Los virus se multiplican solamente en clulas vivas, ya que estas le proporcionan energa y la maquinara para la sntesis.

Periodo eclipse: Se da despus de la interaccin con las clulas hospedadoras, donde el virn se desintegra y pierde su capacidad infecciosa. Tambin es reconocida como la fase de mayor sntesis de estructuras virales.

MULTIPLICACIN VIRAL
Estas series de sucesos se describe como repuesta productiva o ltica. Otro relacin muy distinta con la clula husped, en el cual no se producen nuevos virus, la clula sobrevive y se divide y el material gentico viral persiste de forma indefinida en estado de latencia, lo que se denomina como respuesta no productiva o lisogenia en caso de bacterifagos y ciertas veces se vincula con transformaciones oncgena por virus animales.

MULTIPLICACIN VIRAL
Los virus que pueden penetrar en relacin productiva se denominan virus l lticos o virulentos. Los virus templados son aquellos que pueden establecer una relacin productiva o no productiva con sus clulas husped.

Se lleva a cabo la multiplicacin de las partculas virales en el interior de una clula hospedadora.

PASOS DE LA REPLICACION VIRAL

1. Adsorcin 2. Penetracin

Los virus son patgenos intracelulares obligados, lo que quiere decir que requieren de:
sustratos, energa y maquinaria bioqumica celular

3. Decapsidacin 4. Transcripcin 5. Traduccin 6. Replicacin 7. Ensamblaje 8. Liberacin

Para la
replicacin de su genoma sntesis de sus protenas

El primer paso en la infeccin viral es la adsorcin a la membrana de la clula susceptible por medio de la adhesin de ligandos virales (protenas de la capside o glucoprotenas de las espculas, por ejemplo a receptores superficiales de la clula). La distribucin en el cuerpo del hospedador de ciertos tipos de receptores celulares explica el tropismo tisular y de hospedador de los virus. Los tejidos y clulas que carecen de receptores especficos de virus determinados no son infectados por dichos viriones. La naturaleza de los receptores es variable y ciertos virus pueden tener ms de un tipo de receptor.

ADSORCION VIRAL
Unin ligando-receptor Altamente especfica (rango husped y tropismo viral) Receptores celulares son protenas o glicoprotenas que tienen importantes funciones biolgicas Proceso reversible Independiente de la temperatura Cambios pH y fuerza inica alteran proceso Puede inhibirse por anticuerpos antivirales (neutralizacin) o anticuerpos antireceptor

ADSORCION

ADSORCION

PRIMER PASO DE LA INFECCIN VIRAL REQUIERE PROTEINA DE UNION VIRAL RECEPTORES CELULARES LOS VIRUS NO TIENEN LA CAPACIDAD DE LOCOMOCION POR LO TANTO LA COLISION ES TAN SOLO PROCESO ALEATORIO DETERMINADO POR DIFUSION.

Los picos virales y las colas de los fagos llevan protenas de unin. La adsorcin se incrementa por la presencia de protenas mltiples de unin y protenas receptoras. Un tipo especifico de virus es capaz de infectar solo una gama limitada de tipos de clulas denominada gama de hu huspedes, las diferencias en la gama de huspedes y tropismo de tejidos se deben a la presencia o ausencia de receptores celulares ( incapacidad del virus para infectar). Los anticuerpos neutralizantes a menudo son especficos para las protenas de unin.

Todo el virin es transportado a travs de la membrana citoplasmtica.

MECANISMOS -Penetracin directa -Endocitosis (Viropexia). Usado por virus desnudos. -Fusin De la envoltura viral con m.citoplasmtica celular liberando nucleocapside al citoplasma. De envoltura viral con m. endosomica liberando nucleo capside al citoplasma

ENDOCITOSIS: El virus ingresa en vacuolas intracelulares. Este es probablemente el mecanismo de ingreso ms comn en los virus. No se necesita de la presencia de protenas virales especficas -excepto de aquellas involucradas en la unin al receptor- pero si es necesaria la formacin de vesculas endocticas en la membrana celular y la posterior internalizacin de estas. Este mecanismo involucra un cambio de pH en el endosoma para liberar posteriormente el genoma del virus dentro del citoplasma.

FUSIN: Slo ocurre con los virus envueltos. En este proceso ocurre una fusin de la envoltura viral con la membrana celular, ya sea directamente en la superficie celular o en una vescula citoplasmtica luego de la endocitosis. La fusin requiere de la presencia de una protena de fusin especfica en la envoltura del virus -por ejemplo la hemaglutinina en el virus de la influenza o las glucoprotenas de transmembrana en los retrovirus-. Estas protenas promueven la unin de las membranas del virus y de la clula, esto resulta en la liberacin de la nucleocpside directamente en el citoplasma. Este proceso no es dependiente pH.

Los virus se desmantelan ( pierden su cubierta) antes de replicarse, esto puede producirse de forma simultanea con la entrada o bien en una serie de pasos, por ultimo la nucleocpside debe transportarse al compartimiento de la clula donde tiene lugar la trascripcin y replica.

FORMAS: FUSION CON LA MEMBRANA PLASMATICA O FUSION DIRECTA. ENTRADA VIA ENDOSOMAS O VIROPEXIS. Las cpside del bacterifago se pierden y solo el genoma viral penetra a la clula husped, los fagos con cola se unen mediante las fibras de la cola y el DNA se inyecta a travs de ella.
Herpes virus, paramyxovirus, VIH

Fusin Directa

Viropexis o Endocitosis LLAMADO

VIROPEXIS / ENDOCITOSIS / PINOCITOSIS Los viriones adsorbidos quedan rodeados de la membrana plasmtica, llamada vescula endosomal. Los receptores superficiales se reciclan de modo subsecuente hacia la membrana plasmtica y la vescula endosomal se acidifica mediante proceso celular normal, este PH bajo propicia una fusin de las dos membranas y liberacin de la nucleocpside hacia el citoplasma.

Entra directamente a travs de la membrana

from Schaechter et al, Mechanisms of Microbial Disease, 3rd ed, 1998

 El Endosoma acidificado libera la nucleocpside hacia el citoplasma, las protenas de la cpside viral exponen su dominios hidrofobicos en el entorno de bajo PH del endosoma.

PENETRACIN

En este paso la cpside es parcial o totalmente removida dejando expuesto el genoma viral, generalmente en forma de complejo nucleoproteico. Este paso es uno de los estados de la replicacin viral que menos ha sido investigado hasta el momento, por lo tanto la informacin disponible es relativamente escasa. La remocin de la envoltura viral que ocurre durante la fusin de las membranas, forma parte de este proceso de liberacin del genoma. La fusin entre las envolturas virales y las membranas endosmicas se produce por la accin de protenas virales de fusin.

DESNUDAMIENTO O DECAPSIDACIN

Decapsidacin: -Capside viral es degradada -Se produce la transcripcin y traduccin del genoma viaral

ROTURA DE LA CUBIERTA PARA LIBERAR EL GENOMA

NECESITA HACER DISPONIBLE EL GENOMA CUANDO COMIENZA EL DESNUDAMIENTO, ENTRA EN LA FASE DE ECLIPSE LA FASE ECLIPSE DURA HASTA QUE SE FORME LA PRIMERA PARTICULA VIRAL

PERDIDA DE ENVOLTURA
Es en forma simultnea o poco despus de la penetracin. Es la separacin fsica del cido nucleico viral y puede liberarse de forma libre o como nucleocpside. Para la perdida de envoltura es necesario que la desintegre el endosoma, perdiendo as su infectividad.

El virus debe garantizar la sntesis de dos tipos de macromolculas: protenas virales y cidos nucleicos virales. Aunque los virus con membrana deben incluir lpidos en su estructura, su sntesis no es especial, pues los membranas virales derivan directamente de membranas celulares. Muchos virus tambin tienen la capacidad de modificar el patrn de expresin tanto de cidos nucleicos como de protenas celulares.

REPLICACI REPLICACIN VIRAL

Difieren segn ADN O ARN - VIRUS CON ADN : S e multiplican en el NCLEO de la clula Dependen del ARN polimerasa celular -VIRUS CON ARN: (pocas excepciones) Se multiplican en el CITOPLASMA Para la expresin exitosa debe transcribirse un mRNA especfico a partir de cido nucleico viral. Algunos virus portan polimerasa de RNA para la sntesis de mRNA, llamados virus de cadena negativa, por que su genoma de RNA monocatenario es complementario al mRNA. Las protenas virales se sintetizan poco despus de la infeccin y las tardas son etapas avanzadas de la infeccin, despus de la sntesis de DNA viral. Los RNA se expresan al mismo tiempo.

Los DNA virus se replican en el ncleo, utilizando el DNA de la clula hospedadora, la polimerasa de RNA y el procesamiento de enzimas. La variacin ms amplia en las estrategias de expresin gentica se encuentra entre los virus que contienen RNA.

Es el proceso de copia de un gen o fragmento de DNA utilizando ribonucletidos y originndose diferentes tipos de RNA. La transcripcin constituye la primera etapa que tiene lugar en el proceso de la expresin gentica. La transcripcin consiste, como su nombre indica, en copiar la informacin (secuencia de nucletidos) de un fragmento del ADN, el correspondiente a un gen, en una molcula de ARN. En este proceso, por consiguiente, tomando como molde o patrn una de las cadenas del fragmento del ADN, se sintetiza una molcula de ARN, cuya secuencia de nucletidos ser complementaria con dicha cadena de ADN.

La primera manifestacin de actividad biosinttica viral es la obtencin de ARN mensajero viral, en un proceso conocido como transcripcin. Estas molculas, al igual que los mensajeros celulares, son intermediarias mediante las cuales la informacin fluye desde el genoma hacia la sntesis de protenas en los ribosomas celulares.

Todos los mensajeros son sintetizados necesariamente por una ARN polimerasa, aunque el molde que dicha enzima debe leer para fabricar el mensaje vara dependiendo del tipo de virus. De hecho, la mecnica de transcripcin viral se ha constituido en un criterio de clasificacin de los virus: la clasificacin de Baltimore, propuesta en 1971 por David Baltimore, Premio Nobel de Medicina en 1975 Esta clasificacin incluye siete grupos

Al igual que el genoma hospedero, algunos virus tienen genomas constituidos por ADN de doble hebra. En estos casos, el mensajero es fabricado por una ARN polimerasa dependiente de ADN, que habitualmente es la misma polimerasa celular, el "ARN polimerasa II", localizada en el ncleo de la clula. Los poxvirus portan su propio ARN polimerasa dependiente de ADN, que transcribe el genoma viral en el citoplasma.

Otros virus tienen su genoma constituido por una o varias molculas de ARN de simple hebra, con la particularidad de que los ribosomas celulares pueden utilizar dicha molcula directamente como mensajera (hebra de polaridad positiva). Para que los ribosomas puedan acceder al genoma viral, en estos casos es indispensable que este sea liberado de la cpside.

En ocasiones, el genoma ARN de simple hebra viral es de polaridad negativa, pues no puede ser ledo directamente por los ribosomas porque porta la informacin complementaria al mensaje. As, estos ARN son usados como moldes en el proceso de transcripcin, para lo cual se requiere de una enzima ARN polimerasa dependiente de ARN. Esta enzima debe venir incorporada al virin lista para funcionar -adems de estar codificada en el genoma viral-, porque de lo contrario su informacin gentica no podra fluir.

Algunos virus tienen por genoma una molcula de ARN de doble hebra y, a pesar de traer una hebra de polaridad positiva, usan una polimerasa viral para fabricar nuevos mensajeros.

Aunque los retrovirus tienen un genoma de ARN de polaridad positiva, no lo usan como mensajero, sino que se valen de una enzima transcriptasa inversa para fabricar un intermediario de ADN doble hebra que se integra al genoma de la clula hospedera, y usan este intermediario como molde para la obtencin de ARN mensajero.

Biosntesis de protenas virales

Se deben producir dos tipos de protenas virales estructurales y no estructurales en una secuencia temporal especfica para cada virus. Los virus no poseen maquinaria propia para fabricar sus protenas, por lo que deben adaptar su informacin para traducirla en los ribosomas celulares.

As, la mayora de virus produce ARN mensajeros (ARNm), que cuentan con los elementos tpicos de un mensajero celular: una estructura cap, un marco de lectura abierto que porta la informacin codificante efectiva y una seal de poliadenilacin, o en su defecto, directamente una cola poli A. Esta molcula es sometida a scanning por el complejo de iniciacin de la traduccin que incluye la subunidad menor del ribosoma- hasta que se ensambla el ribosoma completo y se inicia la traduccin.

Replicacin genmica. En esta nomenclatura no debe

confundirse la expresin "replicacin viral", que se refiere a todo el proceso de proliferacin del virus, con "replicacin genmica", que slo contempla la obtencin de copias del genoma viral. Esta etapa es especfica y dependiente del tipo de genoma viral; consecuentemente, cada virus tiene sus propios requerimientos para efectuarla, incluyendo algunas actividades enzimticas propias. Por esta razn, la replicacin genmica siempre es posterior a la traduccin de las protenas virales.

Ciertos virus con genoma de ADN bicatenario utilizan la maquinaria de replicacin de ADN propia de la clula presente en el ncleo y por lo tanto, efectan la clsica replicacin semiconservativa dependiente de uno (Papovaviridae) o varios orgenes (Herpesviridae) de replicacin.

En cambio, otros virus ADN codifican su propia maquinaria de replicacin genmica (Poxviridae) y a veces dicha replicacin puede ser conservativa, es decir, primero se fabrica una hebra de ADN que despus se usa como molde para fabricar su hebra complementaria.

En los virus de ARN monocatenarios, independiente de su polaridad, la replicacin siempre requiere fabricar una molcula complementaria al genoma -denominada antigenoma-, que despus se utiliza como molde para generar nuevas copias del genoma. Ambos pasos son ejecutados por una ARN polimerasa dependiente de ARN codificada por el virus.

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Finalmente, los virus de ARN bicatenario realizan una replicacin conservativa de sus genomas: sintetizan la hebra positiva primero y despus la usan como molde para la polimerizacin de la hebra negativa complementaria. Tanto los virus con ARN bicatenario como los de ARN monocatenarios negativos previamente descritos, portan las ARN polimerasas en su estructura.

Este paso consta de la unin de todos los componentes necesarios para la formacin de la estructura bsica de la partcula viral en un determinado sitio de la clula. El sitio del ensamble depende del lugar de replicacin del virus y del mecanismo por el cual el virus es liberado de la clula, estos eventos varan para los diferentes virus. Por ejemplo, los picornavirus, poxvirus y reovirus se ensamblan en el citoplasma, mientras que los adenovirus, herpesvirus y parvovirus lo hacen en el ncleo

ENSAMBLAJE Y MADURACIN CITOPLASMTICA DEL VIRUS DE LA VIRUELA

F. A. Murphy, School of Veterinary Medicine, University of California, Davis. http://www.vetnet.ucdavis.edu/fam_graphics/download.html

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Se estima que producto del ensamblaje pueden acumularse entre cien y diez mil partculas virales al interior de una clula, dependiendo del virus. Para reiniciar un nuevo ciclo, estas partculas deben salir de la clula, que para ese momento puede ya estar en colapso fisiolgico debido a la infeccin viral. La mayora de los virus desnudos sale de la clula una vez que la membrana citoplasmtica se rompe, liberando todo el contenido interno, en un proceso conocido como lisis celular. Dado que las partculas deben estar listas para infectar una nueva clula, la morfognesis de estos virus concluye antes de la liberacin.

En contraposicin, diversos virus con manto concluyen su morfognesis durante la liberacin, pues en esa etapa adquieren el manto que los recubrir Para que esto ocurra, la nucleocpside debe ser transportada hacia la membrana citoplasmtica, donde ser reconocida por protenas virales asociadas a ella; en esta zona se produce entonces una proyeccin de la membrana celular comparable a una endocitosis, pero dirigiendo la vescula hacia el exterior de la clula

Producto de este proceso, llamado yemacin, sale una partcula viral que porta las protenas de superficie y la nucleocpside viral. Es evidente que la membrana celular tiene una capacidad finita para efectuar este proceso, pues la escasez de componentes lipdicos (fosfolpidos y colesterol) termina por acabar con su integridad, por lo que no es raro que algunos virus modulen la liberacin de partculas para alargar el proceso de replicacin. De esta forma, muchos virus con manto no destruyen su clula hospedera al concluir su ciclo replicativo. En algunos virus envueltos se ha descrito que una vez fuera de la clula, procesan internamente sus protenas, en lo que se denomina maduracin. Por ejemplo, los retrovirus estructuran sus cpsides a partir de protenas procesadas con una proteasa viral, despus de la liberacin de la partcula.

LIBERACIN DE VIRUS POR FORMACIN DE BROTES

El sitio para formacin de brotes en membrana adquiere primero picos especficos del virus y protenas de la matriz. El proceso de formacin de brotes casi nunca provoca la muerte de la clula. La mayora de los retrovirus(excepto el HIV) se reproduce sin muerte celular.

FLORECIMIENTO Y MADURACIN DEL VIH

Hsiung, GD et al., Diagnostic Virology 1994 p204 (D. Medina)

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INVASION E INFECCION POR VIRUS

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1-Adsorcin, 2-Penetracin, 3-Desnudamiento, 4- Multiplicacin (4a-transcripcin, 4b-traduccin, 4c-replicacin), 5-Ensamblaje, 6-Liberacin.

Replicacin vrica: ciclo ltico

Etapas de proceso de replicacin de un bacterifago:
5 Liberacin de viriones
Lisozima codificada por virus

1 Fijacin/adsorcin

Especificidad: interaccin con receptores

2 Penetracin
Rendimiento vrico eclipse - Lisozima

4 Ensamblaje y empaquetamiento Maduracin

3 Sntesis de c. Nucleicos y prot.

Prot. Tempranas Prot Tardias

Duracin: 20-60 fagos vs. 1-2 d virus animales

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INFECCIN LTICA
Ellos entran e inyectan su ADN en la clula husped pero, en lugar de tomar el control y fabricar ms virus, el ADN inyectado puede tornarse inactivo por un cierto tiempo, hasta que un apropiado evento celular dispara el proceso nuevamente. A ste ciclo se le conoce como Lisognico.

Ciclo ltico vs. ciclo lisognico

Ciclo de vida virulento: ciclo replicativo resulta en la destruccin celular o lisis Ciclo de vida temperado: ciclo replicativo conjunto con el del hospedador, sin destruirlo.

Fago virulento
Induccin por luz uV o qcos

Fago atemperado

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