DETERMINACIN DE AZUCARES REDUCTORES POR EL MTODO DE SOMOGYI NELSON

I.

FUNDAMENTO La glucosa u otro azcar reductor reduce el reactivo cprico alcalino, dando el oxido cuproso. Este, en presencia del reactivo arsenomolibdico de Nelson, forma un complejo de xido de molibdeno de color azul estable, cuya intensidad puede ser medida en el foto colormetro, una vez ue sigue las leyes de Lambert y !eer.

II.

REACTIVOS Reactivo C !"ico #e So$o%&i 'SN()

" " " " "

#,$ g de %u&'( ),*+ g de %u&$#.+t"fc' ,sulfato de cobre*#,$ g Na*%%b ,carbonato de sodio an.idro- */,$0 g con una mol1cula de agua 2),$ g de Na3%$4 ,bicarbonato de sodio2*,$ g de tartrato doble de sodio y potasio 2/ g de Na*&'i ,sulfato de sodio-

5isolver en un !1c uer de 2$$$ mL con )$$ mL de agua destilada, acrecentar los reactivos indicados en el orden indicado anteriormente. 6ransferir para un baln volum1trico de 2$$$ mL y completar a volumen con agua destilada, dejar de un da para otro al abrigo de la luz. 7uardar en frasco (mbar.
8

Reactivo A"*e+o$o,i-#ico #e Ne,*o+ 'SN.) So,. A. " " +$, $ g de ,N3#-)9o0$*# ,molibdato de amonio- +4,$:4g de molibdato de amonio #3*$ en :$$ mL de agua destilada. ;dicionar #* mL de 3*&'# concentrado p.a

So,. /. " ),$ g de Na*;s'< en +$ mL de agua destilada 2$,$) g de Naz;s'=6r> ,arsenito disodico-.

9ezclar ; y ! y mantener a 40?% en ba@o maria estufa por *# .oras. Aolumen final a 2$$$ ml.

III. PROCEDIMIENTO " " " " " " " 2,$ ml de solucin problema m(s *,$ ml del reactivo &N2 2$ minutos en ba@o de agua en ebullicin enfriar en ba@o de .ielo adicionar * ml del reactivo &N* esperar + minutos completar a volumen para *+ mL de agua destilada leer la absorbancia a +#$ nm.

IV. CURVA PADRN DE GLUCOSA Besar *+ mg d1 glucosa pura an.idra y diluir en agua destilada .asta un volumen de 2$$ ml en baln volum1trico. %ada ml de esta solucin debe contener $.*+ mg de glucosa.

Numero 6ubos 2 * 4 # + ) 0 / : 2$ !lanco 9uestra a 9uestra b

Badrn de 7luc,ml$,2$ $,*$ $,4$ $,#$ $,+$ $,)$ $,0$ $,/$ $,:$ 2,$$ " $,+$ $,)$

3*' ,ml$,:$ $,/$ $,0$ $,)$ $,+$ $,#$ $,4$ $,*$ $,2$ $,$$ 2,$$

Ceactivo &N2,ml*,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *

Ceactivo &N*,ml*,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *,$ *

%oncentracin ,mg- D

;bsorvancia ,+#$ nm- E

$,$0+ $,2$$ $,2*+ $,2+$ $,20+ $,*$$ $,**+ $,*+$

$,2)* $,*#$ $,*/$ $,4#$ $,#2$ $,#)+ $,+*$ $,+/$

$,**+ $,*0+

5espu1s de adicionar el reactivo de &N2, colocar los tubos en ba@o 9aria en ebullicin por 2$ minutos. Enfriar en ba@o de .ielo y colocar el reactivo de &N*. Esperar + minutos, completar el volumen para *+ ml con agua destilada y leer la absorbancia a +#$ nm.

Foto (.0 6ubos a ebullicin luego de la adicin de &N2.

Foto ..0 Espectrofotmetro

Dia%"a$a #e #i,1cio+e*
+,$#*2 g F 2$$ ml +$ ml F 2$$ ml 2ml F 2$$ ml $,+ ml G ;bsorvancia muestra a G $,**+ V. PREPARACIN DE LA MUESTRA
+,$ g de miel

5isolucin

Enrasa a 2$$ ml

Jiltracin

Jiltrado ,l uido-

Cesiduo ,descartar-

+$ ml F 2$$

2,$ ml F 2$$

6omar $,+ ml

VI.

C2LCULOS3 Cealizar los c(lculos de acuerdo a las indicaciones dadas en clases tericas, expresar los resultados en H de azucares reductores.
Y4 A5/6

%onociendo todos los datos, .allamos los valores de los coeficientes ; y ! de nuestra recta de regresin. Bara nuestro caso los valores sonI

; G " $,$$2*+ !G *,4*2# CG $,::/0 Bara el valor de nuestra muestra la absorvancia fue de $.**+, por lo calculamos en nuestra ecuacin de la recta de la siguiente maneraI $.**+ G " $,$$2*+ = *,4*2# D ue

5onde despejando y calculando nos da un valor de x G $,$:0+ mg Bero $,$:0+ mg """""""""""""""" D """""""""""""""" 5ondeI D es G 2:,#:*+ mg Bero 2:,#:*+ mg """""""""""""" 2 ml D """""""""""""" 2$$ ml D G 2:#: mg G 2,:#: g Bero 2,:#: g """"""""""" +$ ml D """"""""""" 2$$ ml D G 4,/:/ g &i +,/:/ g """"""""""" 2$$ H 4,/:/ g """"""""""" D 6 4 7789. :8 donde D es el porcentaje de azucares reductores .allados en esta muestra. $,+ ml 2$$ ml

VII.

DISCUSION " El resultado obtenido de 00,4* H de azucares reductores en la miel no concuerda con el obtenido por Biccirillo et alt., ue fue de )0,42H, esta diferencia se debe probablemente al contenido de .umedad de cada producto y a su pureza.

VIII. /I/LIOGRAFIA 2. Biccirillo, et alt., ,2::/-. Estudio de algunos par(metros fsico umicos en mieles cosec.adas durante la 1poca seca de oc.o zonas apcolas del Estado Kulia, Aenezuela, ,en linea-, .ttpIFFLLL.revfacagronluz.org.veFv2+M+Fv2++z$2$..tml , *$$/"$*"2). *. Ait, B.N O. 7. de 9artorelli y &. Lpez"Balacios. ,2::#-. %lasificacin de mieles comerciales venezolanas. ;rc.ivos Latinoamericanos de Nutricin. 4. >.ite, P.> Pr. ,2:)*-. %omposicin Bromedio de 9iel y Aariacin de Aalores. 5epartamento de ;gricultura. 9aterial 9imeografiado. Estados Qnidos de ;m1rica.