PRESENTADO EN XII JORNADA DE INVESTIGACION CIENTIFICA UNIVERSITARIA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE SANTO DOMINGO-UASD 14 y |15 de Noviem !

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TITU%O: Control de las micotoxinas presentes en las producciones lcteas nacionales AUTORES& D!' R()(e* +e**o D,(-. I/0' Jo(12,/ C2(d!(do. %i3' F!(/3i43o C!2- P(432(*. 5(!e/ +e**o %*i/64 UNIVERSIDAD CATO%ICA SANTO DOMINGO-UCSD RESUMEN: La Repblica Dominicana cuenta con excelentes condiciones agronmicas suelos! " climatolgicas temperatura " r#gimen plu$iom#trico! como para con$ertirse en un pa%s exportador de lec&e " sus deri$ados' siempre " cuando consiga reducir el ni$el de micotoxinas contenido en los mismos( Las micotoxinas son una clase importante de ms de )** compuestos txicos +ue son producidos en ,orma natural por &ongos de los cuales solo una parte &a demostrado poseer toxicidad para los mam%,eros( Las micotoxinas pueden contaminar los alimentos' los piensos' o las materias primas utili-adas para su elaboracin' originando un grupo de en,ermedades " trastornos denominados Micotoxicosis " +ue resultan txicos para el &ombre " los animales( Reali-amos una in$estigacin documental para ponernos al d%a acerca de la problemtica de las micotoxinas en el pa%s( ./L/0R/S CL/1ES: micotoxinas' industria lctea' a,latoxinas( /0S2R/C2: 2&e pollution o, an" ,ood ,or m"cotoxins is a ma3or problem in t&e de$eloping countries suc& as t&e Dominican Republic' 4&ic& are additionall" e+uipped 4it& a tropical and subtropical climates' 4&ere t&e ,ungus gro4t& is ,a$ored b" bad agricultural practices' &ig& &umidit" and poor conditions storage( 2&e products most li5el" to be contaminated 4it& m"cotoxins are t&e peris&able( Some de$eloping countries' exporters' and importers ,ace di,,iculties in t&e international trade o, ,ood products' due to t&e lac5 o, resources to carr" out sampling and anal"sis( Currentl"' t&e 6orld .roduction o, Ra4 Mil5 is o, t&e order o, 7** billion liters' o, 4&ic& 8)9 comes ,rom cattle: mil5 is t&e main ,ood o, mammals( ;N2R<DUCC;<N: Los productos ms susceptibles de contaminarse con micotoxinas son los perecederos( /lgunos pa%ses en desarrollo' exportadores e importadores tropie-an con di,icultades en el comercio internacional de productos alimenticios' debido a la ,alta de recursos para lle$ar a cabo muestreos " anlisis( /ctualmente la .roduccin Mundial de Lec&e Cruda es del orden de 7** mil millones de litros de los cuales el 8)9 pro$iene del ganado $acuno: la lec&e es el principal alimento de los mam%,eros( En los prximos a=os se pre$# un crecimiento en la produccin de lec&e a un ritmo sostenido: se estima +ue el grueso de dic&o crecimiento pro$endr de pa%ses en desarrollo como el nuestro( 1arios pa%ses &an desarrollado estudios acerca de la incidencia de /,latoxinas M> en lec&e " sus productos' " &an propuesto Ni$eles Mximos .ermisibles para las micotoxinas( La ,recuente deteccin de /?M> en lec&e comercial " sus productos' el ele$ado uso de estos productos por la poblacin &umana " la carcinogenicidad de /?M>' &an impulsado el establecimiento de las regulaciones en el Ni$el Mximo .ermitido NM.! en lec&e " productos lcteos: por lo +ue los ni$eles en lec&es comerciales son continuamente monitoreados alrededor del mundo D%a-' @**7!( La /?M> es regulada en los Estados Unidos de /m#rica a ni$eles de *'*A microgramosB5g debido al ele$ado consumo de lec&e en in,antes " ni=os( 0asados en el establecimiento de l%mites mximos de micotoxinas de acuerdo con los ni$eles internacionales' ser%a un paso importante para la Repblica Dominicana' en el sentido de +ue no su,ra en el ,uturo pre3uicios comerciales por causas de las barreras sanitarias impuestas por los pa%ses importadores de alimentos( Sern utili-adas las t#cnicas de C.LC mediante la capacidad instalada en los laboratorios del pa%s( El m#todo ms aceptado para el anlisis de /?M> es el uso de Columna de ;nmunoa,inidad' seguido de determinacin " control por Cromatogra,%a de L%+u%dos de /lta .resin C.LC!( Los di,erentes mecanismos de accin txica de las micotoxinas' constitu"en un riesgo para la salud &umana " animal' con$irti#ndose en una problemtica de Salud .blica Duarte' @**7!( Existen $arios deri$ados &idroxilados de las a,latoxinas 0> " 0@ /?0> " /?0@!: conocidos como a,latoxinas M> " M@ respecti$amente' se excretan en la lec&e de animales +ue consumen alimentos contaminados con a,latoxinas( La ,recuente deteccin de /?M> en lec&e comercial " sus productos' el

ele$ado uso de estos productos por la poblacin &umana " la carcinogenicidad de /?M>' &an impulsado el establecimiento de las regulaciones en el Ni$el Mximo .ermitido NM.! en lec&e " productos lcteos( .or lo +ue los ni$eles en lec&es comerciales son continuamente monitoreados alrededor del mundo( /?M> es relati$amente estable en lec&e cruda " procesada' " no es a,ectada por los procesos de pasteuri-acin " tratamientos UC2 Ultra Ceig&t 2emperature! S&epard' @**D!( /lgunos in$estigadores &an reportado' +ue &a" una relacin lineal entre la cantidad de /?M> en la lec&e " /?M> en los alimentos de animales: lec&e " productos lcteos son una buena ,uente de nutrientes' tales como prote%nas " calcio' sin embargo' la lec&e " sus productos son la ms potente ,uente de a,latoxinas dentro de los alimentos( Las a,latoxinas M> se estudian en productos como: lec&e pausteri-ada' "ogurt' +ueso blanco' mante+uilla " &elados <NU' >DDE!( En la Unin Europea las /?M> en lec&e deben ser menores de *'*A microgramos L%mite Mximo .ermisible en lec&e ,luida de *' *A microgramosB5g! : en /ustria " ?rancia el ni$el mximo es *' *> microgramos para lec&e in,antil pausteri-ada " de *' *E microgramosB5g para ni=os menores de E a=os detection a,latoxina M> 2ur5e"! <li$erira' @**7!( <0FE2;1<S: Muc&os pa%ses &an reali-ado estudios sobre la incidencia de /,latoxinas M> en lec&e " sus productos' " &an propuesto ni$eles mximos permisibles para las micotoxinas( <b3eti$os importantes para el anlisis de a,latoxinas especialmente /?M>! en lec&e son: >( Conocer " armoni-ar las regulaciones de /?M> en lec&e " productos lcteos @( Estimular estudios de aptitud en los di$ersos laboratorios +ue brindan ser$icios anal%ticos de residuos en lec&e " productos lcteos E( ;mpulsar " promo$er el desarrollo de una red de laboratorios acreditados ME2<D<L<G;/: Se reali- una re$isin de la literatura' para conocer' los elementos bibliogr,icos +ue permitan una actuali-acin del tema de las micotoxinas " su importancia en la industria lec&era nacional' entre$istas a expertos " sectores de la industria alimentaria " del codex alimentarius del pa%s' mediante el uso de la in$estigacin cualitati$a' las t#cnicas etnogr,icas " entre$istas a pro,undidad( RESUL2/D<S: En estudios epidemiolgicos' en di$ersas partes del mundo donde es ,recuente el cncer de &%gado se &a encontrado relacin entre el ni$el de contaminacin por a,latoxinas " esta en,ermedad( Existen datos del importante papel +ue las micotoxinas' especialmente la a,latoxina 0> tiene en la etiolog%a del cncer del &%gado' sobre todo en a+uellos pacientes +ue son portadores del ant%geno del $irus de la Cepatitis 0 .rado' >D8D!( Esta a,latoxina /?0> es la ms txica " comn de las a,latoxinas: " es considerada ser el nmero > de los ms potentes &epatocarcingenos conocidos para animales " seres &umanos ?errar"' >DD)!( Las micotoxinas son consideradas el carcingeno natural ms potente conocido &asta el momento: a pesar de +ue el $irus de la &epatitis 0' continua siendo la principal causa del Cepatocarcinoma CCC!' la sola presencia de la a,latoxina incrementa el riego relati$o de CCC en E'E $eces sobre un &%gado sano: sin embargo cuando ambos ,actores estn presentes' e3ercen un e,ecto sinesg%stico +ue aumenta el riesgo &asta AD $eces <li$eira' @**7!( La a,latoxina M> pertenece a la clasi,icacin @0 de las sustancias cancer%genas por lo &umanos' por lo +ue su presencia en lec&e " deri$ados constitu"e un riesgo para la salud( Las ocratoxinas son H amidas isocumar%nicas de 0I ,enilalanina: la <cratoxina / es la ms txica " el miembro +ue ms predomina( De las micotoxinas la <cratoxina puede contaminar una gran $ariedad de productos alimenticios: el primer compuesto +ue se descubri la <cratoxina /' se aisl de una cepa de Aspergillus ochracens <li$eira' @**7!( La <cratoxina / ,ue descubierta por 1an der Mer4e en >D7A Jint-en' >DHA! " ,ue descrita por primera $e- en >DH)' en granos de ca,# Gal$ano' @**A!( Es la <cratoxina una micotoxina mutag#nica: su rgano diana es el ri=n' pero tambi#n es &epatotxica' inmunotxica " teratog#nica de Clase 0@' pero se desconoce si el mecanismo de accin transcurre a tra$#s de ,enmenos gen#ticos o epigen#ticos( Con el ,in de determinar la concentracin de <cratoxina / en productos alimenticios' se &an implementado los m#todos con L%mites M%nimos .ermisibles picogramos!: actualmente los ni$eles aceptables son del orden de >IA* microgramos B5g en alimentos " de >**I>*** microgramosB5g en piensos <li$eira' @**7!( La Unin Europea &a aprobado recientemente los L%mites Mximos .ermitidos en cereales' de A microgramosB5g' deri$ados de cereales de E microgramosB5g " de u$as pasas de >* microgramosB5g . +ue se ampliaron para ca,# $erde " tostado' $ino' cer$e-a' -umo de u$as' cacao " productos a base de cacao <rti-' @**D!( Las ocratoxinas estn presentes en productos alimenticios' como productos $egetales como & ma%-' cebada' granos calentados' piensos me-clados' &abic&uelas blancas secas' caca&uates mo&osos: " en residuos de alimentos de origen animal rganos a,ectados: ri=n' &%gado " te3ido adiposo! <li$eira' @**7!( La ocratoxina integra una ,amilia de compuestos: <cratoxina /' <cratoxina 0' <cratoxina C Et%l ester de <cratoxina /! " <cratoxina /l,a: la ms txica en la <cratoxina /' asociada a su anillo isocumar%nico( Se &an noti,icado casos de ocratoxicosis en animales de explotacin pecuaria: porcinos " a$es! " la mani,estacin primaria &a sido la ne,ropat%a crnica Lede-ma' @**)!( Se absorbe por el tracto

gastrointestinal' siendo su biodisponibilidad superior al A*9 en los mam%,eros( Se describen casos de personas +ue su,rieron los problemas renales' debido a la in&alacin de ocratoxina tras la manipulacin de trigo contaminado por /spergillus oc&raceus Gal$ano' @**A!( Como contaminante' la carne bo$ina en principio no supone peligro para la salud &umana' "a +ue los rumiantes destru"en la <cratoxina' por la accin de las en-imas bacterianas presentes en la pan-a' lo +ue e$ita +ue la toxina se acumule en los te3idos: pero los alimentos deri$ados del cerdo' representan una ,uente potencial de transmisin de la toxina a la poblacin &umana( La <cratoxina /' es principalmente ne,rotxica ne,ropat%a porcina " ne,ropat%a a$iar espontnea! Jint-en' >DHA!( Las ,umosinas son micotoxinas producidas por &ongos del g#nero Fusarium, F. moniliforme " otras A especies' +ue contaminan sobre todo el ma%-: el desarrollo del &ongo acontece durante el crecimiento' cosec&a' almacenamiento " procesado del ma%- Celi5' @**A!( Las ?usariotoxinas' crecen solo en altos contenidos de agua *' D*9!( Los &ongos productores de las micotoxinas tricotecenos' ms importantes son del g#nero Fusarium: el tricoteceno ms importante es la 2oxina 2I@ Moron' @**E!( Ca" al menos A@ especies de ?usarium' cada una produce al menos E tricotecenos( C<NCLUS;<NES: Desde +ue ,ueron descubiertas en >D7* a,latoxinas! di$ersos pa%ses adoptaron l%mites de tolerancia para esas toxinas en productos destinados al consumo &umano <li$eira' @**7!: estas micotoxinas son producidas como metabolitos secundarios en alimentos como: granos de cereal' arro-' ma%-' ,ri3oles de so"a' nueces' semillas de sorgo' lec&e' "ogurt' +uesos' entre otros( El arro- es un cereal +ue ,orma parte del &bito alimenticio del dominicano' +ue se con,irma por el alto consumo' en las ms di$ersas ,ormas: por tanto' El control de las micotoxinas deber%a ser en,ocado dentro de un programa de Control ;ntegrado' aplicando medidas pre$enti$as en todas las ,ases de produccin de alimentos Contreras' @**D!: estos controles " medidas deben &acerse extensi$os a las siguientes etapas: culti$o de las materias primas' periodo de cosec&a' transporte " distribucin( Se estima +ue el @A9 de la poblacin mundial de cereales se encuentra contaminada Duarte' @*7!( La contaminacin de los alimentos " piensos tiene lugar cuando el ingrediente del pienso &a estado pre$iamente in,ectado con &ongos productores de toxinas: estos &ongos pueden desarrollarse durante la produccin' procesado' transporte o almacenamiento de los alimentos para animales o piensos: la in,eccin de las cosec&as por los &ongos del g#nero /spergillus' ?usarium " .enicilium' disminu"e su rendimiento " los alimentos presentan $alores nutricionales menores( Dentro de las micotoxinas' las a,latoxinas son compuestos "a demostrados &epatocarcinog#nicos' extremadamente txicos +ue pueden ser una amena-a para la salud de los animales " el ser &umano' cuando est expuesto a las a,latoxinas: basados en el establecimiento de l%mites mximos de micotoxinas de acuerdo con los ni$eles internacionales' ser%a un paso importante para la Repblica Dominicana' en el sentido de +ue no su,ra en el ,uturo pre3uicios comerciales por causas de las barreras sanitarias impuestas por los pa%ses importadores de alimentos .rado' >D8D!( Es rele$ante aplicar .rogramas para el Control de Micotoxinas con el ,in de conducir a un ma"or conocimiento de la problemtica originada por estos compuestos txicos en el pa%s " contribuir a la estructuracin " promulgacin de una legislacin estricta " ms acorde a las exigencias del consumidor' " del mercado internacional Contreras' @**D!: basados en el establecimiento de l%mites mximos de micotoxinas de acuerdo con los ni$eles internacionales' ser%a un paso importante para la Repblica Dominicana' en el sentido de +ue en un ,uturo prximo nuestro pa%s podr su,rir per3uicios comerciales por causa de las barreras sanitarias impuestas por los pa%ses importadores Gal$ano' @**A!( Las micotoxinas ocasionan p#rdidas en productos agr%colas +ue son desec&ados Garc%a' @**@!: por lo +ue la me3or manera de mane3ar este problema es reduciendo las concentraciones de a,latoxinas /?0>! en los alimentos de animales ?alla&' @**D!(

+I+%IOGRAFIA& 1. 2. A! i**(0( %. E47e*e8( O. %97e- A' E4 *( o3!(8o:i/( A 2/( 8o:i/( m2860e/(; Revi48( de To:i3o*o0,( <"##4=> "1<1= +!23io C. C( !i(*e4 P. G2-m6/ J' P!od233i9/ de ()*(8o:i/(4 e/ m(,- i/ vi8!o' Revi48( Me:i3(/( de Fi8o7(8o*o0,( <"##1=> 1?& "1@

3. 4. 5. 6.

C(*d(4 E'. Si*v( A' My3o8o:i/4 i/ 3o!/- (4ed )ood 7!od2384 3o/42med i/ +!(-i*& A/ e:7o42!e (44e44me/8 )o! )2mo/i4i/(4' J' A0!i3 Food CAem <"##B=> 55 Ce*iC T e8 (*' A)*(8o:i/ M1 3o/8(mi/(8io/ i/ 7(248e!i-ed mi*C' Ve8 A!3Aiv <"##5=> B5<1=& 5B CD47ede4 A. Di(- G' A/(*y4i4 o) ()*(8o:i/4 i/ 7o2*8!y (/d 7i04 )eed 24ed i/ Co*om i(' JAOAC <1??B=> @#& 1"15 Co/8!e!(4 O. Ei*3Ae4 A' De8e!mi/(3i9/ de ()*(8o:i/(4 e/ (*ime/8o4 de m(yo! 3o/42mo i/)(/8i* 3ome!3i(*i-(do4 e/ *( 3i2d(d de P(m7*o/(. /o!8e de S(/8(/de!' +i482(& Revi48( de *( F(32*8(d de Cie/3i(4 +64i3(4. U/ive!4id(d de P(m7*o/(. Co*om i( <"##?=> B<1= D(/ie* %. Fe!!(!y M. G2e!!e!o %. T(!(de**(4 J' C2(/8i)i3(3i9/ de ()*(8o:i/(4 e/ *( *e3Ae )*2id( 7(!( e* 3o/42mo A2m(/o y e/ (*ime/8o4 7(!( e* 0(/(do *e3Ae!o' Ce/8!o de E482dio4 de Co/8!o* de Co/8(mi/(/8e4 CESCCO Di!e33i9/ Ge/e!(* de S(*2d. Te023i0(*7(. Fo/d2!(4 <1??4= Mo/o0!(),( No' G-?4 D(/ie* %. Fe!!(!y M. G2e!!e!o %. T(!(de**(4 J' C2(/8i)i3(3i9/ de ()*(8o:i/(4 e/ *( *e3Ae )*2id( 7(!( e* 3o/42mo A2m(/o y e/ (*ime/8o4 7(!( e* 0(/(do *e3Ae!o' Ce/8!o de E482dio4 de Co/8!o* de Co/8(mi/(/8e4 CESCCO Di!e33i9/ Ge/e!(* de S(*2d. Te023i0(*7(. Fo/d2!(4 <1??4= Mo/o0!(),( No' G-?4 De/*i M. PD!e- J. Co/8(mi/(3i9/ 7o! mi3o8o:i/(4 e/ *o4 7ie/4o4& E)e38o4. 8!(8(mie/8o y 7!eve/3i9/' XXII C2!4o de E47e3i(*i-(3i9/ FEDNA. +(!3e*o/( <"##G=> E47(H( 1G y 1B o382 !e

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10. D,(- G. E47i8i( E' O332!!e/3e o) ()*(8o:i/ M1 i/ !e8(i* mi*C 4(m7*e4 )!om +o0o86. Co*om i(' Food Addi8ive4 (/d Co/8(mi/(/84. "##G> "$<@=& @11 11. Di!Aeime! G. C!e77y E' Me3A(/i4m o) (38io/ o) o3A!(8o:i/ A' IARC S3i P2 * <1??1=> 115& 1B1 12. D2(!8e S. JimD/e- %' Mi3o8o:i/(4 e/ *( 4(*2d 7I *i3(' Revi48( de S(*2d PI *i3( <"##G=> @ <1= 13. E*ey R' M(Jo! io*o0i3(* 3o/4e32e/3e4 o) A)*(8o:i3o4i4 i/ (/im(* 7!od238io/4' J A/im S3i <1??"=>B#> $?G4 14. E47i/do*( S' Mi3o8o:i/(4 y mi3o8o:i3o4i4 e/ e* 0(/(do ovi/o *e3Ae!o' Revi48( CA(7i/0o Se!ie4 Ko/(4 A!id(4 <"##G=> 5& @? 15. F(**(A A. J()(!i T. F(**(A A. R(A/(m( M' De8e!mi/(8io/o) ()*(8o:i/ M1 *eve*4 i/ I!(/i(/ LAi8e(/d 3!e(m 3Aee4e' Food (/d CAemi3(* To:i3o*o0y <"##?=> "B> 1@B" 16. Fe!!e! P' Co/42mo de *638eo4 e/ A!0e/8i/(& Evo*23i9/ y 7(/o!(m( (382(*' A382(*iO48eo*o0,(. <"##B=> $<"=&@1 17. F*o!e4 G. M(!8,/e- R. Go/-(*o E. Fe!/6/de- E' P!e4e/3i( de !e4id2o4 y 3o/8(mi/(/8e4 e/ *e3Ae A2m(/(' Revi48( E47(Ho*( de S(*2d PI *i3( <"##"=> BG<"= 18. G(*v(/o F e8 (*' My3o8o:i/4 i/ 8Ae A2m(/ )ood CA(i/' I/& Di(- D' TAe mi3o8o:i/( *2e ooC' No88i/0A(m& No88i/0A(/ U/ive!4i8y <"##5=> 1@$

19. G(!3,( J. Die- A. Mo/8(H( G. %97e- J' Mi3o8o:i/(4 e/ !2mi(/8e4& U/ 7!o *em( 7(4(do o 7!e4e/8e' Co/0!e4o de *( So3ied(d E47(Ho*( de medi3i/( i/8e!/( ve8e!i/(!i( <"##"= U/ive!4id(d de %e9/ 20. Gi(3omi/i %. Fi3C F. Di*Ci/ P. M(**m(// C' De4em7e/Ao e 7*2m(0em de )!(/3o4 de 3o!8e i/8o:i3(do4 7o! ()*(8o:i/(4' Revi48( Cie/3i( R2!(* <"##G=> $G<1=. 21. 5((/ 5. ECe/ F' A)*(8o:i/ M1 *eve*4 i/ UFT mi*C (/d C(4A(! 3Aee4e 3o/42med i/ T2!Cey' Food (/d CAemi3(* To:i3o*o0y <"##@=> 4G& $"@B 22. 5( (C +. Do 4o/ A. V(! I' S8!(8e0ie4 8o 7!eve/8 my3o8o:i/ 3o/8(mi/(8io/ o) )ood (/d (/im(* )eed' C!i8i3(* RevieL4 i/ Food S3ie/3e4 (/d N28!i8io/ <"##G=> <4G=& 5?$ 23. 5!o0A P' E7idemio*o0y o) mi3o8o:i/( 7o!3i/e /e7A!o7(8Ay' No!di4C Ve8e! <1?BG=> "@& 45" 24. %ede-m( P. %ede-m( D. +o0(/8e4 S' A)*(8o:i/(4' A38( MDdi3( Co48(!!i3e/4e <"##4=> 4G<4= 25. Mo!o/ GA' De8e33i9/ de (d238o4 de ()*(8o:i/( +1-(* Imi/( 4D!i3( 7o! !(dioi/m2/o(/6*i4i4 e/ 7(3ie/8e4 3o/ 7(8o*o0,(4 (4o3i(d(4 3o/ 42 7!e4e/3i( e/ M(8(mo!o4. MD:i3o <8e4i4=U/ive!4id(d A289/om( de N2evo %e9/ <"##$= 26. Mo44 M' My3o8o:i/4' My3o* Re4 <1??G=> 1##& 51$ 27. N(33A( %. C(v(-o4 N. To!!e4 A. C(48i**o M. Ro *edo A' O3!(8o:i/(4 y 42 im7(38o e/ *( 4(*2d' Revi48( Cie/3i( UAN% <"##5=> @<$=& $B$ 28. O*ivei!( J. +i*e4Ci %. Nove**o D. M(3A(do C' I/3ide/3e o) ()*(8o:i/4 i/ !i3e 8o e 3o/42med y mi*i8(!ie4 i/ 8Ae +!(-i*i(/ (!my y 8Ai/ *(ye! 3A!om(8o0!(7Ay (/d Ai0A 7e!)o!m(/3e *i12id 3A!om(8o0!(7Ay me8Aod4' Cie/3 A0!o8e3. %(v!(4' <"##G=> $"<4=&1"$@ 29. O!0(/i-(3i9/ de *(4 N(3io/e4 U/id(4 7(!( *( A0!i32*82!( y *( A*ime/8(3i9/' Comi4i9/ de* Code: A*ime/8(!i24 "# Pe!,odo de Se4io/e4 P!o0!(m( Co/J2/8o FAOMOMS 4o !e No!m(4 A*ime/8(!i(4 <1??$=. Gi/e !( 30. O!8,- C' A/6*i4i4 de ()*(8o:i/( M1 e/ *e3Ae )!e43( de e48( *o4 *e3Ae!o4 de A!e12i7(' Rev I/v Ve8 Pe!I <"##?=> "#<1=&1$? 31. PeH( D' %( e:7o4i3i9/ ( *( ()*(8o:i/( +1 e/ (/im(*e4 de *( o!(8o!io y 42 4i0/i)i3(do e/ *( 4(*2d 7I *i3(' Revi48( S(*2d PI *i3( de MD:i3o <"##B=> 4?<$= 32. Pie! A' M(Jo! io*o0i3(* 3o/4e12e/3e4 o) A)*(8o:i3o4i4 i/ (/im(* 7!od238io/4' J A/im(* S3i <1??"=> B#& $?G4 33. P!(do G. M(88o4 S. Pe!ei!( E' N,vei4 de ()*(8o:i/(4 em (*02/4 (*ime/8o4 3o/42mido4 em +e*o Ao!i-o/8e /o 7e!,odo de 1?@$ ( 1?@@' Cie/3i( e Te3/o*o0,( de (*ime/8o4 <1?@?=> ?<"=& 1$@ 34. SAe7(!d G' A)*(8o:i/ (/(*y4i4 (8 8Ae e0i/i/0 o) 8Ae 8Le/8y-)i!48 3e/82!y' A/(* +io(/(* CAem <"##?=> $?5& 1"15 35. Smi8A J. Ro44 5' TAe 8o:i0e/i3 (47e!0i**i. I/& Mi3o8o:i/4 (/d A/im(* Food' Smi8A J. Fe/de!4o/ R' edi8o!4 CPR P!e44 <1??1= 36. S20i8(-5o/i4Ai N. S(8o T. S(i8o T. N(C(Jim( M. e8' A*' E:7o42!e 8o ()*(8o:i/4 i/ J(7(/& !i4C (44e44me/8 )o! ()*(8o:i/( +1' Food Addi8ive4 (/d Co/8(mi/(/84 <"#1#=> "B<$=& $G5

37. T2!/e! E' F2/0(* me8( o*i8e4' %o/do/. A3(demi3 P!e44 <1?B1=> 44G 38. Ki/8-e/ F' E* 7!o *em( de *(4 ()*(8o:i/(4' P2 * Cie/8 Ro3Ae I/8 Moyo <1?B5=