Seminario de Microbiologa

Docente
Dr. Miguel Villegas
Integrantes
Alvarado Agurto, Tulio
Carrascal Samilln, Dora
Colina Yesqun, Genaro
Guerrero Ramrez, Cristhian
Primo Cabrejos, Luca
Grupo
03C


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Seminario N5

Paciente de sexo masculino de 18 aos, sin antecedentes de importancia
Hace 24 horas empieza a sentirse mal, decado, sin fuerzas, con dolor
muscular, falta de apetito y dolor de cabeza intenso y nota manchitas
moradas en todo el cuerpo que se unen.
Al examinarlo se observan mculas violceas en varias partes del cuerpo
pero sobretodo en manos y pies. Paciente est somnoliento, pero alerta al
llamado. No hay fiebre. Al poco tiempo de estar en la Emergencia el paciente
empeora: temperatura 38.9 C, aumento del nmero de las lesiones y se
evidencia rigidez de nuca.

1. Mencione las caractersticas morfolgicas del gnero Neisseria.

Las especies Neisseria son bacterias gram negativas aerobias de dimetro
comprendido entre 0,6-1m y que se disponen en parejas (diplococos) cuyos
lados adyacentes se aplanan para adoptar una morfologa semejante a la de
un gramo de caf. Las bacterias son inmviles y no forman endosporas.
Todas las especies son oxidasa-positiva y casi todas sintetizan catalasa;
propiedades que, junto a la morfologa de la tincin de Gram, hacen posible
la identificacin rpida de sospecha de una cepa clnica. Generan cidos por
oxidacin de carbohidratos (No por fermentacin).

2. Cules son las especies del gnero Neisseria qu son patgenas para el ser
humano?

El gnero Neisseria engloba 10 especies detectadas en el ser humano, dos de
las cuales son patgenas estrictas del ser humano:
a. Neisseria gonorrhoeae
Sus factores de virulencia son la Pilina, protena I, II y III, protenas
que se unen a transferrina, protenas que se unen a hemoglobina,
LOS, proteasa de IgA1 y la B-lactamasa.
b. Neisseria meningitidis
El principal factor de virulencia es el polisacrido de la capsula.











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3. Explique la funcin de las estructuras de superficie de la bacteria.

Las estructuras de la superficie son:
a. Pilina
Permiten adhesin inicial a las clulas humanas no ciliadas
b. Protena POR (Protena I)
Permite la supervivencia intracelular, al evadir la fusin de los
fagolisosomas en los neutrfilos
c. Protena OPA (Protena II)
Permite la adhesin firme a las clulas eucariotas
d. Protena RMP (Protena III)
Permite la proteccin de los antgenos frente a los anticuerpos
bactericidas
e. Protenas que se unen a Transferrina
Permiten la adquisicin de Hierro para el metabolismo bacteriano
f. Protenas que se unen Lactoferrina
Permiten la adquisicin de Hierro para el metabolismo bacteriano
g. Protenas que se unen a la Hemoglobina
Permiten la adquisicin de Hierro para el metabolismo bacteriano
h. Lipooligosacrido (LOS)
De actividad endotxica
i. Proteasas de IgA1
Permite la destruccin de la Inmunoglobulina A1
j. Beta Lactamasa
Permite la hidrolizacin del anillo beta lactmico de la penicilina

4. Cules son las caractersticas del crecimiento de Neisseria y en qu
medio de cultivo se desarrollan?

La temperatura adecuada para el crecimiento de este microorganismo oscila
entre los 35C a 37C; se debe evitar la desecacin y presencia de cidos
grasos; requerimientos de cistina y una fuente de energa; se debe aadir
aminocidos, purinas, pirimidinas, vitaminas y almidn soluble, este ltimo
inhibe el efecto txico de los cidos grasos; y por ltimo un requerimiento de
presencia de dixido de carbono al 5%.
Se pueden desarrollar tanto en medios selectivos (Medio de Thayer Martin
modificado), ya que inhiben los microorganismos contaminantes; como en
medios no selectivos (Agar Chocolate), ya que algunas cepas de la Neisseria
son inhibidas por la Vancomicina presente en los medios selectivos





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5. Cul es el reservorio y la puerta de entrada de N. meningitidis?

La transmisin de N. meningitidis se realiza por contacto de persona a
persona, o por la inhalacin de gotas respiratorias que contienen
meningococos.1, 2, 7 Al no sobrevivir en el ambiente y no tener un reservorio
en animales, el hombre constituye su nica posibilidad de sobrevivir y
propagarse. El contacto es usualmente con un enfermo o un portador
asintomtico que aloja a la bacteria en la nasofaringe y que la transmite por
gotas respiratorias o secreciones orales. Neisseria meningitidis es susceptible
a cambios de temperatura y a la desecacin y, por lo tanto, la infeccin no se
transmite por fmites. Los actos de toser o estornudar contribuyen al
mecanismo de transmisin,1,2 por lo que no resulta sorpresivo que la tasa
de colonizacin puede ser mayor a 50% en escuelas, internados, o en
cuarteles militares, especialmente durante periodos asociados a un
incremento en infecciones virales del tracto respiratorio superior.

6. Cul es la prueba de laboratorio que se emplea para identificar a N.
meningitidis? Qu muestras deben recolectarse?
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Directos a. Muestras LCR hemocultivo b. Cultivos- poner el
microorganismo en un medio mixto se puede identificar mediante la tincin
Gram y la prueba de oxidasa. c. Frotis- la tincin de Gram con el lquido
cefalorraqudeo centrifugado o en material aspirado de las petequias. d.
Serologa- Los anticuerpos a polisacridos meningococos pueden medirse
mediante pruebas de aglutacion con perlitas de ltex o hemoaglutinacin o
por su activacin bacteriana.


















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7. Cules son las enfermedades causadas por N. gonorrhoeae?

Las enfermedades ms comunes que causa son:
a. Gonorrea
Caracterizada por secrecin purulenta en la localizacin afectada
(p.ej; uretra, cuello del tero, epiddimo, prstata, ano) tras un
periodo de incubacin de 2-5dias.
b. Gonococemia
Es una enfermedad de transmisin sexual causada por la bacteria
Neisseria gonorrhoeae, la cual se disemina desde el sitio inicial de
infeccin a travs del torrente sanguneo hacia otros rganos del
cuerpo.
c. Infecciones diseminadas
Diseminacin de la infeccin desde el aparato urinario a travs de la
sangre hasta la piel o las articulaciones; se caracteriza por exantema
pustular con base eritematosa y artritis supurativa en las
articulaciones afectadas.
d. Oftalmia neonatal
Infeccin ocular purulenta adquirida por el neonato durante el
nacimiento.

8. Cules son los exmenes de laboratorio que se utilizan para identificar a
N. gonorrhoeae?

Los exmenes a realizar son:
a. Directo
Tincin de Gram en muestras uretrales es precisa solo en hombre,
nuevos mtodos de diagnstico rpido (inmunofluorescencia directa
con anticuerpos monoclonales, ELISA, sondas de ADN y PCR).
b. Cultivo y aislamiento
En medios selectivos como agar de chocolate y otros medios de cultivo
enriquecido con un atmosfera con dixido de carbono al 5%.
c. Identificacin
Pruebas bioqumicas o tcnicas serolgicas (IF directa, ELISA,
coaglutinacin).






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Seminario N6
Paciente de 26 aos, sexo masculino. Acude a consulta porque ha tenido
nuseas y vmitos, a lo que se aade diarrea acuosa no sanguinolenta, que
inici de forma gradual y que ha ido empeorando. Nota un aumento de
temperatura y dolor de cabeza intenso, adems de mialgias. Hace 2 das
acudi a una reunin y comi pollo a la brasa con ensaladas y aderezo
(mayonesa)
Al examen fsico: Paciente adelgazado. Temperatura: 39 C, frecuencia
cardiaca (FC): 84/min, frecuencia respiratoria (FR): 20/min. Deposiciones
sin sangre y sin moco.

1. Seale agentes bacterianos ms frecuentes que causan diarrea.

Los agentes bacterianos ms frecuentes son:
a. Gastroenteritis bacteriana:
Es una inflamacin del estmago e intestinos causada por bacterias.
b. Escherichia coli:
La Escherichia coli est dividida por sus propiedades virulentas,
pudiendo causar diarrea en humanos y otros animales. Otras cepas
causan diarreas hemorrgicas por virtud de su agresividad,
patogenicidad y toxicidad.
c. Campylobacter jejuni
Provoca infecciones intestinales usualmente de origen zoontico. El
cuadro clnico se manifiesta por una diarrea aguda, que puede o no ir
acompaada de vmitos, dolor abdominal, dolor de cabeza y malestar
general. El perodo de incubacin es de 1 a 10 das, el cuadro clnico
es autolimitado y dura entre 2 a 5 das.
d. Salmonela Shigella
Produce salmonelosis con un perido de incubacin de entre 5 horas
y 5 das, diarrea y dolor abdominal. A travs de las heces (excremento)
del enfermo se elimina un gran nmero de esta bacteria y se observa
fiebre entrica con un periodo de incubacin de 7 a 28 das, causante
de dolor de cabeza, fiebre, dolor abdominal y diarrea, erupcin
mculo-papulosa en pecho y espalda. Los enfermos presentan un
perodo de convalecencia entre 1 y 8 semanas y las personas curadas
eliminan Salmonella. Tambin puede ocasionar fiebres entricas o
infeccin intestinal por intoxicacin con algunos alimentos.
e. Yersinia.
La yersiniosis es la enfermedad infecciosa causada por las Yersinia,
comnmente por Y. enterocolitica, y frecuente en nios. La infeccin
rara vez causa sntomas en adultos, en nios pueden causar fiebre,
dolor abdominal y diarrea, a veces hemorrgica.


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2. Cules son las caractersticas morfolgicas y fisiolgicas de las
enterobacterias?

Las caractersticas morfolgicas son:
Las enterobacterias de la familia Enterobacteriaceae son bacilos
gramnegativos comnmente mviles mediante flagelos pertricos a
excepcin hecha del gnero Klebsiella y Shigella que son siempre
inmviles. Poseen pili comunes. Son organismos no esporulados y no
capsulados a excepcin de las especies del gnero Klepsiella, que si
son capsuladas, y de E. coli que puede adquirir la cpsula.
Las caractersticas fisiolgicas son:
La familia enterobacteriaceae son organismos quimiorgantrofos,
anaerobios facultativos de metabolismo fermentativo y no exigentes
nutricionalmente, creciendo en medios de cultivos ordinarios. Son
catalasa y nitrasa positivos y oxidasa negativos.

3. Cules son los factores de virulencia de las enterobacterias? Qu efecto
producen en el humano?

Los factores de virulencia son
a. Adherencia a clulas intestinales y a clulas cultivadas
b. Capacidad de INAVADIR y REPRODUCIRSE del citoplasma, destruyendo
a la clula hospedera.
c. Elaborar Citotoxinas
d. Poros en las cilias del intestino delgado
e. Pilis pequeos
f. Flagelos
g. Siderforos
Muchas de estas bacterias son patgenas y causa de infeccin oportunista,
otras son descomponedoras que viven en la materia orgnica muerta o viven
en el ser humano como parte de una poblacin microbiana normal. Algunas
enterobacterias patgenas causan principalmente infeccin del tracto
urinario y del tracto respiratorio.

4. Cul es el reservorio y mecanismo de transmisin de Salmonella?

El mecanismo de transmisin es por el consumo de alimentos
contaminados (aves, huevos y productos lcteos) y transmisin directa fecal-
oral en los nios. El principal reservorio de Salmonella son las aves de
corral, el ganado vacuno y el porcino; por lo tanto, son fuentes de infeccin
importantes las carnes de estos animales y los huevos. En el caso de S. typhi
y S. paratyphi son patgenos humanos estrictos.


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5. Enumere las especies de Salmonella que son nocivas para los humanos.
Qu enfermedades causan?

Las especies nocivas son:
a. Gastroenteritis
Forma ms frecuente de salmonelosis causada por Salmonella
Enteritidis.
b. Septicemia
Causada por todas las especies de salmonella, aunque las infecciones
por S. choleraesuis, S. paratyphi y S. typhi son las que mayor
frecuencia la producen.
c. Fiebre entrica o ms conocida por fiebre tifoidea
Causada por la S. typhi. Una forma leve de esta enfermedad, la fiebre
paratifoidea: se produce por S. paratyphi A, Salmonella schottmuelleri
(anteriormente conocida como S. paratyphi B) y Salmonella
hirschlfeldi (conocida antes como S. paratyphi C).
d. Colonizacin asintomtica
Las especies de Salmonella responsables de producir la fiebre tifoidea
y paratifoidea se mantienen por la colonizacin del ser humano.

6. Mencione los mtodos bacteriolgicos que se emplean para el aislamiento
de Salmonella

Los aislamientos de Salmonella se conservan:
a. En agar semislido: (caldo nutritivo adicionado de agar al 0,8%) en viales
de vidrio o de plstico, con cierre hermtico. La cepa se siembra por
puncin, se incuba a 37C durante 18-24 horas. Los viales se almacenan
a temperatura ambiente.
b. A - 70C en caldo-glicerol: La cepa se siembra en caldo tripticasa de soya
y se incuba a 37C durante 3 a 4 horas, a fin de que alcance la fase
logartmica de crecimiento. En criotubos se coloca 400 l de glicerol
estril y se agrega 1000 l del cultivo bacteriano. Se conserva en
congeladora a 70C. Para ser utilizada para distintos propsitos se
toma una porcin de la suspensin congelada con un palillo de madera y
se subcultiva en un medio slido o lquido.









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7. Enumere las especies de E. coli que son nocivas para los humanos.

Las especies nocivas son:
a. E. coli enterotoxgena (ECET)
b. E. coli enteropatgena (ECEP)
c. E. coli enteroagregativa (ECEA)
d. E. coli enterohemorrgica (ECEH)
e. E. coli enteroinvasiva (ECEI).

8. Cmo actan las toxinas de E. coli enterotoxignica?

Coloniza el intestino delgado. Posee fimbrias que le permiten adherirse
fuertemente y suministrar la toxina al epitelio. Produce 2 toxinas, una
termolbil (TL) y otra termoestable (TE), o ambas a la vez.
Las toxinas actan al desencadenar el sistema adenilciclasa y aumentar la
secrecin de agua y electrlitos, pero sin producir lesin ni destruccin
celular. La toxina TL est relacionada de forma funcional, inmunolgica y
estructural con la toxina del clera.
LT es funcional y estructural mente semejante a la toxina del clera, esta
toxina est formada por una subunidad A y por cinco subunidades B
idnticas. Las subunidades B se unen a receptores iguales a la del clera,
as como a otras glucoprotenas de superficie en las clulas epiteliales del
intestino delgado. Despus de la endocitosis, la subunidad A de LT-I se
transloca por la membrana de a vacuola, la subunidad A tiene actividad
difosfato adenosina (ADP)-ribosiltransferasa e interacciona con una protena
de membrana (Gs) que regula adenil ciclasa. E l resultado es el aumento de
las concentraciones de monofosfato de adenosina cclico (AMPc), con un
incremento de la secrecin de cloro y disminucin de la absorcin de cloro y
sodio, que se manifiesta con diarrea acuosa. Tambin la toxina estimula la
secrecin prostaglandinas y citosinas inflamatorias.
La toxina ST est relacionada con ciertas cepas de E. coli de Yersinia. El
dao que produce es esencialmente funcional. La ST es una toxina pequea
y monomrica que se une al receptor de transmembrana de la guanilato
ciclasa, lo que provoca el aumento de las concentraciones guanosina
monofosfato ciclasa (GMPc) y la posterior hipersecrecin de lquidos.






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9. Explique el mecanismo por el que E. coli causa infeccin del tracto
urinario.

10. Cules son las especies de Shigella que causan infeccin en el ser
humano? Explique los factores de virulencia de esta bacteria.

De acuerdo con su antgeno O, el gnero se divide en cuatro grupos o
especies que, a su vez, abarcan 43 serotipos (42, de acuerdo a algunos
autores). La estructura antignica de Shigella se caracteriza por presentar
antgeno somtico O y pueden o no poseer antgeno K.
Cada serogrupo puede subdividirse en tipos, sobre la base de variantes del
antgeno O, y estos serotipos se designan mediante nmeros
arbigos. Shigella dysenteriae se puede dividir en 1, 2, 3, 4, 5 siendo el 1 el
ms patgeno. Todas las especies poseen una exotoxina, en mayor
cantidad Shigella dysenteriae 1. Se caracteriza porque produce accin
citotoxica, entetoxica y neurotoxica.
Factores de virulencia.
Shigella se adhiere a las clulas HeLa (lnea celular de cncer crvico-
uterino humano), provoca que estas lo internalicen en su citoplasma y
escapa del fagosoma para reproducirse en el citoplasma eucarionte.
Posteriormente, se disemina a clulas vecinas, sin entrar en contacto
con el medio extracelular.
Plsmido de virulencia. Este plsmido de 220 kb es esencial en el
proceso de invasin; las cepas que carecen de l son incapaces de
promover su internalizacin, y cuando es transferido
experimentalmente a otras especies, se obtienen cepas transformadas

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capaces de ingresar a las clulas HeLa. A este respecto, el plsmido de
virulencia es fundamental en las siguientes funciones bacterianas:
Produccin de adhesinas e invasinas.
Diseminacin intercelular de la bacteria.
Secrecin de diversos factores de virulencia.
La regin plasmdica que determina la entrada bacteriana a la clula
hospedadora codifica para la sntesis de las protenas Ipa
(Invasion Plasmid Antigens), de su chapern molecular IpgC y un
sistema de secrecin de las Ipa, conocido como Mxi-Spa
(Membrane excretion of Ipa and surface presentation of Ipa). Las
protenas IpaA, IpaB, IpaC e IpaD son indispensables para la
adherencia e invasin de Shigella; IpaD funciona como la adhesina
primaria, en tanto que IpaB e IpaC actan como invasinas, solamente
se detectan en el medio extracelular despus del contacto entre la
bacteria y la clula epitelial, y ambas conforman un complejo
extracelular que promueve la internalizacin bacteriana. Por lo que se
refiere al Mxi-Spa corresponde a un clsico sistema de secrecin
proteica tipo III y manifiesta su relevante funcin hasta que han
interactuado las superficies del bacilo y de la clula hospedera;
adems, incluye la participacin de IpgC, para estabilizar a IpaB e
impedir que sta interacte con IpaC en el citoplasma bacteriano, ya
que ello impedira el traslado y la exportacin de ambas molculas.