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FACTORES FISICOQUIMICOS Y CRECIMIENTO OBJETIVO GENERAL Evaluar el efecto de los diferentes factores fisicoqumicos medioambientales sobre el crecimiento y comportamiento

fisiolgico de los microorganismos. OBJETIVOS PARTICULARES Evaluar el efecto de la Temperatura sobre el crecimiento de los microorganismos Determinar el efecto del pH sobre el crecimiento de los microorganismos Estudiar el efecto de la Fuerza Inica sobre el crecimiento de los microorganismos Analizar el efecto de la fuerza Osmtica sobre el crecimiento de los microorganismos Evaluar el efecto de la Tensin de Oxgeno sobre el crecimiento de los microorganismos

EFECTO DE LA TEMPERATURA Microorganismos Cultivos de 48 horas en Agar YEG de los siguientes microorganismos: Serratia marcescens, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Bacillus subtilis, Saccharomyces cerevisiae, y Bacillus stearothermophilus Materiales Caldo YEG (Peptona de Carne 3,0 g.; Extracto de levadura 2,0 g.; Glucosa 10,0 g.; Agua destilada c.s.p. 1 litro pH del medio 6,5) 5 Tubos por microorganismo por grupo Agar YEG (Peptona de Carne 3,0 g.; Extracto de levadura 2,0 g.; Glucosa 10,0 g.; Agar 15,0 g.; Agua destilada c.s.p. 1 litro pH del medio 6,5)1 caja por grupo Procedimiento Con ayuda de un asa bacteriolgica inocular de manera asptica cada uno de los cinco tubos de caldo YEG con el microorganismo asignado. Con ayuda de un asa bacteriolgica inocular de manera asptica la caja de agar YEG con los microorganismos S. marcescens, E. coli, P. fluorescens, B. subtilis, S. cerevisiae y B. stearothermphilus. (Ver figura 1) Incubar los tubos de caldo YEG inoculado a las temperaturas de 5, 25, 37, 45, 55; por 48 horas (mximo). Incubar la caja de agar YEG inoculada a la temperatura asignada
Si no es posible hacer la interpretacin a las 48 horas guardar en la nevara hasta el momento de la lectura.

Con ayuda de un espectrofotmetro, evaluar la densidad de crecimiento en cada tubo para cada microorganismo, para determinar cul es la temperatura ptima de crecimiento para cada microorganismo. Evaluar el comportamiento de crecimiento (cantidad y aspecto) sobre la caja de agar YEG, en funcin de la temperatura.

Figura 1. Patrn de Inoculacin de los diferentes cultivos microbianos EFECTO DEL pH Microorganismos Cultivos de 48 horas en Agar YEG de los siguientes microorganismos: Escherichia coli, Serratia marcescens, Pseudomonas fluorescens, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, y Saccharomyces cerevisiae Materiales Agar YEG pH 4, Agar YEG pH 5, Agar YEG pH 7, Agar YEG pH 9 Una (1) caja por valor de pH por grupo El pH del medio se ajusta con HCl 5N o KOH 5N, para agares con pH 4, 5 y 9utilizar 30 g de agar por litro de medio para lograr la consistencia deseada Procedimiento Con ayuda de un asa bacteriolgica inocular de manera asptica cada una de las cajas de agar YEG con los microorganismos E. coli, S. marcescens, P. fluorescens, S. aureus, B. subtilis, y S. cerevisiae. (Ver figura 1) Incubar las cajas de agar YEG inoculadas a 30C, por 48 horas (mximo).
Si no es posible hacer la interpretacin a las 48 horas guardar en la nevara hasta el momento de la lectura.

Evaluar el comportamiento de crecimiento (cantidad y aspecto) sobre la caja de agar YEG y hacer una comparacin en funcin del pH.

EFECTO DE LA FUERZA IONICA Y LA FUERZA OSMOTICA Microorganismos Cultivos de 48 horas en Agar YEG de los siguientes microorganismos: Escherichia coli, Serratia marcescens, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, y Saccharomyces cerevisiae Materiales Agar YEG, Agar YEG con NaCl 5%, Agar YEG con NaCl 10%, Agar YEG con NaCl 15%, Agar YEG con Sacarosa 5%, Agar YEG con Sacarosa 10%, Agar YEG con Sacarosa 20% Una (1) caja de cada uno por grupo Procedimiento Con ayuda de un asa bacteriolgica inocular de manera asptica cada una de las cajas de agar YEG con NaCl y Sacarosa los microorganismos E. coli, S. marcescens, S. aureus, B. subtilis, y S. cerevisiae. (Ver figura 1) Incubar las cajas de agar YEG inoculadas a 30C, por 48 horas (mximo).
Si no es posible hacer la interpretacin a las 48 horas guardar en la nevara hasta el momento de la lectura.

Evaluar el comportamiento de crecimiento (cantidad y aspecto) sobre la caja de agar YEG y hacer una comparacin en funcin de la Fuerza inica y La Fuerza Osmtica.

EFECTO DE LA TENSION DE OXIGENO Microorganismos Cultivos de 48 horas a 37C en Agar YEG de los siguientes microorganismos: Bacillus subtilis, Escherichia coli Cultivos de 48 horas a 37C en Caldo MRS de Lactobacillus delbrueckii Cultivos de 48 horas a 37C en Caldo Tioglicolato de Clostridium butirycum Materiales Tubos de Agar Tioglicolato (con Resazurina) fundido a 50C: Cuatro (4) por grupo Procedimiento Con ayuda de un asa bacteriolgica inocular de manera asptica cada una de los tubos de agar Tioglicolato los microorganismos B. subtilis E. coli, L. delbrueckii y C. butirycum Inmediatamente despus de inocular cada tubo se debe colocar en un bao de hielo para que el agar solidifique rpidamente Incubar las cajas de agar YEG inoculadas a 30C, por 48 horas (mximo).
Si no es posible hacer la interpretacin a las 48 horas guardar en la nevara hasta el momento de la lectura.

Evaluar el patrn de crecimiento (cantidad y aspecto) en los tubos de agar Tioglicolato