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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA GUIA COMPONENTE PRCTICO DEL CURSO:

: 305689 BIOTENOLOGA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA


ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA

GUA COMPONENTE PRCTICO

305689 BIOTECNOLOGA NOMBRE DEL DIRECTOR Fedra Lorena Ortiz Benavides

NOMBRE DEL ACREDITADOR Acreditador

SAN JUAN DE PASTO Enero de 2014

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2. ASPECTOS DE PROPIEDAD INTELECTUAL Y VERSIONAMIENTO


Autor Gua: FEDRA LORENA ORTIZ BENAVIDS Versiones: 2006-2010 Actualizaciones: FEDRA LORENA ORTIZ BENAVIDES Versiones: 2010 - 1 - 2010 2-2014-1 El presente Documento se rige por la normatividad que con base a derechos de autor de publicaciones universitarias ha expedido la Direccin Nacional de Derechos de Autor, de all que el presente documento se reglamente bajo la Circular No 16 del 15 de Abril de 2002 expedida por este organismo de control pblico a las Instituciones de educacin superior, sobre "Los Derechos de Autor en el mbito Universitario". Al igual que los reglamentos sobre derechos de Autor consagrados en la Ley No. 23 de 1982 sobre Derechos de Autor del congreso de la repblica de Colombia y la Ley No. 44 de 1993 que hace adiciones a la Ley 23 del 82. Para tales efectos de establece que el presente Documento hace parte de los repositorios documentales y digitales la Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD de Colombia.

@CopyRight Universidad Nacional Abierta y a Distancia ISBN 2014 Centro Nacional de Medios para el Aprendizaje

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3. INDICE DE CONTENIDO
Pg. 4. LISTADO DE TABLAS 4.1 LISTADO DE GRFICOS Y FIGURAS 5. CARACTERSTICAS GENERALES 6. DESCRIPCIN DE PRCTICAS PRACTICA No. 1: Determinacin de la curva de crecimiento en organismos unicelulares PRACTICA 2:Cuantificacin de azucares PRACTICA 3:Aislamiento de microorganismos productores de amilasa PRCTICA 4: Aislamiento de ADN Bacteriano 7. RUBRICA DE EVALUACION DE LAS PRCTICAS 8. FUENTES DOCUMENTALES 4 4 5 8 12

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4. LISTADO DE TABLAS

TABLA 1. Resultado de cuantificacin de azucares TABLA 2: Recuento de colonias

4.1 LISTADO DE GRFICOS Y FIGURAS: En este documento no hay grficos y figuras

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5. CARACTERSTICAS GENERALES

Introduccin El desarrollo de la biologa en las ltimas cuatro dcadas, ha hecho posible el desarrollo de sofisticados, procedimientos para el aislamiento, manipulacin y expresin de material gentico, lo que ha llevado consigo al avance de una nueva disciplina:
La

Biot e cno log a . , la cual tiene aplicaciones tanto en la investigacin

bsica, como en la aplicada. Las tcnicas de esta ciencia se han utilizado para estudiar los mecanismos de la replicacin y expresin gnicas en procariotas, eucariotas y sus virus. Algunos de los ms importantes descubrimientos bsicos de la gentica se han realizado utilizando tcnicas ingenieriles. En cuanto a la investigacin aplicada, la Biotecnologa permite el desarrollo de cultivos microbianos capaces de fabricar productos valiosos, tales como la insulina humana, la hormona humana del crecimiento, interfern, vacunas y enzimas industriales. La aplicacin industrial de la Biotecnologa, parece tener un potencial ilimitado.

La Biotecnologa, se ha convertido en la herramienta para un nuevo desarrollo social, basado en el conocimiento del funcionamiento de la vida y sus posibilidades de manipularlo y transformarlo. Su impacto en la Medicina, la agricultura, el mejoramiento de las especies, la evolucin, la industria alimenticia y la farmacologa, dan muestra de la importancia que tiene esta disciplina, que se ha convertido sin lugar a dudas en la base de la revolucin tecnolgica que ha acaparado la atencin de los cientficos y gobiernos como posible estrategia para encontrar soluciones a los problemas que aquejan a la humanidad.

Justificacin

Dada la naturaleza interdisciplinaria de la Biotecnologa, se ha desarrollado esta gua de laboratorio con el fin de que los estudiantes

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complementen los conceptos tericos con la prctica, al mismo tiempo que desarrollen competencias procedimentales que les permita en un futuro prximo llevar a cabo proyectos de investigacin pero igualmente les permita mejorar su desempeo laboral en la medida que sean capaces de buscar soluciones prcticas a problemas Biotecnolgicos industriales. Intencionalida des formativas Propsitos: Fomentar las bases conceptuales y procedimentales que le permitan al estudiante hacer uso de nuestros recursos biolgicos de forma sustentable y de esta forma contribuya con el desarrollo tecnolgico y cientfico de nuestro pas Objetivos: Conocer algunos procedimientos empleados para la obtencin de producto utilizando los fundamentos biotecnolgicos. Identificar los procedimientos para la obtencin de un determinado productos y su aplicacin industrial. Relacionar los conceptos cientficos con los procedimientos tcnicos utilizados en Biotecnologa.

Metas: El estudiante identificar y resolver las diferentes actividades de aplicacin donde demuestre suficiente dominio de los conceptos cientficos y tcnicos en el campo de la Biotecnologa El estudiante describir diferentes procedimientos biotecnolgicos

vistos en las prcticas de laboratorio y presentara un informe en el que analizara los resultados con suficientes argumentos tcnicos y cientficos. Competencias: El estudiante describe y analiza y aplica de manera suficiente las condiciones tcnicas para el desarrollo de las biotecnologas de fermentacin en sus diversas modalidades y usos, as como en el modelamiento de procesos a cargo de enzimas y microorganismos, apoyado en el estudio de protocolos de manejo de los insumos biotecnolgicos Denominacin de practicas Prctica 1: Determinacin de la curva de crecimiento en organismos unicelulares Practica 2:Cuantificacin de azucares Practica 3:Aislamiento de microorganismos productores de amilasa

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Prctica 4: Aislamiento de ADN Bacteriano Nmero de horas Porcentaje Curso Evaluado por proyecto Seguridad industrial 12 Horas de prctica en el laboratorio, aunque ests requieren de muchas horas previas de preparacin. Las prcticas equivalen a 50 puntos del total de la ponderacin del curso , equivalente al 10% del peso evaluativo SI___ NO: X

Los estudiantes en el laboratorio, debern atender las normas de Bioseguridad recomendadas para cada una de estas prcticas. En trminos generales debern llevar bata que cubra su vestuario, zapatos cerrados, guantes, mascarilla. No debern manipular ningn reactivo con la boca , no pueden consumir alimentos ni lquidos dentro del laboratorio , Los microorganismos con lo que se va a trabajar pueden tener algn riesgo para la salud, razn por la cual se debe evitar conversar durante la prctica Hacer uso adecuado de las canecas de residuos y no desechar alcantarillado residuos peligrosos. Tener en cuenta el tipo de riesgo de cada reactivo con el fin de tomar las precauciones necesarias en cada caso. Debern estar pendientes de los implementos asignados y rotularlos antes de la prctica, debern seguir atentamente las instrucciones del laboratorista y haber ledo la gua de laboratorio antes de ingresar a la prctica.

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6. DESCRIPCIN DE PRCTICAS PRACTICA No. 01 DETERMINACION DE LA CURVA DE CRECIMIENTO E ORGANISMOS UNICELULARES

Tipo de practica PRESENCIAL Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas 2.5% 2 Biotecnologa de las fermentaciones, crecimiento microbiano. Propsito(s): Iden Objetivo(s): Ejercitar de la determinacin de la curva de crecimiento de organismos unicelulares (bacterias y levaduras), determinando los parmetros principales que la caracterizan. Meta(s) El estudiante entregar un informe de laboratorio, en el que presente los resultados de la prctica y la fundamentacin terica de crecimiento microbiano que respaldan los resultados Competencia(s) A partir de ste trabajo el estudiante fortalezer sus competencias procedimentales , argumentativas y de escritura cientfica.

Fundamentacin Terica: El crecimiento microbiano est definido como el aumento armnico e irreversible de masa y estructura. Esto puede estar acompaado o no de la divisin celular, ya que sta no es un obligatorio requerimiento. En el cultivo de microorganismos en condiciones artificiales, es muy empleado el cultivo batch, discontinuo o en lote. Generalmente se trata de un cultivo en medio lquido, aireado o esttico y a temperatura constante, y en el cual se parte de una pequea poblacin inicial o inoculo. En este no se adiciona medio fresco ni se extrae material exhausto, por lo cual todos los parmetros varan con el tiempo, es decir, es un proceso en estado transiente. Bajo estas condiciones, si determinamos el comportamiento de una poblacin de organismos unicelulares en funcin del tiempo (log del # de clulas o de viables o de absorbancia vs tiempo) podremos al menos observar cuatro etapas o estadios fisiolgicos conocidos en su conjunto como curva de crecimiento.

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Existen muchos mtodos para la medicin del crecimiento. Entre los ms utilizados se encuentran: recuento total de clulas, conteo de viables, peso seco y turbidimetra. Este ltimo es el ms empleado para organismos unicelulares por la rapidez y facilidad con que se logran los resultados, midiendo la densidad del cultivo a medida que este crece. Para ello se utilizan los fotocolormetros o espectrofotmetro. El aspecto de la curva de crecimiento vara de acuerdo con las condiciones del cultivo, el medio empleado y caractersticas del inculo (edad del cultivo y medio de donde proceda) entre otros aspectos.

Descripcin de la prctica: Esta prctica consiste en que los estudiantes a partir de un mtodo fotomtrico midan la curva de crecimiento de un microorganismo, ya que dentro de la Biotecnologa de las fermentaciones es necesario conocer las caractersticas metablicas del microorganismo con el fin de optimizar las condiciones de rendimiento y obtencin del producto deseado. De esta manera los estudiantes estarn en capacidad de emprender estudio de optimizacin de crecimiento microbiano en las empresas alimentarias o biotecnolgicas que requieran de estos procedimientos.

Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos) Material curva de crecimiento.-cua de c/u de las cepas de saccharomyces cerevisiae en medio malta-agarizado (18 h) -erlenmeyers de 100 ml con 20 ml de medio extracto de malta, estriles (2) -erlenmeyers de 250 ml con 48 ml de medio extracto de malta, estriles (9) -placas de medio extracto de malta-agar (10) -tubos de ensayo con 9 ml de solucin salina estril (80) -reactivo 3,5-dns 500 ml o reactivos del fenol sulfrico 500 ml -puntas estriles para las pipetas automticas. en su defecto -pipetas de 1 y 5 ml, estriles. (35 de c/u) -placas de medio extracto de malta-agar (80) -tubos de ensayos de 15 x 150 mm (30) -fotocolormetro -centrfuga -zaranda orbital (shaker) -vortex -microscopios.

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Software a utilizar en la prctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la prctica: Los datos se los puede ingresar a Excel con el fin de obtener la curva de crecimiento, pero esto no es un requisito necesario para la prctica.

Seguridad Industrial: Los estudiantes en el laboratorio, debern atender las normas de Bioseguridad recomendada para estas prcticas, debern llevar bata blanca que cubra de su vestuario, zapatos cerrados, guantes, mascarilla. No debern manipular ningn reactivo con la boca , no pueden consumir alimentos ni lquidos dentro del laboratorio y debern estar pendientes de los implementos asignados, debern seguir atentamente las instrucciones del laboratorista y haber ledo la gua de laboratorio antes de ingresar a la prctica.

Metodologa:

Conocimiento previo para el desarrollo de la prctica: Crecimiento microbiano, modelos matemticos aplicados al crecimiento microbiano, espectrofotometra. Forma de trabajo: Los estudiantes formarn grupos de tres estudiantes, mximo cinco, quienes sern responsables de la ejecucin de la prctica, los implementos de laboratorio y la elaboracin del informe final que debern entregar al tutor que dirija la prctica. Procedimiento:
Sistema de evaluacin

Informe o productos a entregar: Los estudiantes debern entregar un informe de laboratorio con los siguientes acpites : Introduccin : Es un breve resumen sobre el tema de la prctica, la importancia en el desarrollo de la temtica del curso, una descripcin Justificacin : Describa brevemente la importancia de la medicin del crecimiento microbiano en la Biotecnologa fermentativa Revisin Bibliogrfica: Realice un marco conceptual y terico sobre el crecimiento microbiano, los modelos matemticos al crecimiento microbiano y los diferentes procedimientos que se utilizan para describir el mismo. Metodologa: Realice un diagrama de flujo sobre los procedimientos que utiliz para desarrollar la prctica, puede utilizar esquemas fotografas.

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Resultados y anlisis de resultados: Cuantifique los resultados y presntelos en tablas y grficas para ellos puede utilizar Exel presentarlo en papel milimetrado, argumente y explique con bases cientficas las razones de los resultados Conclusiones: Redacte los apartes ms importantes del desarrollo del tema, los resultados y el anlisis de resultados. Bibliografa. Realice una lista de las fuentes consultadas, teniendo en cuenta las normas APA

Retroalimentacin: Los estudiantes tendrn ocho das hbiles para entregar el informe de laboratorio al tutor a travs de correo electrnico impreso, y a partir de esta fecha el tutor tendr 8 das hbiles para la entrega de la evaluacin y calificacin la cual ser enviada al l director de curso por correo electrnico en el formato que para ello ha establecido la escuela, una vez recibidas las notas el director o tutor del curso las registrar en el aula virtual.

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PRACTICA No. 02: Cuantificacin de azucares Tipo de practica Presencial X Autodirigida Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

2.5% 4 Metabolismo microbiano Propsitos: El estudiante comprender la importancia de conocer el metabolismo de los microorganismos promisorios a nivel industrial Objetivos: Evaluar Metas Competencias

Fundamentacin Terica: Los microorganismos consumen diferentes tipos de sustratos, pero poseen preferencia por un tipo particular de sustrato y algunos resultan no consumibles para algunas cepas de una especie en particular. Cuando dos o mas sustratos estn presentes en el medio de cultivo, los microorganismos no los consumen por igual, sino que consumen preferencialmente uno de ellos hasta agotarlo. Solo en este punto inician el consumo del siguiente sustrato preferido. Este fenmeno se conoce como diauxia. Esa preferencia por un sustrato en particular es diferente para cada una de las cepas de un organismo, y puede ser medida como la variacin en la velocidad de crecimiento, consumo de sustrato o generacin de producto.

Descripcin de la prctica: Para que un microorganismo produzca el metabolito deseado es necesario proporcionarle un sustrato que garantice un mayor rendimiento. Para ello, es necesario realizar diferentes ensayos que nos permita saber las diferencias en preferencia de diferentes tipos de sustrato. En este ejercicio de laboratorio analizaras estadsticamente las diferencias existentes en el consumo de diferentes tipos de azcar por diferentes cepas comerciales de

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levaduras

Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos):


8 x 2 g de levadura seca o hmeda de cerveza o de panadera. Preferiblemente 3 grupos de laboratorio deben trabajar con el mismo tipo de levadura. 200 cm3 de solucin de fructosa 0.2M 200 cm3 de solucin de galactosa 0.2M 200 cm3 de solucin de glucosa 0.2M 200 cm3 de solucin de lactosa 0.2M 200 cm3 de solucin de maltosa 0.2M 200 cm3 de solucin de rafinosa 0.2M 200 cm3 de solucin de sucrosa 0.2M 8 x 0.5g de ortofosfato dihidrogeno de amonio 8 x 0.5g de sulfato de amonio (Alternativamente puede emplearse 1g de nutriente comercialmente, para reemplazar las dos sales de amonio) 8 x 250 cm3 erlenmeyers 8 x tapones de caucho con dos orificios Varillas de vidrios Bureta de 50 cm3 Jeringas aforadas de 25 cm3 o equivalentes para muestreo 8 x 100 cm3 erlenmeyers para titulacin Solucin de hidrxido de sodio 0.1M (alrededor de 400cm3) de levadura disponible

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Solucin indicadora de fenolftaleina y gotero.

Software a utilizar en la practica: No aplica

Metodologa Conocimiento previo para el desarrollo de la prctica: Nutricin y metabolismo microbiano, Forma de trabajo: Los estudiantes formarn grupos de tres estudiantes, mximo cinco, quienes sern responsables de la ejecucin de la prctica, los implementos de laboratorio y la elaboracin del informe final que debern entregar al tutor que dirija la prctica. Procedimiento: 3.2 Curva patrn (Concentracin de azucares totales)

A partir de caldo estril (5 g/l = 5000 mg/l = 5.000.000 ug/l) obtenga una solucin de 150 ug/l (solucin estndar) A partir de la solucin estndar prepare diluciones de 100 ug/l, 70 ug/l, 50 ug/l, 25 ug/l, 10 ug/l, y 5ug/l. En un erlenmeyer de 50 ml y se le aade 1 ml de solucin de fenol al 5 %, mezclndolos bien. Se aade entonces 5 ml de cido sulfrico al 95%. se esperan 30 minutos y se lee la absorbancia a 489 nm. Consigne los datos de absorbancia como se muestra en la siguiente tabla para cada uno de los azucares. Tabla 1. Resultado de cuantificacin de azucares

En Excel obtenga la ecuacin de regresin lineal que relaciona la concentracin de azcar con la absorbancia, con punto de corte en 0,0 y = ax y= absorbancia, x = concentracin de azcar 3.3 Cuantificacin de azcar consumido

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De los tiempos 0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; y 3 horas colecte muestras para cuantificar azucares totales. Colecte 100mlts y dilyalos hasta 3ml de esta muestra tome 1ml en un erlenmeyer de 50 ml y se le aade 1 ml de solucin de fenol al 5 %, mezclndolos bien. Aada 5 ml de cido sulfrico al 95%. Se esperan 30 minutos y se lee la absorbancia a 489 nm. Aplique la ecuacin (x= y/a). y el resultado divdalo por 0.33 (factor de disolucin ) elabore una grafica en donde relacione produccin de biomasa y consumo de sustrato. 4: Variables de respuesta 2,3 (log x2 - log x1) = ----------------------------t2 - t 1 yx/s = - (x2 x1) / (s2 s1)
Sistema de Evaluacin: No aplica

Informe o productos a entregar: Los estudiantes debern entregar un informe de


laboratorio con los siguientes acpites : Introduccin : Es un breve resumen sobre el tema de la prctica, la importancia en el desarrollo de la temtica del curso, una descripcin corta de la experiencia Justificacin : Describa brevemente la importancia del conocer el metabolismo de los microorganismos promisorios de inters industrial Revisin Bibliogrfica: Realice un marco conceptual y terico metabolismo microbiano, sustratos y tipos de sustratos que se utilizan en los diferentes procedimientos biotecnolgicos. Metodologa: Realice un diagrama de flujo sobre los procedimientos que utiliz para desarrollar la prctica, puede utilizar esquemas fotografas. Resultados y anlisis de resultados: Cuantifique los resultados y presntelos en tablas y grficas para ellos puede utilizar Exel presentarlo en papel milimetrado, argumente y explique con bases cientficas las razones de los resultados Conclusiones: Redacte los apartes ms importantes del desarrollo del tema, los resultados y el anlisis de resultados.

Bibliografa. Realice una lista, teniendo en cuenta las normas APA de las fuentes consultadas

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Retroalimentacin: Los estudiantes tendrn ocho das hbiles para entregar el informe
de laboratorio al tutor a travs de correo electrnico impreso; a partir de esta fecha el tutor tendr 8 das hbiles para la entrega de la evaluacin y calificacin la cual ser enviada al l director de curso por correo electrnico en el formato que para ello ha establecido la escuela, una vez recibidas las notas el director o tutor del curso las registrar en el aula virtual.

PRACTICA No. 03: Aislamiento de microorganismos productores de amilasa Tipo de practica Presencial X Autodirigida Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

2.5% 2 Enzimas Propsitos:Que los estudiantes identifiquen las caractersticas metabolicas de microorganismos productores de enzimas amilolticas. Objetivo: Aislar y seleccionar microorganismos productore de enzimas amilolticas a partir de muestras de suelo. Metas: El estudiante entregar un informe de laboratorio dnde describir claramente el procedimiento de aislamiento de microorganismos productores de enzimas amilolticas, as como sus caractersticas morfolgicas. Competencias: El estudiante durante el laboratorio podra ejecutar con desenvoltura y propiedad cada una de las actividades propuestas durante la prctica; cmo tambin demostrar fluidez en la escritura del informe de laboratorio demostrando coherencia cientfica entre la metodologa desarrollada, los resultados y las conclusiones

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presentadas.

Fundamentacin Terica: El almidn est conformado por un polmero lineal de glucosa llamado amilosa y por un polmero ramificado tambin de glucosa llamado amilopectina; lo que hace, que sea considerado como un polmero natural con una alta riqueza calrica, la degradacin del mismo en las molculas de glucosa que representan energa para las clulas se realiza a partir de enzimas extracelulares como la amilasa, la cul es segregada por una gran variedad de microorganismos en ambientes naturales. Uno de los objetivos de la biotecnologa es encontrar microorganismos productores de enzimas, que bajo condiciones ptimas produzcan enzimas a nivel industrial. Descripcin de la prctica: En esta prctica se identificaran microorganismos aislados del suelo capaces de producir amilasa. Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos): 50 ml de agua destilada previamente esterilizada agua peptonada 0.1% (p/v) Pipeta de 10 ml Pipetas de vidrio 1 ml estril 1 gr de tierra seca recogida 1 cm por debajo de la superficie, de diferentes sitios tambin a diferentes alturas se pueden tomar muestras de diferentes tipos de suelo (Se debe colocar en bolsas estriles y rotular). Mnimo utilizar tres muestras Una solucin de yodo Bastoncillos de algodn estril Cajas de petri estril con 15 a 20 mm con nutriente de agar preparado con 0,2 de almidn soluble Rotulador.

Software a utilizar en la prctica: No aplica Metodologa Conocimiento previo para el desarrollo de la prctica: Concepto de enzimas,

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procedimientos aspticos para el cultivo de microorganismos, preparacin de medios nutritivos y reaccin del almidn con el yodo Forma de trabajo: Los estudiantes formarn grupos de tres estudiantes, mximo cinco, quienes sern responsables de la ejecucin de la prctica, los implementos de laboratorio y la elaboracin del informe final que debern entregar al tutor que dirija la prctica. Procedimiento: 1. Mezclar un gramo de tierra seca y diluirlo con 15 ml de agua esterilizada 2. Sembrar en superficie en una placa de agar nutriente / almidn y extender la muestra uniformemente por toda la superficie 3. Rotular la caja petri con el nombre del grupo, fecha y sitio de muestra 4. Incubar a 30 grados durante 48 horas. 5. Realizar el recuento de todas las colonias, de cada uno de los sitios 6. Vierta con mucho cuidado la dilucin de yodo sobre las placas inoculadas hasta cubrir completamente la superficie del agar. Las zonas en que todava quede almidn se teirn de un color entre azul y negro. S los microorganismos han degradado el almidn aparecern zonas de color marrn claro 7. Realice el recuento de aquellas colonias que presenten halos de hidrlisis alrededor de las mismas. Este recuento corresponder a las colonias con actividad amiloltica. 8. Mida con una regla el dimetro en milmetros (mm) de cada uno de los halos. Teniendo en cuenta la siguiente frmula: C= A-B en donde: A. Dimetro de la colonia ms el halo de hidrlisis en mm B. Dimetro de la colonia en mm C. Dimetro del halo de la hidrlisis en mm 9. Escriba los resultados de los puntos 5, 7 y 8 en la siguiente tabla. TABLA 2 : Recuento de colonias

Sitio de muestreo

N. de colonias totales (5)

N. de colonias con halos amiloliticos (7)

Dimetro de halo de Hidrlisis de colonias ms representativas (8) Col 1 Col 2 Col 3

Sistema de Evaluacin: No aplica

Informe o productos a entregar: Los estudiantes debern entregar un informe de

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laboratorio con los siguientes acpites : Introduccin: Es un breve resumen sobre el tema de la prctica, la importancia en el desarrollo de la temtica del curso, una descripcin de la experiencia. Justificacin : Describa brevemente la importancia del procedimiento descrito para encontrar microorganismos de inters industrial Revisin Bibliogrfica: Realice un marco conceptual y terico sobre el enzimas , enzimas de inters industrial y los diferentes procedimientos que se utilizan para obtencin de enzimas Metodologa: Realice un diagrama de flujo sobre los procedimientos que utiliz para desarrollar la prctica, puede utilizar esquemas fotografas. Resultados y anlisis de resultados: Cuantifique los resultados y presntelos en tablas y grficas explique con bases cientficas las razones de los resultados Conclusiones: Redacte los apartes ms importantes del desarrollo del tema, los resultados y el anlisis de resultados.

Bibliografa. Realice una lista, teniendo en cuenta las normas APA de las fuentes consultadas

Retroalimentacin: Los estudiantes tendrn ocho das hbiles para entregar el


informe de laboratorio al tutor a travs de correo electrnico impreso; a partir de esta fecha el tutor tendr 8 das hbiles para la entrega de la evaluacin y calificacin la cual ser enviada al l director de curso por correo electrnico en el formato que para ello ha establecido la escuela, una vez recibidas las notas el director o tutor del curso las registrar en el aula virtual.

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PRACTICA No. 04: Aislamiento de ADN Microbiano Tipo de practica Presencial X Autodirigida Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

2.5% 4 Tcnicas de ingeniera gentica aplicada a la Biotecnologa Propsitos:Que los estudiantes reconozcan la importancia de las tnicas de ingeniera gentica aplicadas al desarrollo Biotecnolgico . Objetivo: Aislar los cidos nucleicos de la Bacteria Scherichia colli Metas: El estudiante entregar un informe de laboratorio dnde describir claramente el procedimiento de aislamiento de Acidos nucleicos en bacterias y la importancia de la tcnica en el desarrollo de la Biotecnologa Competencias: El estudiante durante el laboratorio podra ejecutar con desenvoltura y propiedad cada una de las actividades propuestas durante la prctica; cmo tambin demostrar fluidez en la escritura del informe de laboratorio demostrando coherencia cientfica entre la metodologa desarrollada, los resultados y las conclusiones presentadas.

Fundamentacin Terica: Sin lugar a dudas con el descubrimiento de la doble estructura axial del cido "Desoxi-ribonucleico" (ADN) por Crick y Watson en 1953, seguido por los procesos que permiten la inmovilizacin de las enzimas, los primeros experimentos de ingeniera gentica realizados por Cohen y Boyer en 1973 y aplicacin en 1975 de la tcnica del "hibridoma" para la produccin de anticuerpos "monoclonales", gracias a los trabajos de Milstein y Kohler.(1983). Han

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constituido un avance sin precedentes en el desarrollo de la Biotecnologa. Estos importantes descubrimientos han dado lugar a numerosos trabajos de mejoramiento gentico tanto en plantas como animales; el cultivo de tejidos vegetales y animales a partir de clulas madre, y el importante acontecimiento de la aparicin de la oveja Dolli en el contexto cientfico, que dio un vuelco total al concepto de Biotecnologa.

Descripcin de la prctica: En esta prctica se aislar el ADN microbiano a partir de un procedimiento sencillo desarrollado por Hertel et al (1975) Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos): Software a utilizar en la prctica: No aplica Metodologa Conocimiento previo para el desarrollo de la prctica : Estructura de cidos nucleicos, los Cultivo previamente preparado de Scherichia colli Lizozima en polvo 6 ml de etanol frio 0, 5 ml de detergente domstico Sistema de inoculacin 3 ml de agua destilada Tubos de ensayo Pipetas de 1 ml Pasteur Bao Mara a 60C Incubadora a 37C

Forma de trabajo: Los estudiantes formarn grupos de tres estudiantes, mximo cinco, quienes sern responsables de la ejecucin de la prctica, los implementos de laboratorio y la elaboracin del informe final que debern entregar al tutor que dirija la prctica.

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Procedimiento: 1. Preparar un cultivo de E. Colli en un caldo nutritivo y dejarlo madurar por lo menos durante 4 das 2. Aadir 10 mg de lisozima a 5 ml de suspensin bacteriana y agitarla durante 2 minutos 3. Incubar la mezcla durante 30 minutos a 37 C 4. Aadir a la suspensin bacteriana 5 ml de detergente domstico 5. Llevar la mezcla a bao mara a 60C durante 2 minutos 6. Enfriar la mezcla en agua fra 7. Lentamente y con mucho cuidado verter etanol frio sobre la superficie de la mezcla de manera que forme una capa 8. Los cidos nucleicos precipitarn en la capa superior de etanol de la cual se extraern utilizando una pipeta 9. Se puede aadir unas gotas de azul de metileno con el fin de teir el ADN y volverlo ms visible.

Sistema de Evaluacin: No aplica

Informe o productos a entregar: Los estudiantes debern entregar un informe de


laboratorio con los siguientes acpites : Introduccin: Es un breve resumen sobre el tema de la prctica, la importancia en el desarrollo de la temtica del curso, una descripcin de la experiencia. Justificacin : Describa brevemente la importancia del procedimiento descrito en el desarrollo de la Biotecnologa Revisin Bibliogrfica: Realice un marco conceptual y terico sobre cidos nucleicos y tcnicas de ingeniera gentica aplicadas a la Biotecnologa , Metodologa: Realice un diagrama de flujo sobre los procedimientos que utiliz para desarrollar la prctica, puede utilizar esquemas fotografas. Resultados y anlisis de resultados: Analice los resultados obtenidos, explicando cientficamente cada uno de los pasos que se realizaron durante el procedimiento Conclusiones: Redacte los apartes ms importantes del desarrollo del tema, los resultados y el anlisis de resultados. Bibliografa. Realice una lista, teniendo en cuenta las normas APA de las fuentes

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consultadas

Retroalimentacin: Los estudiantes tendrn ocho das hbiles para entregar el


informe de laboratorio al tutor a travs de correo electrnico impreso; a partir de esta fecha el tutor tendr 8 das hbiles para la entrega de la evaluacin y calificacin la cual ser enviada al l director de curso por correo electrnico en el formato que para ello ha establecido la escuela, una vez recibidas las notas el director o tutor del curso las registrar en el aula virtual.

RUBRICA DE EVALUACIN: La siguiente rbrica de evaluacin se aplicar a todas las prcticas de laboratorio, para un total de 50 puntos
tem Evaluado Valoracin Baja Valoracin Media Valoracin Alta Mximo Puntaje 10

Estructura del informe

El estudiante tuvo en cuenta las normas bsicas para construccin del trabajo (Puntos = 0)

Aunque los documentos entregados presentan una estructura base, la misma carece de algunos elementos del cuerpo Solicitado. (Puntos = 5)

Los documentos presentan una excelente estructura con los requerimientos solicitados (Puntos = 10

Redaccin y ortografa

Los documentos presentan deficiencias en redaccin y errores ortogrficos (Puntos = 0)

No hay errores de ortografa y Los documentos presentan una mediana articulacin de las ideas y la estructura de los prrafos (Puntos = 5)

La redaccin es excelente, las ideas estn correlacionadas, y el cuerpo del texto es coherente en su totalidad (Puntos =10)

10

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Fines del trabajo

No se desarrolla el objetivo del laboratorio y el informe presentado carece de coherencia cientfica (0)

El informe de laboratorio desarrolla el objetivo del mismo; sin embargo en algunos a partes no se evidencia coherencia cientfica entre los diferentes acpites del informe de laboratorio. (10)

El informe de laboratorio desarrolla el objetivo del mismo; se evidencia coherencia cientfica entre los diferentes acpites del informe de laboratorio. (20)

20

Referencias

Mo presenta referencias bibliogrficas. (0)

Presenta un marco terico basado en referencias bibliogrficas poco con muchas de estas no se encuentran acorde con la temtica tratada , las referencias bibliogrficas cumplen con la normatividad APA (5)

Presenta un marco terico basado en referencias bibliogrficas confiables y estas se encuentran acorde con la temtica tratada , las referencias bibliogrficas cumplen con la normatividad APA

10

TOTAL DE PUNTOS POSIBLES

50

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7. FUENTES DOCUMENTALES

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18. SMITH, J.E. (1996): Biotechnology (3 edicin). Cambridge: Cambridge University Press (ISBN: 0-521-44911-1). 19. SOBERON, M La ingeniera gentica y la nueva tecnologa, Fondo de cultura econmica. Mxico, 1996 20. WISEMAN, A.; Principios de biotecnologa; Acribia, Zaragoza, 1985.