Protenas

Integrantes: Edna Viviana Camargo Tocora 2121317 viviana26_1@hotmail.com L ! "driana #lanco $lata 2%622&' adriana.(lanc)%*@hotmail.com
Microbiologa y Bioanlisis, Universidad Industrial de Santander, Facultad de Salud, Escuela de Bacteriologa y Laboratorio Clnico

Objetivos: +(servar el com,ortamiento de las ,rote-nas .rente a di.erentes reactivos. E/,erimentar a,rovechando las ,ro,iedades .-sico01 -micas2 los com,ortamientos de la ,rote-na en di.erentes sit aciones. Introduccin 3e reali!aron c atro e/,erimentos2 en donde se reali!aron di.erentes ,rocedimientos 4 se em,learon distintos reactivos ,ara ,oder o(servar 4 anali!ar el com,ortamiento 1 e ten-a la ,rote-na ante determinado agente. La sol (ilidad de las ,rote-nas est5 determinada ,or la com,osici6n i6nica del medio2 la . er!a i6nica 4 el ,72 al estar constit idos ,or amino5cidos en s ma4or ,arte2 e/,resan el com,ortamiento 1 e tienen estas mol8c las.1 Metodologa Experimento #1 precipitacin de la casena 3e ,re,araron 6 t (os de ensa4o con las sig ientes caracter-sticas: !" 6.' '2& '2% 927 32* 32'

#gua *2*' *23* *2' * 1 729 destilada $cido %21' %262 0 0 0 0 ac%tico &'&1 ( )*+, $cido 0 0 %2' 12% * 0 ac%tico &'1 ( )*+, $cido 0 0 0 0 0 126 ac%tico 1 ( )*+, Tabla 1: ,re,araci6n de sol ciones en t (os de ensa4o. " cada t (o se le agrego 1mL de sol ci6n de al( mina2 4 se agitaron los t (os2 ,ara o(servar 4 anotar la t r(ide!2 4a 1 e la sol ci6n del al( mina esta(a m 4 dil ida2 se dis, so de na n eva sol ci6n m5s concentrada de al( mina 1 e se agreg6 a los t (os ,re,arados ,ara o(servar la t r(ide!. Los res ltados se registran en las ta(la 2 Experimento #2 precipitacin por metales pesados

Tubo #
1

PE !, !ntonio y otros, Bio"u#ica, editorial li#usa, $da edici%n, Me&ico, $''(, )ag *+,

3e colocaron 2 mL de sol ci6n de al( mina en n t (o de ensa4o 4 l ego se le agregaron

nas gotas de s l.ato de co(re %21 mol:L2 se registr6 lo o(servado 4 l ego se a;adi6 n e/ceso de s l.ato de co(re. Experimento #3 precipitacin por reactivos acdicos "gregamos na sol ci6n de ,rote-na <al( mina= 4 a;adimos nas gotas de 5cido tricloacetico al 2%> $:V2 se o(serv6 4 se registr6 ,ara ,roceder l ego a;adir lentamente ?a+7. 3e o(serv6 la reacci6n 4 se registraron los res ltados. Experimento #4 Biuret modificado 3e ten-an 3 t (os2 no de ellos con 1 ml de sol ci6n de #i ret <(lanco=2 el seg ndo ten-a '2 ml de na sol ci6n ,atr6n <7 g:dl= dil ida en 2 ml de ag a2 con 1 ml de #i ret 4 el tercero conten-a '2 ml de la m estra dil ida en 2 ml de ag a2 con 1 ml de #i ret. Los 3 t (os se de@aron re,osar a tem,erat ra am(iente ,or ' min tos 4 se ,rocedi6 a hacer la lect ra de la a(sor(ancia en el es,ecto.ot6metro. -iscusin de resultados Precipitacin de la casena Con la toma de res ltados se , do o(servar 1 e: Tabla 2. T r(ide! Tub Cruces o 1 + 2 +++ 3 ++ 4 ++ 5 + 6 + 3e , do concl ir 1 e se ,resent6 ma4or t r(ide! en los t (os 1 e ten-an n ,7 cercano al , nto isoel8ctrico de la al( mina

4 ten-an menores concentraciones de 5cido2 esto es de(ido a 1 e las ,rote-nas en n ,7 cercano a s , nto isoel8ctrico ,ierden s sol (ilidad de(ido a la red cci6n de s s re, lsiones intermolec lares.2 Precipitacin con metales pesados 3e o(serv6 el cam(io de color adem5s de na s s,ensi6n (lanca en la sol ci6n2 1 e se , ede determinar como la ,reci,itaci6n de la ,rote-na ,or el metal 1 e se le a;adi62 esta ,reci,itaci6n se da gracias a los iones de metal ,resentes en la sol ci6n2 ,odr-a decirse 1 e esta reacci6n oc rri6 ,or el ,7 1 e ten-a la sol ci6n2 n ,7 ma4or al , nto isoel8ctrico2 gracias a esto la ,rote-na se disocia de manera negativa 4 como el metal es n ion ,ositivo se ne a este2 dando como res ltado el ,reci,itado2 adem5s de la ni6n ,or enlaces denominados Cross0 lin)ings entre los gr ,os amino li(res 4 car(o/ilo li(res. 3 Precipitacin por reactivos acdicos 3e o(serv6 ,reci,itado color (lanco de(ido a 1 e la al( mina se convino con el gr ,o acido del 5cido tricloroacetico en este caso el cloro dando como res ltado la desnat rali!aci6n de la ,rote-na 4 ,or ende la ,erdida de la sol (ilidad <no , entes de hidrogeno=. "l adicionar ?a+7 se o(serv6 1 e se disolvi6 ,arte del ,reci,itado ,or la acci6n del ?a+7 1 e interactAa con determinados resid os amonoacidicos ,ero aAn se mantiene en gran ,arte el ,reci,itado. Biuret modificado "(s m estra B C D estra: 0000000000000000 / B C del ,atr6n "(s ,atr6n 1.2
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P-IM. Eduardo, "u#ica orgnica, bsica y a)licada/ de la #ol0cula a la industria, editorial reverte, 1**1, Barcelona, )ag *2*3**' 4 5E6!- eva ir#a, )racticas de bio"u#ica descri)tiva, editorial US.7, $''1, Me&ico, )ag 12'

B C D estra: 0000000000000000 / %.%*6g:dL %.2 B C D estra: %.'2 g:dL Los valores normales de ,rote-na total en s ero est5n entre 6 4 *23g:dL ,or lo 1 e al com,ararlo con el res ltado de la m estra se , ede evidenciar 1 e la ,ersona tiene n m 4 (a@o nivel de ,rote-nas en el s ero. Este res ltado tan (a@o , do darse ,or na .alla en el es,ectro.ot6metro dando valores errados de a(sor(ancia. Preguntas Por qu los di p ptidos ! los alfa amino"cidos no presentan la reaccin #iuret$ Los di,e,tidos 4 amino5cidos no ,resentan reacci6n de (i ret ,or1 e la reacci6n se da solo c ando se ,resentan 2 o m5s enlaces ,e,t-dicos. E$or 1 8 se tili!an agentes desnat rali!antes como antis8,ticosF Los agentes desnat rali!antes degradan las ,rote-nas . ncionales de las (acterias adem5s de las estr ct rales ,or esto son Atiles como agentes antis8,ticos. En qu se diferencia la desnaturali%acin proteica e &idrolisis proteica$ 3e di.erencia en 1 e la desnat rali!aci6n hace ,erder la estr ct ra . ncional de la ,rote-na 1 edando solo la sec encia ,rimaria 4 la hidrolisis degrada la sec encia ,rimaria 1 edando solo .ragmentos de amino5cidos. /e0erencias (, B.L! .S, 7uria, 8u#ica de !li#entos, Editorial de la Universidad de Costa -ica, $''4, 1($ ),

1, 9.-I!, Mara, E&)eri#entos de 8u#ica en Microescala, Universidad Iberoa#ericana, $''*, 44$ ),