MASTITIS BOVINA Luis F. Calvinho E.E.A INTA Rafaela lcalvinho@rafaela.inta.gov.ar DEFINICIN Mastitis es la inflamacin de la glndula mamaria.

Si bien la inflamacin no indica necesariamente la presencia de una infeccin, en la mayora de los casos es causada por agentes bacterianos, por lo cual es usualmente considerada como una enfermedad infecciosa. La mastitis es el resultado de la interaccin entre varios factores de manejo y el medio, que determinan que aumente la exposicin a los microorganismos causales, disminuya la resistencia natural de la vaca hacia la enfermedad y/o se favorezca el paso de los microorganismos a travs del canal del pezn para acceder al epitelio secretor de la glndula mamaria. La magnitud de los cambios patolgicos que se producen depender de la severidad de la inflamacin; en los casos clnicos la alteracin tanto del cuarto afectado como de la leche es evidente, mientras que en los casos subclnicos la alteracin, aunque presente, no es visible a simple vista y es solo detectable por mtodos de diagnstico complementarios. AGENTES ETIOLGICOS Y CONCEPTOS EPIDEMIOLGICOS Se han identificado ms de 80 agentes causales de mastitis, incluyendo especies de bacterias, hongos, mycoplasmas y algas. Estos microorganismos han sido clasificados en patgenos contagiosos y ambientales de acuerdo con sus caractersticas de distribucin e interaccin con el pezn y su canal. Los patgenos contagiosos viven y se multiplican en la glndula mamaria y la piel del pezn, se transmiten de animal a animal principalmente durante el ordeo e incluyen a Staphylococcus aureus, a Streptococcus agalactiae, a Corynebacterium bovis y a especies de Mycoplasma. Los patgenos ambientales son aquellos cuyo reservorio primario es el lugar donde viven las vacas. Estos organismos constituyen un grupo heterogneo, siendo los ms frecuentemente aislados Streptococcus uberis y las bacterias coliformes, mientras que Streptococcus dysgalactiae comparte caractersticas de los patgenos ambientales y los contagiosos. Un tercer grupo de organismos lo conforman los Staphylococcus coagulasa negativos (SCN), que si bien son considerados como integrantes de la flora normal de la piel de la ubre y los pezones, tambin pueden causar infecciones del canal del pezn y de la glndula mamaria. La distribucin dentro de los rodeos lecheros de las distintas especies que conforman este grupo reflejan, en parte, las prcticas de manejo aplicadas en cada establecimiento. En nuestro pas, donde la prevalencia de infeccin masttica en los rodeos es elevada, se observa un predominio de los patgenos contagiosos. Estudios realizados en los ltimos 20 aos en distintas cuencas lecheras de Argentina muestran que los organismos aislados ms frecuentemente, tanto de mastitis clnicas como subclnicas son: S. aureus y distintas especies del gnero Streptococcus. En el cuadro 1 se detalla la frecuencia de

aislamiento de organismos patgenos obtenidos de mastitis subclnicas en distintas cuencas lecheras. Cuadro 1. Frecuencia de aislamiento de algunos organismos patgenos mayores obtenidos de mastitis subclnicas en distintas cuencas lecheras de la Argentina. ORGANISMOS S. aureus S. agalactiae S. uberis S. dysgalactiae Streptococcus spp. Coliformes A 54 23,4 2,8 1,8 4,1 2,8 1,6 B 43,2 13,5 19,2 5,3 C 21,7 2,7 5,9 2,2 1,7 0,9 D 17 23,4 E 25,3 8,8 3,6 19,3 2,7 F 31,5 11,6 5,82 3,1 G 16,6 5,4 9,2 13,3 5,9 H 21,9 5,8 4,34 2 I 13,9 1,6 6,5 -

Referencias: los datos se expresan en porcentajes, que fueron calculados sobre las muestras con aislamientos positivos. A: Tessi et al. (1978) (Cuenca central santafesina), B: Gonzlez et al. (1980) (Cuenca de Crdoba), C: Calvinho et al. (1991a), (Cuenca Central Santafesina), D: Giraudo et al. (1995) (Cuenca de Crdoba), E: Chertcoff et al. (1996) (varias cuencas); F: Tirante et al. (1998) (varias cuencas); G: Acua et al. (2001) (varias cuencas); H: Chaves et al. (2001) (varias cuencas); I: Amand de Mendieta et al. (2001) (Cuenca Mar y Sierras). Patgenos contagiosos Desde el punto de vista epidemiolgico, S. aureus se transmite fundamentalmente durante el ordeo; sin embargo, existen fuentes de contagio extramamarias, que aunque tengan una importancia menor, pueden dificultar el control. Estas fuentes extramamarias son fundamentalmente la piel de las vacas y las moscas. Adems, debe tenerse en cuenta que las vaquillonas primparas pueden contraer infecciones intramamarias (IIM) previo al parto, mantener la infeccin post parto y luego convertirse en una fuente de contagio para otras vacas durante el ordeo. Streptococcus agalactiae es un organismo altamente contagioso, que causa fundamentalmente mastitis subclnica con significativos aumentos de los recuentos de clulas somticas. Es considerado como un patgeno obligado de la glndula mamaria, pero puede sobrevivir por cortos perodos en la piel de la ubre y manos de los ordeadores, lo cual facilita su transmisin entre vacas durante el ordeo. Si bien Str. agalactiae fue la principal causa de mastitis bovina antes de la aparicin de los antimicrobianos, sus caractersticas epidemiolgicas y su susceptibilidad a los antibiticos permiten su erradicacin de los rodeos. Este organismo, que pertenece al grupo B de Lancefield, tambin se puede aislar del aparato genital y faringe de seres humanos. Sin embargo, las cepas que producen enfermedad en seres humanos difieren de las causantes de mastitis en el bovino.

Patgenos ambientales Estreptococos ambientales Los estreptococos ambientales (EA) son frecuentemente aislados, tanto de muestras de mastitis subclnicas como clnicas. La exposicin de los pezones a los EA puede ocurrir tanto durante el ordeo, entre ordeos, durante el perodo de vaca seca, as como antes del parto en vaquillonas primparas. Los EA, y S. uberis en particular, han sido aislados de material de cama para el ganado, suelo, rumen, materia fecal, vulva, labios, ollares, pezones y glndulas mamarias. Tambin los forrajes, como los ensilados, pueden ser una fuente de contaminacin por estos patgenos. En aquellos pases donde la produccin de leche se realiza en condiciones de confinamiento, se ha determinado que las camas constituidas por materia orgnica, muestran una mayor concentracin de EA que las de arena. A su vez, el nmero de organismos presentes en las camas de materia orgnica depende del tipo de material utilizado, siendo superior en las camas de heno e inferior en las de aserrn y viruta. Las camas de heno con alta carga de orina y heces se encuentran altamente contaminadas con EA y se ha demostrado que existe una asociacin entre la cantidad de organismos presentes en la cama y los hallados en la piel del pezn de las vacas de un mismo establecimiento. Tanto el diseo de las instalaciones como las prcticas de manejo utilizadas en cada establecimiento contribuirn a la contaminacin de la cama y a incrementar la exposicin de los pezones a los EA. Asimismo, en algunos estudios, se sealan influencias estacionales en la aparicin de mastitis por EA. La influencia de la contaminacin ambiental en sistemas intensivos y semi intensivos determina una mayor exposicin de los pezones a los EA. Sin embargo, tambin se reconoce que existen condiciones en aquellos pases donde la produccin lechera se realiza bajo pastoreo, que pueden llevar a altos niveles de exposicin a los EA. En las reas sometidas por largos perodos a sombras naturales y en las pasturas con alta carga animal o aquellas sometidas al sobre pastoreo durante pocas de lluvia pueden crearse condiciones de alta exposicin a los EA. Aunque no estn claramente determinadas cules son las mayores fuentes de contaminacin en estos casos, los EA son un problema significativo en pases donde las vacas son mantenidas el 100% del tiempo en condiciones de pastoreo. La higiene insuficiente durante el ordeo y el funcionamiento inadecuado de la mquina de ordear contribuyen a la aparicin de mastitis por EA. El riesgo de contraer nuevas IIM por EA, aparte de depender de la exposicin de los pezones a estos organismos, est influenciado por la etapa de lactancia, nmero de lactancia y estado nutricional e inmunitario. La proporcin de IIM causadas por EA es en general mayor durante el perodo seco que en la lactancia. La mayor proporcin de nuevas IIM se produce durante las dos semanas posteriores al inicio del perodo seco y en las dos semanas previas al parto. Este aumento de la susceptibilidad en el secado temprano se considera que est asociado a la falta del efecto de barrido que ejerce la leche en las vacas en lactancia, a cambios en la composicin de la secrecin mamaria y/o a la falta de un tapn de queratina en el canal del pezn. A su vez, el incremento en la susceptibilidad a las infecciones en el preparto se

debera al acmulo de secrecin por falta de barrido, prdida del tapn de queratina y/o inmunosupresin asociada al parto. La terapia antibitica convencional para vaca seca no tiene efecto en los ndices de IIM registrados previo al parto y la desinfeccin de pezones preparto ha mostrado ser de poco valor. Las IIM son frecuentes tanto en vaquillonas recin paridas como en vacas que finalizan el perodo seco. Las IIM causadas por el patgeno menor Corynebacterium bovis son consideradas como un factor de riesgo para infecciones por EA. En dos estudios se encontr un incremento significativo en el ndice de nuevas IIM por EA en aquellos cuartos infectados por C. bovis. Finalmente, existe abundante informacin acerca de la importancia de la influencia de factores nutricionales como la vitamina E y el selenio en la funcin de las clulas fagocticas. Algunos estudios detectaron un aumento del riesgo a padecer IIM por EA en aquellos animales con deficiencias de estos elementos al parto, perodo durante el cual se incrementa la susceptibilidad a los patgenos ambientales. En general se considera que las IIM subclnicas por EA son de corta duracin, aunque algunas pueden convertirse en crnicas. En un estudio se determin que la duracin promedio era de 12 das, con un rango de 1 a 370 das. Un 15% de las infecciones tuvieron una duracin mayor a 90 das. Estudios realizados en vacas en pastoreo encontraron que la duracin promedio de las infecciones por S. uberis fue de 38 das (ES 7,8 das). La eliminacin espontnea de las IIM por S. uberis oscila entre un 45 a un 78%. Aproximadamente un 50% de las IIM dan signos clnicos. Ms del 90% de los casos clnicos se manifiestan por la presencia de leche anormal con o sin inflamacin local, mientras que un bajo porcentaje pueden cursar con signos sistmicos como fiebre y anorexia. El ndice de nuevas IIM durante la lactancia no es constante, pero es mayor al principio de la lactancia y disminuye al avanzar la misma. Adems, se considera que el nmero de lactancia es tambin un factor de riesgo de infeccin por EA. En general, a medida que aumenta el nmero de lactancia el ndice de nuevas IIM subclnicas por EA aumenta. Sin embargo, los mayores ndices de casos clnicos por EA se han observado en vacas con menor nmero de lactancias. Coliformes Los organismos coliformes tienen como principal reservorio el medio ambiente de la vaca y contaminan la piel de los pezones fundamentalmente en el intervalo entre ordeos. Las IIM causadas por coliformes tienen frecuentemente una corta duracin en comparacin con aqullas causadas por organismos patgenos contagiosos. Aproximadamente el 80 a 90% de las IIM por coliformes que se presentan durante la lactancia pueden dar signos clnicos, con una alta proporcin de casos agudos y un 10% de casos peragudos; mientras que un alto porcentaje de las infecciones se presenta generalmente al periparto, coincidiendo con la inmunosupresin que tiene lugar durante este perodo. La incidencia y prevalencia de IIM por coliformes es mayor en vacas en estabulacin que en pastoreo. Sin embargo, la presencia de barro y las reas de sombra donde se agrupan las vacas durante el verano, pueden contribuir a la aparicin de mastitis por estos organismos. En nuestro pas, estudios de prevalencia de IIM realizados durante

las ltimas dcadas muestran un predominio de los patgenos contagiosos (Cuadro 1). Sin embargo, por la corta duracin de la mayora de las IIM por coliformes, los estudios de prevalencia tienden a subestimar la presencia de estas infecciones. Adems, cabe destacar que, si bien el tipo de explotacin lechera en nuestro pas es fundamentalmente pastoril, durante los ltimos aos se advierte una intensificacin de la produccin), que implica en muchos casos la concentracin de animales en reas reducidas, favoreciendo la exposicin a los organismos coliformes. La exposicin continua de los pezones a los coliformes determina que, tanto la desinfeccin de pezones post ordeo como la terapia antibitica de vaca seca no sean efectivos para controlar la mastitis por estos organismos. Consecuentemente, las medidas de control se deben dirigir a disminuir la exposicin de los pezones a las fuentes de estos organismos y/o aumentar la resistencia de la vaca a las IIM causadas por estos organismos.

PRDIDAS ECONMICAS: CONSECUENCIAS PARA LA INDUSTRIA, EL PRODUCTOR Y EL CONSUMIDOR La mastitis es considerada la enfermedad que ms costos ocasiona a la produccin lechera. Casi el 70 % de las prdidas econmicas son debidas a una reduccin en la produccin lctea causada por infecciones subclnicas. Esta reduccin va acompaada por una alteracin de la composicin lctea que produce una disminucin de su calidad. Durante la inflamacin se produce el pasaje de iones, protenas y glbulos blancos de la sangre a la leche. Adems, las clulas epiteliales mamarias que sintetizan los componentes fundamentales de la leche, sufren alteraciones de sus funciones, pudiendo eventualmente morir con la consecuente disminucin de la leche producida. Los glbulos blancos provenientes de la sangre y las clulas epiteliales descamadas del tejido mamario constituyen lo que se conoce genricamente como clulas somticas. Si bien hay variaciones en la cantidad de clulas somticas que responden a razones fisiolgicas (ej. nmero y etapa de la lactancia), la causa ms importante para su aumento es la infeccin intramamaria (IIM). Cunto mayor sea el nmero de cuartos y vacas con IIM en el rodeo, mayores sern los recuentos de clulas somticas (RCS) en la leche de tanque de fro. Para estimar las prdidas ocasionadas por la mastitis se han desarrollado numerosas tcnicas: relevamientos sobre la percepcin de los productores, correlaciones con los RCS, comparaciones entre rodeos, entre vacas del mismo rodeo, entre cuartos de la misma vaca, entre distintas etapas de la lactacin de una misma vaca o entre mellizas idnticas. Todas ellas tienen un sesgo innato porque es imposible medir directamente cuanto habra producido un animal si no hubiera padecido la inflamacin. Sin embargo, en la mayora de los casos, el sesgo tiende a subestimar la prdida real de produccin lctea que se ha producido. Las prdidas en produccin de leche por mastitis clnicas son mayores cuando la enfermedad se presenta al principio de la lactancia. Si se presenta antes del pico de lactacin se puede perder hasta un 11 % en produccin, comparado con un 6 % de reduccin cuando se produce la enfermedad en cualquier otra etapa de la lactancia. Adems, la mastitis clnica disminuye la duracin de la lactancia e incrementa la

posibilidad que el animal sea descartado. Por otra parte, las prdidas de produccin de leche en cuartos infectados con mastitis subclnica han sido estimadas entre el 10 y el 26 %. A nivel de leche a granel, altos RCS estn asociados con menor produccin lctea. Durante la inflamacin mamaria disminuyen los contenidos de grasa, lactosa y casena y aumentan las sales (cloruros, sodio), el pH, los cidos grasos voltiles y las clulas somticas. Los cambios ms importantes en la composicin de la leche que se producen durante la mastitis se pueden observar en el cuadro 2. Cuadro 2. Influencia de la inflamacin de la glndula mamaria bovina en la composicin de la leche (adaptado de Oliver y Calvinho, 1995) Componente Lactosa % Protena Casena -lactoglobulina -lactoalbmina Lactoferrina Inmunoglobulinas Seroalbmina -macroglobulina Antitripsina Grasa % cidos grasos Colesterol X X X X X X X X Aumentado Disminuido X X X X X

Otras prdidas asociadas incluyen los costos de medicamentos, el aumento de horas de mano de obra, la leche descartada por tratamiento antibitico, la reduccin en la vida til del animal, etc. Desde el punto de vista industrial, la mastitis altera las caractersticas organolpticas de la leche, tiene efectos directos sobre los cultivos iniciadores y la coagulacin por renina, disminuye el rendimiento de los quesos, afecta la estabilidad al calor de la leche ocasionando problemas para la condensacin y produccin de leche en polvo, y afecta la longevidad de los productos lcteos. La magnitud de los cambios de la composicin de la leche variar de acuerdo con la severidad de la respuesta inflamatoria, lo cual depender del tipo de organismo infectante, su patogenicidad, la cantidad de tejido infectado dentro de la glndula mamaria y la integridad de los sistemas de defensa de la vaca. Desde el punto de vista de los

consumidores, una leche masttica tiene un menor valor nutritivo. Adems, puede entraar riesgos para la salud pblica dado que, si bien la pasteurizacin de la leche elimina a los organismos patgenos, existen toxinas bacterianas que no se destruyen por los tratamientos trmicos usuales. Por otra parte, los residuos de antibiticos, si no fueran detectados por la industria y consecuentemente descartada la leche contaminada, podran convertirse en un riesgo potencial para la salud humana. DIAGNSTICO Las vacas afectadas con mastitis clnica muestran una marcada declinacin en la produccin lctea, signos cardinales de la inflamacin y cambios macroscpicos en la composicin de la leche, no requiriendo de pruebas complementarias para el diagnstico. En la mastitis subclnica, por el contrario, no se observan alteraciones macroscpicas de la leche pero se reduce la produccin y se altera la composicin qumica de la misma. La inflamacin debera ser analizada haciendo un seguimiento de diversos mediadores del proceso. Sin embargo, estos compuestos son inestables y su anlisis requiere tcnicas sofisticadas de laboratorio. Por este motivo, las pruebas de rutina slo detectan los cambios secundarios que tienen lugar en la composicin de la leche. El diagnstico de IIM se puede hacer por mtodos directos o indirectos. El primero es el aislamiento del agente causal. Para ello se toman muestras de leche en forma asptica sobre las cuales se practican anlisis bacteriolgicos. Para el segundo existen varias tcnicas, incluyendo la medicin de variables tales como el nmero de clulas somticas, concentracin de lactosa, albmina srica, N-acetil--D-glucosaminidasa (NAGasa), antitripsina, enzimas, aumento de la conductividad elctrica, y presencia de antgenos bacterianos. Recuento de clulas somticas En el caso del diagnstico de mastitis subclnica a nivel de rodeo, el mtodo ms utilizado es el recuento electrnico de clulas somticas en leche (RCS). El RCS es un indicador general de la salud de la ubre, ya que el factor ms importante responsable de altos RCS en leche individual de vacas es la IIM por patgenos de mastitis. Existe correlacin entre el nmero de vacas con cuartos infectados en un rodeo y el valor del RCS en leche de tanque. Aunque el RCS es un ndice confiable para medir la salud de la ubre en un rodeo particular, la evaluacin de un slo resultado puede llevar a una conclusin equivocada. Para evitar errores se deben promediar varios resultados y obtener la media geomtrica de los mismos. En general, un promedio inferior a las 200.000 clulas/ml en la leche total del tambo indica bajo nivel de IIM en el rodeo, mientras que por encima de las 500.000 cl./ml se considera un rodeo problema. Las clulas somticas (CS) se cuentan normalmente en leche a granel o en leche proveniente de los cuatro cuartos de la vaca. El RCS en leche de vaca y de tanque es utilizado como una herramienta diagnstica y de seguimiento de los progresos en el control de mastitis. Adems el RCS en leche de tanque es utilizado para determinar la calidad

sanitaria de la leche cruda y es generalmente incluido dentro de los parmetros que definen el pago de la leche. Por razones fisiolgicas, el nmero de CS en la leche de vaca es alto inmediatamente luego del parto, pero desciende rpidamente durante la primera semana de lactancia, aumentando nuevamente hacia el final de la misma. Promediando la lactancia, el nmero de CS es menor a 100.000/ml. Los valores de una vaca sana se mantienen dentro de estrechos lmites diarios, por lo tanto, el nmero de CS en leche depende de dos factores: el incremento real en la cantidad como consecuencia de la inflamacin y el factor de dilucin. El contenido de CS de la leche muestra una relacin inversa con el volumen de produccin diario, y a su vez, la produccin de leche depende de la disponibilidad de energa metabolizable, de otros nutrientes y de la eficiencia de la vaca para convertirlos en leche. Por lo tanto, el bajo estado nutricional tiende a incrementar el recuento de CS. Para determinar el nmero de clulas somticas en la leche existen mtodos "directos", que son aquellos que cuentan partculas o clulas y los "indirectos", que estiman la cantidad de clulas sobre la base de reacciones que ponen en evidencia componentes celulares. Tradicionalmente, la interpretacin de los RCS se ha basado en el nmero total de clulas presentes, incluyendo clulas epiteliales y glbulos blancos. En la leche de una glndula mamaria sana, se considera que el 10 al 20% est compuesto por clulas epiteliales. El aumento del nmero de CS est sujeto a distintos factores independientes de la infeccin. Sin embargo, la mayor influencia en el contenido individual de clulas de un animal la ejerce la inflamacin. Las clulas presentes en un cuarto sano son fundamentalmente macrfagos, mientras que durante la inflamacin se produce un aumento en la proporcin de leucocitos polimorfonucleares neutrfilos. En casos de mastitis, ms del 90% de las CS pertenecen a esta serie de clulas blancas. Cul es el nmero de clulas que se considera normal? Antes de considerar un valor como normal, se debe tener en cuenta que existen diferencias entre los valores de RCS de leche de vaca y de tanque. Cuando la leche de los cuartos afectados es mezclada con la leche de los cuartos normales, el RCS de la vaca y del rodeo tender a aumentar. Paralelamente, el contenido de clulas de la leche de tanque puede reflejar la dilucin de leches con contenidos de CS variables. Existe acuerdo general en que un elevado recuento de CS en leche de tanque est asociado a una prevalencia alta de mastitis en el rodeo. Sin embargo, la correlacin con el aislamiento bacteriano, considerado como mtodo de diagnstico directo, es pobre. Esto es debido a que existen variables que influyen sobre el contenido celular de la leche normal y anormal y a que los patgenos de mastitis presentan distintos patrones de eliminacin en la leche de vacas infectadas. Si bien los coeficientes de correlacin entre RCS y presencia de IIM estn en el orden de 0,5 a 0,6, la prevalencia de cuartos infectados dentro de un rodeo es el factor ms determinante en el RCS del mismo. Por eso, est generalmente aceptado que cuanto mayor es el recuento individual, mayor ser el problema de mastitis. En el cuadro N 3 se puede observar una gua que indica el nmero de animales infectados en un rodeo de acuerdo con el RCS obtenido. Cuadro N 3. Relacin entre el recuento de clulas somticas y el porcentaje de vacas infectadas en al menos un cuarto mamario dentro de un rodeo. (Adaptado de Philpot y Nickerson, 1992)

Recuento de clulas somticas 0 a 99.000 cl./ml 100.000 a 199.000 cl./ml 200.000 a 299.000 cl./ml 300.000 a 399.000 cl./ml 400.000 a 499.000 cl./ml 500.000 a 599.000 cl./ml

% de vacas infectadas 5 12 34 45 51 67

En los pases de la Unin Europea y en Nueva Zelanda, los valores mximos aceptados de CS en leche de tanque son de 400.000 cl./ml, considerndose como objetivo alcanzar un nivel de 200.000 cl./ml. Para qu sirve obtener un valor mensual de RCS de un tambo? Aparte de ser usado como una medida de la calidad de la leche y formar parte de los parmetros que definen el pago que recibe el productor, el RCS es una indicacin de la prevalencia de mastitis. Los datos obtenidos deben ser agrupados en un grfico, de forma tal que el patrn y los cambios que se presenten, puedan ser comparados con los de meses y aos anteriores. Si bien el RCS en leche de tambo brinda un arma excelente para monitorear la presencia de mastitis, no da informacin sobre el nmero de casos clnicos, qu vacas estn afectadas o qu tipo de agente infeccioso est presente. Esto es debido a las numerosas variables, ya mencionadas, que determinan el RCS. Un rodeo con un RCS superior a 500.000 cl./ml es considerado como un rodeo problema ya que la mastitis ser prevalente (aproximadamente ms de la mitad de las vacas infectadas en al menos un cuarto). Para determinar la severidad de un problema de mastitis en un rodeo con alto RCS, lo ideal es identificar qu organismos predominan por medio de anlisis bacteriolgicos, en base a muestreos individuales de vacas a los efectos de poner en prctica las medidas de control ms aconsejables. Otros mtodos indirectos Una prueba de uso extensivo es el Test de mastitis de California, conocida generalmente por su sigla en ingls "CMT" (California Mastitis Test). Esta prueba mide en forma indirecta la cantidad de clulas somticas suspendidas en la leche del cuarto mamario. Es muy prctica para utilizar al pie de la vaca, aunque la interpretacin de los resultados tiene cierto grado de subjetividad. La seroalbmina bovina (BSA) y la antitripsina son ejemplos de protenas de bajo peso molecular (aproximadamente 60.000) que pasan de la sangre hacia la leche durante el proceso inflamatorio. La BSA se puede cuantificar por medio de una prueba serolgica, utilizando anticuerpos. La desventaja de este mtodo es su costo, y el tiempo de incubacin, que es de 48 a 72 hs. Muchas de las actividades enzimticas de la leche cambian durante la inflamacin. Las enzimas relacionadas con la sntesis de leche disminuyen y simultneamente aumentan

las enzimas conectadas con la inflamacin. Las enzimas que se originan en las clulas blancas aumentarn en forma exponencial. Tal es el caso de la NAGasa que es liberada por los neutrfilos cuando son activados o destruidos. Los niveles de esta enzima pueden aumentar ligeramente si se somete a la muestra al proceso de congelacin-descongelacin, debido a que esto favorece la ruptura de clulas y por lo tanto la liberacin de la enzima. El contenido de lactosa de la leche se puede considerar como un indicador de la capacidad sinttica de las clulas secretorias mamarias y decrece en casos de mastitis. Sin embargo, su porcentaje de reduccin es relativamente bajo, por lo que es un indicador poco sensible de mastitis. La concentracin de cloro y sodio aumentan en la leche como consecuencia de la respuesta inflamatoria. Por otra parte, el contenido de potasio desciende y el pH se incrementa. La conductividad elctrica (CE) aumenta por el incremento de la concentracin inica y la disminucin del contenido graso. Este fenmeno permite el movimiento libre y directo de los iones hacia los electrodos. El aumento de la CE es por lo tanto indicativo de la presencia de mastitis subclnica. En la actualidad se utilizan medidores de CE acoplados a las unidades de ordeo. Estos miden la CE durante todo el ordeo y registran los valores mximos. Tambin existen medidores manuales que son utilizados en tambos con menor grado de automatizacin. La correlacin entre CE y lactosa es alta, ya que al disminuir el contenido de lactosa, debido a las reglas que rigen la presin osmtica de la leche, la concentracin de los iones sodio y cloro debe necesariamente aumentar. Los aparatos manuales que miden la CE cuentan con un visor digital donde se lee el resultado. Esta medicin es por lo tanto ms objetiva que la que se obtiene con otros mtodos indirectos utilizados al pie de la vaca, como el CMT. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que ambos mtodos miden distintas caractersticas de la respuesta inflamatoria. La deteccin del organismo causante de la infeccin intramamaria por medio de anlisis bacteriolgico es considerada como el mtodo de diagnstico directo. Existe correlacin general entre ste y los mtodos indirectos que reflejan los cambios en la composicin de la leche debido a la inflamacin. Sin embargo, se observan discrepancias ya que los mtodos indirectos miden distintos aspectos de la secuencia de cambios que tienen lugar cuando la glndula est infectada por un organismo patgeno. El cuadro 4 muestra la efectividad de tres mtodos indirectos para detectar cuartos infectados.

Cuadro 4. Efectividad de la conductividad elctrica (CE), recuento de clulas somticas (RCS) y test de mastitis California (CMT) para la deteccin de mastitis subclnica causada por patgenos primarios en muestras de leche previa al ordeo. (Fuente Vitulich et al., 1991). Cuartos infectados Log. RCS CE absoluta CE diferencial CMT 392 392 392 392 noCuartos infectados 60 60 60 60 Falsos positivos Falsos negativos (%) 31 19 10 33 (%) 25 53 65 20

Referencias: CE absoluta: valor obtenido tras la medicin de la CE en un cuarto mamario. CE diferencial: valor obtenido al sustraer el mnimo valor de CE obtenido en un cuarto del mximo observado en otro cuarto.

PREVENCIN Y TRATAMIENTO Los microorganismos causantes de mastitis producen formas distintas de enfermedad y por consiguiente no existe una nica tcnica que sirva para controlar a todos ellos simultneamente. Algunos organismos son parsitos obligados de la glndula mamaria mientras que otros estn diseminados en el medio ambiente. Esto hace que la erradicacin completa sea imposible. El objetivo de cualquier programa de control es disminuir la infeccin microbiana. Sin embargo, al desarrollar una estrategia de control es importante conocer dos trminos que hacen a la dinmica de la infeccin dentro de un rodeo: (A) incidencia de infecciones, que es la frecuencia con que se dan las nuevas infecciones en una poblacin en riesgo y (B) la prevalencia de infeccin, que es el nmero de infecciones presentes en un momento dado en un rodeo. Las diferencias entre A y B no son meramente acadmicas. Incidencia es igual a la prevalencia por la duracin de las infecciones. Por ello, en caso de infecciones crnicas, una disminucin en las nuevas infecciones (NI) podra causar poca diferencia en el nivel de infeccin en un corto plazo. Por otro lado, una reduccin en la prevalencia puede ser hecha sin alterar la incidencia. Como dijimos que el objetivo principal no es la erradicacin, el control debe ser una operacin de tipo continuo. De todas formas, existen algunos casos especiales en los cuales el uso de medidas excepcionales puede justificarse al inicio de un programa de control. La prevalencia en un momento dado (medida como el porcentaje de vacas o de cuartos infectados) depende de la frecuencia a la cual se presentan las NI y son eliminadas, aunque esta relacin no es simple. Si la incidencia excede la tasa de eliminacin de IIM, la prevalencia aumentar. Sin embargo, esta ltima no puede determinarse simplemente considerando las infecciones producidas y eliminadas. En realidad, como se puntualiz anteriormente, esta depende tanto de las NI como de su duracin. Este efecto se puede ilustrar simplemente: si se da una NI cada semana en un rodeo y dura una semana, entonces el nivel de infeccin ser 1; pero si cada infeccin dura 4 semanas, entonces ser 4. Los programas de control basados fundamentalmente en higiene y terapia, estn dirigidos a disminuir la incidencia de IIM y a acortar y eliminar las infecciones existentes.

La duracin de las infecciones ejerce un efecto considerable sobre la prevalencia de infeccin y su posibilidad de cambio. Es por ello que el xito de un programa de control depender marcadamente de la reduccin de la persistencia de las infecciones. Esto se logra solamente aumentando la tasa de eliminacin de las mismas. Aquellas infecciones que no se eliminen espontneamente, podrn ser eventualmente eliminadas por terapia o cuando las vacas son descartadas. Al presente, el mtodo ms efectivo que existe para eliminar una infeccin sin eliminar el animal del rodeo es la terapia antibitica utilizada en forma racional. Los programas de control de mastitis se basan en medidas de higiene durante el ordeo, terapia antibitica, control peridico de la mquina de ordear y descarte de animales con IIM crnicas. Estos programas fueron desarrollados a fines de la dcada del 60 y su aplicacin continua en los pases desarrollados ha llevado a un considerable progreso en el control de los patgenos contagiosos. Sin embargo, las distintas caractersticas epidemiolgicas de los organismos causantes de mastitis determinan que la desinfeccin de pezones post-ordeo y la terapia antibitica de vaca seca sean menos efectivas contra los patgenos ambientales, que pueden prevalecer en establecimientos con prcticas de manejo adecuadas para el control de patgenos contagiosos. MEDIDAS DE HIGIENE PARA EL CONTROL DE MASTITIS A. Higiene pre-ordeo La higiene pre-ordeo tiene por objetivo reducir al mnimo la contaminacin bacteriana de los pezones inmediatamente antes de la colocacin de las pezoneras. La higiene brinda un beneficio doble, ya que no solamente disminuye las posibilidades que los organismos ambientales banales accedan a la leche, sino que tambin minimiza la exposicin de la ubre a los organismos patgenos ambientales de mastitis. Adems, como la incidencia de IIM est correlacionada con el nmero de bacterias patgenas en la piel del pezn, la higiene previa reducir el nmero de organismos potencialmente causantes de mastitis. Existen diversos mtodos de higiene y preparacin de la ubre antes del ordeo que incluyen lavado, secado y desinfeccin de los pezones ("predipping"). Esta ltima prctica es considerada como una medida adicional tendiente a minimizar el nmero de organismos patgenos ambientales, particularmente para controlar mastitis por bacterias coliformes. Estudios controlados demostraron la efectividad del "predipping" con soluciones iodforas para disminuir la incidencia de nuevas IIM por coliformes y estreptococos ambientales. Sin embargo, tambin se ha demostrado la eficacia del "predipping" con soluciones conteniendo cido hipocloroso y dixido de cloro para reducir las nuevas IIM por otros patgenos, como S. aureus. B. Desinfeccin de pezones post-ordeo La desinfeccin de pezones post-ordeo elimina los organismos patgenos presentes en la punta de los mismos, impide la colonizacin de su orificio y evita o elimina la colonizacin de heridas y lesiones del pezn, colaborando para una pronta recuperacin del rea afectada.

La desinfeccin de pezones post-ordeo es un componente de gran efectividad dentro de los programas de control de mastitis bovina. Sin embargo, es necesario conocer los alcances de esta prctica y las precauciones que deben observarse al aplicarla. La antisepsia post-ordeo es una medida preventiva que tiende a evitar el establecimiento de nuevas IIM, pero no acorta la duracin de aquellas IIM presentes en un momento dado. Considerando que muchas IIM pueden persistir durante meses, esta prctica usada individualmente requerir un largo perodo de tiempo para reducir significativamente el nivel de infeccin de un rodeo. No obstante, su aplicacin en conjunto con medidas que tiendan a acortar o eliminar las IIM existentes, como la terapia antibitica y la eliminacin de animales con infeccin crnica, incrementar la efectividad del programa de control. La eficacia de la desinfeccin de pezones post-ordeo no es igual ante los distintos tipos de organismos patgenos causantes de mastitis. Esto no se debe a una resistencia inherente de algunos grupos de organismos a los productos germicidas, sino a las diferencias epidemiolgicas existentes entre distintos tipos de organismos. Estas caractersticas determinan que poblaciones de organismos como S. aureus y S. agalactiae, que se transmiten durante el ordeo, disminuyan marcadamente en la piel del pezn tras la aplicacin de antispticos post-ordeo, especialmente en vacas en pastoreo comparadas con aquellas en confinamiento. Sin embargo, la incidencia de IIM por patgenos ambientales, que llegan a la piel del pezn en el intervalo entre ordeos, cuando el poder germicida de los antispticos disminuye, es poco influenciada por esta prctica. Respecto de los SCN, considerados como parte de la flora normal de la piel de la ubre y los pezones, la desinfeccin de pezones post-ordeo tiene efecto no solamente sobre la prevalencia de los mismos, sino tambin sobre la distribucin de las distintas especies que conforman este grupo de organismos. Otra limitante es que los antispticos pueden contener productos irritantes que causan desde resquebrajamiento de la piel hasta severas lesiones en la punta del pezn, que predispondran a brotes de mastitis. Esto puede deberse a la alta acidez o alcalinidad del producto por errores en la fabricacin, al congelamiento o al exceso de calor durante el almacenamiento, a la estratificacin del producto por almacenamiento prolongado, a la falta de mezclado antes del uso y/o empleo extemporneo de desinfectantes para equipos de ordeo o productos caseros que no estn especficamente formulados para aplicar sobre la piel. Adems, la interaccin entre el agente germicida y condiciones climticas inclementes puede promover el agrietamiento de la piel de los pezones. Para evitar la potencial irritacin y preservar la piel del pezn, las formulaciones incluyen agentes emolientes y humectantes. Sin embargo, si estos productos se incorporan en concentraciones mayores al 10-12%, pueden reducir la actividad germicida del antisptico. La aplicacin del desinfectante, tanto pre como post-ordeo, puede hacerse en forma de inmersin del pezn en una solucin o pulverizacin sobre la piel del pezn. La primera requiere la inmersin del pezn utilizando recipientes en forma de copa que contienen la solucin desinfectante. No existe acuerdo sobre la porcin del pezn que debe cubrir el antisptico, aunque en general se recomienda sumergir al menos dos tercios del mismo. La aplicacin por pulverizacin debe hacerse con equipo que incluya un recipiente para contener la solucin antisptica, un sistema de presin y mangueras ubicadas estratgicamente en la sala de ordeo. La ventaja de este mtodo radica en que no existe contaminacin con materia orgnica, como en el caso de algunas copas para inmersin en

donde la solucin de reposicin se mezcla directamente con la que toma contacto con el pezn. Adems, no existiran prdidas por posibilidad de derrame como en el caso del uso de copas. Desde el punto de vista de la eficacia, no se detectaron diferencias entre ambos mtodos para reducir la incidencia de IIM por S. agalactiae en estudios controlados con desafo experimental. Sin embargo, en la prctica puede ocurrir que el uso de pulverizacin logra economizar tiempo a expensas de una menor cobertura de la piel del pezn. Por eso, la recomendacin de orden prctico es que la pulverizacin debe ser efectuada de forma tal que se cumpla con el requisito mencionado de cubrir adecuadamente la piel del pezn. Los agentes germicidas empleados ms frecuentemente como antispticos para pezones son los siguientes: iodforos, clorexidina, cido linear dodecil bencen sulfnico, hipoclorito de sodio, clorato de sodio con cido lctico o mandlico, dicloro triazino trione, protenas antimicrobianas (nisina) y cidos grasos. TRATAMIENTO DE LA MASTITIS CLNICA Normalmente, cuando un veterinario debe enfrentarse con un caso clnico, desconoce la etiologa del mismo. Si bien existen clasificaciones basadas en las caractersticas patolgicas de la inflamacin que tendran cierta correlacin con determinadas etiologas, las manifestaciones clnicas causadas por los diferentes organismos infectantes (ya sea presencia de grumos, decoloracin de la leche, inflamacin del cuarto) no son fcilmente diferenciables en la prctica, y el agente causal solo puede ser identificado en forma confiable por medio de anlisis bacteriolgico. Si bien la urgencia impone tratar el caso desconociendo la etiologa, debe destacarse que las diferencias patognicas y epidemiolgicas que existen entre los distintos organismos productores de mastitis tienen influencia directa en el resultado de la teraputica. Consecuentemente se considera fundamental conocer los organismos predominantes en un rodeo a los efectos de seleccionar el rgimen antimicrobiano ms adecuado. A tal efecto se recomienda tomar muestras de los casos clnicos antes del tratamiento y remitirla a un laboratorio para aislar e identificar los organismos causantes del cuadro. El principal objetivo de la terapia antibitica es eliminar al organismo invasor mediante la administracin de una cantidad ptima de droga activa en el sitio de la infeccin, que supere y mantenga por un tiempo adecuado una concentracin capaz de inhibir al organismo actuante. Esto implica que se debe conocer la susceptibilidad de los organismos actuantes frente a los antibiticos y tambin los niveles esperados de antibitico en el sitio de infeccin luego de su administracin. La susceptibilidad de una poblacin de bacterias a un agente antimicrobiano est representada por la concentracin inhibitoria mnima (CIM) de ese agente; mientras que los niveles esperados de antimicrobianos en la leche o tejido donde se localiza la infeccin est determinada por las propiedades farmacocinticas de las drogas. Estas propiedades, que son: liposolubilidad, grado de ionizacin, afinidad de unin con protenas y tamao molecular determinan la capacidad de la droga para penetrar los tejidos, su particin entre sangre y leche y la proporcin de droga activa no unida a las protenas in vivo. Consecuentemente, el conocimiento de estas propiedades y de la susceptibilidad a los antibiticos de los organismos prevalentes en un rodeo o rea determinada permitir entonces elaborar esquemas de tratamiento con una base racional.

Finalmente, es crtico que las vacas con mastitis agudas sean detectadas en forma temprana y tratadas rpidamente, ya que una demora de unas pocas horas puede ser la diferencia entre el xito y el fracaso. Los animales bajo tratamiento deben ser claramente identificados, ser ordeados ltimos y la leche debe ser descartada durante el tiempo recomendado por el laboratorio que elabor el producto. Los preparados caseros deben evitarse, aplicando slo formulaciones de reconocida eficacia. Vas de administracin Terapia parenteral. Si bien no existe un criterio uniforme para determinar la conveniencia de la va parenteral o intramamaria, en general se considera que aquellos organismos que estn en contacto con las superficies de los ductos y alvelos mamarios, como Streptococcus agalactiae y Staphylococcus coagulasa-negativos (SCN), son favorablemente tratados con antibiticos intramamarios ya que el contacto entre droga y organismo se produce rpidamente. En cambio, se reserva la va parenteral para aquellas infecciones que se radican en la profundidad del tejido o que por la severidad de la misma se considere que puede estar dificultada la difusin del antimicrobiano. Esto puede ocurrir en mastitis causadas por Staphylococcus aureus en las cuales puede haber una distribucin pobre o irregular de la droga en el parnquima intensamente inflamado por la compresin o bloqueo de los ductos por productos de la inflamacin. Esto justificara el uso de un tratamiento parenteral como adyuvante a la teraputica intramamaria, o como nico tratamiento. Como requisito para que una droga sea utilizada por va parenteral, esta debe tener un pasaje efectivo de sangre a leche, el cual depende de las caractersticas farmacocinticas antes mencionadas. La mayora de los antibiticos existen en sus formas ionizada y no ionizada en sangre y leche, pero en proporciones variadas debido a diferencias en el pH en sangre y leche. Un pequeo cambio en el pH puede afectar el grado de ionizacin y por lo tanto producir un profundo efecto en la distribucin de la droga en ambos compartimientos. El pH del plasma es relativamente constante (7,4), pero el de la leche es ms variable (6,5 en leche normal, pero se acerca al del plasma en leche masttica). La mayora de las drogas utilizadas para el tratamiento de mastitis clnicas son sales de cidos o bases orgnicas dbiles o compuestos anfteros. Las bases orgnicas lipoflicas dbiles tienden a acumularse en la leche en su forma ionizada luego de su administracin parenteral, llegando frecuentemente a concentraciones mayores que las obtenidas en sangre. Las bases orgnicas dbiles, acceden a la leche con dificultad y sus concentraciones en leche son menores que las obtenidas en sangre. En casos de mastitis aguda, la barrera sangre/leche est daada parcialmente y por lo tanto el pH de la leche se acerca al de la sangre; la concentracin de la droga en la ubre se aproximar entonces a la concentracin de la fraccin no ligada a protenas sricas. No hay ninguna droga que rena todos los requisitos considerados ideales para un antibitico que se administre por va sistmica, pero el examen de todas las caractersticas: propiedades antibacterianas, espectro y propiedades farmacocinticas, permitirn la adecuada seleccin de las mismas. El cuadro 1 muestra la distribucin de algunos antibiticos luego de su administracin parenteral o intramamaria. La penicilina G, ampicilina y cefalosporinas tienen acceso limitado a la leche normal y concentraciones levemente superiores pueden obtenerse en leche masttica, pero

siempre inferiores a las concentraciones consideradas efectivas. El penetamato en cambio, produce altas concentraciones de penicilina G en leche normal y menores en leche alcalina. La gentamicina es un antimicrobiano del grupo de los aminoglucsidos que, a pesar de ser base ionizada poco liposoluble, puede mantener concentraciones teraputicas efectivas frente a organismos Gram negativos. Las sulfonamidas y sulfonamida ms trimetoprim deben administrarse por va intravenosa para alcanzar concentraciones teraputicas, pero debido a que pierden parte de su actividad antibacteriana en leche, las concentraciones alcanzadas solo son activas contra los patgenos ms sensibles. Los macrlidos, como la espiramicina, eritromicina, tilosina, tilmicosina, pueden concentrarse en leche normal y, aunque se obtengan concentraciones menores en leche masttica, pueden mantener concentraciones efectivas contra S. aureus por al menos 12 hs. En resumen, y teniendo en cuenta el espectro de estos antibiticos, frente a mastitis por Gram positivos las drogas de eleccin seran los macrlidos, mientras que frente a los coliformes las de eleccin seran gentamicina, cloramfenicol y como segunda eleccin combinaciones con trimetoprima. Cuadro 1. Clasificacin de drogas antibacterianas de acuerdo con su distribucin potencial en la glndula mamaria de su administracin por va parenteral e intramamaria. Parenteral Buena distribucin Eritromicina Tilosina Clindamicina Penetamato Espiramicina Florfenicol Lincomicina Tilmicosina Norfloxacina Cefquinome Nitrofuranos Eritromicina Ampicilina Amoxicilina Cefalexina Tilosina Penetamato, etc. Intramamaria

Distribucin limitada Penicilina G Ampicilina Amoxicilina Penicilina G Cloxacilina Cefoxazole

Tetraciclinas Cefalosporinas Novobiocina, etc. Distribucin pobre Dihidroestreptomicina Neomicina Kanamicina Gentamicina Polimixinas, etc.
Fuente: adaptado de Ziv, 1992.

Cefacetrile Tetraciclinas Cefapirin, etc.

Neomicina Kanamicina Dihidroestreptomicina Gentamicina Polimixinas, etc.

Terapia intramamaria. Las formulaciones constan tanto de monodrogas como de combinaciones de drogas (tanto de antimicrobianas, como de antimicrobianas y auxiliares). Por ejemplo, la neomicina ha sido utilizada como el ingrediente principal en preparaciones combinadas debido a su amplio espectro. Eritromicina, polimixina B, bacitracina y penicilina G han sido utilizadas por la accin contra S. aureus de la eritromicina, la actividad sinrgica y antifngica de la polimixina B y porque la penicilina G y la bacitracina posiblemente refuerzan la actividad de la neomicina. Estos fundamentos tericos son a veces difciles de respaldar y por ejemplo en la prctica la penicilina G sola no se ha mostrado inferior a estas preparaciones. Actualmente, las cefalosporinas de amplio espectro tienden a reemplazar este tipo de combinaciones ya que tienen una buena actividad contra muchos Gram negativos y contra S. aureus productores de Beta-lactamasa. Como regla, se preferirn aquellas drogas que demuestren una buena distribucin en la glndula, dejando como segunda eleccin aquellas que muestren una distribucin ms limitada (cuadro 1). Desafortunadamente, algunas de las drogas ms activas in vitro, no poseen las mejores caractersticas de distribucin. Esta puede ser una de las causas que motivan la discrepancia observada entre curaciones clnicas y bacteriolgicas y pruebas de susceptibilidad in vitro. Se ha determinado que la formulacin del antibitico intramamario tiene una influencia significativa en su distribucin en la glndula mamaria, advirtindose que el tamao de partcula es un factor importante para determinar la distribucin de la droga en el tejido mamario. Respecto de la duracin del tratamiento, en general conviene administrar al menos 3 das aquellos productos que son bien absorbidos. En los ltimos aos, para limitar las prdidas debidas a descarte de leche por la presencia de residuos antibiticos posttratamiento, las compaas farmacuticas han focalizado su inters en el desarrollo de drogas intramamarias de corto perodo de eliminacin, algunas consistentes en una aplicacin nica (cefacetril, pirlimicina). Debe tenerse en cuenta que la aplicacin del

tratamiento por cortos perodos puede en algunos casos determinar que no siempre se obtengan curaciones bacteriolgicas y se mantengan IIM subclnicas dentro del rodeo. Al administrar la medicacin intramamaria, debe tenerse en cuenta que el uso de productos no formulados para esa va y en condiciones higinicas inadecuadas puede llevar a la proliferacin de infecciones por patgenos ambientales que son generalmente ms severas que la infeccin original. Adems, existe suficiente evidencia cientfica que demuestra que la insercin total de una cnula dentro del canal del pezn puede aumentar el ndice de nuevas IIM en ese cuarto. La introduccin parcial de la cnula (solamente en la entrada del canal del pezn) no solamente reduce el riesgo de llevar bacterias del canal del pezn a la cisterna sino que tambin le permitir al antibitico ser ubicado cerca del probable sitio inicial de infeccin (colonizacin del canal del pezn). EFECTIVIDAD DE LOS TRATAMIENTOS Curacin clnica vs. curacin bacteriolgica El xito del tratamiento depende del microorganismo causal, la naturaleza y localizacin de la infeccin, el antibitico utilizado y la concentracin del mismo en el sitio de infeccin. La desaparicin de los sntomas clnicos, conocida como curacin clnica, puede ser uno de los objetivos de la terapia antibitica. Sin embargo, esto no es sinnimo de curacin bacteriolgica, que indica la eliminacin del agente causal de la ubre. Los criterios para determinar la curacin bacteriolgica no son siempre uniformes y debern ser definidos teniendo en cuenta el organismo predominante en el rodeo y los objetivos fijados en el programa de control. En cualquier caso, se debe tener en cuenta que las IIM no curadas pueden transformarse en crnicas, constituyndose en una fuente constante de infeccin para los cuartos sanos del mismo animal y del resto del rodeo. En la mayora de los casos, cuando un cuarto clnicamente afectado es tratado con antibiticos, este responde en un da o dos y la mayora de las infecciones son eliminadas. Esto es generalmente vlido para la mayora de las infecciones causadas por estreptococos y por SCN. La excepcin a este patrn es el tratamiento de infecciones por S. aureus donde muchas veces la respuesta clnica es buena pero el porcentaje de eliminacin de las IIM es variable, pudiendo ser menor del 35%. Normalmente esto se debe a una re-emergencia del organismo que origin la infeccin siguiendo a un xito clnico aparente. La curacin total, la cual incluye la erradicacin del agente causante y el retorno de la funcin del rgano afectado a la normalidad, parece ser difcil de obtener. Luego del tratamiento de mastitis con antibiticos, la excrecin de la bacteria en la leche cesa por completo en el caso de curacin o por un perodo variable en el caso de falla. Por lo mencionado anteriormente, la evaluacin de un rgimen teraputico para mastitis clnicas no es un proceso simple. La eficacia puede ser evaluada al principio sobre infecciones experimentales, pero luego sern necesarias pruebas en condiciones naturales. La mayora de los estudios de eficacia de terapia antibitica de mastitis clnicas no incluyen controles sin tratamiento. Esto se debe a que gran parte de estos estudios son realizados en rodeos comerciales en los cuales no es posible dejar vacas sin tratar. Respecto de estudios sobre eficacia de terapia frente a estreptococos ambientales, en los pocos ensayos en que se incluy un grupo control que no recibi tratamiento los porcentajes de curacin bacteriolgica fueron generalmente inferiores a los obtenidos en los grupos

tratados, salvo en un caso en que fueron similares. Los porcentajes de curacin bacteriolgica de mastitis causadas por EA, utilizando distintos antibiticos oscilan desde un 36% hasta un 90%. En estudios de eficacia realizados en la EEA Rafaela del INTA utilizando terapia combinada (parenteral e intramamaria) y solamente intramamaria se obtuvieron porcentajes de curacin superiores al 70%. En el cuadro 2 se resumen algunos resultados de ensayos realizados en el INTA Rafaela para determinar la eficacia de preparaciones antibiticas en el tratamiento de mastitis clnicas. Cuadro 2. Eficacia de curacin bacteriolgica de tratamientos antimicrobianos frente a casos de mastitis clnicas causadas por Streptococcus no agalactiae en cuatro ensayos independientes. Tratamiento A B C D Casos (n) 18 20 11 13 Das post tratamiento 28 21 14 14 Curacin (%) 77,7 85 72,7 77

Referencias: A: penetamato intramuscular y penetamato, dihidroestreptomicina, framicetina y prednisolona intramamaria (Calvinho et al., 1996). B: espiramicina intramuscular y espiramicina, neomicina y flumetasona intramamaria (Calvinho et al., 1988). C: Cefacetril, D: Amoxilina, cido clavulnico y prednisolona (datos no publicados).

El hallazgo de porcentajes de curacin bacteriolgica similares en el grupo control sin tratar en un estudio controlado, gener controversia sobre el valor de la terapia antibitica en casos clnicos de mastitis por estreptococos ambientales. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que el beneficio econmico por el menor gasto de antibitico en el grupo control, se diluy por el mayor nmero de reincidencia de casos clnicos observados en este grupo durante la lactancia. Es importante considerar que los beneficios del tratamiento antibitico no solamente apuntan a aliviar los signos de inflamacin, sino que tambin contribuyen a disminuir la prevalencia de mastitis subclnica con sus prdidas asociadas. Prediccin del resultado de la terapia antibitica Los resultados de las pruebas de susceptibilidad in vitro a los antibiticos muestran una correlacin unas veces variable y otras veces pobre con los de la teraputica. Esto ha llevado a la bsqueda de respuestas que expliquen los mecanismos de estas fallas. En principio, se debe tener en cuenta que el antibitico que administramos no determinar una esterilizacin qumica de la glndula mamaria, sino que colaborar para que el hospedador pueda librarse de la infeccin. Los factores que estn asociados con el resultado de la terapia antimicrobiana tienen relacin con la vaca, el microorganismo y el antimicrobiano empleado. Las fallas teraputicas ms frecuentes se producen frente a S. aureus y por lo tanto han sido objeto de estudios ms detallados. Los factores que inciden en los mecanismos de las fallas teraputicas en tratamientos de mastitis por S. aureus son los siguientes: (A) de la vaca: (1) edad, (2) cronicidad de la infeccin, y (3) nmero de cuartos

afectados, (4) recuento de clulas somticas antes de comenzar el tratamiento (en casos subclnicos). (B) De la bacteria (1) desarrollo de resistencia a los antibiticos; (2) generacin de latencia metablica dentro de las clulas eucariotas; (3) generacin de formas L de bacterias (sin pared celular), (4) reinfecciones. Del antimicrobiano: (1) concentracin inadecuada del antibitico en el sitio de infeccin (falta de mantenimiento de un nivel adecuado de antibitico por el perodo de tiempo requerido o por limitantes farmacocinticas de la droga utilizada); (2) uso de antibiticos que dificultan la fagocitosis. Estos factores determinan que la sola medicin de la susceptibilidad a determinado antimicrobiano de un aislamiento de S. aureus no ser un mtodo efectivo para predecir el resultado de la terapia antibitica. Adems, el mtodo de difusin en agar o antibiograma, que se usa rutinariamente, expresa los patrones de susceptibilidad en trminos cualitativos; esto es: como sensible, intermedio o resistente. Este mtodo se correlaciona con mtodos cuantitativos, ya que las potencias de los discos que se usan, estn ajustadas de acuerdo con las concentraciones de antibiticos esperadas en plasma luego de la administracin parenteral de la droga, pero no tiene gran relacin con la concentracin de antibitico en otros fluidos corporales. Para la mayora de los discos de antibitico utilizados rutinariamente en esta prueba los criterios de interpretacin de los resultados han sido extrapolados de pruebas realizadas con organismos patgenos humanos y basados en concentraciones de antibiticos obtenidas en plasma humano luego de la administracin de la dosis usual. Por lo tanto, su capacidad para pronosticar el posible resultado de un tratamiento de mastitis es discutible. Para el trabajo de mastitis, lo correcto es el tipo de evaluacin cuantitativa que se obtiene por medio de los mtodos de dilucin en caldo o agar, lo cual en estos momentos es impracticable para la mayora de los laboratorios de rutina. De todas formas, el mtodo de difusin en agar presta utilidad, ya que existen criterios de interpretacin para algunos antibiticos frente a determinados patgenos de mastitis. Los patrones de susceptibilidad a los antibiticos estn en constante cambio, por lo que estos anlisis deberan repetirse luego de unos aos para prevenir cambios de flora y/o de sensibilidad a los antimicrobianos. Este conocimiento es de utilidad en la seleccin del antibitico para uso teraputico, aunque no garantice per se el xito del tratamiento. TRATAMIENTO DE LA MASTITIS SUBCLNICA Aunque el tratamiento de los casos clnicos es exitoso en alrededor del 80 % de las infecciones estreptoccicas, slo el 30 % de las infecciones estafiloccicas clnicas son eliminadas de esta manera. Ms an, menos de la mitad de las IIM subclnicas presentes en un tambo en un perodo de 12 meses causan enfermedad clnica y pueden ser detectadas por el ordeador. Por estas razones, el tratamiento de las mastitis clnicas es relativamente inefectivo en eliminar las IIM de un rodeo y es necesario tratar tambin las infecciones subclnicas Tratamiento durante la lactancia. El tratamiento de las IIM subclnicas durante la lactancia, conocido como "terapia blitz" ("blitz" significa relmpago) se utiliza para superar problemas derivados de una alta prevalencia de infecciones por Streptococcus agalactiae. La misma se fundamenta en que este organismo es un patgeno obligado de la glndula mamaria, no existiendo fuentes de contagio extramamarias, y es altamente sensible al tratamiento antibitico. Por lo tanto, si la prctica se

realiza correctamente y se instrumenta un programa de control para prevenir infecciones posteriores, es posible la erradicacin de este organismo de un rodeo lechero. El tratamiento consiste en la identificacin por cultivo bacteriolgico de las vacas infectadas con S. agalactiae y el tratamiento simultneo con un antimicrobiano de eleccin. Al tratar simultneamente se lograr una reduccin inmediata de los niveles de infeccin y de contagio, lo cual se ve reflejado en una brusca cada en los recuentos de clulas somticas (RCS). Si bien la realizacin de este tipo de terapia simultnea implica un alto costo de diagnstico de laboratorio, el costo de antibitico y el descarte de la leche de las vacas tratadas, existe amplia evidencia de los beneficios que se obtienen tras su ejecucin. Sin embargo, debe enfatizarse que este tipo de prcticas debe estar siempre bajo la supervisin de un profesional veterinario y debe ser considerada como un instrumento dentro de un programa integral de control de mastitis. Los programas de control de IIM causadas por S. aureus incluyen desde la aplicacin del clsico programa de los 5 puntos hasta planes basados en la identificacin y segregacin de los animales infectados por este organismo. Tradicionalmente, las mastitis subclnicas causadas por S. aureus son tratadas al inicio del perodo de vaca seca ya que las tasas de curacin son ms altas que aquellas obtenidas al tratar los casos clnicos. Sin embargo, en muchas oportunidades las dificultades de manejo suscitadas por la aplicacin de los planes de segregacin, ha determinado que considerar el uso de terapia antibitica para IIM subclnicas causadas por este organismo. Hasta mitad de la pasada dcada no se haban detectado mejoras significativas en las tasas de curacin con los regmenes y drogas antibiticas disponibles, tanto en mastitis clnicas como subclnicas causadas por S. aureus. En los ltimos aos los esfuerzos se centraron tanto en el uso de terapias intramamarias y sistmicas combinadas, como en las terapias intramamarias extendidas para tratar mastitis subclnicas con el fin de mejorar las tasas de curacin. Las tasas de curacin en mastitis subclnicas por S. aureus varan desde el 4 al 92%, lo cual se ha relacionado tanto a factores de la vaca, del tratamiento antibitico, del propio estado infeccioso y del diseo de los distintos experimentos. Dentro de los factores de la vaca y estado infeccioso se ha determinado que el nmero de lactancia, el recuento de clulas somticas, la duracin de la infeccin y el momento de la lactancia, tienen influencia significativa en el resultado de la terapia antibitica frente a este organismo. La droga ms utilizada para terapia extendida ha sido la pirlimicina. Se han experimentado tratamientos de distinta duracin obtenindose resultados variables aunque promisorios. En este tipo de tratamientos debe hacerse un riguroso anlisis costo-beneficio considerando variables como costo del antibitico, costo de la leche descartada, tasas posibles de curacin, aumento de riesgo de residuos de antibiticos en leche, posibilidad de curacin, aumento de produccin post-tratamiento, descenso del recuento de clulas somticas (RCS), etc. En cualquier caso, el uso de la terapia extendida para casos subclnicos de S. aureus debe ser cuidadosamente evaluado y aplicado dentro del marco de un programa de control de la enfermedad. Tratamiento de vaca seca. Tratamiento a todo el rodeo. Aunque el tratamiento de las IIM subclnicas puede ser administrado durante la lactancia, el mejor momento para tratar dichas infecciones es al final de la misma. Este ltimo elimina ms del 85 % de las infecciones estreptoccicas y del 50 %

de las estafiloccicas. El tratamiento de las IIM subclnicas al secado con antibiticos en base de liberacin lenta acorta la duracin de las infecciones existentes (reduciendo su prevalencia) pero adems disminuye efectivamente la incidencia de IIM durante el perodo seco. Esto lleva a una menor prevalencia de IIM al parto y de mastitis clnicas durante la lactancia subsiguiente. La reduccin del nmero de IIM al parto por la utilizacin del tratamiento de vaca seca se produce tanto en los sistemas de secado brusco como gradual. La terapia de vaca seca reduce en un 70 % el nivel de infeccin en el perodo que va del secado al parto, siendo ms eficaz que el tratamiento durante la lactancia y permitiendo una mejor regeneracin del tejido daado. La recomendacin general es tratar todos los animales al final de su lactancia. El tratamiento de secado a todo el rodeo reduce significativamente la incidencia de IIM durante el perodo seco en animales sin IIM en el momento del secado. Esto es debido a la persistencia de las preparaciones antibiticas de liberacin lenta durante las etapas iniciales y medias del perodo seco y probablemente a un sellado ms rpido del canal del pezn en los animales tratados. Como limitante a la eficacia de esta prctica, se debe considerar que las formulaciones para vacas seca se muestran ms activas durante las primeras semanas del perodo de secado y probablemente brinden poca o ninguna proteccin contra las IIM que se producen durante el crtico perodo del periparto en el cual la vaca est expuesta a contaminacin con estreptococos ambientales. Como recomendacin higinica, para evitar contaminaciones al efectuar el tratamiento de vaca seca se debe desinfectar la punta del pezn con un algodn embebido en alcohol 70, comenzando por los pezones que quedan ms lejos del operador y terminando con los que tiene frente al operador. Para infundir el antibitico se sigue el camino inverso, comenzando por los pezones ms cercanos y terminando por los del lado opuesto. En caso de utilizar preparaciones con cnulas largas, es conveniente insertar la misma slo parcialmente. Tratamiento selectivo. El tratamiento selectivo de vaca seca es generalmente sugerido esgrimiendo razones econmicas y otras propias del riesgo del uso de antibiticos en forma masiva. El criterio de seleccin ideal es la deteccin de los animales con IIM mediante cultivos bacteriolgicos. Sin embargo, como esta prctica genera altos costos, para la identificacin de los animales supuestamente infectados que sern sometidos al tratamiento se utilizan generalmente criterios indirectos de seleccin de los animales. Estos criterios implican el uso del Test de mastitis California, RCS, antecedentes de mastitis clnicas durante la lactancia, nivel de produccin, etc. y tienen distinta capacidad para detectar animales que realmente estn infectados. En estos casos, a medida que aumenta la prevalencia real de IIM se incrementa tambin la proporcin de animales falsos negativos, es decir, la proporcin de animales que teniendo IIM dan negativos al criterio diagnstico y por lo tanto, no son tratados (Cuadro 3).

Cuadro 3. Probabilidad de dejar animales infectados sin tratar (falsos negativos) en un rodeo de 100 animales en ordeo en dos combinaciones de prevalencia real de infecciones intramamarias y criterios de seleccin. Falsos negativos (% del total del rodeo) Prevalencia real de IIM (%) CMT AMC 5 1,25 2,50 30 7,50 15,00
CMT: California Mastitis Test. AMC: Antecedentes de mastitis clnicas. Fuente: Resumido de Tarabla 1996.

En estos casos se debe justipreciar el costo de tratar animales no infectados versus el costo de dejar en el rodeo animales infectados sin tratar. Este ltimo ser ms alto cuanto mayor sea la prevalencia real de IIM. El tratamiento selectivo puede ser til en aquellos establecimientos con controles y registros estrictos y un nivel muy bajo de IIM. Para ello han sido recomendados los antibiticos de corta accin, mientras que los formulados en bases de liberacin lenta, como los que se usan en Argentina, deberan ser utilizados en estrategias donde se traten todos los animales del rodeo. Adems del efecto de la prevalencia real de IIM sobre la proporcin de animales falsos negativos, el riesgo de incluir uno o ms animales con IIM en el grupo no tratado tambin aumenta a medida que se incrementa el tamao del rodeo. Incluso en pases donde la baja prevalencia de IIM permite un vasto uso de la terapia selectiva se trata a todo el rodeo cuando hay problemas de mastitis clnicas o altos RCS. Por otra parte, el tratamiento selectivo obviamente no previene las nuevas IIM que se producen en el perodo seco en los animales que, por haber dado negativo a la prueba diagnstica no reciben tratamiento. Terapia intramamaria y selladores internos Durante los ltimos aos se ha desarrollado un sellador interno del pezn que cumple una funcin similar al tapn de queratina, evitando el ingreso de microorganismos por el pezn durante el perodo seco. Este producto est formulado con subnitrato de bismuto y Alugel 30DF en una base de parafina. Este compuesto se ha utilizado experimentalmente en rodeos con RCS inferiores a 200.000 cl./ml para la prevencin de IIM y no va dirigida a eliminar IIM presentes al momento del secado. Los trabajos publicados han mostrado que el efecto profilctico durante el perodo seco es semejante al obtenido con el uso de antibiticos. Algunos autores han utilizado selladores internos en forma combinada con antibiticos para vaca seca a los efectos de mantener la capacidad de eliminar IIM del antibitico y obtener efecto preventivo del sellador durante el preparto. Es necesaria mayor experimentacin con esta prctica y un anlisis costo-beneficio a los efectos de determinar la conveniencia de la adopcin en cada caso particular. Terapia parenteral La va comnmente utilizada para terapia antibitica de secado es la intramamaria con antimicrobianos formulados en bases de liberacin lenta. Se estima que se obtiene una concentracin teraputica durante los primeros 10 das post secado, mientras que los residuos de antimicrobianos pueden detectarse en secreciones de vaca seca por perodos

variables que oscilan entre los 28 y 49 das. Sin embargo, clculos tericos indican que la concentracin de antibitico libre que acta contra las bacterias presentes en la glndula mamaria sera demasiado baja en todo momento luego de la aplicacin de la formulacin y los cambios inflamatorios podran bloquear la dispersin de la droga en el interior de la glndula. Adems, existe el riesgo de introducir organismos patgenos con la cnula a travs del orificio del pezn. Estos clculos tericos han alentado la utilizacin de la va parenteral de administracin basndose en que se podra lograr una mejor distribucin de la droga en el tejido mamario, evitar los riesgos implcitos en la administracin intramamaria, incrementar la eficacia de curacin observada con la terapia tradicional, simplificar la rutina del secado y reducir los costos de la terapia antibitica. En aos recientes se ha aplicado terapia parenteral para vaca seca, ya sea utilizando esta nica va de administracin o combinndola con terapia intramamaria, obtenindose resultados dispares. La administracin subcutnea de tilmicosina al secado y un tratamiento basado en la administracin simultnea de oxitetraciclina intramuscular y cefapirina intramamaria no incrementaron la eficacia de curacin de IIM causadas por S. aureus. Sin embargo, el tratamiento intramuscular con tilosina dos semanas previas a la fecha probable de parto redujo las IIM luego del parto y una dosis nica de oxitetraciclina al secado redujo la incidencia de IIM durante el perodo seco. Adems, una formulacin conteniendo espiramicina y estreptomicina administrado en una dosis nica por va intramuscular al momento del secado se mostr eficaz para prevenir nuevas IIM durante el perodo seco. Las experiencias realizadas se han basado fundamentalmente en clculos tericos y caractersticas farmacocinticas extrapoladas de trabajos realizados en vacas en lactancia. Sern necesarios mayores estudios para determinar regmenes de dosificacin adecuados y eficacia de las preparaciones consideradas ms aptas para este tipo de teraputica. REFERENCIAS
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