TALLER DE DIAGNOSTICO MICOLOGICO Y APLICACIN CLNICA

Guayaquil - 2011

Mdulo II

Dr. Gustavo E. Giusiano

Facultad de Medicina Instituto de Medicina Regional Universidad Nacional del Nordeste Argentina gustavogiusiano@yahoo.com.ar

Rhinosporidium seeberi

Scientific classification
Kingdom: Phylum: Class: Order: Genus: Species:

Protista
Choanozoa Ichthyosporea Dermocystida Rhinosporidium R. seeberi

Rhinosporidium

Micosis Subcutneas

Esporotricosis

Agente etiolgico: Sporothrix schenckii

Diagnstico
Examen directo en fresco

Cuerpos asteroides

El agente raramente es observado en el examen microscpico directo. directo.

Coloraciones
Giemsa, Gram, Grocott, PAS

PAS

Giemsa

ESPOROTRICOSIS

PAS

MICOLOGIA: MICOLOGIA : BIOPSIA: BIOPSIA : Hiperplasia seudoepiteliomatosa, microabscesos intradrmicos, infiltracin por leucocitos y clulas plasmticas, eosinfilos, granuloma, cuerpos asteroidales. asteroidales.

Cultivo
Sabouraud con ATB

Cultivo a 28C Hongo dimrfico Cultivo a 37C

CULTIVO: 37C:

Colonia levaduriforme

Clulas brotantes ovales, fusiformes. Forma parastica o cultivo a 37C de Sporothrix schenckii

CULTIVO: 25-28C:

Hifas finas (1 a 2 micras de diam.), septadas, conidios ovales a piriformes (2-3 a 6) producidos en bouquet en el extremo del conidiforo. La acumulacin de estas microconidias da aspecto de flor o margarita.

Microcultivo

Micetomas

Eumicetoma
Grano con hifas hialinas o dematiaceas Sospechar grano mictico

GRANOS NEGROS

Corte histolgico

MO 10X MO 100X

Principales Agentes Etiolgicos de Eumicetomas

GRANOS NEGROS
Madurella grisea Madurella mycetomatis Pyrenochaeta romeroi Leptosphaeria senegalensis Exophiala jeanselmei Exophiala wernekii

GRANOS BLANCOS
Scedosporium apiospermum Acremonium kiliense Acremonium recifei Acremonium falciforme Fusarium moniliforme Fusarium solani

GRANOS NEGROS por Madurella mycetomatis

Conidiforos cilndricos pigmentados con anlide en la porcin apical dando aspecto de espina Puede estar ramificado

Exophiala spinifera

Scedosporium apiospermum

Acremonium sp.

Fusarium sp.

Cromomicosis

Examen directo en fresco

Cuerpos esclerticos (clulas fumagoides) Esclerotes de Medlar elementos esfricos, dematiceos, tabicados y agrupados de 2, 4, 6 o ms.

Examen en fresco

Cuerpos esclerticos (clulas fumagoides) Esclerotes de Medlar

Principales Agentes Etigicos de Cromomicosis

Phialopora

verrucosa Cladosporium carrionii Fonsecaea pedrosoi Fonsecaea compacta Rhinocladiella aquaspersa

Phialophora verrucosa

Fialides con forma de botella con collarete conico

Cladosporium sp.

Conidios ovoidales dispuestos en largas cadenas uni o bicelulares

Cladosporium carrioni

Rhinocladiella (Acrotheca)

Conidios ovoidales - fusiformes, laterales, unicelulares que se forman en la extremidad de largos conidiforos erectos cilndricos

Fonsecaea pedrosoi
Tres tipos de fructificacin

Fonsecaea pedrosoi
Tres tipos de fructificacin

Micosis Sistmicas Endmicas

Agente: Paracoccidioides brasiliensis

Paracoccidioidomicosis

Examen directo
FRESCO

400X

TODAS LAS MUESTRAS

Examen directo
COLORACIONES

Giemsa

Groccot Pass Z-N (TBC) Kinyoun (Nocardia) Gram Weigert (P. jiroveci) Azul de toluidina (P. jiroveci)

Coloracin de Giemsa

Grocott

Z -N

* importante por la dificultad en algunos casos de diferenciar con TBC por radiologa o clnica * Asociaciones

TERMODIMORFO

T : 25-28C

35-37C

Forma saproftica

Forma parasitaria

Cultivo
35-37C Forma parasitaria

Cultivo
25-28C Forma saproftica

microconidias

Histoplasmosis
Agente: Histoplasma capsulatum var capsulatum (Argentina)

Histoplasmosis

Diagnstico
Examen directo Fase parasitaria Coloracin de Giemsa
(100X)

intracelular
1-5 micras

Citoplasma en casquete (forma semilunar, desplazado hacia hacia uno de los polos)

Grocott metenamina plata

Histoplasmosis

HEMOcultivo

Mtodo de eleccin Lisis centrifugacin

TERMODIMORFO

T : 25-28C

35-37C

Forma saproftica

Forma parasitaria

Histoplasma capsulatum
var. capsulatum

Forma parasitaria
Fase Levaduriforme unicelular, in vitro 34 34-37 37 C

Elementos levaduriformes (unicelulares) ovoides con un solo brote - Tamao 1-5 micras

Fase Micelial multicelular en la naturaleza e in vitro 25 25-28 C C

Micelio hialino tabicado Microconidias pequeas, piriformes ( < 5 m)

Macroconidias Globosas (8-15micras) Pared gruesa tuberculada

Histoplasma capsulatum
var. capsulatum

Histoplasma capsulatum
var. capsulatum

Fase saproftica

Coccidioidomicosis

Agente: Coccidioides immitis (Valle de San Joaqun California) Coccidioides posadasii

TODAS LAS MUESTRAS

Examen directo
FRESCO
esfrulas de 20 a 80 de dimetro con endosporos

Fase parasitaria

Examen directo

Examen directo

Coccidioides immitis Coccidioides posadasii

Examen directo

Coccidioides immitis Coccidioides posadasii

Calcofluor

Coccidioides immitis Coccidioides posadasii

Coloraciones
Giemsa Gram Grocott PAS
Z-N (TBC) Kinyoun (Nocardia) Gram Weigert (Pneumocistis) Azul de toluidina (Pneumocistis)

Cultivo

T : 25-28C y 35-37C

Forma saproftica

micelio hialino tabicado fragmentado en clamido-artroconidias

113

Forma saproftica
Coccidioides immitis Coccidioides posadasii

112

Micosis oportunistas II

Examen microscpico de colonias levaduriformes

Cryptococcus sp
Saccharomyces cerevisiae

Pichia membranifaciens

Candida globosa

Examen microscpico de colonias levaduriformes

Saccharomyces cerevisiae

Candida krusei

Examen microscpico de colonias levaduriformes

Trichosporon spp Trichosporon cutaneum

Blasto-artroconidios

en agar harina de maz - Tween 80 agar arroz - Tween 80

Microcultivo ( Dalmau, 1929 ) Estudio micromorfolgico de levaduras

25C por 2 a 7 das

Candida albicans Candida dubliniensis

Cryptococcus

Cryptococcus en LCR Test de tinta china

Pneumocystis sp.

Trofozoitos (formas troficas): formas libres de pneumocystis, pequeas, aparece frecuentemente en acmulos

Formas qusticas: redondos o en media luna, de 5-8 micras de diametro. En su interior se encuentran los esporozoitos (cada quiste puede tener hasta 8 esporozoitos).

Formas qusticas
5-8 m

Giemsa

Lavado broncoalveolar (BAL)

Formas trficas (pre-quiste)

Contienen 1 o ms ncleos

4-7 m