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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS


ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL BIOLOGA


FROTIS SANGUINEO


CURSO:
LABORATORIO DE ANALISIS BIOLOGICOS



ALUMNA:
PELAEZ BAILON, ELVIERA


DOCENTES:
Dr. PADILLA SAGASTEGUI, SANTOS ENRIQUE
Dr. BELTRAN ORBEGOSO, RAUL ANTONIO


CICLO:
IX





Trujillo Per
2014



FROTIS SANGUNEO

Introduccin

La sangre es un tejido conjuntivo que circula a travs de la sangre del aparato
cardiovascular, est formado por clulas y un componente extracelular cuyo volumen
supera el de las clulas. El volumen total de sangre es de alrededor de 5 litros lo que
equivale al 7 a 8% de peso corporal total (Rodak, 2005).

Se define como frote, frotis o extendido, a la preparacin microscpica delgada y
transparente, extendida entre dos cristales (porta o cubreobjetos), obtenida de un
lquido orgnico espeso o tejido semilquido o pastoso (sangre, aspirados,
secreciones, exudados, etc.) (Rodak, 2005).

El frotis sanguneo es realizado en forma rutinaria en todo hemograma, ya sea que se
realice en forma manual o automatizada
(2)
.

El frotis sanguneo se utiliza para el estudio de las caractersticas citolgicas de las
clulas de la sangre, lo cual permite valorar el funcionamiento general de la mdula
sea a travs de sus componentes celulares, lo cual implica la evaluacin de las lneas
eritrocticas, leucocitaria y megacarioctica, determinando anormalidades en forma,
tamao, color e inclusiones citoplasmticas, dando una medida cuantitativa y
cualitativa de los elementos que lo conforman (Sans, 2001).

La importancia de un buen extendido y su correcta tincin son fundamentales a la hora
de la observacin al microscopio, ya que un frotis mal hecho entrega muy poca
informacin acerca de la morfologa celular, y en algunos casos es esta observacin
la que entrega al Clnico la informacin que requiere para realizar su diagnstico
(Sans, 2001).

El objetivo de esta prctica es realizar un frotis sanguneo con sangre del alumno y
analizarlo y conocer los componentes celulares del tejido sanguneo


Material

- Lanceta para puncin digital.
- Torundas de algodn.
- Alcohol 70.
- Dos portaobjetos.
- Guantes y bata.
- Tincin con colorante Giemsa (formado por una mezcla de eosina, azul metileno y
azures en solucin acuosa).
- Microscopio de laboratorio.
- Aceite de inmersin



Causas de error en la tincin del frotis sanguneo:

- Coloracin excesivamente azul: Frotis muy grueso, lavado insuficiente, Tincin
muy prolongada, colorante demasiado alcalino.
- Coloracin muy rosada: El agua del lavado, el colorante o el tampn demasiado
cidos.
- Aparicin de artefactos debido a suciedad, deterioro o presencia de grasa en
portaobjetos.
- Hidratacin de los hemates: Fijacin inadecuada por uso de alcohol metlico no
absoluto.


Metodologa

1. Preparamos el material que vamos a utilizar y nos colocamos los guantes.
2. Procedemos a desinfectar el dedo del cual extraeremos la sangre que se
utilizara en el frotis sanguneo.
3. Pinchamos con lanceta en el dedo, una vez hecho esto, apretamos el dedo para
bombear sangre haca afuera. Una vez se haya formado una gota la acercamos
al portaobjetos poco a poco hasta que la sangre pase a ste.














4. Realizamos la extensin del frotis sanguneo.









Tras realizar la extensin, se obtienen tres partes de la muestra:

- Cabeza (con demasiados eritrocitos).
- Cuerpo (zona ptima para la observacin, existe un reparto equilibrado de clulas).
- Cola (eritrocitos en escaso nmero)












Frotis incorrectos:

















5.- Se deja secar la muestra al aire
6.- Colocar el frotis sobre una rejilla para tincin.
7.- Cubrir completamente el portaobjetos con colorante de Wright gota a gota, si el
colorante se comienza a evaporar deber agregarse ms. Dejar el colorante sobre el
frotis 5 minutos.
8.- Agregar un buffer para evitar una coloracin dbil, este buffer puede ser agua
destilada, y dejarlo 5 minutos.
9.- Pasados los 5 minutos se enjuaga el excedo de colorante con agua destilada y se
deja secar
10.- Ya seca la muestra se procede a observar en el microscopio.
Para una mejor observacin del componente celular se puede usar el objetivo de
100 X el vual tambin es llamado objetivo de inmersin. Ya que en este se utiliza
liquido de inmersin para poder utilizarlo

Agregando
colorante
Microscopio
Glbulos rojos
Descripcin de clulas sanguneas

Eritrocitos (Glbulos rojos)

Los Glbulos rojos son las clulas enucleadas carentes
de los grnulos tpicos. Contienen hemoglobina la cual
se fija al oxgeno y al dixido de carbono. Actan solo
dentro del torrente circulatorio, donde se fijan al
oxgeno para entregarlo a los tejidos y fijan dixido de
carbono en los tejidos para llevarlo a los pulmones.


Leucocitos

Los leucocitos se subclasifican en dos grandes grupos granulocitos y agranulocitos, el
fundamento de esta divisin es la presencia de los grnulos especficos prominentes
en el citoplasma.

Granulocitos

Neutrfilos

Constituyen la variedad predominante de los granulocitos. Los neutrfilos maduros
son almacenados en la medula sea antes de ser liberados a la circulacin durante 5
das, una vez en la sangre su permanencia en ella es fugaz ya que pasan rpidamente a
los tejidos donde llevan a cabo su funcin.

Los neutrfilos maduros van a contener 3 tipos de grnulos.

o Grnulos especficos: son pequeos y ms abundantes que los azurfilos.
Estos contienen varias enzimas como la colagenasa tipo IV, activadores del
complemento y otros agentes bactericidas.

o Grnulos azurfilos: surgen al principio de la granulospoyesis y se
encuentran en todos los granulocitos su contenido ms importante es la
mieloperoxidasa, la cual es un bactericida muy potente.

o Grnulos terciarios: hay dos tipos en los neutrfilos los que contienen
fosfatasas y los que contienen metal o proteinasas.
Eosinfilos

Tambin tienen una actividad bactericida pero es mucho menor a la de los neutrfilos.
En sus grnulos almacenan protenas con funciones citotxicas para paracitos y
contiene dos tipos de grnulos:

Grnulos especficos: contienen protenas principales como la protena bsica
mayor, la perxidasa de neutrfilo, etc.

Grnulos azurfilos: son lisosomas con una variedad de hidrolasas acidas
lisosomas y otras enzimas hidrolticas.












Basfilos
Constituyen una muy pequea porcin de los leucocitos, ya que tienden a ubicarse en
los tejidos en donde existe inflamacin relacionada con hipersensibilidad a protenas,
alergia de contacto o rechazo de injerto contra husped. Contiene dos tipos de
grnulos:


Grnulos especficos: estos grnulos contienen heparina, histamina, heparan
sulfato y leucotrienos, los cuales tienen actividades vasoactivas.

Grnulos inespecficos: contienen enzimas hidrolasas.













Agranulocitos

Linfocitos

Son el componente principal del sistema inmunitario. En el organismo hay tres tipos de
linfocitos distintos desde el punto de cita funcional:

Linfocitos T: se diferencian en el timo, tienen una semivida prolongada,
expresan en su superficie protenas marcadoras, y se subclacifican en linfocitos
CD4 y CD8. Los linfocitos T CD4 poseen el marcador CD4 y reconocen a los
antgenos del complejo mayor de histocompatibilidad II.

Los linfocitos T CD8 expresan el marcador CD8 y reconocen a los antgenos unidos al
complejo mayor de histocompatibilidad I.

Linfocitos B: participan en la produccin de anticuerpos circulante. En la
sangre los linfocitos maduros expresan IgM e IgG en su superficie, lo mismo
que las molculas del MHC II.

Linfocitos NK: tienen actividad destructora sobre clulas infectadas por virus o
clulas tumorales








Monocitos

Son los leucocitos ms grandes. Se movilizan desde la medula osea hacia los dems
tejidos, donde se diferencian a macrfagos y reciben un nombre diferente a segn en
el tejido donde estn como osteoclastos en los huesos, clulas de kupffer en el hgado
etc.
Plaquetas

Son pequeos fragmentos citoplasmticos que provienen de los megacariocitos.
Las plaquetas actan en la vigilancia continua de los vasos sanguneos, la formacin de
cogulos y la reparacin del tejido lesionado.













Conclusin
Esta prctica nos ayud a aprender cmo realizar un estudio de laboratorio muy bsico
pero muy importan, tambin nos ayud a conocer la morfologa microscpica de los
componentes celulares de la sangre.

El frotis sanguneo es un estudio muy fcil de realizar pero muy importante ya que
ayuda a la diagnosticacin de diversos trastornos que pueden afectar a las clulas
sanguneas y por consecuencia al organismo, estas enfermedades pueden incluir
anemias, leucemias, trastornos plaquetarios, trastornos inmunes, etc.


Referencias Bibliogrficas

Rodak, B. 2005. Hematologa: Fundamentos y aplicaciones Clnicas. Segunda Edicin.
Ed. Mdica Panamericana.

Sans Sabrafen J., 2001. Hematologa Clnica. Cuarta Edicin, Editorial Harcourt,
Barcelona, Espaa.

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