Cromatografa

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Cromatografa
Cromatgrafo de gases
Colector automtico de fracciones y de muestras
para la cromatografa
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin para la
caracterizacin de mezclas complejas, la cual tiene aplicacin
en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de tcnicas
basadas en el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo
es separar los distintos componentes de una mezcla,
permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos
componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de particin
de los compuestos da como resultado una retencin
diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una
separacin efectiva en funcin de los tiempos de retencin de
cada componente de la mezcla.
La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no
se excluyen mutuamente:
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms
puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final
de muchas sntesis).
Medir la proporcin de los componentes de la mezcla
(finalidad analtica). En este caso, las cantidades de
material empleadas son pequeas.
Historia
El botnico ruso Mijal Tsweet
[1]
(Mikhail Semenovich
Tsweet, 1872-1919) emple por primera vez en 1906 el
trmino "cromatografa" (que proviene del griego y
que significan respectivamente chroma "color" y
graphos "escribir").
A comienzos del ao 1903, Mijail Tsweet us columnas de
adsorcin de lquidos para separar pigmentos vegetales (por
ejemplo, clorofilas). Las disoluciones se hacan pasar a travs
de una columna de vidrio rellena de carbonato de calcio, que finamente dividido de un material poroso que
interacciona de forma diferente con los componentes de la mezcla, de forma que stos se separaban en distintas
bandas coloreadas a lo largo de la columna.
Los primeros equipos de cromatografa de gases aparecieron en el mercado a mediados del siglo XX. A su vez, la
cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) comenz a desarrollarse en los aos 1960, aumentando su
importancia en las dcadas siguientes, hasta convertirse en la tcnica cromatogrfica ms empleada. Sin embargo
esto se ir modificando con el paso de los aos.
Cromatografa
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Clasificacin de los mtodos de separacin en cromatografa
Las distintas tcnicas cromatogrficas
[2]
se pueden dividir segn cmo est dispuesta la fase estacionaria:
Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales tcnicas
son:
Cromatografa en papel
Cromatografa en capa fina
Cromatografa en columna. La fase estacionaria se sita dentro de una columna. Segn el fluido empleado como
fase mvil se distinguen:
Cromatografa de lquidos
Cromatografa de gases
Cromatografa de fluidos supercrticos
La cromatografa de gases incluye a numerosos compuestos orgnicos. En el caso de compuestos no voltiles se
recurre a procesos denominados de "derivacin", a fin de convertirlos en otros compuestos que se volatilicen en las
condiciones de anlisis.
Dentro de la cromatografa lquida destaca la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC, del ingls High
Performance Liquid Chromatography), que es la tcnica cromatogrfica ms empleada en la actualidad,
normalmente en su modalidad de fase reversa, en la que la fase estacionaria tiene carcter no polar, y la fase mvil
posee carcter polar (generalmente agua o mezclas con elevada proporcin de la misma, o de otros disolvente
polares, como por ejemplo metanol). El nombre de "reversa" viene dado porque tradicionalmente la fase estacionaria
estaba compuesta de slice o almina, de carcter polar, y por tanto la fase mvil era un disolvente orgnico poco
polar. Una serie eluotrpica es un rango de sustancias de diferentes polaridades que actan como fase mvil y que
permiten observar un mejor desplazamiento sobre una fase estacionaria.
Separacin de clorofilas mediante cromatografa
en papel
Cromatografa
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Tipos Fase mvil Fase estacionaria
Cromatografa en papel Lquido Papel de celulosa.
Cromatografa en capa
fina
Lquido Gel de slice o almina.
Cromatografa de gases Gas Columnas capilares de slice fundida, columnas empacadas con tierras diatomeas hechas de tubos de
vidrio o metal.
Cromatografa lquida
en fase reversa
Lquido
(polar)
Empaques de siloxano de octilo o siloxano de octadecilo.
Cromatografa lquida
en fase normal
Lquido
(menos polar)
Empaques de slice, almina o un soporte al que se unen qumicamente grupos polares (ciano, amino,
etc).
Cromatografa lquida
de intercambio inico
Lquido
(polar)
Resinas de intercambio inico.
Cromatografa lquida
de exclusin
Lquido Empaques de pequeas partculas de slice o polmeros con red de poros uniforme.
Cromatografa lquida
de adsorcin
Lquido Partculas finamente divididas de slice o de almina.
Cromatografa de
fluidos supercrticos
Lquido Columnas abiertas de slice fundida con recubrimientos internos de varios tipos de siloxanos enlazados y
de enlaces cruzados.
Trminos empleados en cromatografa
[3]
Analito es la substancia que se va a separar durante la cromatografa.
Cromatografa analtica se emplea para determinar la existencia y posiblemente tambin la concentracin de un
analito en una muestra.
Fase enlazada es una fase estacionaria que se une de forma covalente a las partculas de soporte o a las paredes
internas de la columa.
Cromatograma es el resultado grfico de la cromatografa. En el caso de separacin ptima, los diferentes picos
o manchas del cromatograma se corresponden a los componentes de la mezcla separada.

En el eje X se representa el tiempo de retencin, y en el eje Y una seal (obtenida, por ejemplo, a partir de un
espectrofotmetro, un espectrmetro de masas o cualquier otro de los diversos detectores) correspondiente a la
respuesta creada por los diferentes analitos existentes en la muestra. En el caso de un sistema ptimo, la seal
es proporcional a la concentracin del analito especfico separado.
Cromatgrafo es el equipo que permite una separacin sofisticada. Por ejemplo, un cromatgrafo de gases o un
cromatgrafo de lquidos.
Cromatografa
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Cromatografa es el mtodo fsico de separacin en el cual los componentes que se van a separar se distribuyen
entre dos fases, una de las cuales es estacionaria (fase estacionaria) mientras la otra (la fase mvil) se mueve en
una direccin definida.
Eluyente es la fase mvil que atraviesa la columna.
Serie eluotrpica es una lista de disolventes clasificados segn su poder de dilucin.
Fase inmovilizada es una fase estacionaria que est inmovilizada sobre partculas de soporte, o en la pared
interior del tubo contenedor o columna.
Cromatograma correspondiente a una cromatografa liquida en fase reversa para
compuestos fenlicos
Fase mvil es la fase que se mueve en
una direccin definida. Puede ser un
lquido (cromatografa de lquidos o
CEC). un gas (cromatografa de gases) o
un fluido supercrtico (cromatografa de
fluidos supercrticos). La fase mvil
consiste en la muestra que est siendo
separada/analizada y el disolvente, que se
mueven por el interior de la columna. En
el caso de la cromatografa lquida de alta
resolucin, HPLC, la fase mvil es un
disolvente no-polar como el hexano (fase
normal) o bien algn disolvente polar
(cromatografa de fase reversa) y la
muestra que va a ser separada.. La fase
mvil se mueve a travs de la columna de
cromatografa (fase estacionaria) de
forma que la muestra interacciona con la
fase estacionaria y se separa.
Cromatografa preparativa se usa para purificar suficiente cantidad de sustancia para un uso posterior, ms que
para anlisis.
Tiempo de retencin es el tiempo caracterstico que tarda un analito particular en pasar a travs del sistema
(desde la columna de entrada hasta el detector) bajo las condiciones fijadas. Vase tambin: ndice de retencin
de Kovats
Muestra es la materia que va a ser analizada en la cromatografa. Puede consistir en un simple componente o una
mezcla de varios. Cuando la mezcla es tratada en el curso del anlisis, la fase o fases que contienen los analitos de
inters es llamada igualmente muestra mientras el resto de sustancias cuya separacin no resulta de inters es
llamada residuo.
Soluto es cada uno de los componentes de la muestra que va a ser separado.
Disolvente es toda sustancia capaz de solubilizar a otra,y especialmente la fase lquidamvil en cromatografa de
lquidos.
Fase estacionaria es la sustancia que est fija en una posicin en el procedimiento de la cromatografa. Un
ejemplo es la capa de silica en la cromatografa en capa fina.
Cromatografa
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Referencias
[1] La cromatografa. (http:/ / books.google.es/ books?id=XH2HzSlJPywC& pg=PA159) Fundamentos de tecnologa de productos
fitoteraputicos. Nikolai Sharapin. Editorrial Convenio Andrs Bello, 2000. ISBN: 9586980014. Pg. 159-190.l
[2] Tcnicas de bioqumica y biologa molecular. (http:/ / books. google. es/ books?id=iW0yHGmE-JwC& pg=PA179) Jorge David Roriguez
Miranda. Editorial Revert, 1991. ISBN: 8429118195. Cap. 8: Cromatografa. Pg. 179
[3] Glosario de los trminos ms usados en cromatografa. (http:/ / books. google. es/ books?id=efw9ydz9weYC& pg=PA15) Introduccin a la
Cromatagrafa. Stella Torres de Young. Ediciones de la Univ. Nacional de Colombia. ISBN: 9581701192. Pg. 15
Enlaces externos
Cromatografa. (http:/ / www. ugr. es/ ~quiored/ lab/ oper_bas/ crom. htm) Universidad de Granada.
http:/ / www. ulpgc. es/ hege/ almacen/ download/ 39/ 39360/ separaciones_por_cromatografia_1. pdf
Separaciones por cromatografa.] Universidad de Las Palmas de Gran Canaria.
Fuentes y contribuyentes del artculo
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Fuentes y contribuyentes del artculo
Cromatografa Fuente: http://es.wikipedia.org/w/index.php?oldid=74225778 Contribuyentes: .Sergio, Aleator, Alelapenya, Aleposta, Antonorsi, Arjuno3, Armando-Martin, Arquen, Baiji,
Balles2601, Banfield, Barteik, BlackBeast, BlanquitoIng, Camima, Chris zazu, DJ Nietzsche, DanielithoMoya, Davidge, Dermot, Diegusjaimes, Eddie paticonsangre, Edslov, Eduardosalg,
Fadesga, Francorm, Gaijin, GermanX, Gibert10, Gizmo II, Gusgus, Halfdrag, Hanjin, Helmy oved, Hidoy kukyo, Hprmedina, Humbefa, Humberto, Icvav, Isha, Jkbw, Jsanchezes, Killermo,
LMLM, Laura Fiorucci, Leonpolanco, Limbo@MX, Luckas Blade, Luis jaime mgo, Luis1970, MORELO, Macarrones, MadriCR, Magicat, Maleiva, Marsal20, Matdrodes, Miropiro,
Mpeinadopa, Nopetro, Nubecosmica, Omegakent, Orgullomoore, Pacomeco, Penarc, Petruss, Plux, Ramon00, Rapomon, RoyFocker, Runinx, Savh, Sergio Andres Segovia, Shalbat,
SuperBraulio13, Taichi, Technopat, Timbo, Tirithel, Tomy0111, Tosiani, Trafek, Troodon, Txo, UA31, Untrozo, Valadrem, Waka Waka, XalD, Yeza, 419 ediciones annimas
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