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Todas las posibles combinaciones, se define sinergismo cuando las combinaciones de los dos

antimicrobianos, cada uno a un cuatro de la CMI, o menos inhiben el crecimiento bacteriano. Este
resultado se expresa como ndice de concentracin inhibitoria fraccionaria (CIF). Hay sinergismo
cuando el ndice es 0,5 y antagonismo si es 2. Con este mtodo tambin se pueden determinar
interacciones bactericidas y la CMB, mediante el cultivo a partir de cada combinacin de
concentraciones o de cada concentracin de antibitico solo, respectivamente.
Estudian el efecto bactericida a lo largo del tiempo para cada antibitico solo o en combinacin.
Consiste en la siembra repetida en el tiempo a partir de tubos que contienen antibiticos solos o
en combinacin. Posteriormente, se realiza un recuento de las colonias de bacterias que
sobreviven con el tiempo y se representa grficamente (1Fig. 4). Se define sinergismo cuando hay
un aumento de letalidad 100 ufc/ml a las 24 horas en la curva de la asociacin frente a la del
antimicrobiano ms activo en solitario; hay antagonismo cuando existe un aumento en el
crecimiento 100 ufc/ml a las 24 horas en la curva de la asociacin frente a la del antimicrobiano
ms activo en solitario, y se denomina indiferencia si entre la curva del antimicrobiano ms activo
y la de la asociacin no hay una diferencia de letalidad mayor de 10 veces a las 24 horas.

4.2.3. Mtodo de difusin
Se basa en la misma tcnica que el antibiograma de disco-plata: la colocacin de discos o tiras de
papel absorbente con concentraciones conocidas de antibiticos. Se colocan los discos de los dos
antibiticos a estudiar a una distancia que debe ser igual o ligeramente superior a la del radio de la
zona de inhibicin de los antimicrobianos cuando se examinan por separado. En el sinergismo se
ve una zona de inhibicin que une los halos de los dos antimicrobianos, mientras que en el
antagonismo, esta zona de unin aparece con crecimiento, incluso en las zonas de inhibicin de
los dos antimicrobianos. (Fig. 2).
4.2.4. Mtodo Etest
Consiste en la utilizacin de tiras de Etest de cada antibitico por separado y de los dos
antibiticos conjuntamente. Para realizar la prueba de la combinacin de antibiticos se aplica la
tira del antibitico. A sobre el agar y se deja actuar 1 hora. Posteriormente, se retira y se coloca la
tira del antibitico B sobre la impronta de la primera tira. Se define sinergismo cuando la CMI de
los antibiticos en combinacin es 2 diluciones inferior a la CMI de los antibiticos en
combinacin es 2 diluciones superior a la CMI de los antimicrobianos por separado y adicion o
indiferencia cuando la CMI de la combinacin se diferencia en 1 dilucin con las de los
antibiticos por separado.
5. Conclusiones Prcticas
El estudio de la sensibilidad de los microorganismos a los antimicrobianos se realiza,
principalmente, por tcnicas de dilucin o de difusin. La eleccin de un mtodo u otro se
basa en la facilidad de realizacin, la flexibilidad y la utilizacin de sistema automticos o
semiautomticos.
Las tcnicas de dilucin proporcionan resultados cuantitativos (CMI) y las de difusin,
cualitativos (sensible, intermedio, resistente). Ambos mtodos son parecidos, ya que
existe una correlacin directa entre el dimetro del halo de inhibicin y la CMI.
Las tcnicas bioqumicas y genticas permiten detectar el mecanismo o el gen de
resistencia (produccin de -lactamasas, deteccin de la PBP2a, deteccin del gen mecA)
en poco tiempo (minutos u horas).
La utilizacin del antibiograma mediante Etest directamente sobre muestras clnicas
(hemocultivos, LCR, muestras del tracto respiratorio inferior) proporciona resultados
preliminares en menos de 24 horas.
La lectura interpretada del antibiograma analiza los fenotipos de sensibilidad y permite
deducir posibles mecanismos de resistencia. Adems, permite deducir la sensibilidad de
antibiticos no estudiados en el antibiograma.
El estudio de interacciones entre antibiticos en el laboratorio puede ser de utilidad
cuando en clnica se pretende utilizar una combinacin antimicrobiana para conseguir
sinergismo bactericida.