La papaya es una fruta tropical de gran demanda a nivel mundial ya que de este fruto se obtienen
varios beneficios al consumirla, como a nivel industrial. En el campo de la Biotecnologa en los
ltimos aos se han realizado investigaciones sobre este fruto especialmente de la extraccin de su ltex que contiene varias enzimas, una de ellas es la papana que tiene varias aplicaciones especialmente de uso comercial. Es una enzima de la hidrolasa de la proteasa de la cistena (EC 3.4.22.2) presente en la papaya. La papana, procedente del ltex de la fruta verde y an sin madurar, es una Thiol Proteasa la cual cataliza las hidrlisis de steres y pptidos. Fue la primera protena vegetal a la cual se le pudo determinar su estructura cristalina la cual consta de 212 residuos de aminocidos, 34 de los cuales estn ionizados (Moncada, 2001) La papana es un polvo blanco o blanco grisceo, sumamente activo, por lo cual debe ser manejado con precauciones, tambin es producida en forma lquida. La papana es insoluble en disolventes orgnicos, y poco soluble en agua y glicerol. Tiene un punto isoelctrico alrededor de un pH 8.75 y una absorcin mxima aproximada de 278nm. La papana en su estado natural presenta una baja actividad enzimtica debido a la presencia en este estado de enlaces azufre azufre (S-S) en el sitio activo de la molcula. Para que la enzima obtenga su capacidad cataltica es necesario transformar los enlaces S-S a enlaces sulfhidrilos libres (S-H). La activacin de la enzima se puede lograr adicionando agentes reductores moderados como la cistena, sulfuros, sulfitos y cianuros. Adems de la adicin de agentes reductores tambin se utiliza un agente quelante como el EDTA el cual elimina la presencia de iones divalentes como Cd, Zn, Fe, Cu, Hg y Pb los cuales catalizan la formacin de enlaces azufre azufre (S-S) (Moncada, 2001). La actividad de la enzima tambin es afectada desfavorablemente al estar expuesta al aire libre debido a que propicia reacciones de oxidacin en la enzima, otros compuestos como las clorometilcetonas de fenilalanina, lisina y reactivos aldehdicos como fenilhidrazina e hidroxilamina afectan negativamente la actividad de la enzima.
La extraccin o aislamiento de la papana a nivel industrial se realiza a partir del ltex de la papaya el cual como se mencion anteriormente contiene una mezcla de enzimas, la composicin de este y algunas de las caractersticas de sus fracciones enzimticas se muestran en el siguiente cuadro.
Tabla N 1. Caracteristicas de las enzimas del ltex de papaya (Zuna, 2012) ENZIMA PESO MOLECULAR PUNTO ISOELECTRICO CONCENTRACIN DEL LATEX Papana 21000 8.75 10% Quimiopapaina 36000 10.10 45% Lizosima 25000 10.50 20%
La papana puede separarse del resto de enzimas y prepararse rpida y econmicamente, en una forma cristalina, en un estado de pureza bueno y en cantidades razonables, a partir del ltex seco comercial. Se han desarrollado muchos mtodos para aislar la papana del resto de enzimas, entre ellos cabe mencionar el desarrollado por Kimmel y Smith, que es uno de los mtodos ms usados de extraccin de papana. (Zuna, 2012) Este procedimiento comprende una extraccin del ltex, eliminacin del material insoluble en el extracto a un pH=9, precipitaciones con sulfato de amonio, seguidas de tres re cristalizaciones. La papana pura obtenida por este mtodo contiene tres componentes: - Papana activa - Papana no activable - Papana activable Por este mtodo se obtienen aproximadamente de 6 a 7 mg de papana pura por gramo de ltex seco. En general, lo que se busca en la purificacin del ltex seco es: - Reducir el contenido de componentes no proteolticos, para obtener una fraccin con mayor actividad proteoltica. - Separar la papana u otro componente del resto de enzimas o compuestos con actividad proteoltica (o al menos incrementar la proporcin de esta). - Obtener un producto ms estable para incrementar su vida de almacenamiento. - Obtener un producto estril para una aplicacin especfica. La papana aislada representa solo una parte menor del total de actividad proteoltica, esto se debe a que hay otra enzima proteoltica presente en el ltex en una proporcin considerablemente mayor, que tambin ha sido aislada en forma cristalina por medio de un procedimiento diferente, siendo esta la quimiopapana. La suma de las actividades de estas dos enzimas cristalinas representa casi el total de la actividad proteoltica del ltex fresco.
Referencias Moncada, K. (2001). OBTENCION DE LAPAPAINA PARAFABRICACION DECREMAS DE USO COSMETICO. Piura, Per. Zuna, J. C. (2012). EXTRACCION DE LA ENZIMA PAPAINA DEL LATEX DE Carica papaya (PAPAYO) CULTIVADO EN EL PAIS Y SU APLICACIN EN CICATRICES TIPO QUELOIDE Y VERRUGAS. San Salvador, El salvador.