EXTRACCIN E IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS DE RESERVA EN ANIMALES Y PLANTAS
18 DE MARZO DEL 2014
Grupo: 1402 Equipo N: 4 Integrantes: Albarran Villanueva Karina Lizbeth Flores Galicia Karina Moreno Hernandez Maleny Vega Rivera Laura Isabel
OBJETIVOS Analizar la importancia biolgica de los carbohidratos de reserva. Extraer polisacridos de muestras diferentes Identificar los polisacridos con la prueba de lugol y Benedict, antes y despus de su hidrlisis Identificar la presencia de glucgeno en el hgado de las ratas FUNDAMENTOS DE LA TCNICA UTILIZADA Carbohidratos Los carbohidratos son molculas formadas por carbono, hidrgeno y oxgeno (C, H, O) e incluyen algunas de las molculas ms relevantes en la vida de los organismos, como son la glucosa, que es universalmente utilizada por las clulas para la obtencin de energa metablica, el glucgeno contenido en el hgado y el msculo, que forma la reserva de energa ms fcilmente asequible para las clulas del organismo y la ribosa y desoxirribosa que forman parte de la estructura qumica de los cidos nucleicos. Los carbohidratos tienen diversas funciones en el organismo destacan: su papel como combustible metablico (1 g de carbohidrato produce 4 Kilocaloras); como precursores en la biosntesis de cidos grasos y algunos aminocidos y; como constituyentes de molculas complejas importantes: glucolpidos, glucoprotenas, nucletidos y cidos nucleicos. Identificacin de carbohidratos de reserva
Identificacin de polisacaridos mediante la prueba del Lugol En solucin acuosa, la amilosa forma estructuras helicoidales lineales y la amilopectina ramificadas, gracias a la formacin de puentes de H entre los grupos OH de la glucosa y las molculas de H 2 O. Si a una disolucin de almidn se le aade I 2 esta toma un color azul intenso. El color que dan los polisacridos con el lugol (solucin de I 2 y de IK) se debe a que el I 2 ocupa espacios vacos en las hlices de la cadena de unidades de glucosa, especialmente de la amilosa, la amilopectina debido a sus ramificaciones retiene menos I 2 , dando una coloracin roja caracterstica; el glucgeno con el lugol da color rojo caoba. Esta unin del I 2 a la cadena es reversible, y por calentamiento desaparece el color, que al enfriarse reaparece. Identificacin de monosacridos mediante la prueba de Benedict Una de las reacciones ms comunes en la identificacin de carbohidratos es la reaccin de Benedict. Esta reaccin es especfica para azcares con grupo reductores libres (C=O). Todos los monosacridos poseen un grupo reductor libre. Los disacridos maltosa y lactosa tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se pierden los grupos reductores de sus componentes cuando sta es formada. Esta prueba se basa en la capacidad del carbohidrato de reducir el Cu2+ en un medio alcalino a Cu+. Este Cu+ se oxida y precipita en forma de Cu2O, lo que proporciona la coloracin positiva de la reaccin. La coloracin producida va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la concentracin de xido de cobre y sta a su vez de la cantidad de cobre reducido.
RESULTADOS Almidn Glucgeno Arroz Papa Hgado de rata
Testigo (-) S/hidrlisis C/hidrolisis Benedict
Lugol Prueba positiva Color azul
Testigo (+) S/hidrlisis C/hidrolisis Benedict
Testigo (-) S/hidrlisis C/hidrolisis Lugol
Testigo (-) S/hidrlisis C/hidrolisis Lugol
Lugol Benedict Glucgeno
Antes de la hidrlisis Positivo Color rojo ladrillo Negativo Color azul Despues de la hidrlisis Negativo - Positivo Precipitado rojo Almidn
Antes de la hidrlisis Positivo Azul intense Negativo Color azul Despues de la hidrlisis Negativo - Positivo Precipitado rojo
ANALISIS DE RESULTADOS Se logr identificar la presencia de carbohidratos de reserva en animales y plantas, y se pudo identificar en que momentos se tenan polisacridos y cuando monosacridos, llevando a cabo la reaccin de lugol y de Benedict antes y despus de la hidrlisis de cada carbohidrato. En la papa se observa un color ms concentrado de lo esperado debido a que el corte no fue muy delgado y hubo un exceso de lugol. Al hacer reaccinar el almidn del arroz con el lugol se observ una coloracin azul debido a la mayor presencia de amilosa que de amilopectina. CONCLUSINES Si se realiza correctamente la hidrlisis de un polisacrido se obtendrn monosacridos, los cuales pueden identificarse fcilmente mediante el reactivo de Benedict y nos dara una reaccin positiva por la presencia de azucares reductores. BIBLIOGRAFA Campbell M.K. Bioqumica. Ed. Thompson, 4 Edicion 2004 Pag 451-457 Alemany L. M. Prcticas de bioqumica. Editorial Alhambra. Espaa. 1983. Pag 212-216 Clark, J.M. Bioquimica Experimental. Ed. Acribia, Espaa 1996 Pag 40-45