sacarosa, lactosa y maltosa y de polisacridos tales como el almidn. Las enzimas intestinales convierten a los disacridos y polisacridos en monosacridos.

La principal funcin bioqumica de la glucosa es la de proporcionar energa para los procesos de la vida. El adenosn trifosfato ("ATP") es la fuente de energa universal para las reacciones biolgicas. La oxidacin de la glucosa por las vas glucoltica y del cido ctrico es la fuente principal de energa para la biosntesis del ATP. El sistema para regular los niveles de glucosa sangunea funciona para lograr dos fines. El primero es para almacenar glucosa en exceso en relacin a las necesidades corporales inmediatas en un reservorio compacto (glucgeno) y el segundo es para movilizar la glucosa almacenada de manera que mantenga el nivel de glucosa sangunea. La regulacin de la glucosa sangunea es esencial para mantener al cerebro, cuya fuente energtica primaria es la glucosa, abastecido por una cantidad constante de la misma. La funcin de la insulina es desviar la glucosa extracelular a los sitios de almacenamiento intracelular en la forma de macromolculas (como el glucgeno, lpidos y protenas). Es as que la glucosa es almacenada en tiempos de abundancia para los momentos de necesidad. En respuesta a la baja glucosa en sangre, como en perodos de ayuno, una serie de agentes hiperglucemiantes acta en las vas metablicas intermediarias para formar glucosa a partir de las macromolculas almacenadas. De esta forma las protenas y el glucgeno son metabolizados para formar glucosa-6-fosfato (gluconeognesis), la cual es hidrolizada a glucosa en el hgado y liberada a la sangre para mantener los niveles de glucosa sangunea.

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0BJETIVOS _ Destacar la importancia de la glucosa en el metabolismo humano y su relacin con diversas patologas. _ Determinar la concentracin de glucosa en estado basal y posprandial en una muestra biolgica mediante el mtodo enzimtico colorimtrico.

PREPARACIN MUESTRA CLNICA: _ Suero o plasma venoso. _ La muestra debe recolectarse en ayuno excepto por el agua, durante ocho horas cuando menos antes de la prueba. _ La muestra debe recolectarse en tubo colector de tapn rojo para suero el cual no contiene anticoagulante, o de color lila el cual contiene EDTA anticoagulante para obtener plasma. _ La muestra debe centrifugarse a 3500 rpm durante 5 min para separar el suero y plasma. _ La glucosa en suero o plasma es estable al menos 3 das a 2-8C.

DESARROLLO DE LA PRCTICA: 1. Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Estndar Muestra Muestra Control Reactivo ---1.0mL Estndar 10mL --1.0mL Muestra -10mL -1.0mL Muestra Control --10mL 1.0mL

2. Mezclar e incubar 10 min a 37C 30 min a temperatura ambiente. 3. Leer la absorbancia (A) a 505nm. 4. Coloracin estable 30 minutos a temperatura ambiente.

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Abs. Muestra mg /dL Glucosa = Abs. Estndar x Conc. estndar.

mg/dL x 0.0555 = mmol

Concentracin del estndar: 100 mg/dL.

EXAMEN GENERAL DE ORINA (EGO)

INTRODUCCIN Los anlisis de orina realizados en el laboratorio clnico, puede proporcionar una informacin amplia, variada y til del rin de un individuo y de las enfermedades sistmicas que pueden afectar este rgano excretor. Por medio de este anlisis, es posible elucidar tanto desrdenes estructurales (anatmicos) como desrdenes funcionales (fisiolgicos) del rin y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronstico. La realizacin cuidadosa del examen de orina, por parte del laboratorio, ayuda al diagnstico diferencial de numerosas enfermedades del sistema urinario. Usualmente, los datos de laboratorio obtenidos por medio de este anlisis, se logran sin dolor, dao o tensin para el paciente. Esta es la razn por la cual, la realizacin e interpretacin correcta del anlisis de orina, por parte del laboratorio permanecer siempre como una herramienta esencial de la prctica clnica. En la actualidad, se practican tres tipos de exmenes de orina: anlisis de orina por tira hmeda, empleado generalmente por los mdicos en sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de anlisis hmedo de la orina, comnmente llamado anlisis bsico o rutinario de orina; y citodiagnstico de la orina, que es una evaluacin citolgica especializada del sedimento urinario que correlaciona con los anlisis realizados por medio de la tira reactiva. El anlisis de orina realizado con la tira hmeda es un ensayo de primera etapa para la deteccin y monitoreo de pacientes con anormalidades qumicas. Los pacientes diabticos a menudo monitorean
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permanentemente su propia enfermedad, buscando signos de glucosuria, proteinuria, e infecciones del tracto urinario, mediante pruebas realizadas en casa. El anlisis de orina hmedo o rutinario, proporciona, a costos razonables, un tamizaje adecuado para la deteccin de anormalidades qumicas y morfolgicas presentes en la orina. Este procedimiento se compone de dos partes: 1) un anlisis macroscpico, en el cual se determinan las caractersticas fisicoqumicas (apariencia, gravedad especfica y la medicin de los constituyentes qumicos por medio de la tira), y 2) un examen microscpico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos. Por medio de este simple examen de orina, un uromicroscopista experimentado puede detectar y monitorear muchas entidades que afectan al rin y al tracto urinario inferior. Recientemente, el citodiagnstico de la orina ha ganado aceptacin mdica como un anlisis nuevo, ms sensible en el diagnstico de ciertas patologas renales y del tracto urinario inferior. Como este anlisis requiere mayor inversin de tiempo debido a la preparacin de coloraciones, debe reservarse para pacientes sintomticos con enfermedades renales, del tracto urinario inferior, o neoplasias.

OBJETIVOS _ Establecer el mtodo adecuado de recoleccin de especimenes de orina para un anlisis especfico. _ Discutir las propiedades fsicas ms importantes de la orina y sus relaciones con la enfermedad. _ Identificar los constituyentes qumicos ms importantes de la orina, como cuantificarlos y como confirmar su presencia. _ Describir mtodos adecuados para estandarizacin de los especmenes de orina y de los hallazgos microscpicos ms comunes.

FUNDAMENTO El anlisis de orina rutinario, se basa en un procedimiento que se compone de dos partes: 1) un anlisis macroscpico, en el cual se determinan las caractersticas fisicoqumicas (apariencia, gravedad especfica y la medicin de los constituyentes qumicos por medio de la tira como protenas, glucosa, cetonas, pH), y 2) un examen microscpico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos.
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PREPARACIN MUESTRA CLNICA El cuidado en la recoleccin de la orina y su entrega rpida en el laboratorio, son cruciales para obtener una informacin ptima. La orina debe ser colectada en un recipiente limpio, estril, que tenga un cierre seguro para prevenir posibles derramamientos, evaporacin o contaminacin. Estos recipientes deben rotularse con el nombre del paciente, fecha y hora de recoleccin. Para que los datos del uroanlisis sean precisos, es esencial que la orina sea examinada dentro de las dos horas siguientes a su recoleccin o preservada de alguna manera, usualmente por refrigeracin (2 a 8 C). Se pueden usar fijadores o preservativos adecuados, siempre y cuando se entiendan claramente sus efectos sobre la orina y sobre los ensayos en ella realizados. Si la orina es recolectada sin preservativos y permanece a temperatura ambiente se empezar a descomponer. Los preservativos actan impidiendo los cambios qumicos asociados a la descomposicin y previniendo el crecimiento y metabolismo de los microorganismos. El anlisis de orina proporciona informacin, para la determinacin, diagnstico diferencial y valoracin de las alteraciones renales. El examen general de orina consta en tres fases:

1. examen fsico, en el que se evala el aspecto de la orina (color y transparencia ) 2. examen qumico, que evala el estado de 9 componentes con utilidad clnica para valorar estados de salud y de enfermedad. 3. examen microscpico, que identifica y cuenta el tipo de clulas, cilindros, cristales, y otros componentes (bacterias, moco) que podran estar presentes en orina.

Bibliografa. Manual de prcticas de Bioqumica Clnica. UNAM. 2009.

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