Universidad

Morelos POtCllCa
u










MANUAL
DE
PRCTICAS
DE
LABORATORI
O










Ingeniera en Biotecnologa
Microbiologa
FICHA TECNICA
Universidad i.:-:.' Politcnica

FICHA TCNICA
Ingeniera Gentica
Fecha: Junio 14 2011
Nombre del catedrtico: Rosaura Aparicio Fabre
Nombre de la prctica: Diluciones
Clave:

Nmero de prctica: 1 Duracin en horas: 3
Justificacin: En algunas situaciones en que las cantidades de sustancia necesarias para ver un
efecto son extremadamente pequeas (por ejemplo un frmaco para tratar una
enfermedad) y difcilmente se pueden pesar o medir en esas proporciones tan
pequeas. En esas situaciones es necesario recurrir a la preparacin de una
solucin de alta concentracin (o solucin de stock o solucin madre) y hacer
diluciones seriadas a partir de sta.
Objetivos/Resultados de
aprendizaje:
El alumno adquirir la habilidad de realizar diluciones seriadas a partir de una
solucin madre o "stock".
Laboratorio donde se desarrollo de la prctica:
Laboratorio de Biotecnologa
Actividades a desarrollar:
Desarrollar el protocolo adecuadamente para preparar diluciones seriadas
Cuantificar en el espectro la absorbancia de la soluciones obtenidas
Evidencia a generar en el desarrollo de la prctica:
Diluciones seriadas de solucin madre con colorante y solucin madre con glucosa.
COMPETENCIA
S
HABILIDADE
S
El alumno ser competente en el conocimiento y clculo de diluciones
seriadas
Obtendr diluciones
soluciones madre y lo
curva de absorbancia.
seriadas de diferentes
comprobar haciendo una









Elabor: Rosaura y Gabriel I Revis:

EQUIPO REQUERIDOS
NOMBRE ESPECIFICACIONES
espectrofotmetro
Temperatura ambiente

OTROS MATERIALES REQUERIDOS
(No suministrados por el Laboratorio)
CANTIDA
D
MATERIA
L
ESPECIFICACIONES

Agua tri destilada o inyectable
REACTIVOS REQUERIDOS
NOMBRE CANTIDAD S I R O
INTRODUCCION
La adecuada investigada por el alumno.
OBJETIVO
MATERIALES REQUERIDOS POR EQUIPO (Cristalera)
CANTIDAD MATERIAL ESPECIFICACIONES
20 Tubos de ensayo de vidrio 13x1.5
cm
Limpios
10 Tubos de ensayo de vidrio 10 x1.0
cm
Limpios
4 Pipetas de vidrio de 10 ml Graduadas
4 Pipetas de vidrio de 5 ml Graduadas
4 Pipetas de vidrio de 1 ml Graduadas
1 Celda de plstico para espectro

4 Perilla para pipeta de vidrio

4 Gradillas para tubos de ensayo Gradillas para los 2 tipos de tubos

Planteado por el alumno









Manejo y disposicin de los reactivos requeridos:
Manejo de residuos no peligrosos y peligroso y en qu tipo de recipiente ponerlo
En este espacio se pone la manera en que se manejan y la disposicin que se le dar a cada
uno de los desechos (qumicos y biolgicos) que se generen durante la prctica.
Nombre del reactivo Datos importantes de la ficha tcnica

Incendio: combate, derrame
Salud Ambiente
Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarn en el laboratorio.

Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarn en el laboratorio


Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarn en el laboratorio





________________ PROCEDIMIENTO O METODOLOGIA ______________

Procedimiento:

Caso 1
1 . Preparar la solucin madre o stock, pesando 20 mg de albmina y solubilizarla en 20 ml de agua. Esta se llamar solucin A
2. Hacer una dilucin 1:2 Tomar 2 ml de la solucin A + 2 ml de agua
Albmina 500 mg

n

Azul de Coomassie 100 mg

J


S: Riesgo a la Salud I: Riesgo de Incendio R: Riesgo de reactividad O:especificaciones
3. Mezclar muy bien.
4. Hacer dilucin 1:4 Tomar 2 ml de la dilucin 1:4 + 2 ml de agua
5. Mezclar muy bien.



Caso 2.
La solucin madre 0,1 M y se hacer diluciones 1/10 hasta 10
-9
M. La solucin madre la preparar el profesor, pedrsela
a l. Llenar la siguiente tabla.
tubo
1
concentracin
ml de H2O ml de solucin x dilucin
1 0.01M (10
-2
) 9 ml 1 ml solucin 0.1 M 1/10
2 0.001M (10
-3
)
1
9 ml
1
l
1 ml solucin 0.01M
1/100
3

9 ml 1 ml solucin 0.001M

4

5

6

7

tubo concentracin mlde H2O ml solucin x dilucin
1 0.5 mg/ml 2 ml
2 ml solucin madre (1 mg/ml)
1 ___________________ |
1/2
2 0.25 mg/ml 2 ml 2 ml de la solucin 0.5 mg/ml 1/4
3

1/8
4

1/16
5

1/32
6

1/64

Repetir este procedimiento, utilizando la dilucin inmediata anteriormente, hasta completar la siguiente tabla.
8



Leer la absorbancia de los tubos del caso 1 a una longitud de onda de 280 nm Leer la
absorbancia de los tubos del caso 2 a una longitud de onda de 595 nm Graficar los datos
obtenidos, concentracin/absorbancia. (hojas milimtricas).

REPORTE DE LA PRACTICA


EVIDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS DURANTE LA PRACTICA |
En este espacio se ponen las observaciones, graficas, clculos matemticos dibujos, datos,
esquemas, tabla de datos, etc. Que se generaron durante el desarrollo de la prctica.
DISCUSION


CONCLUSION


BIBLIOGRAFIA
Consultada por el maestro y por el alumno