IESTP DANIEL ALCIDES CARRIN

CARRERA PROFESIONAL TCNICA EN FARMACIA

GUA DE PRCTICA
BIOQUMICA
CDIGO : 323-F
CICLO : III
lti!
R"#i$i%& : Q'F' OSCAR ALBERTO MUGURU(A LPE(
2)*3
LIMA - PER
Direccin de Farmacia Pgina 1 de 16 Revisado 2013
CARRERA PROFESIONAL TCNICA EN FARMACIA
A$i+&!t,-! : Bioqumica C%.i+/ : 323-F
PRCTICA N0 *
DETERMINACIN DE P1 2 SISTEMAS BUFFER
*'*' I&t-/.,33i%&:
El pH (potencial de hidrgeno) es una medida de la acidez o alcalinidad de una disolucin
!a escala de pH tpicamente "a de # a $% en disolucin acuosa& siendo 'cidas las
disoluciones con pH menores a ( ) alcalinas las que tienen pH ma)ores a ( El pH * (
indica la neutralidad de la disolucin El pH se puede medir de +orma apro,imada mediante
el uso de reacti"os indicadores de pH o de +orma precisa mediante el uso del
potencimetro
-n sistema .u++er es aquella solucin que resiste a un cam.io en el pH por la adicin de
'cidos o .ases Este hecho es de "ital importancia& )a que solamente un le"e cam.io en la
concentracin de hidrogeniones en la c/lula puede producir un paro en la acti"idad de las
enzimas 0e puede o.tener mezclando en las proporciones adecuadas un 'cido d/.il con
su sal o una .ase d/.il con su sal
*'2' O45"ti#/:
1eterminar el pH de un alimento ) la importancia de los sistemas .u++er en el organismo
M6t/./: 2/todo colorim/trico ) m/todo potenciom/trico
*'3' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$:
A' M!t"-i!l"$ " i&.,"&t!-i! 9-/9/-3i/&!.! 9/- l/$ !l,&/$:
!os alumnos ingresar'n al la.oratorio con guardapol"o& ca.ello recogido en un
mo3o alto: con zapatos cerrados ) sin o.4etos colgantes como pulseras& aretes
largos o anillos
!os ensa)os se realizar'n con mascarilla: gorro co.ertor& guantes descarta.les )
lentes de proteccin (de uso personal)
M,"$t-!$: !eche& 4ugos de +rutas
B' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$:
M!t"-i!l"$ C!&ti.!. O4$"-#!3i%&
Bea5er graduado& $## ml 6
Bea5er graduado& $6# ml 6
7oteros de pl'stico $#
7radillas 6
8apel indicador uni"ersal 2 , mesa
8apel tornasol ro4o 2 , mesa
8apel tornasol azul 2 , mesa
!entes de proteccin 6 Cada alumno deber traer sus propios lentes
8icetas c9agua destilada 6
8ipeta graduada& 2 ml 6
8ipeta graduada& 6 ml 6
Direccin de Farmacia Pgina 2 de 16 Revisado 2013
8ipeta graduada& $# ml 6
8ropipetas 6
:u.os de ensa)o $6 , $26 3#
:u.os de ensa)o $; , $6# $#
E8,i9/$
8otencimetro $
C' R"!3ti#/$
8ara la entrega de reacti"os se considerar' un apro,imado de 6 alumnos por mesa de
tra.a4o
R"!3ti#/$ C/&3"&t-!3i%& C!&t' ;<=
<cido clorhdrico #$ = $## ml
Hidr,ido de sodio #$ = $## ml
>o4o de metilo #$? 2# ml
Fenol+taleina $? 2# ml
@naran4ado de metilo #&$? 2# ml
Bu++er pH $# 6# ml
Bu++er pH % 6# ml
Bu++er pH ( 6# ml
<cido ac/tico #&$ = 6# ml
@cetato de sodio #&$ = 3# ml
*'>' P-/3".ii"&t/

A' A&?li$i$ C/l/-i6t-i3/ 3/& P!9"l"$ I&.i3!./-"$ ." 91'
1eterminar el pH de soluciones diluidas de HAl e =aBH utilizando papel indicador
uni"ersal :ornasol ro4o ) azul
1eterminar el pH de una muestra& mediante el uso de cintas colorim/tricas ) la cartilla
de colores para interpretacin del "alor del pH
B' A&?li$i$ C/l/-i6t-i3/ 3/& -"!3ti#/$ i&.i3!./-"$ ." 91'
1eterminar el pH del 'cido clorhdrico #$ = ) del hidr,ido de sodio #$ = con los
reacti"os indicadores de pH: +enol+talena& ro4o de metilo ) anaran4ado de metilo
Aomparar resultados
Importante: No emplear potencimetro para leer el pH del cido y del hidrxido, bajo riesgo de deterioro
del equipo.

C' A&?li$i$ P/t"&3i/6t-i3/'
>econocimiento del 8otencimetro
8rocedimiento de cali.racin del potencimetro -so de .u++ers cali.radores
1eterminar el pH de di+erentes muestras lquidas proporcionadas por los alumnos

Verificar el uso, limpieza y los tipos de muestras a leer, tomando la
precaucin de que no sean muy cidas ni muy bsicas para garantizar el
normal funcionamiento del equipo No medir pH de cidos de hidrxidos
directamente del frasco!.
"s imprescindible que despu#s de emplear el equipo, el electrodo sea
enjuagado con$ agua destilada, guardar el electrodo en el capuchn con la
solucin de almacenamiento H%&'()((, *olicitar en el laboratorio en caso de
que falte!.
IMPORTANTE.&
"s necesario enjuagar bien el electrodo y eliminar todo residuo de muestras, despu#s de realizar una
lectura.
Direccin de Farmacia Pgina 3 de 16 Revisado 2013
"mplear el electrodo solo para realizar la lectura Hasta que se estabilice!, no dejarlo remojando en
ninguna solucin por mucho tiempo +uestras ,arias, agua destilada, agua de ca-o!.
*e calibrar de acuerdo al tipo de muestra a leer$
.ara leer muestras cidas$ /alibrar el potencimetro con buffer 0 y buffer '.
.ara leer muestras bsicas$ /alibrar el potencimetro con buffer ' y buffer 1(.
.ara leer muestras tanto cidas como bsicas$ /alibrar con buffer 0, ' y 1(.
"l electrodo del potencimetro proporcionado en prctica solo se emplea para leer soluciones muestras
l2quidas 3al como indica la figura!. No se debe emplear para sustancias espesas, ni muy densas
shampoo, mermelada, etc.! slidas carne, queso, hamburguesa!, ya que no se realizar una correcta
lectura y el electrodo no est dise-ado para tal fin.
D' A33i%& ." ,& 4,@@"-
Aolocar 3 tu.os de ensa)os en una gradilla ) a3adir los siguientes reacti"os segCn
indica la ta.la a continuacin:
T,4/ * T,4/ 2 T,4/ 3
@gua destilada $# ml D ml D ml
<cido ac/tico #&$ = --- $ ml $&6 ml
@cetato de sodio #&$ = --- $ ml #&6 ml
@naran4ado de metilo 2 gotas 2 gotas 2 gotas
- @gregar el HAl #&$ =& gota a gota a cada tu.o hasta cam.io de coloracin
*'A' O4$"-#!3i/&"$ 7 R"$,lt!./$
a 1eterminacin de pH mediante el uso del potencimetro
- B.ser"ar las lecturas de pH de las muestras lquidas
- Aomparar con los "alores tericos
- Enterpretar
. @ccin de un .u++er
- B.ser"ar los colores o.tenido en los tu.os
- @notar la cantidad de gotas de HAl #&$ = empleadas para el cam.io de coloracin
- Enterpretar
*'B' C,"$ti/&!-i/
$ FAu'les son los cuidados a considerar en el mane4o del potencimetroG
2 FAu'les son los "alores de pH para la leche ) los 4ugos de +rutasG
3 FAu'les son los Bu++er +isiolgicosG
% FHu/ es la capacidad amortiguadora de un .u++erG
*'C' R"@"-"&3i! Bi4li/+-?@i3!
- Ahang >a)mond HuImica Auarta edicin 2c 7raJ Hill Espa3a $KK(
- !ehninger @l.ert ! Bioqumica Ediciones Bmega Espa3a$KD#
- Ahum.e 7uti/rrez& 7uillermo 7ua de 8r'cticas de Bioqumica E -ni"ersidad =acional
Federico Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- Bautista Espinoza& 2arleni 2anual de pr'cticas .ioqumica E -ni"ersidad =acional
Federico Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- 0tr)er& ! $KK6 Bioqumica Auarta edicin Editorial >e"erte Barcelona Espa3a
Direccin de Farmacia Pgina 4 de 16 Revisado 2013
PRCTICA N0 2
RECONOCIMIENTO DE CARBO1IDRATOS 2 GLUCGENO 1EPTICO
2'*'I&t-/.,33i%&
!os car.ohidratos son .iomol/culas que pueden ser identi+icados mediante el uso de reacti"os
de coloracin )9o precipitacin El glucgeno es un polisac'rido que se encuentra en el hgado
de los animales
2'2' O45"ti#/
>econocer& identi+icar ) caracterizar a los car.ohidratos en muestras de alimentos ) muestras
.iolgicas mediante el an'lisis qumico cualitati"o
M6t/./
@n'lisis qumico cualitati"o
2'3' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$
A' M!t"-i!l"$ " i&.,"&t!-i! 9-/9/-3i/&!.! 9/- l/$ !l,&/$:
M !os alumnos ingresar'n al la.oratorio con guardapol"o& ca.ello recogido en un mo3o alto&
con zapatos cerrados ) sin o.4etos colgantes como pulseras& aretes largos o anillos
M !os ensa)os se realizar'n con mascarilla& gorro co.ertor& guantes descarta.les ) lentes
de proteccin (de uso personal)
M M,"$t-!$: Hgado de pollo Bpcional: u"as& manzana
B' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$:
M!t"-i!l"$ C!&ti.!. O4$"-#!3i%&
Larilla de agitacin 6
Bea5er graduado $6# ml 6
Esp'tulas c9mango de madera 6
7oteros de pl'stico $#
7radillas 6
!entes de proteccin 6 Aada alumno de.er' traer sus lentes
!una de relo4 6
2echeros con alcohol 6
8icetas c9agua destilada 6
8inza quirCrgica de metal 6
8inza de metal para tu.os de ensa)o 6
8ipeta graduada& $ ml 6
8ipeta graduada& $# ml $#
8ropipeta 6
:u.os de ensa)o $3 , $## mm $# 8ara centri+ugacin
:u.os de ensa)o $6 , $26 mm 3#
E8,i9/$
Balanzas mec'nicas 6 $ , cada mesa de tra.a4o
Aentri+uga $
Aocinilla el/ctrica $
C' R"!3ti#/$
Direccin de Farmacia Pgina 5 de 16 Revisado 2013
8ara la entrega de reacti"os se considerar' un apro,imado de 6 alumnos por mesa de
tra.a4o
R"!3ti#/$ C/&3"&t-!3i%& C!&t' ;<= O4$"-#!3i%&
<cido sul+Crico K( ? 2# ml @m.os +orman >eacti"o de
2olish @l+a na+tol 2 ? 3# ml
@lmidn $ ? 3# ml
Fructosa $6 g
7lucosa $6 g
0eli"ano++ 6# ml
Benedict 2 +co , 6# ml
Etanol K; N $2# ml
7lucosa $ ? 3# ml
0acarosa $ ? 3# ml
Hidr,ido de potasio 3# ? $2# ml 0olucin alcohlica
!ugol 3# ml
Fehling @ 6# ml
Fehling B 6# ml
2'>' P-/3".ii"&t/
!' A&?li$i$ ." !D,3!-"$ -".,3t/-"$:
!'*'- A&?li$i$ 3/& R"!3ti#/ ." B"&".i3t
@gregar a un tu.o de ensa)o $ ml de glucosa al $? ) en otro tu.o $ ml de sacarosa al
$?
@gregar $ ml de reacti"o de Benedict a cada uno de los tu.os
Aalentar sua"emente am.os tu.os con el mechero hasta cam.io de color
B.ser"ar @nalizar Enterpretar
!'2'- A&?li$i$ 3/& R"!3ti#/ ." F"Eli&+
@gregar a un tu.o de ensa)o $ ml de glucosa al $? ) en otro tu.o $ ml de sacarosa al
$?
@gregar $ ml de reacti"o de Fehling a cada uno de los tu.os (El reacti"o de Fehling
est' +ormado por #6 ml de >eacti"o Fehling @ ) #6 ml de >eacti"o Fehling B)
Aalentar sua"emente am.os tu.os con el mechero hasta cam.io de color
B.ser"ar @nalizar Enterpretar

4' R"3/&/3ii"&t/ ."l !li.%&:
Aolocar $ ml de solucin de almidn al $? en un tu.o de ensa)o de $6 , $26 mm&
agregar dos gotas !ugol B.ser"ar la coloracin caracterstica
B.ser"ar @nalizar Enterpretar
3' EFt-!33i%& ." Gl,3%+"&/ E"9?ti3/
8esar en un .ea5er 2 g de hgado de pollo pre"iamente trozado en peque3os
+ragmentos
@dicionar $# ml de OBH alcohlico al 3#? Aalentar en cocinilla a e.ullicin& hasta
completa disgregacin de la muestra En+riar
@gregar 6 ml de Etanol K; ?
0eparar 6 ml de la muestra en un tu.o de ensa)o de $3 , $## ) centri+ugar a 36##
>82 por 6 minutos
0eparar el so.renadante ) redisol"er el sedimento (contiene al glucgeno)& con 2 ml de
agua destilada

Direccin de Farmacia Pgina 6 de 16 Revisado 2013
.' R"!33i%& G"&"-!l ." M/li$E'
@l sedimento disuelto se le adiciona $# gotas de @l+a na+tol al 2 ? (>"o 2olish)&
mezclar el contenidoP adicionar en zona $ ml de 'cido sul+Crico concentrado (no agitar)
de manera que se +orme en la inter+ase un anillo coloreado que separa la +ase acuosa
de la +ase 'cida
B.ser"ar @nalizar Enterpretar
"' R"3/&/3ii"&t/ ." 3"t/$!$'
Aolocar $ml del reacti"o 0eli"ano++ en tu.o de ensa)o& a3adir QmgR de muestra de
Fructosa ) calentar lentamente en mechero hasta completa coloracin (anotar el tiempo
de reaccin) >epetir con glucosa (anotar el tiempo de reaccin)
B.ser"ar @nalizar Aomparar los tiempos Enterpretar
2'A' O4$"-#!3i/&"$ 7 R"$,lt!./$
- B.ser"ar los cam.ios de coloracin )9o aparicin de precipitados
- @notar e interpretar
2'B' C,"$ti/&!-i/
$ FAu'l es la composicin del reacti"o de BenedictG
2 FAu'l es la composicin del reacti"o de FehlingG
3 FAu'l es la composicin del lugolG
% FAu'l es la composicin del reacti"o de 0eli"ano++G
6 Endique las di+erencias entre el glucgeno ) el almidn
2'C' R"@"-"&3i! Bi4li/+-?@i3!
- Ahang >a)mond HuImica Auarta edicin 2c 7raJ Hill Espa3a $KK(
- !ehninger @l.ert ! Bioqumica Ediciones Bmega Espa3a$KD#
- Ahum.e 7uti/rrez& 7uillermo 7ua de 8r'cticas de Bioqumica E -ni"ersidad =acional
Federico Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- Bautista Espinoza& 2arleni 2anual de pr'cticas .ioqumica E -ni"ersidad =acional Federico
Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
0tr)er& ! $KK6 Bioqumica Auarta edicin Editorial >e"erte Barcelona Espa3a
PRCTICA N0 3
DETERMINACIN CUALITATIGA DE LPIDOS
3'*' I&t-/.,33i%&
!os lpidos son .iomol/culas estructuralmente heterog/neas ) que se "an a poder reconocer
por sus propiedades +sicas ) qumicas comunes tales como su solu.ilidad& densidad&
emulsi+icacin ) saponi+icacin
3'2' O45"ti#/
1emostrar las propiedades de los lpidos mediante an'lisis Humico Aualitati"o& ensa)o de
solu.ilidad ) saponi+icacin
M6t/./
@n'lisis Humico Aualitati"o
Ensa)o de solu.ilidad ) saponi+icacin
Direccin de Farmacia Pgina 7 de 16 Revisado 2013
3'3' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$
A' M!t"-i!l"$ " i&.,"&t!-i! 9-/9/-3i/&!.! 9/- l/$ !l,&/$:
!os alumnos ingresar'n al la.oratorio con guardapol"o& ca.ello recogido en un
mo3o alto: con zapatos cerrados ) sin o.4etos colgantes como pulseras& aretes
largos o anillos
!os ensa)os se realizar'n con mascarilla: gorro co.ertor& guantes descarta.les )
lentes de proteccin (de uso personal)
M,"$t-!$: @ceite "egetal ) 2anteca de cerdo (Bpcional: trozos de se.o de res o
grasa de pollo)
B' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$:
M!t"-i!l"$ C!&ti.!. O4$"-#!3i%&
:u.os de ensa)o $; , $6# mm $#
:u.os de ensa)o $3 , $## mm 3#
8ipetas graduada& 2 ml 6
8ipetas graduada& 6 ml $#
Beac5er , $6# ml 6
!entes de proteccin 6
8ropipeta de goma 6
7radillas 6
Larilla de agitacin 6
Fiolas , 6# ml 6
7oteros de pl'stico $#
8apel para+ilm 6
!una de relo4 6
Esp'tula c9mango de madera 6
8icetas c 9agua destilada 6
E8,i9/$
Aampana e,tractora de gases $
Aocinilla $
Balanza mec'nica 6 $ , cada mesa de tra.a4o
C' R"!3ti#/$
8ara la entrega de reacti"os se considerar' un apro,imado de 6 alumnos por mesa de
tra.a4o
R"!3ti#/$ C/&3"&t-!3i%& C!&t' O4$"-#!3i%&
@lcohol etlico K;? $## ml
Bencina de petrleo ;# ml
Aloro+ormo ;# ml
0ales Biliares $6 g
Hidr,ido de potasio 3#? 2## ml Solucin Alcohlica
0udan EEE $? 3# ml Sol. en ter de petrleo (bencina)
@zul de metileno #$? 3# ml
3'>' P-/3".ii"&t/
!' E&$!7/ ." $/l,4ili.!. :omar % tu.os de $3 , $## ) numerarlos de $ al % luego:
Direccin de Farmacia Pgina 8 de 16 Revisado 2013
T,4/$ * 2 3 >
A3"it" #"+"t!l $# gotas $# gotas $# gotas $# gotas
@gua destilada 2 ml
@lcohol etlico 2 ml
Bencina de petrleo 2 ml
Aloro+ormo 2ml
B.ser"ar @nalizar Enterpretar
Bpcionalmente repetir el ensa)o con la muestra de se.o de res )9o grasa de pollo
4' E,l$i@i3!3i%&
@3adir 6 ml de agua destilada en un tu.o de ensa)o $; , $6# mm @gregar $# gotas
de aceite "egetal
@dicionar 2 gotas de azul de metileno ) 2 gotas de 0udan EEE
Homogenizar por agitacin en/rgica >eposar B.ser"ar Enterpretar
!uego& agregar QmgR de 0ales Biliares
@gitar B.ser"ar Enterpretar

3' D"&$i.!. ."l !3"it"
8esar una +iola "aca
@dicionar a la +iola la muestra de aceite ) "ol"er pesar
>estar el peso de la +iola "aca del peso de la +iola con la muestra
Aalcular la densidad
.' S!9/&i@i3!3i%& ." +-!$!$
En un .ea5er de $6# ml& colocar $# gramos de manteca de cerdo
@3adir 2# ml de solucin alcohlica de hidr,ido de potasio al 3#?
Aalentar en cocinilla a e.ullicin hasta la +ormacin de una sustancia pastosa (4a.n)
:omar precauciones para e"itar derrames En+riar
>ealizar la prue.a de la espuma para demostrar la presencia de 4a.n
3'A' O4$"-#!3i/&"$ 7 R"$,lt!./$
B.ser"ar lo o.tenido en cada e,periencia
@notar e interpretar
3'B' C,"$ti/&!-i/
$ FAu'les son los disol"entes de lpidosG
2 FEn qu/ consiste el +enmeno de emulsi+icacinG
3 FAu'l es la densidad del aceite "egetalG
% FEn qu/ consiste la saponi+icacin de las grasasG
3'C' R"@"-"&3i! Bi4li/+-?@i3!
- Ahang >a)mond HuImica Auarta edicin 2c 7raJ Hill Espa3a $KK(
- !ehninger @l.ert ! Bioqumica Ediciones Bmega Espa3a$KD#
- Ahum.e 7uti/rrez& 7uillermo 7ua de 8r'cticas de Bioqumica E -ni"ersidad =acional
Federico Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- Bautista Espinoza& 2arleni 2anual de pr'cticas .ioqumica E -ni"ersidad =acional Federico
Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
Direccin de Farmacia Pgina 9 de 16 Revisado 2013
PRCTICA N0 >
DETERMINACIN CUALITATIGA DEL COLESTEROL
>'*'I&t-/.,33i%&
El colesterol es un lpido esteroide que se encuentra en los alimentos de origen animal 0e
puede e,traer a partir de la )ema de hue"o e identi+icar a tra"/s de una coloracin o.tenida
por un m/todo enzim'tico
>'2' O45"ti#/

Edenti+icar el colesterol presente en la )ema de hue"o de gallina ) de codorniz
M6t/./
Edenti+icacin de colesterol por m/todo enzim'tico .asado en la reaccin de :rinder

>'3' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$

A' M!t"-i!l"$ " i&.,"&t!-i! 9-/9/-3i/&!.! 9/- l/$ !l,&/$:
!os alumnos ingresar'n al la.oratorio con guardapol"o& ca.ello recogido en un
mo3o alto: con zapatos cerrados ) sin o.4etos colgantes como pulseras& aretes
largos o anillos
!os ensa)os se realizar'n con mascarilla: gorro co.ertor& guantes descarta.les )
lentes de proteccin (de uso personal)
M,"$t-!$: Hue"o de gallina& Hue"o de codorniz
B' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$:
M!t"-i!l"$ C!&ti.!. O4$"-#!3i%&
7radillas 6
:u.o de ensa)o $3,$## mm 3#
Beac5er graduado $6# ml $#
8ipeta graduada& 2 ml 6
:ips (amarillos) 6# unid
8ipeta graduada& 6 ml 6
Esp'tula c9 mango de madera 6
8ropipeta 6
8apel 8ara+ilm cs
8ipeta graduada& $ ml 6
Larillas de agitacin $#
8icetas c9agua destilada 6
E8,i9/$
Ba3o mara c 9termmetro $
Balanzas $ , mesa
Aentri+uga $
2icropipeta $ 8ara a.sor.er $# microlitros
C' R"!3ti#/$
Direccin de Farmacia Pgina 10 de 16 Revisado 2013
8ara la entrega de reacti"os se considerar' un apro,imado de 6 alumnos por mesa de
tra.a4o
R"!3ti#/$ C/&3"&t-!3i%& C!&t' ;<= O4$"-#!3i%&
Aolesterol Enzim'tico 6# ml
Est'ndar de Aolesterol $ ml
@cetona $## ml
>'>' P-/3".ii"&t/
!' EFt-!33i%& ." 3/l"$t"-/l ." l! 7"! ." E,"#/'
Aascar un hue"o de gallina con precaucin ) separar la clara de la )ema teniendo
cuidado de no romperla
:omar $ g de la )ema en un Beac5er de $6# ml @3adir so.re la )ema 6 ml de
acetona ) agitar hasta o.tener una suspensin homog/nea Lerter el contenido en
tu.os $3 , $## para centri+ugar Aontrapesar
Aentri+ugar a 36## >82 durante 6 minutos 7uardar el so.renadante que contiene el
e,tracto acetnico >epetir todo el proceso con el hue"o de codorniz
4' D"t"33i%& 3,!lit!ti#! ."l 3/&t"&i./ "& 3/l"$t"-/l t/t!l ." l/$ "Ft-!3t/$'
>otular adecuadamente cuatro tu.os de ensa)o como: Blanco (B)& Est'ndar (0) )
E,tracto acetnico 28 $ (hue"o de gallina ) ) E,tracto acetonico 28 2 (hue"o de
codorniz )
@gregar en cada uno de los tu.os las soluciones reacti"as de acuerdo al cuadro:
C/9/&"&t"$ Bl!&3/ E$t?&.!-
MP*
1,"#/ ."
+!lli&!
MP2
1,"#/ ."
3/-./-&iD
E,tracto acetnico de hue"o de
gallina
- - #&#$ ml
E,tracto acetnico de hue"o de
codorniz
- - - #&#$ ml
Est'ndar de colesterol -
#&#$ ml
M".i- 3/&
i3-/9i9"t!
- -
>eacti"o enzim'tico de colesterol $&# ml $&# ml $&# ml $&# ml
:apar los tu.os con papel para+ilm Homogenizar por in"ersin
Encu.acin en .a3o marIa a 3(S& durante 6 minutos
>'A' O4$"-#!3i/&"$ 7 R"$,lt!./$
B.ser"ar los colores del est'ndar& .lanco ) los e,tractos
Aomparar @nalizar Enterpretar
>'B' C,"$ti/&!-i/
$ FAu'l es la importancia del colesterol en saludG
2 FHu/ alimentos son ricos en colesterolG
3 FAu'l es la composicin del reacti"o enzim'tico de colesterolG
% Endique la reaccin enzim'tica que ocurre entre el colesterol ) el reacti"o enzim'tico de
colesterol
>'C' R"@"-"&3i! Bi4li/+-?@i3!
Direccin de Farmacia Pgina 11 de 16 Revisado 2013
- Ahang >a)mond HuImica Auarta edicin 2c 7raJ Hill Espa3a $KK(
- !ehninger @l.ert ! Bioqumica Ediciones Bmega Espa3a$KD#
- Ahum.e 7uti/rrez& 7uillermo 7ua de 8r'cticas de Bioqumica E -ni"ersidad =acional
Federico Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- Bautista Espinoza& 2arleni 2anual de pr'cticas .ioqumica E -ni"ersidad =acional Federico
Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- 0tr)er& ! $KK6 Bioqumica Auarta edicin Editorial >e"erte Barcelona Espa3a
PRCTICA N0 A
IDENTIFICACIN CUALITATIGA DE PROTENAS
A'*' I&t-/.,33i%&
!as protenas son .iomol/culas +ormadas por la unin de amino'cidos que presentan
propiedades +sicas ) qumicas comunes tales como la desnaturalizacin ) la +ormacin de un
compuesto coloreado cuando reaccionan con el reacti"o de Biuret !a o"oal.Cmina es una
protena que se encuentra en la clara de hue"o
A'2' O45"ti#/
E,traer la o"oal.Cmina a partir de la clara de hue"o ) reconocer sus propiedades
M6t/./
2/todo de Biuret
@n'lisis qumico cualitati"o
A'3' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$
A' M!t"-i!l"$ " i&.,"&t!-i! 9-/9/-3i/&!.! 9/- l/$ !l,&/$:
!os alumnos ingresar'n al la.oratorio con guardapol"o& ca.ello recogido en un
mo3o alto: con zapatos cerrados ) sin o.4etos colgantes como pulseras& aretes
largos o anillos
!os ensa)os se realizar'n con mascarilla: gorro co.ertor& guantes descarta.les )
lentes de proteccin (de uso personal)
M,"$t-!$: Hue"o de gallina
B' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$:
M!t"-i!l"$ C!&ti.!. O4$"-#!3i%&
Beac5er graduado $##ml 6
8ro.eta graduada 6# ml 2
Larillas de agitacin 6
:u.os de ensa)o$3 , $##mm %#
8ipetas graduadas de 2 ml 6
8ipetas graduadas de 6 ml 6
8ipetas graduadas de $ ml 6
8ropipetas 6
7oteros 6
8apel para+ilm cs
7radillas ;
8inzas de metal para tu.os 6
Esp'tulas 6
Direccin de Farmacia Pgina 12 de 16 Revisado 2013
8icetas c9agua destilada 6
!entes de proteccin 6
E8,i9/$
Ba3o 2ara c 9termmetro $
Balanza 6 $ , cada mesa de tra.a4o
Aentri+uga $
C' R"!3ti#/$
8ara la entrega de reacti"os se considerar' un apro,imado de 6 alumnos por mesa de
tra.a4o
R"!3ti#/ C/&3"&t-!3i%& C!&t' ;<= O4$"-#!3i/&"$
Bu++er pH ( (Fos+ato) #$ 2 2## ml
@cido sul+Crico cc 2# ml
Hidr,ido de sodio $# ? 3# ml
@cetona 3# ml
@cetato de plomo #2 2 3# ml
>eacti"o de Biuret $2# ml
@cido ntrico Ac 2# ml
A'>' P-/3".ii"&t/
!' EFt-!33i%& ." l! /#/!l4Hi&! ." l! 3l!-! ." E,"#/:
:omar un hue"o de gallina& cascarlo ) separar unos 2 g de la clara del hue"o
Aolocarlo en Bea5er de $## ml ) diluir con 2# ml de Bu++er +os+ato pH ( @gitar para
homogenizar
Aentri+ugar a 36## rpm por 6 minutos 0eparar el so.renadante (solucin de al.Cmina
de apro, $# mg9ml)
4' D"$&!t,-!liD!3i%& ." 9-/t"I&!$'
>otular (con plumn marcador) cinco tu.os de ensa)o del $ al 6 ) a3adir a cada tu.o
$ml de la disolucin de al.Cmina de $# mg9ml @ continuacin tratar cada tu.o con lo
siguiente:
C!l/-'- 8oner el tu.o * en Ba3o 2ara a %2S A por $# minutos B.ser"ar Enterpretar
M".i/ ?3i./'- @l tu.o 2 a3adir $ ml de acido sul+Crico concentrado @gitar ) o.ser"ar
Enterpretar
M".i/ 4?$i3/'- @3adir al tu.o 3: $ ml de hidr,ido de sodio al $#? @gitar ) B.ser"ar
Enterpretar
Di$/l#"&t"$ /-+?&i3/$- @3adir al tu.o >& 2 ml de acetona @gitar ) B.ser"ar
Enterpretar
C!ti/&"$ 9"$!./$- @3adir al tu.o A: $ ml de acetato de plomo #2 2 @gitar )
B.ser"ar Enterpretar
3' I."&ti@i3!3i%& 9/- "l M6t/./ ." Bi,-"t'
>otular % tu.os ) a3adir los reacti"os en el siguiente orden:
REACTIGO T,4/* T,4/2 T,4/3 T,4/>
@gua destilada 2 ml $D ml $ ml -
@l.Cmina (sol. de albmina de aprox. 10 mgml) - #2ml $ ml 2 ml
>eacti"o de Biuret 3 ml 3 ml 3 ml 3 ml
@gitar ) esperar $# minutos B.ser"ar la aparicin de color caracterstico Lioleta

.' R"!33i%& J!&t/9-/t"i3! ;/93i/&!l=
En un tu.o de ensa)o $3 , $## colocar $ml de al.Cmina de hue"o
@3adirle $ml de acido ntrico concentrado
@gitar ) o.ser"ar el color ) el desprendimiento de gas (pardo T ro4izo)
Direccin de Farmacia Pgina 13 de 16 Revisado 2013
@3adir gotas de hidr,ido al $#?B.ser"ar Enterpretar
A'A' O4$"-#!3i/&"$ 7 R"$,lt!./$
- B.ser"ar las coloraciones )9o precipitados +ormados
- @notar e interpretar
A'B' C,"$ti/&!-i/
$ FHu/ alimentos son ricos en protenasG
2 1escri.a la estructura de la o"oal.Cmina
3 FEn qu/ consiste el +enmeno de desnaturalizacin de una protenaG
% FAu'l es la composicin del reacti"o de BiuretG
A'C' R"@"-"&3i! Bi4li/+-?@i3!
- Ahang >a)mond HuImica Auarta edicin 2c 7raJ Hill Espa3a $KK(
- !ehninger @l.ert ! Bioqumica Ediciones Bmega Espa3a$KD#
- Ahum.e 7uti/rrez& 7uillermo 7ua de 8r'cticas de Bioqumica E -ni"ersidad =acional
Federico Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- Bautista Espinoza& 2arleni 2anual de pr'cticas .ioqumica E -ni"ersidad =acional Federico
Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- 0tr)er& ! $KK6 Bioqumica Auarta edicin Editorial >e"erte Barcelona Espa3a
PRCTICA N0 B
ACTIGIDAD EN(IMTICA
B'*'I&t-/.,33i%&
!as enzimas son protenas .iocatalizadoras !a amilasa sali"al ) la lipasa pancre'tica de la
pancreatina son
hidrolasas que "an a descomponer por accin del agua al almidn ) a los triglic/ridos
respecti"amente !a pero,idasa descompone al per,ido de hidrgeno
B'2' O45"ti#/
>econocer la acti"idad enzim'tica
M6t/./
Hidrlisis de los sustratos por acti"idad enzim'tica de la amilasa sali"al ) de la lipasa
pancre'tica presente en la 8ancreatina
B'3' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$
A' M!t"-i!l"$ " i&.,"&t!-i! 9-/9/-3i/&!.! 9/- l/$ !l,&/$:
!os alumnos ingresar'n al la.oratorio con guardapol"o& ca.ello recogido en un
mo3o alto: con zapatos cerrados ) sin o.4etos colgantes como pulseras& aretes
largos o anillos
!os ensa)os se realizar'n con mascarilla: gorro co.ertor& guantes descarta.les )
lentes de proteccin (de uso personal)
M,"$t-!$: !eche +resca& carne cruda& carne cocida& secrecin sali"al reci/n
o.tenida de los alumnos
Direccin de Farmacia Pgina 14 de 16 Revisado 2013
B' M!t"-i!l"$ 7 E8,i9/$:
M!t"-i!l"$ C!&ti.!. O4$"-#!3i%&
:u.os de ensa)o $6 , $26 mm 6# $# , mesa
7radillas 6
8ipetas graduada& $ ml 6
8ipetas graduada& 2 ml 6
8ipetas graduada& 6 ml 6
8ipetas graduada& $# ml 6
Bea5er graduado& $6# ml 6 !pcional 100 ml
Larillas de agitacin 6
Em.udos peque3os 6
8ro.eta graduada& 6# ml 6
8apel de +iltro$# , $#cm 2#
8ropipeta de goma 6
7oteros de pl'stico 6
8apel 8ara+ilm cs
8icetas c9agua destilada 6
E8,i9/$
Ba3o 2ara c9termmetro $
Aocinilla el/ctrica $ !pcional
C' R"!3ti#/$
8ara la entrega de reacti"os se considerar' un apro,imado de 6 alumnos por mesa de
tra.a4o
R"!3ti#/$ C/&3"&t-!3i%& C!&t' ;<= O4$"-#!3i%&
@lmidn $? 26# ml >eci/n preparada
!ugol 3# ml
Aar.onato de potasio #2 2 $6# ml
Aloruro de sodio #D6 ? 2## ml >eci/n preparada
Fenol+talena $? 3# ml 0olucin @lcohlica
8ancreatina 6 ? 6# ml
0ales .iliares 6 ? 6# ml
8er,ido de hidrgeno $# Lol (# ml @gua o,igenada
B'>' P-/3".ii"&t/
!' 1i.-%li$i$ ."l !li.%&'
O4t"&3i%& ." l! !l@! !il!$! $!li#!l
8reparar un em.udo con papel de +iltro ) humedecerlo con Aloruro de sodio al #D6 ?
Filtrar secrecin sali"al de dos personas en mezcla con $# ml de Aloruro de sodio al
#D6 ?
1i.-%li$i$ ."l !li.%& ;9/- "@"3t/ ." l! 3/&3"&t-!3i%& ." l! "&Di!=
0eguir el siguiente esquema: usar tu.os de $6 , $26 mm

REACTIGOS T,4/ * T,4/ 2 T,4/ 3 T,4/ > T,4/ A
0ol de almidn $? (3(S) 6 ml 6 ml 6 ml 6 ml 6 ml
Aloruro de sodio al #D6 ? $'# ml #'K ml #'(6 ml #'6 ml # ml
0ol al+a amilasa sali"al (3(S) # ml #'$ ml #'26 ml #'6 ml $'# ml
@dicionar r'pidamente la amilasa sali"al ) agitar r'pidamente todos los tu.os
Direccin de Farmacia Pgina 15 de 16 Revisado 2013
Encu.ar a 3(S por 6 minutos& despu/s que se adiciona la enzima
@l termino del tiempo a3adir $ - 2 gotas de !ugol B.ser"ar
4' 1i.-%li$i$ ." t-i+li36-i./$'
2edir 3# ml de leche +resca ) adicionar 6 gotas de +enol+talena al $?
@3adir Aar.onato de potasio& gota a gota hasta cam.io a color rosado persistente
:omar cuatro tu.os de ensa)o $6 , $26 mm ) numerarlos del * al > @3adir los
siguientes reacti"os en ml

REACTIGOS T,4/ * T,4/ 2 T,4/ 3 T,4/ >
!eche alcalinizada 6# ml 6# ml 6# ml 6# ml
@gua destilada $6 ml $# ml #6 ml #
0ales .iliares al 6 ? # #6 ml $# ml $6 ml
8ancreatina al 6 ? # # $# ml $# ml
@gitar por rotacin los tu.os ) colocar en B2 a 3(S
B.ser"ar los cam.ios de color (decoloraciones)
:omar el tiempo que tardan las reacciones e interpretar los resultados
3' A3ti#i.!. ." 3!t!l!$!
En un tu.o de ensa)o de $6 , $26 mm colocar un poco de carne cruda +inamente
di"idida
@gregar 3 ml de agua o,igenada $# Lol
B.ser"ar el resultado Enterpretar
Bpcional: >epetir el proceso anterior con carne cocida
B'A' O4$"-#!3i/&"$ 7 R"$,lt!./$
- B.ser"ar lo o.tenido en cada e,periencia
- @notar e interpretar
B'B' C,"$ti/&!-i/
FHu/ reaccin ocurre entre el lugol ) el almidnG
FAmo se produce la hidrolisis del almidn mediante al+a amilasa sali"alG
FAmo se produce la hidrolisis de los triglic/ridos mediante la pancreatinaG
FHu/ papel cumple las sales .iliares para la hidrolisis de los triglic/ridosG
FAu'les son las hidrolasas m's comunesG
B'C' R"@"-"&3i! Bi4li/+-?@i3!
- Ahang >a)mond HuImica Auarta edicin 2c 7raJ Hill Espa3a $KK(
- !ehninger @l.ert ! Bioqumica Ediciones Bmega Espa3a$KD#
- Ahum.e 7uti/rrez& 7uillermo 7ua de 8r'cticas de Bioqumica E -ni"ersidad =acional
Federico Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- Bautista Espinoza& 2arleni 2anual de pr'cticas .ioqumica E -ni"ersidad =acional Federico
Lillarreal FEE0 E8E@ 2##D
- 0tr)er& ! $KK6 Bioqumica Auarta edicin Editorial >e"erte Barcelona Espa3a
Direccin de Farmacia Pgina 16 de 16 Revisado 2013