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PRCTICA 6

POTENCIAL DE ACCIN.
SIMULACIN POR COMPUTADORA.

INTRODUCCIN
Una de las vas de la transmisin de la informacin en los organismos, utiliza
seales elctricas generadas en el sistema nervioso. Estos impulsos nerviosos en
general, estn asociados con respuestas rpidas de las clulas excitables a los
estmulos del medio. Al aplicarles el estmulo adecuado muestran un cambio de
potencial: el potencial de accin (llamado tambin espiga o impulso nervioso), el
cual es conducido a lo largo de la regin axnica de una neurona o a lo largo de la
membrana plasmtica de una clula muscular. De manera inicial el estmulo
produce una despolarizacin de la membrana del axn, la cual a su vez hace que
aumente la conductancia de Na+ al interior. A cierto nivel de despolarizacin de la
membrana (cerca del 15% del potencial de reposo), la membrana se vuelve muy
permeable al Na+ (por la apertura de canales de Na+ dependientes de voltaje). El
influjo de Na+ hace que el potencial transmembrana caiga rpidamente hacia cero
y el potencial de membrana tiende a llegar al potencial de equilibrio de este ion. En
el pico de la espiga se inicia otro cambio en la permeabilidad, lo que da como
resultado una mayor conductancia del K+. El eflujo de este ion en sentido de su
gradiente de electroqumico, tiende a llevar al potencial transmembrana de vuelta
al valor del potencial de equilibrio del K+. A medida que aumenta la conductancia
del K+, se inactiva la conductancia del Na+.

OBJETIVO GENERAL
Establecer el papel que tienen los canales ionicos de Na+ y k+ en la generacin del
potencial de accin

OBJETIVOS PARTICULARES
Determinar el efecto que tienen los estmulos elctricos de diferentes intensidades
y duraciones sobre el potencial de accin y la excitabilidad de una neurona.
Determinar el efecto que tiene la aplicacin de estmulos repetidos a diferentes
intervalos sobre el potencial de accin y la excitabilidad de una neurona.
Observar el efecto que provocan el cambio de la concentracin de los iones
involucrados en el potencial de accin sobre el potencial de membrana.
Observar el efecto que provocan algunas sustancias bloqueadoras de los canales
dependientes de voltaje sobre la naturaleza y caractersticas del potencial de
accin.

MATERIAL
Programa de simulacin por computadora, basado en el modelo propuesto por
Hodgkin y Huxley, para la generacin del potencial de accin creado por Dave
Touretzky HHsim, Computadora PC.
DESARROLLO
El dispositivo empleado para desarrollar este simulador es similar al que muestra
la figura 1. Identificar sus partes.
Iniciar el programa HHsim y localizar en la pantalla principal los controles que se
muestran en la figura 2, a los que se hace referencia en las actividades
posteriores.

Establecer los parmetros iniciales de la forma siguiente:

-Asegrese que el control 1 marca Voltage Recording.
-En el control 2, seleccionar g Na (pS), g K (pS) y blank, respectivamente.
-Activar Membrane en el control 3. Esto despliega una ventana donde debe
establecer la temperatura en 20C. Ocultar la ventana con el botn Hide que
aparece en la misma.

Potencial umbral
-Activar Stimuli en el control 3. Esto despliega una ventana donde se pueden
cambiar los parmetros de dos estimuladores capaces de aplicar dos estmulos
cada uno. Para este caso solo se usar el primer estmulo del estimulador 1.
-Cada estmulo tiene tres parmetros: (Ti) Tiempo de inicio (ms), (Int) Intensidad
(nA) y (Dur) Duracin (ms). Establecer Ti= 0.0 ms, Int= 10 nA y Dur=0.1 ms. El
segundo estmulo debe marcar cero en todos los parmetros.
-Activar el estimulador usando el botn Stim1 del control 4 y observar la
respuesta en el potencial de membrana.
-Aplicar estmulos similares, incrementando gradualmente la duracin hasta
provocar un potencial de accin.
-Encontrar la duracin mnima para que estmulos con intensidades de 5, 10, 15,
20, 35, 40, y 66 nA que pueda provocar un potencial de accin.

Nota: Antes de aplicar cada estmulo debe borrar la respuesta anterior usando el
botn Clear del control 4.

Suma temporal de estmulos subumbrales
-Establecer el primer estmulo con Int= 15 nA, Dur= 0.4 ms y Ti= 0 ms. El segundo
estmulo debe ser similar pero con Ti= 15 ms.
-Activar el estimulador y observar la respuesta.
-Repetir la experiencia disminuyendo gradualmente el tiempo de inicio del
segundo estmulo (Ti= 8,4,2,1 ms).
Periodo refractario
-Establecer el primer estmulo con Int= 50nA, Dur= 0.11ms y Ti= 0 ms. El segundo
estmulo con Int= 40nA, Dur= 0.11ms y Ti= 20 ms. Activar el estimulador y
observar la respuesta.
-Repetir la experiencia reduciendo el tiempo de inicio del segundo estmulo a
10ms. Observar la respuesta.
-Repetir la experiencia con Ti= 5ms para el segundo estmulo. Observe la
respuesta.
-Encontrar el tiempo de inicio para el segundo estmulo al cual desaparece el
segundo potencial de accin.
-Repita la experiencia con Ti= 2ms para el segundo estmulo. Observe la
respuesta.
-Incremente la intensidad del segundo estmulo a Int= 60nA. Observe
- Incremente la intensidad del segundo estmulo a Int= 70nA. Observe
-Reduzca el tiempo de inicio del segundo estmulo hasta Ti= 1.8ms.
-Incremente la intensidad del segundo estmulo hasta Int= 80nA. Repita
incrementando a Int= 100nA

Concentraciones inicas
-Establezca los parmetros del segundo estmulo en cero, para el primer estmulo
Int= 20nA, Dur= 0.5ms y Ti= 0ms.
-Aplique el estmulo
-Sin borrar la respuesta anterior active Membrane con el control 3. Cambie la
concentracin extracelular de Na
+
= 400mM. Aplique el estmulo.
-Sin borrar las respuestas anteriores, reduzca la concentracin extracelular de
Na
+
, de 50 en 50mM aplicando un estmulo cada vez. Observe la respuesta.

Nota: Puede utilizar el botn Zoom out del control 4 y la barra de desplazamiento
de tiempo para visualizar toda la serie y comparar las respuestas.

-Borre las respuestas anteriores.
-Restablezca la concentracin original.
-Repita el experimento aumentando de 50 en 50mM la concentracin extracelular
de Na
+
. Si es necesario detener el experimento use el botn Stop del control 4.

-Restablezca la concentracin original, borre las respuestas anteriores y aplique
un estmulo.
-Reduzca ahora la concentracin extracelular de K
+
de 1 en 1nM aplicando
estmulos cada vez. Contine reduciendo an si no se provoca un potencial de
accin.
-restablezca la concentracin, borre las respuestas anteriores y estimule.
-Incremente de 1 en 1mM la concentracin extracelular de K
+
estimulando cada
vez. Si es necesario detener la prueba use el botn Stop.
Canales dependientes de voltaje
-Restablezca las concentraciones originales, borre las respuestas anteriores y
aplique un estmulo.
-Sin borrar la respuesta anterior active Drugs del control 3. Y cambie el
porcentaje de inhibicin por Tetrodotoxina (TTX) incrementando de 5 en 5%
estimulando cada vez sin borrar.
-Restablezca, borre las respuestas anteriores y repita la experiencia ahora
incrementando la inhibicin por tetraetilamonio.
-Restablezca, borre las respuestas anteriores, aplique pronasa. Aplique un
estmulo.





Fig 1 Esquema de la disposicin de los electrodos de estimulacin y registro en un fragmento sellado de
axn gigante de calamar.

Fig 2 Pantalla principal del programa HHsim. Los nmeros 1 al 4 indican los controles que se emplean durante
esta prctica.

BIBLIOGRAFIA:
Aidley, D. J., The Physiology of Excitable Cells. 1989. Edit. Cambridge University Press,
Cambridge, Inglaterra.
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Eckert, Randall D., Burgreen W., y K. French, Fisiologa Animal, Mecanismos y
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