Vacunas contra el Virus de Papiloma humano

Dr. Vicente Madrid Marina Centro de Investigaciones sobre Enfermedades infecciosas INSTITUTO NACIONAL DE SALUD PBLICA

Factores determinantes del desarrollo de Cncer crvico uterino

Sociales:
Respuesta del sistema de salud Cobertura de programa de tamizaje Barreras culturales Niveles de pobreza Infraestructura de saneamiento

Factores ambientales Mujer infectada con VPH

Epidemiolgicos:
Niveles hormonales Tabaquismo Desnutricin Multiparidad Infecciones asociadas Mltiples parejas sexuales

Factores genticos VPH:

Tipo de variante Virus de alto riesgo

VPH-Husped

Husped Inmunogentica Inmunosupresin IL-10, TGF-b1

PERSISTENCIA INMUNOSUPRESIN LOCAL

VPH: PERSISTENCIA TRANSFORMACIN

Cncer crvico uterino

Torres-Poveda KJ et al. La infeccin por el virus del papiloma humano y cncer cervicouterino: una perspectiva de salud pblica. RIC 2008; 60(5):414-20.

Epidemiologa de CaCu a nivel mundial

Tasas de incidencia mundial de CaCu por 100 000 mujeres (todas las edades), normalizadas segn la edad con respecto a la poblacin estndar de la OMS (2005). (OMS, 2007).

Incidencia y Mortalidad por CaCu en Amrica Latina

Posso H. Carga de cnceres asociados con el VPH en Amrica Latina. Newsletter on Human Papillomavirus. HPV Today. 2007. 12: 3.

Mortalidad por CaCu en mujeres 25 aos por Entidad Federativa 2007

Fuente: INEGI. Estadsticas vitales, 2007. Base de datos. CONAPO. Proyecciones de la poblacin de Mxico, 2005-2050.

Prevalencia de VPH en mujeres con cncer por regin

OMS. Integracin de la atencin sanitaria para la salud sexual y reproductiva y las enfermedades crnicas. Control integral del cncer cervicouterino. Gua de prcticas esenciales. 2007. 281p.

Historia Natural del Cncer Crvico uterino

91% (2a)

Infeccin 80% transitoria

Infeccin por HPV 4 a 5 aos

9%

9 a 19 aos

Infeccin Persistente Tipo de HPV Edad de la infeccin Factores inmunolgicos 98.8% Inmunologa curativa.

NIC bajo grado

1.2% Cncer NIC invasor alto grado Factores hormonales Factores genticos

Factores de Riesgo

Inmunosupresin Selectiva. Evasin

Inmunidad insuficiente

HISTORIA NATURAL DEL CNCER CRVICO UTERINO

INFECCIN POR VPH
PERIODO PREPATOGNICO
INTERACCIN DE LOS FACTORES DE RIESGO

NIC DE BAJO GRADO

NIC DE ALTO GRADO

CNCER INVASOR

AGENTE HUSPED

AMBIENTE
PREVENCIN PRIMARIA
PROMOCIN DE LA SALUD PROTECCIN ESPECFICA

PERIODO PATOGNICO PERIODO PATOGNICO Enfermedad avanzada Convalecencia Muerte HORIZONTE CLNICO Estado crnico HORIZONTE CLNICO Patognesis Invalidez RECUPERACIN temprana Interaccin del husped SUBCLNICO Recuperacin y estimulo SUBCLNICO SUBCLNICO
DIAGNSTICO PRECOZ TTO OPORTUNO Y ADECUADO

PREVENCIN SECUNDARIA PREVENCIN SECUNDARIA

LIMITACIN DEL DAO

PREVENCIN TERCIARIA PREVENCIN TERCIARIA

REHABILITACIN

HISTORIA NATURAL DEL CNCER CERVICOUTERINO

PREVENCIN PRIMARIA
No exposicin a factores de riesgo.

PREVENCIN SECUNDARIA
Programas poblacionales de DOC: -Efectividad. -Eficiencia. -Cobertura ampliada. -Satisfaccin de la usuaria. Bajo Costo Imagen visual. cervical asistida.

PREVENCIN TERCIARIA
Tratamiento y rehabilitacin. VACUNAS TERAPETICAS CONTRA NEOPLASIA INTRAEPITELIAL CERVICAL

--Posponer edad de inicio de vida sexual. -Prctica de relaciones sexuales monogmicas. -Uso consistente de - condn.

Terapia Gnica

- Induce regresin.

Pruebas de Citologa cervical. deteccin -Thin Prep.

VACUNAS PROFILCTICAS CONTRA VPH.

Exposicin a riesgo: Infeccin Aguda por Virus de Papiloma Humano. (Autolimitada por el husped. En promedio tiene duracin de 12 meses).

Edad
Epitelio normal.

20

30

Determinacin de Desarrollo VPH como estrategia Tecnolgico de deteccin temprana de lesiones precursoras. -Autotoma vaginal. -Toma dirigida. -Infeccin por Chlamydia trachomatis -Infeccin por Herpes-2 -Inmunosupresin -Multiparidad. -Consumo de hormonales Infeccin persistente por anticonceptivos por ms Virus de Papiloma Humano. de 10 aos. (10-15% de infecciones agudas) Transformacin Neoplsica
40 50 60

-Destruccin de zona de transformacin. con asa diatrmica. -Crioterapia. -Laserterapia.

-Conizacin con bistur en fro. -Histerectoma. -Quimioterapia. -Radioterapia.

Acciones para mejora en la calidad de vida.

-Clnica del dolor. --Apoyo psicosocial familiar.

70

Muerte
Cncer invasor.

Integridad del Sistema Inmune.

Regresin espontnea 40-60%

Lesiones intraepiteliales de bajo grado.

Regresin espontnea. 30-40%

Lesiones intraepiteliales de alto grado.

Evolucin 10-20%

OMS. Integracin de la atencin sanitaria para la salud sexual y reproductiva y las enfermedades crnicas. Control integral del cncer cervicouterino. Gua de prcticas esenciales. 2007. 281p.

Integracin entre el tamizaje y la vacunacin de VPH

OPS. Reunin especial de expertos en vigilancia de las enfermedades relacionadas con el VPH en las Amricas. Boletn de Inmunizacin 2006; 28 (6): 1-4.

Estructura Genmica del VPH

E6
Transformacin e inmortalizacin celular

RLC
7906/1

E7

p53 Rb

7000
Protena principal de la L1 cpside

1000

E1
Replicacin Regulacin

6000

VPH 16
5000 4000 3000

2000

Protena secundaria de la cpside

E4 L2 E2

Alteracin de la Matriz Intracelular

E5
Estimulo de crecimiento

Regulacin de la Transcripcin viral

Clasificacin del VPH de acuerdo al riesgo de inducir una neoplasia

Grupo de VPH
Alto riesgo

Tipo de VPH
16, 18, 45, 56

Riesgo intermedio
Bajo riesgo

31, 33, 35, 51, 52, 58

6, 11, 42, 43, 44
70% casos CaCU invasor 4% carga cncer global

Proceso de elaboracin de la vacuna

Prueba de Concepto Estudios pre-clnicos: seguridad y respuesta inmune adecuada

Estudios clnicos vacunales

Licencia FDA
Vacuna experimental ensayada en laboratorio Ensayos en animales Fase I a III

ENSAYOS CLNICOS VACUNALES

No. Individuos Tiempo duracin FASE III 5000 voluntarios 20-100 voluntarios sanos 500 voluntarios sanos sanos 12-18 meses. 4 aos 5 aos Estudio multicntrico controlado para Primera etapa en poblacin En este fase se confirmar eficacia humana donde se suministra determina la eficacia de la vacuna en una vacuna experimental protectora de la vacuna grupos grandes de personas Analizar la seguridad en Analizar la seguridad de la vacuna en pequeos grupos grandes grupos de personas Evaluar Realizar estudios de dosis y vas de administracin Establecer dosis ms eficaz y horario de suministro Seguridad y inmunogenicidad requeridas para Fase III Medir en la prevencin de la enfermedad Seguridad y eficacia (requerido antes de certificacin) FASE I FASE II

Caractersticas generales

Objeto de evaluacin:

Pre-requisitos para avance a siguiente fase

Optimizacin de la reaccin inmunolgica

Dellepiane N, Griffiths N, Milstien JB. New Challenges in assuring vaccine quality. Bulletin of the World Health Organization, 2000, 78 (2): 155162.

Que caractersticas debe tener una vacuna?

-Segura: que la vacuna por s misma, no cause enfermedad o muerte (inocuidad, sin efectos secundarios). - Eficacia protectora relacionada con alta inmunogenicidad: evite la enfermedad, proteja a una proporcin alta de quienes la reciben, induccin de una proteccin duradera, sin prdida de la capacidad protectora total o parcialmente (estabilidad)
- Bajo costo por dosis: accesibilidad para la poblacin

Antecedentes del desarrollo de vacunas profilcticas contra VPH

Biologa del papilomavirus Restriccin absoluta del hospedero: (HPVs infectan nicamente al humano, los papilomavirus de perro infectan slo a perros). No hay papilomavirus que infecten ratones de laboratorio. Modelos animales de infeccin natural (conejos, perros, vacas). Tropismo por epitelio diferenciado: los HPVs no se pueden propagar en cantidades necesarias para vacunas en cultivos convencionales, pocos virus son aislados de lesiones, no es posible el desarrollo de vacunas convencionales. Ciclo de replicacin HPV exclusivamente intraepitelial: mecanismo de escape a la respuesta inmune, viremia baja, respuesta de anticuerpos a HPVs 16 genitales es baja (tiempo promedio de seroconversin de 8-9 meses), niveles de anticuerpos circulantes es baja. Anticuerpos neutralizantes en suero no son efectivos para la prevencin de infeccin en la superficie epitelial.

PARADIGMAS: EL ENTENDIMIENTO DE LA INTERACCIN HPV-HUESPED Y TUMOR-HUESPED Fundamentos para el diseo lgico de una vacuna:
1. Protenas Estructurales Virales son el blanco mayor para Vacunas Profilcticas. Inmunidad mediada por Anticuerpos 2. Protenas No-estructurales son el blanco mayor para Vacunas Teraputicas. Inmunidad Mediada por clulas T
L1 E5 E2 E1 E6 E7

L2
Protenas Estructurales

E4
Protenas No-estructurales

Antecedentes desarrollo de vacunas profilcticas contra VPH

Infecciones naturales en animales Protenas L1 y L2 de la cpside viral expresadas en protenas usadas como inmungenos Protena L1 nativa completa fue ms efectiva para generar concentraciones altas de anticuerpos neutralizantes

Inmunidad humoral en humanos

Respuesta de anticuerpos frente a eptopes conformacionales (respuesta tipo especfica) y lineales de protenas de la cpside viral en individuos infectados. Candidatos vacunales profilcticos deben incluir las protenas nativas plegadas correctamente.

Antecedentes Desarrollo de vacunas profilcticas contra VPH

Generacin de partculas similares a virus (virus-like particles VLPs) Protenas de fusin de L1 de HPV expresadas en bacterias: insolubles, no adoptaron la conformacin nativa Reto: generar protena L1 nativa plegada correctamente Diseo de sistemas de expresin en eucariotas y procariotas Sistema de expresin en levaduras Sistema de expresin virus vaccinia: protenas L1 y L2 nativas de HPV 16 se ensamblaban juntas por s mismas, generando cpsides vacas (no ADN) o VLPs (mezcla de partculas de virus). Sistema de expresin en baculovirus: protena L1 de la cpside nativa poda ensamblarse por si misma dentro de VLPs. Ambos sistemas con rendimientos de VPLs bajos El gen L1 de HPV 16 aislado de LIE bajo grado, fue usado para generar vectores recombinantes de baculovirus. Rendimiento de VLPs se increment cuatro veces ms. Se evidenci diferencias entre L1 nativo y prototipo (mutacin que afecta la eficiencias con que los VLPs son ensamblados (Evans 2001).

Estructura de L1 del VPH

VIRIONES L2 L1 / CAPSIDE L1

Vacunas profilcticas contra VPH estn dirigidas contra la protena L1

Estrategia de las Vacunas Profilcticas vs VPH

Vacunacin Con VLPS L1 HPV Plsmido o virus que codifica L1 de HPV

Induccin de Ac Neutralizantes Vs L1 y CTL

Autoensamble de las VLPs Protena L1

HPV de alto riesgo

Purificacin

Transferencia y expresin Gnica en levaduras clulas de insecto

VLPs = Virus Like Particles

VACUNAS PROFILACTICAS CONTRA PAPILOMAVIRUS HUMANO

Vacunas Profilcticas: Merck & Co. Inc.: Gardasil, basada en HPV 6, 11, 16 y 18 GlaxoSmithKline: Cervarix, basada en HPV 16 y 18

Generadas por una mezcla de partculas de virus (VLPs), derivadas de la protena L1 de los papilomas en cuestin.
Aplicacin: Mujeres Adolecentes: Edad 9 a 15 aos. Sin infeccin de HPV y lesiones Mujeres jovenes: Edad 16 a 26 aos. Sin infeccin de HPV y lesiones. Proteccin: Se pretende que tenga una proteccin de por lo menos el 70 % de los casos de cncer cervical asociados a los HPV6, 11, 16 y 18.
Madrid-Marina V, Torres-Poveda KJ, Lopez-Toledo G, Garca-Carranc A. Advantages and Disadvantages of Current Prophylactic Vaccines against human papillomavirus. Archives of Medical Research. 2009; 40:471-77.

Vacunas profilcticas disponibles contra VPH

0,2,6m

0,1,6m

Muoz N, Reina JC, Snchez GI. La vacuna contra el virus del papiloma humano: una gran arma para la prevencin primaria del cncer de cuello uterino. Colombia Mdica 2008; 39 (2): 196-204.

Efectividad clnica

Prevencin de NIC 2/3 y de verrugas genitales Fiebre

Prevencin de NIC 2/3

Eventos adversos
Muy comn Comn No comn Dolor de cabeza, dolor muscular Sntomas gastrointestinales. Prurito en sitio de inyeccin Urticaria, artralgia, fiebre Parestesia e induracin en sitio de Urticaria inyeccin

Nuevos desarrollos tecnolgicos con nuevas generaciones de vacunas polivalentes contra VPH, que incluirn una proteccin contra nueva genotipos.

Kitchener HC. HPV vaccines. In: Stern P, Kitchener HC, editors. Vaccines for the prevention of cervical cancer: Prophylactic HPV vaccines: current status. 2008. pp. 77-89.

RESULTADOS DE ENSAYOS CLNICOS VACUNAS PROFILCTICAS VPH

EFECTIVIDAD 1. 2. Eficacia de 100% en prevencin de lesiones por VPH16-18 en mujeres antes del inicio de vida sexual o que estn libres de infeccin. Alta eficacia contra infeccin persistente por VPH a los 6 y 12 meses y contra cualquier tipo de NIC. En vacuna tetravalente, eficiente contra lesiones genitales externas. En mujeres con infeccin prevalente a VPH 16-18, la aplicacin de vacunas no ha evidenciado efecto. Buena persistencia de anticuerpos durante siete aos. Aceptable perfil de seguridad. Controversias: Mayor nivel de eficacia e inmunogenicidad con el adyuvante ASO4 (monofosforil lpido A). Utilidad de vacuna tetravalente para prevenir otro tipo de lesiones (cnceres anogenitales: vulvar, vaginal y cncer anogenital en hombres que tienen sexo con hombres; papilomatosis respiratoria recurrente, verrugas genitales y cncer orofarngeo).

3.

4. 5. 6. -

RESULTADOS DE ENSAYOS CLNICOS VACUNAS PROFILCTICAS VPH

INMUNOGENICIDAD

1.

2. 3.

4. -

No se ha identificado una correlacin de proteccin inmunolgica en los vacunados: no se conoce el nivel mnimo requerido de anticuerpos para proteger contra la infeccin. Se ha establecido la correlacin entre la presencia de anticuerpos y el efecto profilctico. Inmunogenicidad relacionada con la edad: niveles de anti-VPH en el mes sptimo con un esquema de tres dosis, son estadsticamente ms altos en adolescentes menores de 12 aos, comparado con adolescentes y mujeres de ms edad. Existencia de una respuesta inmunitaria de memoria: Aumento de ttulos de anticuerpos frente a VPH 16/18 en sujetos previamente seropositivos cuando se les administr la vacuna. Dosis extra de vacuna (cuarta dosis) a los 60 meses en 80 sujetos: rpida respuesta inmunitaria frente a cuatro tipos de vacuna tetravalente, excede niveles de ttulos medios geomtricos de IgG en el sptimo mes. Con vacuna bivalente, eficacia en dos ensayos con adolescentes (10-17a), seroconversin con la tercera dosis, GMT al menos dos veces ms elevados.

Estudio Fase II Niveles Anticuerpos Anti-VPH 16 solamente

Ttulo Medio Geometrico (mMU/mL)-GMT 1000

de
VPH 16 10 mg VPH 16 20 mg VPH 16 40 mg VPH 16 80 mg

100
Anticuerpos Anti-VPH 16 en mujeres con infeccin por VPH 16 previa o en curso

10

3 Vacunacin

12 18 Tiempo (Meses)

24

Villa LL et. al. Lancet Oncology Early Online Publication. Available at: http://oncology.thelancet.com/ournal/vol6;iss4/early_online_publication. Accessed April 8, 2005.

RESULTADOS DE ENSAYOS CLNICOS VACUNAS PROFILCTICAS VPH

INMUNOGENICIDAD

5. Respuesta inducida de anticuerpos es ms alta (100 veces ms), que la que ocurre en la infeccin natural. 6. Respuesta inmune de las nias de 9 a 11 aos despus de dos dosis de vacuna es similar o mayor a la obtenida despus de tres dosis en mujeres de 16 a 26 aos, en las que ya se ha probado la eficacia de la vacuna.
ANTECEDENTES DE VACUNACIN (0, 6 Y 60 MESES) National Advisory Committee on Immunization NACI Canad 1. 2. 3. 4. Item 6 Segn estudios clnicos, nada indica que la vacuna sea menos efectiva si se administra en un esquema extendido. Tercera dosis se da en el momento en el que se requiere mayor proteccin, alrededor del inicio de las relaciones sexuales Respuesta de anticuerpos ms alta que la obtenida durante la vacunacin primaria similar a la observada con hepatitis B.

Lista de Pros y contras de las vacunas profilcticas vs HPV

VENTAJAS Altamente inmunognica Alta eficacia clnica Induce memoria de linfocitos B Proteccin Cruzada Edad extendida para Vacunacin DESVENTAJAS Alto costo; la ms cara producida al momento Lmite de proteccin; slo dos tipos oncognicos Decaimiento de la respuesta de anticuerpos ? Ser necesario una re-inmunizacin? Espectro Restringido Costo efectivo para prevenir cncer solo cuando se use en nios y adolescentes jvenes Seguridad referida y percepcin pblica en pases desarrollados

Perfil aceptable de seguridad

Sin impacto cuando se administra en sujetos que cursan con infecciones de Puede crear una falsa expectativa en algunos tipos de VPH contenidos en las sectores en pases en desarrollo vacunas
Madrid-Marina V., Torres-Poveda, KJ et al. CURRENT PROPHYLACTIC VACCINES AGAINST HPV; PROS & CONS. Archives of Medical Research 2009;40:471-7.

Madrid-Marina V., Torres-Poveda, KJ et al. CURRENT PROPHYLACTIC VACCINES AGAINST HPV; PROS & CONS. Archives of Medical Research 2009;40:471-7.

Recomendaciones de Strategic Advisory Group of Experts (SAGE) de OMS

1.Inclusin de la vacuna de VPH en los programas nacionales de inmunizacin (anlisis costo-efectivos de su introduccin). Integrada a la estrategia de deteccin y tratamiento de CaCu 2.Grupo blanco primario: nias y adolescentes entre los 9 y 13 aos de edad. Decisin final depender de edad de inicio de vida sexual y factibilidad de facilitar vacuna en escuelas, servicios de salud y comunidad. 3.Vacunacin de adolescentes de mayor edad como segundo grupo prioritario para vacunacin (anlisis costo efectividad). Si la introduccin es en fases debe privilegiarse a las adolescentes con menor probabilidad de tener acceso al tamizaje de CaCu 4.Actualmente no se recomienda vacunar a varones
Programa Mundial de Vacunas e Inmunizacin. Suministro y Calidad de las Vacunas, OMS; 1996.

Recomendaciones para aplicacin de Vacuna Profilctica contra VPH-Mxico

Se recomienda esquema de vacunacin: 0, 6 y 60 meses en nias de 9 aos (cuarto de primaria). El esquema incrementar la cobertura de prevencin primaria en nias a los 9 aos. El esquema 0, 6 y 60 meses no se recomienda en adolescentes mayores de 12 aos. La vacunacin debe integrarse a la deteccin y tratamiento oportuno de calidad Sistema de vigilancia epidemiolgica (laboratorio central) para cuantificacin de anticuerpos contra VPH 16 y 18 en poblacin intervenida, que permita evaluar respuesta inmune con dos dosis y estimar efecto de proteccin. La tercera dosis tendr menos costos (14 aos). Al diferirla a 60 meses Los ahorros generados deben fortalecer la deteccin secundaria.

Consideraciones en la vacunacin
El PIB y el presupuesto en salud son bajos en Latinoamrica y no hay justificacin para implementar programas de vacunacin poblacional contra VPH, ante el elevado costo Estudio de costo-efectividad determin que las estrategias de prevencin secundaria son ms costoefectivas para mujeres adultas, con la utilizacin del Papanicolau y captura de hbridos. Para que la vacunacin sea costo-efectiva, deber tener un costo no mayor de 18 USD por dosis, actualmente 133 USD por dosis en Mxico.

CONCLUSIONES

Hay una primera generacin de vacunas profilcticas Todas ellas con excelente inmunogenicidad a L1 No existe inmunidad cruzada con otros tipos VPH Dirigidas a VPH oncognicos tipos 16 y 18 y no oncognicos tipos 6 y 11.

LA VACUNACIN CONTRA HPV GENERA MS PREGUNTAS?

Poblacin Blanco: A quin, Cuando, Cmo? Puntos Evaluacin : dificultad para evaluar y Problemas ticos Ser efectiva e inteligente para pases pobres? No se permitir desviar recursos para dejar de proporcionar importantes intervenciones en otros aspectos de la salud poblacional.

VACUNAS TERAPETICAS

Therapeutic vaccines in humans : Realities of today and hopes for tomorrow

Vacunas teraputicas contra Cncer

Estrategia 1 Aumento de la Respuesta Inmune Funcin -Antgeno o molcula Coestimuladora -Citocinas -Receptor de linfocitos 2 Muerte directa Tumor -Terapia Suicida -Supresor de Tumores -Anti-sentido -MicroRNA.

PARADIGMAS: EL ENTENDIMIENTO DE LA INTERACCIN HPV-HUSPED Y TUMOR-HUSPED Fundamentos para el diseo lgico de una vacuna:
1. Protenas Estructurales Virales son el blanco mayor para Vacunas Profilcticas. Inmunidad mediada por Anticuerpos 2. Protenas No-estructurales son el blanco mayor para Vacunas Teraputicas. Inmunidad Mediada por clulas T

L1
L2

E5

E2
E4

E1

E6

E7

Protenas Estructurales

Protenas No-estructurales

Vacunas Teraputicas
Company Antigen E6 + E7 HPV16,18 E6, E7 + IL-2 HPV16 L2 / E6/E7 HPV16 L2 / E7 HPV6 E7 HPV16, Mb HSP65 E6/E7 HPV16 E7 HPV16 Multikine E7 HPV16 DNA L1, E7 HPV16 L1 / L2 / E7 HPV16 E2, HPV18 E2, HPV16, IL-12 Vaccine Type Live vaccinia Live vaccinia Fusion Protein Fusion Protein Fusin Protein Fusion Protein Peptide Cytokines Microparticles Chimeric VLPs Chimeric VLPs Live vaccinia Adenovirus

Xenova/Cantab Transgene Xenova/Cantab Cantab Stressgen CSL Cytel, University of Leiden CEL-SCI Zycos MediGene NCI
UNAM INSP

ESTRATEGIAS DE TERAPIA GNICA EN CNCER CRVICO UTERINO

RNA de Interferencia (RNAi) Vacunas de Vectores Adenovirales

Vacunas de ADN Inmunoterapia: Antgenos virales

MARCO CONCEPTUAL Infeccin por VPH (alto riesgo) VPH-16 Integracin RNA de interferencia RNAm E6
Oncoprotena

Paciente

Degradacin
Reparacin del dao

p53
Arresto del Ciclo celular

E6 RNAm E7
Oncoprotena

Transformacin Inmortalizacin

pRB

Apoptosis

E7 Bloqueo de la traduccin Posible erradicacin del tumor Estrategia de Terapia contra CaCU
Secuestro

CaCU

Proliferacin de clulas SiHa transfectadas con psiRNAE6B y psiRNAE7B (48 hrs)

[0 ug] [3 ug] [5 ug]

A
pSilencer

Cell viability (% Control)

E
psiRNAE6B

100 80 60 40 20 0
100 80 60 40 20 0 1 2 3 4 5 0ug 3ug 5ug

0ug 3ug 5ug

psiRNAE7B

48

Dr. OscarPeralta, 2010

Time after transfection (days)

How Immune System Sees and Responds to Tumor Antigens

IL-12 Adeno-E2 Cervical cancer (Apoptosis )

AKNA

La induccin de actividad antitumoral inhibe el desarrollo del tumor por la administracin de pcDNA3E7mutante y pNGVLIL-12
Administracin intramuscular de 3 dosis de 100g los plsmidos de E7 y IL-12 en los das 1, 3, 5
Celulas Tumorales BMK16Myc

3500 3000
Control Plasmid

Mean Tumor Size ( mm )

2500 2000
E7Plasmid

E7
IL12

1500 1000 500 0 Days Post Tumor Challenge

E7/IL-12 Plasmid

Medicin del tamao del tumor hasta los 40 das

Induccin de inmunidad celular durante el desarrollo del tumor mediante la por administracin de pcDNA3E7mutante y pNGVLIL-12
Administracin intramuscular de 100g los plsmidos de E7 y IL-12 en los das 1, 7, 14
Celulas Tumorales BMK16Myc

30000

25000
E7

20000
IL12

CPM

15000

Obtencin de linfocitos de bazo para ensayos de proliferacin a los 21 das con 1g de la protena E7 recombinante

10000

5000

Control

E7

E7/IL-12

Terapia Gnica Aumentando la Respuesta Inmune

IL12

IL-12
IL-12

INMUNIZACION PLASMIDOS (pCMV-mIL-12, pCDNA3) y PBS

1200

IL-12
1000
Volumen Tumoral (mm3)

800 600 400 200 0 0 2 4 6 8 10 Das 12 14 16 18

GRUPO 1 (IL-12) GRUPO 2 (IL-12) GRUPO 3 (IL-12) PBS pCDNA3

IL-10

Victor Bermdez

GENE THERAPY WITH ADENOVIRAL VECTORS

REPRESION DE LA EXPRESION DE E6 POR LA PROTEINA E2 DE HPV16 EN CELULAS BM K-16/myc

REPRESION

0.8 0.6 0.4 0.2 0

12

24

36

48

60 HORAS

REPRESION DE LA EXPRESION DE E7 POR E2 DE HPV16 EN CELULAS BMK-16/myc

1 0.8

REPRESION

0.6 0.4 0.2 0

12

24

36

48

60 HORAS

M en C Victor H. Bermdez

ACTIVACIN DE LAS CASPASAS 8 Y 3 POR LA PROTENA E2 DE HPV 16 EN CLULAS HPV-16+

pCMVp16-E2
0 12 24 36 48 60

pCMVp16-E2 Inhibidor Caspasa 8

0 12 24 36 48 60

Procaspasa 8 Caspasa 8 Procaspasa 3 Caspasa 3

b-Actina
Bermdez-Morales VH, Peralta-Zaragoza O, Guzmn-Olea E, Garca-Carranc A, Bahena-Romn M, AlcocerGonzlez JM, Madrid-Marina V. HPV 16 E2 protein induces apoptosis in human and murine HPV-16 transformed epithelial cells and its anti-tumor effect in vivo. Tumor Biology; 30(2):61-72, 2009.

GENE THERAPY WITH ADENOVIRAL VECTORS

CONCLUSIONES
Hay una primera generacin de vacunas profilcticas Todas ellas con excelente inmunogenecidad a L1 No existe inmunidad cruzada con otros tipos VPH Dirigidas a VPH oncognicos tipos 16 y 18. Los resultados de las vacunas teraputicas no son tan halagadores. Se requieren ms y mejores vacunas para impactar en los ndices de mortalidad de las mujeres por cncer cervicouterino en Mxico.

PARTICIPANTES
Instituto Nacional de Salud Pblica MC. Margarita Bahena Dra. Ana Burguete Dr. Vctor H. Bermdez MC. Eva Hernndez MC. Alfredo Lagunas Dr. Oscar Peralta Dr. Jos Moreno Dra. Kirvis Torres Universidad Nacional Autnoma de Mxico Dr. Alejandro G. Carranc Universidad de Nuevo Len (Fac. Ciencias) Dr. Juan Manuel Alcocer Dra. Cristina Rodrguez Dr. Reyes Tamz Guerra

PREGUNTAS?

vmarina@insp.mx

vmarina@insp.mx