MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

CRONOGRAMA:
APLICACIN MICROORGANISMOS
! Hasta 1900: Era pre-Pasteur (bebidas alcohlicas, productos
lcteos, vinagre)
! 1900 1940: Era Pasteur
! Fermentaciones industriales (etanol, butanol, acetona)
! Produccin cidos orgnicos (actico, ctrico, lctico)
! 1940-1960: Era antibitico
! produccin antibiticos
! 1960-1975: Era post-antibitico
! Produccin de a,a., enzimas
! 1975- presente: Era Biotecnologa molecular
! Tecnologa de ADNA recombinante
! Productos en mercado: insulina humana, vacunas






APLICACIONES DE LOS MICROORGANISMOS Y SISTEMAS
O PROCESOS BIOLOGICOS EN LA INDUSTRIA
DNA RECOMBINANTE
INGENIERIA GENETICA
Manipulacin de organismos para
la obtencin de productos
biolgicos deseados:
Sustancias qumicas
Enzimas
Vacunas
Hormonas, anticuerpos,
factores sanguineos
ENZIMAS Y
BIOCATALIZADORES
Elaboracin de alimentos
Equipos de diagnstico
Biosensores
Quimioterapia
Sustancias qumicas
TRATAMIENTO Y UTILIZACIN DE
RESIDUOS
Detoxicacin
Uso de subproductos
Aguas residuales
INGENIERA DE PROCESOS
Recoleccin, pretratamieto, ltracin
Reactores nuevos
Recuperacin de catalizadores/microorganismos
Extraccin de productos
Reciclado de aguas
Euentes
INTERFERONES Y ANTICUERPOS
MONOCLONALES
Diagnstico
Tratamiento
COMBUSTIBLES
Alchohol (azucr de caa)
Metano (digestores de biomasa)
Hidrgeno (fotolisis)
FIJACIN DE NITRGENO
Reduccin de uso de fertilizantes
N atmosfrico a amonaco
FERMENTADORES TRADICIONALES
Alcohol
Antibiticos
Sustancias qumicas
CULTIVOS DE CLULAS VEGETALES Y
PROTENAS UNICELULARES
Produccin de Biomasa
Sustancias qumicas: esteroide, alcaloides
Protenas
Tecnologa microbiana
tradicional:
" Fermentaciones alcohlicas
" Produccin de productos
farmacuticos , aditivos
alimentarios, enzimas y
sustancias qumicas
industriales
" Biorremediacin
Tecnologa microbiana con
organismos alterados
mediante procesos de
ingeniera gentica:
" Fabricacin de hormonas
" Moduladores del sistema
inmune
" Vacunas
El microorganismo es
modificado antes de
ingresar a la industria:
se altera genticamente
por mutacin o por
recombinacin
Microorganismos
industriales son
especialistas metablicos
capaces de producir
especficamente y con un
alto rendimiento,
metabolitos particulares
La fuente de todas las
cepas industriales es el
ambiente natural

Las cepas industriales
se depositan en
colecciones de cultivos
que sirven como
almacn
CEPAS INDUSTRIALES
1. Cultivo axnico
2. Estable
3. Fcil de inocular (esporas)
4. Crecimiento Rpido
5. Rpida produccin del compuesto deseado
6. Capaz de crecer en cultivo lquido y barato
Licor de maceracin de maz, suero
7. No txico ni patgeno
8. Fcil eliminacin de las clulas del medio:
Tamao de clula grande o formadores de agregados
celulares
9. Susceptibles de manipulacin gentica
PROPIEDADES DE LOS MICROORGANISMO
PRODUCTOS DE LA MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
Bioconversin
Producto
(bioconversin
de esteroides)
Sustrato
Productos de las Clulas
Enzimas
(Glucosa
Isomerasa)
Antibiticos
(Penicilina)
Aditivos
Alimenticios
(aminocidos)
Alcohol
Productos
Qumicos
(cido ctrico)
Clulas
Levadura
LA LEVADURA COMO PRODUCTO INDUSTRIAL
BIOCONVERSIN
Produccin de cortisona utilizando un microorganismo
CRECIMIENTO Y FORMACIN DE PRODUCTOS INDUSTRIALES
Sustrato para el
crecimiento
Clulas Metabolito
primario
Sustrato para el
crecimiento
Clulas

Metabolito
primario
Metabolito
secundario
Sustrato para el
crecimiento
Clulas

Metabolito
primario
Metabolito
Secundario
Especcos de un grupo de organismos
No esenciales para el crecimiento
Dependiente de las condiciones decrecimiento
Producidos como grupo de estructuras relacionadas:
" Una cepa de Streptomyces produce 32 antibiticos distintos
del tipo antraciclina
Puede obtenerse una superproduccin espectacular
CARACTERSTICAS DE LOS METABOLITOS
SECUNDARIOS
Staphylococcus
Penicilina
Cefalosporina
Tetraciclina
Estreptomicina
Griseofulvina
Actinomicina
Pepstatina
ciclosporina A
Krestina
Bestatina
Gibberelina
Antibitico
Antibitico
Antibitico
Antibitico
Antibitico (antifngico)
Antitumoral
Tratamientos antiulcerosos
Inmunosupresor
Tratamiento del cncer
Tratamiento del cncer
Regulador del crecimiento vegetal
Metabolito secundario Utilidad comercial
Metabolitos microbianos secundarios comercializados
Penicilina
Actinomicina
Neomicina
Estroptomicina
Candicidina
Estreptomicina
Tetraciclina
Penicilina
Glucosa
Glucosa
Glucosa
Glucosa
Fosfato
Fosfato
Fosfato
Fuentes de nitrgeno
Componente del medio Metabolito secudario reprimido
Represin del metabolismo secundario por componentes del medio
CLASIFICACIN DE LOS PRODUCTOS
INDUSTRIALES SEGN SU USO:
Productos farmacuticos de origen
microbiano
Biotecnologa microbiana en
agricultura
Sustancias qumicas y aditivos
alimentarios
Productos qumicos comerciales y
produccin de energa
Biorremediacin
PRODUCTOS FARMACUTICOS DE ORIGEN
MICROBIANO
! Antibiticos
! Hormonas esteroides
! Insulina
! Hormona del crecimiento
! Linfocinas
! Pptidos neuroactivos
! Factores de coagulacin sangunea
! Activador del plasmingeno tisular
! Vacunas
! Anticuerpos monoclonales para diagnstico y terapia
Productos farmacuticos
veterinarios de origen
microbiano
Inculos radiculares
Ingeniera gentica de plantas
mediada por
microorganismos como
portadores genticos
BIOTECNOLOGA MICROBIANA EN AGRICULTURA
SUSTANCIAS QUMICAS Y ADITIVOS
ALIMENTARIOS
Sustancias especiales y aditivos alimentarios:
Aminocidos:
" Glutamato: potenciar el sabor
" Aspartato+alanina: modular el sabor de jugos de frutas
" glicina: mejorar el sabor de alimentos dulces
" Aspartame: endulzar
" Lisina y metionina: aditivos nutrivos
" Cistena antioxidante de jugos de frurtas
" Triptofano + histidina: evita la rancidez de los alimentos
Vitaminas: rivoflavina, vitamina B
12
, vitamina C
PRODUCTOS QUMICOS COMERCIALES Y
PRODUCCIN DE ENERGA
Productos qumicos
comerciales de estructura
sencilla y bajo valor
monetarios

Etanol (combustible para
motores)
cido actico
cido lctico
Glicerol
CLASES DE PRODUCTOS INDUSTRIALES
Metabolitos
microbianos
Alcohol
cido actico
cido lctico
Aminocidos
Vitaminas
Antibiticos
Esteroides
Alcaloides
Clulas microbianas
Protena unicelular:
levaduras, algas,
bacterias y hongos
Clulas para la
inoculacin:bacterias
fijadoras de nitrgeno,
micorrizas, inculos para
la fermentacin de
lcteos y embutidos
Enzimas
Digestin de
almidones,
lpidos y
protenas
Sntesis de
antibiticos
semisintticos
PRODUCCIN DE PRODUCTOS
DE MAMFEROS POR MICROORGANISMOS
MODIFICADOS POR INGENIERA GENTICA
Desarrollo de un proceso biotecnolgico:
Si el gen o los genes que codifican para la
produccin de una protena de mamfero se
pueden clonar dentro de un microorganismo
Si se obtiene una buena expresin de este gen
PRODUCTOS BIOTECNOLGICOS FABRICADOS
POR DNA RECOMBINANTE
Protenas de sangre para:
" Disolver cogulos
" Promover la coagulacin sangunea
" Desarrollar glbulos rojos
Hormonas para:
" Tratamiento de diabetes
" Regulacin del calcio
" Alivio del dolor
" Osteoporosis
" Diurticos y antihipertensivos
Moduladores inmunes:
" Estimulantes de las clulas T
" Activador de clulas B
" Agentes antivirales, anticancergenos,
antitumorales, antiinflamatorios
" Tratamiento de infecciones
Vacunas:
" Prevencin de infeccin
" Hepatitis B
" Sarampin
" Clera
" Rabia
" Sida (no en el mercado, slo en experimentacin)
Antcuerpos monoclonales:

" Protenas especficas que reconocen y se fijan a un
solo antgeno
" Tratamiento de cncer, deshacerse de sustancias
qumicas txicas de las clulas tumorales
" Tratamiento de enfermedades cardacas: destruir
cogulos de sangre catalizados por plaquetas
" Diagnstico clnico: embarazo y enfermedades
humanas y animales
No todos los productos estn en el mercado
PRINCIPALES PRODUCTOS

300,000
30,000
2000
1000

Corynebacterium glutamicum
Brevibacterium avum
Corynebacterium glutamicum
Brevibacterium avum


Aminoacidos
Acido glutamico
Lisina
Fenilalanina
arginina

250,000
50,000
50,000

Aspergillus niger
Aspergillus niger
Lactobacillus delbrueckii
Acidos organicos
Acido citrico
Acido gluconico
Acido lactico

500,000
50,000

Levaduras y bacterias lacticas
Candida utilis
Biomasa
Starters para alimentos
Proteina unicelular

20 millones
2000

Saccharomyces cerevisiae
Clostridium acetobutylicum
Solventes
Etanol
Acetona/butanol
PRODUCCION
(Ton/ao)
ORGANISMO

PRODUCTO

< 0.1 Corynebacterium diphteriae
Clostridium tetani
Bordetella pertussis
Virus atenuado crecido en rion de mono
o celulas diploides humanas
Idem anterior
Antigenos de supercie expresados en
levadura
Vacunas
Difteria
Tetanos
Pertussis
Polio

Rubola
Hepatitis B


5 Claviceps paspali

Alcaloides del ergot

10 Propionibacterium shermanii
Eremothecium ashbyii

Vitaminas
B12
Riboavina

600
500
500
500
100
50
50

Bacillus spp
Bacillus amyloliquefasciens
Aspergillus niger
Bacillus coagulans
Aspergillus niger
Mucor o levaduras recombinantes
Enzimas
Proteasas
Alfa-Amilasas
Glucoa-amilasa
Glucosa isomerasa
Pectinasa
Renina
otras
PRODUCCION
(Ton/ao)
ORGANISMO

PRODUCTO

< 0.1 Bacillus thuringiensis
Insecticidas
Esporas bacterianas

80,000
15,000
15,000
10,000
2,000
1,000


Penicillum chrysogenum
Cephalosporium acremonium
Streptomyces aureofaciens
Streptomyces erythreus
Bacillus brevis
Streptomyces griseus
Penicillum griseofulvum
Antibioticos
Penicilinas
Cefalosporinas
Tetraciclinas
Macrolidos (eritromicina)
Polipeptidicos (gramicidina)
Aminoglicosidos (estreptomicina)
Aromticos (griseofulvina)
< 0..01 Celulas de hibridoma Anticuerpos monoclonales

< 0.1 E. coli recombinante
E. coli recombinante o celulas de mamfero
recombinante
celulas de mamfero recombinante
celulas de mamfero recombinante
E. coli recombinante
Proteinas de uso teraputico
Insulina
Hormona de crecimiento
Eritropoyetina
FactorVIII-C
Activador del plasminogeno
Interferon alfa2


< 0.1 Lithospermum (plantas)
Levaduras
Pigmentos
Shikoninas
Beta-carotenos
PRODUCCION
(Ton/ao)
ORGANISMO

PRODUCTO



VENTAJAS DE LOS MICROORGANISMOS COMO UNIDADES DE PRODUCCIN


" Rpido crecimiento debido a la favorable relacin rea/ volumen
" Diversidad metablica
" Estabilidad gentica
" Crecimiento en gran escala y separacin fcil de productos y sustratos

* Adaptabilidad a distintos ambientes y condiciones de crecimiento (sustratos
slidos, lquidos, frascos, fermentadores)

Incrementar
la productividad
* Facilidad de manipulacin gentica
Modificar los productos finales

SELECCIN DE M.O. DE INTERS
INDUSTRIAL
Cepa genticamente estable
Velocidad de crecimiento alta
Libre de contaminantes: fagos
Requerimientos nutricionales: medios cultivos de costo
reducido
Fcil conservacin por largos perodos de tiempo
Proceso fermentativo en corto tiempo
Producto: alto rendimiento y fcil extraccin
LOS MICROORGANISMOS PUEDEN EMPLEARSE COMO :

Productores de metabolitos primarios y secundarios
Productores de biomasa y sus constituyentes (Protenas y
aminoacidos, Vitaminas, cidos Nucleicos, Polmeros de H de C y
esteres, Biomasa)
Huspedes para la expresin de genes homlogos y heterlogos
Unidades de Biotransformacin

Uso de microorganismos en
biotransformaciones

Reacciones Quimicas realizadas por microorganismos:
Oxidaciones
Reducciones
Reacciones hidrolticas
PORQU LOS METALES SON TXICOS?
Los mecanismos de toxicidad son el resultado de una fuerte
capacidad de coordinacin con los ligandos presentes en la
clula
Los compuestos catinicos se unen a grupos SH : Inhibicin
de enzimas
Pueden interferir con iones de importancia fisiolgica : Cd
2+ con Zn 2+ , Ni y Co con Fe, Zn con Mg
Oxianiones (cromato, arseniato) interferencia con sulfato y
fosfato
Efecto del arsnico sobre la salud humana
http://dermis.multimedica.de/doia/image.asp?zugr=d&lang=s&cd=43&nr=40&diagnr=757335
ACCIN DE LA ROXARSONA
Wershaw y col., 1999 ; Christen, 2001; Cortinas y col., 2006; Stolz y col., 2007
Reduccin de NO
2


cido 4-hidroxi-3-amino fenil
arsnico (HAPA)
Desaminacin

cido 4-hidroxifenil arsnico
Fisin del anillo
aromtico

Clivaje de enlace
C-As

Arsenito (As (III))
Arseniato (As (V))
Roxarsona

Roxarsona + Consorcio
bacteriano anaerbico

83.3% Degradacin
Longitud de onda nm
rea bajo la curva: 123.970 nm
rea bajo la curva: 21.910nm
DEGRADACIN DE ROXARSONA