Sie sind auf Seite 1von 14

Archiv fr Mikrobiologie 50, 343- 356 (1965)

Aus dem Max Planck-Institut fr Kulturpflanzenzchtung Hamburg-Volksdorf


Untersuchungen ber die Bildung und Regeneration
von Fruchtkrpern bei Hutpilzen
I. Pleurotus Florida
Von
GERLIND EO ER
Mit 4 Textabbildungen
(Eingegangen am 10. Dezember 1964)
I n der lteren Literatur gibt es Beispiele fr ein Regenerationsver-
mgen bei Hutpilzen, welches aus einer mehr oder weniger starken
Ergnzung herausgeschnittener Sektoren aus Hut und Stiel besteht
( M A GNU S 1 9 0 1 ) . Diese A rt von Regeneration ist durch eine Verschiebung
der Wachstumszonen und -Intensitten bereits differenzierter Frucht-
krperpartien erklrbar. Sie ist zu unterscheiden von einer Regeneration
neuer, vollstndiger Fruchtkrper aus differenzierten Fruchtkrper-
stcken, wie sie BE VA N U . K E M P 1 9 5 8 fr Flammulina (Gollyhia) velutipes
Gurt. ex. Fr. wohl erstmals beschrieben haben. 1 9 6 1 berichtete auch
K A RP I NSK I ber die Regeneration neuer Fruchtkrper aus greren
Stielstcken von Boletus edulis Bull. ex. Fr. U nter gewissen Bedingungen
wurde auch bei Agaricus bisporus ( Lge. ) Sing, eine Regeneration neuer
Fruchtkrper beobachtet ( EGER 1 9 6 3 ) . Demnach scheint diese Flligkeit
zur Regeneration bei Hutpilzen verbreitet zu sein. Wi e sie zustande
kommt, ist von groem Interesse ; lt doch die uere bereinstimmung
in der A usbildung der Fruchtkrper bei M ycelkulturen und bei der
Regeneration auch eine hnlichkeit der physiologischen Voraussetzungen
fr die Fruchtkrperbildung erwarten. Die Regenerationsfhigkeit nher
zu untersuchen und fr das Studium der M orphogenese auszunutzen,
ist der Zweck dieser und weiterer A rbeiten.
A. Methodik
i. Material
a) Pleurotus Florida. Dieser Stamm wurde von BL O C K (Gainesville/Florida)
als Pleurotus ostreatus (Jacq. ex. Fr.) Qul, isoliert. Die Fruchtkrper unterscheiden
sich unter Kulturbedingungen aber von denen eines Pleurotus ostreatus-8taimme8
aus Deutschland. SMITH (Ann Arbor/Michigan) fand hnlichkeit mit Pleurotus
cornucopiae Paul ex. Fr.^. Bis zur genauen Feststellung der Artzugehrigkeit sei daher
nur von Pleurotus Florida'' die Rede.
1 Herrn Dr. AL E X AN DE R H. SMITH danke ich fr sein Fachurteil.
344 GE RL IN D E GE R : Bildung und Regeneration von Fruchtkrpern bei Hutpilzen. I
b) Agaricus bisporus (Lge.) Sing. E s wurden Fruchtkrper von Handelssorten
und vom Stamm 59 c mit Calvatia-iTmigen Fruchtkrpern (FRITSC HE 1963) ver-
wendet.
c) Flammulina velutipes (Gurt. ex. Fr.) Sing. E in Dikaryon (L^ X L 2 ) stammt
von ASC HAN - BE RG (Uppsala), das andere von K. MoRi (Tokio).
2. Versuchsbedingungen
Die Mycel i en wurden auf 1517 ml Nhrboden mit 2 , 5% Biomalz (Malzin/
Mnchen) und l,5^/o Marokkanischem Agar-Agar in Petrischalen aus Polyst3^ol bei
2 4 C im Dunkeln herangezogen. Zum Schutz vor Austrocknung wurden sie in
Beuteln aus Polythylen gehalten, bis der Nhrboden durchwachsen war. Das
dauerte 710 Tage. Dann kamen die Kulturen zur Fruchtkrperbildung ohne
Beutel in einen Raum mit 182 0C , Tageslicht, Luftzirkulation und Luftbefeuch-
tung (dreimal tglich auf 95 ^/o durch Zerstuben von Wasser mit einem Aerosol-
gert. Minimum 60 ^/o). Fruchtkrperstcke, die sich regenerieren sollten, wurden
nur den fr die Fruchtkrperbildung gnstigen Bedingungen ausgesetzt.
Die Fruchtkrper von Pleurotus und Flammulina wuchsen unter aseptischen
Bedingungen heran und wurden auch aseptisch geerntet und zerschnitten. E in Teil
der Pleurotus-YTuchtkTi^Gr stammte jedoch nicht von dem oben beschriebenen
Agar-Nhrboden, sondern von einem sterilisierten Substrat aus Stroh mit Torf,
Soja- und Baumwollsaatmehl (TIL L 1962 ) oder geschrotetem Hafer (BL O C K 1958).
Alle Fruchtkrper von Agaricus waren unter kommerziellen Bedingungen entstan-
den. Die Versuche mit 1015 Petrischalen je Behandlungsart und Kontrolle wurden
mindestens dreimal von verschiedenen Personen wiederholt. Alle Schalen eines
Versuches wurden entsprechend dem Lateinischen Quadrat" gemischt gestapelt,
um den Einflu eventueller Positionsunterschiede (in bezug auf Licht und Ventila-
tion) auszugleichen.
B. Versuche und Ergebnisse
i . Fruchtkrperbildung von Pleurotus auf Malzagar
Die Fruchtkrperbildung war sehr unregelmig. Frhestens 20 Tage
nach dem A ufstellen der K ulturen i m hellen Raum wurden die ersten
Fruchtkrperanlagen beobachtet. Oft gab es innerhalb des Beobachtungs-
zeitraumes von 40 5 0 Tagen gar keine Fruchtkrper. I m gnstigsten
Versuch waren 8 4 ^/^ der M ycelien frtil. Je Schale gab es 1 2, in sehr
seltenen Fllen 45 Fruchtkrperanlagen, und zwar bevorzugt am Rand.
Die meisten A nlagen blieben kmmerlich und vertrockneten. Nur wenige
wuchsen zu horn- oder geweihartigen Gebilden von 3 5 cm Lnge heran.
Zuweilen gab es rudimentre Hte. Voll entwickelte Fruchtkrper mit
reifen Sporen ( A bb. l a) wurden. nur erhalten, wenn Schalen mit A nlagen
offen in eine feuchte K ammer gestellt und mit feuchter Luft umsplt
wurden. Bei den meisten Versuchen wurde auf die A usbildung vollstndi-
ger Fruchtkrper verzichtet.
Abb. l. a Fruchtkrper von Pleurotus Florida mit reifen Sporen am Rand einer Mycelkultur.
b Stck eines Fruchtkrperstieles, seit 7 Tagen auf Biomalzagar. Aus den Schnittflchen wchst
Mycel heraus, aus der unverletzten Oberflche werden unzhlige Fruchtkrperanlagen regeneriert. In
unmittelbarer Nhe des Agars wachsen einige zu jungen Fruchtkrpern heran, c Mycel von Pleurotus,
auf welches vor 18 Tagen ein Fruchtkrperstck von Agaricus bisporus 59 c gelegt worden ist. Am
Rand der Schale Fruchtkrperanlagen und Fruchtkrper von Pleurotus
Abb. 1 (Legende siehe S. 344)
3 46 GERLIND EGER:
2, Regeneration von Pleurotus
40 Stielstcke ( 1 c m 0 , etwa 1,5 cm lang) von wohlentwickelten
Fruchtkrpern und 3 0 kmmerliche, ganze Fruchtkrper mit rudiment-
ren Hten ( 0 des Stiels 3 4 mm) wurden, entsprechend den Versuchen
von BE VA N U . K E M P ( 1 9 5 8 ) auf frischen M alzagar gelegt. A us ersteren
wuchs aus den Schnittflchen ppig M ycel heraus. Gleichzeitig regene-
rierte die unverletzte Oberflche unzhlige Fruchtkrperanlagen. Beson-
ders in unmittelbarer Nhe des A gars wuchsen sie krftig. Bereits nach
7 Tagen gab es auf allen Stcken neue Fruchtkrper von etwa 1 cm Lnge
( A bb. 1 b) . Von den kmmerlichen Fruchtkrpern regenerierte einer nicht.
Er bedeckte sich ganz mit dichtem, flauschigem M ycel. A uch auf den
anderen, kmmerlichen Exemplaren war auf der Oberflche mehr oder
weniger, kurzes oder flauschiges M ycel zu beobachten. I n allen Fllen
war bei Versuchsende die regenerierte Fruchtkrpersubstanz ein M ehr-
faches der A usgangssubstanz.
P ilzmycelien lassen sich ohne zu starke Einbue der Lebensfhigkeit
durch A ufbewahren bei 20 C konservieren ( CA BM I CHA EL 1 9 62; R A P E R ,
J. R. , persnliche M itteilung) . Es wurde geprft, ob sich auch Frucht-
krperstcke und ihre Regenerationsfhigkeit auf diese Weise haltbar
machen lassen. 3 6 Stcke von Stielen krftiger bis kmmerlicher Frucht-
krper wurden einige Tage bis Wochen bei 20 C eingefroren. Nach dem
A uftauen war die P ermeabilitt gestrt. Die Stcke sahen mehr oder
weniger glasig aus, und der Zellsaft lie sich leicht herausdrcken.
A uf A gar gelegt, entwickelten sie trotzdem ein krftiges M ycel und
23 regenerierten wie frisches M aterial. Diejenigen Stcke, die nicht
regenerierten, zeigten weder eine Beziehung zur Gre noch zur Her-
kunft der Fruchtkrper. Von mehreren Stcken desselben Stieles
zeigten ein oder zwei keine, die Nachbarstcke aber krftige Regene-
ration.
Bei Pleurotus kann man also wie bei Flammulina velutipes ( BEVA N U .
K E M P 1 9 5 8 ) unter A usnutzung der Regenerationsfhigkeit relativ schnell
neue Fruchtkrper erhalten. Da die Regenerationsfhigkeit nach dem
Tiefgefrieren noch erhalten ist, kann man bei Bedarf auf Gefrierkonserven
zurckgreifen.
3. Hat vorkultiviertes Mycel einen Einflu auf die Regeneration?
Zum U nterschied zu den vorangegangenen Versuchen wurden frische
Stielstcke auf vorkultiviertes M ycel gelegt, welches den A garnhrboden
ganz durchwachsen hatte. Die Regeneration setzte, wie in den voraus-
gegangenen Versuchen, sofort ein und hatte augenscheinlich dasselbe
A usma. Ein Einflu des M ycels lie sich auf diese Weise nicht fest-
stellen.
Bildung und Regeneration von Fruchtkrpern bei Hutpilzen. I 347
4. Beeinflussen regenerierende Fruchtkrperstcke
die Fruchtkrperbildung am Mycel?
1 1 ,5 cm lange, gefrorene Stielstcke kmmerlicher bis sehr krf-
tiger Fruchtkrper wurden, wie in den Versuchen unter 3 . , auf
vorkultiviertes M ycel gelegt und die Fruchtkrperbildung an diesem ver-
glichen mit gleichaltrigen K ontrollkulturen ohne Stielstcke. Die unter-
schiedlichen Ergebnisse dieser Versuche sind in Tab. l zusammen-
gefat. I n zwei Versuchen ( 1 und 2, Tab. l ) setzte die Regeneration auf
allen Stielstcken sofort ein. Nur i m Versuch 1 gab es in einer von zehn
Schalen ( lO^ / o) einen Fruchtkrper am M ycelrand. Bei den K ontrollen
war die Fruchtkrperbildung mit 30/o geringfgig besser. I n zwei
weiteren Versuchen ( 3 und 4, Tabelle 1 ) regenerierte nur ein Teil der
Fruchtkrperstcke. Die Fruchtkrperbildung am M ycel war aber ganz
erheblich in den Schalen mit Stielstcken, dagegen Null bei den K on-
trollen. Sie begann bereits nach 1 0 bzw. 18 Tagen und i m Versuch 3
unabhngig davon, ob die Stielstcke regenerierten oder nicht. I n den
Versuchen 5 und 6 der Tab. 1 blieb die Regeneration aus. Die Frucht-
krperbildung am M ycel war deutlich besser als bei den K ontrollen.
Sie begann frher, und der A nteil der K ulturen mit Fruchtkrpern
war grer. Es gab im Versuchsmittel je Schale mehr und auch grere
Fruchtkrper ( doch sind die letzten beiden U nterschiede nicht bei allen
Wiederholungen signifikant) . I n allen Versuchen, auer 1 der Tab. l ,
wuchs auf den Stielstcken mehr oder weniger M ycel, und zwar um so
dichter, je schwcher die Regeneration war. Die Neubildung von Frucht-
krpern fand nicht in der Nhe der Stielstcke, sondern wie bei den
K ontrollen bevorzugt am ueren Rand des M ycels statt.
Diese Versuche zeigten mit abnehmender Regenerationsfhigkeit der
Stielstcke eine Zunahme der Fruchtkrperbildung am M ycel. U nklar
ist, warum die Stielstcke nicht in allen Versuchen der Tab. l regene-
rierten. Die zweite Spalte der Tab. 1 enthlt A ngaben ber den Zustand
des jeweils verwendeten Fruchtkrpermaterials. Daraus ist ersichtlich,
da es von Versuch zu Versuch variiert war. Eine K orrelation zwischen
der Gre der Fruchtkrper oder dem A usbildungsgrad der Hte und
dem Regenerations vermgen ist nicht zu erkennen.
Wi e kommt die Frderung der Fruchtkrperbildung am M ycel zu-
stande? I n vergleichbaren Versuchen mit nicht gefrorenen Stielstcken
auf vorkultiviertem M ycel ( S. 3 46) hatte das M ycel keine Fruchtkrper
gebildet. A uch in den Regenerations versuchen mit frischem M aterial auf
A gar ( S. 3 46) gab es keine Fruchtkrper. Dagegen fruktifizierte das M ycel
mehrerer K ulturen aus tiefgefrorenen Fruchtkrperstcken, an denen
die Regeneration unterblieben war. Es mu die Frderung der Frucht-
krperbildung daher irgendwie durch das Gefrieren der Fruchtkrper-
stcke ermglicht worden sein. M an kann annehmen, da durch das
Tabelle 1. bersicht ber die Begeneration und die Neubildung von Fruchtkrpern bei Pleurotus-Kulturen,
welche mit gefrorenen Fruchtkrperstcken belegt worden waren
Behandelte Kulturen Kontrollen
Versuch Aussehen der verwendeten FK "/o Kulturen mit regenerierten FK % Kulturen mit FK am Mycel % Kulturen mit FK am Mycel
I II III IV V I II III IV V I II I I I IV V
1 wohlentwickelte Hte, 100 100 100 100 100
_ _ _ _
10
_ _ _
30
Stiel 0 um 10 mm
2 * 1 rudimentre Hte, 100 100 100 100 100 11 33
3 J Stiel 0 um 3 mm 2 0 2 0 40 60 40 50 70 70
4 entwickelte Hte, 12 12 88 88
Stiel 0 um 6 mm
5 kleine Hte, 10 80 100 100 10 68 84
Stiel 0 um 3 mm
6 wohlentwickelte Hte, 53 84 84 14 36
Stiel 0 um 6 mm,
1 mal aufgetaut
7 rudimentre Hte, 54 80 100 100 10 68 84
Stiel 0 um 3 mm.
zerrieben
Erluterung: FK = Fruchtkrper; * = FK bei 8C eingefroren; = es wurden keine FK und auch keine FK-Anlagen gebildet;
IV = Termine, an denen die FK-Bildung kontrolliert wurde; I = 10 Tage nach der Behandlung; IIV = darauffolgend im Abstand
von 78 Tagen.
21
b
Bildung und Regeneration von Fruchtkrpern bei Hutpilzen. I 349
Tiefgefrieren und A uftauen ein Teil der
Zellen geschdigt oder sogar zerstrt wird.
Nach dem A uftauen knnte aus diesen
Zellen ein unbekannter Faktor in das
M ycel gelangen und die Fruchtkrper-
bildung induzieren. Die A bgabe dieses
Faktors an das M ycel knnte durch die
erhhte P ermeabilitt des P lasmas oder
durch den ausgelaufenen Zellsaft gefrdert
werden. Eine solche A nnahme knnte
auch verstehen helfen, warum in Ver-
such 1 und 2 der Tab. l eine St i mu l a t i o n
der Fruchtkrperbildung am M ycel aus-
gebeben ist. Die Fruchtkrperstcke
von Versuch 1 waren dicker und tauten
daher langsamer auf als die Stcke in den
anderen Versuchen ( vgl. Tab. l ) . Der frag-
liche Faktor knnte bei den grten
Stcken whrend des langsameren A uf-
tauvorgangs wieder resorbiert worden
sein. I n Versuch 2 wurden Stcke ver-
wendet, welche nur bei S'^C eingefroren
waren. Hier knnte die zur Freisetzung
des Faktors notwendige Schdigung von
Zellen unzureichend gewesen sein. Zu einer
Erklrung fr die ungleichmige R e g e -
ne r a t i o n in Tab. l verhilft eine solche
A nnahme aber nicht.
Sollte tatschlich ein Induktionsfaktor
aus zerstrten Zellen in das M ycel gelangen
knnen, so mte sich mit frischem, aber
zerriebenem Stielmaterial ebenfalls eine
Frderung der Fruchtkrperbdung am
M ycel erreichen lassen. Tab. 2 zeigt das
Ergebnis von vier Versuchen. Es wurden
12 kmmerliche Fruchtkrper mit rudi-
mentren Hten in steriHsierten Rei b-
schalen zerrieben und der Fruchtkrperbrei
auf einer engbegrenzten Stelle auf das
M ycel aufgetragen ( Versuch 1 3 ) . I n
Versuch 4 wurde die dreifache M enge
verwendet. I n allen Versuchen gab es
eine Frderung der Fruchtkrperbildung
I S I
I I I
I I I
Gi -rH lO
lO 00
1 ^ I
CD CO l >
O CO I >
I
s I I
I I I
Ii
3 5 0 GEBLIND EGER:
am M ycel gegenber den K ontrollen. I n den Versuchen 24 machte sie
sich auch an den greren M ittelwerten fr die Fruchtkrperzahl je
Schale und die Fruchtkrperlnge deutlich ( diese Differenzen sind jedoch
nur bei Versuch 2 und 3 signifikant) . I n allen Versuchen traten frher
oder spter auch auf dem Fruchtkrperbrei Fruchtkrper auf, beson-
ders frhzeitig und hufig bei Versuch 4. Diese auf dem Brei entstandenen
Fruchtkrper mu man wohl als Regenerate ansehen, nicht als echte
Neubildung, wie am M ycel : Die Zerstrung der zhen Fruchtkrper
war nur unvoU kommen, und es blieben stets kleine, faserige Stckchen
erhalten. Ein Versuch wurde auch mit gefrorenen, zerriebenen Frucht-
krpern durchgefhrt ( Tab. 1 / 7) . Er zeigte jedoch gegenber den Ver-
suchen 5 und 6 der Tab. 1 keine weitere Frderung.
Das wichtigste Ergebnis sei nochmals hervorgehoben: Stielstcke
von Pleurotus enthalten einen Induktionsfaktor. Dieser kann ber die
Zerstrung von Zellen in das M ycel gelangen und dort die Fruchtkrper-
bildung auslsen. Ob die aus Stielstcken hervorwachsenden Regenerate
die Fruchtkrperbildung am M ycel irgendwie beeinflussen knnen, lt
sich jedoch aufgrund der bisherigen Versuche nicht entscheiden.
5 . Beeinflut artfremdes Fruchtkr per material die Fruchtkrperbildung ?
I n der Einleitung wurde erwhnt, da die Regeneration neuer Frucht-
krper aus Stielstcken eine bei Basidiomyceten verbreitete Fhigkeit
zu sein scheint. Nachdem bei Pleurotus ein Induktionsfaktor nach-
gewiesen worden ist, der von Fruchtkrperzellen losgelst werden kann,
ist ein entsprechender Faktor auch bei anderen Hutpilzen zu erwarten.
Die nchsten Versuche sollten zeigen, ob dieser auch in anderen A rten
vermutete Faktor auf Pleurotus-Mjcel wirkt.
Fruchtkrpermaterial von Flammulina velutipes und Agaricus bisporus wurde,
entsprechend den vorherigen Versuchen, auf vorkultiviertes Mycel von Pleurotus
gelegt. In den Versuchen mit Flammulina waren es nur Stiele oder Stcke davon.
VergHchen selbst mit kmmerlichen P/6^rows-Fruchtkrpern handelte es sich um
wenig Substanz. Fr die Versuche mit Agaricus wurden teilweise junge Frucht-
krper verwendet, sogenannte buttons" der angelschsischen Literatur. Der Hut
hatte sich bereits deutlich vom Stiel abgesetzt, der aber noch nicht gestreckt war.
Die frisch geernteten Fruchtkrper wurden sauber abgeputzt und der Stiel in halber
Hhe abgeschnitten. In Parallelversuchen wurden aseptisch herausgenommene
Stcke groer Fruchtkrper (besonders von Stamm 59 c) verwendet. Die Substanz-
menge entsprach etwa derjenigen in den Versuchen mit Stielstcken von Pleurotus,
Das Fruchtkrpermaterial wurde tiefgefroren oder zerrieben, zuletzt auch frisch
und unzerkleinert verwendet.
I n allen Versuchen mit Flammulina gab es eine Frderung der Frucht-
krperbildung gegenber den K ontrollen. Besonders deutlich war sie in
einem Versuch mit frischen, nicht zerriebenen Stielstcken, in welchem
die K ontrollkulturen keine Fruchtkrper gebildet hatten ( A bb. 2) . I n
allen Fllen wurde die Fruchtkrpersubstanz von dem Pleurotu^-M.jql
Bildung und Regeneration von Fruchtkrpern bei Hutpilzen. I 3 5 1
schnell und dicht berwachsen. A uch mit Agaricus gab es stets eine
deutliche Frderung der Fruchtkrperbdung. Sie war hher, wenn
frisches M aterial verwendet wurde, vor allem ganze , , buttons", die mit
80.
S 60
40.
29 37 Tbgenach
der Behandlung
20.
Ol
I
Abb. 2
22
Abb. 3
X
43 Tage nach
der Behandlung
Abb. 2 . Frderung der Fruchtkrperbildung von Pleurotus durch Fruchtkrperstcke von Flammulina
velutipes. Auf vorkultiviertes Pleurotus-Mycel wurden Stcke frischer i^'fammMKmo-Stiele gelegt. Die
senkrechten Sulen zeigen die Anzahl Kulturen in Prozent, die zu den jeweiligen Beobachtungstermi-
nen Fruchtkrper gebildet hatten: Kontrollen ohne Plammulina-Stcke; I I mit Flammulina
Abb. 3. Frderung der Fruchtkrperbildung von Pleurotus durch ^ffancws-Fruchtkrper. Auf vorkulti-
viertes Mycel von Pleurotus wurden frische und gefrorene Fruchtkrper von Agaricus bisporus gelegt
(vgl. Abb. 4). Die senkrechten Sulen zeigen die Anzahl Kulturen in Prozent, die zu den jeweiligen
Beobachtungsterminen Fruchtkrper gebildet hatten: Kontrollen ohne Fruchtkrperstcke;
I I Agaricus frisch; Agaricus gefroren
Abb. 4. Frderung des Mycelwachstums von Pleurotus durch gefrorene Fruchtkrper von Agaricus
bisporus. Auf gleichaltriges PfeMro(s-Mycel wurden 8 Tage vor Aufnahme des Fotos junge Agaricus-
Fruchtkrper, buttons", gelegt. Das oberste Hutstck wurde abgeschnitten, damit die Petrischalen
geschlossen werden konnten. Linke Schale mit frischem, rechte mit 2 4 Std bei 2 0C eingefrorenem
Fruchtkrper
3 5 2 GERLIND EGER:
der breiten Schnittflche auf das Pleurotus-Mjcel aufgesetzt worden
waren ( siehe A bb. 3 ) . A uch das Agaricus-Material wurde von Pleurotus-
Mycel schnell und dicht flauschig berwachsen, besonders tiefgefrorene
Stcke. Letztere verursachten auerdem eine schnelle und starke Wachs-
tumsfrderung des M ycels auf der gesamten A garoberflche ( A bb. 4) .
Die Fruchtkrper entstanden wieder bevorzugt am Rand der K ulturen
( A bb. l c ) .
Es ist ganz offensichtlich, da auch in den Fruchtkrpern von Flam-
mulina und Agaricus etwas enthalten ist, was die Fruchtkrperbildung
am Pleurotus-Mjcel stimuliert.
C. Diskussion
Bei M ycelkulturen ist die Fruchtkrperbildung ein Ereignis, welches
nicht immer gleich gut stattfindet. Hinzu kommt, da geraume Zeit
erforderlich ist, bis das M ycel den fr die Fruchtkrperbdung not-
wendigen Zustand erreicht hat. Die Regeneration bei Pleurotus Florida
gestattet nicht nur, Zeit zu sparen, sondern auch von den M ycelkulturen
unabhngig zu werden, zumal sich auch durch Gefrierung konserviertes
M aterial verwenden lt. A llerdings tritt auch die Regeneration nicht
mit absoluter Sicherheit ein. Wi e schon BE VA N U . K E M P ( 1 9 5 8 ) fr
Flammulina velutipes berichtet haben, gibt es immer wieder einzelne
Stielstcke, welche sich statt mit Regeneraten mit dichtem M ycel be-
decken. Eine Erklrung wurde dafr noch nicht gefunden. Bei bisherigen
U ntersuchungen wurde aber auch noch nicht auf einen eventuellen Ein-
flu des A lters oder des Entwicklungszustandes der Fruchtkrper
geachtet. Es knnte auch sein, da die Regenerationsfhigkeit ver-
schiedener Fruchtkrperteile unterschiedlich ist. Sorgfltig angelegte
Regenerationsversuche, die alle diese M glichkeiten bercksichtigen,
stehen noch aus.
BE VA N U . K E M P ( 1 9 5 8 ) machten keine A ngaben darber, ob bei den
Flammulina-Kultmen, die aus Fruchtkrperstcken hervorgegangen
sind, neben der Regeneration von Fruchtkrpern auch Fruchtkrper-
bdung am M ycel auftrat. SI NDEN, TSC HI ERP E U . HA TJSEB ( 1 9 6 2)
berichteten, da bei Agaricus bisporus transplantierte, wachsende Frucht-
krper die Bildung von Fruchtkrperanlagen in ihrer U mgebung unter-
drckten. Diese U nterdrckung dauerte so lange an, bis die Frucht-
krper geerntet wurden oder Sporenreife erlangt hatten. - Einige Ver-
suche mit Pleurotus sollten prfen, ob Fruchtkrperstcke oder daraus
regenerierte Fruchtkrper eventuell die Fruktifikation am M ycel hem-
men. A uch eine Beschleunigung oder Hemmung der Regeneration durch
ein vorgebdetes M ycel wurde erwogen und experimentell geprft. Die
Versuche ermglichen jedoch noch keine Entscheidung dieser Fragen,
we sie nicht gengend differenziert angelegt waren und weil zum Te
Bildung und Regeneration von Fruchtkrpern bei Hutpilzen. I 3 5 3
gefrorenes Fruchtkrpermaterial verwendet wurde. Letzteres verhielt
sich in seiner Wirkung auf das M ycel aber anders als Stcke frischer
Fruchtkrper.
Nachdem bei niederen P ilzen der Nachweis von Stoffen gelungen war,
welche die Reproduktion beeinflussen ( Zusammenfassung siehe C OC H-
RA NE 1 9 5 8 ) , wurde auch bei Basidiomyceten eine stoffliche, vielleicht
hormonartige Grundlage der Fruchtkrperbdung erwartet. Es war
wiederholt festgesteU t worden ( BA VENDA M M 1 9 3 6 ) , da holzzerstrende
P ze frher Fruchtkrper bdeten, wenn als A usgangsmaterial fr die
K ulturen nicht M ycel, sondern ein Fruchtkrperstck genommen wurde
BE VA N U . K E M P ( 1 9 5 8 ) zeigten, da K ulturen von Flammulina velutipes
die mit einem Homogenat aus Fruchtkrpern angelegt waren, frher
fruktifizierten als Vergleichskulturen mi t homogenisiertem M ycel. K ul
turen, fr welche altes M ycel zum Beimpfen verwendet wurde, frukti
fizierten bevorzugt auf oder dicht neben dem Impfmaterial ( FA LCK 1 9 0 2
zitiert bei BA VENDA M M 1 9 3 6 ; BE VA N U . K E M P 1 9 5 8 ) . Nun wurde an
genommen, da im M ycel mit zunehmendem A lter ein die Fruchtkrper
bdung auslsender Stoff gebdet wrde imd da dieser Stoff in Frucht
krpern leichter entstnde als i m M ycel. Deshalb versuchten BE VA N U
K E M P ( 1 9 5 8 ) sowie HA ND K E ( 1 9 6 2) einen wirksamen Stoff aus Frucht
krpern zu isolieren ergebnislos.
Die vorliegende A rbeit mit Pleurotus demonstriert erstmalig, da aus
Fruchtkrperstcken mit geschdigten oder zerstrten ZeU en ( gefroren,
zerrieben) ein Faktor in ein bereits entwickeltes M ycel bergehen und
dort die Fruchtkrperbdung stimulieren kann. Die neuen Fruchtkrper
entstehen in grerem, mehrere Zentimeter betragendem A bstand vom
zugesetzten Fruchtkrpermaterial. Dabei mu entweder der Faktor
selbst oder ein von ihm ausgehender Reiz in dem M ycel weitergeleitet
werden. Ferner demonstriert diese A rbeit, da eine gleiche Stimulation
durch artfremdes M aterial hervorgerufen werden kann; im Gegensatz
zu arteigenem auch dann, wenn es weder gefroren noch zerrieben ist.
Doch ist auch in diesen FU en mi t einer Schdigung oder A bttung der
Hyphen in den Fruchtkrperstcken zu rechnen, da Pleurotus-MyGQl
die Agaricus- und FlammulinaStoke sehr schneU und dicht berwchst.
Der Beweis fehlt aU erdings noch.
Es wre voreilig, in diesen Versuchen mit Pleurotus den Nachweis
eines artunspezifischen Fruchtkrper-Bdungshormons zu sehen. Zwar
haben neueste A rbeiten bereits die Existenz eines Streckungshormons
oder Wuchsstoffes in Fruchtkrpern von Agaricus bisporus sehr wahr-
scheinlich gemacht, welcher in den LameU en gebdet wird ( HA GI M OTO
1 9 6 3 ; GRITEN 1 9 6 3 ) , und SI NDEN, TSC HI ERP E U . HA U SE R ( 1 9 6 2) haben
zur Erklrung einer Hemmung der A nlagenbdung durch wachsende,
transplantierte Fruchtkrper von Agaricus bisporus die Wirkung eines
Arch. Mikrobiol., Bd. 50 24
3 5 4 GEBLIND EGER:
Hormons erwogen. A llein die sprlichen Informationen, die wir aus der
vorliegenden A rbeit schpfen, schlieen andere Hypothesen nicht aus.
So knnte z. B. im Biomalz M angel an einer niedrigmolekularen Ver-
bindung herrschen, welche zur Fruchtkrperbdung notwendig ist und
von Pleurotus nicht synthetisiert werden kann. Eine solche Verbindung
knnte der Cofaktor eines Enzyms sein, das zur Fruchtkrperbdung
ntig ist und in Fruchtkrperzellen in relativ groer M enge in lebenden
Strukturen eingeschlossen ist. Das Enzym wre nicht beliebig in das
M ycel verfrachtbar. Nach der Zerstrung der Zellen knnte aber der
Cofaktor von vegetativen Hyphen aufgenommen werden und die Frucht-
krperbdung an einer gnstigen Stelle des M ycels ermglichen. Eine
solche A nnahme wrde auch die Wirkung artfremden Fruchtkrper-
materials verstndlich machen.
Di e Frderung der Fruchtkrperbdung am M ycel durch ber-
tragung lebender Bestandtee aus FruchtkrperzeU en kann mit sehr
hoher Wahrscheinlichkeit ausgeschlossen werden. Es mten sonst gerade
unzerstrte Fruchtkrperstcke der eigenen A rt die Fruktifikation be-
sonders stark beeinflussen und nicht zerriebene Zellen! A uch die Stimu-
lierung durch frische, ganze ^ ^ anct*5-Fruchtkrper spricht eher gegen
die Wirkung von K ernen oder P lasmaelementen. Wenn zwischen art-
fremden P zhyphen auch A nastomosen beobachtet wurden ( BU L L ER
1 9 3 1 ) , so gibt es bis heute nicht den geringsten A nhaltspunkt fr einen
K ern- oder P lasmaaustausch in solchen Fllen.
Welche Hypothese auch immer zur Deutung der Ergebnisse heran-
gezogen wi rd; immer ist die Schwierigkeit gro, wenn man neben der
Frdenmg der Fruktifikation des M ycels auch noch das Verhalten der
Fruchtkrperstcke hinsichtlich der Regeneration bercksichtigen wiU .
Es sind einfach noch zu wenig Tatsachen bekannt. Die Frderung des
Wachstums von Pleurotus-Mjael durch gefrorene ^ ^ anct^ ^ -Fruchtkrper
gibt weitere Rtsel auf. Ein Versuch zur Verknpfung der Beobachtungen
dieser A rbeit mit den Ergebnissen und Hypothesen der Verffentlichun-
gen ber die Fruchtkrperbdung von Psilocyhe panaeoliformis ( U R A -
Y A M A 1 9 60 ) und Agaricus bisporus ( E G E R 1 9 61 ) ^ erscheint zum gegen-
wrtigen Zeitpunkt noch aussichtslos. Es mu noch sehr viel A rbeit
geleistet werden, um einem Verstndnis des P roblems der Fruchtkrper-
bdung bei Hutpzen nherzukommen.
Zusammenfassung
1. M ycelkulturen von Pleurotus auf Biomalz-A gar fruktifizierten nach
20 40 Tagen sehr unregelmig.
1 N ach Abschlu des Manuskriptes wurde mir die Arbeit von TSCHIERP E U .
SINDEN, Arch. Mikrobiol. 49 , 40 3 425 ( 1 9 64) , bekannt. Ich werde sie an anderer
Stelle ausfhrhch diskutieren.
Bildung und Regeneration von Fruchtkrpern bei Hutpilzen. I 355
2 4*
2. A uf Biomalz-A gar gelegte Stielstcke frischer P Zet^ roto-Frucht-
krper regenerierten innerhalb von 1 0 Tagen neue Fruchtkrper. Durch
Gefrieren bei 20 C konservierte Stielstcke behielten ihre Regenera-
tionsfhigkeit zum groen Teil bei.
3 . Wurden frische Stielstcke von Pleurotus auf vorkultiviertes
Pleurotus-Mjcel gelegt, so fand ebenfalls Regeneration statt. Frucht-
krperbdung am M ycel konnte nicht beobachtet werden. Dagegen ver-
ursachten zerriebene oder gefrorene Stielstcke auf vorkultiviertem
M ycel eine Frderung der Fruktifikation.
4. Eine Frderung der Fruktifikation fand auch dann statt, wenn
artfremde Fruchtkrperstcke (Agaricus bisporus, Flammulina velutipes)
auf Pleurotus-Mjcel gegeben wurden. Gefrorene Fruchtkrperstcke von
Agaricus bewirkten auerdem noch eine Wachstumsfrderung des M ycels.
5 . Die neuen Fruchtkrper hatten mehrere Zentimeter A bstand von
dem stimulierenden Fruchtkrpermaterial. Es mu ein Faktor aus
letzterem in das M ycel bergetreten sein. Dieser Faktor oder ein durch
ihn verursachter Reiz mu in dem M ycel weitergeleitet worden sein.
Summary
1. M ycelium-cultures of Pleurotus on malt-agar fruited very irregu-
larly after 20 to 40 days.
2. P ieces of fresh fruit bodies of Pleurotus on malt-agar regenerated
new fruit bodies within 1 0 days. Stalk pieces which were kept frozen at
20 C for longer periods maintained a great deal of their regenera-
tive character.
3 . Fresh stalk pieces of Pleurotus also showed regeneration on pre-
cultivated Pleurotus-mjcelium. Fruit body formation on the mycelium
was not observed. However mazerated or frozen stalk pieces on pre-
cultivated mycelium stimulated fructification.
4. Stimulation of fructification was also observed when pieces of
fruit bodies of different species (Agaricus bisporus, Flammulina velutipes)
were put on mycelium of Pleurotus. Frozen pieces of fruit bodies of
Agaricus additionally stimulated the growth of the Pleurotus mycelium.
5 . The new fruit bodies developed in some distance of the stimulating
fruit body material. A factor must have been released from the fruit
body material into the myceliiun. This factor or a stimulus caused by
it must have been transferred.
Frulein L OTTE BA ETGE und Frau MA RIA NNE SCHNEIDEREIT danke ich fr
zuverlssige Assistenz, Herrn KONRA D E NGELHA RDT fr die Herstellung der Fotos.
Literatur
BA VENDA M M , W . : Erkennen, Nachweis und Kultur der holzverfrbenden und holz-
zerstrenden Pze. Abderh. Handb. biol. Arbeitsmeth. Abt. X I I / 2 , Heft 7
(1936).
356 GE RL IN D E GE B : Bildung und Regeneration von Fruchtkrpern bei Hutpilzen. I
BE VAN , E . A . , and R. F. 0. KE IHP: Stipe Regeneration and Fruit-body Production
in CollyUa velutipes (Gurt.) Fr. Nature (L ond.) 181, 11451146 (1958).
BL O C K, S. S. , G. TSAO , and L . HAN : Production of Mushrooms from Sawdust.
Engeneering Progress at the University of Florida. X I H, N r. 1, Supplement.
Jan. 1959 Technical Paper N o. 158.
BuL L E B, R. : Researches on fungi 4 u. 5 (1931/1933). L ondon: Longmans, Green
and Co.
C ABMIC HAE L , J. W. : Viability of mold cultures stored at 2 0C . Mycologia (N .Y.)
64, 432 - 436 (1962 ).
CocHBANE, V. W. : Physiology of fungi. N ew York: John Wiley & Sons Inc. 1958.
E GE B, G. : Untersuchungen ber die Funktion der Deckschicht bei der Frucht-
krperbdung des Kulturchampignons, Psalliota bispora L ge. Arch. Mikrobiol.
39, 313- 334 (1961).
ber die Regeneration von Fruchtkrperanlagen aus Fruchtkrpern von Hut-
pilzen. Z. Pzkunde 2 9, 2 4 - 2 6 (1963).
FBITSC HE , G. , U. R. V. SE N GBUSC H: Beispiel der spontanen Entwicklung neuer
Fruchtkrperformen beim Kulturchampignon. Der Zchter 38,2 702 74 (1963).
GBTJE N , H. E . : Endogenous Growth Regulation in Carpophores of Agaricus bisporus.
Plant Physiol. 38, 652 - 666 (1963).
HAGIMO TO , HIBO SHI: Studies on the growth of fruit body of fungi IV. The growth
of the fruit body of Agaricus bisporus and the economy of the mushroom growth
hormone. Bot. Mag. 76, 2 56- 2 63 (1963).
HAN DKE , H. H . : Zur Fruchtkrperbdung holzbewohnender Basidiomyceten in
Kultur. Holzzerstrung durch Pze, S. 4349. Intern. Symposium Eberswalde.
Berlin: Akademie-Verlag 1962 .
KABPIN SKI, J. J. : Ergebnisse der ersten E tappe von Arbeiten ber den Steinpilz
(Boletus edulis), Prace institutu badawczego lenictwa N r. 2 45 (1961).
MAGN US, W . : ber die Formbildung der Hutpze. Arch. Biontol. 1, 85161 (1901).
SI N DE N , J. W . , H . J. TSC HIE BPE , and E . HAUSE B: Transplantation of sporophores
as a new method for studying growth and nutritional factors of mushrooms.
Mushroom Sei. V, 2 50- 2 66 (1962 ).
TI L L , 0. : Champignonkultur auf sterilisiertem Nhrsubstrat imd die Wiederver-
wendung von abgetragenem Kompost. Mushroom Sei. V, 12 7133 (1962 ).
UBAYAMA, T. : Studies on fruit body formation of Psilocybe panaeoliformis murril in
pure culture. Memoirs of the Faculty of Liberal Arts & E ducation, Miyazaki
Univ. 9, 393- 461 (1960).
Dr. GE BL IN D E GE B,
Institut fr Allgemeine Botanik der Ruhruniversitt,
463 Bochum-Querenburg, Im L ottental