Alas

345
CAPITULO IX
FOTOTROFA
9.1. FOTOSNTESIS OXIGNICA Y ANOXIGNICA EN EL MUNDO MICROBIANO
La fototrofa es la capacidad de captar energa de la luz. Aunque la capacidad de usar
la luz como fuente para generar ATP (fotofosforilacin) depende de un mecanismo
caracterstico, tiene en comn con la fosforilacin oxidativa el hecho de que produce
tambin un gradiente electroqumico de protones a ambos lados de una membrana, el
cual a su vez alimenta ATP-sintasas. Estrictamente hablando, la fotosntesis alude a la
fotoautotrofa, es decir, la combinacin de fototrofa o captacin de esa energa
lumnica (obtenida en la "fase luminosa") con su empleo para fijar el CO
2
(autotrofa)
hasta material celular ("fase oscura").
Haciendo abstraccin del tipo de donante de electrones, la ecuacin general de
la fotosntesis sera:
Energa de la luz (hn)
2 H
2
A + CO
2
-----------> [CH
2
O] + H
2
O + 2 A
En cianobacterias, algas y plantas verdes, H
2
A = H
2
O, como agente reductor.
Por lo tanto, al oxidarse se genera O
2
(fotosntesis oxignica). Figura N 9.1.
En bacterias fotosintticas anoxignicas H
2
A puede ser H
2
, SH
2
, S
2
O
3
-
, etc.
Evidentemente, no pueden liberar oxgeno (fotosntesis anoxignica).
Por otro lado, existen procariotas fototrofos que captan la energa de la luz, pero
emplean materia orgnica como fuente de carbono, por lo que se denominan
fotoheterotrofos.
Ms de la mitad de la fotosntesis de nuestro planeta se debe a bacterias
fotosintticas. Cuadro N 9.1.
346
Figura N 9.1. Una Visin Simplificada de los tipos de fotosntesis
Fuente: (Corzo Varillas J. 2003)
Cuadro N 9.1. Ciertas caractersticas de los diferentes tipos de microorganismos
fotosintetizadores
Fuente: (Cortez, E. et al. 2005)
347
Figura N 9.2. rbol filogentico eubacteriano basado en datos de ARN 16S
Fuente: (M.T. Madigan, J.M. Martinko y J. Parker., 2002).
Muchos microorganismos son capaces de usar la luz como fuente de la energa
(fototrofa). De stos, Cyanobacteria y las algas son particularmente significativas
porque son oxignicas, usando agua como donador de electrones para la transferencia
del electrn durante la fotosntesis (Figura N 9.2). Junto con las plantas, estos
microorganismos son responsables de toda la generacin biolgica de oxgeno sobre
la Tierra.
En cierto sentido, todos los generadores biolgicos de oxgeno descienden de estos
microorganismos puesto que los cloroplastos fueron adquiridos por endosimbiosis de
348
un linaje de Cyanobacteria. As, los principios generales del metabolismo en
Cyanobacteria se pueden tambin aplicar a los cloroplastos.
9.1.1. Fotosntesis oxignica
La fotosntesis oxignica es la modalidad de fotosntesis en la que el agua es el
donante primario de electrones y que, por lo tanto, libera oxgeno (O
2
) como
subproducto. Figura N 9.3.
Figura N 9.3. Modalidad de Fotosntesis Oxignica
Fuente: (Blankenship, R. L. 2002).
Esta modalidad metablica es propia de las cianobacterias y de sus descendientes
por endosimbiosis, los diversos tipos de cianelas y plastos que se observan en las
(algas) eucariticas y en las plantas.
Las otras bacterias y arqueobacterias fotosintticas recurren a otros donantes de
electrones, como el sulfuro o el hidrgeno. A partir de que la fotosntesis oxignica
apareciera en cianobacterias y se convirtiera en la forma principal de metabolismo
349
auttrofo, la atmsfera terrestre empez a enriquecerse en oxgeno, hasta entonces
casi ausente.
En palabras simples, el proceso de combinacin de dixido de carbono con agua para
formar azcar, resulta en un exceso de oxgeno, el cual es liberado.
En la Fotosntesis oxignica la generacin de ATP y poder reductor se lleva a cabo en
dos centros de reaccin fotoqumica diferentes llamados Fotosistema I (PSI) y
Fotosistema II (PSII), los cuales contienen clorofila y se localizan en las membranas de
los tilacoides. Estos dos fotosistemas actan de una manera conjunta en
cianobacterias, algas y plantas.
a) Cuando la luz es absorbida por las molculas de clorofila existentes en el PSI,
stas molculas de clorofila se fotoactivan lo que les permite oxidarse. Los
electrones eliminados de las molculas de clorofila del PSI son aceptados por
el NADP reducindose a NADPH
2
.Todo esto deja a las molculas de clorofila
del PSI temporalmente deficientes en electrones lo que les confiere una carga
positiva.
b) De la misma manera, la luz absorbida por las molculas de clorofila existentes
en el PSII provoca que un electrn sea eliminado de cada molcula. Estos
electrones pasan a travs de un sistema transportador de electrones hasta que
llegan al PSI donde son aceptados por las molculas de clorofila deficientes en
electrones que se reducen. Este sistema transportador de electrones es
parecido al descrito en la fosforilacin oxidativa, utilizndose la energa
liberada para la sntesis de ATP.
La diferencia radica en que el donador primario de electrones es la clorofila del PSII y
el aceptor terminal de electrones es la clorofila del PSI (NADH
2
y O
2
respectivamente
en la fosforilacin oxidativa).
En este punto la clorofila del PSII es deficiente en electrones. Sin embargo, esta
clorofila es un fuerte agente oxidante que obtiene los electrones necesarios para
reducirse de las molculas de H
2
O.
Esta oxidacin del H
2
O genera oxgeno gaseoso. Las cianobacterias, algas y plantas
son organismos que generan oxgeno mediante la fotosntesis oxignica, siendo los
350
responsables de la produccin mayoritaria del oxgeno que existe en la atmsfera
terrestre. Figura N 9.4.
La atmsfera de la primitiva Tierra no contena oxgeno hasta que se desarrollaron las
cianobacterias hace entre 1000 y 3000 millones de aos.
El desarrollo de los organismos aerobios slo fue posible despus de que se
acumularan en la atmsfera apreciables cantidades de O
2
(generado mediante la
fotosntesis oxignica de las cianobacterias).
Adems de la fotosntesis oxignica, muchas bacterias pueden tambin fotosintetizar
de forma anaerobia, tpicamente con sulfuro de hidrgeno (H
2
S) como donador de
electrones para producir sulfato. El azufre inorgnico (S
0
), tiosulfato (S
2
O
3
2-
) y el hierro
ferroso (Fe
2+
) son tambin usados por algunos organismos.
Figura N 9.4. Comparativo de la fosforilacin Cclica y la fosforilacin No cclica.
Fuente: (Voet, D. y J. G. Voet. 2006)
Filogenticamente, todas las bacterias fotosintticas oxignicas descienden de
Cyanobacteria, mientras que las bacterias fotosintticas anoxgenas pertenecen a las
bacterias prpuras (Proteobacteria), a las bacterias verdes del azufre (por ejemplo,
Chlorobium), a las bacterias verdes no del azufre (por ejemplo, Chloroflexus) o a
351
Heliobacteria (bacterias Gram positivas de contenido GC bajo). Adems de estos
organismos, algunos otros (por ejemplo la archaea Halobacterium o la bacteria
Roseobacter, entre otras) pueden utilizar la luz para producir energa usando la enzima
bacteriorodopsina. Este tipo de metabolismo no se considera fotosntesis sino
fotofosforilacin, puesto que genera energa, pero no fija directamente el carbono.
Como consecuencia de la diversidad de bacterias fotosintticas, existen numerosos
mecanismos por los cuales la luz es convertida en energa para el metabolismo. Todos
los organismos fotosintticos localizan sus centros de reaccin fotosintticos dentro de
membranas, que pueden ser invaginaciones de la membrana citoplsmica (bacterias
prpuras), membranas del tilacoide (Cyanobacteria), estructuras en antena
especializadas llamadas los clorosomas (las bacterias verdes del azufre y no del
azufre) o la membrana citoplsmica en s misma (heliobacteria). Diversas bacterias
fotosintticas tambin contienen diversos pigmentos fotosintticos tales como clorofilas
y carotenoides permitiendo que se aprovechen diversas porciones del espectro
electromagntico y de este modo habiten diversas zonas. Algunos grupos de
organismos contienen estructuras captadoras de luz ms especializadas, por ejemplo,
ficobilisomas en Cyanobacteria y clorosomas en las bacterias verdes del azufre y no
del azufre, aumentando la eficiencia en la utilizacin de la luz.
9.1.2. Fotosntesis anoxgena
Los fototrofos anoxignicos convierten la energa de la luz en
energa qumica necesaria para el crecimiento; sin embargo, y al contrario que las
plantas, algas y cianobacterias en este proceso de transformacin de la energa no se
produce oxgeno y por ello se le llama fotosntesis anoxignica. Otra diferencia es que
352
los fototrofos anoxignicos contienen un tipo de clorofila, bacterioclorofila, diferente a la
clorofila de las plantas. Estas bacterias contienen adems carotenoides, pigmentos
encargados de la absorcin de la energa de la luz y posterior transmisin a la
bacterioclorofila.
El color de estos pigmentos son los que le dan el nombre a estas bacterias: bacterias
rojas y bacterias verdes (Cuadro N 9.2). En las cianobacterias estos pigmentos
captadores de luz son las ficobilinas, de ah su nombre: bacterias azules
(cianobacterias).
Cuadro N 9.2. Bacterias fotosintticas
Fuente: (M.T. Madigan, J.M. Martinko y J. Parker., 2002).
En las bacterias rojas y bacterias verdes slo existe un fotosistema, de tal manera que
la energa absorbida de la luz se utiliza para transportar un electrn desde la clorofila a
la cadena de transporte de electrones que finalmente cede el electrn a la misma
353
clorofila. En esta cadena de transporte de electrones se genera la energa necesaria
para sintetizar ATP. Sin embargo, el transporte de electrones es cclico (el donador
primario de electrones y el aceptor terminal de electrones es la misma clorofila) no
existiendo por lo tanto reduccin de NADP a NADPH.
Esta reduccin se lleva a cabo mediante transporte inverso de electrones gracias a los
electrones donados por el hidrgeno gaseoso (H
2
) o el sulfuro de hidrgeno (H
2
S). En
cualquier caso nunca se produce O
2
. Figura N 9.5.
Figura N 9.5. Modalidad de Fotosntesis Anoxignica.
Este grupo bacteriano est dividido en 7 subgrupos. Son clulas Gram negativas, de
forma esfrica, espiral, bacilar o vibroide. Se organizan en agregados regulares o
irregulares, unicelulares o formas filamentosas multicelulares. Presentan pigmentos
fotosintticos localizados en la membrana citoplasmtica (subgrupo 4), y en varios
tipos de sistemas de membrana intracitoplasmtico (subgrupo 1-3 ) o en clorosomas
(subgrupo 5 y 6). El color de las suspensiones celulares vara de prpura-violeta a
prpura roja, rojo-rosado, amarillo, caf y verde. Todas tienen en comn la presencia
de bacterioclorofila y pigmentos carotenoides.
354
Presentan crecimiento fotoautotrfico o fotoorganotrfico en condiciones anaerbicas o
microaerbicas. En contraste a la fotosntesis oxignica de cianobacterias, presentan
una fotosntesis anoxignica la cual es dependiente de un donador externo de
electrones, tal como compuesto de azufre reducido, hidrgeno molecular o compuestos
orgnicos. Durante la oxidacin del sulfuro glbulos de azufre son formados
transitoriamente almacenados dentro de la clula (subgrupo 1) o fuera de la clula (2 y
5). Almacenan polisacridos, poli-b -hidroxibutirato y polifosfato.
Se desarrollan en ambientes anxicos de suelos hmedos y en ambientes acuticos,
agua dulce, marina y ambientes hipersalinos.
Bioqumicamente, la fotosntesis anoxgena es muy diferente de la fotosntesis
oxignica. Las Cyanobacteria (y por extensin los cloroplastos) usan un esquema Z de
flujo de electrones que es utilizado eventualmente para formar NADH. Se utilizan dos
centros reactivos distintos (fotosistemas) y la fuerza motiva del protn es generada
usando un flujo cclico de electrones y quinona. En las bacterias fotosintticas
anoxignicas el flujo de electrones es cclico, transferiendo los electrones de nuevo,
una vez empleados en la fotosntesis, al nico centro de la reaccin. Se genera la
fuerza motiva protn usando solamente quinona. En Heliobacteria y en las bacterias
verdes del azufre y no del azufre se forma NADH usando la protena ferredoxina, una
reaccin energticamente favorable. En las bacterias prpuras se forma NADH
mediante el flujo inverso de electrones debido al potencial qumico ms bajo de este
centro de reaccin. En todos los casos, sin embargo, se genera y se utiliza la fuerza
motiva de un protn para conducir la produccin de ATP va una ATPasa.
Las bacterias nicamente son poseedoras de fotosistemas I, de manera que al carecer
de fotosistemas II no estn capacitadas para usar al agua como dador de electrones, y
en consecuencia, no producen oxgeno al realizar la fotosntesis. En funcin de la
molcula que emplean como dador de electrones y el lugar en el que acumulan sus
productos, es posible diferenciar tres tipos de bacterias fotosintticas: las sulfobacterias
purpreas se caracterizan por emplear sulfuro de hidrgeno (H
2
S) como dador de
electrones y por acumular el azufre en su interior; las sulfobacterias verdes tambin
utilizan al sulfuro de hidrgeno, pero a diferencia de las purpreas no acumulan azufre
355
en su interior; y finalmente, las bacterias verdes carentes de azufre usan materia
orgnica, tal como cido lctico, como donadora de electrones.
En las bacterias purpreas, los fotosistemas I estn presentes en la membrana
plasmtica, mientras que en las bacterias verdes, estos se encuentran en la membrana
de ciertos orgnulos especiales. Los pigmentos fotosintticos estn constituidos por
las bacterioclorofilas a, b, c, d y e, as como tambin por los carotenos; por otra parte,
lo ms frecuente es que la molcula diana sea la denominada P890.
Al igual que sucede en la fotosntesis oxignica, existe tanto una fase luminosa como
una oscura, distinguindose en la primera un transporte de electrones acclico y otro
cclico. Mientras en el cclico nicamente se obtiene ATP, en el acclico se reduce el
NAD
+
a NADH, que posteriormente es empleado para la reduccin del CO
2
, NO
3
-
, entre
otros. El NADH tambin puede ser obtenido en ausencia de luz, gracias al ATP
procedente del proceso cclico. Figura N 9.7.
Figura N 9.7. Potencial de Reduccin de la Fotosntesis Anoxignica
Fuente: (Purves, W.K., Sadava, D.; Orians, G.H.; Heller, H.C. 2002)
356
La mayora de los microorganismos fotosintticos son auttrofos, fijando dixido de
carbono va el ciclo de Calvin. Algunas bacterias fotosintticas (por ejemplo,
Chloroflexus) son fotohetertrofos, lo que significa que utilizan compuestos orgnicos
como fuente de carbono para el crecimiento. Algunos organismos fotosintticos
tambin son capaces de fijar nitrgeno.
9.2. GRUPOS DE BACTERIAS FOTOTROFAS
Los microorganismos no pueden obtener su energa nicamente de la oxidacin de
compuestos inorgnicos y orgnicos, sino que muchos pueden capturar la energa
luminosa y utilizarla para sintetizar ATP y NADH o NADPH. Este proceso es atrapada y
convertida en energa qumica recibe el nombre de fotosntesis.
Las bacterias fotosintticas realizan una parte muy importante de la transformacin y
generacin de la materia orgnica de lagos y ros.
Su existencia es determinante en el frgil equilibrio energtico de este planeta.
Estudiarlas es de gran importancia. En Mxico existen ya algunos grupos interesados
en estos microorganismos y en sus mecanismos de transformacin y conservacin de
la energa solar.
Un organismo fotosinttico generalmente incorpora y reduce CO
2
, reacciones stas
que se consideran parte de este proceso. La fotosntesis es uno de los procesos
metablicos ms importantes que ocurren en nuestro planeta debido a que casi toda
nuestra energa procede en ltimo trmino de la energa solar.
La energa solar proporciona a los organismos fotosntesis el ATP y el NADPH
necesarios para sintetizar la materia orgnica requerida para el crecimiento. A su vez,
estos organismos sirven como base de la mayora de las cadenas alimentarias de la
biosfera.
La fotosntesis tambin es responsable de reponer nuestras provisiones de O
2
, un
proceso crucial que es realizado por diversos organismos, tanto eucariotas como
procariotas.
Aunque la mayora de las personas asocian la fotosntesis a las plantas superiores ms
evidentes, ms de la mitad de la fotosntesis de nuestro planeta es realizada por
microorganismos.
357
9.2.1. Diversidad de organismos Fotosintticos
Existen tres grupos de bacterias Gram negativas fotosintticas:
Cianobacterias.
Bacterias rojas del azufre y no del azufre.
Bacterias verdes.
Estos organismos pueden vivir utilizando CO
2
como nica fuente de carbono y algunos
son capaces de fijar el nitrgeno atmosfrico. Cuadro N 9.3.
Cuadro N 9.3. Grupos de organismos Fotosintticas Eucariotas y Procariotas.
Organismos eucariotas Organismos procariotas
Plantas superiores
Algas verdes, pardas y rojas
multicelulares
Algas unicelulares
(p. ej. Euglenoides, dinoflagelados,
diatomeas)
Cianobacterias
Bacterias verdes del azufre
Bacterias verdes no sulfreas
Bacterias prpuras del azufre
Bacterias prpuras no sulfreas
Prochloron
9.2.2. Ecologa de las bacterias fotosintticas
Cianobacterias: ocupan hbitat muy amplios: aguas (dulces o saladas), suelos,
ambientes extremos (desiertos, Antrtida), en vida libre o en simbiosis.
Ecosistemas terrestres: beneficiosas como productores primarios y fijadores de
N
2
Ambientes acuticos. Ver problemas: eutroficacin y floraciones (blooms).
358
Bacterias del azufre (tanto rojas como verdes). Hbitat muy especiales: ambientes
acuticos anaerobios con luz y presencia de H
2
S H
2
.
Estas condiciones se presentan en tres tipos de sistemas:
En lagos profundos meromcticos, donde tiene lugar una estratificacin
permanente o estacional de las aguas.
En estanques de poca profundidad, ricos en materia orgnica, CO
2
, H
2
y,
generalmente, H
2
S, producidos por bacterias anaerbicas de los sedimentos,
constituyendo los denominados tapetes microbianos.
9.2.3. Pigmentos de las Bacterias Fotosinteticas
Las bacterioclorofilas son unos pigmentos fotosintticos que se encuentran en
varias bacterias fototrofas. Estn relacionadas con las clorofilas, que son los pigmentos
primarios en plantas, algas y cyanobacterias.
Los grupos que contienen bacterioclorofila realizan la fotosntesis pero no producen
oxgeno. Usan longitudes de onda de luz que no son absorbidas por las plantas.
Cuadro N 9.4.
Los diferentes grupos contienen diferentes tipos de bacterioclorofila:
Bacterioclorofila a, Bacteria prpura, Chloracidobacterium thermophilum.
1
Bacterioclorofila b, Bacteria prpura.
Bacterioclorofila c, Bacteria verde del azufre, Chloroflexi, Chloracidobacterium
thermophilum.
Bacterioclorofila d, Bacteria verde del azufre.
Bacterioclorofila e, Bacteria verde del azufre.
Bacterioclorofila g, Heliobacteria.
Las bacterioclorofilas c y d son clorinas, con un anillo pirrol reducido, y las restantes
son bacterioclorinas, con dos.
359
Cuadro N 9.4. Tipos de Bacterioclorofilas en los grupos microbianos.
Pigmento Bacteriana grupo
en el infrarrojo
mximo de absorcin
in vivo (nm)
Bacterioclorofila a
Las bacterias prpuras
(= Proteobacteria ),
thermophilum
Chloracidobacterium
805, 830-890
Bacterioclorofila b Prpura bacterias 835-850, 1020-1040
Bacterioclorofila c
azufre, las bacterias
verdes , Chloroflexi ,
"Cab. thermophilum"
745-755
Bacterioclorofila c
s
Verdes no sulfricas
bacterias
740
Bacterioclorofila d Verde azufre bacterias 705-740
Bacterioclorofila e Verde azufre bacterias 719-726
Bacterioclorofila g Heliobacteria 670, 788
Bacterioclorofilas a, b son bacteriochlorinas, con dos anillos de pirrol reducido (B y D),
bacterioclorofilas c, d, e se clorinas, con una reduccin de pirrol ring "(D), mientras que
bacterioclorofila g es nico.
Fuente: (C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.B. Ahern, 2002).
Otros pigmentos fotosintticos tambin absorben la energa luminosa. Entre stos, los
ms extendidos son los carotenoides, molculas largas generalmente de color amarillo
que poseen un extenso sistema de dobles enlaces conjugados.
El -caroteno est presente en Prochloron y en la mayora de las divisiones de las
algas, la fucoxantina se encuentra en diatomeas, dinoflagelados y algas pardas
(Phacophyta). Las algas rojas y las cianobacterias poseen pigmentos fotosintticos
denominados ficobiliprotenas, formadas por una protena unida a un tetrapirrol.
La ficoeritrina es un pigmento rojo con una absorcin mxima en 550 nm, y la
ficocianina es un pigmento azul (absorcin mxima en 620 y 640 nm).
360
Figura N 9.9. Estructura qumica de los Pigmentos fotosintticos
Estructura de las bacterioclorofilas. R puede ser fitilo o geranilgeranilo. la
bacterioclorofila b difiere basicamente de la a en R
3
=(CH-CH
3
).
Fuente: (J. Koolman y KH Rhm, 2004).
361
9.3. FISIOLOGA DEL CRECIMIENTO FOTOTRPICO EN LAS BACTERIAS
PRPURAS Y VERDES
9.3.1. Bacterias prpuras
Incluidas en el Phylum Proteobacteria. Unicelulares, mviles por flagelos.
Metablicamente muy verstiles:
- Condiciones anaerobias y luz: fijan N
2
y crecen fotoautotrficamente o
fotoheterotrficamente
- Condiciones aerobias: quimiohetertrofas.
Las bacterias prpuras o bacterias prpuras fotosintticas.
Son proteobacterias fototrofas, esto es, capaces de producir energa a travs de
la fotosntesis. Poseen pigmentos de bacterioclorofila a o b, junto con
varios carotenoides. Estos les proporcionan unos colores que incluyen el prpura, rojo,
marrn y naranja. La fotosntesis tiene lugar en centros reactivos sobre la membrana
celular, la cual se dobla dentro de la clula para formar sacos, tubos u hojas,
incrementando la superficie disponible.
Como la mayora de las dems bacterias fotosintticas, las bacterias prpuras no
producen oxgeno porque el agente reductor implicado en la fotosntesis no es el agua.
Se dividen en dos subgrupos: del azufre y no del azufre. Cuadro N 9.5.
Cuadro N 9.5. Bacterias prpuras del azufre y no del azufre
Fuente: (Berenger J. y J. L. Sanz. 2002)
362
a. Bacteria prpura del azufre
En algunas, llamadas bacterias prpuras del azufre, el agente reductor
es sulfuro o azufre. En el pasado los distintos grupos eran consideradas familias, pero
los rboles de ARN indican que las bacterias prpuras comprenden una variedad
de grupos separados, cada uno ms relacionado con proteobacterias no-fotosintticas
que con los otros grupos.
Las bacterias prpuras del azufre se incluyen en el subgrupo gamma y forman el
orden Chromatiales. La semejanza entre la maquinaria fotosinttica en estas diversas
lneas indica que tuvieron un origen comn, bien de algn antepasado comn o
conseguida por transferencia lateral.
Bacterias rojas del azufre: Chromatium Chromatiumes un gnero de bacterias Gram-
negativas encontradas en agua. Metablicamente se clasifican dentro de las bacterias
prpuras (o rojas) del azufre con capacidad fotosinttica.
b. Bacteria prpura no del azufre
Las bacterias prpuras no del azufre, tpicamente el agente reductor
es hidrgeno aunque algunas pueden utilizar otros compuestos en cantidades
pequeas, se incluyen entre los subgrupos de proteobacterias alfa y beta,
comprendiendo:
Rhodospirillales
Rhodospirillaceae es una familia de proteobacterias. La mayora son bacterias
prpuras no del azufre, produciendo energa a travs de la fotosntesis (inicialmente
todas las bacterias prpuras no del azufre se incluan aqu). Se encuentran a menudo
en ambientes acuticos anaerobios, tales como fango y agua estancada, aunque
tambin pueden sobrevivir en presencia de aire.
Esta familia tambin incluye a Magnetospirillum, que contiene minsculas
cadenas de la magnetita. stas les permiten detectar el campo magntico de la tierra,
que corre tanto hacia abajo como de norte a sur, para volver al fondo de una charca
363
(magnetotaxis). Cadenas similares de magnetita se han encontrado en meteoritos
marcianos, lo que ha llevado a sugerir la existencia de vida en Marte.
Rhodospirillaceae (por ejemplo, Rhodospirillum).
Acetobacteraceae (por ejemplo, Rhodopila).
Rhizobiales
Bradyrhizobiaceae (por ejemplo, Rhodopseudomonas).
Las Bradyrhizobiaceae son una familia de bacterias, con diez gneros; incluyendo
bacterias asociadas a plantas como Bradyrhizobium, un gnero de rhizobia que
establecen simbiosis con algunas leguminosas. Tambin con animales como Afipia
felis, formalmente causante de la enfermedad por araazo de gato. Otras son de vida
libre, como Rhodopseudomonas, una bacteria fotosinttica prpura hallada en aguas
marinas y en suelos.
Rhodobiaceae (por ejemplo, Rhodobium).
Rhodobiumes un gnero de bacterias prpuras no del azufre. Los rboles de ARN los
separan de las dems familias, por lo que se clasifican en la suya
propia, Rhodobiaceae. Las clulas tienen forma de bacilo y se reproducen
por gemacin como muchos otros miembros de Rhizobiales. R. orientis, la especie
tpica, fue aislada del agua del mar en 1995. Es capaz de la produccin fotosinttica de
hidrgeno usando la enzima nitrogenasa.
Hyphomicrobiaceae (por ejemplo, Rhodomicrobium).
364
Otras familias:
Rhodocyclaceae (por ejemplo, Rhodocyclus).
Rhodocyclaceae es una familia de bacterias Gram negativas que se incluye en su
propio orden, Rhodocyclales, en el subgrupo beta de Proteobacteria. Incluye muchos
gneros previamente asignados a la familia Pseudomonadaceae. La familia contiene
principalmente bacterias con forma de bacilo, aerobias y desnitrificantes, que exhiben
capacidades metablicas muy verstiles. La mayora de las especies viven en hbitats
acuticos y prefieren condiciones oligotrficas. Muchas proliferan en aguas residuales
y juegan un importante papel en la biorremediacin, por ejemplo, Zoogloea.
El gneros que da nombre al grupo, Rhodocyclus es bastante atpico en el grupo, pues
el nico fototrofo entre ellos. Rhodocyclus sp. Realizan la fotosntesis anoxgena bajo
condiciones anxicas de forma similar a otros gneros de proteobacterias alpha. La
especie Rhodocyclus purpureus tambin se diferencia de los otros miembros de la
familia (incluyendo otras especies Rhodocyclus) por la forma anular de su clula que
lleva los dos extremos de la clula hasta casi tocarse y que ha inspirado su nombre.
Rhodobacteraceae (por ejemplo, Rhodobacter).
Comamonadaceae (por ejemplo, Rhodoferax).
9.3.2. Bacterias verdes
Pequeo grupo de bacterias similares fisiolgica, nutricional y ecolgicamente a las
bacterias rojas.
Las bacterias verdes del azufre o Chlorobi constituyen un pequeo grupo
de bacterias que realizan la fotosntesis anoxignica.
Caractersticas Generales.
Son Anoxifotobacterias que utilizan como donadores de electrones SH
2
y
a veces SO
4
2-
La mayora auttrofos
365
Morfologa muy variada: cadenas de cocobacilos, formando entramados
Mas antiguas que las Cianobacterias
Muy alejadas filogenticamente de los otros dos grupos de anoxifotobacterias,
Bacterias Prpura y Heliobacterias
Poseen Bacterioclorofila a junto a c, d, o e y Carotenoides de color verde
El aparato fotosinttico est localizado en Clorosomas y membrana plasmtica
Viven a grandes profundidades
Algunas forman Consorcios con bacterias quimiorganotrofas
Gneros representativos: Chlorobium, Pelochromatium, Pelodictyon
a. Bacterias verdes del azufre
Son fotolitoauttrofas obligadas que usan sulfuro de hidrgeno (H
2
S) o azufre (S) como
donantes de electrones (por comparacin, las plantas durante la fotosntesis usan agua
como donante de electrones y producen oxgeno). Las estructuras donde se
almacenan los pigmentos fotosintticos estn unidas a la membrana y se conocen
como clorosomas o vesculas clorobiales. Estos clorosomas
contienenbacterioclorofila "c", "d" y "e".
Estas bacterias se encuentran en las zonas ricas en azufre y anaerobias de los lagos.
Algunas de estas bacterias contienen vesculas que les permiten ajustar la profundidad
para conseguir una cantidad ptima de luz y H
2
S ya que estas bacterias son
generalmente inmviles (se conoce una especie que tiene un flagelo). Otras especies
no tienen vesculas y se las encuentra en el fango rico en azufre en el fondo de los
lagos y lagunas. Estas bacterias son bien diversas morfolgicamente y se pueden
presentar como bacilos, cocos y vibrios. Algunas crecen solas, otras en cadenas y
pueden ser de color verde grama o marrn chocolate.
Una especie de bacteria verde del azufre ha sido encontrada viviendo en
una fumarola de la costa de Mxico a una profundidad de 2.500 metros bajo la
superficie del Ocano Pacfico. A esta profundidad, las bacterias, denominadas GSB1,
viven del dbil resplandor del respiradero termal puesto que ninguna luz del sol puede
penetrar a tal profundidad.
366
Las bacterias verdes del azufre se clasifican en la familia Chlorobiaceae que, al no
estar estrechamente emparentada con ninguna otra, se incluye en su propio
filo, Chlorobi. El grupo ms prximo es Bacteroidetes.
Bacterias verdes del azufre
Phylum Chlorobi. Fotoauttrofos anaerobios. Gen. Chlorobium.
b. Bacterias verdes no del azufre
Las bacterias verdes no del azufre (Chloroflexi) son un filo de bacterias que obtienen
energa mediante fotosntesis. Su denominacin se debe a su pigmento verde, que se
encuentra generalmente asociado a estructuras membranosas internas
llamadas clorosomas.
Las bacterias de este grupo son aerobias facultativas, pero no
producen oxgeno durante la fotosntesis, pues contienen bacterioclorofila y
realizan fotosntesis anoxignica. Su va de fijacin del carbono tambin difiere de la de
otras bacterias fotosintticas. El nombre de bacterias no del azufre no es muy
adecuado porque pueden utilizar compuestos reducidos de azufre como donadores de
electrones. Tienden a formar colonias encerradas en envolturas tpicamente
filamentosas, y se mueven mediante deslizamiento sobre superficies. Algunas especies
son termfilas.
Caractersticas Generales
Lnea filogentica propia, muy distante de las bacterias verdes del Azufre. Es
una lnea evolutiva muy antigua
Poseen bacterioclorofila a o c
367
Utilizan sustancias orgnicas como donadores de electrones
Poseen Clorosomas
Viven en aguas termales donde forman biopelculas
Gneros representativos: Chloroflexus, Chloronema
Algunas especies que anteriormente se incluan en este grupo, ahora se clasifican en
el filo Thermomicrobia. Cavalier-Smith denomina a estos dos grupos Chlorobacteria y
considera que son las bacterias ms primitivas.
Phylum Chloroflexi. Gn. Chloroflexus (fotohetertrofo, pudiendo ser fotoauttrofo o
quimiohetertrofo de forma facultativa).
9.3.3. Reaccin Luminosa en bacterias Verdes y Prpuras
Las bacterias fotosintticas verdes y prpuras se diferencian de las cianobacterias y de
los fotosintetizadores eucariotas en varias aspectos fundamentales. Cuadro N 9.6.
En particular, las bacterias verdes y prpuras no utilizan agua como fuente de
electrones ni producen O
2
mediante fotosntesis, es decir, son anoxignicas.
Por el contrario, las cianobacterias y los fotosintetizadores eucariotas son casi siempre
oxignicos. En la reaccin luminosa fotosinttica de las bacterias prpuras no se
produce NADPH directamente. Las bacterias verdes pueden reducir el NAD
+
directamente durante la reaccin luminosa. Para sintetizar NADH y NADPH, las
bacterias verdes y prpuras deben usar dadores de electrones tales como el
368
hidrgeno, el sulfuro de hidrgeno, el azufre elemental y compuestos orgnicos que
tienen potenciales de reduccin ms negativos que el agua y que, por tanto, son ms
fciles de oxidar (son mejores dadores de electrones).
Por ltimo, las bacterias verdes y prpuras poseen pigmentos fotosintticos
ligeramente diferentes, las bacterioclorofilas muchas de las cuales tienen mximo de
absorcin en longitudes de onda ms largas. Figura N 9.10.
Las bacterioclorofilas a y b tienen mximos en 775 y 790 nm, respectivamente. In vivo,
los mximos estn en 830 a 890 nm (bacterioclorofila a) y 1020 a 1040 nm (Bchl b).
Este desplazamiento de los mximos de absorcin a la regin infrarroja adapta mejor a
estas bacterias a sus nichos ecolgicos.
Figura N 9.10. Sistema de transporte de electrones en las bacterias
fotosintticas
369
Cuadro N 9.6. Caractersticas generales de las bacterias fototrficas purpuras y
verdes.
Fuente: (Berenger J. y J. L. Sanz. 2002)
Actualmente, hay cuatro grupos de bacterias verdes y prpuras fotosintticas, cada
una de las cuales contiene varios gneros: bacterias verdes sulfricas (Chlorobium),
bacterias verdes no sulfreas (Chloroflexus), bacterias prpuras sulfreas
(Chromatium), y bacterias prpuras no sulfreas (Rhodospirillum,
Rhodopseudomonas).
Muchas de las diferencias observadas en las bacterias verdes y prpuras se deben a la
falta del fotosistema II. Por ello no pueden usar agua como dador de electrones en el
transporte de electrones no cclico. Consecuentemente, sin el fotosistema II, no pueden
producir O
2
a partir de H
2
O mediante la fotosntesis y estn limitadas a la
fotofosforilacin cclica. De hecho, casi todas las bacterias prpuras y verdes sulfreas
son anaerobios estrictos. Cuando se excita la clorofila P870 especial del centro de
reaccin, cede un electrn a la bacteriofeofitina.
A continuacin, los electrones fluyen a las quinonas y, a travs de una cadena
transportadora de electrones, de nuevo a la P870 impulsando as la sntesis de ATP.
Es destacable que aun que tanto las bacterias verdes como las prpuras carecen de
dos fotosistemas, presentan fotosistemas diferentes, as, las prpuras tienen un
370
aparato fotosinttico similar al fotosistema II, mientras que las verdes sulfreas tienen
un sistema similar al fotosistema I.
a- Cadena de transporte electrnico en bacterias verdes
Las bacterias verdes presentan un aparato fotosinttico diferente de las bacterias
prpura. En primer lugar, el mismo no se encuentra localizado en investigaciones de la
membrana, sino en vesculas, denominadas clorosomas, localizadas debajo de la
membrana citoplasmtica. Los clorosomas contienen bacterioclorofila c, d o e
(absorcin entre 700 y 755nm) y, adicionalmente, muchos de los carotenoides y
protenas. En este sistema, las vesculas pigmentales absorben la luz y transfieren la
energa al centro de reaccin, denominado P840, que est localizado en la membrana
citoplasmtica.
La proporcin entre la bacterioclorofila de las vesculas y la bacterioclorofila de los
centros de reaccin es de 1 a 1000, mucho ms alta que en el caso de las bacterias
prpura; por tanto, los clorosomas son captadores muy eficientes de luz, incluso en
condiciones de iluminacin muy dbil.
Estas bacterias tienen un fotosistema del tipo PSI, con un pico de absorcin a 840 nm.
Puede tener bacterioclorofilas de los tipos c, d, e. Los electrones abandonan PSI
unidos a una ferrosulfoprotena soluble, de pequeo tamao, la ferredoxina, que se
desplaza por la cara interna citoslica- y son transferidos a la coenzima Q por la
enzima ferredoxina-coenzima Q oxidorreductasa y, a continuacin siguen un camino
similar al anterior; en este caso el citocromo de tipo c que devuelve el electrn al
fotosistema es el c553.
La diferencia fundamental con el caso anterior es que el potencial redox de la
ferredoxina es menor que el del NAD+, por lo que esa ferrosulfoprotena puede reducir
directamente al NAD+ (o al NADP+, que tiene igual potencial redox)
371
Figura N 9.11. El flujo de electrones que se genera en el aparato fotosinttico de
las bacterias verdes posibilita la reduccin directa del NAD
+
.
En este sistema, el flujo de electrones (Figura N 9.11) implica la transferencia de un
electrn desde el centro de reaccin a una protena de hierro y azufre .
A diferencia de las bacterias prpuras, el siguiente intermediario, una ferredoxina,
puede desviar el electrn hacia el NAD
+
. En este caso la reduccin del citocromo c
555
,
que es el que a su vez vuelve a reducir al centro de reaccin, se consigue mediante un
dador externo de electrones como, por ejemplo, el SH
2
. En las bacterias verdes, al
igual que sucede en la fotosntesis oxignica, la reduccin del NAD
+
es consecuencia
directa del proceso fotosinttico. La excepcin es Chloroflexus, cuyo aceptor primario
de electrones presenta un potencial redox que impide reducir directamente el NAD
+
.
Las bacterias verdes y prpuras se enfrentan a un nuevo problema debido a que
tambin requieren NADH o NADPH para la incorporacin de CO
2
. Pueden sintetizar
NADH al menos de tres formas. Si estn creciendo en presencia de gas hidrgeno, que
tiene un potencial de reduccin ms negativo que el del NAD
+
, pueden usar
directamente el hidrogeno para sintetizar NADH. Al igual que los quimiolitotrofos,
muchas bacterias prpuras fotosistemas utilizan ATP o la fuerza motriz de protones
372
para invertir el flujo de electrones en una cadena transportadora de electrones, y
transferidos de dadores inorgnicos u orgnicos al NAD
+
.
Las bacterias verdes sulfreas, como Chlorobium, parecen realizar una forma sencilla
de flujo de electrones fotosinttico no cclico para reducir el NAD
+
. Las bacterias
verdes (Chlorobium y relacionados) pueden emplear diversos donadores de
electrones: sulfuro, tiosulfato, azufre elemental y diversos compuestos orgnicos, para
llevar a cabo la reduccin de la clorofila oxidada. Evidentemente, ajustan el flujo de
electrones a travs de las vas cclica (produce slo ATP sin consumir poder reductor
externo) y no cclica (produce slo NADPH usando un donador externo de electrones)
para maximizar la eficiencia del sistema en funcin de sus necesidades metablicas.
El esquema de la cadena de transporte electrnico de estas bacterias es el siguiente:
(Figura N 9.12).
Figura N 9.12. Transporte cclico y no ciclico de electrones
PSI; 2, citocromo bf; 3: Ferredoxina:coQ oxidorreductasa; 4: Ferredoxina:NADP
oxidoreductasa. En rojo, transporte no cclico; en azul, transporte cclico de
electrones.
Las bacterias fotosintticas verdes que producen azufre (sulfurosas),
como Chlorobium, viven en ambientes carentes de oxgeno, como en el fondo de
algunos lagos ricos en materia orgnica. Estos organismos le dan el color verde
caracterstico a estas aguas. As encontramos tambin bacterias prpuras
373
sulfurosas, como Chromatium, que viven en ambientes tambin carentes de
oxgeno y que utilizan compuestos con azufre en su metabolismo. stas se
encuentran tambin en algunos lagos y en manantiales de aguas termales
sulfurosas. Finalmente tenemos a las bacterias prpuras no sulfurosas, que
tienen la peculiaridad de utilizar la luz en ausencia de oxgeno, como las bacterias
verdes y las prpuras sulfurosas, pero adems pueden utilizar al oxgeno durante
los periodos de oscuridad. Estas bacterias poseen en su interior una complicada
organizacin de molculas encargadas de captar la luz solar y conservar la
energa proporcionada por esta forma de energa qumica. La luz que es
aprovechada es la luz visible y gran parte de la cual es empleada tambin por las
plantas verdes, de tal forma que los pigmentos encargados de captar la luz lo
hacen en las regiones del espectro de la luz visible que no son utilizadas por las
plantas. Estas molculas se conocen como pigmentos antena y, dado que la
intensidad de la luz que llega a las profundidades donde se encuentran estas
bacterias es muy baja, su captacin debe ser muy eficiente para as aprovechar
la energa al mximo.
Estos microorganismos cuentan con estructuras internas que contienen las molculas
que captan la luz de tan baja intensidad. Estas estructuras se conocen como
cromatforos y contienen molculas de clorofila tpica de estas bacterias, que son las
que captan la luz y retienen la energa que sta proporciona.
Figura N 9.13. Fotosintesis en sistemas Oxicos y Anoxicos
374
B. Cadena de transporte electrnico en bacterias prpuras.
Las bacterias prpuras presentan bacterioclorofilas a o b. Adems de absorber luz en
la banda correspondiente a la bacterioclorofila (800-890nm y 1020-1040nm), tambin
absorben en una segunda regin entre 400 y 500nm debido a la presencia de los
carotenoides responsables del color rojo, prpura o marrn de las bacterias fototrofas.
Estos pigmentos protegen a las bacterias del efecto txico de la fotooxidacin y,
adems, transfieren la energa absorbida a la bacterioclorofila. Invaginaciones de la
membrana proporcionan espacio para la localizacin del aparato fotosinttico, que
incluye los elementos reseados en la Figura N 9.14.
Un elemento esencial del aparato fotosinttico es el centro de captacin de la luz (CL),
que incluye ms del 90% de la bacterioclorofila, juntamente con carotenoides y muchas
protenas. Estos centros transfieren la energa luminosa a los centros de reaccin.
Cada centro de reaccin puede estar asociado a muchos CL (entre 20 y 490). El centro
de reaccin, denominado P870, es un complejo que incluye 4 molculas de
bacterioclorofila (dos de ellas activas fotoqumicamente), 2 molculas de
bacteriofeofitina (bacterioclorofila libre de magnesio) y una protena con tres
subunidades diferentes. Este centro de reaccin se encuentra asociado a un complejo
de hierro-ubiquinona. Estos dos complejos, integrados en la membrana, se encuentran
asociados a otro complejo, tambin anclado en la membrana, denominado citocromo
bc
1
. Al aparato fotosinttico pertenece tambin la ubiquinona y el citocromo c
2
,
molculas que se mueven libremente en la membrana.
Figura N 9.14. Invaginaciones de la membrana donde se localiza el aparato
fotosinttico.
375
En presencia de luz, cada quntum absorbido provoca que un electrn se transloque
del par de bacterioclorofilas activas del centro de reaccin a la bacteriofeofitina, va una
bacterioclorofila secundaria , pasando posteriormente al complejo
ubiquinona-hierro . De aqu, el flujo de electrones sigue va complejo
citocromo bc
1
y citocromo c
2
, el cual vuelve a reducir otra vez al
complejo P870. Figura N 9.15.
Este transporte de electrones cclico genera un gradiente de pH en la membrana,
estimndose que por cada electrn que circula son expulsados al exterior dos protones
que son utilizados para generar ATP mediante la ATP-asa. Del anlisis del fotosistema
de las bacterias prpura se deduce que no existe ninguna posible desviacin del flujo
de electrones entre la bacteriofeofitina y el complejo ubiquinona-hierro
. Ello implica que el flujo de electrones no puede desviarse hacia el
NAD
+
, por lo que la reduccin del mismo se realiza utilizando el SH
2
(Cromaticeas) o sustratos orgnicos (Rodospirilceas). Si el potencial redox del dador
de hidrgeno lo permite, el mismo se oxida en una reaccin dependiente del NAD
+
.
Para los dems sustratos (incluido H
2
), el NAD
+
se reduce a travs de una cadena de
transporte inverso de electrones, a expensas del ATP generado en el proceso
fotosinttico.
Figura N 9.15. Flujo de electrones en el aparato fotosinttico de las bacterias
prpuras.
376
El flujo de electrones que se genera no posibilita la reduccin directa del NAD
+
, ya que
el aceptor primario de electrones (Fe-Q) tiene un potencial ms positivo que el par
NAD
+
/NADH. Ello no sucede as en el sistema de bacterias verdes.
El gradiente de hidrogeniones as creado puede ser empleado por la bacteria para
sintetizar ATP a travs de la ATPasa F de su membrana. Observe que los electrones
abandonan el fotosistema con un potencial redox mayor que el correspondiente al par
NAD
+
/NADH (-0,32 V, en condiciones estndar), por lo que la transferencia de
electrones desde la coenzima Q reducida al NAD
+
es un proceso endergnico.
9.4. FOTOSNTESIS DE LAS CIANOBACTERIAS
Las cianobacterias constituyen un grupo grande y heterogneo de microorganismos
fototrofos. Clasicamente, los miembros de este grupo se han conocido con el nombre
de algas verdeazuladas aunque, atendiendo a su naturaleza procariota, el termino
correcto que se debe emplear para denominarlos es el de cianobacterias.
Las cianobacterias, antiguamente conocidas como algas verdeazules, por su color
verde-azulado (a veces rojizo, pardo o negro), son bacterias que han estado viviendo
sobre nuestro planeta por ms de 3 mil millones de aos.
Se caracterizan por que son procariotas (sin ncleo verdadero), auttrofos
(fundamentalmente). Unicelulares, tamao entre 1 m hasta varios micrmetros.
Las cianobacterias crecen en ambientes lnticos (lagos y lagunas), suelos hmedos,
troncos muertos, cortezas de rboles, algunas en aguas salobres y otras en aguas
termales.
Hace miles de millones de aos las haba en tan gran nmero, que eran capaces de
aadir, a travs de la fotosntesis, suficiente oxgeno a la primitiva atmsfera de la
Tierra, como para que los animales que necesitaban oxgeno pudieran sobrevivir.
377
9.4.1. Caractersticas Generales
Bacterias Gram negativas
Morfologa variada: unicelulares y filamentosas mviles por deslizamiento
Presentan diferenciaciones celulares: Heteroquistes y Acinetos
Realizan Fotosntesis Oxignica. Presentan Ficobilisomas
Fotoauttrofos: asimilan el CO
2
mediante el Ciclo de Calvin-Benson
Acumulan glucgeno
Ciclo de Krebs incompleto
Fijan Nitrgeno, producen Geosmina y Toxinas
Se dividen por fisin binaria, gemacin o fisin mltiple
Estn presentes en numerosos hbitats: Superficie e interior de rocas, suelos
desrticos, estanques y lagos, en simbiosis con Hongos, Protozoos y plantas.
Tamao entre 1 m hasta varios micrmetros
Son componentes bsicos de los Estromatolitos. Hay restos fsiles de ms de
3000 millones de aos de antigedad. Probablemente fueron los primeros
organismos productores de Oxgeno
Actualmente son 24 gneros: Chroococcus, Synechococcus, Anabaena, Spirulina,
Nostoc, Oscillatoria y otros.
Gneros sin heterocistes: Oscillatoria y Spirulina
Gneros con heterocistes: Anabaena.
378
9.4.2. Importancia Biolgica de las Cianobacterias
Las cianobacterias son organismos antiguos que se caracterizan por conjugar el
proceso de la fotosntesis oxgenica con una estructura celular tpicamente bacteriana.
Al ser responsables de la primera acumulacin de oxgeno en la atmsfera, las
cianobacterias han tenido una enorme relevancia en la evolucin de nuestro planeta y
de la vida en l.
En la actualidad presentan una amplia distribucin ecolgica, encontrndose en
ambientes muy variados, tanto terrestres como martimos, e incluso en los ms
extremos, siendo la fotoautotrofia, con fijacin de CO
2
a travs del ciclo de Calvin, su
principal forma de vida, y contribuyendo de manera importante a la productividad
primaria global de la Tierra. Muchas cianobacterias son capaces de fijar el nitrgeno
atmosfrico, siendo, a su vez, capaces de hacerlo en condiciones de aerobiosis (de
hecho, ciertas cianobacterias representan los mayores fijadores en amplias zonas
ocenicas contribuyendo de forma importante a la cantidad total de nitrgeno fijado en
vida libre).
La existencia conjunta de la fotosntesis y de la fijacin de nitrgeno ha requerido el
diseo de estrategias que hagan posible el funcionamiento de ambos procesos
antagnicos desde el punto de vista de sus requerimientos ambientales.
Entre tales estrategias la separacin en el tiempo o en el espacio de ambas funciones
permite el desarrollo normal de la clula en condiciones de bajos niveles de nitrgeno
combinado. En este sentido, merece particular mencin la capacidad de algunas
especies filamentosas de desarrollar unas clulas llamadas heterocistos,
enormemente especializadas en la fijacin del nitrgeno en ambientes aerbicos.
Por lo que respecta a la fisiologa de este grupo, la misma es notablemente sencilla.
Como fuente de nitrgeno utilizando nitrato o amonio. No obstante, es importante
resaltar que muchas cianobacterias fijan nitrgeno elemental. Aun cuando muchas
especies son fototrofas obligadas, incapaces de crecer en la oscuridad a expensas de
materia orgnica, algunas pueden asimilar compuestos orgnicos sencillos, tales como
la glucosa o el acetato. No obstante, ello solo tiene lugar en presencia de luz. Parece
que las cianobacterias son incapaces de producir ATP mediante la oxidacin de
379
compuestos pero, si el ATP es obtenido mediante fotofosforilacion, algunos
compuestos orgnicos pueden ser utilizados como fuente de carbono.
Es tambin importante mencionar que algunas cianobacterias pueden llevar tambin a
cabo una fotosntesis anoxigenica. En estas circunstancias funciona solamente el
fotosistema I, y el SH2 funciona como dador de electrones.
9.4.3. Caractersticas de la Fotosntesis de las cianobacterias
A pesar de tener un metabolismo fototrofo, difieren de las bacterias verdes, purpuras y,
de hecho, del resto de procariotas fototrofos en aspectos esenciales,
fundamentalmente por el hecho de que desarrollan una fotosntesis oxignica.
Presentan solamente un tipo de clorofila, la clorofila a, al igual que las plantas
superiores y la mayora de las algas. Adems todas ellas presentan un tipo de
pigmentos caractersticos, las ficobilinas, que juegan un papel accesorio en la
fotosntesis. Las ficocianinas, un tipo de ficobilinas, son azules, y presentan un pico
mximo de absorcin de la luz a 625-630 nm. Juntamente con la clorofila a son
responsables del color de este grupo de microorganismos.
Las cianobacterias inventaron una variante de la fotosntesis que ha llegado a ser la
predominante, y que ha determinado la evolucin de la biosfera terrestre. Se trata de
la fotosntesis oxignica. La fotosntesis necesita un reductor (una fuente
de electrones), que en este caso es el agua (H
2
O). Al tomar el H del agua se
libera oxgeno. La explosin evolutiva y ecolgica de las cianobacterias, hace miles de
millones de aos, dio lugar a la invasin de la atmsfera por este gas, que ahora la
caracteriza, sentando las bases para la aparicin del metabolismo aerobio y
la radiacin de los organismos eucariontes.
En las Cianobacterias la Fotosntesis se realiza en las Laminillas membranosas o
Cromatforos (organelos membranosos parecidos a los Cloroplastos de los vegetales
superiores). Es de tipo Oxignica puesto que utiliza el H
2
O como donador de
electrones liberando O
2
atmosfrico.
Junto con el ATP y NADPH
2
que son sintetizados en presencia de la luz solar, el CO
2
es fijado y reducido posteriormente en Carbohidratos. En estas Bacterias fotosintticas
380
no existe el PSII (Fotosistema II) su Fotofosforilacin de de tipo Cclica con
participacin de un nico sistema pigmentario el PSI (Fotosistema I).
El proceso fotosinttico de las cianobacterias se presentan en la Figura N 9.16. La
energa lumnica es captada y transferida al centro de reaccin I, lo que provoca que
un electrn salte, siendo capturado por una protena con hierro y azufre que presentan
un Eo de -600 mV. El electrn, a travs de un flujo cclico, es transferido al centro de
reaccin I va ferredoxina, plastoquinona, un complejo citocromo bf y una protena con
Fe y S y plastocianina. La transferencia de electrones de la quinona al complejo
citocromo bf est asociada a la translocacin de protones a travs de la membrana.
Figura N 9.16. Sistema fotosinttico de las Cianobacteria.
P680, centro de reaccin II; P700, centro de reaccin I; PQ
A
-Fe, complejo
plastoquinonahierro; PQ, plastoquinona; cit bf, citocromo bf; PC; plastoquinona; Fd,
ferredoxina; Fe-S, protena azufre y hierro.
Fuente: (Pares I.F. y A. Jurez, 1997).
381
Este flujo cclico de electrones puede interrumpirse para producir poder reductor de
NADPH, al cual se le transfiere los electrones de la ferredoxina. Si se da esta situacin,
el aporte externo de electrones se realiza mediante el fotosistema II. La transferencia
de electrones al NAD
+
genera un pool de plastoquinona oxidada. Teniendo en cuenta
que la plastoquinona se encuentra en la membrana en concentraciones mucho ms
elevadas que el resto de los componentes, el sistema puede soportar un cierto flujo de
electrones al NAD
+
sin aporte externo pero, finalmente, el pool de plastoquinona
necesita ser reducido. El centro de reaccin II se encarga de bombear electrones de
agua a un complejo plastoquinona-hierro, el cual finalmente lo transfiere a la
plastoquinona. El potencial redox tan positivo del centro de reaccin P680 (E
0
=+850
mV) posibilita oxidar agua a oxigeno, proceso catalizado por una manganoproteina.
Las Cianobacterias fijan el N
2
atmosfrico reducindolo a Amonio (NH
4
). La fijacin del
N
2
atmosfrico se realiza en ellas a travs de la Nitrogenasa (enzima fijadora del N
2
atmosfrico) quien lo fija y lo reduce a NH
4
.
Por ende, las Cianobacterias poseen la capacidad de realizar la Fotosntesis Oxignica
y participar en el Ciclo del N
2
. Estos 2 procesos en ellas No son compatibles, ya que la
enzima Nitrogenasa es inhibida por el O
2
molecular que se desprende por la escisin
de la molcula de H
2
O, por lo que durante el dia solo realizan la Fotosntesis, mientras
que en la noche fijan el N
2
y lo reducen a NH
4
.
En el ciclo del N
2
las Cianobacterias solo intervienen en el proceso de Amonificacin
(transformacin del N
2
atmosfrico en NH
4
).
Lo que denominamos fotosntesis en realidad son dos procesos acoplados. El
esquema representa a un cloroplasto, pero tambin podra valer para explicar lo que
ocurre en el interior de una cianobacteria. A la izquierda tenemos la denominada Fase
Luminosa en la que la energa de la luz es transformada en energa qumica. En la
parte de la derecha tenemos la Fase Oscura donde se aprovecha la energa qumica
para reducir el CO
2
a hidratos de carbono. En las plantas, algas y cianobacterias el
donador de electrones e hidrgenos es el agua y por ello se consigue la fotolisis del
agua obtenindose oxgeno como producto residual, por ello se habla de fotosntesis
oxignica. En otros seres vivos como las bacterias verdes, fotosntticos ese donador
es distinto y no se produce oxgeno, por lo que se denomina fotosntesis anoxignica.
382
9.4.4. El PSI y el transporte electrnico entre fotosistemas
Los PSI de cianobacterias y de cloroplastos son muy similares, y funcionan de la
misma manera, cediendo un electrn a la ferredoxina. Se diferencian en la molcula
que, a su vez, cede electrones a la clorofila oxidada.
En cianobacterias, que poseen simultneamente cadena de trasporte electrnico,
respiratorio y fotosinttico, los electrones llegan al PSI transportados por un citocromo
de tipo c, que es el mismo que lleva los electrones al centro IV. De hecho, en
cianobacterias las dos cadenas de transporte electrnico (respiratoria y fotosinttica)
comparten la quinona, el centro respiratorio III y el citocromo c. Figura N 9.17.
Por el contrario, los cloroplastos carecen de cadena de transporte electrnico
respiratorio. No son cianobacterias, aunque procedan de una bacteriacianobacteria
probablemente- endosimbionte. En este caso, los electrones llegan al PSI desde el
citocromo b6f transportados por una pequea protena soluble con un tomo de cobre,
la plastocianina. En su estado oxidado el cobre est como Cu
2+
, y como Cu
+
en su
estado reducido.
La ferredoxina reducida sirve como fuente de poder reductor para:
1. Producir NADPH, mediante la NADP reductasa o Ferredoxina: NADP
oxidoreductasa. Es una protena de membrana.
2. Reducir directamente al citocromo b6f, en cuyo caso tenemos el transporte de
electrones cclico, sin produccin de NADPH pero sintetizando ATP gracias al
bombeo de protones desde el citocromo.
3. Otros procesos redox del cloroplasto que requieren ferredoxina reducida.
383
Figura N 9.17. El PSI y el transporte electrnico entre Fotosistemas
384
La ferredoxina NADP
+
reductasa (FNR, EC 1.18.1.2) es una flavoprotena que contiene
FAD, y que cataliza la fotorreduccin del NADP
+
durante la fotosntesis oxgenica. Esta
enzima se encuentra en todas las cianobacterias y en todos los eucariotas
fotosintticos, y tambin ha sido descrita en diferentes tejidos no fotosintticos de
plantas superiores.
La FNR de cianobacterias, aislada de clulas vegetativas esta muy bien caracterizada,
y su papel fisiolgico consiste en catalizar la reduccin del NADP
+
utilizando dos
electrones donados por sendas molculas de ferredoxina reducida. Se ha descrito
tambin que en las cianobacterias, la FNR puede tambin funcionar como una NADPH
deshidrogenasa respiratoria.
9.4.5. Fotofosforilacin
La fotofosforilacin es un proceso de sntesis de ATP a partir de ADP + fosfato
llevado a cabo por las ATP-sintasas de la membrana del tilacoide, en los cloroplastos
de las clulas vegetales. Es un proceso de la fase luminosa de la fotosntesis en que
se utiliza la energa liberada en el transporte de electrones para bombear protones
desde el estroma al interior del tilacoide con el fin de crear un gradiente electroqumico
el cual, al disiparse por la salida de protones del tilacoide al estroma a travs de las
ATP-sintasas, acopla esta energa protn-motriz a la fosforilacin del ADP para formar
ATP. La energa necesaria la proporciona la luz que es captada por los pigmentos
fotosintticos.
Es la sntesis de ATP que se produce cuando se exponen cloroplastos aislados a la
accin de la luz, en presencia de ADP y fosfato. La formacin de ATP a partir de la
reaccin de ADP y fosfato, es el resultado del acoplamiento energtico de la
fosforilacin al proceso de transporte de electrones inducido por la luz, de la misma
forma que la fosforilacin oxidativa est acoplada al transporte de electrones y al
consumo de oxgeno en las mitocondrias.
ADP + Pi + cloroplastos + luz ATP Pi = fosfato inorgnico.
385
Existen dos tipos:
Fotofosforilacin acclica. Estn implicados ambos fotosistemas, I y II; el flujo de
electrones que produce no es cclico por lo que se sintetiza tanto ATP como NADPH.
Fotofosforilacin cclica. Est implicado slo el fotosistema I; se realiza un
bombeo de hidrogeniones del estroma al espacio tilacoidal, que contribuye a crear un
gradiente electroqumico de hidrogeniones y por tanto a la sntesis del ATP, sin que se
produzca NADPH.
Un fotosistema es el conjunto mnimo de los compuestos necesarios para llevar a cabo
el proceso de fotosntesis. Es un centro de reaccin que se sita, junto con otros
muchos, en las membranas de los tilacoides. Permite recibir la energa luminosa y
transmitirla a lo largo de una cadena de reacciones que la transforman en energa
qumica.
En el fotosistema I se realiza la sntesis cclica de ATP, que es independiente de la
fotlisis del agua y de la formacin de NADPH; mientras que la fotofosforilacin no
cclica, est acoplada al transporte de electrones desde el agua, en el fotosistema II a
travs de una cadena transportadora.
La molcula de H
2
O del lado izquierdo de la ecuacin, cede los dos electrones
necesarios para la reduccin del NADP+ y el tomo de oxgeno que se libera en forma
de O
2
. La molcula de H
2
O del lado derecho de la ecuacin procede de la formacin
de ATP a partir de la reaccin de ADP + Pi.
a. Fase luminosa cclica
En la fase luminosa o fotoqumica cclica interviene de forma exclusiva el fotosistema I,
generndose un flujo o ciclo de electrones que en cada vuelta da lugar a sntesis de
ATP. Figura N 9.18.
Al no intervenir el fotosistema II, no hay fotlisis del agua y, por ende, no se produce la
reduccin del NADP
+
ni se desprende oxgeno. nicamente se obtiene ATP.
386
Figura N 9.18. Fase luminosa Cclica
El objetivo que tiene la fase cclica tratada es el de subsanar el dficit de ATP obtenido
en la fase acclica para poder afrontar la fase oscura posterior.
Cuando se ilumina con luz de longitud de onda superior a 680 nm (lo que se llama rojo
lejano) slo se produce el proceso cclico. Al incidir los fotones sobre el fotosistema I, la
clorofila P700 libera los electrones que llegan a la ferredoxina, la cual los cede a un
citocromo bf y ste a la plastoquinona (PQ), que capta dos protones y pasa a (PQH
2
).
La plastoquinona reducida cede los dos electrones al citocromo bf, seguidamente a la
plastocianina y de vuelta al fotosistema I. Figura N 9.19.
387
Este flujo de electrones produce una diferencia de potencial en el tilacoide que hace
que entren protones al interior. Posteriormente saldrn al estroma por la ATP-sintetasa
fosforilando ADP en ATP. De forma que nicamente se producir ATP en esta fase.
Figura N 9.19. Fotofosforilacin Cclica
Sirve para compensar el hecho de que en la fotofosforilacin acclica no se genera
suficiente ATP para la fase oscura.
La fase luminosa cclica puede producirse al mismo tiempo que la acclica.
b. Fotofosforilacin acclica
El proceso de la fase luminosa, supuesto para dos electrones, es el siguiente: Los
fotones inciden sobre el fotosistema II, excitando y liberando dos electrones, que pasan
al primer aceptor de electrones, la feofitina. Los electrones los repone el primer dador
de electrones, el dador Z, con los electrones procedentes de la fotlisis del agua en el
interior del tilacoide (la molcula de agua se divide en 2H
+
+ 2e
-
+ 1/2O
2
).
Los protones de la fotlisis se acumulan en el interior del tilacoide, y el oxgeno es
liberado.
388
Los electrones pasan a una cadena de transporte de electrones, que invertir su
energa liberada en la sntesis de ATP.
La teora quimioosmtica nos lo explica de la siguiente manera: los electrones son
cedidos a las plastoquinonas, las cuales captan tambin dos protones del estroma. Los
electrones y los protones pasan al complejo de citocromos bf, que bombea los
protones al interior del tilacoide. Se consigue as una gran concentracin de protones
en el tilacoide (entre stos y los resultantes de la fotlisis del agua), que se compensa
regresando al estroma a travs de las protenas ATP-sintasas, que invierten la energa
del paso de los protones en sintetizar ATP. La sntesis de ATP en la fase fotoqumica
se denomina fotofosforilacin.
Los electrones de los citocromos pasan a la plastocianina, que los cede a su vez al
fotosistema I. Con la energa de la luz, los electrones son de nuevo liberados y
captados por el aceptor A
0
. De ah pasan a travs de una serie de filoquinonas hasta
llegar a la ferredoxina. sta molcula los cede a la enzima NADP
+
-reductasa, que
capta tambin dos protones del estroma. Con los dos protones y los dos electrones,
reduce un NADP
+
en NADPH + H
+
. Figura N 9.20.
El balance final es: por cada molcula de agua (y por cada cuatro fotones) se forman
media molcula de oxgeno, 1,3 molculas de ATP, y un NADPH + H
+
.
Figura N 9.20. Fotofosforilacin acclica
389
En la membrana tilacoidal como resultado de la fotlisis del agua y de la oxidacin de
la plastoquinona (PQH
2
) se generan protones (H
+
); que originan un fuerte gradiente de
concentracin de protones (H
+
) al ser transportados del lumen tilacoidal hacia el
estroma. Este gradiente de pH a travs de la membrana es responsable de la sntesis
de ATP, catalizada por la ATP sintasa conocida tambin como factor de acoplamiento;
ya que acopla la sntesis de ATP al transporte de electrones y protones a travs de la
membrana tilacoidal. La ATP sintasa existe en los tilacoides del estroma y consta de
dos partes principales: un tallo denominado CFo, que se extiende desde el lumen de la
membrana tilacoidal hasta el estroma y una porcin esfrica (cabeza) que se conoce
como CF1 y que descansa en el estroma. Esta ATPasa es similar a la de las
mitocondrias donde sintetiza ATP.
El flujo cclico de electrones tiene lugar en algunos eucariontes y bacterias
fotosintticas primitivas. No se produce NADPH, sino ATP solamente. Esto puede
ocurrir cuando las clulas pueden requerir un suministro de ATP adicional, o cuando no
se encuentre presente NADP+ para ser reducido a NADPH. En el fotosistema II, el
390
bombeo de iones H+ dentro del tilacoide crea un gradiente electroqumico que culmina
con la sntesis de ATP a partir de ADP +Pi. Figura N 9.21.
Figura N 9.21. Flujo acclico de electrones en los dos fotosistemas.
9.4.6. Reaccin luminosa en Eucariotas y Cianobacterias
Todos los organismos fotosintticos tienen pigmentos para la absorcin de la luz. Los
pigmentos ms importantes son las clorofilas. Las clorofilas son grandes anillos planos
compuestos de cuatro anillos pirrlicos con sustituciones, con un tomo de magnesio
coordinado con los cuatro tomos de nitrgeno centrales. En los eucariotas pueden
encontrarse varias clorofilas, de las cuales las dos ms importantes son al clorofila a y
la clorofila b. Estas dos molculas se diferencian ligeramente en su estructura y en sus
propiedades espectrales. Cuando se disuelve en acetona, la clorofila a tiene un pico de
absorcin de luz en 665 nm; el pico correspondiente para la clorofila b se encuentra en
645 nm. Adems de absorber la luz roja, las clorofilas tambin absorben intensamente
la luz azul (el segundo pico de absorcin para la clorofila a se encuentra en 43 0 nm).
Las clorofilas transmiten la luz verde debido a que absorben principalmente los
espectros azul y rojo. Por este motivo muchos organismos fotosintticos son de color
391
verde. La larga cola hidrfoba unida al anillo de clorofila facilita su unin en las
membranas, donde tienen lugar las reacciones luminosas.
Los carotenoides y las ficobiliprotenas a menudo reciben el nombre de pigmentos
accesorios debido a su papel en la fotosntesis. Aunque las clorofilas no pueden
absorber la energa luminosa de manera eficaz en el espectro comprendido entre el
azul-verde y el amarillo (aproximadamente entre 470 y 630 nm), los pigmentos
accesorios absorben la luz en este regin y transfieren la energa captada a la clorofila.
De esta manera, hacen ms eficaz la fotosntesis en un espectro ms amplio de
longitudes de onda. Los pigmentos accesorios tambin protegen a los
microorganismos de la luz del sol intensa que podra oxidar y lesionar el aparato
fotosinttico en su ausencia.
Las clorofilas y los pigmentos accesorios se disponen en estructuras muy organizadas
denominadas antenas, cuya finalidad es crear una extensa superficie para atrapar el
mayor nmero de fotones posible. Una antena tiene unas 300 molculas de clorofila.
La energa luminosa es capturada en una antena y transferida de clorofila a clorofila
hasta que llegue a una clorofila del centro de reaccin directamente involucrada en el
transporte fotosinttico de electrones. En las eucariotas y en las cianobacterias existen
dos tipos de antenas asociadas a dos fotosntesis diferentes. El fotosistema I absorbe
luz con una longitud de onda mayor ( 680 nm) y dirige la energa hacia una molcula
especial de clorofila a denominada P700. El trmino P700 significa que este molcula
absorbe con gran eficacia la luz en una longitud de onda de 700 nbm. El fotosistema II
atrapa la luz en longitudes de onda ms cortas ( 680 nm) y transfiere una energa a la
clorofila especial P680.
Cuando la antena del fotosistema I transfiere energa luminosa a la clorofila P700 del
centro de reaccin, la P700 absorbe la energa y se excita, su potencial de reduccin
pasa a ser muy negativo. A continuacin, cede su electrn excitado o de alta energa a
un aceptor especfico, probablemente una molcula especial de clorofila a (A) o una
protena ferrosulfurada. El electrn es transferido finalmente a la ferredoxina, desde
donde puede moverse en dos direcciones. En la va cclica (lneas discontinuas), el
electrn se mueve en una ruta cclica a travs de una serie de transportadores de
392
electrones y vuelve a la P700 oxidada. La va se denomina cclica debido a que el
electrn procedente de la P700 vuelve a sta despus de recorrer la cadena
transportadora fotosinttica de electrones (Figura N 9.22). Durante el transporte cclico
de electrones se forma FMP en la regin del citocromo b6, utilizando para sintetizar
ATP. Este proceso recibe el nombre de fotofosforilacin cclica debido a que los
electrones recorren una ruta cclica y se forma ATP. En el proceso slo participa el
fotosistema I.
Figura N 9.22. Direccin del flujo de electrones.
Fuente: (Zannoni, D. 2004)
393
Los electrones tambin pueden recorrer una va no cclica en la que intervienen los dos
fotosistemas. La P700 es excitada y cede electrones a la ferredoxina como en el caso
anterior. Sin embargo, en la ruta no cclica la ferredoxina reducida reduce el NADP
+
a
NADPH. Debido a que los electrones cedidos al NADP
+
no pueden ser utilizados para
reducir la P700 oxidada, se requiere la participacin del fotosistema II. Este cede
entonces los electrones a la P700 oxidada y genera ATP en el proceso. La antena del
fotosistema II absorbe energa luminosa y excita a la P680, que a su vez reduce la
feofitina a. La feofitina a es clorofila a en la que se ha sustituido el magnesio central por
dos tomos de hidrgenos. Posteriormente, los electrones son transferidos a O
(probablemente una plastoquinona) y recorren en sentido descendente la cadena
transportadora de electrones hasta la P700.
La P680 oxidada obtiene un electrn de la oxidacin de agua a O
2
. (Figura N 9.23).
As, los electrones fluyen desde el agua hasta el NADP
+
con la ayuda de la energa
proveniente de dos fotosistemas, y se sintetiza ATP mediante fotofosforilacin no
cclica. Se estima que se forman 1 ATP y NADPH cuando dos electrones recorren la
va no cclica.
Figura N 9.23. Esquema que muestra como la P680 oxidada obtiene un electrn
de la oxidacin de agua a O
2
Fuente: (T. Audesirk y G.Audesirk, 2003).
394
El transporte de electrones fotosinttico, al igual que el transporte de electrones
mitocondrial, tiene lugar en el interior de una membrana. Las membranas de los grama
de los cloroplastos contienen las dos fotosistemas y sus antenas. Durante el transporte
electrnico fotosinttico, se desplazan protones al interior del tilacoide, que
posteriormente vuelven al estroma, derivndose la sntesis de ATP. Se cree que las
laminillas estromales slo poseen el fotosistema I y que slo participan en la
fotofosforilacin cclica. En las cianobacterias, las reacciones luminosas fotosintticas
tambin se localizan en membranas.
Para formar una molcula de oxgeno se requieren dos molculas de agua, lo que
supone la cesin de 4 electrones por el centro fotoqumico P680. En resumen, el
proceso puede ser el siguiente:
El OEC acta como un acumulador de carga: va cediendo electrones uno a uno al
P680 hasta que acumula un dficit de cuatro electrones; en ese momento, toma los 4
electrones a la vez de dos molculas de agua y libera una de oxgeno. Este
procedimiento evita que se formen intermedios parcialmente reducidos de oxgeno, que
son muy reactivos. Note que los hidrogeniones se liberan en el exterior del citosol (o
del estroma del cloroplasto), colaborando por consiguiente a la creacin de la fuerza
protn-motriz necesaria para la sntesis de ATP. Figura N 9.24.
Salvo por la presencia del OEC, las estructuras y el funcionamiento de los PSII de
cianobacterias y cloroplastos son anlogas a las del PSII de las bacterias prpuras, por
lo que no se repetir aqu.
Figura N 9.24. Transporte de electrones fotosinttico
395
Las reacciones oscuras requieren 3 ATP y 2 NADPH para reducir 1 CO
2
y utilizarlo
para sintetizar hidrato de carbono (CH
2
0).
CO
2
+ 2ATP + 2NADPH + 2H- + H
2
O -------> (CH
2
O) + 3ADP + 3P + NADP
+
El sistema no cclico genera I NADPH y 1 ATP por cada par de electrones; por
consiguiente cuatro electrones que pasan a travs del sistema producirn 2 NADPH y
2 ATP. Se necesita un total de 8 cuantos de energa luminosa (4 cuantos por cada
fotosistema) para impulsar los cuatro electrones desde el agua al NADP
+
. Debido a que
la relacin entre el ATP y el NADPH necesaria para la fijacin del CO
2
es de 3;2, debe
suministrarse al menos 1 ATP ms. La fotofosforilacin cclica probablemente opera de
manera independiente para generar el ATP adicional. Esto requiere la absorcin de
otros 2 a 4 cuantos.
+
Por lo tanto, son necesarios alrededor de 10 a 12 cuantos de
energa luminosa para reducir e incorporar una molcula de CO
2
durante la
fotosntesis.
9.4.7. Fijacin fotosinttica del CO
2
Aunque la mayora de los microorganismos puede incorporar o fijar CO
2
, al menos en
las reacciones anaplerticas, slo los autotrofos utilizan CO
2
como fuentes de carbono
exclusiva o principal. La reduccin e incorporacin del CO
2
requiere una gran cantidad
de energa. Los autotrofos generalmente obtienen la energa mediante la absorcin de
luz durante la fotosntesis, pero algunos la obtienen de la oxidacin de dadores de
electrones inorgnicos reducidos. La fijacin de CO
2
autotrfica es fundamental para la
vida sobre la tierra ya que aporta la materia orgnica de la que dependen los
organismos heterotrofos. Reacciones luminosas fotosintticas y quimilitotrofia.
Algunos microorganismos pueden fijar CO
2
o convertir esta molcula inorgnica en
carbono orgnico y asimilarlo en tres rutas principales. Casi todos los autotrofos
microbianos incorporan CO
2
mediante una ruta metablica especial que recibe diversos
nombres: ciclo de Calvin, ciclo de Calvin- Benson o ciclo reductor de las pentosas
fosfato. Figura N 9.25.
396
Figura N 9.25. Ciclo de Calvin- Benson
Fuente: (C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.B. Ahern, 2002).
Aunque el ciclo de Calvin se encuentra en eucariotas fotosintticos, est ausente en
Archaea, en algunas bacterias anaerobias obligadas, y en algunas bacterias
microaeroflicas. Estos microorganismos normalmente emplean una de las siguientes
rutas. Una ruta reducida del cido tricarboxlico es utilizada por algunas Archaea
(Thermoproteus, Sulfolobus) y por bacterias como Chirorobium y Desulfobacter.
La ruta del acetil-CoA se encuentra en metangenos, sulfato-reductores, y en bcterias
que pueden formar acetato a partir del CO
2
, durante la fermentacin (acetgenos).
397
Debido a su gran importancia, nos centraremos aqu en el ciclo de Calvin. Rutas
alterantivas para la fijacin de CO
2
.
El ciclo de Calvin tiene lugar en el estroma del cloroplasto de auttrofos microbianos
eucariticos.
Las cianobacterias, algunas bacterias nitrificantes y tiobacilos poseen carboxisomas,
cuerpos de inclusin polidricos que contienen la enzima ribulosa-1.5 bisfosfato
carboxilasa y que podran constituir el sitio donde se fija el CO
2
o almacena la
carboxilasa y otras protenas.
Resulta ms fcil comprender el ciclo si se divide en tres fases: carboxilacin,
reduccin y regeneracin.
a. Fase de carboxilacin
La fijacin del dixido de carbono la realiza la enzima ribulosa 1,5-bisfosfato
carboxilasa o ribulosabisfosfato, carboxilasa/oxigenasa (rubisco), la cual cataliaza la
adicin del CO
2
a la ribulosa 1,5- bisfosfato (RuBP), formando dos molculas de 3-
fosfoglicerato (PGA). Figura N 9.26.
Figura N 9.26. Fijacin del dixido de carbono
Fuente: (T. Audesirk y G.Audesirk, 2003).
398
b. Fase de reduccin
Una vez que se ha formado el PGA mediante carboxilacin, es reducido a
gliceraldehdo 3-fosfato. La reduccin, llevada a cabo por dos enzimas es bsicamente
la inversin de una parte de la ruta glucoltica, aunque la gliceraldehdo 3-fosfato
deshidrogenasa se diferencia de la enzima glucoltica en que utiliza NADH
+
en lugar
de NAD
+
. Figura N 9.27.
Figura N 9.27. Las tres fases del ciclo de Calvin carboxilacin, reduccin y
regeneracin.
399
c. Fase de regeneracin
La tercera fase del ciclo de Calvin regenera RuBP y produce h hidratos de carbono
tales como gliceraldehdo 3-fosfato, fructosa y glucosa. Esta parte del ciclo es similar a
la ruta de las pentosas fosfato y en ella participan las reacciones de la transcetolasa y
la transaldolasa. El ciclo se completa cuando la fosforribuloquinasa forma de nuevo
RuBP. Figura N 9.28.
Para sintetizar fructosa 6-fosfato o glucosa 6-fosfato a partir de CO
2
, el ciclo debe
operar seis veces para producir la hexosa deseada y formar en nuevo las seis
molculas de RuBP.
5 RuBP + 6 CO
2
-------> 12 PGA-------> 6 RuBP + Fructosa 6-P
Para incorporar una molcula de CO
2
a la materia orgnica son necesarias tres
molculas de ATP y dos de NADPH. La formacin de glucosa a partir del CO
2
puede
resumirse mediante la siguiente ecuacin:
6CO
2
+ 18ATP + 12NADPH + 12H
+
+ 12H
2
O---->Glucosa + 18ADP + 18P1 + 12NADP
+
En los quimioautotrofos, el ATP y el NADPH son aportados por las reacciones
luminosas fotosintticas o por la oxidacin de molculas inorgnicas. Los azcares
formados en el ciclo de Calvin pueden utilizarse posteriormente para sintetizar otras
molculas esenciales.
Figura N 9.28. La tercera fase del ciclo de Calvin regenera RuBP
400
En Chloroflexus la asimilacin del CO2 no implica la utilizacin del ciclo de calvin o del
CAT reverso, sino de una via nica, la via del hidroxipropionato, que implica una doble
carboxilacion de acetil-CoA para generar metilmalonil-CoA, que se desdobla en dos
molculas de acetil-CoA, una de las cuales se utiliza para biosntesis. Figura N 9.28.
Figura N 9.28. Generacin de metilmalonil-coa en Chloroflexus
9.5. FOTO METABOLISMO DE LAS HALOBACTERIAS
Las halobacterias son arqueobacterias adaptadas a vivir en ambientes de alta
concentracin salina. No se desarrollan a concentraciones de NACl inferiores a 2.5
M,
siendo optima para su crecimiento una concentracin de 5 M de NaCl. Se trata siempre
401
de organismos organotrofos, siendo la mayora de las especies aerobios obligados.
Utilizan aminocidos y cidos orgnicos como fuente de energa, y requieren
diferentes factores de crecimiento (fundamentalmente vitaminas) para un desarrollo
ptimo.
Las halobacterias, que crecen en agua extremadamente salada, son aerobias
facultativas; ya que pueden crecer en ausencia de oxgeno. Los pigmentos prpuras
conocidos como retinal (pigmento encontrado en el ojo humano) funcionan como las
clorofilas. La bacteriorodopsina es un complejo formado por retinal y protenas de la
membrana, la que genera electrones que establecen un gradiente de protones que
activa una bomba ADP-ATP, que produce ATP en presencia de la luz, pero en
ausencia de clorofila. Este comportamiento ayuda a sustentar la universalidad de la
teora quimio-osmtica de Mitchell, en la funcin de sintetizar ATP.
9.5.1. Caractersticas y clasificacin de las Halobacterias
Las halobacterias (o halomebacterias) son una clase de arqueobacterias que se
encuentran en el agua saturada o casi saturada de sal. Tambin son llamados
halfilos, aunque este nombre tambin se refiere a otros organismos que viven en
medios con alta concentracin salina. Crean mareas.
Los Halfilos estn todos en el mismo nivel taxonmico:
Flum Euryarchaeota, Clase Halobacteria, Orden Halobacteriales, Familia
Halobacteriaceae.
La Familia Halobacteriaceae comprende 14 gneros diferentes.
Son aerobios hetertroficos que habitan ambientes hipersalinos y no crecern en las
concentraciones de ClNa menores de 1.5 molar. Requieren tambin concentraciones
altas de magnesio para sobrevivir. Algunos gneros no slo son haloflicos, sino
tambin alcalfilos.
Es decir, crecen mejor en valores de pH por encima de 9. Estas bacterias
organotrficas requieren iones Na+ para estabilizar su pared celular de glicoprotena.
402
La concentracin de sal externa alta es equilibrada por la acumulacin intracelular de
iones de K
+
.
Los halfilos extremos viven en ambientes naturales como el Mar Muerto, el Great Salt
Lake o estanques de agua de mar en evaporacin, donde la concentracin de sal es
muy alta (tan alto como 5 molar o 25 por ciento ClNa), ya que requieren
obligatoriamente sal para crecer y no lo harn en concentraciones de sal bajas. Su
pared celular, ribosomas y enzimas se estabilizan con Na
+
. Halobacterium halobium, la
especie prevaleciente en el Great Salt Lake, se adapta al ambiente de alta salinidad
por medio del desarrollo de una "membrana prpura", que realmente son parches de
pigmento captador de luz en la membrana plasmtica. Este pigmento es un tipo de
rodopsina llamado bacteriorrodopsina que reacciona con la luz produciendo un
gradiente de protones en la membrana que permite la sntesis de ATP. ste es el nico
ejemplo en la naturaleza de fotofosforilacin no fotosinttica.
Estos organismos son hetertrofos que normalmente respiran por medios aerobios. La
alta concentracin de NaCl en su ambiente limita la disponibilidad de O
2
para la
respiracin pero ellos pueden complementar su capacidad productora de ATP
convirtiendo energa luminosa en ATP usando la bacteriorrodopsina. Cuando el
oxgeno est presente en el ambiente, sus membranas plasmticas son rojas (alto
contenido en carotenoide), pero sin oxgeno, las membranas se vuelven purpreas
(bacteriorrodopsina).
El crecimiento en ambientes hipersalinos condicionan la fisiologa de estos
microorganismos, los cuales, para mantener una presin osmtica intracelular superior
a la del medio externo (situacin comn en el mundo bacteriano), bombean K
+
al
interior de la clula (la concentracin intracelular de este ion suele ser de 3M) .El Na
+
tambin es requerido para el mantenimiento de la estructura de su pared celular.
Se clasifican segn su tolerancia a la concentracin de ClNa:
Halfilos Moderados: 3 a 15% ClNa
Halfilos Medios: 9 a 24% ClNa
Halfilos Extremos: 18 a 30% ClNa
403
El representante tpico de este grupo es Halobacterium salinarium que es un halfilo
extremo que crece de forma ptima a concentraciones 4-5 M de ClNa (no lo hace por
debajo de concentraciones de ClNa 3 M). Esta microfotografa de una preparacin por
congelacin muestra la estructura de la superficie de la membrana de la clula y revela
parches lisos de "membrana prpura" (bacteriorrodopsina) empotrados en la
membrana plasmtica. Algunas especies de Halobacterium utilizan hidratos de
carbono, pero este hecho es poco frecuente. Tambin en este gnero se han
encontrado especies capaces de crecer anaerobiamente, bien fermentado azucares
bien respirando. En este ltimo caso utilizan nitrato, azufre elemental o tiosulfato como
aceptor terminal de electrones.
9.5.2. Mecanismos de Fotometabolismo de las Halobacterias
Algunas especies de haloarqueas presentan en su membrana
citoplasmtica pigmentos retinales tales como la bacteriorrodopsina (BR) y
la halorrodopsina que permiten al microorganismo utilizar la energa
luminosa para generar gradientes de protones y cloruro respectivamente.
Estos gradientes son utilizados por el microorganismo para realizar
distintos procesos bioenergticos. Ambos pigmentos estn constituidos por
un tipo de protena asociadas con una molcula de retinal y se localizan en
la membrana citoplasmtica.
Pero mientras la halorrodopsina se encuentra dispersa por la membrana, la
bacteriorrodopsina se concentra en regiones o parches. As pues encontramos:
a. Membrana roja
Compuesta esencialmente por lpidos y protenas. En ella se localizan los pigmentos
carotenoides, la halorrodopsina y el resto de los componentes habituales de la
membrana (ATPasa, transportadores de sustancias, transporte electrnico, etc.).
b. Membrana prpura Compuesta exclusivamente por bacteriorrodopsina y lpidos
La membrana prpura es una membrana transductora de energa luminosa que forma
parte de la membrana citoplasmtica (en forma de parches o manchas) de algunos
microorganismos halfilos extremos pertenecientes al dominio Archaea. Contiene un
solo tipo de protena, la bacteriorrodopsina (BR), que consiste en una cromoprotena
404
capaz de utilizar la energa luminosa para bombear H
+
del interior al exterior de la
clula, generando as un gradiente electroqumico de H
+
o fuerza protn-motriz. Las
clulas son capaces de utilizar esta fuerza protn-motriz para sintetizar ATP y realizar
otras funciones vitales que requieren un gasto energtico.
Se considera que se trata del mecanismo ms sencillo que se conoce de fototrofa, es
decir de transformacin de la energa luminosa en un
tipo de energa metablicamente utilizable.
Figura N 9.29. Bombeo de protones dependiente de la luz en las halobacterias.
La excitacin producida por la luz provoca que el retinal en estado trans pase a la
forma cis, lo que a su vez provoca la expulsin de un protn hacia el exterior. La
forma cis vuelve a la trans en un proceso no fotodependiente y que incorpora un
protn del citoplasma. El gradiente protnico puede utilizarse para sintetizar ATP
mediante la ATP-asa. P-protena a la que est unida el retinal a travs del residuo
lisina (lys).
La membrana de las halobacterias presenta ciertas particularidades, como la presencia
de carotenoides que protegen a la clula de la agresin fotoqumica. Estos
405
carotenoides, denominados bacteriorruberinas, de color anaranjado a rojizo, confieren
a la clula un color rojo. Adicionalmente, la pigmentacin se ve potenciada por una
molcula purpura cuya sntesis se induce cuando la presin parcial de oxigeno se
reduce: se trata de la bacteriorrodopcina, denominada de esta forma por su similitud
estructural con el pigmento visual del ojo, la rodopsina .Al igual que esta, la
bacteriorrodopcina consiste en una protena unida a retinal a travs de la membrana
citoplasmtica. Figura N 9.30
Figura N 9.30. Fotosntesis de Halobacterium halobium
Al disminuir la presin parcial de oxigeno, el color de las clulas de Halobacterium de
anaranjado-rojizo a un color rojo intenso, debido a la sntesis de bacteriorrodopsina. Si
se asla la membrana citoplasmtica de clulas que han crecido en ambientes con baja
concentracin de O
2
, la membrana purpura se encuentra cubriendo regiones de la
membrana citoplasmtica, lo cual sugiere que la bacteriorrodopsina es acumulada en
la membrana preexistente mientras que se va reduciendo la concentracin de O
2
.
La capacidad de la bacteriorrodopsina de captar luz es utilizada por las clulas para
llevar a cabo un proceso nico, que posibilita la sin tesis de ATP a expensas de la luz
en ausencia de clorofilas. En presencia de luz (la bacteriorrodopsina presenta un
mximo de absorcin a 570 nm), el cromforo retinal, que normalmente se encuentran
en conformacin trans, pasa a conformacin cis (fig. 23.7), lo que lleva a la
transferencia de protones al exterior de la clula.
406
La forma cis tiene tendencia a estabilizarse en la oscuridad, captando protones del
citoplasma. Este ciclo crea un gradiente electroqumico a travs de la membrana
citoplasmtica, el cual puede ser utilizado para la sntesis de ATP.
La energa generada por esta reaccin no permite soportar el crecimiento mximo de
halobacterium en ausencia de una fuente orgnica de energa, pero puede mantener
un crecimiento lento en condiciones anaerobias desfavorables para la obtencin de
energa a expensas de materia orgnica y tambin posibilita mantener la viabilidad de
las clulas en condiciones anaerobias y en ausencia de fuentes alternativas de
energa. Adicionalmente, el gradiente de protones creado tambin sirve para bombear
Na
+
/ H
+
, y para facilitar la entrada de nutrientes , incluido el K
+
necesario para el
equilibrio osmtico .
9.6. BIOLUMINISCENCIA EN LAS BACTERIAS
La relacin entre radiacin luminosa y metabolismo microbiano no solamente est
restringida a la utilizacin de la energa radiante por parte de los microorganismos sino
que, tambin, existen actividades metablicas microbianas que conllevan la produccin
de luz.
Se conoce como bioluminiscencia a la produccin de luz de ciertos organismos vivos.
Es un fenmeno muy extendido en todos los niveles biolgicos: bacterias, hongos,
protistas unicelulares, celentreos, gusanos, moluscos, cefalpodos, crustceos,
insectos, equinodermos, peces.
La bioluminiscencia en el mundo procariota es ms frecuente de lo que normalmente
se cree. Las bacterias bioluminiscencias se encuentran en ambientes tanto acuticos y
terrestres, pudindose aislar fcilmente como saprofitos que crecen sobre peces
muertos o sobre carne. A pesar de que diversos grupos bacterianos tienen esta
propiedad, clsicamente ha sido asociada a dos gneros, Vibrio y Photobacterium.
Las Bacterias que emiten bioluminicencia est amplamente distribudas em ambientes
naturales. A lo largo de los aos varios investigadores vienen estudando la fisiologia,
407
bioqumica y control gentco de bioluminescencia. Esos descubrimientos han
revolucionado el rea de Microbiologa Ambiental a travs de la utilizacin de los
genes lux como biosensores en escudos ambientales. Esta revisin examinar una
cronologa de descubrimientos cientficos de la bioluminiscencia bacteriana de las
aplicaciones actuales en estudios ambientales, mediante la utilizacin de test de
toxicidad Microtox. La significancia ecolgica da bioluminiscencia ser tambin
examinada.
9.6.1. Mecanismo de la bioluminiscencia
La bioluminiscencia se debe a un proceso qumico complejo en el que intervienen
varios elementos. Estos seres sintetizan luciferina, un compuesto orgnico que
reacciona (se oxida) en presencia del oxgeno. La luciferasa es una enzima cataltica
que acelera la reaccin y el ATP (trifosfato de adenosina), una molcula que genera la
energa para que tenga lugar la reaccin. El exceso de energa se libera en forma de
luz.
Los procesos metablicos que conducen a la produccin de luz por los
microorganismos son actualmente bien conocidos. Las catlisis del proceso depende
de un enzima, la luciferasa, que cataliza una reaccin en el cual un aldehdo de cadena
larga es oxidado.
Esta reaccin emite luz:
Se trata de una reaccin que requiere oxigeno, flavin mononucletido reducido y el
correspondiente aldehdo, que suele ser el tetradecanal, aun cuando in vitro el sistema
funcione con molculas ms cortas, de 12 9 tomos de C. la luciferasa es una
enzima compuesto de dos subunidades, y . Los genes que codifican dichas
subunidades (lux A y lux B) se encuentran localizados en el mismo opern, que
tambin incluye los genes luxC, luxD, luxE, que codifican una reductasa de cidos
grasos. El clonaje de este bloque de genes ha abierto enormes posibilidades de
408
aplicaciones prcticas a la emisin de luz por las bacterias, ya que es posible convertir
en bioluminiscentes a muchos microorganismos que de forma natural no lo son. Para
ello, solamente es necesario introducir un plsmido recombinante que contenga los
genes anteriormente mencionados.
Si bien la mayora de las bacterias carecen de la luciferasa y de la reductasa de cidos
grasos, s que pueden proporcionar FMNH
2
y, en la prctica, el aldehdo puede ser
suministrado por el medio.
La posibilidad de convertir en bioluminiscentes a bacterias que de forma natural no lo
son ofrece innumerables posibilidades de aplicaciones prcticas, entre las que se
puede incluir el estudio de la expresin de genes diferentes (fusionando con el opern
lux al gen de inters), la deteccin de la presencia en determinadas muestras de un
microorganismo concreto (utilizando bacterifagos especficos portadores de los genes
lux que, una vez introducidos en la bacteria si la misma se encuentra presente,
provocarn la aparicin de luminiscencia en la muestra), o la deteccin de la viabilidad
bacteriana, ya que la produccin de luz es dependiente del estado energtico de la
bacteria. De hecho, la deteccin de la presencia de microorganismos por la produccin
de luz tiene sin duda proyeccin en muchos campos de la microbiologa aplicada, por
ejemplo, cuando se requiera comprobar el efecto de algn producto o condicin
ambiental sobre una microflora especifica, la cual habr sido previamente convertida
en bioluminiscente.
9.6.2. Simbiosis con bacterias Luminiscentes
Este fenmeno se conoce slo en animales marinos tales como los celentreos,
gusanos, moluscos, equinodermos y peces. La luz emitida por el pescado o la carne en
descomposicin se debe a bacterias mientras que la de la madera muerta se debe
tanto a bacterias como a los micelios de ciertos hongos. En el mar existen bacterias
libres como Bacterium phosphorescens o la especie del mar Bltico Vibrium balticum.
Otras muchas bacterias bioluminiscentes viven como parsitos o en simbiosis con
otros animales.
Parece ser el fenmeno de luminiscencia de origen biolgico ms extendido en el reino
animal. En diversos lugares del cuerpo los animales disponen de pequeas vejigas,
comnmente llamadas fotforos, donde guardan bacterias luminiscentes. Algunas
409
especies producen luz continua cuya intensidad puede ser neutralizada o modulada
mediante diversas estructuras especializadas. Normalmente los rganos luminosos
estn conectados al sistema nervioso, lo que permite al animal controlar la emisin
lumnica a voluntad.
La relacin entre la bacteria Vibrio fischeri y el calamar sepilide Euprymna scolopes
es un sistema que sirve como modelo de simbiosis en el laboratorio. En su fase juvenil,
el Euprymna scolopes posee una serie de apndices recubiertos de mucosidad
alrededor de su rgano luminoso con los que recoge bacterias Vibrio fischeri del
entorno marino. Cuando la cantidad es suficiente, los apndices mueren al tiempo que
el rgano luminoso madura en un proceso fisiolgico que se ha asociado con la
aparicin de la citotoxina traqueal.
La composicin qumica de estas sustancias vara en las distintas especies
bioluminiscentes. Por ello, se desarrolla una variada gama de colores, entre el verde y
el azul como los ms comunes, y el rojo o el mbar en casos ms puntuales: la
medusa abisal Periphylla periphylla genera tonalidades rojizas.

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