I Congresso de Pesquisa e Ps-Graduao do Cmpus Rio Verde do IFGoiano. 06 e 07 de novembro de 2012.

ISOLAMENTO, PURIFICAO E CARACTERIZAO DE METABLITOS ESPECIAS DE NABO FORRAGEIRO (Raphanus sativus L.)
BORGES, Elisngela Barbosa (Estudante IC)1; ALVES, Cassia Cristina Fernandes (Orientador)1; ALVES,Jos Milton (Colaborador)1 ; FERREIRA, Nelsimar Laurinda (Colaborador)1.
1

Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia Goiano Cmpus Rio Verde - GO.

RESUMO: Os vegetais representam as maiores fontes de substncias ativas que podem ser usadas na teraputica. Tendo em vista a crescente demanda de alternativas aos combustveis fsseis, diversas plantas vm sendo estudadas com objetivo de fornecimento de leo para produo de biodiesel, entre estas plantas podemos destacar o Nabo forrageiro (Raphanus sativus L). O objetivo de desenvolver este trabalho obter dados sobre metablitos especiais de Nabo forrageiro, pois existem poucos dados na literatura sobre estudo fitoqumico desta espcie. O material vegetal foi colhido no campo e foram separados as folhas, flores e caule, todo o material vegetal foi modo e utilizando macerao a frio foram obtidos os extratos de diferentes polaridades. Os extratos foram submetidos a mtodos cromatogrficos utilizando slica gel e sephadex e as fraes obtidas foram analisadas atravs de CCDA, aps diversos mtodos cromatogrficos de purificao verificou-se que a planta apresenta extratos ricos em flavonides e terpenos. INTRODUO A natureza, desde sempre, tem o poder de despertar no homem, um fascnio, no somente pelos recursos oferecidos para sua alimentao e manuteno, mas por sua principal fonte de inspirao e aprendizado, buscando cada vez mais compreender a leis naturais e o desafio de transpor as barreiras a sua sobrevivncia, como o clima e as doenas, levando assim o homem, ao atual estgio de desenvolvimento cientfico. (JUNIOR et al.,2006). Pesquisas mostram que as plantas produzem princpios ativos de acordo com o ambiente em que elas vivem, e a presena de outras plantas podem comprometer a produo de metablitos especiais. (MAIA et al., 2009). Os metablitos secundrios produzidos por plantas, melhor conceituados, como metablitos especiais, tiveram um papel fundamental no desenvolvimento da qumica orgnica sinttica moderna. Historicamente, o desenvolvimento da qumica orgnica, ocorreu paralelamente ao estudo das plantas, principalmente a partir do sculo XIX, quando foram registrados os primeiros estudos sobre plantas, com base cientfica. Isso resultou no isolamento de alguns princpios ativos de plantas, j ento conhecidas como medicinais. Desses estudos foram obtidas algumas substancias que se consagraram como princpios ativos eficazes, e que at hoje ainda so muito empregados no tratamento de certas doenas, a exemplo de morfina, quinina, cnfora e cocana (Montanari, 2001). O desenvolvimento desta pesquisa, tem como objetivo, isolar, purificar e caracterizar metabolitos especiais do nabo forrageiro (Raphanus sativus L). MATERIAL E MTODOS O material vegetal foi obtido atravs do plantio de experimento no campo experimental do laboratrio de Agroenergia do Instituto Federal Goiano Campos/Rio Verde. Posteriormente ao plantio e desenvolvimento do Nabo forrageiro houve a coleta das plantas que no foram submetidas a nenhum tratamento denominadas de Branco, tambm coletou-se plantas que foram submetidas a tratamentos de nutrio mineral e calagem que sero estudadas posteriormente. Aps a coleta, o material vegetal foi levado para o Laboratrio de Qumica de produtos Naturais. No laboratrio foram separadas manualmente a raiz, o caule, as folhas, as flores e os gros. As razes e os gros separados foram descartados. As folhas do Nabo forrageiro aps serem modas, foram colocadas em um balo de vidro de 1

I Congresso de Pesquisa e Ps-Graduao do Cmpus Rio Verde do IFGoiano. 06 e 07 de novembro de 2012.

3 litros e coberta com hexano, depois de ficarem submersas no solvente hexano por trs dias o material foi filtrado e o solvente recuperado atravs do evaporador rotativo, o solvente recuperado foi novamente colocado em contato com as folhas trituradas, este procedimento foi repetido diversas vezes at obter o extrato hexnico do nabo forrageiro. Foi obtido tambm extratos das folhas utilizando diclorometano como solvente e extratos das flores do nabo forrageiro utilizando diclorometano e metanol como solventes utilizando o mtodo de macerao a frio. O extrato obtido das folhas com o solvente hexano foi denominado NFBrH (Nabo Folhas Branco Hexano) 9,6 gramas, e o extrato obtido com o solvente diclorometano foi denominado NFBrD (Nabo Folhas Branco Diclorometano) 5,5 gramas. O extrato das flores extrado com diclorometano foi denominado (NFlBrD) 3,3 gramas e o obtido com o solvente metanol foi denominado (NFlBrM) 6,3 gramas. Foi realizada partio com solvente com todos os extratos obtidos. Para realizar a partio dissolveu os extratos em metanol/gua 1:1 e colocou em um funil de separao e adicionou-se diclorometano obtendo duas fraes a frao metanol/agua e a frao solvel em dicloromentano. As fraes obtidas aps as parties com solventes foram submetidas cromatografia em coluna usando como fase estacionria slica gel 60 0,2-0,5mm/35-70 mesh ASTM e coletadas fraes com solventes de diferentes polaridades exceto a frao denominada NFlBrDM (Nabo Flores Branco Diclorometano Metanol) que foi submetida a cromatografia em coluna usando Shefadex LH 20 e um nico solvente, neste caso o metanol. Aps a partio com solventes do extrato hexnico das folhas a frao solvel em hexano NFBrHH (Nabo Folhas Branco Hexano Hexano) esta frao foi submetida a cromatografia em coluna com slica gel e foram obtidas 331 fraes, a outra frao das folhas solvel em diclorometano denominada NFBrDD (Nabo Folhas Branco Diclorometano Diclorometano) tambm foi submetida a fracionamento cromatogrfico em coluna usando slica gel foram obtidas 276 fraes. No caso das flores a frao obtida com diclorometano denominada NFlBrDD (Nabo Flores Branco Diclorometano Diclorometano) aps a submisso a cromatografia em coluna

utilizando como fase estacionria slica gel foram obtidas 72 fraes e a frao metanlica obtida a partir da partio com solventes denominada NFlBrDM (Nabo Flores Branco Diclorometano Metanol) que foi submetida a cromatografia utilizando como fase estacionaria sephadex e foram extradas 11 fraes. As fraes obtidas aps as cromatografias em coluna foram analisadas atravs de CCDA (Cromatografia em Camada Delgada Analtica) reunindo as fraes semelhantes para serem submetidas a novos fracionamentos em colunas cromatogrficas e identificando as amostras puras. RESULTADO E DISCUSSO Aps os processos de fracionamentos e purificao dos extratos e fraes obteve-se as seguintes fraes: a frao NFBrDD 39/10283/85-01, a frao NFBrHH 45/48-44/50-04, a frao NFBrHH-149 e a frao NFlBrDD-18/2208 que aps anlise em CCDA e utilizando lmpada de UV verificou-se que as mesmas apresentavam um ponto indicando a presena de uma substncia, estas amostras foram enviadas para anlises expectomtricas. No desenvolvimento desta pesquisa verificou-se indcios de que os extratos e fraes obtidas das folhas e flores do nabo possuem em sua constituio flavonides e terpenos. Os flavonides podem desenvolver funes farmaclogicas como antibacteriana e antimicrobiana etc (Pires et al., 2011).

Os seres vivos possuem como caractersticas de suma importncia atividade metablica, no caso das plantas, seu metabolismo divido em metablitos primrios e secundrios, os terpenos so substncias comuns nas plantas e um metablito secundrio, compreendendo em si, mais de 1500 compostos que so de grande valor para a indstria farmacutica (Calou, 2008).
CONCLUSO

Atravs dos mtodos utilizados foi possvel isolar e purificar alguns compostos, e verificar a presena de terpenos e flavonides em algumas fraes obtidas dos extratos de diferentes polaridades das folhas e flores do nabo forrageiro, sendo que a continuidade
2

I Congresso de Pesquisa e Ps-Graduao do Cmpus Rio Verde do IFGoiano. 06 e 07 de novembro de 2012.

deste trabalho possibilitar isolar e identificar metablitos especiais de diferentes classes. O desenvolvimento de pesquisa fitoqumica com esta espcie vegetal muito importante, pois existem poucos dados na literatura sobre metablitos especiais isolados do nabo, por isso a continuidade do desenvolvimento do projeto importante.
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS PIRES, A., M., L.; SILVEIRA, E., R.; PESSOA,O., D., L.; Flavonides de Lonchocarpus campestris (Leguminosae) Qum. Nova vol.34 N.2, 2011. CALOU, I.,B., F.; Acido Centipedico e Lactona do Acido Hawtriwaico em Modelos de Dermatite de Contanto Induzida Por TPA e Oxazolona em Camundongos. Efeitos dos terpenos 2008.

JUNIOR, Cludio V.; BOLZANI, Vanderlan S.; BARREIRO,Eliezer J., Os produtos naturais e a qumica medicinal moderna. Qumica nova, v. 29, n.02, 2006. MAIA, J.T.L.S. et al. Influncia do cultivo em consrcio na produo de fitomassa e leo essencial de manjerico (Ocimum basilicum L.) e hortel (Mentha x villosa Huds.). Rev. bras. plantas med. [online]. 2009, vol.11, n.2, pp. 137140. ISSN 1516-0572. MONTANARI, C. A.; BOLZANI, V. S.; Planejamento racional de frmacos baseado em produtos naturais. Qumica Nova, Vol. 24, No. 1, 105-111, 2001.