Polycyclische Aromatische

MAK, 45.
Lieferung, 2008
Polycyclische Aromatische Kohlenwasserstoffe (PAH) 1
Polycyclische Aromatische
Kohlenwasserstoffe (PAH)
MAK-Wert
Spitzenbegrenzung
Hautresorption (2007) H
Sensibilisierende Wirkung
Fruchtschdigende Wirkung
Stoff Strukturformel Krebs- Keimzell-
erzeugende mutagene
Wirkung (2007) Wirkung (2007)
Kategorie Kategorie
Anthanthren 2
a)
Benzo[a]anthracen 2 3 A
Benzo[b]fluoranthen 2 3 B
Benzo[j]fluoranthen 2 3 B
Benzo[k]fluoranthen 2 3 B
Benzo[b]naphtho- 2 3 B
[2,1-d]thiophen
erzeugende mutagene
Kategorie Kategorie
Benzo[a]pyren 2 2
Chrysen 2
a)
Cyclopenta[cd]pyren 2 3 B
Dibenzo[a,h]anthracen 2 3 A
Dibenzo[a,e]pyren 2 3 B
Dibenzo[a,h]pyren 2 3 B
Dibenzo[a,i]pyren 2 3 B
2 Polycyclische Aromatische Kohlenwasserstoffe (PAH)
Chemische Bezeichnung siehe Tab. 1
CAS-Nr. siehe Tab. 1
Summenformel siehe Tab. 1
Synonyma siehe Tab. 2
Molmasse siehe Tab. 1
Schmelzpunkt siehe Tab. 1
Siedepunkt bei hPa siehe Tab. 1
Dampfdruck bei 20C siehe Tab. 1
log K
OW
siehe Tab. 1
MAK, 45. Lieferung, 2008
erzeugende mutagene
Kategorie Kategorie
Dibenzo[a,l]pyren 2 3 B
Indeno[1,2,3-cd]pyren 2
a)
1-Methylpyren 2
a)
Naphthalin 2 3 B
Phenanthren
b)
b)
Pyren
b)
b)
a)
keine Einstufung wegen fehlender Daten,
b)
keine Einstufung aufgrund der vorliegenden
Daten
Wesentliche Grundlage dieser Begrndung sind die Monographie zu ausgewhlten
polycyclischen aromatischen Kohlenwasserstoffen des International Programme on
Chemical Safety (WHO 1998) sowie Auszge aus den Beitrgen zum Forschungsbe-
richt Polycyclische Aromatische Kohlenwasserstoffe (PAH) (DFG 2004) der Ad-hoc-
Arbeitsgruppe PAH der Kommission. Die aus WHO (1998) entnommenen Tabellen
mit Einzeldaten wurden aus Grnden der bersichtlichkeit in einem Anhang zusam-
mengestellt. Die physiko-chemischen Daten der Verbindungen sind in Tabelle 1 aufge-
fhrt, die IUPAC-Namen und Synonyma in Tabelle 2.
Benz[a]anthracen bezeichnet den mit der IUPAC-Nomenklatur 1979 bereinstimmen-
den Namen fr diese Verbindung. In der Verffentlichung der IUPAC-Nomenklatur aus
dem Jahr 1993 wird bei der Bezeichnung Benz die Einfgung eines o vor der fol-
genden Klammer verfgt, wenn in dieser Klammer ein Vokal steht. In der IUPAC-
Nomenklatur aus dem Jahr 1993 wird allerdings auch die Ersetzung des Namens
Benz[a]anthracen durch den Namen Tetraphen verfgt (Moss 1998). Dieser Vor-
schrift wird in dieser Begrndung nicht gefolgt, da Begrndungen unter den Verbin-
dungsnamen verffentlicht werden, die vor allem im arbeitsmedizinischen und toxiko-
logischen Bereich bekannt sind. Hiervon kann bei der Bezeichnung Tetraphen fr
Benzo[a]anthracen nicht ausgegangen werden.
In der IUPAC-Nomenklatur aus dem Jahr 1993 wird allerdings das Ersetzen des
Namens Benzo[a]pyren durch den Namen Benzo[pqr]tetraphen verfgt. In einer
Anmerkung wird mitgeteilt, dass die CAS dem nicht folgt, sondern als Ausnahme wei-
terhin als Bezeichnung Benzo[a]pyren verwendet (Moss 1998). Da die Verbindung
unter dem Namen Benzo[a]pyren vor allem im arbeitsmedizinischen und toxikologi-
schen Bereich bekannt ist, wird in bereinstimmung mit CAS (Chemical Abstracts
Service) der Vorgabe von IUPAC nicht gefolgt.
1 Allgemeiner Wirkungscharakter
Polycyclische aromatische Kohlenwasserstoffe (PAH) werden aufgrund ihrer krebser-
regenden Wirkung als eine in hohem Mae relevante Schadstoffklasse angesehen
(IARC 1973, 1983; WHO 1998). Nach Metabolisierung knnen PAH verschiedene
toxische Wirkungen zeigen. Zur Wirkung einzelner PAH und Metaboliten liegen
umfangreiche und ausfhrliche bersichten (WHO 1998) und Untersuchungen (DFG
2004) vor. Bei Naphthalin ist auf die Begndung 1995 und den Nachtrag 2001 hinzu-
weisen. Die krebserregende Wirkung einzelner PAH ist durch Tierversuche in unter-
schiedlichen Expositionsmodellen eindeutig nachgewiesen (IARC 1973; WHO 1998).
In zahlreichen tierexperimentellen Studien werden mit PAH genotoxische Wirkungen
beobachtet, die auch in Humanzellen in Kultur und in vivo gefunden werden (WHO
1998; Glatt 2005).
Fr den Menschen stellen die Inhalation von PAH-belasteter Atemluft und die Auf-
nahme von PAH-kontaminierten Nahrungsmitteln die Hauptquellen der PAH-Exposi-
tion dar. Extrem hohe lokale Expositionen finden sich an bestimmten Arbeitspltzen
wie in Kokereien, in Teerverarbeitungsbetrieben, im Untertagebergbau etc., wo auch
eine Belastung durch Hautkontakt eine wesentliche Rolle spielen kann. Die gute Haut-
penetration von einzelnen PAH ist beim Menschen und im Tierversuch gezeigt. Es gibt
keinen Grund anzunehmen, dass sich das Penetrationsverhalten der nicht untersuchten
PAH wesentlich davon unterscheidet.
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Tab. 2. IUPAC-Bezeichnung und Synonyma der PAH (Quellen: NIST (2007); *: DIMDI Datenbank
ChemIDplus)
Verbindung IUPAC-Name Synonyma
Anthanthren Dibenzo[def,mno]chrysene Dibenzo[cd,jk]pyren
Benzo[a]anthracen Benzo[a]anthracene 1,2-Benzanthracen
1,2-Benzanthren
2,3-Benzphenanthren
Benzo[b]phenanthren
2,3-Benzophenanthren
Tetraphen
Naphthanthracen
Benzo[b]fluoranthen Benz[e]acephenanthrylene 3,4-Benz[e]acephenanthrylen
Benzo[e]fluoranthen
2,3-Benzofluoranthen
Benzo[j]fluoranthen Benzo[j]fluoranthene 7,8-Benzfluoranthen
Benzo[l]fluoranthen
Dibenzo[a,jk]fluoren
Benzo-12,13-fluoranthen
Benzo[k]fluoranthen Benzo[k]fluoranthene 11,12-Benzofluoranthen
2,3: 1,8-Binaphthylen
Dibenzo[b,jk]fluoren
Benzo[b]naphtho- Benzo[b]naphtho- 11-Thiabenzo[a]fluoren
[2,1-d]thiophen* [2,1-d]thiophene 1,2-Benzo-9-thiofluoren
Benzo[a]dibenzothiophen
Naphtho[1,2-b]thianaphthen
Naphtho[1,2-d]benzothiophen
9 Thia-1,2-benzofluoren
Benzo[a]pyren Benzo[a]pyrene Benzo[def]chrysen
3,4-Benzopyren
6,7-Benzopyren
1,2-Benzopyren
4,5-Benzopyren
Chrysen Chrysene Benzo[a]phenanthren
1,2-Benzophenanthren
1,2,5,6-Dibenzonaphthalen
Cyclopenta[cd]pyren Cyclopenta[cd]pyrene Acepyren
Acepyrylen
Cyclopentenopyren
Dibenzo[a,h]anthracen Dibenzo[a,h]anthracene 1,2: 5,6-Benz[a]anthracen
1,2: 5,6-Benzanthracen
1,2,5,6-Dibenzoanthracen
Dibenzo[a,l]pyren Dibenzo[def,p]chrysene 2,3: 4,5-Dibenzopyren
3,4: 8,9-Dibenzopyren
4,5,6,7-Dibenzopyren
2 Wirkungsmechanismus
PAH sind relativ reaktionstrge hydrophobe Verbindungen, die im Stoffwechsel von
Sugern in hochreaktive (+)-anti, ()-anti, (+)-syn und ()-syn-Dihydrodiolepoxide
umgewandelt werden knnen. Diese Diolepoxide reagieren mit Doppelstrang- und
Einzelstrang-DNA, vorzugsweise mit der N
6
-Position des Guanins und der N
2
-Positi-
on des Adenins, wobei fr jedes syn- und anti-Enantiomer jeweils cis- und trans-
Addukte gebildet werden (Jerina et al. 1991; Scicchitano 2005). Entsprechend ihrer
Reaktionsfhigkeit und Struktur knnen aktivierte PAH auch weitere Addukte bilden.
Am Beispiel der DNA-Addukte von anti-Dihydrodiolepoxiden wurde nachgewiesen,
dass mit der kovalenten Verknpfung bestimmte Konformationsnderungen der DNA
verbunden sind. So kann der aromatische Ligand in der kleinen DNA-Furche zu liegen
kommen, ohne grere Konformationsnderungen zu induzieren, er kann sich auf eine
Weise zwischen Basenpaare schieben (interkalieren), dass die Doppelhelix nur gedehnt
wird, oder er kann sich zwischen Basenpaare drngen, so dass deren Wasserstoff-
brckenbindungen zerbrechen und einzelne DNA-Basen aus der doppelhelikalen
Struktur in den Helix-Auenbereich verlagert werden (Geacintov et al. 1997).
Es sind zahlreiche PAH auf tumorigene Wirkung untersucht worden. Man hat beob-
achtet, dass Verbindungen, die aufgrund eines angulren Benzolrings eine Einbuchtung
zeigen, eine Bay-Region, starke Kanzerogene sind, bertroffen allerdings von Ver-
bindungen mit einer Fjord-Region. Verstndlicherweise beeinflussen die Struktur-
eigentmlichkeiten der PAH sowohl deren metabolische Aktivierung als auch die Ste-
reochemie nach DNA-Bindung.
Schlssige Struktur-Wirkungsgesetzmigkeiten, aus denen sich die kanzerogene Wir-
kungsstrke ableiten liee, gibt es nicht. Die Bindungshufigkeit (Modifikationsdich-
te) allein ist fr die tumorigene Wirkung ein nur grober Mastab. Von grerem Ein-
Tab. 2. Fortsetzung
Verbindung IUPAC-Name Synonyma
Dibenzo[a,e]pyren Naphtho[1,2,3,4-def]chrysene 1,2: 4,5-Dibenzopyren
Dibenzo[a,h]pyren Dibenzo[b,def]chrysene 3,4: 8,9-Dibenzpyren
Dibenzo[a,i]pyren Benzo[rst]pentaphene Dibenzo[b,h]pyren
4,5,8,9-Dibenzopyren
Indeno[1,2,3-cd]pyren Indeno[1,2,3-cd]pyrene 1,10-(1,2-Phenylen)pyren
1,10-(o-Phenylen)pyren
o-Phenylenpyren
2,3-(o-Phenylen)pyren
2,3-Phenylenpyren
Naphthalin Naphthalene
Phenanthren Phenanthrene Phenanthrin
Pyren Pyrene Benzo[def]phenanthren
*1-Methylpyren 1-Methylpyrene 3-Methylpyren
fluss dagegen ist die Art der DNA-Bindung, denn an ihr entscheidet sich, ob pro-
grammierter Zelltod eintritt oder DNA-Reparatur und ob letztere bezogen auf
den Zellzyklus gengend rasch abluft, ob bei der DNA-Replikation das DNA-Hin-
dernis berwunden werden kann und dies um den Preis welcher Replikationsfehler
(Chakravarti et al. 2000; Conney et al. 2001) und anderer mglicher Reaktionen. Ein
hufiger Befund sind Mutationen in den Onkogenen H-ras, K-ras und p53 (DeMarini
et al. 2001; Hecht et al. 1998; Noda et al. 2004; Ross und Nesnow 1999). Die biologi-
schen Folgen der zahlreichen DNA-Modifikationsarten sind nur schwer vorauszusehen
(Baird et al. 2005).
Hinzu kommen Gen-Aktivierungen durch PAH (Ma 2001). Gut untersucht ist die
Induktion Fremdstoff-abbauender Enzyme der Phase I (z. B. Cytochrom P4501A1,
1A2) und der Phase II (z. B. Glutathion-S-Transferase, UDP-Glucuronosyl-Trans-
ferase) (Kondraganti et al. 2005), die nicht nur die verstrkte (und aktivierende) Meta-
bolisierung der PAH nach sich ziehen, sondern auch den unphysiologischen Abbau
endogener Metaboliten katalysieren. berexpression, z. B. des Protoonkogens c-myc
(Fields et al. 2004), des Transferrinrezeptor-Gens (Kemp et al. 2006) sowie weiterer
Gene, ist beschrieben worden.
3 Toxikokinetik und Metabolismus
3.1 Aufnahme, Verteilung, Ausscheidung
Die Aufnahme von PAH erfolgt inhalativ, dermal und ber den Gastrointestinaltrakt.
Die Verteilung von PAH im Krper nach Applikation ist bei Nagern untersucht wor-
den. Die Gehalte, die in den unterschiedlichen Geweben bestimmt wurden, hngen
unter anderem von dem jeweiligen PAH ab, der Art der Applikation, dem Vehikel, dem
Zeitpunkt der Bestimmung in dem jeweiligen Gewebe nach der Applikation und der
An- oder Abwesenheit von Induktoren oder Inhibitoren des Kohlenwasserstoff-Meta-
bolismus im Organismus. Die Untersuchungen haben gezeigt, dass nach Exposition
PAH in jedem inneren Organ nachweisbar sind, dass fettreiche Gewebe ein Depot dar-
stellen knnen, aus denen die PAH wieder freigesetzt werden, und dass der Gastroin-
testinaltrakt besonders hohe Gehalte an Kohlenwasserstoffen und Metaboliten enthlt,
auch dann wenn ein anderer als der orale Applikationsweg gewhlt worden ist (WHO
1998).
Tierexperimente haben gezeigt, dass PAH rasch ber Blut und Lymphe vom Ort der
Applikation (Gastrointestinaltrakt, Lunge, Haut) in andere Gewebe transportiert wer-
den (Mitchell 1982). Dieses lsst sich auch daran erkennen, dass nach Applikation von
PAH auf die Nagetierhaut hohe Konzentrationen an DNA-Addukten in der Lunge
gefunden werden (Carmichael et al. 1990; Randerath et al. 1988; Schoket et al. 1988).
Die Hautresorption von PAH beim Menschen ist gut dokumentiert. In einer Feldstudie
wurde auf eine sehr hohe dermale Belastung von Kreosot-exponierten Arbeitern ge-
schlossen, da die tgliche Ausscheidung von 1-Hydroxypyren die tgliche inhalative
Aufnahme um den Faktor 50 berstieg (Elovaara et al. 1995). Anhand des 1-Hydroxy-
pyren wurde bei 12 Kokereiarbeitern nachgewiesen, dass im Durchschnitt 75% der
Gesamtaufnahme an Pyren ber die Haut erfolgt (Van Rooij et al. 1993 a). Die Haut-
kontamination bei Kreosot-exponierten Arbeitern konnte durch Tragen von Schutz-
kleidung um 35% reduziert und die 1-Hydroxypyren-Ausscheidung im Urin als Ma
der inneren Belastung dadurch um 50% reduziert werden (Van Rooij et al. 1993 b). An
Freiwilligen wurde gezeigt, dass nach epikutaner Applikation einer Kohlenteer-Salbe
die 1-Hydroxypyren-Ausscheidung im Urin erhht war. Es wurde abgeschtzt, dass
etwa 2 mg Pyren/cm
2
systemisch verfgbar war (Van Rooij et al. 1993 c). Die Hufig-
keit aromatischer DNA-Addukte war nach Applikation einer Kohlenteer-Salbe an
Ekzem-Patienten in Monozyten, Lymphozyten und Granulozyten etwa 2- bis 4fach
erhht, in der Haut 20fach. Die Ausscheidung von 3-Hydroxybenzo[a]pyren im Urin
korrelierte mit der Addukthufigkeit in der Haut (Godschalk et al. 1998). Nach topi-
scher Applikation einer 2%igen Lsung von Steinkohlenteer in Petroleum wurden
Phenanthren, Anthracen, Pyren und Fluoranthen im peripheren Blut nachgewiesen
(Storer et al. 1984). Freiwillige, die mit Kreosot (100 ml) oder Pyren (500 mg, aufge-
tragen in einer Toluol-Lsung) behandelt worden waren, und Psoriasis-Patienten, die
ein Steinkohlenteer enthaltendes Shampoo verwendeten, schieden im Urin 1-Hydroxy-
pyren als Konjugat aus. In beiden Fllen wurde die maximale Ausscheidung 10 bis 15
Stunden nach Behandlung beobachtet (Viau et al. 1995 a).
In vitro wurde an Affen-Vollhaut nachgewiesen, dass die Penetration von Acenaphthen,
Anthracen, Phenanthren, Fluoranthen, Naphthalin, Pyren und Fluoren aus Schmierl
geringer ist als aus Aceton und knstlichem Schwei. Fr Benzo[a]anthracen,
Benzo[b]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen und Benzo[a]pyren konnte nur aus Ace-
ton/knstlichem Schwei eine Resorption nachgewiesen werden (Sartorelli et al.
1999). In Durchflusszellen mit Humanhaut wurde die Penetration von radioaktiv mar-
kiertem Benzo[a]pyren bei bis zu 24-stndiger Exposition nachgewiesen. Quantitative
Angaben zur Hhe des Fluxes knnen der Arbeit nicht entnommen werden. Die
Behandlung der Haut mit zwei Hautschutzcremes verringerte die Resorption nicht, es
wurden sogar z. T. erhhte Resorptionsraten beobachtet (van der Bijl et al. 2002)
Die Ausscheidung von oral oder intraperitoneal applizierten PAH ist bei der Ratte nach
etwa 3 Tagen abgeschlossen (Aitio 1974; Grimmer et al. 1988 a, 1991 b; Jacob et al.
1989). Die Ausscheidung von 57% der verabreichten Pyrenmenge im Harn und von
18% in den Faeces von Ratten wurde innerhalb von 24 Stunden beobachtet (Viau et al.
1999), whrend fr diese Spezies Halbwertszeiten von 57 Stunden bestimmt wurden
(Bouchard et al. 1998).
Die bei der Metabolisierung der PAH gebildeten Phenole und Dihydrodiole werden im
Harn in Form der besser wasserlslichen Sulfate und Glucuronide nach einer durch
Sulfotransferasen katalysierten Konjugation mit Schwefelsure bzw. durch UDP-Glu-
curonosyltransferasen katalysierten Konjugation mit Glucuronsure ausgeschieden.
Zumindest fr Nagetiere konnte gezeigt werden, dass Arenoxide auch durch katalyti-
sche Wirkung der Glutathion-S-Transferase zu Glutathionkonjugaten umgesetzt wer-
den, die schlielich nach Abspaltung von zwei Aminosureresten (Glycin, Gluta-
minsure) und nachfolgender Acetylierung als Mercaptursuren (MCS) ausgeschieden
werden. Es ist offen, ob dieser Prozess, der einer der wesentlichen Eliminierungswege
beim Nager ist, fr den Menschen ebenfalls von Bedeutung ist. Grundstzlich kann
dieser Ausscheidungsweg nicht ausgeschlossen werden, da wasserlsliche Metaboliten
mit einem Molgewicht von <475 Dalton (Molgewichte fr MCS von Phenanthren,
Pyren und Benzo[a]pyren liegen bei 357, 381 bzw. 431 Dalton) vorzugsweise im Harn,
solche mit hheren Molgewichten dagegen mit den Faeces ausgeschieden werden (Nau
1994). Darber hinaus wurde die Ausscheidung anderer Mercaptoderivate von PAH-
Metaboliten wie Mercaptoessigsure, Mercaptomilchsure und Mercaptobrenztrau-
bensure im Harn von Nagetieren beschrieben (Horning et al. 1987). Es ist unklar, ob
diese auch beim Menschen gebildet werden.
Zigarettenraucher scheiden die inhalierten PAH innerhalb von 24 Stunden aus (Jacob
2007 a). Dieses wird auch durch eine Arbeit von Brzeznicki et al. (1997) fr eine PAH-
exponierte Versuchsgruppe eines Aluminiumwerkes besttigt (Halbwertszeit 9,8 Stun-
den). Bei freiwilligen Probanden wurde nach einer dermalen bzw. nahrungsbedingten
Aufnahme von Pyren eine Halbwertszeit von etwa 12 Stunden bestimmt (Viau et al.
1995 a), whrend in einer anderen Studie nach Verabreichung von Pyren mit der Nah-
rung eine Halbwertszeit von 4,4 Stunden gefunden wurde (Buckley und Lioy 1992).
3.2 Metabolismus
3.2.1 Enzyme und Biotransformationsreaktionen im Metabolismus von PAH
Cytochrome P450 (CYP) arbeiten berwiegend als Monooxygenasen, die eine Ep-
oxid-Gruppe (Tabelle 3, A) oder seltener direkt eine phenolische Hydroxyl-Grup-
pe in PAH einfhren knnen (Jerina 1983). Viele PAH-Epoxide reagieren spontan mit
Nukleophilen wie DNA, Wasser oder Glutathion, wobei DNA-Addukte, trans-Dihy-
drodiole bzw. Glutathionkonjugate entstehen. Alternativ knnen sie spontan zu Pheno-
len oder seltener zu den tautomeren Carbonyl-Verbindungen isomerisieren (Tabel-
le 3, B). In Abhngigkeit von der Struktur des Epoxides treten oft nur einige dieser
Reaktionswege auf, wobei die Verhltnisse in Anwesenheit von Enzymen wie Epoxid-
hydrolasen (EH) und Glutathiontransferasen (GST) erheblich verndert werden kn-
nen. Aus PAH mit aliphatischen Teilstrukturen oder Thiaarenen bilden CYP oft zudem
benzylische Alkohole (Engst et al. 1999) und S-Oxide (Jacob et al. 1991) in betrchtli-
chen Mengen. Eine bersicht zur Toxikologie der Thiaarene findet sich bei Jacob
(1990). Fr zwei Isomere des Benzo[b]naphthothiophen wurde bei Salmonella typhi-
murium eine positive Wirkung beobachtetet (Pool et al. 1989). Dagegen scheint die
N-Oxidation bei der Biotransformation von Azaarenen kaum eine Rolle zu spielen
(Schneider et al. 1994; Ye et al. 1995). Benzylische Alkohole, S-Oxide (Tabelle 3, C)
und N-Oxide (Tabelle 3, D) sind unter physiologischen Bedingungen wenig reaktiv.
Benzylische Alkohole knnen sowohl zu reaktiven Metaboliten (Schwefelsureestern)
als auch ausscheidungsfhigen Metaboliten (z. B. Carbonsuren und Glucuroniden)
weiter verstoffwechselt werden (Glatt et al. 2003; Ma et al. 2002; Watabe et al. 1982).
ber die Bedeutung der S- und N-Oxidation fr die weitere Umsetzung von PAH ist
nur wenig bekannt.
Cytochrome katalysieren hufig den ersten Biotransformationsschritt von PAH. Doch
ist es nicht ungewhnlich, dass weitere Monooxygenase-Reaktionen am gleichen
Molekl erfolgen. Toxikologisch bedeutsam ist insbesondere die Bildung von Dihy-
drodiol-Epoxiden an terminalen Benzo-Ringen (Jerina 1983; Thakker et al. 1985).
Zahlreiche CYP-Formen sind grundstzlich in der Lage, PAH zu metabolisieren (Jacob
et al. 1996 a). Doch sind Mitglieder der CYP1-Familie (CYP1B1, CYP1A1 und selte-
ner CYP1A2) weitaus aktiver als andere Formen; dies gilt insbesondere fr den ersten
Biotransformationsschritt eines PAH. Es ist bemerkenswert, dass die meisten einzelnen
CYP-Formen mehrere unterschiedliche Produkte aus einem PAH-Substrat bilden kn-
nen, wobei sich die Produktprofile zwischen verschiedenen CYP-Formen aber stark
unterscheiden knnen (Engst et al. 1999; Jacob et al. 1996 a).
CYP knnen an PAH nicht nur als Monooxygenase agieren, sondern auch als Ein-Elek-
tron-Oxidasen, wobei ein kurzlebiges Radikal-Kation entsteht (Cavalieri und Rogan
1995) (Tabelle 3, E). hnliche Reaktionen knnen durch zahlreiche Peroxidasen wie
Lipoxygenasen (Kulkarni 2002) und Prostaglandin-H-Synthasen (Degen et al. 2002)
vermittelt werden. Radikal-Kationen knnen mit der DNA reagieren, wobei die N
7
-
Tab. 3. Oxidativer Metabolismus von Aromaten
Substrat Enzym Produkt
A Cytochrom P450
B spontan
C Cytochrom P450
D Cytochrom P450
E Cytochrom P450
Cytochrom P450,
F
Myeloperoxidase,
Lipooxigenase,
Prostaglandin-H-Synthase
Position als Reaktionszentrum stark bevorzugt wird. Die resultierenden Addukte sind
instabil und hinterlassen nach Zerfall apurinische Stellen in der DNA. Alternativ kn-
nen ber Radikal-Kationen stabile Metaboliten, wie Phenole und Chinone, gebildet
werden. Zudem scheint es, dass Dihydrodiole nicht nur ber Monooxygenase-Reak-
tionen, sondern auch peroxidativ zu Dihydrodiol-Epoxiden umgewandelt werden kn-
nen (wie aus den resultierenden DNA-Addukten und den Tetraolen als Folgemetaboli-
ten abgeleitet werden kann), etwa durch Prostaglandin-H-Synthasen (Marnett et al.
1979), Lipoxygenasen (Hughes et al. 1989), Myeloperoxidase (Trush et al. 1991) und
eine Peroxidase aus der Plazenta (Madhavan und Naidu 2000) (Tabelle 3, F).
Epoxide knnen durch Epoxidhydrolasen zu trans-Dihydrodiolen hydrolysiert wer-
den (Abbildung 1, A) (Arand und Oesch 2002; Glatt et al. 1982; Jerina 1983). Fr
PAH-Epoxide scheint nur eine Form von Bedeutung zu sein, nmlich die Membran-
gebundene Form mEH (mikrosomale Epoxidhydrolase). Die Hydrolyse von Epoxiden
ist primr als eine Detoxifizierung zu verstehen, da Dihydrodiole viel weniger reaktiv
sind als Epoxide. Allerdings knnen in Folgereaktionen aus Dihydrodiolen hochpro-
blematische Produkte, wie Dihydrodiol-Epoxide (Abbildung 1, B) und ortho-Chinone
(Abbildung 1, C) gebildet werden. So fhrte eine Elimination der Ephx1-Gensequenz
(Knockout) dazu, dass die kanzerogene Wirkung des 7,12-Dimethylbenzo[a]anthra-
cen bei systemischer Applikation vollstndig und im Initiations-Promotions-Test auf
der Haut nahezu vollstndig aufgehoben wurde (Miyata et al. 1999).
Nach Einfhrung Sauerstoff-haltiger funktioneller Gruppen knnen verschiedene
Oxido-Reduktasen in die Biotransformation von PAH eingreifen. Zu erwhnen sind
insbesondere die Dihydrodiol-Dehydrogenasen (die zur Superfamilie der Aldo-Keto-
reduktasen gehren) (Glatt et al. 1979, 1982; Jez und Penning 2001; Oppermann und
Maser 2000; Penning 2004), die Carbonylreduktase (und andere Mitglieder der kurz-
kettigen Dehydrogenasen/Reduktasen, SHR) (Wermuth et al. 1986), die Chinonre-
Abb. 1. Bildung von Dihydrodiolen aus PAH via CYP-Oxidation zu Arenoxiden und nachfolgende
Hydrolyse durch mikrosomale Epoxidhydrolase, EPHX1 (A). Bildung von Chinonen (C)
aus Dihydrodiolen durch AKR (Aldo-Ketoreduktasen) sowie weitere CYP-Oxidation zu
Dihydrodiolepoxiden (B).
duktase (DT-Diaphorase, NQO1) (Chesis et al. 1984; Lind et al. 1982), die CYP-
Reduktase (Chesis et al. 1984; Hermersdrfer et al. 1997), und bei PAH mit Seiten-
ketten Alkoholdehydrogenasen (ADH) und Aldehyddehydrogenasen (ALDH)
(Ma et al. 2002). Dihydrodiol-Dehydrogenasen knnen trans-Dihydrodiole in Cate-
chole umsetzen, die leicht zu ortho-Chinonen autoxidieren (Penning 2004) (Abbildung
1, C). Die Chinonreduktase reduziert ortho-, para- und mehrkernige Chinone durch
Zwei-Elektronen-Transfer zu den entsprechenden Hydrochinonen (Abbildung 2), die
Abb. 2. Zwei-Elektronen-Reduktion von Chinonen zu Hydrochinonen durch NQO1 (Chinonreduk-
tase; DT-Diaphorase)
Abb. 3. Alkohol-Aldehyd-Gleichgewicht zwischen benzylischem Alkohol und Arylaldehyd sowie
dessen Weiteroxidation zur Arylcarbonsure durch ALDH (ADH=Alkoholdehydrogenase;
ALDH=Aldehyddehydrogenase).
Drei Klassen von konjugierenden Enzymen nehmen eine prominente Stellung bei der
Biotransformation von PAH ein, die Glutathiontransferasen (GST), UDP-Glucuro-
nosyl-transferasen (UGT) und Sulfotransferasen (SULT). GST setzen elektrophile
Substrate um, UGT und SULT greifen dagegen an nukleophilen Strukturen an (meis-
tens an Hydroxyl-Gruppen).
in der Regel gute Substrate fr Sulfotransferasen (Abbildung 6) und UDP-Glucurono-
syltransferasen (Abbildung 5) sind. Die regulre Funktion der CYP-Reduktase besteht
in der Aufnahme von zwei Elektronen aus NADPH und deren Weitergabe als einzelne
Elektronen auf CYP. Als Elektronenakzeptor knnen allerdings auch niedermolekula-
re Substanzen wie Chinone fungieren, die dann in Semichinone umgewandelt werden.
Diese knnen leicht mit Luft-Sauerstoff unter Bildung von Superoxid-Anionen wieder
zum Chinon autoxidieren. Alkoholdehydrogenasen knnen die Bioaktivierung von
benzylischen Alkoholen zu reaktiven Schwefelsure-Estern verhindern, indem sie die
Alkohole zu Aldehyden umwandeln (Ma et al. 2002). Allerdings ist das Alkohol-Alde-
hyd-Gleichgewicht in der Regel auf der Seite des Alkohols. Deswegen funktioniert
diese Inaktivierung nur, wenn der Aldehyd schnell weiter metabolisiert wird, wozu
Aldehyddehydrogenasen gut geeignet sind (Abbildung 3).
PAH-Epoxide knnen von zahlreichen GST-Formen umgesetzt werden (Dostal et al.
1988; Glatt et al. 1983; Seidel et al. 1998 b; Sundberg et al. 1997, 1998 a, b) (Abbil-
dung 4, A). Fr einige Dihydrodiol-Epoxide scheint die GST P1 besonders gnstige
kinetische Eigenschaften aufzuweisen (Seidel et al. 1998 b; Sundberg et al. 1998 a)
(Abbildung 4, B). berdies knnen GST auch Chinone umsetzen, wobei als Michael-
Additionsprodukte Hydrochinone mit ein oder mehreren C-stndigen Glutathionyl-
Resten entstehen (Monks und Lau 1998) (Abbildung 4, C). Einige dieser substituierten
Hydrochinone sind Oxidations-empfindlicher als die entsprechenden unsubstituierten
Hydrochinone (Monks und Lau 1998). Es sind keine Daten darber bekannt, welche
humanen GST-Formen PAH-Chinone besonders gut umsetzen. Als Substrate fr GST
knnen nicht nur elektrophile Phase-I-Metaboliten, sondern auch elektrophile Phase-
II-Metaboliten fungieren. So wurden einige polycyklische benzylische Schwefelsure-
Abb. 4. Konjugation elektrophiler Metaboliten wie Arenoxide (4A), Dihydrodiolepoxide (4B), Chi-
none (4C), und benzylischer Sulfatester (4D) mit Glutathion (GSH), katalysiert durch
Glutathion-S-transferasen (GST).
ester in der Ratte besonders gut durch die GST T2 inaktiviert (Hessel 2006; Hiratsuka
et al. 1994) (Abbildung 4, D); entsprechende Daten fr humane GST fehlen. Vor der
Ausscheidung werden Glutathionkonjugate in der Regel weiter prozessiert, besonders
hufig zu Mercaptursuren. Das Auftreten von Mercaptursuren in Harn oder Faeces
ist ein Biomarker fr die Bildung eines elektrophilen Metaboliten und dessen Detoxi-
Abb. 5. Konjugation nukleophiler PAH-Phenole (5A), Hydrochinone (5B), Dihydrodiole (5C), ben-
zylischer Alkohole (5D) und Arylcarbonsuren (5D) mit Glucuronsure, katalysiert durch
UDP-Glucuronosyl-transferasen (UGT)
fizierung. Unter dem Einsatz aufwendiger Analytik konnten Mercaptursuren, die aus
Dihydrodiol-Epoxiden, K-Region-Epoxiden und benzylischen Sulfaten gebildet wur-
den, im Harn von Menschen und Versuchstieren nachgewiesen werden (Boyland und
Sims 1962 a; Ma 2002; Upadhyaya et al. 2006; Yang et al. 1999).
Zu den PAH-Metaboliten, die glucuronidiert werden knnen, gehren Phenole, Hydro-
chinone, Dihydrodiole, benzylische Alkohole und Carbonsuren (Lind 1985; Ma et al.
2002; Nemoto und Gelboin 1976) (Abbildung 5 AE). Darunter befinden sich zwar
keine reaktiven Metaboliten, aber deren Vorstufen, die damit durch UGT sequestriert
werden knnen. Die resultierenden Glucuronide sind, soweit untersucht, wenig reaktiv
und gut ausscheidungsfhig. Damit stellt die Glucuronidierung im PAH-Metabolismus
durchgehend eine Inaktivierung dar, wenn man von der Mglichkeit einer Spaltung der
Konjugate durch bakterielle b-Glucuronidasen im Darmtrakt absieht; in diesem Falle
knnten Glucuronide als Transportformen von proximalen Kanzerogenen/Mutagenen
fungieren.
Differenzierter ist die Sulfat-Konjugation zu bewerten. Eine Sulfatierung von phenoli-
schen Hydroxyl-Gruppen (auch in Hydrochinonen) fhrt zur Bildung stabiler, aus-
scheidungsfhiger Sulfate (Nemoto et al. 1978) (Abbildung 6, AC). Dagegen stellt
Sulfat in einer benzylischen Position auf Grund der Resonanz-Stabilisierung des resul-
tierenden Kations eine gute Abgangsgruppe dar (Abbildung 6, D). In der Tat sind
Sulfoxymethyl-Metaboliten ultimale Mutagene/Kanzerogene einiger methylierter
PAH, wie etwa des 1-Methylpyren (Glatt 2000; Rogan et al. 1986; Surh et al. 1990 a;
Abb. 6. Sulfatkonjugation von Phenolen (6A), Hydrochinonen (6B), Dihydrodiolen (6C) und ben-
zylischen Alkoholen (6D) katalysiert durch Sulfotransferasen (SULT).
Watabe et al. 1982). Auch Dihydrodiole und Tetrole enthalten benzylische (und even-
tuell) allylische Hydroxyl-Gruppen. Durch Sulfokonjugation kann eine Abgangsgrup-
pe hnlich dem Oxiran-Sauerstoff generiert werden, so dass potenziell das gleiche
Kation, wie es aus den entsprechenden Epoxiden entsteht (Abbildung 6), auf Akzep-
tormolekle bertragen werden kann. Dass diese Reaktivierung tatschlich stattfindet,
wurde in vitro fr einige Dihydrodiole (Surh et al. 1993) und Tetrole (Glatt et al. 1998)
nachgewiesen, ihre praktische Relevanz in vivo ist aber unbekannt.
3.2.2 Reaktive PAH-Metaboliten und ihre Rolle bei der Kanzerogenese
PAH-Epoxide sind wichtige Intermediate bei der Biotransformation von PAH, knnen
jedoch untereinander stark in ihren chemischen und biochemischen Eigenschaften dif-
ferieren. Arenoxide an zentralen aromatischen Positionen (z. B. Benzo[a]pyren-1,2-
und -2,3-oxid) isomerisieren unmittelbar nach ihrer Bildung zu Phenolen (Yang et al.
1977). Damit ist das transiente Auftreten des Epoxides im Vergleich zu einer direkten
Hydroxylierung zwar fr den Mechanismus der Enzymreaktion von Interesse, aber
nicht fr die Toxikologie. Eine Epoxidierung an terminalen Benzoringen, etwa an den
7,8- oder 9,10-Positionen von Benzo[a]pyren, wirkt sich weniger drastisch auf das aro-
matische System aus, so dass die entsprechenden Arenoxide lngere Halbwertszeiten
aufweisen. Sie knnen mit DNAreagieren und zeigen in der Regel eine nachweisbare,
allerdings geringe mutagene Aktivitt. Ihre spontane Hydrolyse ist gegenber der Iso-
merisierung vernachlssigbar. In Gegenwart von mikrosomaler Epoxidhydrolase kann
jedoch die Hydrolyse zu Dihydrodiolen zum dominanten Weg werden (Shou et al.
1994). Bei einer dritten Gruppe findet die Epoxidierung an einer isolierten Doppelbin-
dung statt, die zwar mit dem aromatischen System konjugiert ist, aber schon weitge-
hend olefinischen Charakter hat. Beispiele sind Epoxide an Ethylen-berbrckungen
(z. B. Cyclopenta[cd]pyren-3,4-oxid) (Gold und Eisenstadt 1980; Wood et al. 1980)
und an terminalen Benzo-Ringen nach Sttigung der vicinalen Doppelbindung (z.B.
anti-Benzo[a]pyren-7,8-dihydrodiol-9,10-oxid) (Sims et al. 1974). Auch die Bildung
von Epoxiden an K-Regionen von PAH (z. B. Benzo[a]pyren-4,5-oxid) ist ein Beispiel
fr die Epoxidierung an elektronenreichen Positionen mit partiellem Doppelbindungs-
charakter (Oesch und Glatt 1976). Bei diesen Epoxiden dominiert die Reaktivitt
gegenber Nukleophilen; Isomerisierungsreaktionen treten nicht oder nur in geringem
Umfang auf. Diese Epoxide sind in der Regel starke Mutagene, sofern sie nicht meta-
bolisch inaktiviert werden. Bezglich metabolischer Inaktivierung knnen sie sich
allerdings stark voneinander unterscheiden. So ist Benzo[a]pyren-4,5-oxid in Salmo-
nella in Abwesenheit von Sugerenzymen ein potentes Mutagen, doch kann es durch
mikrosomale Epoxidhydrolase und viele verschiedene GST-Formen uerst effektiv
detoxifiziert werden. hnliches gilt fr das Benzo[a]anthracen-5,6-oxid (Glatt et al.
1982, 1983). Seine direkte Applikation an Nagetiere kann zwar zu einer Tumorbildung
fhren, aber nur bei lokaler Gabe einer relativ hohen Dosis, bei der die Detoxifizie-
rungssysteme berlastet werden (Flesher et al. 1976). Immerhin ist Benzo[a]pyren-4,5-
oxid hauptverantwortlich fr die DNA-Addukt-Bildung in Benzo[a]pyren-belasteten
Muscheln; diesen fehlen vermutlich effiziente Detoxifizierungssysteme. Anti-
Benzo[a]pyren-7,8-dihydrodiol-9,10-oxid und Cyclopenta[cd]pyren-3,4-oxid gelten
als wichtige ultimale Kanzerogene der betreffenden PAH. Mit diesen Epoxiden lassen
sich in Versuchstieren Tumoren viel leichter induzieren als mit Benzo[a]pyren-4,5-
oxid, was zu einem erheblichen Teil auf ihrer geringeren Detoxifizierung beruht. Vici-
nale Dihydrodiol-Epoxide sind je nach ihrer Stereochemie schlechte oder gar keine
Substrate fr mikrosomale Epoxidhydrolase, wobei offensichtlich die hydrophilen
Hydroxyl-Gruppen in der Nhe des Oxiran-Rings die Interaktion mit dem Enzym
beeintrchtigen (Glatt et al. 1982). Die Umsetzung von Dihydrodiol-Epoxiden durch
GST ist um mehrere Grenordnungen langsamer als jene von einfachen Arenoxiden
(Glatt et al. 1983).
Benzylische Sulfate treten als reaktive Intermediate insbesondere bei der Biotransfor-
mation von alkylierten PAH auf. Wie Epoxide lassen sie sich auch chemisch darstellen
und direkt auf toxikologische Wirkungen untersuchen. Benzylische Sulfate erwiesen
sich im Tierversuch als kanzerogen (Cavalieri et al. 1978; Flesher et al. 1998 a, b; Horn
et al. 1996; Surh et al. 1990 a). Mit der DNA reagieren sie in hnlicher Weise wie
Epoxide. Fr beide Substanzklassen sind die exozyklischen Amino-Gruppen der Pu-
rinbasen die bevorzugten Zielstrukturen, wobei stabile Addukte entstehen. Nach Gabe
von alkylierten Pyrenen, die im Tierversuch Tumoren induziert hatten (Rice et al.
1987), lieen sich in Geweben die gleichen DNA-Addukte, die auch durch die ent-
sprechenden Alkylsulfate gebildet werden, nachweisen (Glatt 2007 b). Vergleichbare
Daten liegen allerdings nur fr wenige alkylierte PAH vor. Beim 7,12-Dimethylben-
zo[a]anthracen scheinen Dihydrodiol-Epoxide und nicht Sulfatester die Kanzeroge-
nitt zu bestimmen (Surh et al. 1991).
Im Gegensatz zu Epoxiden liegen Sulfate unter physiologischen Bedingungen als
Anionen vor, was ihre Verteilung im Organismus einschrnkt. Sulfoxymethylpyrene
werden aktiv durch die organischen Anionentransporter OAT1 und OAT3 in Zellen
aufgenommen (Bakhiya et al. 2006). Diese Transporter werden vor allem in Nierentu-
buluszellen exprimiert, was vermutlich der Grund fr die besonders starke renale
DNA-Addukt-Bildung durch 1-Sulfooxymethylpyren sein drfte (Glatt et al. 2003).
Erwhnenswert ist zudem, dass normalerweise nur ein geringer Teil des 1-Hydroxy-
methylpyrens in der Ratte in vivo zum entsprechenden Schwefelsure-Ester aktiviert
wird. Die Hauptmenge wird durch Alkoholdehydrogenasen und Aldehyddehydroge-
nasen zur Carbonsure oxidiert. Wird dieser Weg jedoch blockiert, etwa durch die
Gabe von Ethanol, einem konkurrierenden Substrat der Alkoholdehydrogenasen und
Aldehyddehydrogenasen, schnellt die Addukt-Bildung dramatisch in die Hhe (zum
Teil ber 100-fach) (Ma et al. 2002).
PAH-Radikal-Kationen knnen in einer Ein-Elektron-Oxidation direkt aus den Koh-
lenwasserstoffen gebildet werden (Cavalieri und Rogan 1995). Sowohl in vitro als auch
in vivo kann dies zur Bildung von instabilen N
7
-PAH-Purin-Addukten fhren. Ver-
schiedene Reaktionsanstze in zellfreien Systemen waren so angelegt, dass die
Adduktbildung in der DNA erfolgt sein musste (da keine nennenswerten anderen
Purin-Ressourcen vorhanden waren). Durch die Bindung an der N
7
-Position wird die
glykosidische Bindung labil, was zur Freisetzung der modifizierten Base und der Ent-
stehung einer apurinischen Stelle in der DNAfhrt. Auch in Zellkultur und in vivo wer-
den diese Basen-Addukte gebildet, doch bleibt unklar, in welchem Ausmae sie an
DNA, RNA oder freien Nukleotiden entstehen. Es ist zu erwarten, dass die Radikale
vor allem im Zytoplasma und in der ueren Kernmembran entstehen und mit den
nchstliegenden Zielstrukturen reagieren. Zu bedenken ist ferner, dass apurinische
Stellen in der DNAin groer Zahl auch ohne Fremdstoffeinwirkungen entstehen, etwa
durch spontane Desaminierung von Cytosin-Resten zu Uracil-Resten (ca. 200 pro Tag
und Zelle) oder Fehlinkorporation von Desoxyuridin und nachfolgende Basen-Exzisi-
onsreparatur durch die Uracil-Glykosidase (Atamna et al. 2000) oder durch spontane
Depurinierung (ca. 9000 AP-Stellen, die pro Tag und Zelle infolge spontaner Desami-
nierung von Thymidin-Resten in der DNA gebildet werden) mit nachfolgender Repa-
ratur durch AP-Endonuklease 1 (Ape1) (Nakamura und Swenberg 1999). Unter diesen
Umstnden bleibt eine mgliche Rolle von PAH-Radikal-Kationen bei der PAH-Kan-
zerogenese unklar. 7,12-Dimethylbenzo[a]anthracen gehrt zu den PAH, die besonders
viele N
7
-Basen-Addukte bilden (Devanesan et al. 1993). Ein Knockout der Ephx1 soll-
te diese Radikalbildung nicht beeintrchtigen, hebt aber die kanzerogene Wirkung von
7,12-Dimethylbenzo[a]anthracen in der Maus auf (Miyata et al. 1999). Daraus kann
geschlossen werden, dass PAH-Radikal-Kationen allein nicht ausreichen, um Tumoren
zu induzieren.
Die biologische Aktivitt von PAH-Chinonen hngt stark vom verwendeten Modell
ab. In Bakterien zeigen sie keine oder nur eine geringe mutagene oder zytotoxische
Aktivitt (Chesis et al. 1984; Flowers-Geary et al. 1996; Wislocki et al. 1976; Wood
et al. 1977 b). Vermutlich beruht dies auf dem stark reduktiven Milieu in Bakterien-
zellen. Dagegen sind etliche PAH-Chinone in Sugerzellen in Kultur stark toxisch
und teilweise auch genotoxisch wobei je nach Substanz berwiegend chromosomale
Schden oder auch Genmutationen induziert werden (Flowers-Geary et al. 1996;
Ludewig et al. 1991). Die beteiligten Mechanismen sind heterogen. Einige Chinone
reagieren als Michael-Akzeptoren mit Nukleophilen. In anderen Fllen erfolgt die Bin-
dung an Makromolekle nach einer Ein-Elektron-Reduktion zum Semichinon. Hufig
beteiligt ist auch ein Redox-Zyklus mit Bildung von reaktivem Sauerstoff. Diese
Befunde sttzen sich fast ausschlielich auf Zellkultur-Modelle. Dagegen liegen nur
wenige Untersuchungen mit PAH-Chinonen in Versuchstieren vor; diese beschrnken
sich im Wesentlichen auf Benzo[a]pyren-Chinone (Joseph et al. 2000; Slaga et al. 1978
b). Dabei zeigte sich eine marginale Initiation von Papillomen in der Maushaut nach
lokaler Verabreichung. Vermutlich werden diese Chinone in vivo schnell und berwie-
gend zu Hydrochinonen reduziert und knnen als solche leicht konjugiert (Lilienblum
et al. 1985) und dann ausgeschieden werden (Ruzgyte et al. 2005). Postuliert wird ins-
besondere eine Rolle von ortho-Chinonen bei der PAH-Kanzerogenese (Palackal et al.
2002; Penning et al. 1999); allerdings fehlen hierzu sttzende In-vivo-Befunde. Einen
Sonderfall stellt das Naphthalin dar, das in Kanzerogenitts-Kategorie 2 eingestuft ist
(Nachtrag Naphthalin 2001). Zwar ist der Mechanismus seiner Kanzerogenitt nicht
geklrt, doch lassen sich in Versuchstieren in vivo Protein-Addukte des 1,2- und 1,4-
Naphthochinons (neben Addukten des Naphthalin-1,2-oxids) nachweisen (Troester
et al. 2002; Waidyanatha et al. 2002). Im Vergleich zu anderen PAH wird Naphthalin
relativ schnell metabolisiert.
PAH knnen berdies photoaktiviert werden. Unter anderem wurden als mutagene
Photoaktivierungsprodukte Epidioxide isoliert (Tu et al. 1979). Bei der humanen
Exposition gegen PAH drfte diesem Mechanismus keine wesentliche Bedeutung zu-
kommen.
Zusammenfassend ergibt sich, dass aus PAH zahlreiche verschiedene reaktive Produk-
te gebildet werden knnen. Ihre tatschliche Rolle bei kanzerogenen und anderen
adversen Effekten von PAH ist unterschiedlich gut belegt. berzeugend ist die Daten-
lage fr Epoxide. Bei rein aromatischen PAH mit Bay- oder Fjord-Region (z. B.
Benzo[a]pyren) und einzelnen methylierten Kongeneren (z. B. 7,12-Dimethyl-
benzo[a]anthracen) stellen insbesondere Dihydrodiol-Epoxide entscheidende ultimale
Kanzerogene dar. Vereinzelt drften auch einfache Epoxide, wie das Cyclopenta[cd]-
pyren-3,4-oxid, als ultimale Kanzerogene in Betracht kommen auch wenn nicht ganz
ausgeschlossen werden kann, dass eine weitere Aktivierung durch mikrosomale
Epoxidhydrolase und SULT erfolgt; zumindest ist eine derartige Reaktivierung in vitro
gut belegt (Glatt et al. 1994 b; Hsu et al. 1999; Surh et al. 1993). Bei einigen kanzero-
genen Alkylpyrenen kann eine SULT-abhngige Aktivierung als gesichert gelten; die
DNA-Addukte werden durch reaktive Sulfate gebildet, und die Sulfate erwiesen sich
als kanzerogen. Es ist zu erwarten, dass dieser Weg bei weiteren alkylierten PAH wich-
tig ist, doch fehlen Daten (zum Vorkommen von alkylierten PAH (siehe Abschnitt 6.2).
Es ist mglich, dass weitere reaktive Metaboliten, wie freie Radikale, Chinone und
Photoaktivierungsprodukte, an der Kanzerogenitt von PAH beteiligt sind; allerdings
beruht diese Vermutung ausschlielich auf In-vitro-Befunden oder wenig schlssigen
Endpunkten (N
7
-PAH-Purin-Addukte ungeklrter Herkunft). Belastbare In-vivo-
Befunde fehlen, abgesehen von Protein-Chinon-Addukten beim Naphthalin, das in
Kanzerogenitts-Kategorie 2 eingestuft ist (Nachtrag Naphthalin 2001). Andere In-
vivo-Befunde (Verlust der 7,12-Dimethylbenzo[a]anthracen-Kanzerogenitt bei
Ephx1-Knockout; Kanzerogenittsuntersuchungen mit mehrkernigen PAH-Chinonen)
sprechen eher gegen eine Rolle dieser Aktivierungswege in den verwendeten Model-
len; fr eine abschlieende Beurteilung ist die Datenlage aber noch unzureichend.
4 Erfahrungen beim Menschen
4.1 Einmalige Exposition
Hinweise auf eine perkutane Resorption von PAH beim Menschen liegen vor. Nach
topischer Applikation einer 2%igen Lsung von Steinkohlenteer in Petroleum wurden
Phenanthren, Anthracen, Pyren und Fluoranthen im peripheren Blut nachgewiesen
(Storer et al. 1984). Freiwillige, die mit Kreosot (100 ml) oder Pyren (500 mg, aufge-
tragen in einer Toluol-Lsung) behandelt worden waren, und Psoriasis-Patienten, die
ein Steinkohlenteer enthaltendes Shampoo verwendeten, schieden im Urin 1-Hydroxy-
pyren als Konjugate aus. In beiden Fllen wurde die maximale Ausscheidung 10 bis 15
Stunden nach der Behandlung beobachtet (Viau et al. 1995 a). Naphthalin, das in Kan-
zerogenitts-Kategorie 2 eingestuft ist (Nachtrag Naphthalin 2001), wird in Woh-
nungen oft als Mittel gegen Insekten verwendet. Nach oraler, dermaler oder inhalativer
Exposition stellt die akute hmolytische Anmie einen typischen systemischen Effekt
beim Menschen dar. Die lethalen oralen Dosen bei Vergiftungsfllen mit Naphthalin
werden mit 515 g fr Erwachsene und mit 2 g fr ein 6jhriges Kind angegeben
(Begrndung Naphthalin 1995). Zwischen 1949 und 1959 wurden in den USA zehn
Vergiftungsflle mit Naphthalin bei Kindern durch Mottenkugeln (Nuckeln oder Ver-
schlucken) beschrieben. Bei einigen der Kinder zeigte sich eine hmolytische Anmie
(Anziulewicz et al. 1959; Mackell et al. 1951; Zuelzer und Apt 1949).
Die Symptome, die nach Einnahme von Naphthalin auftraten, zeigten sich nach ein bis
mehreren Tagen in Form von belkeit, Erbrechen und Krmpfen. Oft folgte eine Diar-
rhoe. Andere Symptome waren Bewutseinsstrungen, Lethargie, Koordinations-
strungen, Koma und halbseitige Lhmung. Der gleichzeitig auftretenden hmolyti-
schen Anmie mit Hmoglobingehalten von bis zu 40% folgte hufig eine Hmoglo-
binurie. Mehr oder weniger stark ausgeprgte Gelbsucht konnte ebenfalls beobachtet
werden, in einem lethalen Fall auch Lebernekrose (Konar et al. 1939).
4.2 Wiederholte Exposition
Hmolytische Anmie nach Inhalation von Naphthalin wurde bei Neugeborenen
beobachtet, die in vorher mit Mottenkugeln behandelte Decken eingewickelt waren
und das sich verflchtigende Naphthalin inhalierten (Valaes et al. 1963). Bei fnf von
neun Arbeitern unter 40 Jahren, die ber fnf Jahre hohen Naphthalinkonzentrationen
in der Atemluft (k. w. A.) ausgesetzt waren, wurden Linsentrbungen beobachtet. Wei-
tere Berichte ber Cornea-Ulzerationen und Katarakte nach Exposition am Arbeits-
platz gegenber Naphthalin als Dampf oder Staub liegen von verschiedenen Autoren
vor. Um 1900 wurde Naphthalin bei Darmerkrankungen in Dosen von 3 bis 5 g pro
Tag verabreicht. Nach mehrtgiger Anwendung wurden Harnzwang mit heftigem
Brennen der Harnrhre sowie bei einigen Patienten eine Schwellung und Rtung der
ueren Harnrhrenmndung beobachtet. Darber hinaus sind auch zwei Flle trans-
plazentarer Naphthalinvergiftung beschrieben. Diffuse Linsenverschattungen nach
dermaler Aufnahme von Naphthalin wurden bei acht von zwanzig Arbeitern, die ein
Farbstoffzwischenprodukt herstellten, festgestellt. Bei zwei Arbeitern, die direkten
Umgang mit Naphthalin bzw. Naphthalinpuder (k. w. A.) hatten, wurde ber eine
Kataraktbildung an beiden Augen bzw. eine einseitige Chorioretinitis berichtet. Eine
inhalative Exposition konnte nicht ausgeschlossen werden (Begrndung Naphthalin
1995). Naphthalin wurde 2001 in Kanzerogenitts-Kategorie 2 eingestuft (Nachtrag
Naphthalin 2001).
Aus der groen Anzahl von Studien zur Belastung von Arbeitspltzen durch PAH wur-
den einige in Tabelle 4 zusammengestellt, die lediglich Benzo[a]pyren bercksichti-
gen. Aus der Tabelle wird ersichtlich, dass die Konzentrationen fr vergleichbare und
sogar fr identische Arbeitspltze sehr variabel sind; sie zeigt aber auch, dass durch
Modernisierungen von Industrieanlagen groe Fortschritte zur Verbesserung der
Arbeitsplatzsituation bezglich der PAH-Emission erzielt wurden. Dieses gilt insbe-
sondere fr Kokereibetriebe, fr die Maximalbelastungen von 5 mg Benzo[a]pyren/m
3
fr die Ofendecke bzw. 2 mg Benzo[a]pyren/m
3
fr andere Arbeitspltze in Deutsch-
land (BMA 1989) bzw. 0,15 mg Benzo[a]pyren/m
3
fr Betriebe zur Herstellung von
Kohleelektroden in Frankreich gesetzlich vorgeschrieben sind (Lafontaine et al. 1990).
Im Hinblick auf das Human-Biomonitoring muss allerdings betont werden, dass die
PAH-Profile nicht nur von einem Emittenten zum anderen, sondern auch zeitabhngig
fr bestimmte Arbeitspltze schwanken, so dass eine Extrapolation der Konzentratio-
nen fr Phenanthren und Pyren auf Basis der gemessenen Benzo[a]pyren-Konzentra-
tion nicht generell mglich ist. Die an verschiedenen Arbeitspltzen gemessenen PAH-
Profile (Herstellung von Graphitelektroden, Herstellung und Verarbeitung von Feuer-
festmaterial) weisen erheblich unterschiedliche relative Benzo[a]pyren-Gehalte mit
Schwankungen um den Faktor 5 auf (Preuss et al. 2006). Anhand des 1-Hydroxypyrens
wurde bei 12 Kokereiarbeitern nachgewiesen, dass im Durchschnitt 75% der Gesamt-
aufnahme an Pyren ber die Haut erfolgt (Van Rooij et al. 1993 a).
Tab. 4. Benzo[a]pyren-Konzentrationen an verschiedenen Arbeitspltzen
Arbeitsplatz Land Jahr Benzo[a]pyren Literatur
[mg/m
3
]
Kokerei
Ofendecke Polen 1978 20383 Braszczynska et al.
1978
modernisiert 06,8 Braszczynska et al.
1978
Ofendecke Schweden 1982 9,413,5 Lindstedt und
Sollenberg 1982
Fllwagenfahrer 4,717 Lindstedt und
Sollenberg 1982
Deckenmann Deutschland 1981 22,333,0 Blome 1981
Ofendecke Deutschland 2002 7,44 (Mittelwert) Strunk et al. 2002
Top side; Maschinist
Batterieseite Deutschland 2002 1,26 (Mittelwert) Strunk et al. 2002
Bench side; Maschinist
Ofenbereich Deutschland 2002 0,94 (Mittelwert) Strunk et al. 2002
Fllwagenfahrer 4,5 Blome 1981
Rampenarbeiter 1,33 Blome 1981
Fahrer 0,160,93 Blome 1981
Ofenplattform Deutschland 1992 10,615,8 Grimmer et al. 1993 b
Battery Topside
Fllwagenfahrer 5,810,1 Grimmer et al. 1993 b
Maschinist 0,94,9 Grimmer et al. 1993 b
Employee farther from
the centre of emission
Batterieseite, Ofendecke, Deutschland Zeitraum 0,62 (Median) Preuss et al. 2003 c
Reparaturarbeiten an der drei Jahre 5,05
Brennkammerwand (90. Perzentil)
Verschiedene Arbeitspltze
Aluminiumwerke Norwegen 1978 11,3854 Bjrseth et al.
(Soederberg-Technik) 1978 a, b
Kupfer-, Messing- Deutschland 1983 <0,050,1 Blome 1983
und Zinkgieerei
Stahlgieerei 0,3857,5*
Kanada 1982 Coenen 1988
Deutschland 1982 Verma et al. 1982
1983 Blome 1983
1986 Knecht et al. 1986
Finnland 1981 Schimberg 1981
Leichtmetallgieerei Deutschland 1983 0,050,26 Blome 1983
Straenbau
unter Verwendung von Deutschland 1989 0,722,0 Knecht und Woitowitz
Carbobitumen 1989
unter Verwendung von Deutschland 1990 0,02 (Median) Tobias et al. 1990
Petrobitumen
Dnemark 1989 4,0 (Median) Hansen 1989
4.2.1 Humanbiomonitoring von PAH-Metaboliten
Es hat sich in der arbeitsmedizinischen Praxis gezeigt, dass fr Personen innerhalb
eines einzigen Gewerkes und zustzlich nahezu identischer uerer Exposition (PAH
in der Luft) dennoch erhebliche interindividuelle Unterschiede in der inneren PAH-
Exposition vorliegen knnen (Grimmer et al. 1997; Seidel et al. 2002). Neben der
geringen Mglichkeit einer oralen Exposition (Hand-Mund-Kontakt) sowie mglicher
pharmakokinetischer Faktoren ist als Hauptursache fr diese interindividuellen Unter-
schiede jedoch in erster Linie die dermale Resorption von PAH anzusehen, die insge-
samt einen erheblichen und nicht zu vernachlssigenden Anteil an der Gesamtexposi-
tion gegenber PAH ausmacht (Gndel et al. 2000; McClean et al. 2004; Vanaanen
et al. 2005; Van Rooij et al. 1992, 1994). Zugleich ergeben sich aussagekrftige Asso-
ziationen mit moderaten Korrelationskoeffizienten zwischen gemessenen PAH-Kon-
zentrationen in der Luft und gemessenen Metabolitenkonzentrationen im Urin nur,
wenn Personen mit dermaler Belastung aus der statistischen Analyse ausgeschlossen
werden (Unwin et al. 2006). Aufgrund der bekannten Eigenschaft von PAH, auch ber
die Haut aufgenommen zu werden, werden Pyrolyseprodukte sowie andere Stoffgemi-
sche, die PAH enthalten, dementsprechend wie Stoffe gehandhabt, die mit einer H-
Markierung versehen sind (DFG 2007). Insgesamt ist damit aufgrund der dermalen
Tab. 4. Fortsetzung
Arbeitsplatz Land Jahr Benzo[a]pyren Literatur
[mg/m
3
]
Dachdeckereibetriebe Deutschland 1983 14,0 (Maximalwert) Blome 1983
USA 1982 0,411,0 Malaiyandi et al. 1982
Optische Industrie Deutschland 1983 <0,0519,7 Blome 1983
Teerraffinerie Deutschland 1979 3,6 Schunk 1979
Teerdestillation Deutschland Zeitraum 0,14 (Median)
drei Jahre 4,74 (90. Perzentil) Preuss et al. 2003 c
Bitumenherstellung Deutschland 1983 <0,5 Blome 1983
Bitumenverarbeitung Deutschland 2003 <0,06 Preuss et al. 2003 b
Ziegeleien Frankreich 1987 3,4 Lesage et al. 1987
Gummiindustrie USA 1980 032,3 Williams et al. 1980
Finnland 1982 <0,020,25 Enwald 1982
Deutschland 1983 <0,05 Blome 1983
Herstellung von Deutschland Zeitraum 0,49 (Median) Preuss et al. 2003 c
Graphitelektroden drei Jahre 4,08 (90. Perzentil)
Deutschland 1996 0,0033,39 Angerer et al. 1997 a
Herstellung von Deutschland Zeitraum 0,17 (Median) Preuss et al. 2003 c
Feuerfestmaterialien drei Jahre 3,44 (90. Perzentil)
Herstellung von Deutschland Zeitraum 0,10 (Median) Preuss et al. 2006
Feuerfestmaterialien fnf Jahre 1,72 (90. Perzentil)
38,15
(Maximalwert)
Verarbeitung von Deutschland Zeitraum 0,63 (Median) Preuss et al. 2003 c
Feuerfestmaterialien drei Jahre 23,25 (90. Perzentil)
* Benzo[a]pyren-Konzentrationsbereich in den 5 zitierten Stahlgieereistudien
Resorption von PAH ein Humanbiomonitoring mittels der Bestimmung von PAH-spe-
zifischen Metaboliten im Urin als wesentlich geeigneter fr eine Abschtzung der
Exposition am Arbeitplatz anzusehen als PAH-Messungen in der Atemluft am Arbeits-
platz.
Neben der guten dermalen Resorption von PAH ist auch deren systemisch-toxische
Wirkung als relevant fr eine krebserzeugende Gefhrdung des Menschen anzusehen.
Von entscheidender Bedeutung ist dabei die systemisch, d.h. sowohl inhalativ, dermal
als auch oral aufgenommene Gesamtmenge an PAH am Arbeitsplatz oder aus der
Umwelt. Diese kann wiederum optimal durch ein Humanbiomonitoring erfasst werden.
Da die Ausscheidung von PAH-spezifischen Metaboliten in der Allgemeinbevlkerung
vor allem durch die Rauch- und Ernhrungsgewohnheiten sowie durch die Umweltex-
position der untersuchten Personen beeinflusst wird, hat sich das Humanbiomonitoring
gegenber PAH-spezifischen Metaboliten neben der Arbeitsmedizin auch in der
umweltmedizinischen Praxis bewhrt und ist auch hier aufgrund der Hauptaufnahme-
pfade und der systemisch-toxischen Wirkungsweise von PAH dem Luftmonitoring
oder der Expositionserfassung durch Fragebgen als berlegen anzusehen (Gunier
et al. 2006; Hu et al. 2006).
Als Messparameter fr die innere PAH-Belastung wird in der Mehrzahl aller Studien
die Bestimmung von 1-Hydroxypyren eingesetzt (Levin 1995 b). 1-Hydroxypyren
reprsentiert dabei den Hauptmetaboliten von Pyren in Sugern (Boyland und Sims
1964; Grimmer et al. 1994; Harper 1958; Harper und Legator 1987; Jacob et al. 1982;
Keimig et al. 1983) und hat sich als sensitiver und spezifischer Parameter einer PAH-
Exposition durchgesetzt; eine bersicht wird in Jongeneelen (1997) dargestellt. Neben
1-Hydroxypyren konnten auch weitere Metaboliten des Pyrens, z. B. trans-4,5-Dihy-
droxy-4,5-dihydropyren, 1,6- und 1,8-Dihydroxypyren, 1,6- und 1,8-Pyrenchinon
sowie Dihydrodiolphenole im Urin nachgewiesen werden (Boyland und Sims 1964;
Harper 1957, 1958; Harper und Legator 1987; Jacob et al. 1982; Keimig et al. 1983).
Eine Auswahl von Daten zur Ausscheidung von 1-Hydroxypyren im Harn von nicht
exponierten Personen und PAH-exponierten Beschftigten an unterschiedlichen
Arbeitspltzen ist in den Tabellen 5 a und 5 b dargestellt. Alle Angaben sind in mg/g
Kreatinin bzw. mg/l Urin aufgefhrt, wobei in einzelnen Studien lediglich Angaben
in mg/24 Stunden Harn vorlagen. Diese Daten wurden unter der Annahme einer tgli-
chen Ausscheidung von 1,2 g Kreatinin fr Frauen und 1,8 g fr Mnner der besseren
Vergleichbarkeit wegen auf mg/g Kreatinin umgerechnet. Angaben in Konzentrationen
von mmol/mol Kreatinin wurden umgerechnet in mg/g Kreatinin.
Die interindividuellen Unterschiede, die bezglich der Ausscheidung von 1-Hydroxy-
pyren beobachtet werden, liegen zunchst an den unterschiedlich hohen Expositionen
in verschiedenen Gewerken und unterschiedlichen Arbeitsbereichen innerhalb eines
Gewerkes. So liegen bei der Messung von 1-Hydroxypyren u.a. hhere Expositionen
bei der Herstellung von Feuerfestmaterialien und der Herstellung von Graphitelektro-
den und Kohlenstoffspezialprodukten vor, als z. B. in Kokereien oder der Weiterverar-
beitung von Feuerfestmaterialien (BGFA 2005; Rossbach und Angerer 2002). Diese
Ergebnisse konnten durch die Messung von mehrfach-hydroxylierten PAH-Metaboli-
ten besttigt werden (Jacob und Seidel 2002).
Auch die interindividuellen Unterschiede in der Ausscheidung von 1-Hydroxypyren
innerhalb eines Gewerkes knnen noch groen Schwankungen unterliegen (Faktoren
zwischen 10 und 100; Petry et al. 1996), die mit der teilweise betrchtlichen dermalen
Resorption von PAH an einzelnen Arbeitspltzen oder unterschiedlicher Hygienema-
nahmen der Beschftigten innerhalb des untersuchten Gewerkes erklrt werden knnen
(McClean et al. 2004). Interindividuelle Unterschiede in der Ausscheidung von
1-Hydroxypyren knnen dagegen nur in sehr geringem Umfang mit genetischen Poly-
morphismen in PAH-metabolisierenden Genen erklrt werden. Die Analyse von 11
Polymorphismen in insgesamt acht am Fremdstoffwechsel von PAH beteiligten Enzy-
men (CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, CYP3A4, mikrosomale Epoxidhydrolase,
GSTM1, GSTT1, GSTP) in einem Kollektiv von 170 gegen PAH exponierten Arbei-
tern ergab dabei lediglich bei drei Polymorphismen einen Einfluss auf die Ausschei-
dung von 1-Hydroxypyren im Urin, der darber hinaus mit Faktoren zwischen 1,4 und
1,6 vernachlssigbar klein war (Rihs et al. 2005).
1-Hydroxypyren ist nicht das Endprodukt eines Stoffwechselweges des Pyrens, son-
dern wird enzymatisch zu 1,6- und 1,8-Dihydroxypyren weiteroxydiert. Diese Dihy-
droxypyrene stehen endogen im Redox-Gleichgewicht mit den Pyrenchinonen und
wurden erst jngst im Humanharn nachgewiesen und bestimmt (Ruzgyte et al. 2005;
Seidel et al. 2005). In dem Verfahren von Ruzgyte et al. (2005) wurde eine Hoch-
druckflssigkeitschromatograhie mit Fluoreszenzdetektion zur Bestimmung der 1,8-
Dihydroxypyrene nach deren Umwandlung in Diacetylderivate eingesetzt. Demge-
genber wurde von Seidel et al. (2005) die fr Phenole bekannte Bestimmung mittels
GC/MS nach Derivatisierung zu Methylethern eingesetzt. In Studien mit insgesamt
mehr als 300 Probanden (Nichtraucher) aus Deutschland und drei weiteren europi-
schen Lndern wurde in der Allgemeinbevlkerung eine Ausscheidung dieser 1,8-
Dihydroxypyrene in gleichen oder sogar hheren Konzentrationen als bei 1-Hydroxy-
pyren nachgewiesen (Verhltnis 1-Hydroxypyren/1,8-Dihydroxypyren 1,0 bis 0,5;
Seidel und Jacob 2005; Seidel et al. 2005). Diese Verhltnisse der Ausscheidung von
1-Hydroxypyren zu 1,8-Dihydroxypyren verndern sich drastisch bei Beschftigten
mit einer Arbeitsplatzexposition. So wurde bei Arbeitern der Graphitelektrodenherstel-
lung 1-Hydroxypyren/1,8-Dihydroxypyren-Verhltnisse von etwa 19: 1, bei Kokerei-
arbeitern etwa 10: 1, bei Konverterzustellern etwa 4: 1 und bei Arbeitern der Feuer-
festmaterialherstellung von etwa 3: 1 gemessen (Seidel und Jacob 2005). Die Ergeb-
nisse weisen darauf hin, dass bei hheren PAH-Belastungen eine Verschiebung im
Pyrenmetabolismus zu Gunsten einer Ausscheidung von 1-Hydroxypyren stattfindet.
Bei Niedrigbelastung hingegen macht das 1-Hydroxypyren nur etwa 50% der im Urin
bestimmten phenolischen Pyrenmetaboliten aus. Eine bersicht zeigen die Tabellen 5
a und 5 b.
Neben der Bestimmung von 1-Hydroxypyren im Urin wird in neueren Studien auch die
Ausscheidung weiterer PAH-Metaboliten vor allem der Phenanthrenphenole (1-, 2-,
3-, 4- und 9-Hydroxy-Phenanthren) untersucht. Diese werden bei der Auswertung der
Daten zumeist als Summenparameter aller fnf Isomeren (SHydroxy-Phenanthrene)
angegeben und besitzen den Vorteil, dass die SHydroxy-Phenanthrene im Vergleich
zum 1-Hydroxypyren im Harn durch individuelle Rauch- oder Ernhrungsgewohnhei-
ten der untersuchten Beschftigten wesentlich geringer beeinflusst werden. Insgesamt
ist mit der Bestimmung der SHydroxy-Phenanthrene eine beruflich bedingte PAH-
Exposition sensitiver und spezifischer zu erfassen als mittels der Bestimmung von
1-Hydroxypyren im Urin. Der im Vergleich zu 1-Hydroxypyren geringere Einfluss des
Rauchens auf die Ausscheidung von SHydroxy-Phenanthrenen im Harn zeigte sich
dabei bereits in frheren Studien. So konnte lediglich ein geringer Anstieg an SHy-
Tab. 5 a. Ausscheidung von 1-Hydroxypyren (Median bzw. Bereich) im Urin bei Kontrollproban-
den
Exponierte Personen Anzahl Land 1-Hydroxypyren Literatur
[mg/g [mg/l Urin]
Kreatinin]
Allgemeinbevlkerung 2747 USA 0,044 0,047 CDC 2005
Frauen 1399 0,042 0,043 Zeitraum 2001
2002
Mnner 1348 0,046 0,055 Zeitraum 2001
2002
Frauen 1206 0,077 0,071 Zeitraum 1999
2000
Mnner 1106 0,070 0,085 Zeitraum 1999
2000
Allgemeinbevlkerung
Nichtraucher 389 Deutschland 0,08 0,10 UBA 1998
Westdeutschland 182 0,09
Ostdeutschland 45 0,11
Raucher 184 0,19 0,25
Allgemeinbevlkerung 140 Kanada 0,17 Viau et al. 1995 b
Nichtraucher 95 0,14
Raucher 45 0,23
Allgemeinbevlkerung UBA 1990
Nichtraucher
Westdeutschland 75 Deutschland 0,12
Ostdeutschland 75 0,30
Allgemeinbevlkerung 139 Deutschland <0,040,13 Gen et al. 1995
Nichtraucher 80 <0,040,054
Raucher 59 <0,040,13
Allgemeinbevlkerung 70 Volksrepublik 0,84,6 Zhao et al. 1990
China
Allgemeinbevlkerung Lafontaine et al.
Nichtraucher 27 Frankreich 0,06 2006
(0,020,29)
Raucher 27 0,22
(0,081,02)
Allgemeinbevlkerung 8 Deutschland 0,3 Grimmer et al.
1991c
Nichtraucher 10 Deutschland 0,540,34
a)
Jacob et al.
Raucher 9 0,410,18
a)
1999 a
Nichtraucher 11 Deutschland <0,10,3 <0,10,3 Angerer et al.
Raucher 11 <0,10,8 <0,10,8 1992
Nichtraucher 97 Deutschland 0,061,56 Gndel et al. 1996
Raucher 27 0,181,50
Tab. 5 a. Fortsetzung
[mg/g [mg/l Urin]
Kreatinin]
Allgemeinbevlkerung Italien Granella und
Nichtraucher 19 0,04 Clonfero 1993
Raucher 20 0,08
Mit Teersalbe 8 Deutschland 0,945,81 Angerer et al.
behandelte Patienten 1992
25 Italien 7,60 Clonfero et al.
1989
a)
Mittelwert
Tab. 5 b. Ausscheidung von 1-Hydroxypyren im Urin (Median bzw. Bereich) bei beruflich expo-
nierten Personen
[mg/g [mg/l Urin]
Kreatinin]
unterschiedliche 237 Deutschland 5,38 BGFA
Industrien (Gesamt) (0,12279,63) Jacob und Seidel
2002; Rossbach
und Angerer 2002
Herstellung von 71 8,65
Graphitelektroden und (0,3690,84)
Kohlenstoffspezial-
produkten
Feuerfestmaterialien (0,31279,63)
Kokerei 47 4,30
(0,5134,82)
Verarbeitung von 24 4,98
Teerdestillation 18 1,51
(0,315,08)
Brandschadensanierung 5 0,46
(0,132,09)
Wasserbau und 4 1,98
Korrosionsschutz (0,837,88)
Tab. 5 b. Fortsetzung
[mg/g [mg/l Urin]
Kreatinin]
Herstellung von 34 Norwegen 19,7 Bentsen-Farmen
Graphitelektroden et al. 1999
67 Deutschland 8,7 Angerer et al.
1997 b
67 Deutschland 0,2326 Mannschreck
et al. 1996
23 Deutschland 7,1125,0 Gen et al. 1995
6 Deutschland 7,182,0 9,773,5 Angerer et al.
4 18,1129,6 20,150,4 1992
14 2,2125,0 3,2160,8
13 0,5816,8
Teertrnkanlagen 3 Niederlande 1,338,5 Jongeneelen 1992
1 80,9158
3 8,2134,9
6 4,8146,5
9 1,255.9
3 7,141,2 12,777,1 Angerer et al. 1992
3 1,09,1 Jongeneelen et al.
1986
Kreosot-Arbeiter Kanada 3,14 Viau et al. 1995 b
(0,3520,19)
Teerdestillation 4 Niederlande 2,325,1 Jongeneelen et al.
1986
Kokerei 15 Volksrepublik 36,3 Zhao et al. 1990
China
31 Schweden 15,9 Levin et al. 1995 a;
Sikstrm und
10 1,934,7 Levin 1989
Ofendecke 24 Deutschland 3,379,4 Strunk et al. 2002
8 Deutschland 14,1118,5 Grimmer et al.
1993 b
Fllwagenfahrer 4 Deutschland 8,221,0 Grimmer et al.
1993 b
Maschinist 4 2,06,9
Tab. 5 b. Fortsetzung
[mg/g [mg/l Urin]
Kreatinin]
Aluminiumschmelze 5 Niederlande 2,317 Vu-Duc und
Lafontaine 1996
25 Deutschland 0,1126,2 Gen et al. 1995
37 Deutschland 0,7126,2 0,299,2 Angerer et al. 1992
Stahlwerke 12 Volksrepublik 3,5 Zhao et al. 1990
China
Graphitlbehandlung 10 Deutschland 0,85 <0,14,2 Gen et al. 1995;
von Glasformen (0,13,8) Angerer et al. 1992
Straenbau
Straenbau (allg.) 49 Deutschland 0,22 0,18 Marczynski et al.
2006
4 Deutschland 2,6 Grimmer 1993 c
31 Niederlande 0,816,4 Jongeneelen et al.
1988
Heibitumen- 66 Deutschland 0,44 0,30 Marczynski et al.
verarbeitung 2006
Petrobitumen- 20 Deutschland 0,42,4 Knecht und
verarbeitung Woitowitz 1989
Carbobitumen- 12 5,392,1
verarbeitung
Mllverbrennung
Gemeindebetrieb 53 Deutschland <0,10,8 <0,11,3 Gen et al. 1995;
Angerer et al. 1992
Industriebetrieb 43 <0,10,8 Gen et al. 1995
Fleischrucherei 13 Deutschland <0,11,1 <0,11,1 Gen et al. 1995;
Angerer et al. 1992
Bahnschwellenbetriebe 14 Niederlande 0,48,7 Jongeneelen 1992
Brandbekmpfung 43 Kanada <0,16,9 Caux et al. 2002
(Feuerwehr)
Autoreparatur-
werksttten
Nichtraucher 40 Italien 0,07 Granella und
Raucher 25 0,13 Clonfero 1993
droxy-Phenanthrenen bei Rauchern im Vergleich zu Nichtrauchern beobachtet werden,
whrend fr Passivraucher im Vergleich zu Nichtrauchern berhaupt keine Unter-
schiede nachweisbar waren (Hoepfner et al. 1987; Martin et al. 1989). Auch unter-
schiedliche Ernhrungsgewohnheiten besitzen einen geringeren Einfluss auf die Aus-
scheidung von SHydroxy-Phenanthrenen im Urin. Eine Erhhung der Konzentration
an Phenanthren in der Nahrung ca. um Faktor 10 (von 0,5 mg/kg auf 4,4 mg/kg) fhrte
lediglich zu einem leichten Anstieg der Ausscheidung an SHydroxy-Phenanthrenen,
nmlich um den Faktor 2 (Martin et al. 1989). Dies besttigten auch die Befunde einer
weiteren Studie, die lediglich einen Anstieg um den Faktor 412 an 1-Hydroxypyren
im Harn fr Personen fanden, die auf Holzkohle gegrilltes Fleisch mit einer ca. 250fach
hheren Benzo[a]pyren-Konzentration als die entsprechenden Kontrollpersonen kon-
sumiert hatten (Buckley und Lioy 1992). Hierbei ist jedoch unklar, inwiefern die
Pyrenkonzentration des Grillguts im gleichen Umfang wie Benzo[a]pyren erhht war.
Eine Auswahl von Daten zur Ausscheidung von SHydroxy-Phenanthrenen im Harn
von nicht exponierten Personen und PAH-exponierten Beschftigten an unterschiedli-
chen Arbeitspltzen ist jeweils in den Tabellen 6 a und 6 b dargestellt. Alle Angaben
sind in mg/g Kreatinin bzw. mg/l Urin aufgefhrt.
Aufgrund des unterschiedlichen PAH-Profils in den verschiedenen Gewerken und
damit der unterschiedlichen Ergebnisse bei der Ausscheidung von 1-Hydroxypyren
Tab. 6 a. Ausscheidung von 1-, 2-, 3-, 4- und 9-Hydroxyphenanthren (SHydroxyphenanthrene)
(Median bzw. Bereich) im Urin bei Kontrollprobanden
Exponierte Personen Anzahl Land SHydroxyphenanthrene Literatur
[mg/g [mg/l Urin]
Kreatinin]
Frauen 1397 0,37 0,38 Zeitraum 2001
2002
Mnner 1344 0,35 0,45
Frauen 1131 0,38 0,41 Zeitraum 1999
2000
Mnner 1048 0,33 0,41 (1-, 2- und 3-
Hydroxyphen-
anthren)
Allgemeinbevlkerung UBA 1998
Nichtraucher 389 Deutschland 0,67 0,84
Raucher 184 1,00 1,38
Allgemeinbevlkerung
8 Deutschland 3,5 Grimmer et al.
1991 a
Nichtraucher 10 Deutschland 1,3 Jacob et al. 1999 a
Raucher 6 2,4
Raucher mit Lungenkrebs 10 1,6
Tab. 6 b. Ausscheidung von 1-, 2-, 3-, 4- und 9-Hydroxyphenanthren (SHydroxyphenanthrene)
(Median bzw. Bereich) im Urin bei beruflich exponierten Personen in Deutschland
Exponierte Personen Anzahl SHydroxyphenanthrene Literatur
[mg/g Kreatinin] [mg/l Urin]
unterschiedliche 237 8,48 BGFA
Industrien (Gesamt) (0,19122,18) und Seidel 2002;
Rossbach und
Angerer 2002
Graphitelektroden und (0,54122,18)
Kohlenstoffspezialprodukten
Kokerei 47 10,29
(3,3079,36)
Verarbeitung von 24 13,96
Teerdestillation 18 7,05
(2,1129,53)
Brandschadensanierung 5 2,17
(0,856,53)
Wasserbau und 4 5,61
Korrosionsschutz (3,1817,07)
Kokerei 8 12,0 Strunk et al. 2002
Ofendecke 24 70,0 Grimmer et al. 1991 a
4 103686
a)
Grimmer et al. 1993 b
Fllwagenfahrer 4 45,088,0
a)
Maschinist 4 7,022,0
a)
Straenbau
Straenbau (allg.) 49 1,15 0,95 Marczynski et al.
2006
4 35,0 Grimmer et al. 1991 a
6 1,50 Martin et al. 1989
Heibitumenverarbeitung 66 2,37 1,56 Marczynski et al.
2006
Bitumenverarbeitung 7 4,9 bis 322
b)
Martin et al. 1989
Behandlung mit Kreosot 1 542
b)
Martin et al. 1989
(Holzimprgnierung)
a)
24-Stunden-Urin;
b)
aus Abbildung entnommen
und SHydroxyphenanthrenen im Harn zwischen den Gewerken, ergibt sich fr SHy-
droxyphenanthrene im Vergleich zu 1-Hydroxypyren eine vernderte Hierarchie hin-
sichtlich der Hhe der Exposition innerhalb der einzelnen Gewerke. Die hchsten Kon-
zentrationen an SHydroxyphenanthrenen ergaben sich analog 1-Hydroxypyren
sowohl bei der Herstellung von Feuerfestmaterialien sowie der Herstellung von Gra-
phitelektroden und Kohlenstoffspezialprodukten. Jedoch wurden auch im Gegensatz
zu den Ergebnissen fr 1-Hydroxypyren hohe Expositionen in Form von SHydroxy-
phenanthrenen sowohl in Kokereien als auch bei der Weiterverarbeitung von Feuer-
festmaterialien und der Teerdestillation ermittelt (BGFA2005; Jacob und Seidel 2002;
Rossbach und Angerer 2002).
Zusammenfassend kann damit gesagt werden, dass die Ergebnisse der Messungen von
1-Hydroxypyren und SHydroxyphenanthrenen im Urin bei PAH-exponierten Beschf-
tigten vor allem bei der Herstellung und Weiterverarbeitung von Feuerfestmaterialien
und Graphitelektroden wie auch Kokereien und der Teerdestillation hhere Expositio-
nen gegenber PAH anzeigen, whrend die Brandschadensanierung sowie der Wasser-
bau und Korrosionsschutz eher von untergeordneter Bedeutung fr eine Exposition
gegenber PAH sind. Sowohl mittels Messungen von 1-Hydroxypyren als auch SHy-
droxyphenanthrenen konnten in den letzteren Industriezweigen lediglich geringe
Expositionen nachgewiesen werden.
Analog zu 1-Hydroxypyren sind die interindividuellen Unterschiede, die bezglich der
Ausscheidung von SHydroxyphenanthrenen beobachtet werden, mit den unterschied-
lich hohen Expositionen in den verschiedenen Gewerken erklrbar. Auch innerhalb
eines Gewerkes unterliegt die Ausscheidung von SHydroxyphenanthrenen interindivi-
duellen Schwankungen. Diese knnen wie bei 1-Hydroxypyren aufgrund der hohen
Faktoren zwischen 10 und 100 nur mit der teilweise betrchtlichen dermalen Resorption
von PAH erklrt werden. Interindividuelle Unterschiede aufgrund genetischer Polymor-
phismen in PAH-metabolisierenden Genen sind dagegen wie bei 1-Hydroxypyren auch
im Falle von SHydroxyphenanthrenen nur von untergeordneter Bedeutung (Rihs et al.
2005). Fr SHydroxyphenanthrene zeigte die Analyse von 11 Polymorphismen in ins-
gesamt acht am Fremdstoffwechsel von PAH beteiligten Enzymen (CYP1A1, CYP1A2,
CYP1B1, CYP3A4, mikrosomale Epoxidhydrolase (EPHX1), GSTM1, GSTT1,
GSTP), dass lediglich vier Polymorphismen einen potentiellen Einfluss auf die Aus-
scheidung von SHydroxyphenanthrenen im Urin hatten. Die entsprechenden Faktoren
sind jedoch mit Werten zwischen 1,5 und 2,0 vernachlssigbar klein im Vergleich zu den
hohen Schwankungsbreiten mit Faktoren von 10100, die allein aufgrund unterschied-
licher dermaler Resorption an ansonsten identischen Arbeitspltzen vorliegen knnen.
Die meisten kanzerogenen PAH, wie auch das am besten untersuchte Benzo[a]pyren,
weisen als Strukturparameter eine fr die biologische Wirkung kritische Bay-Region
auf. Als ultimal biologisch wirksamer Hauptmetabolit des Benzo[a]pyrens wird das
Bay-Region anti-Benzo[a]pyren-7,8-dihydrodiol-9,10-oxid gebildet, welches durch
weitere enzymatische Oxidation des intermediren Benzo[a]pyren-trans-7,8-dihydro-
diols entsteht. In Strukturanalogie zum Benzo[a]pyren wird das Phenanthren als ein-
fachster Vertreter der PAH mit einer Bay-Region via Phenanthren-trans-1,2-dihydro-
diol zum Bay-Region anti-Phenanthren-1,2-dihydrodiol-3,4-oxid verstoffwechselt
(Jacob et al. 1996 b; Nordqvist et al. 1981). Im Humanurin kann sowohl das interme-
dire Phenanthren-1,2-dihydrodiol (Grimmer et al. 1993 a, b; Hecht 2002; Jacob et al.
1999 b) als auch das als Endprodukt dieses Stoffwechselweges ausgeschiedene Phen-
anthrentetrol (Hecht et al. 2003), welches durch Hydrolyse des Bay-Region anti-Phen-
anthren-1,2-dihydrodiol-3,4-oxids entsteht, bestimmt werden. Whrend die Ausschei-
dung der monohydroxylierten Metaboliten (Phenole) des nicht-kanzerogenen Phenan-
threns einem Entgiftungsweg entspricht, wird vorgeschlagen, das Phenanthrentetrol als
qualitativen Surrogatmarker fr die metabolische Aktivierung von PAH zu bestimmen
(Hecht et al. 2003), da die entsprechenden enzymatischen Schritte analog zu denen an
kanzerogenen PAH wie Benzo[a]pyren ablaufen.
Die Bestimmung des Phenanthren-1,2-dihydrodiols wurde mittels einer GC/MS-
Methodik nach Derivatisierung zu Methylethern (Jacob et al. 1999 a) bei Beschftig-
ten mit einer Arbeitsplatzexposition untersucht (Seidel und Jacob 2005). So wurde bei
Arbeitern der Graphitelektrodenherstellung ein Median von 0,7 mg/g Kreatinin, bei
Kokereiarbeitern von 3,6 mg/g Kreatinin, bei Konverterzustellern 51,7 mg/g Kreatinin,
und bei Arbeitern der Feuerfestmaterialherstellung 21,2 bzw. 127,7 mg/g Kreatinin je
nach verwendetem Material gefunden. Diese zunehmenden Werte lassen sich ebenso
wie die der SHydroxyphenanthrene (BGFA 2005) durch eine zunehmende Exposition
gegenber Phenanthren an den Arbeitspltzen erklren. Auffllig ist jedoch, dass bei
zunehmender Expositionshhe das Verhltnis des ausgeschiedenen Phenanthren-1,2-
dihydrodiols zur SHydroxyphenanthrene stark ansteigt, was auf eine Induktion dieses
Stoffwechselweges bei den Exponierten hinweist.
Die Ausscheidung von Phenanthrentetrol wurde in den USA bei Nichtrauchern, Rau-
chern, Kokereiarbeitern und bei Psoriasispatienten mit einer Teersalbenbehandlung
untersucht, wobei eine GC/NICI-MS-Methodik nach Derivatisierung zu Silylethern
eingesetzt wurde (Hecht et al. 2003). Hierbei zeigte es sich, dass das Phenanthrentetrol
einen sensitiven Biomarker fr eine PAH-Exposition darstellt, der nderungen in der
Expositionshhe gut widerspiegelt. So wurden in den vier genannten Expositionsgrup-
pen mit aufsteigender Belastung jeweils signifikante Unterschiede in der Ausscheidung
des Phenanthrentetrols festgestellt (Nichtraucher, n=30, Mittelwert =1,51 pmol/mg
Kreatinin; Raucher, n=31, Mittelwert =4,58 pmol/mg Kreatinin; Kokereiarbeiter,
n=32, Mittelwert =25,7 pmol/mg Kreatinin; Psoriasispatienten, n=20, Mittel-
wert =791 pmol/mg Kreatinin). Auch bei 300 Probanden der europischen Allgemein-
bevlkerung (Nichtraucher) aus Italien, Polen und Serbien wurden sowohl die SHy-
droxyphenanthrene als auch die Phenanthrentetrol-Ausscheidung gemessen (Seidel
et al. 2005). Phenanthrentetrol wurde in diesen niedrig belasteten Kohorten im Ver-
gleich zu SHydroxyphenanthrene in etwa gleichen oder sogar hheren Mengen ausge-
schieden (Italien, Mediane, SHydroxyphenanthrene 0,37 mg/g Kreatinin, Phenanthren-
tetrol 0,53 mg/g Kreatinin; Polen, Mediane, SHydroxyphenanthrene 2,01 mg/g Kreati-
nin, Phenanthrentetrol 1,77 mg/g Kreatinin; Serbien, Mediane, SHydroxyphenanthrene
1,05 mg/g Kreatinin, Phenanthrentetrol 1,10 mg/g Kreatinin). Eine 6-wchige Longitu-
dinalstudie an Rauchern und Nichtrauchern zeigte, dass die ausgeschiedenen Konzen-
trationen an SHydroxyphenanthrenen, Phenanthrentetrol und das Verhltnis SHy-
droxyphenanthrene/Phenanthrentetrol innerhalb der einzelnen Probanden schwanken
(Variationskoeffizient fr die Mittelwerte lag im Bereich 2946%). Das hhere Ver-
hltnis Phenanthrentetrol/SHydroxyphenanthrene bei Rauchern versus Nichtrauchern
(1,39 versus 0,78) wurde als Induktion des metabolischen Aktivierungsweges bei den
Rauchern interpretiert (Hecht et al. 2005). Die vorliegenden Untersuchungen belegen,
dass das Phenanthrentetrol als ein guter Biomarker fr eine innere PAH-Belastung ver-
wendet werden kann.
Das bisher dargestellte Humanbiomonitoring auf Basis der Ausscheidung von Phenan-
thren- und Pyrenmetaboliten im Urin spiegelt nicht die innere Belastung durch krebser-
regende PAH in Pyrolyseprodukten oder anderen PAH-haltigen Gemischen wider.
Dementsprechend gibt es Bestrebungen, Metaboliten kanzerogener PAH wie Naphtha-
lin, Chrysen und Benzo[a]pyren analytisch zu erfassen.
Seit der Neubewertung von Naphthalin (Nachtrag Naphthalin 2001) als krebserre-
genden Gefahrstoff, aufgrund einer NTP-Studie (NTP 2000), stellt sich auch die Frage
nach einem Humanbiomonitoring fr diese Substanz. Die Aufnahme des niedrig sie-
denden Naphthalins erfolgt zu einem betrchtlichen Anteil ber die Lunge. Die Aus-
scheidung seiner Metaboliten, u.a. 1- und 2-Naphthol, verluft ber den Urin. Damit
sind diese beiden Metaboliten leicht fr ein Humanbiomonitoring im Urin zugnglich.
1- und 2-Naphthol wurden in der Zwischenzeit in einer Reihe von Studien gemessen,
wobei die Ergebnisse sowohl getrennt als auch als Summe (SNaphthole) angegeben
wurden. Die wohl umfangreichsten Untersuchungen in der Allgemeinbevlkerung lie-
gen wie fr alle anderen PAH-Metaboliten auch seitens des Centers for Disease
Control & Prevention in den USA vor, welches in jeweils zweijhrigem Turnus die
interne Belastung der amerikanischen Allgemeinbevlkerung hinsichtlich verschiede-
ner Umweltkontaminanten (inkl. PAH) in Tausenden von Urinproben testet. Dabei
wurde im Third National Report on Human Exposure to Environmental Chemicals
des National Health and Nutrition Examination Survey (CDC 2005) eine Ausschei-
dung an SNaphthole von 4,0 mg/l bzw. 3,5 mg/g Kreatinin (Median) bei 2748 Personen
gemessen. Bei Mnnern (n=1349) wurde der Wert mit 4,5 mg/l bzw. 3,8 mg/g Kreati-
nin bestimmt, whrend der entsprechende Wert bei Frauen bei 3,6 mg/l bzw. 4,0 mg/g
Kreatinin lag. Raucher hatten dabei hhere Werte an SNaphthole (Nan et al. 2001; Ser-
dar et al. 2003 a). hnliche Werte wurden auch im Urin von Vorschulkindern (Wilson
et al. 2003), Schlern (Kang et al. 2002) und Erwachsenen gefunden (Kim et al. 2003;
Kuusimaki et al. 2004; Serdar et al. 2003 a). Die Daten des CDC 2005 (von Proben die
zwischen 2001 und 2002 gesammelt wurden) lagen dabei jedoch lediglich bei 50% der-
jenigen Messwerte, die von anderen Autoren in 983 Personen (Raucher und Nichtrau-
cher) in den USAermittelt wurden (Hill et al. 1995). Dabei betrugen die Medianwerte
fr die 1- bzw. 2-Naphtholausscheidung im Urin 4,4 bzw. 3,4 mg/l. Die entsprechenden
95. Perzentile betrugen 43 bzw. 30 mg/l. Auch in Deutschland wurden bei 72 Erwach-
senen und 35 Kindern 1- und 2-Naphthol im Urin zur Abschtzung der internen Expo-
sition gegenber Naphthalin bestimmt. Bei Rauchern wurden dabei vierfach hhere
Gehalte an SNaphthole (bezogen auf Kreatinin) gefunden als bei Nichtrauchern
(Preuss et al. 2004 b). Als vorlufige Referenzwerte (95. Perzentilwerte) werden in
Deutschland fr SNaphthole im Urin fr erwachsene Nichtraucher 41,2 mg/g Kreatinin
und fr Kinder 23,5 mg/g Kreatinin vorgeschlagen.
Auch in Studien zur beruflichen Belastung konnte gezeigt werden, dass sich 1- und 2-
Naphthol als spezifische und sensitive Parameter einer Exposition gegen Naphthalin
erwiesen (Nan et al. 2001; Preuss und Angerer 2004 a; Preuss et al. 2003 a, 2004 b,
2005; Rappaport et al. 2004; Serdar et al. 2003 a, b).
Hhere innere Naphthalinbelastungen bis zu ca. 1300 mg/l werden im Vergleich zur
Allgemeinbevlkerung bei beruflich Exponierten gefunden. Bei Kokereiarbeitern
lagen die Konzentrationen an 1-und 2-Naphthol im Urin zwischen 5,3 und 386,4 mg/l
bzw. 4,8 und 174,3 mg/g Kreatinin. Die entsprechenden Konzentrationen bei Beschf-
tigten zur Herstellung feuerfester Materialien lagen im Bereich von 1,5 bis 205,8 mg/l
(1,5 bis 109,5 mg/g Kreatinin), whrend sie bei Beschftigten der Kohleelektrodenher-
stellung zwischen <Nachweisgrenze und 216 mg/l (<Nachweisgrenze und 150,5 mg/g
Kreatinin) bestimmt wurden. Die entsprechenden Konzentrationen in einem nicht
exponierten Kollektiv wurden von den Autoren im Bereich zwischen 1,4 und 83,6 mg/l
(1,4 und 84,6 mg/g Kreatinin) angegeben (Preuss et al. 2005).
Im Gegensatz zu Naphthalin werden hher siedende PAH (z. B. Chrysen, Benzo-
[a]pyren) vorzugsweise mit den Faeces ausgeschieden (Jacob et al. 1990). Die dem-
entsprechend zu entwickelnden Analyseverfahren mssen uerst sensitiv und spezi-
fisch sein, um die im Urin vorhandenen geringen Mengen an hydroxylierten Metabo-
liten mit ausreichender diagnostischer Validitt nachweisen zu knnen. Die Untersu-
chungen konzentrierten sich dabei zunchst auf 3-Hydroxybenzo[a]pyren im Urin als
Metabolit der Leitsubstanz Benzo[a]pyren.
1983 wurde erstmals eine Methode zur Bestimmung von 3-Hydroxybenzo[a]pyren
nach Reduktion mit Iodwasserstoff beschrieben (Becher und Bjrseth 1983). Die mit
dieser Methode gemessenen Konzentrationen betrugen 0,12 mg/l im Harn von PAH-
exponierten Arbeitern. Das Verfahren konnte sich jedoch nicht als Routineverfahren
durchsetzen. Im Anschluss wurde ein HPLC-Verfahren zur Bestimmung von 3-Hy-
droxybenzo[a]pyren mit Wiederfindungsraten von 43% und einer Bestimmungsgrenze
von 1 ng/24 Std.-Harn verffentlicht (Jongeneelen et al. 1985 a). In einer spteren
Arbeit wurde eine wesentlich hhere Nachweisgrenze von 1 mg/l (4 nmol/l) angegeben
(Jongeneelen et al. 1987). Die Konzentrationen von 3-Hydroxybenzo[a]pyren im Harn
von Arbeitern einer Steinkohlenteer-Destillationsanlage lagen jedoch unterhalb der
Nachweisgrenze, so dass die Methode fr das Humanbiomonitoring wenig geeignet
erschien. Die Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit der HPLC-Methode wurde
durch Zugabe von Ascorbinsure zum Elutionsmittel verbessert (Bouchard et al. 1994).
Spter wurde eine HPLC-Methode mit Fluoreszenz-Detektion unter Verwendung einer
mit Phthalocyaninkupfer modifizierten Kieselgel-Vorsule beschrieben, wie sie
ursprnglich von Lintelmann et al. (1994 a, b) und Boos et al. (1992) entwickelt wurde,
und fr 3-Hydroxybenzo[a]pyren und 3-Hydroxybenzo[a]anthracen, die simultan
bestimmt werden konnten, wurden Nachweisgrenzen von 6 ng/l bzw. 8 ng/l gefunden
(Gndel und Angerer 2000). Fr den nach Schichtende gesammelten Harn von Arbei-
tern (n=19) einer Fabrik zur Herstellung feuerfester Materialien konnten Konzentra-
tionen von 3198 ng 3-Hydroxybenzo[a]pyren/g Kreatinin und 151871 ng 3-
Hydroxybenzo[a]anthracen/g Kreatinin gemessen werden. Nach Meinung der Autoren
knnte 3-Hydroxybenzo[a]anthracen einen Biomarker darstellen, der die Gruppe der
kanzerogenen PAH reprsentiert (Gndel et al. 2000). Die Ergebnisse lagen in einem
Bereich, der auch in einer anderen Studie fr 3-Hydroxybenzo[a]pyren sowohl fr
nicht exponierte Personen (6 ng/l, n=48) als auch fr Kokereiarbeiter (370 ng/l, n=40)
und Straenbauarbeiter (19 ng/l, n=10) gefunden wurde (Grimmer et al. 1990, 1991 a).
Eine Korrelation zwischen der innerhalb von acht Arbeitszeitstunden inhalierten
Benzo[a]pyren-Menge und der Ausscheidung seiner phenolischen Metaboliten
(Summe aus 3-, 7- und 9-Hydroxybenzo[a]pyren) konnte festgestellt werden (Grimmer
et al. 1993 a). Einer inhalierten Benzo[a]pyren-Menge von 17,71 mg entsprach dabei
eine ausgeschiedene Phenolmenge von 0,82 mg. Die Nachweisgrenze fr 3-Hydroxy-
benzo[a]pyren bei Verwendung der blichen Fluoreszenz-Detektion ist allerdings zu
hoch fr eine sensitive und spezifische Bestimmung dieses Analyten im Harn von
beruflich nicht exponierten Probanden (z. B. Kinder) (Hollender et al. 2000). Es wur-
den daher zunchst andere empfindlichere Methoden etabliert, wie HPLC mit Laser-
induzierter Fluoreszenz-Detektion (LIF) unter Verwendung einer verbesserten Proben-
anreicherung oder g-Cyclodextrin-modifizierte mizellare elektrokinetische Chromato-
graphie mit LIF, die es ermglichte, niedrigere Konzentrationen im Bereich von 0,5
8 ng/l zu bestimmen (Ariese et al. 1994; Smith et al. 1998). Im Harn von Kokereiar-
beitern konnten zwar im Vergleich zu nicht exponierten Probanden signifikant erhhte
1-Hydroxypyren-Konzentrationen, in den meisten Proben dagegen keine entsprechend
erhhten 3-Hydroxybenzo[a]pyren-Konzentrationen beobachtet werden (Ariese et al.
1994).
In der Zwischenzeit wurden drei sensitive und spezifische Methoden zum Nachweis
fr 3-Hydroxybenzo[a]pyren entwickelt, die routinemssig in Studien eingesetzt wer-
den knnen. Eine Methodik wurde auf Basis der Kapillargaschromatographie mit
hochauflsender Massenspektrometrie (GC-HRMS) entwickelt (Romanoff et al.
2006). Nach enzymatischer Hydrolyse, Aufreinigung mittels Festphasenextraktion und
Silylierung der hydroxylierten PAH-Metaboliten gelingt es mit der Methode, 3-
Hydroxybenzo[a]pyren bis in den unteren ng/l-Bereich nachzuweisen. Das mit dieser
Methode im Rahmen des amerikanischen Umweltsurveys ermittelte 95. Perzentil an 3-
Hydroxybenzo[a]pyren im Urin von 2152 Personen der Allgemeinbevlkerung wurde
dabei mit 0,18 mg/l bestimmt. Der Median lag unterhalb der Nachweisgrenze.
Eine zweite Methode basiert auf einer Hochdruckflssigkeitschromatographie mit
einem APCI-Tandem-Massenspektrometer als Detektionssystem (Fan et al. 2006). Im
Multiple Reaction Monitoring Mode (MRM) stellt die Tandem-Massenspektrometrie
eine weitere hervorragende Technik zur quantitativen Bestimmung von PAH-Metabo-
liten im Urin dar, wobei aufgrund der hohen Selektivitt nach der enzymatischen Spal-
tung der Konjugate nur eine einfache Festphasenextraktion als Probenvorbereitung
erforderlich ist. Die Methode weist fr 3-Hydroxybenzo[a]pyren eine Bestimmungs-
grenze von 1,03 mg/l auf. Neben dem 3-Hydroxybenzo[a]pyren wurde mit diesem Ver-
fahren auch 1-Hydroxypyren im Urin erfasst. Bei einer studentischen Kohorte von
Rauchern und Passivrauchern in China wurden fr die Ausscheidung von 3-Hydroxy-
benzo[a]pyren und 1-Hydroxypyren Mittelwerte von 0,0070,011 bzw. 0,253
0,138 mmol/mol Kreatinin gefunden. Demgegenber lagen die Mittelwerte von 3-
Hydroxybenzo[a]pyren und 1-Hydroxypyren fr die Nichtraucher bei 0,0060,012
bzw. 0,1920,129 mmol/mol Kreatinin (entsprechend 0,0110,023 bzw. 0,37
0,249 mg/g Kreatinin) (Fan et al. 2006).
Eine dritte Methode basiert auf der Hochdruckflssigkeitschromatographie mit vierfa-
cher Sulenschaltung zur On-line-Aufreinigung der Urinproben mit dem abschlieen-
den Nachweis von 3-Hydroxybenzo[a]pyren mittels Fluoreszenzdetektion (4D-HPLC-
FLD) (Lafontaine et al. 2006; Simon et al. 2000). Die mit dieser Methode ermittelten
Konzentrationen bei 27 Rauchern wurden im Median 0,055 ng/g Kreatinin (<0,024
0,199 ng/g) bestimmt, whrend der Median von 27 Nichtrauchern bei 0,026 ng/g
(<0,0240,107 ng/g) betrug (Lafontaine et al. 2006). Mit der beschriebenen Methode
wurden neben den regulren Metaboliten 1-Hydroxypyren und SHydroxyphenanthre-
ne auch 3-Hydroxybenzo[a]pyren in Urinproben nach der Schicht bei insgesamt 225
PAH-exponierten Beschftigten aus unterschiedlichen Industriegewerken analysiert
(Frster et al. 2007). Der Median an 3-Hydroxybenzo[a]pyren wurde zu 0,8 ng/g Krea-
tinin bestimmt (<Limit of detection 19,5 ng/g; 95. Perzentil: 6,7 ng/g) und lag damit
ca. um den Faktor 40 hher als der Wert von Nichtrauchern in der Studie von Lafon-
taine et al. (2006). Lediglich 1% der analysierten Proben ergaben Werte unterhalb der
Nachweisgrenze. Die 3-Hydroxybenzo[a]pyren-Werte waren dabei stark positiv mit
den entsprechenden Werten an 1-Hydroxypyren und SHydroxyphenanthrenen im Urin
assoziiert, sowohl aufgrund dermaler Resorption als auch aufgrund mangelhafter
Nachweisgrenzen von Benzo[a]pyren in der Luft konnten keine Assoziationen zwi-
schen den Benzo[a]pyren-Werten in der Luft und 3-Hydroxybenzo[a]pyren im Urin
gefunden werden.
Die Methoden von Romanoff et al. (2006) und Lafontaine et al. (2006) sind vollstn-
dig automatisiert und erfordern lediglich geringe manuelle Probenvorbereitung. In den
Studien des amerikanischen Umweltsurveys wie auch in der Studie von Lafontaine
et al. (2006) und Frster et al. (2007) stellten beide Methoden ihre Fhigkeit zum Rou-
tinebetrieb unter Beweis, wobei die 4D-HPLC-FLD-Methodik von Lafontaine et al. fr
den Nachweis von 3-Hydroxybenzo[a]pyren im Urin sensitiver ist. Die gemessenen
Werte an 3-Hydroxybenzo[a]pyren in der nichtexponierten amerikanischen Allge-
meinbevlkerung liegen dabei um den Faktor 510 hher als diejenigen Konzentra-
tionen der beruflich nicht exponierten Allgemeinbevlkerung in Deutschland. Inwie-
fern diese Unterschiede methodisch bedingt sind oder auf Unterschiede in den PAH-
Expositionen ber die Umwelt zwischen beiden Lndern zurckzufhren sind, ist der-
zeit nicht geklrt. Mit der Methodik von Romanoff et al. (2006) sind neben der Bestim-
mung von 3-Hydroxybenzo[a]pyren innerhalb eines analytischen Laufes auch noch die
routinemssigen Bestimmungen weiterer PAH-Metaboliten mit Nachweisgrenzen im
unteren ng/l-Bereich mglich, u.a. von 1-, 3- und 9-Benzo[a]anthracen (SHydroxy-
benzo[a]anthracene), 1-, 2-, und 3- Hydroxybenzo[c]phenanthren (SHydroxybenzo[c]-
phenanthrene), 1-, 2-, 3-, 4- und 6-Hydroxychrysen (SHydroxychrysene), 3-Hydroxy-
fluoranthen sowie 2-, 3- und 9-Hydroxyfluoren (SHydroxyfluorene). In Proben von
2152 Personen der amerikanischen Allgemeinbevlkerung (CDC 2005) wurde dabei
der Median fr 3-Hydroxyfluoranthen zu 17,5 mg/l Urin bzw. 14,7 mg/g Kreatinin
bestimmt, whrend die Medianwerte fr SHydroxyfluorene bei 0,67 mg/l Urin bzw.
0,54 mg/g Kreatinin lagen. Fr alle anderen Metaboliten lagen die Medianwerte unter-
halb der Nachweisgrenze. Die 95. Perzentile wurden fr SHydroxybenzo[a]anthrace-
ne mit 0,04 mg/l Urin, fr SHydroxybenzo[c]phenanthrene mit 0,06 mg/l Urin, fr
SHydroxychrysene mit 0,26 mg/l Urin, fr 3-Hydroxyfluoranthen mit 0,1 mg/l Urin und
fr SHydroxyfluorene mit 0,55 mg/l Urin bestimmt. Die Methode wurde neuerdings
am CDC auch auf die Erfassung des 7-Hydroxybenzo[a]pyrens ausgeweitet (Li et al.
2006).
Als Biomarker reprsentieren die ausgeschiedenen monohydroxylierten PAH (Phe-
nole) aufgrund ihres nukleophilen Charakters detoxifizierte Metaboliten. Ein wn-
schenswerter Biomarker wre daher idealerweise ein Metabolit von einem kanzeroge-
nen PAH wie dem Benzo[a]pyren, der eine Bioaktivierung, z. B. zu den elektrophil-
reaktiven Dihydrodiolepoxiden reprsentiert. Ein solcher Biomarker wre das Benzo-
[a]pyrentetrol, welches durch Hydrolyse des anti-Benzo[a]pyren-7,8-dihydrodiol-
9,10-oxids (s. Kap. 3.2.2) gebildet wird. Die Bestimmung des Benzo[a]pyrentetrols im
Urin (Bentsen-Farmen et al. 1999; Bowman et al. 1997; Simpson et al. 2000; Wu et al.
2002) konnte jedoch aufgrund der sehr geringen ausgeschiedenen Mengen und der
nicht ausreichenden Nachweisgrenzen in der arbeits- und umweltmedizinischen Praxis
bisher nicht etabliert werden.
Eine humane PAH-Exposition an unterschiedlichen Arbeitspltzen in verschiedenen
Gewerken ist immer durch erhebliche Unterschiede in den PAH-Zusammensetzungen
gekennzeichnet, wobei das Spektrum von niedermolekularen Vertretern, wie dem noch
flchtigen Naphthalin, bis zu hhermolekularen Vertretern, wie dem Benzo[a]pyren
und den Dibenzopyrenen, reicht. Letztere sind fast vollstndig an Partikel gebunden.
Als Biomarker sind daher insbesondere Metaboliten geeignet, die ein breites Spektrum
der Exposition abdecken, wobei generell die ausgeschiedenen Mengen im Urin mit
zunehmendem Molekulargewicht abnehmen. Unter Bercksichtigung der Urinaus-
scheidung und der gut etablierten Bestimmungsmethoden stellen die Phenole eine
bedeutende Klasse von Metaboliten fr die Bestimmung einer PAH-Belastung dar. Ins-
besondere sind die Phenole des Naphthalins, des Pyrens und des Phenanthrens gut
etablierte und mit verschiedenen Methoden routinemig zu bestimmende Biomarker
im Urin. Neuere analytische Entwicklungen erlauben auch die spezifische und sensiti-
ve Bestimmung des im Urin in relativ geringen Mengen vorkommenden 3-Hydroxy-
benzo[a]pyrens als Belastungsmarker fr das kanzerogene Benzo[a]pyren. Da Phenole
grundstzlich eine Detoxifizierung von PAH reprsentieren, kommt der Bestimmung
weiterer Metabolitenklassen, die insbesondere eine Bewertung des Gefhrdungspoten-
tials von PAH erlauben, besondere Bedeutung zu. Aktuelle analytische Entwicklungen
konzentrieren sich hier auf die Bestimmung von Tetrolen, die als Hydrolyseprodukte
aus den fr die biologische Wirkung wichtigen Bay-Region-Dihydrodiolepoxiden
gebildet werden, sowie auf Dihydrodiole, aus denen die entsprechenden Bay-Region-
Dihydrodiolepoxide entstehen. Derzeit erlaubt das nicht kanzerogene Phenanthren eine
solche Bestimmung mehrerer Metabolitenklassen als Biomarker, wobei sich ein Meta-
bolitenprofil aus mehreren Phenolen, Dihydrodiolen und einem aus einem Bay-Regi-
on-Dihydrodiolepoxid gebildeten Tetrol erstellen lsst. Letzteres reflektiert aufgrund
der schon erwhnten Strukturanalogie den wichtigsten metabolischen Aktivierungsweg
fr PAH. Inwieweit die Ausscheidung des Phenanthrentetrols mit einer Bildung von
Dihydrodiolepoxiden kanzerogener PAH wie Benzo[a]pyren bzw. mit der Bildung von
DNA-Addukten als deren Effektmarker assoziiert ist, bedarf weiterer Untersuchungen.
4.2.2 Suszeptibilitt
Fr interindividuelle Unterschiede in der Ausscheidung von PAH-Metaboliten werden
Sequenzvarianten in denjenigen Genen verantwortlich gemacht, die in den PAH-Stoff-
wechsel involviert sind. Vernderte Gene knnen die katalytischen Eigenschaften (bei
vernderter Aminosuresequenz) oder die Menge des kodierten Enzyms beeinflussen
(Alexandrie et al. 2000; Glatt 2004; Kim et al. 2003; Kuljukka-Rabb et al. 2002;
Nerurkar et al. 2000; Rihs et al. 2005; Wu et al. 1998, 2002).
Suszeptibilitt im Zusammenhang mit der Exkretion von 1-Hydroxypyren
Die interindividuellen Unterschiede, die bezglich der Ausscheidung von 1-Hydroxy-
pyren beobachtet werden, knnen grundstzlich durch genetische Polymorphismen der
am Metabolismus von Pyren beteiligten Enzyme hervorgerufen werden, wie geneti-
sche Varianten der CYP-Enzyme (Phase 1) und verschiedene Glutathion-S-Transfera-
sen (GST) (Phase 2) (Autrup 2000; Bartsch et al. 2000). Bei der Untersuchung eines
mglichen Einflusses des CYP1A1-Msp-I-Genotyps auf die Ausscheidung von 1-
Hydroxypyren bei Kokereiarbeitern in Taiwan wurde eine 2fach erhhte 1-Hydroxy-
pyren-Konzentration bei Individuen mit der homozygoten Variante (aa) dieses Geno-
typs im Vergleich zur Gruppe mit Wildtyp (AA) und heterozygoter Variante (Aa)
(p=0,04) gefunden (Wu et al. 1998). Zustzlich wurde ein positiver Trend fr die 1-
Hydroxypyren-Ausscheidung in abnehmender Reihenfolge beobachtet. Dieser war bei
den auf der Ofendecke arbeitenden Beschftigten mit homozygoter Variante als Merk-
mal ausgeprgter als bei denjenigen mit heterozygoter Variante als Merkmal. Bei den
neben dem Ofen arbeitenden Beschftigten war der Trend insgesamt weniger ausge-
prgt, aber ebenfalls bei denjenigen mit homozygoter Variante als Merkmal vorherr-
schender (p<0,001). Zu hnlichen Ergebnissen kommt eine Studie, in der Verkehrspo-
lizisten mit einer PAH-Exposition durch kontaminierte Umgebungsluft in stdtischen
Gebieten untersucht wurden. Bei Polizisten, die weniger als 15 Zigaretten/Tag rauch-
ten und der heterozygoten Variante des CYP1A1-Msp-I-Genotyps zugehrig waren,
wurden hhere Konzentrationen an 1-Hydroxypyren im Harn gefunden als bei Polizis-
ten, die homozygot fr den Referenztyp waren. Demgegenber wurde kein Einfluss
des Genotyps auf die Ausscheidung des 1-Hydroxypyrens festgestellt, wenn die Poli-
zisten entweder Nichtraucher waren oder mehr als 15 Zigaretten/Tag geraucht hatten
(Merlo et al. 1998). In einer Untersuchung von beruflich nicht belasteten Probanden,
die aus Japanern, Hawaiianern und weier Bevlkerung bestand, wurde unter Berck-
sichtigung von Alter, ethnischer Zugehrigkeit und Anzahl der gerauchten Zigaretten
beobachtet, dass Raucher mit heterozygotem CYP1A1-Msp-I-Genotyp eine 2fach
hhere Harnausscheidung an 1-Hydroxypyren aufwiesen als Raucher mit dem Refe-
renztyp (p=0,02). Vergleichbare Resultate wurden in dieser Studie auch fr den
CYP1A1-Ile462Val-Genotyp gefunden (Gen: CYP1A1*2B) (Nerurkar et al. 2000).
Auch in einer mit 162 chinesischen Kokereiarbeitern durchgefhrten Studie wurde eine
erhhte 1-Hydroxypyren-Konzentration im Urin von Trgern der homozygoten
CYP1A1-462Val-Variante beschrieben (Zhang et al. 2001). Demgegenber wurde in
einer Studie mit Kokereiarbeitern in China kein Einfluss des CYP1A1-Ile462Val-Geno-
typs auf die 1-Hydroxypyren-Ausscheidung gefunden (Pan et al. 1998). Eine Untersu-
chung an Arbeitern in einer Aluminiumschmelze zeigte eine nicht-signifikante Zunah-
me der 1-Hydroxypyren-Ausscheidung fr Individuen mit heterozygotem CYP1A1-
Ile462Val-Genotyp (Alexandrie et al. 2000). Die hchsten Harnkonzentrationen an 1-
Hydroxypyren wurden in dieser Studie bei Probanden beobachtet, die zustzlich keine
GSTM1-Expression (Nullgenotyp) aufwiesen. Im Unterschied zu diesen Befunden
wurde berichtet, dass bei Beschftigten in der Aluminiumproduktion kein Einfluss des
CYP1A1Ile462Val-Genotyps nachzuweisen war (Schoket et al. 2001). Auch weitere
untersuchte CYP-Genotypen wie CYP1A1-Msp-I, CYP1B1-Leu432Val, CYP2C9-
Arg144Cys und CYP2C9-Ile359Leu zeigten keinen Einfluss auf die 1-Hydroxypyren-
Ausscheidung der Probanden (Schoket et al. 2001). In einer Publikation wird darauf
hingewiesen, dass fr die 1-Hydroxypyren-Ausscheidung nicht nur das extra-hepati-
sche CYP1A1 in der Lunge beitrgt, sondern auch andere Formen des CYP, insbeson-
dere die in der Leber vorkommenden Formen, die den Pyrenmetabolismus katalysieren
(Alexandrie et al. 2000). Dies wird durch eine Studie an Kokereiarbeitern in Korea
belegt. Der untersuchte CYP1A1-Ile462Val-Polymorphismus zeigte in dieser Untersu-
chung keinen Einfluss, was von den Autoren mit einer deutlich geringeren Expression
des CYP1A1 in asiatischen Populationen im Vergleich zur weien Bevlkerung in
Zusammenhang gebracht wird. Interessanterweise wurde bei den Kokereiarbeitern
aber eine hhere Ausscheidung an 1-Hydroxypyren in Individuen mit c1/c2- oder
c2/c2-Genotyp der CYP2E1 gefunden (Nan et al. 2001). Die vorliegenden Daten deu-
ten darauf hin, dass Individuen mit bestimmten genetischen Varianten des CYP1A1-
und CYP2E1-Gens eine erhhte Kapazitt zur Verstoffwechselung des Pyrens zum 1-
Hydroxypyren aufweisen.
Die Beziehung zwischen GST-Genotypen und der Harnausscheidung von 1-Hydroxy-
pyren ist nur deskriptiver Natur, da die 1-Hydroxypyren-Konzentration aus den ausge-
schiedenen Glucuronid- und Sulfatkonjugaten im Urin bestimmt wird. Eine metaboli-
sche Basis ist nicht ersichtlich, da Phenole keine Substrate fr GST sind; auch gibt es
keine Hinweise dafr, dass das mglicherweise intermedir gebildete Pyren-1,2-oxid
mit Glutathion konjugiert wird. Der Einfluss von GSTM1- und GSTT1-Polymorphis-
men auf die Harnauscheidung von 1-Hydroxypyren als Glucuronid wurde zunchst bei
Rauchern untersucht. Whrend bei Rauchern mit GSTM1-Defizienz (Null-Genotyp)
eine im Vergleich zu Individuen mit positivem GSTM1-Genotyp eine gesteigerte Aus-
scheidung an 1-Hydroxypyren festgestellt wurde, war die Ausscheidung an 1-
Hydroxypyren in GSTT1-positiven Rauchern gegenber solchen mit GSTT1-Defizienz
erhht (Hong et al. 1999). Bei Kokereiarbeitern in Italien wurde eine erhhte Aus-
scheidung an 1-Hydroxypyren, verknpft mit dem GSTM1-Nullgenotyp, gefunden
(Brescia et al. (1999). Diese Beobachtung wird auch durch die schon erwhnte Studie
an Beschftigten in der Aluminiumindustrie gesttzt (Alexandrie et al. 2000). Hinge-
gen wurde bei Arbeitern in einer Aluminiumschmelze eine nicht-signifikante Abnahme
der 1-Hydroxypyren-Ausscheidung bei Individuen bestimmt, die einen GSTM1-Null-
genotyp aufwiesen. Darber hinaus fanden diese Autoren eine Interaktion zwischen
GSTM1 und GSTP1. So zeigten Probanden mit GSTM1-Defizienz eine signifikant
niedrigere 1-Hydroxypyren-Ausscheidung im Vergleich zum GSTM1-positiven Geno-
typ, wenn gleichzeitig der GSTP1-Genotyp-Ile105/Ile105 vorlag (Schoket et al. 2001).
Weitere Untersuchungen an Verkehrspolizisten in Italien (Merlo et al. 1998) und Koke-
reiarbeitern in Schweden (vreb et al. 1998) und in China (Zhang et al. 2001) kom-
men zu dem Ergebnis, dass ein GST-Polymorphismus in den Enzymen GSTM1,
GSTP1 oder GSTT1 keinen oder allenfalls einen marginalen Einfluss auf die 1-
Hydroxypyren-Ausscheidung hat. Die Studie an Kokereiarbeitern in Korea zeigte kei-
nen Einfluss von GSTM1 auf die 1-Hydroxypyren-Ausscheidung, whrend fr
GSTT1-positive Probanden im Vergleich zu GSTT1-Nullgenotypen eine hhere Kon-
zentration von 1-Hydroxypyren im Harn gefunden wurde, die aber statistisch nicht sig-
nifikant war (Nan et al. 2001). Dies steht im Einklang mit Ergebnissen einer Studie an
US-Soldaten in Kuweit (Poirier et al. 1998). Eine neuere Studie an Kokereiarbeitern in
Holland ergab, dass bei beruflicher Exposition gegen PAH weder GSTM1 noch
GSTT1 einen Einfluss auf die Ausscheidung von 1-Hydroxypyren im Harn haben (van
Delft et al. 2001).
Interessanterweise zeigte die Auswertung einer jngeren koreanischen Studie, die an
661 Probanden ohne berufliche PAH-Exposition durchgefhrt wurde, nach Adjustie-
rung fr Rauchen und Lebensstil, dass die GSTT1-Trger gegenber den Probanden
mit GSTT1-Nullgenotyp einen1,5fach hheren 1-Hydroxypyren-Spiegel im Urin auf-
wiesen (p<0,05). Fr GSTT1-Trger mit nicht vorhandenem GSTM1-Gen (GSTM1*0)
verstrkte sich dieser Trend, d.h. der 1-Hydroxypyren-Spiegel war um den Faktor 2
erhht. Andere einzeln untersuchte Polymorphismen in den Genen CYP1A1, CYP1B1
und fr GSTM1 hatten dagegen keinen Einfluss auf die 1-Hydroxypyren-Exkretion
(Yang et al. 2003).
Suszeptibilitt im Zusammenhang mit der Exkretion von Hydroxyphenanthrenen
In einer Reihe von Studien wurden Phenanthren-Metaboliten fr das humane Biomo-
nitoring von PAH benutzt (der Begriff Hydroxyphenanthrene und Phenanthrole wird in
der Literatur synonym benutzt). Phenanthren kann zu fnf verschiedenen Phenolen
(1-, 2-, 3-, 4- und 9-Hydroxyphenanthren), drei trans-Dihydrodiolen (1,2-, 3,4- und
9,10-Dihydroxydihydrophenanthren) und dem Phenanthrentetrol als Hydrolyseprodukt
des anti-Phenanthren-1,2-dihydrodiol-3,4-oxids metabolisiert werden, die vorzugswei-
se in Form ihrer Sulfate und Glucuronide ausgeschieden werden (Boyland und Sims
1962 a, b, c; Boyland und Wolf 1950; Grimmer et al. 1991 b; Hecht et al. 2003;
Lertratanangkoon et al. 1982; Sims 1962; Struble et al. 1986). Ein signifikanter Zu-
sammenhang zwischen der Exkretion von Phenanthrenmetaboliten und dem Gehalt
von 1-Hydroxypyren im Urin wurde gefunden (Mannschreck et al. 1996).
Da Phenanthren an drei verschiedenen Moleklregionen oxidiert werden kann und zu
einem erheblich hheren Anteil als Pyren durch mikrosomale Epoxidhydrolasen zu
Dihydrodiolen umgesetzt wird, liefert sein Harnmetaboliten-Profil auch Informationen
zur Balance der an diesen Prozessen beteiligten Enzyme. Verschiedene CYP-Formen
weisen unterschiedliche Regiospezifitten fr die Oxidation des Phenanthrens auf
(Jacob et al. 1996 a, b). Dementsprechend lsst sich die Induktion einzelner CYP-For-
men an dem Profil der im Harn ausgeschiedenen Phenanthrenmetaboliten erkennen; so
wurde z. B. eine Induktion von CYP1A2 fr Zigarettenraucher nachgewiesen (Jacob
et al. 1999 a) und zwar aufgrund des vernderten Verhltnisses der Oxidation des
Phenanthrens an der 3,4-Position zur 1,2-Position. Zustzlich wird beschieben, dass die
Phenanthrentetrole, die infolge der weiteren Metabolisierung des 1,2-Dihydrodiols ent-
stehen, ein wertvoller Biomarker sind, der nicht nur den biologischen Stoffwechselweg
der PAH aufzeigt, sondern auch in der Lage ist, im Urin feine Unterschiede in der
Exposition gegen Phenanthren in einem vorgegebenen PAH-Gemisch zu detektieren
(Hecht et al. 2003).
Der Einfluss von genetischen Polymorphismen auf die Metabolisierung des Phenan-
threns ist bisher wenig untersucht. In einer Studie, die 170 PAH-exponierte Beschf-
tigte einschloss, wurde gefunden, dass Trger der CYP1A1-Variante 3801TC, welche
mit der bereits erwhnten heterozygoten Variante CYP1A1-Msp-I (Merlo et al. 1998;
Wu et al. 1998) identisch ist, eine 1,6fach erhhte, signifikante Hydroxyphenanthren-
Konzentration gegenber der homozygoten Referenz (3801TT; p=0,03) aufweisen
(Rihs et al. 2005). Darber hinaus zeigte die heterozygote GSTP1-Variante 114AV
gegenber der Referenz GSTP1-114AA sowohl fr Hydroxyphenanthren eine 2fach
erhhte (p=0,001) als auch fr 1-Hydroxypyren eine 1,5fach erhhte Ausscheidung
(p=0,03). In der gleichen Studie ergab sich auch fr die beiden homozygoten Varian-
ten der mikrosomalen Epoxidhydrolase EPHX1 113His/113His sowie 139Arg/Arg ein
Effekt auf die Exkretion. Die Variante 113His/113His war mit einer erhhten (p=0,05)
und die Variante 139Arg/139Arg mit einer reduzierten (p=0,02) Hydroxyphenanthren-
Ausscheidung im Vergleich zu den Referenzgenotypen 113Tyr/113Tyr und
139His/139His assoziiert.
Suszeptibilitt im Zusammenhang mit der Phenanthrentetrol-Exkretion
Whrend die Phenanthrole Biomarker der Detoxifikation darstellen, handelt es sich bei
den Phenanthrentetrolen um Biomarker der metabolischen Aktivierung, deren Anwen-
dung krzlich beschrieben wurde (Hecht et al. 2003, 2005). In einer Studie mit 346
Rauchern wurden ebenfalls elf verschiedene Polymorphismen verschiedener PAH-
metabolisierender Enzyme darauf untersucht, inwieweit sie einen Einfluss auf den
Quotienten der im Harn bestimmten Metaboliten r-1,t-2,3,c-4-Tetrahydroxy-1,2,3,4-
tetrahydrophenanthren/3-Hydroxyphenanthren aufweisen (Hecht et al. 2006). Hierbei
zeigte der hetero- und homozygote CYP1A1-Ile462Val-Polymorphismus eine signifi-
kante Assoziation (p=0,02) mit einem erhhten Phenanthrentetrol/3-Hydroxyphenan-
thren-Quotienten. Im Gegensatz dazu waren zwei heterozygote Polymorphismen im
CYP1B1-Gen (Arg48Gly und Ala119Ser) mit einem signifikant erniedrigtem Phenan-
threntetrol/3-Hydroxyphenanthren-Quotienten assoziiert (p<0,02).
4.3 Wirkung auf Haut und Schleimhute
Hautkontakt mit geringen Mengen Naphthalin (Tragen von Kleidung, die mit Motten-
kugeln versehen worden war) bewirkte bei empfindlichen Probanden Reizung bis aus-
geprgte Dermatitis (Gerade 1960 a). Der Kontakt mit Kleidern, die Mottenkugeln aus-
gesetzt waren, kann schwere Erytheme hervorrufen. Arbeiter zeigten Hautentzndun-
gen an Hnden, Armen, Beinen und Unterleib nach Kontakt mit 1 bis 1,5% Naphtha-
lin enthaltendem Minerall oder eine Dermatitis nach Hautkontakt mit Naphthalin. Zu
Augenirritationen kann es ab Luftkonzentrationen von 15 ml Naphthalin/m
3
kommen
(Begrndung Naphthalin 1995).
Bei einem Mann mit abschilfernder Dermatitis trat Heilung ein, nachdem kein Kontakt
mehr mit Naphthalin bestand (Fanburg 1940). Flle hmolytischer Anmie wurden bei
Neugeborenen beobachtet, deren Windeln vorher zusammen mit Mottenkugeln aufbe-
wahrt worden waren (Anziulewicz et al. 1959). Wiederholte Exposition gegen Naph-
thalindmpfen oder Naphthalinstaub fhrte zu Geschwrbildung an der Cornea und zu
Linsentrbung sowie Katarakten (Sandmeyer 1981).
4.4 Allergene Wirkung
Anthracen steigert die Empfindlichkeit der Haut gegenber Sonneneinstrahlung
(Gerade 1960 a). Bei einem 43jhrigen Patienten, der an einer akuten rezidivierenden
Dermatitis litt, wurde im Epikutantest eine positive Reaktion auf Naphthalin nachge-
wiesen. Einer von 598 Patienten, die aufgrund von Dermatosen begutachtet wurden,
reagierte im Epikutantest positiv auf Naphthalin. Die Hufigkeit einer Allergie auf
Naphthalin wird mit 0,13% angegeben (Begrndung Naphthalin 1995).
4.5 Reproduktionstoxizitt
Es liegen zwei Berichte ber eine transplazentare Naphthalinvergiftung vor
(Anziulewicz et al. 1959; Zinkham und Childs 1958). In beiden Fllen hatten werden-
de Mtter ber lngere Zeit im letzten Trimenon der Schwangerschaft naphthalinhalti-
ge Mottenkugeln gelutscht oder gekaut. Sieben Stunden bzw. drei Tage nach der
Geburt trat bei den Neugeborenen eine hmolytische Anmie mit Gelbsucht auf.
4.6 Genotoxizitt
Genotoxische Wirkungen von PAH wurden in Humanzellen in Kultur und in vivo
gefunden (Glatt 2005).
4.7 Kanzerogenitt
PAH sind komplexe Stoffgemische mit mehreren hundert verschiedenen Einzelverbin-
dungen, die von der International Agency for Research on Cancer (IARC) im Jahr 2005
neu bewertet wurden (Straif et al. 2005). Als einzelner Stoff ist bislang nur Benzo-
[a]pyren als gesichertes Humankanzerogen eingestuft (IARC Gruppe 1). Als wahr-
scheinliche Kanzerogene fr den Menschen (IARC Gruppe 2A) gelten ferner Cyclo-
penta[cd]pyren, Dibenzo[a,h]anthracen und Dibenzo[a,l]pyren. Teerle (lige Flssig-
keiten, die bei der fraktionierten Destillation von Steinkohlenteer entstehen; auch als
Kreosot bezeichnet) enthalten Gemische von PAH und werden ebenfalls als wahr-
scheinliche humane Kanzerogene eingestuft (IARC Gruppe 2A).
Als gesichert krebserzeugende Expositionsumstnde (IARC Gruppe 1) hat die IARC
2005 Ttigkeiten bei der Gaserzeugung aus Kohle, Koksherstellung, Kohleteerdestilla-
tion, als Schornsteinfeger, Straenbauer und Dachdecker beim Umgang mit Steinkoh-
lenteer und bei der Aluminiumerzeugung eingestuft (Straif et al. 2005).
4.7.1 Arbeitsplatzbezug
Eine berufliche Exposition gegen PAH erfolgt in der Regel ber die Atemwege durch
Verbrennungsabgase aus organischem Material und ber die Haut durch Steinkohlen-
teerprodukte. In zahlreichen Studien wurde in Industriezweigen mit hoher PAH-Belas-
tung eine signifikante Erhhung verschiedener Krebsarten vorrangig in Lunge, Harn-
blase und Haut nachgewiesen. Bei bestimmten Ttigkeiten liegt auch heute noch die
berufliche PAH-Exposition weit ber der Belastung durch Tabakrauchen. Boffetta et al.
(1997) geben fr verschiedene Industriezweige eine bersicht ber die relativen
Krebsrisiken durch PAH-Expositionen an. Eine Review von Bosetti et al. (2006)
knpft an die Review von Boffetta et al. an und wertet die bis zum Jahr 2005 publi-
zierten Studien fr Krebs der Atemwege und ableitenden Harnwege aus. Ferner stellen
Armstrong et al. (2004) in ihrer Review eine Quantifizierung der Dosis-Wirkungs-
Beziehungen fr Lungenkrebs in den verschiedenen Industriezweigen auf. Berck-
sichtigt ist eine in den Studien vorgenommenen Adjustierung auf Rauchen.
In Deutschland werden mehr als 200000 Arbeitspltze mit einer beruflich verursach-
ten PAH-Belastung angenommen, die ber der Grundbelastung in der Umwelt liegt
(CAREX 2007). Hohe PAH-Belastungen knnen an Arbeitspltzen in Kokereien,
Aluminium-, Eisen- und Stahlwerken, in Steinkohlenteer, Pech, Kreosot, Minerall,
Ru und Carbon Black produzierenden und verarbeitenden Industriebetrieben sowie in
Fertigungsbetrieben von Feuerfestmaterial und Graphitelektroden auftreten. Dabei
knnen sehr groe Spannbreiten von mglichen PAH-Konzentrationen auftreten. Im
Rahmen einer krzlich in Deutschland durchgefhrten multizentrischen Studie wurden
im Zeitraum von 1999 bis 2003 zahlreiche Messungen zu PAH-Expositionen an
Arbeitspltzen in vier verschiedenen Industriezweigen (Herstellung von Feuerfestma-
terial und Graphitelektroden, Kokereien und Beschickung von Konvertern) durchge-
fhrt. Gegenber PAH insgesamt (Summe der im Atembereich gemessenen Konzen-
trationen der partikelgebundenen und gasfrmigen 16 USEPAPAH) ergaben sich mitt-
lere Belastungen von 13,5 mg/m
3
bei der Herstellung von Graphitelektroden,
22,5 mg/m
3
bei der Herstellung von Koks, 30,2 mg/m
3
bei der Herstellung von Feuer-
festmaterial und 576 mg/m
3
bei der Beschickung von Konvertern (Rihs et al. 2005).
Straenbauarbeiter und Dachdecker hatten vor allem in der Vergangenheit durch die
Verwendung von Steinkohlenteer hohe PAH-Belastungen. Im Straenbau wurde Teer
1984 in Deutschland verboten. Die allgemeine Verwendung von Steinkohleteer wurde
mit der Teerlverordnung vom 27. Mai 1991 und der im Jahr 2002 geltenden Chemi-
kalien-Verbotsverordnung erheblich eingeschrnkt. Teer wurde im Straenbau durch
Bitumen als Bindemittel ersetzt, wodurch die berufliche PAH-Belastung deutlich redu-
ziert wurde. Darber hinaus vernderte sich mit der Herausnahme des Teers auch die
Zusammensetzung der Dmpfe und Aerosole. Belastungen durch Teer sind dennoch im
Straenbau gelegentlich mglich, z. B. bei Sanierungsmanahmen von teerhaltigen
Straen. Solche Teerbelastungen knnen im Biomonitoring durch hohe Werte von
PAH-Metaboliten deutlich erkannt werden (Schott et al. 2003).
Bei Schornsteinfegern beobachtete Sir Percival Pott (1775) bereits vor mehr als 200
Jahren eine ungewhnlich hohe Inzidenz des Scrotumkarzinoms (Schornsteinfeger-
Krebs). In spteren Arbeiten wird ber das gehufte Auftreten von neoplastischen Ver-
nderungen der Atemwegsorgane und anderer Organe bei dieser Berufsgruppe berich-
tet (Cadez 1983; Gustavsson et al. 1987, 1988; Hogstedt et al. 1982). Deutlich erhhte
Hautkrebsinzidenzen (Scrotum) sowie neoplastische Vernderungen in anderen Orga-
nen wurden in der Folge auch bei weiteren Berufsgruppen mit einer Steinkohlenteer-,
Steinkohlenteerpech- oder Kreosot-Exposition in Holzimprgnieranstalten beobachtet
(Karlehagen et al. 1992). Von historischer Bedeutung sind auch die 1936 und 1947
publizierten Studien zur Mortalitt an Lungenkrebs und Larynxkarzinomen anhand
von Berufsangaben auf Todesbescheinigungen (Kennaway und Kennaway 1936,
1947).
Neben den signifikant erhhten Krebsinzidenzen fr Lunge, Harnblase und Haut in
typischen Industrien mit hoher PAH-Exposition finden sich in der Literatur Hinweise
auf Krebs in weiteren Organen wie Niere, Larynx, Oesophagus und Magen. Die Befun-
de sind jedoch weniger konsistent und knnen unter dem Gesichtspunkt von mglichen
Mischexpositionen und der insgesamt unzureichenden Datenlage nicht abschlieend
bewertet werden. Es gibt jedoch Hinweise, dass auch eine Assoziation zum Larynx-
karzinom vorliegen knnte.
Koexpositionen knnen unter verschiedenen Expositionsumstnden, insbesondere
durch heterozyklische Amine, aromatische Amine und Benzol auftreten. In einer Stu-
die an 6423 Mnnern, die zwischen 1954 und 1997 in einer Aluminiumhtte beschf-
tigt waren, korrelierten die kumulativen Expositionsvariablen fr Benzo[a]pyren und
benzollsliche Stoffe auerordentlich gut (r=0,94) (Friesen et al. 2007).
4.7.2 Lungenkrebs
Die Lunge gilt als wesentliches Zielorgan bei luftgetragenen beruflichen PAH-Belas-
tungen. Eine Erhhung der Lungenkrebssterblichkeit durch PAH wurde bereits von
Kennaway und Kennaway in ihren 1936 und 1947 verffentlichten Studien fr
Beschftigte in Kokereien, Gasarbeiter, Straenbauarbeiter und Asphaltierer berichtet.
In der Folge wurden zahlreiche Studien zur Untersuchung des relativen Lungenkrebs-
risikos durch PAH durchgefhrt, von denen als grere Studien (mit mindestens
100 Lungenkrebsfllen) die Arbeiten von Andjelkovich et al. (1990, 1992, 1994),
Armstrong et al. (1994), Boffetta et al. (2003), Constantino et al. (1995), Doll et al.
(1972), Gibbs (1985), Hammond et al. (1976), Hurley et al. (1983), Rockette und
Arena (1983), Romundstad et al. (2000), Sorahan et al. (1994), Swaen et al. (1991) und
Xu et al. (1996) zu nennen sind.
In Deutschland wurde 1989 Lungenkrebs durch Kokereirohgase in die Liste der
Berufskrankheiten (BK 4110) aufgenommen und eine Technische Richtkonzentration
(TRK) fr Benzo[a]pyren eingefhrt (bis 2005). 1998 gab der rztliche Sachverstn-
digenbeirat Berufskrankheiten beim Bundesministerium fr Arbeit und Soziales die
Empfehlung, in die Anlage der Berufskrankheiten-Verordnung folgende neue Berufs-
krankheit aufzunehmen: Lungenkrebs durch polycyklische aromatische Kohlenwas-
serstoffe bei Nachweis der Einwirkung einer kumulativen Dosis von mindestens 100
Benzo[a]pyren-Jahren [(mg/m
3
) Jahre] (BMA 1998).
Eine Erhhung des relativen Lungenkrebsrisikos durch berufliche PAH-Belastungen
wird auch in den Metaanalysen besttigt (Armstrong et al. 2004; Bosetti et al. 2006).
Die geschtzte Risikoerhhung ist jedoch vom Industriezweig abhngig und in den
meisten Branchen moderat.
In einer Arbeit wurden insgesamt 39 Kohortenstudien aus der Zeit zwischen 1972 bis
2001 analysiert (Armstrong et al. 2004). Die Studien stammten aus neun verschiede-
nen Industriezweigen: Kokereien (10 Kohortenstudien), Gaserzeugung aus Kohle (4),
Aluminiumschmelzen (8), Kohleanodenherstellung (4), Asphaltverarbeitung (3), Teer-
erzeugung (3), Schornsteinfeger (2), thermoelektrische Kraftwerke (3) und Carbon
Black-Herstellung (2). Die Gesamtzahl der betrachteten Lungenkrebsflle liegt bei
ber 2800. Im Gegensatz zu anderen Metaanalysen wurden auch quantitative Dosis-
Wirkungsbeziehungen bercksichtigt. Die Risikoschtzungen werden als sogenannte
URR (Unit Relative Risks) angegeben, d.h. als RR (relative Risiken) bezogen auf
100 mg/m
3
Benzo[a]pyren-Jahre.
Das relative Lungenkrebsrisiko war signifikant erhht (1,2 bei 100 mg/m
3
Benzo-
[a]pyren-Jahren, 95%-KI: 1,111,29). Dies bedeutet, dass bei einer kumulativen
Exposition von 100 mg/m
3
Benzo[a]pyren-Jahren das Lungenkrebsrisiko um 20%
steigt. Die Autoren weisen jedoch darauf hin, dass die Schtzung aufgrund von Hetero-
genitten, z. B. Unterschieden in der Exposition, zwischen den Branchen vorsichtig zu
interpretieren ist und Risikoschtzungen branchenspezifisch betrachtet werden sollten.
Als mgliche Erklrung fr die Heterogenitt wird diskutiert, dass die vorkommenden
PAH-Gemische in den verschiedenen Industriezweigen eine unterschiedliche Zusam-
mensetzung haben und entsprechend eine unterschiedliche Kanzerogenitt aufweisen
(Armstrong et al. 2004). Fr die Koks-, Gas- und Aluminiumherstellung sind die rela-
tiven Lungenkrebsrisiken relativ konsistent erhht. Fr die drei Industrien zusammen-
genommen ergab sich ein erhhtes relatives Lungenkrebsrisiko von 1,17 bei 100 mg/m
3
Benzo[a]pyren-Jahren (95%-KI: 1,121,22). Fr die anderen sechs Branchen ist bis
auf die Branche Carbon Black (URR=0,00; 95% KI: 0 bis ber 1000) das relative Lun-
genkrebsrisiko wesentlich hher, aber aufgrund kleinerer Fallzahlen und geringer
Expositionshhen deutlich weniger zuverlssig (URR=4,30 fr Kohleanodenherstel-
lung, 95%-KI: 0,8122,79, bis URR= ber 1000 fr thermoelektrische Kraftwerke,
95%-KI: 0 bis weit ber 1000). Fr Asphaltarbeiter und Schornsteinfeger ergab sich
eine signifikante relative Risikoerhhung; fr Kohleanodenherstellung, Teererzeu-
gung, Kraftwerke und Carbon-Black-Herstellung hingegen nicht. Insgesamt zeigen die
Expositionen in den analysierten Studien eine groe Spannbreite und liegen zwischen
0,75805 mg/m
3
Benzo[a]pyren-Jahren (dies entspricht etwa einer Luftkonzentration
von 0,0440 mg/m
3
). Aus den Ergebnissen wurde gefolgert, dass eine inhalative beruf-
liche Exposition mit PAH einen signifikanten Einfluss auf das Lungenkrebsrisiko hat.
Das durchschnittliche relative Risiko fr 100 mg/m
3
Benzo[a]pyren-Jahre (URR)
betrug 1,2 (95% CI 1,111,29) (Armstrong et al. 2004).
In einer Metaanalyse wurden Kohortenstudien von 1997 bis 2005 analysiert (Bosetti
et al. 2006). Ferner wurden fr die Risikoschtzungen auch Studien einbezogen, die
bereits in der Review von Boffetta et al. (1997) bewertet wurden. Insgesamt wurden
die Ergebnisse von 57 Kohortenstudien aus zehn verschiedenen Branchen zusammen-
gefasst. Im Gegensatz zu Armstrong et al. wurden jedoch keine Dosis-Wirkungsbezie-
hungen fr PAH-Expositionen und relatives Lungenkrebsrisiko geschtzt, sondern die
gepoolten Risikoschtzungen als gewichtetes Mittel der SMR (standardisierte Morta-
littsquotienten) berechnet. Ferner zeigten sich zwischen den analysierten Studien
deutliche Heterogenitten in den ermittelten relativen Risiken auch innerhalb der Bran-
chen. Ein signifikant erhhtes relatives Lungenkrebsrisiko wurde fr Asphaltarbeiter
(RR=1,14; 95%-KI: 1,071,22), Carbon-Black-Herstellung (RR=1,30; 95%-KI:
1,061,59), Eisenhtten (RR=1,40; 95%-KI: 1,321,49), Dachdecker (RR=1,51;
95%-KI: 1,281,78), Kokereien (RR=1,58; 95%-KI: 1,982,64) und Gaserzeugung
aus Kohle (RR=2,29; 95%-KI: 1,982,64) gefunden. Die Ergebnisse fr Kokereien
und fr die Gaserzeugung untersttzen die Ergebnisse von Armstrong et al. (2004). Fr
Aluminiumschmelzen fanden Bosetti et al. (1997) im Gegensatz zu Armstrong et al.
(2004) jedoch keine signifikante Risikoerhhung (RR=1,03; 95%-KI: 0,951,11). Die
Ergebnisse fr die Carbon-Black-Herstellung sind nach Angaben von Bosetti et al.
(1997) mit Einschrnkung zu interpretieren, da die betrachteten Daten wenig belastbar
sind. Im Zusammenhang mit der Gasherstellung und den Eisenhtten wird die Rolle
von Begleitsubstanzen diskutiert, die an der Lungenkrebsentstehung beteiligt sein
knnten. Bei der Gasherstellung sind dies z. B. Schwermetalle und Quarz und in Eisen-
und Stahlhtten Schwermetalle, Quarz und Asbest. Fr die Kohleanodenherstellung,
Teerdestillation und fr Kreosote wurde keine signifikante Erhhung des relativen
Lungenkrebsrisikos festgestellt.
Fayerweather (2007) aktualisierte eine Metaanalyse fr Straenbauer und Dachdecker
von Partanen und Boffetta (1994). Fr Dachdecker wurde eine signifikante Risikoer-
hhung gefunden (RR=1,67; 95%-KI: 1,392,20), die nach Adjustierung gegen Teer
nicht mehr signifikant war (RR=1,10; 95%-KI: 0,911,33). Das erhhte relative Lun-
genkrebsrisiko von Dachdeckern und Straenbauern wurde auf PAH-Expositionen im
Teer zurckgefhrt.
Insgesamt lsst sich aus den vorliegenden epidemiologischen Studien auf der Basis
eines relativen Risikos ein Zusammenhang zwischen beruflichen PAH-Expositionen
und Lungenkrebs ableiten. Die Metaanalyse von Armstrong et al (2004) zeigte eine sta-
tistisch signifikante Dosis-Wirkungsbeziehung zwischen kumulativer PAH-Exposition
(in Benzo[a]pyren-Jahren) und Lungenkrebs, welche in der Untergruppe der rauch-
adjustierten Studien tendenziell sogar noch strker war als im Durchschnitt aller Stu-
dien.
4.7.3 Blasenkrebs
Bereits seit den 1990er Jahren besteht Evidenz, aufgrund epidemiologischer Befunde
in Einzelstudien einen Zusammenhang von beruflicher PAH-Exposition und Harn-
blasenkrebs anzunehmen (z. B. Pesch et al. 2000 a; Steineck et al. 1990). Dies wurde
durch Reviews (z. B. Boffetta et al. 1997), Metaanalysen (z. B. Armstrong et al. 2003;
Bosetti et al. 2006; Gaertner und Theriault 2002) und gepoolte Analysen (z. B.
Kogevinas et al. 2003) gesttzt, auch wenn der Zusammenhang weniger klar ausge-
prgt ist als mit Lungenkrebs. Die Ursachen hierfr knnen verschieden sein. Insbe-
sondere ist zu beachten, dass durch die geringere Inzidenz von Blasenkrebs im Ver-
gleich zu Lungenkrebs in Kohortenstudien kleinere Fallzahlen beobachtet werden, die
zu einer greren Unsicherheit bei der Risikoschtzung fhren.
Boffetta et al. (1997) bezogen die Risikoerhhungen fr Blasenkrebs vorwiegend auf
Expositionen gegen Steinkohlenteer und Steinkohlenpech. Hierbei sind jedoch Begleit-
expositionen durch aromatische Amine mglich, die beim Lungenkrebs keinen rele-
vanten Confounder darstellen. In einer Metaanalyse (Bosetti et al. 2006) werden erhh-
te Risiken in der Gaserzeugung aus Kohle (gepooltes RR=2,39; 95%-KI: 1,364,21)
besttigt, jedoch geringere Risiken in der Aluminiumproduktion (gepooltes RR=1,29;
95%-KI: 1,121,49) und bei der Stahlerzeugung (gepooltes RR=1,29; 95%-KI:
1,061,57) gezeigt. Eine weitere Metaanalyse von 40 Kohortenstudien unter Htten-
werkern ergab ein insgesamt nur geringes, signifikant erhhtes relatives Risiko von
1,11 (95%-KI: 1,051,17), das sich nur leicht erhhte, wenn die Analyse auf Studien
beschrnkt wurde, fr die geeignetere Expositionsabschtzungen vorlagen (Gaertner
und Theriault 2002).
In einer Metaanalyse von 27 Kohortenstudien wurde ein Zusammenhang von berufli-
cher PAH-Belastung und Harnblasenkrebs gefolgert und ein signifikant erhhtes relati-
ves Risiko von 1,33 (95%-KI: 1,161,52) geschtzt (Armstrong et al. 2003). Auffllig
sind starke Einflsse der zugrunde gelegten Modellannahmen auf die Risikoschtzer.
Kohortenstudien bei Arbeitspltzen mit moderater PAH-Belastung ergaben weniger
klare Hinweise auf ein PAH-assoziertes Blasenkrebsrisiko. Das relative Risiko fr 48
Flle mit Harnblasenkrebs wurde in einer Kohorte von 7928 Straenbauarbeitern
ermittelt (Burstyn et al. 2007). Durch die geringe Fallzahl konnten jedoch potenzielle
Confounder nicht ausreichend kontrolliert werden. Kumulative PAH-Belastung war
nicht mit einer erhhten Blasenkrebsinzidenz assoziiert, allerdings zeigte sich eine Ver-
dopplung des relativen Risikos bei hheren Konzentrationen.
Bevlkerungskohorten untersttzen die Annahme eines Zusammenhangs von berufli-
cher PAH-Belastung und Harnblasenkarzinomen nur bedingt. So wurde in einer nie-
derlndischen Kohorte durch Experteneinschtzung der einzelnen Berufsbiographien
ein relatives Risiko (Incidence Rate Ratio) von 1,24 (95%-KI: 0,682,27) fr hohe
PAH-Belastung ermittelt (Zeegers et al. 2001). In allen 19 Fllen wurde ein Rauchver-
halten verneint. Das relative Blasenkrebsrisiko war unter aktuellen Rauchern etwas
hher, aber nicht signifikant (RR=1,61; 95%-KI: 0,624,17). Erfolgte eine Adjustie-
rung nach Belastung durch z. B. aromatische Amine, lag das relative Risiko niedriger
(RR=1,18; 95%-KI: 0,622,24).
Auch verschiedene Fall-Kontroll-Studien geben Hinweise auf ein erhhtes relatives
Blasenkrebsrisiko durch berufliche PAH-Belastung. PAH-Belastung wird dort in der
Regel durch eine Job-Expositions-Matrix (JEM) abgeschtzt. So war in einer der bis-
her grten Fall-Kontroll-Studien, der deutschen multizentrischen Nieren- und Uro-
thel-Carcinom-Studie (MURC-Studie), eine hohe PAH-Belastung (ermittelt mit einer
britischen JEM von Pannett et al. 1985) mit einem signifikanten relativen Urothelkar-
zinomrisiko verbunden (OR=1,6; 95%-KI: 1,12,3) (Pesch et al. 2000 a). Eine
gepoolte Analyse europischer Fall-Kontroll-Studien (Kogevinas et al. 2003), die auch
die deutschen Daten einbezieht, ermittelte mit der finnischen JEM fr eine hohe PAH-
Belastung ebenfalls ein signifikantes relatives Risiko von 1,23 (95%-KI: 1,071,40).
Die Autoren weisen daruf hin, dass in der angewandten JEM aromatische Amine als
Expositions-Kategorie nicht bercksichtigt wurden. Eine weitere groe Fall-Kontroll-
Studie in British Columbia mit 1129 Blasenkrebsfllen und 2998 Krebskontrollen
(auer Lungenkrebs) ergab erhhte relative Risiken in der Verhttung von Nichteisen-
erz, darunter in der Aluminiumerzeugung, jedoch erfolgte keine quantitative Abscht-
zung der PAH-Exposition (Band et al. 2005).
Die relativ konsistenten Befunde untersttzen eine Assoziation zwischen PAH-Ex-
position und Krebs der ableitenden Harnwege, auch wenn in Steinkohlenteer-Pro-
dukten aromatische Amine wie 2-Naphthylamin enthalten sind (Grimmer et al. 1987;
Hofmann und Boente 1933).
4.7.4 Nierenzellkrebs
Die Niere ist derzeit kein gesichertes Zielorgan fr eine berufliche PAH-Belastung.
Eine Beschftigung in der Kokserzeugung wurde von der IARC als carcinogenic to
humans (Kategorie 1) eingestuft, wobei auch die Niere als mgliches Zielorgan auf-
gefhrt wurde (IARC 1987).
In der Vergangenheit fanden sich in Kohortenstudien fr Beschftigte in Industrie-
zweigen mit hoher PAH-Exposition keine deutlichen Hinweise auf ein PAH-assoziier-
tes relatives Nierenkrebsrisiko. Hinweise auf ein erhhtes Risiko fanden sich in ver-
schiedenen Fall-Kontroll-Studien nach beruflichem Kontakt mit Teer, Pech und Stein-
kohlenteerprodukten (Mandel et al. 1995; Partanen et al. 1991; Sharpe et al. 1989;
Siemiatycki 1991; Siemiatycki et al. 1987, 1988). Dieses war jedoch nicht immer sig-
nifkant (siehe McLaughlin et al. 1984, 1985). In einer kleineren Fall-Kontroll-Studie
wurde fr Arbeiter in lraffinerien, die mit Kohlenwasserstoffen (k. w. A.) in Kontakt
gekommen waren, eine schwache Assoziation fr ein erhhtes relatives Nierenkrebs-
risiko bei Mnnern gefunden (Kadamani et al. 1989). In einer dnischen Fall-Kontroll-
Studie wurden erhhte relative Risiken berichtet, u.a. in lraffinerien (Mellemgaard
et al. 1994). In der vergleichsweise groen deutschen Fall-Kontroll-Studie fanden sich
anhand einer britischen JEM (Job Exposure Matrix) marginal erhhte relative Risiken
fr eine PAH-Belastung nach Expositionsabschtzung (Pesch et al. 2000 b).
Bei einer Reihe von Studien waren Expositionen gegen Benzol und anderen Lsungs-
mitteln nicht auszuschlieen oder sogar bekannt. Boffetta et al. (1997) hielten daher
die epidemiologische Beweislage allein fr nicht berzeugend. Die unzureichenden
Daten aus Kohortenstudien sowie ein nach Adjustierung auf Rauchen signifikant
erhhtes Risiko fr Lungen- und Harnblasenkrebs (Pesch et al. 2000 b; van Dijk et al.
2006), zeigen, dass die Evidenz fr Nierenzellkrebs weiterhin unzureichend geklrt ist.
4.7.5 Hautkrebs
Die Haut ist ein wichtiges Zielorgan fr die dermale Belastung gegen PAH, insbeson-
dere in Form von Teer und aus Steinkohlenteer gewonnenen Produkten. Bsartige
Hauttumoren entwickeln sich in der Regel ber prkanzerse Vorstadien, sogenannte
Teerkeratosen, die als solche bereits Berufserkrankungen darstellen knnen.
Sir Percival Pott beobachtete vor mehr als 200 Jahren eine ungewhnlich hohe Inzi-
denz des Scrotumkarzinoms bei Schornsteinfegern (Pott 1775). Erkrankungen an Skro-
talkrebs wurden nach diesen ersten Beobachtungen von Pott in groer Zahl auch bei
beruflichem Umgang mit PAH-haltigen Derivaten aus Steinkohlenteer, bei Baumwoll-
spinnern nach Kontakt mit Spindellen (Henry 1946), in Automobilwerksttten
(Waterhouse 1971) und in der Metallindustrie nach Exposition gegen nicht wasser-
mischbaren Minerallen, wie Bohr-, Schneid-, Khl- und Zylinderlen, beobachtet
(Jrvholm und Lavenius 1987; Roush et al. 1964; Waldron et al. 1984). Bei Personen,
die gegen PAH durch Minerall exponiert waren, wurde ein erhhtes Risiko fr Platten-
epithelkarzinome der Haut (OR=1,46; 95%-KI: 1,062,05) gefunden (Kubasiewicz
et al. 1991). Eine Verdoppelung des relativen Risikos fr Melanome, die in einer Stu-
die ermittelt wurde (Bell et al. 1987), war in anderen Studien allerdings nicht zur beob-
achten und ist mglicherweise auf einen Observerbias zurckzufhren (intensivere
und hufigere Untersuchung der Haut bei PAH-Exponierten, wegen des bekannten
Risikos der Entwicklung von Plattenepithelkarzinomen und deren Vorstufen; Letzel
und Drexler 1998).
Belastbare neuere Kohortenstudien zum Hautkrebsrisiko durch PAH bzw. Steinkoh-
lenteer und seine Produkte sind nicht bekannt. bersichten ber epidemiologische
Befunde zum Hautkrebs nach Exposition gegen PAH-haltigen Materialien, insbeson-
dere gegen Teer, Pech, Kreosot und weiteren aus Steinkohlenteer gewonnenen Pro-
dukten, wurden u.a. von Bolm-Audorff (1998), vom CBEAP (1972) sowie von der
IARC (1973, 1983, 1984 a, b, 1987) vorgelegt.
Da alle Hautkrebsformen, mit Ausnahme der Melanome, d.h. Plattenepithelzellkar-
zinome und ihre Vorstufen sowie Basaliome, hufig nicht tdlich verlaufen und
daher in der Regel nicht in Krebsregistern dokumentiert werden, sind Kohortenstu-
dien hinsichtlich des relativen Hautkrebsrisikos fr nichtmelanozytren Hautkrebs
(Non-Melanoma Skin Cancer; NMSC) kaum aussagekrftig. Wichtige Kofaktoren
fr NMSC und Melanome sind Exposition gegen UV-Licht und der Hautttyp
(Grodstein et al. 1995; Ramos et al. 2004; Veierod et al. 2003). Die Rolle der Haut-
hygiene ist weniger bekannt. Es ist weiterhin schwierig, die dermale Exposition
zu quantifizieren. Hierzu wurden erste Anstze mit einem semiquantitativen Ver-
schmutzungsindex (van Wendel de Joode et al. 2005 a, b) und mit Pads (Tsai et al.
2001) entwickelt.
4.7.6 Kehlkopf-, Rachen- und Mundhhlenkrebs
Die Bedeutung von PAH fr die Entstehung von bsartigen Tumoren der oberen Atem-
wege wird derzeit noch diskutiert. Kehlkopf-, Rachen- und Mundhhlenkrebs liegen
auf Grund mechanistischer berlegungen im potentiellen Wirkungsspektrum der PAH
(Norpoth 1990). Die sich aus toxikologisch-mechanistischen Anstzen ergebenden
Hinweise auf einen Kausalzusammenhang werden durch entsprechende epidemiologi-
sche Evidenz nicht ausreichend gesttzt. Der Einfluss der verschiedenen Risikofakto-
ren ist abhngig von der jeweiligen Sublokalisation. Methodische Probleme, die Sub-
lokalisationen zu diagnostizieren und entsprechend separat zu bewerten, mssen bei
Kopf-Hals-Tumoren besonders beachtet werden.
In Hinblick auf die notwendige Abgrenzung einer beruflichen PAH-Belastung vom
Rauchen kommt bei dieser Lokalisation erschwerend hinzu, dass zustzlich die starken
Wirkungen von Alkohol im Zusammenhang mit Rauchen auf die Schleimhute berck-
sichtigt werden mssen. Derzeit wird geschtzt, dass 75% dieser Tumoren auf die
Kombinationswirkung von Rauchen und Alkohol zurckzufhren sind (Hashibe et al.
2007). In Kohortenstudien fehlen jedoch hufig entsprechende Daten, um diese starken
Konfounder geeignet zu kontrollieren. Dazu zhlen in bestimmten Industrien auch wei-
tere berufliche Belastungen, insbesondere Exposition gegen Asbest oder Schweirauch
(Gustavsson et al. 1998).
In verschiedenen historischen Beobachtungen wird von sehr hufigen Kehlkopf-
krebserkrankungen nach beruflicher PAH-Exposition berichtet (z. B. Kennaway und
Kennaway 1936). Es gibt bisher aber kaum Kohortenstudien, die gezielt relative
Krebsrisiken fr Sublokalisationen des Kehlkopfes sowie der Mund- und Rachenhh-
le durch PAH-Expositionen ermittelt haben, insbesondere nicht in den Bereichen, die
hoch gegen PAH exponiert sind.
Zu Kopf-Hals-Tumoren wurden relativ umfangreiche Fall-Kontroll-Studien durchge-
fhrt. So werden fr Larynxkarzinome erhhte relative Risiken fr Personen berichtet,
die jemals als Straenbauarbeiter beschftigt waren (OR=6,4; 95%-KI: 2,417,3)
(Becher et al. 2005). Bei 1010 Fllen mit Tumoren bei Mnnern und 2176 Kontrollen
wurden nur Hinweise auf ein erhhtes relatives Risiko durch Lsemitteln fr Tumoren
des Larynx und Hypopharynx gefunden (Berrino et al. 2003).
Aufgrund der Datenlage, der besonderen methodischen Probleme und der starken Kon-
founder kann zwar aus Grnden der Plausibilitt ein Einfluss von beruflicher PAH-
Belastung auf diese Lokalisationen vermutet werden, jedoch fehlen verlssliche epide-
miologische Daten.
4.7.7 Weitere Krebslokalisationen
Generell sind PAH-Verbindungen geeignet, auch andere epitheliale Tumoren zu erzeu-
gen. Belastbare epidemiologische Hinweise auf Krebs anderer Lokalisationen durch
eine berufliche PAH-Belastung liegen aber nicht vor. Boffetta et al. (1997) halten die
epidemiologische Evidenz fr die Zielorgane Lunge, Haut und Harnblase bei hoher
beruflicher Belastung gegenber PAH fr gegeben. Fr Nierenzellkrebs und Kopf-
Hals-Tumoren ergeben sich Hinweise auf mgliche, jedoch nicht ausreichend gesi-
cherte Zusammenhnge mit einer beruflichen PAH-Exposition. Fr weitere Krebsloka-
lisationen ergeben sich derzeit keine belastbaren Hinweise auf einen kausalen Zusam-
menhang mit einer beruflichen PAH-Exposition.
Da besonders bei Teerexponierten als weitere Belastung auch eine orale Aufnahme
von PAH, z. B. durch unzureichende Hygiene oder ber die Mundatmung, nicht aus-
geschlossen werden kann, wurden verschiedentlich Magen-Darm-Tumoren diskutiert.
Beispielsweise wurde bei Dachdeckern in den USAein vermehrtes Auftreten von Kar-
zinomen des Magens beobachtet (Hammond et al. 1976). Auch Beobachtungen von
anderen Autoren (Manz 1984 und Silverstein et al. 1985) zeigen eine hhere Zahl an
gastrointestinalen Tumoren nach Teer- und Pech-Expositionen bzw. in Kokereien,
jedoch gibt es auch gegenteilige Befunde (z. B. Swaen et al. 1991). Als miturschlich
fr die beobachteten Erkrankungen an Magenkrebs kommen auch andere mglicher-
weise synkanzerogen wirkende Stoffe in Betracht.
Unter weiteren Krebslokalisationen, die in den vorliegenden Dokumentationen
(Boffetta et al. 1997; IARC 1973, 1983, 1984 a, b, 1985, 1986 a, 1987) diskutiert wer-
den, werden auch Leukmien genannt. Hier muss darauf hingewiesen werden, dass
hohe Belastungen durch Benzol in einigen Bereichen wie Kokereien mglich sind
(Friesen et al. 2007).
5 Tierexperimentelle Befunde und In-vitro-Untersuchungen
5.1 Akute Toxizitt
Zur akuten Toxizitt von PAH sind nur wenige Studien vorhanden, auer zu Naphtha-
lin (Nachtrag Naphthalin 2001). Die bei WHO (1998) angegebenen Werte zeigen,
dass die akute Toxizitt gering ist (Tabelle A1 Anhang). Bei jungen Ratten bewirkte
eine intraperitoneale Einzeldosis von 10 mg Benzo[a]pyren eine Reduzierung des
Wachstums (Haddow et al. 1937). Bei Musen wurden nach einmaliger intraperitonea-
ler Injektion von Benzo[a]pyren (k. A. zur Dosis) verkleinerte Milz, zellulre Deple-
tion, Hmosiderose und Follikel mit groen Lymphozyten beobachtet (Shubik und
Della Porta 1957; WHO 1998). Nach einmaliger Applikation von 0,05 ml einer
15%igen Lsung von Benzo[a]pyren in Aceton in den intraskapulren Bereich war die
Mitoserate bei epidermalen Zellen von haarlosen Musen (hr/hr-Stamm) vermindert
(Elgjo 1968). Eine einzelne intraperitoneale Injektion von 30 mg Chrysen pro Tier ver-
nderte das Wachstum bei Ratten nicht. 390 mg Dibenzo[a,h]anthracen fhrten bei
jungen Ratten nach ein- oder zweimaliger intraperitonealer Injektion innerhalb von
2 Tagen zu einer Wachstumsverminderung, die bis zu 15 Wochen bestehen blieb
(Haddow et al. 1937).
Fr Naphthalin sind bei WHO (1998) die toxischen Wirkungen von Einzeldosen in
einer Tabelle zusammengestellt (Tabelle A2 Anhang). Die orale Gabe von 400 mg/kg
KG fhrte beim Hund zu Anmie, 4000 mg/kg KG zu ausgeprgter Diarrhoe. Dosen
von 1000 bis 3000 mg/kg KG bewirkten beim Kaninchen eine Trbung der Cornea;
3000 mg/kg KG wirkten bei Kaninchen und Katze letal. Nach inhalativer Exposition
(0,1 mg/l, entsprechend 100 mg/m
3
; 4 h) wurden bei der Maus bronchiale Nekrosen
beobachtet. Nach i.p. Applikation bei Maus, Ratte und Hamster zeigten sich Effekte
auf das respiratorische System. Neuere Studien zur akuten Toxizitt von Naphthalin
sind im Nachtrag Naphthalin 2001 enthalten. Bei Musen wurde nach 4-stndiger
inhalativer Applikation von 2 ml Naphthalin/m
3
(10,6 mg/m
3
) im Epithel der proxima-
len bronchiolren Atemwege bei einigen Tieren Clara-Zell-Nekrosen beobachtet; aus-
geprgtere Schdigungen traten mit steigenden Konzentrationen auf. Bei mnnlichen
Sprague-Dawley-Ratten, die ber vier Stunden lang Konzentrationen bis zu 110 ml
Naphthalin/m
3
(586 mg/m
3
) ausgesetzt waren, zeigten sich dagegen keine Vernderun-
gen in den Zellen der verschiedenen bronchiolren Abschnitte der Luftrhre. Schden
an den Clara-Zellen zeigten sich bei Musen auch nach oraler Gabe von 200 mg Naph-
thalin/kg KG und nach i.p. Applikation ab 300 mg/kg KG; ab 200 mg/kg KG war das
Epithel der terminalen Bronchiolen betroffen.
Nach wiederholter inhalativer Applikation von Naphthalin wurde bei Musen beob-
achtet, dass die Clara-Zellen aufgrund eines von Gluthation abhngigen Mechanismus
gegen weitere Schdigungen resistent werden (West et al. 2003).
5.2 Subakute, subchronische und chronische Toxizitt
5.2.1 Inhalative Aufnahme
Mnnliche Syrische Goldhamster wurden inhalativ tglich 4,5 Stunden an 5 Tagen der
Woche 16 Wochen lang gegen 9,8 oder 44,8 mg/m
3
Benzo[a]pyren exponiert. Es wur-
den keine Neoplasien im Respirationstrakt beobachtet (Thyssen et al. 1980). Fischer-
344/Crl-Ratten wurden gegen 7,7 mg Benzo[a]pyren-Staub/m
3
an 2 Stunden pro Tag
an 5 Tagen pro Woche 4 Wochen lang exponiert. Die Lungenlavage, die Clearance
radioaktiv markierter Partikel und histopathologische Untersuchungen ergaben keine
Lsionen des Respirationstrakts (Wolff et al. 1989).
5.2.2 Orale Aufnahme
DBA/2N-Musen, die einen Ah-Rezeptor (Arylhydrocarbon-Rezeptor) mit geringer
Affinitt haben, wurde 120 mg Benzo[a]pyren eine bis vier Wochen lang tglich oral
verabreicht. Die Tiere verendeten aufgrund der toxischen Wirkung auf das Knochen-
mark. Bei C57B1/6N-Musen mit einem Ah-Rezeptor hoher Affinitt zeigte sich keine
toxische Wirkung auf das Knochenmark, die Tiere berlebten 6 Monate unter diesen
Bedingungen (Legraverend et al. 1983). Bei Ratten, denen 50 oder 150 mg
Benzo[a]pyren oral 4 Tage lang verabreicht wurde, zeigte sich eine verminderte Car-
boxylase-Aktivitt in der Darmmucosa. Der NOAEL hinsichtlich der Wirkung auf
Magen, Leber oder Niere lag bei 150 mg Benzo[a]pyren/kg KG pro Tag (Nousiainen
et al. 1984). Das Wachstum von Ratten, denen 1,1 g Benzo[a]pyren/kg Futter 100 Tage
lang verabreicht wurde, war gehemmt (White und White 1939; WHO 1998). Orale
Gabe von 100 mg Phenanthren/kg KG pro Tag vier Tage lang bewirkte einen 30%igen
Anstieg der Carboxylase-Aktivitt in der Darmschleimhaut (Nousiainen et al. 1984).
Die tgliche orale Applikation von Benzo[a]anthracen bei Ratten vier Tage lang ergab
einen NOAEL von 150 mg/kg KG hinsichtlich der Wirkung auf Magen, Leber oder
Niere. Die Carboxylase-Aktivitt in der Darmmucosa war vermindert (Nousiainen
et al. 1984).
Untersuchungen zu Naphthalin sind bei WHO (1998) in einer Tabelle (Tabelle A3) auf-
gefhrt. Bei der Ratte fhrten 150 bis 220 mg/kg KG, 14 Wochen lang verabreicht, zu
vergrerter Leber mit Zelldem, Schdigung des Leberparenchyms und Anzeichen
einer Entzndung der Niere. Die Gabe von 1000 mg/kg im Futter 4660 Tage lang
bewirkte die Bildung von Katarakten; 2000 mg/kg im Futter Wachstumshemmung
sowie Vergrerung und Verfettung der Leber. Muse wurden mit 27, 53 oder
267 mg/kg KG an 7 Tagen/Woche 14 Tage lang behandelt. Bei den Tieren der hchsten
Dosisgruppe wurde unter anderem Gewichtsreduktion bei Thymus und Milz beobach-
tet. In einem zweiten Experiment (5,3; 53 oder 133 mg/kg KG an 7 Tagen der Woche
90 Wochen lang) zeigte sich eine Verringerung der relativen Milzgewichte. Beim Hund
trat nach Gabe von 220 mg/kg KG 7 Tage lang Diarhoe und Anmie auf (siehe auch
Begrndung Naphthalin 1995).
Gruppen von je 20 mnnlichen oder weiblichen CD-1-Musen erhielten per Schlund-
sonde 75, 125 oder 250 mg Pyren/kg KG 13 Wochen lang. Nephropathie wurde bei den
vier mnnlichen Kontrolltieren, einem Tier der niedrigen Dosis, einem Tier der mittle-
ren Dosis und neun Tieren der hohen Dosis festgestellt, bei den weiblichen Tieren ent-
sprechend bei 2, 3, 7 und 10 Tieren. Die relativen und absoluten Nierengewichte waren
bei den Tieren der mittleren und der hchsten Dosisgruppe erniedrigt. Auf der Basis der
Nephropathie und der verringerten Nierengewichte wurde ein NOAEL von 75 mg/kg
KG pro Tag und ein LOAEL von 125 mg/kg KG pro Tag bestimmt (USEPA 1989;
WHO 1998).
5.2.3 Dermale Aufnahme
Bei einer In-vitro-Untersuchung zur dermalen Penetration von Benzo[a]pyren oder
Pyren bei Meerschweinchen zeigte sich, dass Pyren vorrangig passiv diffundiert,
whrend Benzo[a]pyren im Zuge der Resorption einer Biotransformation unterworfen
war und das 7,8,9,10-Tetrol als Metabolit in der Rezeptorflssigkeit der Diffusionszel-
len gefunden wurde (Ng et al. 1992). In In-vitro-Untersuchungen mit Hautprparationen
von Musen, Ratten, Kaninchen, Meerschweinchen, Pinselohrffchen und Menschen,
die mit Benzo[a]pyren behandelt worden waren, wurden sowohl die Muttersubstanz als
auch ein weites Spektrum von Metaboliten in der Rezeptorflssigkeit gefunden (Kao
et al. 1985).
14
C-markiertes Benzo[a]pyren wurde im Nackenbereich von Musen in
Dosierungen von 1,25 bis 125 mg/cm
2
aufgetragen und die Tiere wurden 7 Tage spter
gettet. Innerhalb einer Stunde waren 6%, innerhalb von 24 Stunden 40% der aufgetra-
genen Menge nicht mehr nachweisbar. Nach sieben Tagen waren noch 7% am Auftra-
gungsort nachweisbar. Der grte Anteil des Benzo[a]pyrens wurde ber das hepatobi-
lire System und in den Faeces ausgeschieden, 35% nach 24 Stunden, 58% nach 48
Stunden und 80% nach sieben Tagen. Nur 10% der Radioaktivitt wurde im Urin gefun-
den. Die Aufnahme zeigte bei >15 mg/cm
2
einen Sttigungseffekt; dies wurde als Indiz
fr ein erhhtes Risiko der Tumorinduktion im Epithel der Haut gesehen (Sanders et al.
1986). Die Bindung von Benzo[a]pyren an DNAund Proteine in der Musehaut war 15-
bis 20mal hher, wenn an Stelle eines niedrigviskosen ls Aceton als Vehikel eingesetzt
wurde (Ingram und Phillips 19938). Whrend in Aceton gelstes
14
C-Benzo[a]pyren
leicht die menschlichen Leichen entnommene Haut durchdrang (Diffusionszellen,
Dauer 24 Stunden, Rezeptorflssigkeit menschliches Plasma), erfolgte ein bergang
von Benzo[a]pyren aus Erde in solche Haut zu einem wesentlich geringeren Anteil. Ein
bergang von Benzo[a]pyren aus solcher menschlicher Haut in die Rezeptorflssigkeit
konnte nicht beobachtet werden. Eine In-vivo-Untersuchung mit Rhesusaffen mit in
Erde enthaltenem Benzo[a]pyren zeigte eine im Vergleich zur menschlichen Haut signi-
fikant geringere Resorption (Wester et al. 1990). Es gibt Hinweise fr eine Aufnahme
durch die Haut (WHO 1998).
5.2.4 Subkutane und intraperitoneale Aufnahme
Eine wchentliche subkutane Injektion von 0,25 mg Benzo[a]anthracen 40 Wochen
lang bei Musen resultierte in einer Anreicherung von Eisen in den Lymphdrsen und
einer Verringerung der Anzahl lymphatischer Zellen (Hoch-Ligeti 1941). Bei Musen,
die wchentliche subkutane Injektionen von 0,25 mg Dibenzo[a,h]anthracen pro Tier
erhielten, wurden weiche, vergrerte Lebern mit Anzeichen von Degeneration beob-
achtet, auerdem eine Anreicherung von Eisen in den Lymphdrsen und eine Verrin-
gerung der Anzahl lymphatischer Zellen (Hoch-Ligeti 1941). Hmolymphatische Ver-
nderungen, darunter extravaskulre Erythrozyten im Lymphknotenbereich und groe
pigmentierte Zellen, wurden bei mnnlichen Ratten beobachtet, nachdem an 5 Tagen/
Woche 4 Wochen lang s.c. Injektionen von 0,28 mg Dibenzo[a,h]anthracen pro Tier
vorgenommen worden waren (Lasnitzki und Woodhouse 1944).
Muse, denen intraperitoneal 500 mg Pyren/kg KG pro Tag 7 Tage lang verabreicht
wurde, berlebten (Gerade 1960 b). Untersuchungen mit Naphthalin sind bei WHO
(1998) in einer Tabelle (Anhang Tabelle A3) aufgefhrt. Die i.p.-Gabe von 50 bis
200 mg/kg KG sieben Tage lang zeigte bei der Maus keine morphologischen Effekte.
Auch die Gabe von 300 mg/kg KG am 8. Tag wurde toleriert. Effekte beim Kaninchen
nach s.c.-Gabe von 0,1 bis 1 ml/kg KG 123 Tage lang wurden mit einer Hypoxmie,
hervorgerufen durch eine hmolytische Anmie, in Verbindung gebracht (siehe auch
Begrndung Naphthalin 1995).
5.3 Wirkung auf Haut und Schleimhute
5.3.1 Haut
1912 demonstrierten Yamagiwa und Ichikawa (1915) die krebserzeugende Wirkung
des Steinkohlenteers erstmals an der Kaninchenhaut. Es folgten Studien in groer Zahl,
durch welche diese Wirkung fr eine Reihe von Produkten aus Steinkohlenteer an der
Musehaut nachgewiesen wurde (IARC 1985). Mit der Applikation von Benzo[a]-
pyren auf die Musehaut durch Cook et al. (1932) begann die Zeit der Prfung zahl-
reicher PAH in diesem Testsystem nicht nur zum Nachweis ihrer krebserzeugenden
Wirkung, sondern auch zum Studium von Dosis-Wirkungs- und Struktur-Wirkungs-
Beziehungen. bersichten zur Hautkrebserzeugung beim Versuchstier finden sich bei
Arcos et al. (1968), Boutwell (1964), Eckardt (1959), Hueper (1964), IARC (1983,
1985), Weisburger und Weisburger (1967), Wynder und Hoffmann (1970) sowie Pott
und Heinrich (1990) (vgl. Abschnitt 5.7).
Die adversen dermatologischen Effekte, die bei Tieren nach akuter und subchronischer
dermaler Exposition gegen PAH beobachtet wurden, betrafen Zerstrung der Talgdr-
sen, dermale Geschwre, Hyperplasie, Hyperkeratose und nderungen des epiderma-
len Zellwachstums. Perylen, Benzo[e]pyren, Phenanthren, Pyren, Anthracen, Naphtha-
lin, Acenaphthen, Fluoren und Fluoranthen erzeugten keinen Talgdrsenschwund;
Benzo[a]anthracen, Dibenzo[a,h]anthracen und Benzo[a]pyren reduzierten den
Talgdrsen-Index auf >1 (Bock und Mund 1958). Beim Talgdrsen-Index wird die
Anzahl der aktiven Talgdrsen in der Haut der mit einer kanzerogenen Substanz behan-
delten Tiere zur Anzahl der aktiven Talgdrsen in der Haut von Tieren, die mit einer
nicht-kanzerogenen Substanz behandelt wurden, verglichen. Vollstndige Zerstrung
der Talgdrsen nach Applikation der kanzerogenen Substanz wird mit dem Index 3,
Degeneration von mehr als der Hlfte der Talgdrsen mit dem Index 2, von weniger als
der Hlfte mit dem Index 1 angegeben. Der Index 0 bezeichnet die intakte Haut (Smith
1956; Suntzeff et al. 1955, 1957). Bei Swiss-Musen, die tglich ber die Dauer von 3
Tagen mit Lsungen von Benzo[a]pyren behandelt wurden, zerstrte eine Konzentra-
tion von 0,1% weniger als die Hlfte, 0,2% mehr als 50% der Talgdrsen (Suntzeff
et al. 1955). Bei weiblichen Sencar-Musen wurden 6,25 bis 200 nmol Dibenzo-
[a,l]pyren oder dessen Metaboliten einmalig auf die Haut appliziert. Dibenzo[a,l]pyren
und Dibenzo[a,l]pyren-11,12-dihydrodiol, ein metabolischer Vorlufer des hochwirk-
samen Diolepoxids, bewirkten 5 bis 6 Tage nach Behandlung ein Erythem (Casale
et al. 1997).
Benzo[a]pyren
Der ID
50
-Wert (Irritant Dose 50) fr dermale Reizaktivitt beim Museohr wurde 24
Stunden nach Applikation mit 5,6 x 10
5
mmol Benzo[a]pyren bestimmt (Brune et al.
1978).
Naphthalin
Die Applikation von 495 mg auf die Kaninchenhaut, ohne Okklusion, fhrte zu einer
leichten Reizung (Sax und Lewis 1984).
5.3.2 Auge
Eine Einzeldosis von 100 mg Naphthalin zeigte beim Kaninchenauge eine leicht rei-
zende Wirkung (Sax und Lewis 1984).
5.4 Allergene Wirkung
Benzo[a]pyren
Vier adulten weiblichen Meerschweinchen wurde eine Gesamtdosis von 250 mg
Benzo[a]pyren in komplettem Freunds Adjuvans injiziert; sie wurden zwei bis drei
Wochen spter hinsichtlich Kontaktsensibilisierung mit Lsungen von 0,001; 0,01; 0,1
oder 1% Benzo[a]pyren in Aceton und Olivenl behandelt. Nach 24 Stunden wurde
eine geringe bis ausgeprgte berempfindllichkeit beobachtet (Old et al. 1963). C3H-
Muse erhielten eine epikutane Gabe von 100 mg Benzo[a]pyren in 0,1% Acetonl-
sung. 5 Tage spter wurde Kontaktberempfindlichkeit durch Applikation von 20 mg
Benzo[a]pyren an dem dem Rcken zugekehrten Teil des Ohres hervorgerufen. Die
Reaktion wurde ber die Dicke des Ohres bestimmt, die ein Maximum 3 bis 5 Tage
nach Verabreichung erreichte. Der LOAEL fr Kontaktsensibilisierung wurde mit
120 mg bestimmt (Klemme et al. 1987). Ein positives Ergebnis zeigte sich fr
Benzo[a]pyren auch im Local Lymph Node Assay (LLNA). Musen (k. w. A.) wurden
an drei aufeinander folgenden Tagen verschiedene Konzentrationen der Testsubstanz
(0,5; 1,0 und 2,5% Benzo[a]pyren in Aceton/Olivenl) oder das Vehikel auf der Rck-
seite beider Ohren aufgetragen. Nach 5 Tagen wurde den Tieren
3
H-Thymidin injiziert
und die Lymphozytenproliferation im Vergleich zu den Kontrolltieren ber das inkor-
porierte
3
H-Thymidin bestimmt. Benzo[a]pyren wurde als sensibilisierend eingestuft
(Ashby et al. 1995).
Anthracen
Bei Meerschweinchen wurde keine Kontaktsensibilisierung durch Anthracen beobach-
tet (Old et al. 1963).
Phenanthren
Bei Phenanthren wurde keine Kontaktsensibilisierung beobachtet (Old et al. 1963;
WHO 1998).
Dibenzo[a,l]pyren
Weiblichen Sencar-Musen wurden 6,25 bis 200 nmol Dibenzo[a,l]pyren oder ausge-
whlte Metaboliten einmalig auf die Haut appliziert. Bei Dibenzo[a,l]pyren und Diben-
zo[a,l]pyren-11,12-dihydrodiol, einem Vorlufer des Dihydrodiolepoxids, zeigte sich
5 bis 6 Tage nach Behandlung ein Erythem. Intensitt und Dauer des Erythems waren
dosisabhngig, whrend das verzgerte Auftreten des Erythems zeitlich konstant und
dosisunabhngig war. Dies wurde als Hinweis auf eine durch diese Verbindungen indu-
zierte Kontaktsensibilisierung gesehen. Histologische Befunde in der Haut stimmten
mit dem Bild einer Kontaktsensibilisierung berein; in Verbindung mit dem Erythrem
zeigten sich epidermale Hyperplasie und mononuklere Leukozyten in der Dermis. Die
Applikation einer zweiten Dosis zur Antigenexposition nach fnf Tagen in einem zwei-
ten Versuch, in dem eine Anschwellung des Museohrs gemessen wurde, besttigten
eine durch Dibenzo[a,l]pyren induzierte Kontaktsensibilisierung (Casale et al. 1997).
5.5 Reproduktionstoxizitt
Die Ergebnisse der Untersuchungen zur embryotoxischen Wirkung von Benzo[a]an-
thracen, Chrysen, und Dibenzo[a,h]anthracen bei der Ratte und von Benzo[a]pyren
und Naphthalin bei Maus und Ratte (Tabelle A4), zur Wirkung von Benzo[a]pyren auf
die Fertilitt (Tabelle A5) und auf die Wirkung von Benzo[a]pyren auf die postnatale
Entwicklung der Maus (Tabelle A6) sind im Anhang zusammengestellt. Die Tabellen
sind aus WHO (1998) entnommen. Benzo[a]pyren zeigte bei der Maus adverse Effek-
te auf die Fertilitt weiblicher Tiere sowie bei der postnatalen Entwicklung der Nach-
kommen. In einer Studie an jungen Musen wurde fr Benzo[a]pyren auf Basis der
Effekte auf die Fertilitt (Sperma im Lumen der Hoden; Gre der Wrfe) und der
Embryotoxizitt (Fehlbildungen) ein NOEL von 150 mg/kg KG pro Tag ermittelt
(Rigdon und Neal 1965).
5.6 Genotoxizitt
Eine bersicht hinsichtlich genotoxischer Wirkung der PAH ist in Tabelle 1 aufge-
nommen. Die Einstufung der keimzellmutagen Wirkung ist auf dem Deckblatt der
Begrndung verzeichnet.
5.6.1 In vitro
Die Ergebnisse von Untersuchungen an Salmonella typhimurium mit Anthanthren,
Benzo[a]anthracen, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen,
Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen (nicht in WHO 1998 aufgefhrt), Benzo[a]pyren,
Chrysen, Cyclopenta[cd]pyren, Dibenzo[a,h]anthracen, Dibenzo[a,e]pyren, Dibenzo-
[a,h]pyren, Dibenzo[a,l]pyren, Indeno[1,2,3-cd]pyren, Naphthalin (siehe auch Begrn-
dungsnachtrag Naphthalin 2001), Phenanthren und Pyren sind nach WHO (1998) in
Tabelle A7 (Anhang) wiedergegeben. Wegen der Flle der Daten sind die Reinheit der
Testsubstanzen und Details der Testkonditionen nicht aufgefhrt. Unterschiede in den
verwendeten S9-Fraktionen hinsichtlich Alter, Geschlecht und Stamm der hierfr ein-
gesetzten Ratten sowie die Anwendung unterschiedlicher Enzyminduktoren knnten
wesentlichen Einfluss auf die ermittelten Ergebnisse haben und auch Diskrepanzen
erklren. Benzo[a]pyren bzw. Pyren wurden als kanzerogene bzw. nicht kanzerogene,
strukturverwandte Testsubstanzen in einer von der WHO durchgefhrten Evaluierung
von Kurzzeit-Tests eingesetzt (IPCS 1988).
Zur Untersuchung der durch PAH hervorgerufenen DNA-Schdigung bei Prokaryon-
ten sei auf die Tabelle 82 in der WHO-Monographie (WHO 1998) verwiesen. Die in
der Tabelle A8 (Anhang) zusammengestellten Daten zur DNA-Schdigung durch PAH
bei Eukaryonten sind ebenfalls der WHO-Monographie entnommen; sie enthlt Daten
zu Benzo[a]anthracen, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen, Benzo[k]fluor-
anthen, Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen (nicht in WHO 1998 aufgefhrt), Benzo[a]-
pyren, Chrysen, Cyclopenta[cd]pyren, Dibenz[a,h]anthracen, Phenanthren und Pyren.
Bei Chrysen, Phenanthren und Pyren (mit einer Ausnahme) wurde keine DNA-Sch-
digung nachgewiesen. Bei allen anderen Verbindungen zeigte sich eine Induktion von
DNA-Schden.
Neuere Studien zur In-vitro-Genotoxizitt von Naphthalin sind in dem Begrndungs-
nachtrag Naphthalin 2001 aufgefhrt. Naphthalin induzierte in CHO-Zellen in An-
und Abwesenheit eines metabolischen Systems eine Erhhung der Schwesterchroma-
tidaustausche und nur mit S9-Mix auch verstrkt Chromosomenaberrationen. Im Mikro-
nukleus-Test mit MCL-5-Zellen wurde eine signifikant erhhte Anzahl an CREST-nega-
tiven Mikronuklei gefunden. Naphthalin verursachte in J774A.1-Makrophagen einen
signifikanten Anstieg von Superoxid-Anionen und Hydroxylradikalen sowie einen
Anstieg der DNA-Fragmentierung (Begrndungsnachtrag Naphthalin 2001).
DNA-Addukte des Dibenzo[a,l]pyrens wurden in C3H10T1/2-Zellen mittels TLC/
HPLC und
32
P-Labelling nachgewiesen (Nesnow et al. 1997). In C3H10T1/2CL8-Zel-
len wurden nach Applikation von Cyclopenta[cd]pyren mittels
32
P-Labelling DNA-
Addukte nachgewiesen (Nelson et al. 2002).
Auch bei der Untersuchung des Metabolismus von Dibenzo[a,h]anthracen in
C3H10T1/2-Zellen konnten DNA-Addukte registriert werden. Der Nachweis von
DNA-Addukten der Muttersubstanz und einiger mglicher intermedirer Verbindungen
gelang ber
32
P-Labelling (Nesnow et al. 1994). Nach Exposition von C3H10T1/2-
Zellen gegen
3
H-Dihydroxyepoxytetrahydrobenzo[a]pyren und
3
H-Benzo[a]pyren
zeigte sich nach Aufarbeitung des Lysats, dass der grere Anteil an Addukten in
der mitochondrialen DNA und nicht in der nukleren DNA enthalten ist (Backer und
Weinstein 1982).
5.6.2 In vivo
In Tabelle A9 des Anhangs (WHO 1998) sind Untersuchungen von Benzo[a]anthracen,
Benzo[a]pyren und Pyren bei Drosophila melanogaster zusammengestellt.
Untersuchungen von Benzo[a]anthracen, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen,
Benzo[k]fluoranthen, Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen (nicht in WHO 1998 aufge-
fhrt), Benzo[a]pyren, Chrysen, Dibenzo[a,h]anthracen, Dibenzo[a,e]pyren, Inde-
no[1,2,3-cd]pyren, Naphthalin, Phenanthren und Pyren sind hinsichtlich chromosoma-
ler Effekte von PAH in Sugetierzellsystemen in vivo in Tabelle A10 des Anhangs
zusammengefasst, mit einbezogen sind DNA-Bindung und Addukte sowie Spermien-
abnormalitten. DNA-Addukte oder DNA-Bindung wurden mit Ausnahme von Pyren
fr alle aufgefhrten Verbindungen nachgewiesen (WHO 1998). Benzo[a]pyren und
trans-Benzo[a]pyren-4,5-diol fhrten bei C3H10T1/2-Zellen zu einer Schdigung der
DNA, stabile DNA-Addukte konnten in den mit trans-Benzo[a]pyren-4,5-diol behan-
delten Zellen nicht nachgewiesen werden (Nesnow et al. 2002). Nach Gabe von Benzo-
[a]anthracen, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[a]pyren, Chrysen, Dibenzo[a,h]anthracen
und Phenanthren wurden SCE induziert, bei Gabe von Pyren nicht.
Studien zur In-vivo-Genotoxizitt von Naphthalin sind in dem Begrndungsnachtrag
Naphthalin 2001 aufgefhrt. In Rattenhepatozyten wurde keine erhhte auerplan-
mige DNA-Synthese gefunden. Bei weiblichen Ratten wurde nach oraler Applikati-
on von Naphthalin ein Anstieg der Lipidperoxidation in Mitochondrien aus Leber und
Gehirn und eine Erhhung der DNA-Einzelstrangbrche in der Leber beobachtet.
Benzo[a]anthracen erhhte im Knochenmark des Hamsters und in den Oozyten der
Maus die Zahl der chromosomalen Aberrationen, in einem anderen Versuch jedoch
nicht im Knochenmark der Ratte und des Hamsters. Zu Benzo[a]pyren liegen sowohl
negative als auch positive Befunde vor. Benzo[b]fluoranthen, Dibenz[a,h]anthracen
und Phenanthren induzierten keine Erhhung chromosomaler Aberrationen in vivo. In
Knochenmarkszellen und Spermatogonien des Chinesischen Hamsters zeigte Chrysen
keine erhhte Zahl an chromomalen Aberrationen, in Oozyten der Maus war ein
schwacher Anstieg an chromosomalen Aberrationen sichtbar (Basler et al. 1977).
In Knochenmarkszellen und Milzzellen der Ratte wurde nach Gabe von Benzo[a]-
anthracen eine erhhte Zahl an Mikronuklei nachgewiesen, ebenso bei Benzo[b]fluor-
anthen und Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen im Knochenmark der Maus, bei Di-
benzo[a,h]anthracen in Lunge, Blutlymphozyten und Knochenmark der Ratte und in
der Musehaut. Zum Mikronukleustest an Keratinozyten der Maus rief Chrysen
sowohl einen positiven (Nishikawa et al. 2005) als auch einen negativen Befund (He
und Baker 1991) hervor. Fr Benzo[a]pyren liegen zur Induktion von Mikronuklei
sowohl zahlreiche positive Befunde in verschiedenen Geweben von Maus, Ratte und
Chinesischem Hamster vor, wie auch negative Befunde bei Maus und Hamster. Durch
Naphthalin, Phenanthren und Pyren lie sich keine erhhte Zahl an Mikronuklei her-
vorrufen.
Benzo[a]pyren rief dominante Letalmutationen hervor (Begrndung Benzo[a]pyren
2001).
In Lungenzellen des Mausstammes A/J wurden nach Applikation von Cyclopenta-
[cd]pyren mittels
32
P-Labelling DNA-Addukte nachgewiesen (Nelson et al. 2002).
5.6.3 Interaktion verschiedener PAH hinsichtlich Genotoxizitt
und Kanzerogenitt
Da Beschftigte an Arbeitspltzen berwiegend PAH-Gemischen ausgesetzt sind, wird
nachfolgend die Interaktion von PAH untereinander hinsichtlich ihrer genotoxischen
und kanzerogenen Wirkung beschrieben.
5.6.3.1 In-vitro-Studien zur Genotoxizitt im Ames Test, SOS-Chromotest
und zur DNA-Adduktbildung
DNA-Addukte wurden in vitro in humanen Lungenfibroblasten nach Behandlung mit
einzelnen kanzerogenen PAH im Vergleich zu binren Mischungen und komplexeren
knstlichen oder natrlichen Gemischen in einer weiteren Studie mit
32
P-Postlabelling
im Konzentrationsbereich von 0,110 mM untersucht. Dabei fhrte die Koexposition
der Zellen gegen 0,1 mM Dibenzo[a,l]pyren und 0,1 mM eines zweiten PAH zur Reduk-
tion der Adduktrate um 16,6 % (Chrysen) bis 99,4 % (Dibenzo[a,h]anthracen) im Ver-
gleich zur Behandlung mit 0,1 mM Dibenzo[a,l]pyren alleine. Eine Koexposition
gegen 1 mM Benzo[a]pyren und 1 mM eines anderen PAH fhrte zu einer Reduktion
zwischen 27,9 % (Benzo[ghi]perylen) und 99,2 % (Dibenzo[a,h]anthracen) im Ver-
gleich zur Adduktrate nach Exposition gegen 1,0 mM Benzo[a]pyren alleine. Um einen
Einfluss der Konzentration zu ermitteln, wurden Zellen mit 1 mM Benzo[a]pyren und
verschiedenen Konzentrationen (0,1 mM; 0,2 mM; 1,0 mM) von Dibenzo[a,h]anthracen
behandelt. Es fand sich eine dosisabhngige Reduktion der Adduktraten von 31,6 %
(0,1 mM Dibenzo[a,h]anthracen) bis 98,9 % (1,0 mM Dibenzo[a,h]anthracen) im Ver-
gleich zur Adduktrate bei Exposition gegen Benzo[a]pyren alleine. Weiterhin fhrte
der Zusatz eines PAH-Gemisches oder eines organischen Extraktes atembarer Luftpar-
tikel bei Exposition der Zellen gegen 0,1 mM, 0,05 mM oder 0,01 mM Benzo[a]pyren
zu einer bis zu fnffachen Reduktion der Benzo[a]pyrendihydrodiolepoxid-DNA-
Addukte bei dem PAH-Gemisch und einer bis zu 10fachen Reduktion bei dem Extrakt
im Vergleich zur Exposition gegenber Benzo[a]pyren alleine (Binkova und Sram
2004). Die Autoren vermuten als Ursache eine Konkurrenz der Einzelverbindungen um
Bindungstellen der PAH-metabolisierenden Enzyme, deren Sttigung oder eine Inakti-
vierung dieser Enzyme durch reaktive PAH-Metaboliten.
Im SOS-Chromotest an E. coli wurden verschiedene PAH-Einzelverbindungen (An-
thracen, Phenanthren, Fluoranthen, Pyren, Benzo[c]phenanthren, Benzo[a]anthracen,
Chrysen, Benzo[b,j,k]fluoranthen (quimolare Mischung aus Benzo[b]fluoranthen,
Benzo[j]fluoranthen und Benzo[k]fluoranthen), Benzo[a]pyren, Indeno[1,2,3-cd]-
pyren, Dibenzo[a,h]anthracen, 3-Methylcholanthren, Benzo[ghi]perylen) und ver-
schiedene PAH-Gemische, bestehend aus den genannten Einzelverbindungen, hin-
sichtlich ihrer Fhigkeit zur Induktion von DNA-Schden untersucht. Bei Gesamt-
PAH-Konzentrationen der Gemische oberhalb von 1 mg/ml war die Induktion von
DNA-Schden geringer als die Summe der induzierten Schden durch die Einzelver-
bindungen. Bei Gesamt-PAH-Konzentrationen unterhalb von 0,75 mg/ml war die SOS-
Antwort dagegen nur unwesentlich geringer als die Summe der durch die Einzelver-
bindungen verursachten DNA-Schden. Im niedrigen Konzentrationsbereich ist daher
von einer Additivitt der Einzeleffekte auszugehen (White 2002). Die Autoren halten
es fr mglich, dass die bei hohen Konzentrationen beobachteten subadditiven Effek-
te, auf die relativ schlechte Lslichkeit der PAH und damit auf eine geringere Biover-
fgbarkeit zurckzufhren sind.
Im bakteriellen Mutagenittstest mit Salmonella typhimurium (TA98; Aktivierung mit
S9-Mix oder Mikrosomen aus Rattenleber) reduzierten komplexe Gemische von PAH,
die aus Kohlelen gewonnen wurden, die mutagene Aktivitt von Benzo[a]pyren und
7,12-Dimethylbenzo[a]anthracen. Die untersuchten Mengen lagen zwischen 0,5 und
10 mg Benzo[a]pyren/Platte und bei 25 mg 7,12-Dimethylbenzo[a]anthracen/Platte.
Lediglich bei einer Benzo[a]pyren-Dosis von 0,5 mg/Platte wurde bei der Testung
gemeinsam mit einem PAH-Gemisch ein strkerer mutagener Effekt beobachtet als
fr Benzo[a]pyren alleine (Haugen und Peak 1983). Einige nicht mutagene Kohlen-
wasserstoffe mit 2 oder 3 unsubstitutierten Ringen wie Naphthalin (250 nmol) oder
Anthracen (14,3 nmol) erhhten im bakteriellen Mutagenittstest mit Salmonella
typhimurium die mutagenen Effekte von Benzo[a]pyren. Die meisten der untersuch-
ten mutagenen PAH (333,3 nmol Naphthacen, 250 nmol 1,2-Benzo[a]anthracen, 500
nmol Fluoranthen, 333,3 nmol Triphenylen, 16,7 nmol Benzo[e]pyren, 11,1 nmol
Dibenzo[a,c]anthracen, 33,3 nmol Dibenzo[a,h]anthracen, 33,3 nmol Benzo[b]fluor-
anthen, 10 nmol Perylen, 2 nmol Dibenzo[a,l]pyren, 10 nmol Dibenzo[a,i]pyren, 14,3
nmol Anthanthren, 25 nmol Coronen) fhrten bei gleichzeitiger Verabreichung in
hheren Dosierungen zu einer Abnahme der mutagenen Wirkung von Benzo[a]pyren,
einige davon (5 nmol Naphthacen, 10 nmol 1,2-Benzo[a]anthracen, 1 nmol Benzo[e]-
pyren, 1 nmol Benzo[b]fluoranthen und 0,25 nmol Anthanthren) bewirkten bei nied-
rigeren Dosierungen ebenfalls eine Zunahme der Mutagenitt von Benzo[a]pyren
(Hermann 1981). Die Autorin gibt Mutagenittserhhungs- bzw. -erniedrigungsindi-
zes an (in nmol
1
), die dem reziproken Wert derjenigen Konzentration entsprechen,
bei der ein PAH zur Hlfte der maximalen Erhhung bzw. Erniedrigung der Muta-
genitt von Benzo[a]pyren (1 mg) fhrt. Zur besseren Lesbarkeit wurden diese Werte
in dieser Zusammenstellung umgerechnet und als entsprechende Konzentrationen
angegeben.
Subadditive Effekte in einem bakteriellen Mutagenittstest mit Salmonella typhimu-
rium TA98 wurden ebenfalls fr eine Mischung aus Benzo[a]pyren (1 mg) und Diben-
zo[a,i]pyren (2 mg) beschrieben. Verglichen mit Benzo[a]pyren alleine ist die muta-
gene Wirkung des binren Gemisches nahezu unverndert, in Bezug auf Dibenzo-
[a,i]pyren war eine leichte Erhhung festzustellen (Salamone et al. 1979 b).
5.6.3.2 In-vivo-Studien zur kanzeroge Wirkung an der Haut und in der Lunge
von Musen
An der Haut von NMRI-Musen wurde Benzo[a]pyren sowohl allein als auch in
Mischungen mit weiteren kanzerogenen PAH, nmlich Dibenzo[a,h]anthracen,
Benzo[a]anthracen und Benzo[b]fluoranthen, im epikutanen Tropftest untersucht
(Schmidt et al. 1976). Dabei wurden Gruppen von 100 Tieren zweimal wchentlich mit
den PAH in einer acetonischen Lsung an der Rckenhaut behandelt. Die Dosierungen
des Benzo[a]pyren wurden anhand seiner bekannten Dosis-Wirkungskurve in diesem
Test (Schmidt et al. 1976) mit 1,0 mg, 1,7 mg und 3,0 mg so gewhlt, dass eine Tumor-
ausbeute etwa zwischen 5 und 50% erwartet werden konnte, um somit sowohl syner-
gistische als auch antagonistische Effekte der untersuchten PAH-Mischungen erfassen
zu knnen. Es wurden drei verschiedene Mischungen aus Benzo[a]pyren, Dibenzo-
[a,h]anthracen, Benzo[a]anthracen und Benzo[b]fluoranthen untersucht. Dabei wurden
der gewhlten Dosierung des Benzo[a]pyrens (1,0; 1,7; 3,0 mg) die drei weiteren PAH
in Verhltnissen zugemischt, wie sie dem relativen Gewichtsanteil im Zigaretten-
rauch-Kondensat (1,0 : 0,7 : 2,8 : 1,8), im Kfz-Abgas-Kondensat (1,0 : 0,7 : 1,4 : 0,9)
und im Rucherkammerru und -teer (1,0 : 0,8 : 2,6 : 2,5) entspricht. Des Weiteren
wurden Mischungen von sieben nicht-kanzerogenen PAH sowohl alleine als auch in
Kombination mit den Mischungen der vier kanzerogenen PAH getestet. Die Mischung
der nicht-kanzerogenen PAH umfassten Phenanthren, Anthracen, Fluoranthen, Pyren,
Chrysen, Benzo[e]pyren und Benzo[ghi]perylen. Die drei Mischungen, die alle 11 PAH
enthalten, entsprechend der jeweiligen Matrix Zigartettenrauch-Kondensat, Kfz-
Abgas-Kondensat und Rucherkammerru und -teer, wurden nach dem bereits erlu-
terten Prinzip zusammengesetzt. Demgegenber wurde aber fr die untersuchten
Mischungen der sieben nicht-kanzerogenen PAH ein insgesamt hheres Dosierungs-
schema gewhlt, welches auf einem 1-, 3-, 9- und 27fachen Gewichtsanteil, bezogen
auf Benzo[a]pyren, basierte. Alle Applikationen in den Gruppen Behandlung mit
Benzo[a]pyren, Behandlung mit kanzerogenen PAH, Behandlung mit nicht-karzi-
nogenen PAH und Behandlung mit allen PAH wurden von den Musen ohne akut-
toxische Schden vertragen. Die Muse wurden bis zu ihrem natrlichen Tod beob-
achtet oder bei Auftreten eines Tumors an der Applikationsstelle gettet. Die histolo-
gische Befundung weist in der Regel die Bildung von Plattenepithelkarzinomen an der
Applikationsstelle nach, vereinzelt auch von Papillomen, Fibrosarkomen und malignen
Lymphomen.
In allen Behandlungsgruppen mit kanzerogenen PAH lie sich eine Wirkungssteige-
rung (Tumorausbeute 3171%) gegenber der Gruppe feststellen, die mit Benzo-
[a]pyren (Tumorausbeute 1353%) allein behandelt wurde. Die Wirkung in der jewei-
ligen Gruppe, in der alle elf PAH eingesetzt wurden, schien derjenigen in der Gruppe,
in der nur mit kanzerogen PAH behandelt wurde, zumindest gleichzukommen oder
strker, keinesfalls jedoch schwcher als sie zu sein. Die als nicht kanzerogen wirk-
sam angesehene Gruppe von sieben PAH erzeugte auch lokale Tumoren, aber mit ver-
gleichsweise geringer Hufigkeit (Tumorausbeute <5%) mit Ausnahme der hchsten
Dosierung (27-facher Gewichtsanteil bezogen auf Benzo[a]pyren; Tumorausbeute
1733%). Bei der statistischen Auswertung zeigte sich, dass lineare Dosis-Wirkungs-
beziehungen vorliegen.
Diese Studie zeigt, dass mit einer Hemmung der kanzerogenen Wirkung kanzerogener
PAH nicht gerechnet werden kann, wenn sie zusammen mit anderen nicht-kanzeroge-
nen PAH in Gemischen appliziert werden, welche die in der Umwelt vorkommenden
Mengenverhltnisse widerspiegeln. Die relativ schwchere Wirkung der Gemische
kanzerogener PAH, bezogen auf diejenige des Benzo[a]pyrens, erklrt sich durch den
gewichtsmig starken Anteil schwcher kanzerogen wirksamer PAH. Hinsichtlich der
Wirkung in einer Mischung kann, zumindest fr die vier hier untersuchten kanzeroge-
nen PAH, von einer additiven Wirkung ausgegangen werden, wie die entsprechend den
toxischen quivalenzfaktoren erwartete Verschiebung der Dosis-Wirkungskurve fr
die Mischung (wie im Kfz-Abgas-Kondensat, siehe Schmhl et al. 1977) im Vergleich
zu der des Benzo[a]pyrens besttigt. Antagonistische Wirkungen fr das Einwirken
von Benzo[a]pyren oder Dibenzo[a,h]anthracen, zusammen mit verschiedenen nicht
kanzerogenen PAH, wie sie schon von Falk et al. (1964) beschrieben wurden, konnten
nicht besttigt werden.
Die interaktive kanzerogene Wirkung binrer Mischungen von Benzo[a]pyren und
Dibenzo[a,h]anthracen wurde in weiblichen NMRI-Musen nach subkutaner Injektion
untersucht (Pfeiffer 1977). Benzo[a]pyren wurde allein in sechs Dosierungen von 3,12
bis 100,0 mg und Dibenzo[a,h]anthracen in ebenfalls sechs Dosierungen von 2,35 bis
75 mg appliziert. Zu den beiden einzelnen Dosierungsreihen wurden auch jeweils die
korrespondierenden binren Mischungen (im Verhltnis 1,0 : 0,75, wie es im Automo-
bilabgas-Kondensat zu finden ist) (Grimmer et al. 1973) untersucht. Um den Effekt
einer realen PAH-Mischung noch besser erfassen zu knnen, wurden die jeweiligen
binren Mischungen noch zustzlich in einer Mischung mit zehn weiteren nicht-kan-
zerogenen PAH getestet (Benzo[a]pyren, Dibenzo[a,h]anthracen, Benzo[e]pyren
(2,1570,0 mg), Benzo[a]anthracen (3,12100 mg), Phenanthren (1254000 mg),
Anthracen (31,251000 mg), Pyren (65,12100 mg), Fluoranthen (28,1900 mg),
Chrysen (3,12100 mg), Perylen (0,27,0 mg), Benzo[ghi]perylen (12,8410 mg),
Coronen (3,12100 mg) im Verhltnis 1,0 : 0,75 : 0,7 : 1,0 : 40,0 : 10,0 : 21,0 : 9,0 :
1,0 : 0,07 : 4,1 : 1,0 wie es im Automobilabgas-Kondensat vorkommt (Grimmer et al.
1973). Die Mischung der zehn nicht-kanzerogenen PAH wurde ebenfalls in einer sepa-
raten Versuchsreihe untersucht. Die beiden kanzerogenen PAH bzw. die drei genannten
Mischungen (insgesamt 5 Gruppen mit jeweils sechs Dosierungen) wurden in Trica-
prylin gelst und subkutan in einer Einzelinjektion an 100 Muse pro Dosierung appli-
ziert. Die Tumorinzidenz wurde nach 114 Wochen bestimmt.
In der Gruppe mit Benzo[a]pyren und Dibenzo[a,h]anthracen alleine zeigte sich fr die
sechs Dosierungen eine jeweils zunehmende Tumorinzidenz von 983 bzw. 3769%.
Fr die binren Mischungen wurde eine Tumorinzidenz von 4879% bestimmt. Fr
die Mischung aller zwlf PAH wird ebenfalls eine zunehmende Tumorinzidenz von
4182% gefunden. Demgegenber verhlt sich die Gruppe mit den zehn nicht-kanze-
rogenen PAH indifferent (Tumorinzidenz schwankt zwischen 4 und 13%). Die statisti-
sche Auswertung ergibt lineare Dosis-Wirkungskurven fr Dibenzo[a,h]anthracen und
seine binre Mischung mit Benzo[a]pyren, whrend fr Benzo[a]pyren allein eine von
der Linearitt signifikant abweichende Beziehung festgestellt wird. Niedrige Dosie-
rungen an Dibenzo[a,h]anthracen haben einen greren Tumor-induzierenden Effekt
als vergleichbare Dosen an Benzo[a]pyren, whrend sich bei hheren Dosierungen die-
ser Sachverhalt genau umgekehrt darstellt. Die Mischung aus Benzo[a]pyren und
Dibenzo[a,h]anthracen ist um den Faktor 1,4 (statistisch nicht signifikant) strker wirk-
sam als Dibenzo[a,h]anthracen allein. Die kanzerogene Wirkung der Mischung aller 12
PAH hngt fast vollstndig vom Effekt der Kombination der beiden kanzerogenen PAH
ab. Somit bt die Mischung der zehn nicht-kanzerogenen PAH keinen Einfluss auf die
Wirkung der Kombination der beiden kanzerogenen PAH aus.
Weitere Untersuchungen zur Interaktion binrer PAH-Mischungen belegen Effekte,
sowohl grer als additiv (synergistisch) als auch kleiner als additiv (antagonistisch)
(Arcos et al. 1988). So konnte gezeigt werden, dass die kanzerogene Wirkung des
Benzo[a]pyrens an der Maus in Gegenwart von Anthracen, Chrysen, Perylen, Phenan-
thren, Pyren oder Dibenzo[a,h]anthracen inhibiert wird (Crabtree 1946; Falk et al.
1964; Finzi et al. 1968). Andererseits wurde auch ein synergistischer Effekt fr die
Tumorbildung in Gegenwart von Phenanthren und Pyren sowie fr 7,12-Dimethylben-
zo[a]anthracen (CAS 57-97-6; IUPAC: 7,12-Dimethylbenzo[b]phenanthren) und Me-
thylcholanthren berichtet (Hoffmann und Wynder 1962; Roe 1962; Rusch et al. 1942).
Auch die kanzerogene Wirkung des Dibenzo[a,h]anthracens wird durch andere PAH in
unterschiedlicher Weise beeinflusst. Anthracen, Benzo[a]anthracen und Phenanthren
inhibierten seine Tumorwirkung (Falk et al. 1964; Hill et al. 1952; Lacassagne et al.
1945; Steiner und Falk 1951), whrend ber eine synergistische Wirkung zusammen
mit Benzo[a]anthracen, Benzo[e]pyren, Phenanthren oder 3-Methylcholanthren
berichtet wird (Falk et al. 1964; Steiner 1955; Steiner und Falk 1951). Die synergisti-
schen und antagonistischen oder auch neutralen Effekte hngen offenbar nicht nur vom
PAH, sondern auch vom relativen Mengenverhltnis in der getesteten Kombination ab.
Die Interaktion kanzerogener PAH wurde auch im Lungentumortest in der mnnli-
chen A/J-Maus untersucht (Nesnow et al. 1998). Dabei entstehen nach intraperitonea-
ler Gabe innerhalb von 8 Monaten Adenome in der Lunge. Wie gezeigt wurde, ent-
wickeln sich aus diesen Lungenadenomen innerhalb von 18 bis 24 Monaten Lungena-
denokarzinome. Es wurden Mischungen aus fnf kanzerogenen PAH untersucht. Aus-
gewhlt wurden Benzo[a]pyren, Benzo[b]fluoranthen, Dibenzo[a,h]anthracen, 5-
Methylchrysen und Cyclopenta[cd]pyren, wobei als Auswahlkriterien das Umweltvor-
kommen, die unterschiedliche chemische Struktur, unterschiedliche metabolische Akti-
vierungswege und die verschieden starke tumorpromovierende Wirkung bercksichtigt
wurden (Nesnow et al. 1998). Nach Dosis-Wirkungsstudien der jeweils einzelnen PAH
wurden die Dosierungen fr die Mischungen so gewhlt, dass die Sterberate <25% und
die Verminderung der Gewichtszunahme <10% betrug, die erwartete Tumorantwort im
Bereich von 2 bis 100 Lungenadenomen lag und eine mgliche 2fach grere oder eine
4-fach geringere als additive Tumorantwort erfassbar war. Basierend auf den erhalte-
nen Dosis-Wirkungsdaten und dem Umweltvorkommen wurden die folgenden Dosie-
rungen in mg/kg KG gewhlt (hohe/niedrige Dosis): Benzo[a]pyren (75/30),
Benzo[b]fluoranthen (75/30), Dibenzo[a,h]anthracen (10/2,5), 5-Methylchrysen (30/10)
und Cyclopenta[cd]pyren (100/30). Aus der jeweiligen niedrigen und hohen Dosierung
wurden insgesamt 32 Versuchgruppen fr die quintren PAH-Mischungen zusammen-
gestellt. Der Einfluss des nicht-kanzerogenen Pyrens auf eine quintre Mischung der
kanzerogen PAH wurde mit folgender Zusammensetzung untersucht: Benzo[a]pyren
30, Benzo[b]fluoranthen 30, Dibenzo[a,h]anthracen 2,5; 5-Methylchrysen 30 und
Cyclopenta[cd]pyren 100 mg/kg KG; dabei muss angemerkt werden, dass Pyren in
dem benutzen Tumormodell im Dosisbereich von 10 bis 200 mg/kg KG inaktiv war.
Die Ergebnisse dieser Untersuchungen ergaben signifikante Abweichungen von einer
Additivitt, wobei sowohl kleiner als additive als auch grer als additive Tumorwir-
kungen gefunden wurden. Das Ausma der Abweichung lag in einem Bereich von
+97,4 bis 55% von dem, was bei additiver Wirkung zu erwarten war. Die Abwei-
chungen zeigten einen Dosisbezug, wobei fr niedrigere Dosierungen eine grere,
und bei hheren Dosierungen eine niedrigere als additive Interaktion festgestellt
wurde. Allerdings dominierten die kleiner als additiven Wirkungen bei den getesteten
quintren PAH-Mischungen. Die Gegenwart von Pyren verursachte eine 35%ige
Reduktion der Tumorigenitt der quintren Mischung.
Die erhaltenen Daten stehen zum Teil in scheinbarem Widerspruch zu Ergebnissen, die
in Studien zur Interaktion von PAH in binren Mischungen erhalten wurden. So wurde
fr eine binre Mischung von Benzo[a]pyren und Cyclopenta[cd]pyren ein mehr als
additiver Effekt in der Induktion von Papillomen an der Musehaut gefunden, whrend
im Lungentumormodell der A/J-Maus ein geringerer als additiver Effekt beobachtet
wurde. hnlich wurde fr Benzo[a]pyren und Pyren ein grerer als additiver Effekt
bei der Induktion von Papillomen im Initiations-Promotionstest an der Musehaut
erhalten (Nesnow et al. 1985), wohingegen Pyren, das weder Hauttumoren (Nesnow
et al. 1985) noch Lungentumoren in der A/J-Maus hervorrief, eine signifikante Reduk-
tion der Lungentumorbildung bewirkt, ausgelst durch die genannte quintre Mi-
schung von PAH, bewirkte.
Die vorliegenden Studien belegen eine Interaktion von PAH in verschiedenen
Mischungen auf die kanzerogene Wirkung an der Haut und in der Lunge in Abhngig-
keit von Spezies, Zielorgan, Art der Applikation und verabreichten Mengenverhltnis-
sen. Da die Tumorigenese durch PAH einen Mehrstufenprozess beinhaltet, kann ver-
mutet werden, dass ein multiplikativer Effekt fr zwei oder mehrere kanzerogene PAH
bereinstimmt mit einer parallelen Wirkung auf verschiedenen Stufen, whrend von
einer additiven Wirkung dann auszugehen ist, wenn die PAH auf der gleichen Stufe
wirken (Gibb und Chen 1986). Ebenso wurde postuliert, dass sich ein Synergismus
ergibt, wenn der geschwindigkeitsbestimmende Schritt in der Genese eines Tumors fr
beide interagierenden Kanzerogene unterschiedlich ist (Reif 1984). Die vorliegenden
Studien zeigen, dass solche Interaktionen fr PAH zwar existieren, sie aber in ihrem
Ausma begrenzt sind (Nesnow et al. 1998). Es erscheint daher sinnvoll, zur Abscht-
zung der Wirkung eines PAH-Gemisches in erster Nherung von einer additiven Wir-
kung auszugehen.
5.6.3.3 In-Vivo-Studien zur DNA Bindung
Die Bindung von Benzo[a]pyren oder 7,12-Dimethylbenzo[a]anthracen an DNAunter
dem Einfluss der Prsenz verschiedener Konzentrationen von Benzo[e]pyren wurde in
der Epidermis von Sencar-Musen untersucht. Bei Exposition gegen 50 nmol
Benzo[a]pyren und gleichzeitiger Applikation von Benzo[e]pyren (50, 150 oder 500
nmol) 12 Stunden lang fand sich eine von der Benzo[e]pyren-Dosis abhngige
Erhhung der DNA-Bindung um 22 bis 40% im Vergleich zur Behandlung mit
Benzo[a]pyren alleine. Bei Exposition gegen 200 nmol Benzo[a]pyren und 200, 600
oder 2000 nmol Benzo[e]pyren 12 Stunden lang konnte nur bei der hchsten Benzo-
[e]pyren-Dosis ein Anstieg in der DNA-Bindung detektiert werden; bei Exposition 24
Stunden lang wurde dagegen keine Vernderung der DNA-Bindung beobachtet. Bei
Koexposition gegen 7,12-Dimethylbenzo[a]anthracen (5 oder 20 nmol) und der 1- bis
20fachen molaren Menge Benzo[e]pyren 3 bis 48 Stunden lang verringerte sich die
DNA-Bindung in Abhngigkeit von der Benzo[e]pyren-Dosis (Smolarek et al. 1987).
In einer vergleichbaren Studie wurden in der Epidermis von Sencar-Musen, die 3
Stunden lang gegen 20 nmol Benzo[a]pyren exponiert waren, bei gleichzeitiger Expo-
sition gegen 60 nmol Benzo[e]pyren nur 69% und bei 200 nmol Benzo[e]pyren nur
59% der Addukte gefunden, wie sie bei alleiniger Exposition gegen Benzo[a]pyren
auftraten. Demgegenber fand sich bei Exposition 12, 24 oder 48 Stunden lang eine
Erhhung der Benzo[a]pyren-DNA-Adduktraten, die bei 12-stndiger Exposition und
60 nmol Benzo[e]pyren mit 27% Erhhung sowie bei 24-stndiger Exposition und
200 nmol Benzo[e]pyren mit 31% signifikant war. Nach 48-stndiger Exposition hatte
Benzo[e]pyren keinen Einfluss auf die Benzo[a]pyren-DNA-Adduktraten (Lau und
Baird 1992). Bei gleichzeitiger topischer Verabreichung von Dibenzo[a,l]pyren,
Dibenzo[a,e]pyren und Benzo[a]pyren auf die Musehaut wurden insgesamt 31%
weniger DNA-Addukte gefunden als bei Verabreichung der Einzelsubstanzen,
whrend die gemeinsame Verabreichung von Dibenzo[a,e]pyren und Benzo[a]pyren
zu einer um 65% erhhten DNA-Bindung im Vergleich zur DNA-Bindung bei der
Summe der Einzelsubstanzen fhrte (Hughes und Phillips 1990). In einer weiteren Stu-
die wurde radioaktiv markiertes Benzo[a]pyren (25 mg) alleine und zusammen mit
jeweils einem von fnf verschiedenen komplexen-PAH-haltigen Gemischen (5 mg)
dermal auf den Rcken von rasierten CD-1-Musen verabreicht. Die Benzo[a]pyren-
DNA-Bindung betrug nach alleiniger Applikation von Benzo[a]pyren 6,30,63
pmol/mg DNA. Bei Verabreichung von Benzo[a]pyren zusammen mit jeweils einem
der verschiedenen Gemische war die Benzo[a]pyren-DNA-Bindung in Abhngigkeit
vom komplexen Gemisch auf Werte zwischen 2,940,59 und 0,90,12 pmol/mg DNA
reduziert. Als Ursache wird die Konkurrenz der Verbindungen um Bindungstellen der
am Metabolismus beteiligten CYP vermutet (Springer et al. 1989).
Die aufgefhrten Studien zeigen, dass eine gleichzeitige Exposition gegen mehreren
PAH die genotoxische Wirkung einzelner Verbindungen abschwchen oder verstrken
kann, wobei keine beradditiven Effekte gefunden wurden. Die Interaktion wird davon
beeinflusst, welche Substanzen zusammenwirken sowie von deren Konzentration, der
Expositionsdauer und anderen Faktoren. Deshalb ist fr die Bewertung des genotoxi-
schen Potentials von Gemischen eine Einzelfallbetrachtung notwendig.
5.7 Kanzerogenitt
5.7.1 Kurzzeitstudien
In vitro
Zelltransformationsstudien:
Im Zelltransformationstest an Makrophagen, isoliert aus dem Bauchfell der Ratte,
erwiesen sich Benzo[a]pyren und Pyren als negativ (Andersen et al. 1988).
Benzo[a]pyren und trans-Benzo[a]pyren-4,5-diol bewirken bei C3H10T1/2-Zellen
morphologische Transformationen (Nesnow et al. 2002). In einer weiteren Studie mit
C3H10T1/2-Zellen induzierten Benzo[a]pyren und Benzo[a]pyren-7,8-diol dosisab-
hngig, Dibenzo[a,h]anthracen jedoch nur gering erhhte Transformationsraten;
Phenanthren verursachte keine Transformationen (Lubet et al. 1983). Ein Vergleich
der Transformationsaktivitten von Benzo[a]pyren und Dibenzo[a,l]pyren bei
C3H10T1/2-Zellen zeigte eine um den Faktor vier bis 12 hhere Wirkung des Diben-
zo[a,l]pyrens. Fr Dibenzo[a,e]pyren wurde eine im Vergleich zu Benzo[a]pyren
geringere, fr Dibenzo[a,l]pyren eine grere Wirkung auf die Transformationshufig-
keit bei C3H10T1/ 2CL8-Zellen berichtet (Davis et al. 1999). Auch bei der Untersu-
chung des Metabolismus von Dibenzo[a,h]anthracen in C3H10T1/2-Zellen konnten
Zelltransformationen registriert werden (Nesnow et al. 1994). Im Zusammenhang mit
der Untersuchung der Transformationsaktivitten von 6-Nitrochrysen und 6-
Nitrobenzo[a]pyren in den Zelllinien BALB/3T3, C3H10T1/2 und syrischen Hamster-
embryozellen wurden auch Benzo[a]pyren und Chrysen eingesetzt. Bei den syrischen
Hamsterembryozellen waren alle Verbindungen aktiv. Bezogen auf die Konzentratio-
nen und die entsprechenden Transformationsfrequenzen zeigte Benzo[a]pyren die
hchste, Chrysen die niedrigste Aktivitt. In den beiden anderen Zelllinien war ledig-
lich Benzo[a]pyren eindeutig aktiv (Sala et al. 1987). Auch Cruciani et al. (1996) beob-
achteten bei syrischen Hamsterembryonenzellen eine erhhte Inzidenz der Transfor-
mationen mit Benzo[a]pyren. Ein Vergleich der beiden Zellininen BALB/c-3T3 und
C3H10T1/2 ergab, dass beide sehr sensitiv sind, die C3H10T1/2-Zellen bei anderen
kanzerogenen Verbindungen aber nicht reagierten (Lubet et al. 1990). Wurden
Benzo[a]pyren und Dibenzo[a,h]anthracen als Mischung eingesetzt, wurde bei
CH310T1/2CL8-Zellen eine geringere (antagonistische) Transformationswirkung
beobachtet (Nesnow et al. 2000).
In vivo
Das Solt-Farber-Modell basiert auf der Beobachtung, dass bei Ratten einige in der
Leber kanzerogen wirkende Verbindungen bei einem kleinen Anteil der Hepatozyten
eine Resistenz gegen deren Zytotoxizitt bewirken. Aus diesen resistenten Hepato-
zyten knnen sich Krebszellen entwickeln. Im Solt-Farber-Modell werden prneo-
plastische Zellen durch die kurzzeitige Gabe von 2-Acetylaminofluoren im Futter
erzeugt und ihre Proliferation durch eine partielle Hepatektomie intensiviert (Solt und
Farber 1976; Solt et al. 1977). Tsuda et al. (1980) wandten dieses Modell bei Untersu-
chungen zur chemisch induzierten Kanzerogenese an. Als histochemischer Marker fr
die resistenten Hepatozyten diente die Expression der g-GT (g-Glutamyltranspepti-
dase) auf der Oberflche der Leberzellen. Mit Benzo[a]pyren konnten die g-GT-posi-
tiven Hepatozyten erzeugt werden, nicht jedoch mit Naphthalin (eingestuft in Kanze-
rogenitts-Kategorie 2; siehe Begrndungsnachtrag Naphthalin 2001), Pyren oder
Phenanthren.
5.7.2 Langzeitstudien
Die intrapulmonale Injektion an Osborne-Mendel-Ratten, bei der lichtabhngige Reak-
tionen, die eher zu biologisch weniger aktiven oder unwirksamen Artefakten fhren
knnen, vermieden werden, scheint fr die Abschtzung des kanzerogenen Potentials
von PAH fr die Lunge besonders geeignet zu sein, nicht nur aufgrund der Tatsache,
dass es sich um das Zielorgan handelt. Insgesamt fhrt dieses Tumormodell zu hnli-
chen Ergebnissen wie die Versuche mit der Tropfung auf die Musehaut und damit
auch zu einer hnlichen Reihung der Kanzerogenitt einzelner PAH.
Das kanzerogene Potenzial von Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen wurde nach einmali-
ger intratrachealer Instillation untersucht (Wenzel-Hartung 1992; Wenzel-Hartung
et al. 1990). Weibliche Osborne-Mendel-Ratten wurden in Gruppen zu je 35 Tieren mit
0, 1, 3 oder 6 mg Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen (Reinheit 99,6%) pro Tier behan-
delt. Es trat ein Karzinom bei der Dosis 1 mg/Tier sowie jeweils elf Karzinome bei der
mittleren und hohen Konzentration auf. Die Inzidenzen betrugen 2,9% (1 mg/Tier)
sowie jeweils 31,4%; die mittlere berlebensdauer 102 bis 105 Wochen. Im Vergleich
mit Benzo[a]pyren (Faktor 1,00) wurde die Kanzerogenitt von Benzo[b]naphtho[2,1-d]-
thiophen mit dem Faktor 0,02 angegeben.
Die tierexperimentellen Untersuchungen zur kanzerogenen Wirkung der polycycli-
schen aromatischen Kohlenwasserstoffe Anthanthren, Benzo[a]anthracen, Benzo-
[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen, Benzo[a]pyren, Chrysen,
Cyclopenta[cd]pyren, Dibenzo[a,h]anthracen, Dibenzo[a,e]pyren, Dibenzo[a,h]pyren,
Dibenzo[a,l]pyren, Indeno[1,2,3-cd]pyren, Naphthalin, Phenanthren und Pyren finden
sich in der Tabelle 7, zusammengestellt aus Tabelle A12 des Anhanges, deren Daten
aus der WHO-Dokumentation (WHO 1998) entnommen sind. Nach dermaler Applika-
tion zeigte sich bei allen untersuchten Substanzen eine kanzerogene Wirkung. Je nach
Applikationsart (siehe Tabelle 7) und Spezies waren auch andere Organe wie Lunge
oder Magen nach oraler Applikation, Leber nach intraperitonealer Gabe betroffen. Im
Inhalationsexperiment mit Benzo[a]pyren-Aerosol wurden beim Hamster Tumoren der
Nase, des Kehlkopfs, des Rachens, der Speiserhre, des Vormagens und der Trachea
erzeugt (Thyssen et al. 1981). Direkte submandibulare Zufuhr von Benzo[a]pyren
fhrte bei der Ratte zu lokalen Karzinomen und Sarkomen (Reichhart und Althoff
1980). Phenanthren und Pyren waren nur nach dermaler Verabreichung kanzerogen.
Nach alternierender Behandlung (Applikation erfolgte im Wechsel subkutan in rechte
und linke Leiste sowie in die Peritoneal-Hhle) mit Dibenzo[a,h]anthracen von zehn
Musen zweimal pro Woche ber 50 Wochen wurden bei drei Tieren subkutane Sar-
kome beobachtet (Boyland und Burrows 1935).
Bei Naphthalin-Behandlung konnten nach dermaler Applikation keine bzw. nicht ein-
deutige Hauttumoren beobachtet werden (Kennaway 1930; Knake 1956; Schmeltz
et al. 1978). Jedoch ist darauf hinzuweisen, dass wegen des hohen Dampfdruckes von
Naphthalin die dermale Applikation bei Kanzerogenittsstudien nur bedingt geeignet
erscheint. Eine inhalative Kanzerogenittsstudie an Musen (NTP 1992) zeigte signifi-
kant erhhte Vorkommen pulmonaler, alveolrer und bronchialer Adenome bei den
weiblichen Tieren. Naphthalin wurde aufgrund einer im Jahr 2000 durchgefhrten
inhalativen NTP-Studie, bei der sich bei mnnlichen und weiblichen Ratten Tumoren
im respiratorischen und olfaktorischen Epithel gezeigt hatten, in die Kanzerogenitts-
Kategorie 2 der MAK-und BAT-Werte-Liste eingestuft (siehe Nachtrag Naphthalin
2001).
5.8 Sonstige Wirkungen
Modellversuche mit in V79-Zellen des Chinesischen Hamsters singulr exprimierten
CYP-Formen (CYP1A1, 1B1 und 1A2) verschiedener Spezies (Mensch, Ratte, Maus)
fhrten fr diese Spezies zu unterschiedlichen Metabolitenprofilen und Konzentratio-
nen an proximalen und ultimalen Kanzerogenen (Jacob et al. 1996 a, b, 1999 b; Seidel
et al. 1998 a).
Bei mnnlichen Wistar-Ratten zeigten sich nach oraler Gabe von Benzo[a]pyren in
Dosen von 3, 10, 30 oder 90 mg/kg KG ber 35 Tage immuntoxische Wirkungen. Die
Thymusgewichte waren bei den Tieren der drei hheren Dosen dosisabhngig, die
Lymphknotengewichte bei denjenigen der hchsten Dosis vermindert. In dieser Dosis-
gruppe wurden die meisten toxischen Effekte beobachtet. Die relative Anzahl der B-Zel-
len in der Milz war schon bei einer Dosis von 10 mg/kg KG vermindert (De Jong et al.
1999). Die Untersuchung einer immunotoxischen Wirkung von Naphthalin an Milzkul-
turen verlief negativ. Dies wird von den Autoren darauf zurckgefhrt, dass die mikro-
somalen Milzzellen Naphthalin nicht metabolisieren knnen (Kawabata und White
1990).
Bei 10 Asphaltarbeitern und 13 Hochofenarbeitern wurde die Wirkung der PAH-Expo-
sition auf die T-Lymphozyten und die natrlichen Killerzellen untersucht. Die Aus-
scheidung an 1-Hydroxypyren im Urin war bei den Hochofenarbeitern im Vergleich zu
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den Asphaltarbeitern signifikant erhht. Beobachtet wurde eine im Vergleich zu den
Probanden der Kontrollgruppe bei den gegen PAH exponierten Arbeitern vorliegende
Hemmung der T-Lymphozyten-Proliferation. Eine Vermehrung an natrlichen Killer-
zellen trat nur bei den Asphaltarbeitern auf (Karakaya et al. 2004).
6 1-Methylpyren als Vertreter der alkylierten PAH
6.1 Allgemein
Es ist schon lange bekannt, dass in der Umwelt neben unsubstituierten aromatischen
PAH auch viele alkylierte PAH auftreten, insbesondere solche, die eine oder mehrere
Methyl-Gruppen aufweisen oder die in der Bay-Region mit einer Methylengruppe
berbrckt sind. Diese alkylierten PAH wurden bezglich ihrer Wirkung und ihres Vor-
kommens viel weniger gut untersucht als die unsubstituierten Kohlenwasserstoffe.
Dies liegt zum Teil daran, dass es viele positionsisomere Verbindungen gibt, deren
Trennung und Strukturaufklrung schwierig ist, zumal Referenzsubstanzen nur sehr
begrenzt verfgbar sind.
6.2 Vorkommen von alkylierten PAH
Als exemplarisch fr die Thematik kann eine Studie von Broman et al. (1987) angese-
hen werden, in der Sedimente aus der Ostsee bei Stockholm mit GC-MS auf PAH
untersucht wurden. Unter anderem wurden neben Phenanthren (562 ng/g) vier Peaks
von Monomethyl-Phenanthrenen (zusammen 528 ng/g), 13 Peaks von Dimethyl-
Phenanthrenen (767 ng/g) und 17 Peaks von Trimethyl-Phenanthrenen (698 ng/g)
gefunden. Da keine Standards fr die Dimethyl- und Trimethyl-Phenanthrene verfg-
bar waren, konnte deren exakte Struktur nicht aufgeklrt werden. Fr die Quantifizie-
rung wurde angenommen, dass die Ausbeute bei der Aufarbeitung und der Response-
Faktor bei der Massenspektrometrie gleich wie jene des analogen reinen PAH waren.
In dieser Studie wurden auch alle drei mglichen isomeren Methylpyrene (1-, 2- und
4-Methylpyren) im Sediment nachgewiesen.
Methylpyrene wurden berdies in Zigarettenrauch-Kondensaten (Grimmer 1988 b),
Autoabgasen und Zellulosepyrolysaten (Okamoto und Yoshida 1981), geruchertem
Kse (Guilln und Sopelana 2004), Olivenl (Guilln et al. 2004), und in Austern,
Krabben und Fischen (Pancirov und Brown 1977) nachgewiesen. ber deuterierte
Standards verschiedener alkylierter PAH unter anderem fr 1-Methylpyren, 2-Methyl-
pyren, 4-Methylpyren, 1,6-Dimethylpyren und 1,8-Dimethylpyren wurde gezeigt,
dass alle drei Monomethylpyrene ungefhr im gleichen Verhltnis in allen untersuch-
ten Proben vorkommen (Zigarettenrauch-Kondensate, gebrauchte le aus verschiede-
nen Motoren, Boden- und Sedimentproben, Steinkohlenteer und die Partikelfraktion
aus Dieselabgasen), wobei der Gehalt der Methylpyrene jenen des Benzo[a]pyren weit
bersteigen konnte (in den Zigarettenrauch-Kondensaten um den Faktor 8) oder auch
deutlich darunter blieb (um den Faktor 7 im Steinkohlenteer). Auch 1,6-Dimethylpyren
und 1,8-Dimethylpyren konnten einzeln oder als Summe in allen diesen Proben auer
im Steinkohlenteer nachgewiesen werden.
6.3 Metabolismus
Alkylierte PAH knnen einerseits ber die gleichen Stoffwechselwege wie ihre unsub-
stituierten Kongenere zu reaktiven Metaboliten, z. B. Bay-Region-Dihydrodiol-Epoxi-
den, aktiviert werden. Andererseits ermglichen Alkyl-Substituenten zustzliche Akti-
vierungswege, nmlich die Bildung reaktiver benzylischer Schwefelsureester. Die
Relevanz der Seitenkettenaktivierung lsst sich etwa am Beispiel des Pyrens und des
1-Methylpyrens aufzeigen. Beide Verbindungen haben keinen terminalen Benzoring
und knnen deshalb nicht zu vicinalen Dihydrodiol-Epoxiden aktiviert werden.
Nach Inkubation von 1-Methylpyren mit Lebermikrosomen und NADPH, dem Kofak-
tor fr Monooxygenasen, wurden sowohl der benzylische Alkohol, 1-Hydroxymethyl-
pyren, als auch Ring-oxidierte Metaboliten gefunden (Engst et al. 1999). Bei Verwen-
dung von Mikrosomen des Menschen und von unbehandelten Ratten dominierte die
Seitenkettenoxidation stark. Nach Enzyminduktion mit 3-Methylcholanthren verscho-
ben sich die Stoffwechselwege mit Rattenlebermikrosomen drastisch zu Gunsten der
Ring-Oxidation. Dieser Weg dominierte auch in V79-Zelllinien, in denen Ratten-
CYP1A1 exprimiert wurde, also in jener Form, die in der Leber durch 3-Methylchol-
anthren besonders stark induziert wird. Im Gegensatz dazu oxidierten alle untersuch-
ten in V79-Zellen exprimierten humanen CYP-Formen 1-Methylpyren bevorzugt an
der Methyl-Gruppe. Das galt auch fr CYP1A1, -1A2 und -1B1, die Formen, die je
nach Gewebe durch PAH gut induziert werden, und fr CYP3A4, die in der Leber
quantitativ wichtigste Form. Es ist deshalb zu erwarten, dass der Mensch sowohl
mit als auch ohne Enzyminduktion durch PAH 1-Methylpyren zu einem erheblichen
Teil zum 1-Hydroxymethylpyren umsetzt. 1-Hydroxymethylpyren ist ein exzellentes
Substrat fr zahlreiche Sulfotransferasen von Mensch und Ratte (Glatt et al. 2003).
Die weitere Metabolisierung von 1-Hydroxymethylpyren ist in Abbildung 7 darge-
stellt. Eine Induktion der Sulfotransferasen durch PAH wurde nicht beobachtet (Glatt
2007 a).
Die Sulfatgruppe ist in einigen chemischen Bindungen eine gute Abgangsgruppe. Ihre
spontane Abspaltung fhrt zu hochreaktiven Carbonium-Ionen (oder bei aromatischen
Aminen zu Nitrenium-Ionen), die kovalent an zellulre Makromolekle binden knnen
(Glatt et al. 2003). Das resultierende Sulfokonjugat, 1-Sulfooxymethylpyren, hat in
Wasser eine geringe Halbwertszeit (ca. 3 min), ist hoch reaktiv und bildet mutagene
DNA-Addukte (siehe auch Abbildung 7). Dabei ist bemerkenswert, dass die Expressi-
on der Sulfotransferase-Formen, die 1-Hydroxymethylpyren aktivieren, in der Ratte
sehr stark auf die Leber fokussiert ist, whrend beim Menschen auch extrahepatische
Sulfotransferase-Formen 1-Hydroxymethylpyren sehr gut aktivieren (Glatt et al.
2003). 1-Hydroxymethylpyren ist berdies ein exzellentes Substrat fr Alkoholdehy-
drogenasen (Ma et al. 2002), beim Menschen vor allem fr die Form 2 (Kollock et al.
2007). In der Tat dominierte nach Verabreichung von 1-Hydroxymethylpyren an Rat-
ten die Oxidation zur Carbonsure die Biotransformation; durch diese Konkurrenzre-
aktion wird die Sulfotransferase-abhngige Toxifizierung vermindert.
6.4 Genotoxizitt
In vitro
1-Methylpyren ist im Test an Salmonella typhimurium TA98 mit metabolischer Akti-
vierung (S9) positiv (50200 mg/Platte aus publizierter Graphik abgelesen). In einem
weiteren Versuch wurden die entstandenen Metaboliten extrahiert und mittels HPLC
aufgetrennt. Neben 1-Hydroxymethylpyren wurden das 4,5-Dihydrodiol und das
9,10-Dihydrodiol von 1-Methylpyren identifiziert (Rice et al. 1988 a). In CYP-expri-
mierenden V79-Zellen wurden die hchsten absoluten Raten an benzylischer Hydroxy-
lierung in den Zellen gefunden, die die beim Menschen vorkommenden Formen
Abb. 7. Metabolisierungschema des aus 1-Methylpyren ber CYP-Enzyme entstandenen
1-Hydroxymethylpyrens zum DNA-Addukt (Glatt et al. 2003)
CYP1B1, -1A1 und -3A4 exprimierten. Die relativen Raten der benzylischen Hydroxy-
lierung (1-Hydroxymethylpyren und 1-Pyrencarboxylsure als Summenparameter) in
den Zellen waren 83%, 81%, 8085% und 45% bei CYC3A4, -2E1, -1B1 und -1A1
sowie 3% bzw. 45% bei CYP1A1 und -1B2 aus der Ratte (Engst et al. 1999). Der
Hauptmetabolit beim Menschen, 1-Hydroxymethylpyren, ist in Salmonella-Stmmen
und V79-Zelllinien, die bestimmte Sulfotransferasen des Menschen oder anderer Su-
gerspezies exprimieren, stark mutagen (Glatt et al. 2002; 2003). 1-Methylpyren ist ein
starker Induktor von auerplanmiger DNA-Synthese (UDS) in frisch isolierten Rat-
tenhepatozyten (Rice et al., 1987). Bei einer Konzentration von 1 mM 1-Methylpyren
war diese Wirkung so stark, dass sie nicht mehr quantifiziert werden konnte, whrend
unsubstituiertes Pyren im gleichen System selbst in der hchsten untersuchten Kon-
zentration (0,5 mM) inaktiv blieb. Das als Positivkontrolle verwendete 7,12-Dimethyl-
benzo[a]anthracen, ein potentes Kanzerogen, zeigte eine deutlich schwchere UDS-
Induktion als 1-Methylpyren. Das Sulfokonjugat, 1-Sulfooxymethylpyren, bildete
DNA-Addukte in zellfreien Systemen (Glatt et al. 2003) und in Bakterien- und Su-
gerzellen in Kultur und induzierte Mutationen, sofern fr einen Transmembrantransfer
gesorgt wurde. Dies konnte erreicht werden durch Zugabe von Chlorid-Ionen zum
Medium, wobei die ladungsneutrale reaktive Spezies 1-Chlormethylpyren spontan
gebildet wurde (Glatt et al. 1990).
In vivo
In der Ratte in vivo induzierte 1-Hydroxymethylpyren nach intraperitonealer Gabe die
Bildung von DNA-Addukten in verschiedenen Geweben (Surh et al. 1990 b; Glatt
et al. 2003). Mnnlichen Sprague-Dawley-Ratten wurde mit Tritium markiertes 1-
Hydroxymethylpyren (0,25 mmol/kg KG) intraperitoneal appliziert. Nach sechs Stun-
den machten die benzylischen DNA-Addukte etwa 6070% der in der Leber gebun-
denen Radioaktivitt aus (Surh et al. 1990 b). Eine starke Bildung von DNA-Addukten
in der Leber und einzelnen anderen Geweben wurde auch mit der
32
P-Postlabelling-
Methode nachgewiesen (Glatt et al. 2003). Dabei wurden die hchsten Addukt-Hu-
figkeiten in der Niere gemessen, obwohl in diesem Gewebe wesentlich geringere Sul-
fotransferase-Aktivitten vorhanden sind als in der Leber (zur Metabolisierung s. auch
Abbildung. 7). Dies wird mit einer Verteilung des in der Leber gebildeten 1-Sulfooxy-
methylpyrens ber das Blut in Verbindung gebracht. Nach intraperitonealer Gabe bei
Ratten wurde 1-Sulfooxymethylpyren trotz seiner kurzen Halbwertszeit (Wasser,
37C) noch nach drei Stunden im Plasma nachgewiesen. Die reversible Bindung an
Plasmaproteine behinderte die Hydrolyse von 1-Sulfooxymethylpyren zu 1-Hydroxy-
methylpyren stark (Glatt et al. 2003). Die Bildung dieser DNA-Addukte wurde bis
200fach verstrkt, wenn die weitere Oxidation von 1-Hydroxymethylpyren durch
Hemmung der Alkoholdehydrogenasen mit dem Hemmstoff 4-Methylpyrazol oder
dem konkurrierenden Substrat Ethanol blockiert wurde. In vivo wurden bis zu 10
5
DNA-Addukte pro 10
8
Nukleotide erreicht, eine Hufigkeit, die fr Addukte solchen
Strukturtyps ungewhnlich hoch ist.
Das Sulfonkonjugat, 1-Sulfooxymethylpyren, bildete DNA-Addukte nach parenteraler
Verabreichung an Ratten (Glatt et al. 2003) und induzierte Mutationen durch Expres-
sion von Organic Anion Transporters in der Zielzelle (Bakhiya et al. 2006).
Bei Verabreichung von Alkylpyrenen, ihren benzylischen Alkoholen oder Schwefel-
sureestern wurde jeweils das gleiche DNA-Adduktmuster in Tieren in vivo gefunden
wie bei Behandlung von DNA mit Sulfatester in vitro (Glatt et al. 2007). Dies impli-
ziert, dass der beschriebene Aktivierungsweg tatschlich fr die in vivo beobachteten
Effekte verantwortlich ist.
6.5 Kanzerogenitt
Es wurden mehrere Kanzerogenittsuntersuchungen mit 1-Methylpyren durchgefhrt.
Bei lokaler Applikation induzierte 1-Methylpyren keine Hauttumoren, was bei einem
Aktivierungsweg, bei dem die hepatischen Sulfotransferase-Formen bei Nagetieren
eine wichtige Rolle spielen, nicht berrascht. Ein kanzerogener Befund zeigte sich bei
der neugeborenen Maus. In einer Gruppe von 39 neugeborenen Musen wurde jedes
Tier i.p. mit 150 mg 1-Methylpyren am 1. Tag, 300 mg 1-Methylpyren am 10. Tag und
600 mg 1-Methylpyren am 15. Lebenstag behandelt. Nach 52 Wochen wurden die ber-
lebenden 19 mnnlichen und 19 weiblichen Tiere gettet und die Lebern histologisch
untersucht. 1-Methylpyren fhrte zu einer signifikanten Zunahme von Lebertumoren
(8 Tumoren; bei Kontrolltieren 1 Tumor). Bei 1-Methylpyren-behandelten Tieren, aber
nicht bei Kontrolltieren, trat zudem eine nicht signifikant erhhte Hufigkeit der Lun-
genadenome und Leukmien auf. In der Studie wurde Benzo[a]pyren als Positivkon-
trolle eingesetzt. Trotz der um den Faktor 3,8 niedrigeren Dosis induzierte
Benzo[a]pyren Lebertumoren bei ungefhr dem doppelten Prozentsatz der Tiere und in
einer insgesamt etwa um den Faktor 7 greren Anzahl (Rice et al. 1987). Aufgrund
dieser Daten knnte man dem 1-Methylpyren einen quivalenzfaktor von 0,1 zuord-
nen, mit den Einschrnkungen, dass 1-Methylpyren und Benzo[a]pyren nur in einer
einzigen Dosis geprft wurden, und dass die neugeborene Maus vergleichsweise wenig
Sulfotransferasen exprimiert. Die Sulfotransferasen, die fr die Aktivierung von
1-Methylpyren erforderlich sind, wirken bei Benzo[a]pyren detoxifizierend.
1-Hydroxymethylpyren initiierte und promovierte Enzym-vernderte Foci in der Leber
bei neugeborenen Ratten (intraperitoneale Verabreichung, neun behandelte und berle-
bende Tiere, zwlf Kontrolltiere, Ttung nach 155 Tagen). Die Induktion solcher
Enzym-vernderter Foci ist ein guter Indikator fr eine hepatokanzerogene Wirkung
(Glatt et al. 1994 a). 1-Sulfooxymethylpyren initiierte nach epikutaner Verabreichung
Tumoren an der Haut der Maus. Gruppen von je 30 weiblichen CD-1-Musen erhiel-
ten 10 topische Applikationen mit 1-Hydroxymethylpyren oder 1-Sulfooxymethylpy-
ren (je 0,25 oder 0,5 mmol), gelst in Aceton/DMSO. Eine Woche nach der letzten
Applikation wurden 2,5 mg TPA zweimal wchentlich 22 Wochen lang aufgetragen.
Alle Tiere berlebten. Bei 1-Hydroxymethylpyren wurden bei der niedrigen Dosis bei
einem von 30 Tieren, bei der hheren Dosis bei drei von 30 Tieren Papillome beob-
achtet, bei 1-Sulfooxymethylpyren bei sieben bzw. zehn von 30 Tieren. Papillome tra-
ten bei drei von 30 Kontrolltieren auf. Damit induzierte nur 1-Sulfooxymethylpyren
bei der hchsten Dosierung bei Musen einen signifikanten Anstieg der Hufigkeit der
Hautpapillome (Surh et al. 1990 b). Nach subkutaner Verabreichung ist 1-Sulfooxy-
methylpyren ein komplettes Kanzerogen an der Haut der Ratte. Gruppen von je 12 Rat-
ten (30 Tage alt) wurden an jedem zweiten Wochentag mit 0,2 mmol 1-Hydroxyme-
thylpyren oder 1-Sulfooxymethylpyren 20mal subkutan behandelt. Den Tieren der
einen Kontrollgruppe wurde das Vehikel Sesaml/DMSO im Verhltnis 9: 1 verab-
reicht, die Tiere der zweiten Kontrollgruppe blieben unbehandelt. Nach 52 Wochen
wurden bei sieben der mit 1-Sulfooxymethylpyren behandelten Tiere Sarkome festge-
stellt, nicht aber bei den mit 1-Hydroxypyren behandelten Tieren. In dieser Gruppe ent-
wickelten sich bei zwei Tieren Fibroadenome. Bei Tieren der Kontrollgruppen zeigten
sich keine Tumoren (Horn et al. 1996).
6.6 Bewertung der Kanzerogenitt
Pyren war bei Maus und Goldhamster nicht kanzerogen (Tabelle A12 im Anhang) und
zeigte in den meisten Genotoxizttsuntersuchungen ein negatives Ergebnis; bei positi-
vem Resultat in Genotoxizttsuntersuchungen war die Wirkstrke viel schwcher als
jene von Benzo[a]pyren. Dagegen ist fr 1-Methylpyren eine kanzerogene und geno-
toxische Wirkung gut belegt, und der Aktivierungsweg ist aufgeklrt.
1-Methylpyren ist in der Umwelt weit verbreitet, wobei das Verhltnis der Gehalte von
1-Methylpyren und Benzo[a]pyren stark variieren kann.
1-Methylpyren kann in vitro wie auch im Tierversuch zu einem genotoxischen Meta-
boliten aktiviert werden. Der Aktivierungsweg ist gut beschrieben und weicht von
jenem fr Benzo[a]pyren stark ab. Untersuchungen mit cDNA-exprimierten Enzymen
lassen erwarten, dass 1-Methylpyren auch beim Menschen aktiviert wird vermutlich
sogar in einem strkeren Ausma als bei Musen und Ratten, vor allem wenn extrahe-
patische Gewebe betrachtet werden.
Zur Kanzerogenitt des 1-Methylpyren und seiner Metaboliten liegen nur vereinzelte
tierexperimentelle Untersuchungen vor. Diese belegen zwar eindeutig eine kanzeroge-
ne Wirkung, doch kann deren Strke nicht hinreichend beurteilt werden. Bei der neu-
geborenen Maus war 1-Methylpyren um etwa eine Grenordnung geringer potent als
Benzo[a]pyren. Da die beiden Substanzen ber unterschiedliche Stoffwechselwege
aktiviert werden, drfte ihre relative Wirkstrke auch vom Test-System abhngen. Die
vermehrte Bildung von DNA-Addukten nach gleichzeitiger Gabe von Ethanol und 1-
Hydroxymethylpyren zeigt, dass die Wirkung stark von der konkreten enzymatischen
Situation abhngen kann. Eine Festlegung von quivalenzfaktoren ist unter diesen
Gegebenheiten eher problematisch.
Viele andere alkylierte PAH knnen zu benzylischen Schwefelsure-Estern aktiviert
werden, einschlielich 1-Methylpyren, 2-Methylpyren, 4-Methylpyren, 1,6-Dimethyl-
pyren und 1,8-Dimethylpyren (Glatt 2007 d). Dabei sind die benzylischen Schwefel-
sure-Ester von 2-Methylpyren und 4-Methylpyren aber chemisch wesentlich weniger
reaktiv und biologisch weniger aktiv als 1-Sulfooxymethylpyren. Der Schwefelsure-
Ester von 1,6-Dimethylpyren ist hnlich aktiv wie 1-Sulfooxymethylpyren, jener von
1,8-Dimethylpyren ist deutlich reaktiver und biologisch potenter. Allerdings kommen
1,6-Dimethylpyren und 1,8-Dimethylpyren in geringerer Menge als 1-Methylpyren in
den untersuchten Matrices vor; auch sind sie schwieriger zu analysieren, da 15 isome-
re Dimethylpyrene und drei Ethylpyrene mit gleicher Masse mglich sind. Zudem lie-
gen erst wenige biologische Daten fr diese Verbindungen vor. Aus diesen Grnden
wird 1-Methylpyren als Vertreter der groen Klassen der alkylierten PAH bei der Rou-
tine-Analytik vorgeschlagen. Zudem sollte diese Substanz in verschiedenen Tiermo-
dellen vergleichend mit einem unsubstituierten PAH, z. B. Benzo[a]pyren, auf Strke
und Organotropie der kanzerogenen Wirkung geprft werden.
7 Wirkungsbilanzen fr die PAH
Wesentliche Fortschritte zum Verstndnis eines urschlichen Zusammenhanges zwi-
schen PAH-Exposition und Krebsentstehung konnten durch sogenannte Wirkungsbi-
lanzanalysen erreicht werden. In ihnen wurden bekanntermaen krebsverdchtige
Gemische wie Kraftfahrzeugabgas, gebrauchtes Motorenschmierl, Kohlerauchgas-
Kondensat sowie Tabakrauch-Kondensat chemisch fraktioniert und diese Fraktionen
im Vergleich zum Originalgemisch in einem geeigneten Tiermodell (epikutane Appli-
kation an der Maus oder intrapulmonale Applikation an der Ratte) auf ihr krebserzeu-
gendes Potential getestet (Grimmer 1993 c; Jacob 1996). Ergebnisse derartiger Wir-
kungsbilanzanalysen sind fr fnf verschiedene Gemische in Tabelle 8 wiedergegeben.
Tab. 8. Prozentualer Anteil der PAH und des Benzo[a]pyrens an der kanzerogenen Potenz verschie-
dener Gemische (Jacob 1996)
Wirkungsanteil in %
Maus (epikutan) Ratte (intrapulmonal)
PAH* Benzo[a]- PAH* Benzo[a]-
pyren pyren
gebrauchtes Motorl 70 18
Gew.-%** 1,1 0,02
Kfz-Abgas-Kondensat (Ottomotor) 85 6 81 2,4
Gew.-% 3,5 0,04 2,8 0,05
Steinkohlenrauchgas-Kondensat 90 11 >90 1,4
Gew.-% 22,7 0,1 29 0,11
Dieselmotorabgas-Kondensat
(organischer Extrakt) 80 4
Gew.-% 0,9 0,01
Zigaretten-Nebenstromrauch-Kondensat 75 0,17
Gew.-% 3,5 0,0004
* PAH mit 4 und mehr Ringen, ** prozentualer Anteil an der Gemischmasse
Aus ihnen sind drei Erkenntnisse zu gewinnen:
1. In allen untersuchten Gemischen ist die krebserzeugende Wirkung zum weitaus
berwiegenden Teil (7090% und mehr) auf die Klasse der PAH mit vier und
mehr Ringen zurckzufhren, obgleich diese mehrheitlich weniger als 4 Gewichts-
prozent des Gemisches ausmachen (Ausnahme: Steinkohlenrauchgas-Kondensat
mit 2329%).
2. Der durch Benzo[a]pyren bedingte Wirkungsanteil variiert stark innerhalb der hier
untersuchten Gemische (0,17% fr Zigaretten-Nebenrauch-Kondensat und 4% fr
den organischen Extrakt von Dieselmotorabgas-Kondensat, d.h. um den Faktor 24)
und korreliert nicht mit dem Massenanteil dieser Komponente in dem Gemisch, der
zwischen 410
4
und 0,1% liegt.
3. In zwei Tiermodellen, die verschiedene Spezies (Maus und Ratte) und ebenfalls
zwei verschiedene Zielorgane (Haut und Lunge) verwenden, wurden hnliche
Ergebnisse erhalten. So wird die exzeptionelle Bedeutung der PAH-Fraktion fr den
kanzerogenen Effekt im Fall von Kfz-Abgas-Kondensat und Steinkohlenrauchgas-
Kondensat in beiden Modellen besttigt (85% bzw. 81% (Kfz-Abgas) und 90%
(Steinkohlenrauchgas)). Der relative Wirkungsanteil von Benzo[a]pyren unter-
scheidet sich dagegen in den benutzten Tiermodellen mit 1,42,4% (Ratte, intra-
pulmonal) und 611% (Maus, epikutan) erheblich. Bei der 24 Monate langen
uerlichen Verabreichung der PAH-Fraktionen im Fall der epikutanen Applikation
bei der Maus wird die relative Wirkung von Benzo[a]pyren aufgrund der Stabilitt
dieser Komponente gegenber photoinduzierten Zersetzungsprozessen im Vergleich
zu anderen weniger stabilen kanzerogenen PAH (wie Anthanthren, Cyclopenta-
[cd]pyren, sowie PAH mit anthracenoiden Partialstrukturen) berbetont. Im Fall der
intrapulmonalen Applikation spielen diese Prozesse dagegen verstndlicherweise
keine Rolle.
Bei den hier erwhnten Wirkungsbilanzen wurden aus technischen Grnden allerdings
lediglich Kondensate bzw. Extrakte untersucht, whrend die Gasphase, von der eben-
falls krebserzeugende Wirkungen ausgehen knnen (Formaldehyd, Acrolein, Crotonal-
dehyd, Butenolide etc.), unbercksichtigt blieb.
Dass neben den bekannten krebserzeugenden PAH auch bislang unbekannte, vor-
nehmlich im hheren Siedebereich zu findende Homologe einen wesentlichen Beitrag
zur Gesamt-Kanzerogenitt liefern, ergibt sich bereits aus den in den 70er Jahren
durchgefhrten Wirkungsbilanzen von Automobilabgas (Grimmer 1977), in denen ver-
sucht wurde, den krebserregenden Effekt der PAH-Fraktion durch Applikation eines
synthetischen Gemisches der in diesem Gemisch nachgewiesenen biologisch aktiven
PAH zu simulieren. Durch Verabreichung von 7 kanzerogenen PAH (Benzo[a]pyren,
Benzo[a]anthracen, Chrysen, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen, Dibenzo-
[a,h]anthracen und Indeno[1,2,3-cd]pyren, gemischt im Verhltnis ihres Vorkommens
im Ottomotorabgas) konnten jedoch nur 1015% des Gesamteffektes hervorgerufen
werden. Es wurde vermutet, dass die verbleibenden 85% auf methylen-berbrckte
PAH vom Typ Cyclopenta[cd]pyren zurckzufhren sind. Eine einfache Rechnung
zeigt jedoch, dass der Effekt auf diese Komponente allein nicht zurckzufhren sein
kann. Zwar ist ihre Konzentration im Abgas etwa 12mal hher als die von Benzo-
[a]pyren, was aber bei einem Wirkungsquivalent von 0,15 maximal der doppelten
Wirkung von Benzo[a]pyren entspricht, dem in diesem Gemisch ein Wirkungsanteil
von 9% zugerechnet wurde. Zusammengenommen ergeben diese 8 Komponenten also
allenfalls einen Wirkungsanteil von 33%, whrend 67% der Wirkung unerklrt bleiben.
hnliche Verhltnisse fanden sich im Fall von Steinkohlenrauchgas-Kondensat (Stein-
kohlenverbrennung). Auch hier wird die gesamte kanzerogene Wirkung praktisch von
den PAH mit 4 und mehr Ringen bewirkt. Eine Hochvakuumdestillation der PAH-Frak-
tion in zwei Unterfraktionen zeigte aber, dass die flchtige Fraktion, die 50% der
Masse ausmachte und die alle gaschromatographierbaren PAH enthielt, auch nur zur
Hlfte zur Kanzerogenitt beitrug. Die restliche Wirkung blieb im Destillationsrck-
stand (ebenfalls 50 Gewichts-% der ursprnglichen Fraktion), in dem praktisch keine
gaschromatographierbaren PAH nachweisbar waren (Grimmer et al. 1985). Dieser
Befund weist darauf hin, dass sich unter den hher siedenden PAH entweder zahlrei-
che mig wirksame oder einige hoch wirksame, bisher unidentifizierte Komponenten
befinden mssen, von denen z.Zt. erst das Dibenzo[a,l]pyren bekannt wurde. Die Auf-
klrung ihrer Strukturen ist daher von hoher Bedeutung.
8 Wirkungsquivalente der PAH
Aufgrund der unterschiedlichen PAH-Profile ist nicht von einem konstanten Beitrag
des Benzo[a]pyrens zur Gesamtkanzerogenitt der PAH-Fraktion in verschiedenen
Gemischen auszugehen. Bei der hohen Konzentration, z. B. an Chrysen und Benzo-
[b]fluoranthen, knnen auch diese Komponenten, obgleich sie nur Wirkungsquiva-
lente von 0,03 bzw. 0,11 aufweisen, wesentlich zum kanzerogenen Potential beitragen.
Durch das in jngster Zeit berichtete, extrem hohe krebserregende Potential des Diben-
zo[a,l]pyrens (zwischen 10- und 100fach wirksamer als Benzo[a]pyren) (Muller et al.
1995, 1997), kommt dieser Verbindung mglicherweise eine besondere Bedeutung in
PAH-Gemischen zu. Neuere Untersuchungen haben gezeigt, dass die Konzentration an
Dibenzo[a,l]pyren in verschiedenen Gemischen (Automobilabgas, Steinkohlenteer-
pech) etwa 1/10 der des Benzo[a]pyrens erreicht. Auch wurde diese Komponente im
Zigarettenrauch-Kondensat nachgewiesen (Seidel et al. 2004). Ein Hundertstel der
Benzo[a]pyren-Konzentration an dieser Komponente wrde somit den gleichen biolo-
gischen Effekt wie den fr Benzo[a]pyren zu erwartenden hervorrufen. Fr viele
Gemische ist daher zu erwarten, dass der PAH-bedingte krebserregende Effekt zu
einem wesentlichen Teil auf Dibenzo[a,l]pyren zurckzufhren ist. Hieraus ist auch die
Notwendigkeit zu erkennen, diese Komponente zuknftig in PAH-Gemischen quanti-
tativ zu bestimmen.
Um dem variablen Anteil des Benzo[a]pyrens in einer betrachteten Matrix Rechnung zu
tragen, wird zur Bewertung der krebserregenden Potenz eines PAH-Gemisches vorge-
schlagen, einen Summenparameter im Sinne eines Dosis-Additions-Modells (IARC
1986 b) auf der Basis von Wirkungsquivalenten aus Kanzerogenittsuntersuchungen
am Nager zu errechnen. Die Frage, ob sich die kanzerogenen Potenzen einzelner PAH
wirklich zu einem Gesamtpotential addieren oder ob synergistische Effekte, wie die
Induktion bestimmter CYP-Enzyme durch beispielsweise selbst nicht oder nur schwach
kanzerogene PAH wie Benzo[k]fluoranthen (Jacob et al. 1979; Schmoldt et al. 1981), zu
beradditiven Effekten fhren, die auf einer vermehrten Bildung von proximalen und
ultimalen Kanzerogenen beruhen, ist gegenwrtig nicht zu entscheiden.
9 quivalenzfaktoren der PAH
Die Proportionalitt der ueren und der inneren Belastung ist bei der Anwendung von
quivalenzfaktoren zur Abschtzung einer gesundheitlichen Belastung ein wichtiges
Kriterium. Der zugrunde liegende Wirkungsmechanismus der betrachteten Substanzen
sollte vergleichbar sein (Neumann 1996). PAH unterliegen einer metabolischen Akti-
vierung zu reaktiven Metaboliten, die infolge einer DNA-Bindung fr die genotoxische
Wirkung verantwortlich sind. Die hier fr PAH angesetzten Wirkungsquivalenzfakto-
ren basieren auf Kanzerogenittsuntersuchungen vorwiegend im Lungenimplanta-
tionsmodell.
Die in verschiedenen bersichtsartikeln publizierten, auf Benzo[a]pyren (1,0) bezoge-
nen Wirkungsquivalente einzelner Verbindungen wurden in Tabelle 9 zusammenge-
stellt. Die Autoren dieser Publikationen weisen darauf hin, dass ausreichende Daten
zum Effekt des Expositionsweges auf Wirkungsquivalente nicht vorliegen, gehen aber
davon aus, dass bei den Berechnungen der Wirkungsquivalente angenommen werden
kann, dass die relativen kanzerogenen Potenziale der Verbindungen dieselben sind,
Tab. 9. Zusammenstellung der Wirkungsquivalente nach Malcolm und Dobsen (1994)
Verbindung Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs-
quivalent quivalent quivalent quivalent quivalent quivalent
Rugen et al. Nisbet und Clement Chu und USEPA Krewski
(1989) LaGoy (1988) Chen (1984) et al.
(1992) (1984) (1989)
Naphthalin
a)
0,001 0
Fluoranthen 0,001 0
Chrysen 0,01 0,0044 0,001 1 0,004
Anthracen 0,01 0,32 0
Dibenzo[a,h]anthracen 0,60 5 1,1 0,69 1 1,11
Dibenzo[a,c]anthracen
Benzo[a]anthracen 0,005 0,1 0,145 0,013 1 0,145
Phenanthren 0,001 0
1-Methylphenanthren
Benzo[b]fluoranthen 0,024 0,1 0,140 0,08 1 0,141
Benzo[j]fluoranthen 0,08
Benzo[k]fluoranthen 0,1 0,066 0,004 1 0,061
Pyren 0,001 0,081 0 0,081
Benzo[a]pyren 1 1 1 1
Benzo[e]pyren 0.004
Cyclopenta[cd]pyren 0,023
Indeno[1,2,3-cd]pyren 0,006 0,1 0,232 0,017 1 0,232
Perylen
Benzo[ghi]perylen 0,01 0,022 0 0,022
Fluoren 0,001 0
Acenaphthylen 0,001 0
Acenaphthen 0,001 0
Coronen
a)
Naphthalin wurde im Begrndungsnachtrag Naphthalin 2001 in die Kanzerogenitts-Kategorie
2 eingestuft; fr die Ableitung eines quivalenzfaktors geeignete Studien fehlen jedoch bisher.
unabhngig von der Art der Exposition. Den PAH, fr die aus der Literatur kein Wert
fr das Wirkungsquivalent ersichtlich ist, wird von ihnen auf der Grundlage der
IARC- und USEPA-Klassifikation ein Wert zugeordnet. Nicht kanzerogene Verbin-
dungen erhalten einen Wert von 0,001 (Malcolm und Dobsen 1994).
Andere Autoren gehen von Hautpinselungs-Studien aus. Dem Modell liegt die Annah-
me zugrunde, dass die relativen kanzerogenen Wirkungen einzelner PAH, die ber
intestinale Exposition bestimmt wurden, hnlich sind wie diejenigen bei dermaler
Exposition. Als Endpunkt wird von ihnen die Summe der Papillome und Karzinome
pro Verbindung angesehen. Bei der Berechnung der Relativen-Tumor-Dosis (RTD)
kommen sie zu den in der Tabelle 10 angegebenen Werten (Rugen et al. 1989).
Tab. 9. Fortsetzung
Verbindung Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs-
quivalent quivalent quivalent quivalent quivalent quivalent
Deutsch- Wenzel- Wynder Habs et al. LaVoie Pfeiffer
Wenzel Hartung und (1980) et al. (1977)
et al. et al. Hoffmann (1982)
(1983 a) (1990) (1959 a, b)
Naphthalin
a)
Fluoranthen 0
Chrysen 0,03 0,01
Anthracen 0
Dibenzo[a,h]anthracen 1,908 1,0 1,0
Dibenzo[a,c]anthracen
Benzo[a]anthracen
Phenanthren 0,001
1-Methylphenanthren
Benzo[b]fluoranthen 0,11 0,1 0,3 0,1
Benzo[k]fluoranthen 0,03 0,01 0 0,01
Pyren 0
Benzo[a]pyren 1 1 1 1 1 1
Benzo[e]pyren 0,003 0,01
Cyclopenta[cd]pyren 0,1
Indeno[1,2,3-cd]pyren 0,08 0,01 0
Perylen
Benzo[ghi]perylen 0,01 0
Fluoren
Acenaphthylen
Acenaphthen
Coronen
a)
In einer anderen Verffentlichung werden Ergebnisse einer Modellrechnung vorge-
stellt. Es wird angenommen, dass die Wahrscheinlichkeit der Tumorentstehung nach
einer bestimmten Expositionszeit gegen eine Mischung von PAH mit einer Benzo-
[a]pyren quivalenten Konzentration dem Two-Stage Birth-Death-Mutation Model
entspricht. Bei diesem Modell werden Gewebewachstum und Zelldynamik mit einbe-
zogen (Krewski et al. 1989). Weitere Angaben zu den hierbei eingesetzten Daten fehlen.
Fr die Ableitung von toxischen quivalenzfaktoren (Toxic Equivalency Factors)
geht man von den folgenden Annahmen aus. Eine gut untersuchte Verbindung kann als
Tab. 9. Fortsetzung
Verbindung Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs- Wirkungs-
quivalent quivalent quivalente quivalente
Phillips et al. Hughes und bzw. Wirkungs- gerundet
(1979) Phillips (1993)
b)
bereiche
Naphthalin
a)
0.001 0,001
Fluoranthen 0,001 0,001
Chrysen 0,00440,03 0,01
Anthracen 00,32
c)
0,01
Dibenzo[a,h]anthracen 1,0 0,605 1,0
Dibenzo[a,c]anthracen 0,1
d)
0,1
d)
Benzo[a]anthracen 0,1 0,0050,145 0,1
Phenanthren 0,001 0,001
1-Methyl-phenanthren 0,001
d)
0,001
d)
Benzo[b]fluoranthen xxx 0,0240,3 0,1
Benzo[j]fluoranthen 0,030,08 0,1
Benzo[k]fluoranthen xx 0,0040,1 0,1
Pyren 0,0010,081
c)
0,001
Benzo[a]pyren 1 1 1
Benzo[e]pyren 0,0030,01 0,01
Cyclopenta[cd]pyren 0,0230,1 0,1
Indeno[1,2,3-cd]pyren x 00.232 0,1
Perylen 0,001
d)
0,001
d)
Benzo[ghi]perylen 0,010,022 0,01
Fluoren 0,001 0,001
Acenaphthylen 0,001 0,001
Acenaphthen 0,001 0,001
Coronen 0,001
b)
0,001
d)
a)
b)
Grenangabe, da die Daten nicht auf Benzo[a]pyren bezogen
c)
Wirkungsquivalente, die wegen Nicht-bereinstimmung mit den Daten nicht verwendet wurden
d)
Wirkungsquivalente ber IARC- und USEPA-Klassifikation
Surrogat oder als Referenzsubstanz fr alle Verbindungen der Verbindungsklasse die-
nen. Die toxischen Effekte aller Verbindungen der Verbindungsklasse sind qualitativ
denjenigen der Surrogat-Verbindung hnlich und knnen quantitativ ber relative
Potenzen oder toxische quivalenzfaktoren charakterisiert werden. Die toxischen
quivalenzfaktoren verschiedener Endpunkte sind hnlich, so dass begrenzte Informa-
tionen zur relativen toxischen Potenz in einem oder in wenigen Testsystemen dafr ein-
gesetzt werden knnen, toxische quivalenzfaktoren fr eine einzelne Verbindung
oder Untergruppe von Verbindungen fr andere Endpunkte festzulegen. Die toxischen
Wirkungen der Verbindungen einer Mischung sind additiv. Als Grundlage nehmen die
Autoren neben den Verffentlichungen von Chu und Chen (1984) und Clement (1988)
insgesamt 11 Verffentlichungen mit verschiedenen Applikationen (intrapulmonal,
dermal, subkutan) und der Bildung von DNA-Addukten in In-vitro-Untersuchungen.
Der von den Autoren durchgefhrte Vergleich mit Ergebnissen von Studien von
Schmhl et al. (1977) und Pfeiffer (1977) zeigt teilweise bereinstimmungen (Nisbet
und LaGoy 1992).
Untersucht wurde an weiblichen 3 Monate alten Osborne-Mendel-Ratten (27 bis 35
Tiere pro Dosisgruppe) die Wirkung von Benzo[a]pyren, Anthanthren, Benzo[b]fluor-
anthen, Indeno[1,2,3-cd]pyren, Benzo[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen, Benzo[e]-
pyren und Benzo[ghi]perylen nach einmaliger Lungenimplantation (Stanton et al.
1972) von je drei Dosierungen pro Substanz (bei Anthanthren zwei Dosierungen). Die
Tiere wurden bis zu ihrem natrlichen Tod beobachtet und danach wurden die Lungen
untersucht. Als Parameter der kanzerogenen Wirkung diente die Anzahl der tumortra-
genden Tiere. Ein dosisabhngiger Bezug auf Grundlage der histologischen Beurtei-
lung und der mathematischen Berechnungen konnte fr Benzo[a]pyren, Benzo[b]fluor-
anthen, Indeno[1,2,3-cd]pyren, Benzo[k]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen und Anth-
anthren hergestellt werden. Bei Benzo[ghi]perylen zeigte sich nur eine schwache Wir-
kung. Die relativen kanzerogenen Wirkungen sind in Tabelle 11 angegeben. Die Auto-
ren weisen auf die bereinstimmung der Ergebnisse mit denjenigen anderer Untersu-
chungen nach dermaler oder subkutaner Applikation der Substanzen hin (Deutsch-
Wenzel et al. 1983 b).
Tab. 10. Relative Dosen der kanzerogenen Wirkung von PAH (bezogen auf Benzo[a]pyren = 1)
berechnet ber die Anzahl der Papillome und Karzinome nach Hautpinselung (Rugen et al.
1989)
Verbindung Beobachtungs- Relative-Tumor- Literatur
zeit (Monate) Dosis (RTD)
bezogen auf
Benzo[a]pyren 1,0
Benzo[a]anthracen 18 179 Bingham und Falk 1969
Benzo[b]fluoranthen 8 42,5 Wynder und Hoffmann 1959 a
Benzo[j]fluoranthen 8 13,1 Wynder und Hoffmann 1959 a
Dibenzo[a,h]anthracen 7 1,67 Wynder und Hoffmann 1959 b
Indeno[1,2,3-cd]pyren 10 167 Wynder und Hoffmann 1961
Auch andere Autoren setzten zur Applikation von Phenanthren, Chrysen, Dibenzo-
[a,h]anthracen, Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen und Benzo[a]pyren als Referenzsub-
stanz bei weiblichen Osborne-Mendel-Ratten die Lungenimplantation ein. Die Tiere
wurden bis zu ihrem natrlichen Tod beobachtet, und danach wurden die Lungen unter-
sucht. Als Parameter der kanzerogenen Wirkung diente die Anzahl der Tumoren pro
Tier. Nach Probit-Analyse der Ergebnisse wurden, relativ zur kanzerogenen Wirkung
von Benzo[a]pyren, Wirkungsquivalente von 1,91 fr Dibenzo[a,h]anthracen, von
0,03 fr Chrysen, von 0,02 fr Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen und von 0,001 fr
Phenanthren bestimmt (Wenzel-Hartung et al. 1990).
Auf die Haut appliziert wurden 0,5%ige Lsungen von vier aus Zigarettenrauch-
Kondensat isolierten und aufgereinigten Verbindungen (Benzo[b]fluoranthen, Benzo-
[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen und Benzo[mno]fluoranthen) in Aceton bei Grup-
pen von je 20 weiblichen Swiss-Musen dreimal wchentlich ber einen Zeitraum von
6 bis 13 Monate. Fr Benzo[b]fluoranthen und Benzo[j]fluoranthen wurden relativ
starke biologische Wirkungen, fr Benzo[k]fluoranthen minimale und fr Benzo-
[mno]fluoranthen keine Wirkungen beobachtet (Wynder und Hoffmann 1959 a). In
einer weiteren Untersuchung wurden neben weiteren PAH Dibenzo[a,h]anthracen und
Dibenzo[a,i]pyren untersucht (Wynder und Hoffman 1959 b). In einer Tabelle sind die
relative kanzerogene Wirkung von Benzo[a]pyren und Dibenzo[a,h]anthracen jeweils
mit +++, diejenige von Benzo[b]fluoranthen und Benzo[j]fluoranthen mit ++, fr
Benzo[a]anthracen und Chrysen mit +, fr Benzo[e]pyren, Benzo[k]fluoranthen und
Benzo[ghi]perylen mit angegeben (Wynder und Hoffmann 1959 b).
Benzo[a]pyren, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen,
Indeno[1,2,3-cd]pyren, Cyclopenta[cd]pyren und Coronen wurden im epikutanen
Tropfversuch an der Musehaut untersucht. Je 40 weiblichen NMRI-Musen (Alter: 10
Wochen) pro Dosisgruppe wurden zweimal wchentlich drei Dosen der in Aceton
gelsten Verbindungen im Dosisbereich von 1,7 bis 9,2 pg/Tier; bei Cyclo-
penta[cd]pyren 1,7 bis 27,2 pg/Tier auf die geschorene Rckenhaut getropft. Bei Coro-
nen (gelst in DMSO) erfolgte die Applikation viermal pro Woche. Die Tiere wurden
bis zum natrlichen Tod beobachtet und danach wurde die Haut histologisch unter-
Tab. 11. Relative kanzerogene Wirkung einiger PAH nach Lungenimplantation bei Osborne-
Mendel-Ratten (Deutsch-Wenzel et al. 1983 b)
Verbindung Relative kanzerogene Wirkung
Anthanthren 0,19
Benzo[b]fluoranthen 0,11
Benzo[k]fluoranthen 0,03
Benzo[ghi]perylen 0,01
Benzo[a]pyren 1,00
Benzo[e]pyren 0,003
Indeno[1,2,3-cd]pyren 0,08
sucht. Die Kontollgruppen umfassten 80 Tiere (k. w. A.). Benzo[a]pyren und Benzo-
[b]fluoranthen zeigten einen klaren, Benz[j]fluoranthen und Cyclopenta[cd]pyren
einen schwachen kanzerogenen Effekt, bezogen auf die Anzahl der Tumoren. Coronen,
Benzo[k]fluoranthen und Indeno[1,2,3-cd]pyren wurden als nicht kanzerogen einge-
stuft. Nach statistischer Bearbeitung der Daten ergab sich fr Benzo[b]fluoranthen eine
im Vergleich zu Benzo[a]pyren relative effektive Wirkung von 0,27, fr Cyclo-
penta[cd]pyren hierfr ein Wert von 0,05 (Habs et al. 1980).
An je 20 weiblichen CD-1-Musen pro Dosisgruppe wurde mit Benzo[b]fluoranthen,
Benzo[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen und Benzo[a]pyren ein Initiations-Promo-
tionsversuch durchgefhrt. Zur Initiierung wurden 10 Dosen verabreicht (Gesamtdosis
10 bis 100 mg in Aceton, bei Benzo[a]pyren 30 mg). Zehn Tage nach der Initiation
wurde TPA dreimal wchentlich 20 Wochen lang appliziert. Die Initiierungsdosis von
30 mg fhrte bei Benzo[a]pyren zu 4,9 Tumoren/Tier, bei Benzo[b]fluoranthen zu 2,3
Tumoren/Tier, bei Benzo[j]fluoranthen zu 0,6 Tumoren/Tier und bei Benzo[k]fluor-
anthen zu 0,1 Tumoren/Tier. Die Tiere der Kontrollgruppe (Applikation von Aceton)
waren ohne Befund (LaVoie et al. 1982).
Benzo[a]pyren und Dibenzo[a,h]anthracen wurden einmalig subkutan bei Musen
appliziert. Die Untersuchung erfolgte nach 114 Wochen. Ein Vergleich der Aktivitt
von Benzo[a]pyren mit derjenigen von Dibenzo[a,h]anthracen ergab, dass mit 2,35 und
4,7 mg Dibenzo[a,h]anthracen hhere Tumorraten beobachtet wurden, verglichen mit
3,12 und 6,25 mg Benzo[a]pyren. Bei den mit Benzo[a]pyren behandelten Tieren ent-
wickelten sich 9 bzw. 35 Sarkome, bei den mit Dibenzo[a,h]anthracen behandelten Tie-
ren 37 bzw. 39 Sarkome (Inzidenzen beziehen sich auf jeweils 100 Tiere) (Pfeiffer 1977).
Lsungen (1 mmol/Tier) von
3
H-markiertem Benzo[a]pyren, Dibenzo[a,h]anthracen,
Benzo[a]anthracen und Dibenz[a,c]anthracen wurden auf den rasierten Rcken von
mnnlichen C57BL-Musen (15 Tiere pro Gruppe) aufgetragen. Nach Ttung der Tiere
wurde die DNA des behandelten Hautbereiches isoliert, enzymatisch hydrolysiert und
das Hydrolysat ber Sulenchromatographie aufgetrennt. Es ergaben sich DNA-Bin-
dungsraten von 27 pmol/mg DNA fr Benzo[a]pyren, 15 pmol/mg DNA fr Diben-
zo[a,h]anthracen, 10 pmol/mg DNAfr Dibenz[a,c]anthracen und 2 pmol/mg DNAfr
Benzo[a]anthracen (Phillips et al. 1979).
Bei Untersuchungen an mnnlichen Parkes-Musen (sechs bis acht Wochen alt) wurden
1,0 mmol Benzo[ghi]perylen/Maus dermal appliziert, Gruppen von je vier Musen wur-
den sechs Stunden, einen Tag und 2, 4, 7, 21 und 84 Tage nach der Behandlung gettet
und die DNAdes behandelten Hautareals isoliert. Muse wurden mit je 0,25 mmol Sub-
stanz/Maus mit Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen,
Benzo[ghi]fluoranthen, Benzo[ghi]perylen, Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen und Inde-
no[1,2,3-cd]pyren behandelt und die DNA des behandelten Hautareals wurde isoliert.
Ein Vergleich der DNA-Adduktraten nach
32
P-Labelling mit einer entsprechenden Wir-
kung von Benzo[a]pyren kann nicht vorgenommen werden (Hughes und Phillips 1993).
Eine Untersuchung mit von den Autoren synthetisiertem Dibenzo[a,l]pyren an weibli-
chen Swiss-Musen (Wynder und Hoffmann 1961) kann aufgrund fraglicher Substanz-
identifizierung (angegebener Schmelzpunkt 224 bis 226C; nach WHO 1998 liegt der
Schmelzpunkt von Dibenzo[a,l]pyren bei 162C) nicht verwendet werden. Von der
kalifornischen Umweltbehrde (OEHHA 1994) wurden Berechnungen von quiva-
lenzfaktoren fr Dibenzo[a,l]pyren, Dibenzo[a,e]pyren, Dibenzo[a,h]pyren und
Dibenzo[a,i]pyren durchgefhrt, die auf den von Cavalieri et al. (1989, 1991) erhobe-
nen Daten beruhten. Bei Dibenzo[a,l]pyren wurde von Cavalieri et al. (1989, 1991) die
tumorinduzierende Wirkung und deren Dosisabhngigkeit von vier Dibenzo[a]pyrenen
an der Haut der Maus und in der Brustdrse der Ratte untersucht. In einigen Experi-
menten wurde Benzo[a]pyren als Referenzsubstanz eingesetzt. Dibenzo[a,l]pyren
zeigte sich als die Substanz mit dem hchsten Wirkungspotenzial. Mehrere Dosierun-
gen wurden getestet. Beim Vergleich der Ergebnisse nach dermaler Applikation von
33,3 nmol Dibenzo[a,l]pyren als Initiator (Phorbolester als Promotor) mit denjenigen
nach Applikation der gleichen Menge von Benzo[a]pyren zeigte sich, dass Dibenzo-
[a,l]pyren bei 23 von 24 Tieren Tumoren induziert hatte, whrend Benzo[a]pyren bei
10 von 23 Tieren zu Tumoren gefhrt hatte. Es ergab sich eine relative Wirkungspo-
tenz von 5,8. In einem zweiten Experiment wurden je 4 nmol pro Substanz verglichen.
Bei 22 der 24 mit Dibenzo[a,l]pyren behandelten Tiere zeigten sich Tumoren, bei den
mit Benzo[a]pyren behandelten bei einem von 24 Tieren. Dies ergab eine relative Wir-
kungspotenz von 25. In einem dritten Experiment wurden 100 nmol der beiden Sub-
stanzen ohne Promoter verglichen. Sieben der 24 Tiere der Dibenzo[a,l]pyren-Gruppe
und ein Tier der Benzo[a]pyren-Gruppe hatten Tumoren; die relative Wirkungspotenz
ergab sich mit 4. Direkte Applikation von 0,25 und 1 mmol Dibenzo[a,l]pyren in die
Brustdrse fhrte bei allen behandelten Ratten zu Tumoren (19 bzw. 20 Tiere),
whrend bei nur einem der mit 0,25 mmol Benzo[a]pyren behandelten Tiere ein Tumor
auftrat. Dies ergibt eine relative Wirkungspotenz von 100. Aufgrund dieser wesentlich
hheren tumorinduzierenden Wirkung von Dibenzo[a,l]pyren wird diesem ein qui-
valenzfaktor von 10 zugeordnet. Die tumorinduzierende Wirkung von Dibenzo[a,h]-
pyren ist der von Dibenzo[a,l]pyren vergleichbar. Zum Beispiel zeigten sich bei 18 von
24 behandelten Musen nach dermaler Applikation von Dibenzo[a,h]pyren Tumoren,
im Vergleich dazu mit Dibenzo[a,l]pyren bei 22 von 24 Tieren. Bei den Kontrolltieren
traten bei zwei von 23 Musen Hauttumoren auf. Dibenzo[a,h]pyren wird ein quiva-
lenzfaktor von 10 zugeordnet.
Dibenzo[a,i]pyren wird in seiner Wirkung derjenigen von Dibenzo[a,l]pyren gleichge-
stellt. Als Beispiel wird angefhrt, dass sich bei Musen nach dermaler Applikation
von Dibenzo[a,i]pyren bei 15 von 24 behandelten Tieren Tumoren zeigten; im Ver-
gleich dazu mit Dibenzo[a,l]pyren bei 22 von 24 Tieren. Bei zwei von 23 Tieren der
Kontrollgruppe wurden Hauttumoren beobachtet. Dibenzo[a,i]pyren wird ein quiva-
lenzfaktor von 10 zugeordnet.
Dibenzo[a,e]pyren zeigte von den vier Verbindungen die geringsten Wirkungen
(Cavalieri et al. 1989, 1991). Dibenzo[a,l] pyren hatte im Vergleich zu Dibenzo-
[a,e]pyren eine zehn- bis zwanzigfach strkere Wirkung. Dibenzo[a,e]pyren wird ein
quivalenzfaktor von 1 zugeordnet.
Ein Beispiel fr die Anwendung von Wirkungsquivalenten ist in Tabelle 12 gegeben.
Hier sind fr das Gemisch gebrauchtes Motorenschmierl (zuflliges Muster) die
Konzentrationen mit den jeweiligen Wirkungsquivalenten multipliziert und die
Summe gleich 100% gesetzt, wobei bislang unbekannte, mglicherweise krebserre-
gende PAH natrlich nicht bercksichtigt werden knnen. Der prozentuale Wirkungs-
anteil von Benzo[a]pyren errechnet sich fr diesen Fall zu etwa 14%. Eine von Grim-
mer et al. (1982) durchgefhrte Wirkungsbilanzanalyse mit einem gebrauchten Moto-
renl ergab fr Benzo[a]pyren einen relativen Wirkungsanteil von 18%. Bercksichtigt
man die fr die epikutane Applikation diskutierte berschtzung dieser Komponente
(vergleiche Abschnitt 7), kommt man mit dieser Berechung zu recht hnlichen Ergeb-
nissen.
Es hat bisher bereits eine Reihe von Vorschlgen zu toxischen quivalenzfaktoren fr
PAH, basierend auf verschiedenen Kanzerogenittsuntersuchungen gegeben (siehe
Tab. 12. Analyse eines gebrauchten Mineralls und Abschtzung der Anteile einzelner PAH an der
kanzerogenen Gesamtwirkung
PAH Konzentration Wirkungs- c f % der Wirkung
[mg/kg] (c)
a)
quivalent Gesamt- relativ zu
(f)
j)
wirkung
k)
Benzo[a]pyren
Phenanthren 11200 0,001
b)
1,2 2,5 0,2
Anthracen 24,0
Fluoranthen 42,8 0,001
e)
0,04 0,1
Pyren 255 0,001
e)
0,26 0,5 -
h)
Benzo[b]naphtho[2,1-d]- 314 0,01
b)
3,14 6,6 0,5
thiophen
Benzo[ghi]fluoranthen 1,37
Benzo[c]phenanthren 3,92
Cyclopenta[cd]pyren 0,18 0,1
e)
0,02
h)
h)
Benzo[a]anthracen 27,6 0,1
d)
2,76 5,8 0,4
Chrysen/Triphenylen 313 0,01
b)
3,13 6,6 0,5
Benzo[b+j+k]fluoranthen 18,9 0,1
c)
1,89 4,0 0,3
Benzo[e]pyren 50,1 0,01
c)
0,50 1,1 0,1
Benzo[a]pyren 6,75 1,0 6,75 14,2 1,0
Perylen 2,57 0,001
e)

h)
Indeno[1,2,3-cd]pyren 1,56 0,1
e)
0,16 0,3
h)
Dibenzo[a,h]anthracen 4,67 1,0
b)
4,67 9,8 0,7
Benzo[ghi]perylen 228 0,01
b)
2,28 4,8 0,3
Anthanthren 4,70 0,1
c)
0,47 1,0 0,1
Coronen 11,5 0,001
e)
0,01
h)
h)
Dibenzo[a,l]pyren 0,20 100,0
f)
20,0 42,1 3,0
Dibenzo[a,e]pyren 0,14 1,0
g)
0,14 0,3
h)
Dibenzo[a,i]pyren 0,53 0,1
g)
0,05 0,1
h)
Dibenzo[a,h]pyren n.n.
i)
1,0
f)

a)
Jacob 2007 b,
b)
Wenzel-Hartung et al. 1990,
c)
Deutsch-Wenzel et al. 1983 b,
d)
Jacob 2007 b,
e)
Malcolm und Dobsen 1994,
f)
Muller et al. 1995; Flowers et al. 2002,
g)
McClure 2004
h)
<0,1,
i)
nicht nachweisbar,
j)
dekadisch gerundet,
k)
Gesamtwirkung definiert als Summe der er-
rechneten Wirkungen der in der Liste aufgefhrten PAH
Tabelle 13; Chu und Chen 1984; Clement 1988; Collins et al. 1998; Malcolm und
Dobsen 1994; Nisbet und LaGoy 1992; Petry et al. 1996; Thorslund und Farrer 1991;
USEPA1984). Das ursprngliche Konzept der Umweltschutzbehrde (EPA) der Verei-
nigten Staaten teilte die PAH in zwei Gruppen auf, in solche mit kanzerogener und sol-
che mit nicht-kanzerogener Wirkung (USEPA1984). Allen PAH mit kanzerogener Wir-
kung wurde der Wert 1 zugeordnet, wohingegen allen nicht-kanzerogenen PAH der
Wert Null zugewiesen wurde (Tabelle 13).
Da die in der EPA-Liste bercksichtigten kanzerogenen PAH berwiegend eine gerin-
gere Wirkung als das Benzo[a]pyren aufweisen, fhrt dieses Konzept zwangslufig zur
berbewertung der biologischen Aktivitt eines Gemisches. Dies wurde spter von
Chu und Chen (1984) sowie von Thorslund und Farrer (1991) und Clement (1988)
bercksichtigt und fhrte diese Autoren zunchst zu genaueren Werten (Tabelle 13).
Von Nisbet und LaGoy (1992) wurde dann, basierend auf den vorhandenen Kanzero-
genittsdaten, allen PAH der EPA-Liste ein quivalenzfaktor zugeordnet und die
Werte anderer Autoren wiederum vereinfacht, da sie diese im Verhltnis zu Unsicher-
heiten in der Bewertung von PAH-Mischungen als unvernnftig przise erachteten
(Tabelle 13). Wie Nisbet und LaGoy (1992) ausfhren, kann allerdings nicht ausge-
schlossen werden, dass unterschiedliche PAH-Gemische mglicherweise vernderte
Aktivitten zeigen, aufgrund von Unterschieden in der Bioverfgbarkeit, Kompetition
an kritischen Bindungstellen, kokanzerogenen Effekten oder Metabolismus. Abgese-
hen von diesen Argumenten wurde von Petry et al. (1996) eine Anwendung von qui-
valenzfaktoren als wenig sinnvoll erachtet, da die Verbesserung der Riskobewertung
Tab. 13. Vorgeschlagene Kanzerogenitts-quivalenzfaktoren fr die einzelnen PAH der EPA-Liste
PAH USEPA Chu und Clement Thorslund Nisbet und
(1984) Chen (1988) und Farrer LaGoy
(1984) (1991) (1992)
Naphthalin 0 0,001
Acenaphthylen 0 0,001
Acenaphthen 0 0,001
Fluoren 0 0,001
Phenanthren 0 0,001
Anthracen 0 0,32 0,01
Fluoranthen 0 0,001
Pyren 0 0,081 0,001
Benzo[a]anthracen 1 0,013 0,145 0,145 0,1
Chrysen 1 0,001 0,0044 0,0044 0,01
Benzo[j+b]fluoranthen 1 0,08 0,14 0,12 0,1
Benzo[k]fluoranthen 1 0,004 0,066 0,052 0,1
Benzo[a]pyren 1 1 1 1 1
Indeno[1,2,3-cd]pyren 1 0,017 0,232 0,278 0,1
Dibenzo[a,h]anthracen 1 0,69 1,1 1,11 1
Benzo[ghi]perylen 0 0,022 0,021 0,1
eines PAH-Gemisches anhand von quivalenzfaktoren mit einem Faktor von 23 im
Vergleich zu einer Bewertung, die ausschlielich auf der Leitkomponente Benzo-
[a]pyren beruht, zu gering sei, verglichen mit den Unsicherheiten, die mit diesen Wer-
ten verbunden sind.
Das Ergebnis der Riskobewertung einer PAH-Mischung hngt jedoch nicht nur von der
Validitt der quivalenzfaktoren, sondern entscheidend auch von der betrachteten
Anzahl kanzerogener PAH ab, die das jeweilige PAH-Profil in ihrer kanzerogenen Wir-
kung bestimmen. Collins et al. (1998) von der kalifornischen Umweltschutzbehrde
sttzen das Konzept der quivalenzfaktoren und weisen darauf hin, dass im Unter-
schied zur Liste der quivalenzfaktoren von Nisbet und LaGoy (1992) ausschlielich
solche fr bekannte kanzerogene PAH einbezogen werden sollten, um die fr eine Risi-
kobewertung wichtigsten Vertreter zu identifizieren. Unabdingbar in diesem Zusam-
menhang ist die Einbeziehung bestimmter Dibenzopyrene, insbesondere des Diben-
zo[a,l]pyrens, aufgrund seiner bereits erwhnten starken kanzerogenen Wirkung. In
Tabelle 14 ist exemplarisch eine Kalkulation der Benzo[a]pyren-quivalente von PAH
aus dem Tabakrauch-Kondensat und einer Innenraummessung von Kchen mit Kohle-
feuerung in China gezeigt, unter Einbeziehung von vier isomeren Dibenzopyrenen. Der
relative Wirkungsanteil der Dibenzopyrene liegt hier zwischen 34 und 70%. Wrde
man die Bewertung des Tabakrauch-Kondensats nur auf der Basis der Leitkomponen-
te Benzo[a]pyren durchfhren, so gelangt man im Vergleich zum Summenparameter zu
einer etwa um den Faktor 6 zu tief liegenden Bewertung. Im Fall der Innenraummes-
sung offenbart die Rechnung bei Bezug auf das Benzo[a]pyren als Leitkomponente
ebenfalls eine Unterbewertung um diesen Faktor. Dies illustriert nachdrcklich die
Bedeutung, die der relative Wirkungsanteil der Dibenzopyrene annehmen kann.
Die fr die Bewertung von PAH-Gemischen vorgeschlagenen quivalenzfaktoren sind
in den Tabellen 15 und 16, in der die zur routinemigen Bestimmung vorgeschlagenen
PAH aufgefhrt sind, mit angegeben. Die in der Tabelle aufgefhrten quivalenzfak-
toren sind von den Autoren gerundet, um die Angabe einer nicht sinnvollen Genauig-
keit zu vermeiden. Bei den von der USEPAangegebenen sieben Verbindungen, die als
mglicherweise humankanzerogen angesehen wurden, wurde wie fr Benzo[a]pyren
ein quivalenzfaktor von 1 angegeben. Ersatz dieses quivalenzfaktors, mit dem eine
berschtzung der kanzerogenen Wirkung dieser Verbindungen verbunden gewesen
wre, durch in der neueren Literatur enthaltene quivalenzfaktoren, ermglicht bei
fnf dieser Verbindungen (Benzo[a]anthracen, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluor-
anthen (in der EPA-Liste als Summe Benzo[j+b]fluoranthen angegeben), Dibenzo-
[a,h]pyren und Indeno[1,2,3-cd]pyren) eine realistischere Abschtzung ihres Beitrages
zur kanzerogenen Gesamtaktivitt des PAH-Gemisches. Die Einfhrung von quiva-
lenzfaktoren fr die anderen PAH gibt deren Beitrag, der ansonsten unterschtzt wor-
den wre, zur Gesamtaktivitt realistischer wieder.
11 Bewertung
Die Einstufungen der einzelnen Komponenten der PAH hinsichtlich der Kanzeroge-
nitt und der Keimzellmutagenitt sind der Tabelle auf dem Deckblatt zu entnehmen.
Anthanthren, Benzo[a]anthracen, Benzo[b]fluoranthen, Benzo[j]fluoranthen, Benzo-
[k]fluoranthen, Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen, Chrysen, Dibenz[a,h]anthracen,
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Dibenzo[a,e]pyren, Dibenzo[a,h]pyren, Dibenzo[a,i]pyren, Dibenzo[a,l]pyren, Inde-
no[1,2,3-cd]pyren und 1-Methylpyren werden in die Kanzerogenittskategorie 2 ein-
gestuft, da sie sich in Tierversuchen als kanzerogen erwiesen haben. Phenanthren und
Pyren werden aufgrund der negativen Ergebnisse in den Tierversuchen zur Kanzero-
genitt nicht in eine Kanzerogenittskategorie eingestuft.
In die Kategorie 3 A fr Keimzellmutagene werden Benzo[a]anthracen und Dibenzo-
[a,h]anthracen eingestuft, da In-vivo-Daten in Somazellen vorliegen und die Erreich-
barkeit der Keimzellen nachgewiesen ist oder In-vivo-Daten in Keimzellen vorliegen.
In die Kategorie 3 B fr Keimzellmutagene werden Benzo[b]fluoranthen, Benzo-
[j]fluoranthen, Benzo[k]fluoranthen, Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen, Dibenzo[a,e]-
pyren, Dibenzo[a,h]pyren, Dibenzo[a,i]pyren und Dibenzo[a,l]pyren eingestuft, da
entweder In-vitro-Daten und eine Analogie zu einem keimzellmutagenen Stoff oder In-
vivo-Daten an Somazellen vorliegen. Fr Phenanthren und Pyren erfolgt aufgrund der
Datenlage und fr Anthanthren, Chrysen, Indeno[1,2,3-cd]pyren und 1-Methylpyren
aufgrund fehlender Daten keine Einstufung in eine Kategorie fr Keimzellmutagene.
Die Einstufung von Benzo[a]pyren in die Kategorie 2 fr Keimzellmutagene und Kan-
zerogene sowie von Cyclopenta[cd]pyren und Naphthalin in die Kategorie 3 B fr
Keimzellmutagene und Kategorie 2 fr Kanzerogene wird besttigt (Begrndung
Benzo[a]pyren 2001; Begrndung Cyclopenta[cd]pyren 2007; Begrndung
Naphthalin 2001).
Die gute Hautpenetration von einzelnen PAH ist beim Menschen und im Tierversuch
nachgewiesen. Es gibt keinen Grund anzunehmen, dass sich das Penetrationsverhalten
der PAH wesentlich unterscheidet. Da die Hautaufnahme am Arbeitsplatz zum ber-
wiegenden Teil zur inneren Belastung beitrgt, werden PAH mit H markiert.
Zu den PAH liegen keine Befunde zur sensibilisierenden Wirkung beim Menschen vor.
Obwohl experimentelle Befunde am Tier auf eine kontaktsensibilisierende Wirkung
des Benzo[a]pyrens hinweisen, wird von einer Markierung mit Sh abgesehen, da
trotz Hautkontakt mit dieser Substanz bisher nicht ber Flle von allergischem Kon-
taktekzem durch Benzo[a]pyren berichtet wurde. Fr die brigen PAH liegen keine
oder keine validen Befunde am Tier vor, so dass auch diese nicht mit Sh markiert
werden. Zur atemwegssensibilisierenden Wirkung liegen keine Befunde vor, daher
erfolgt ebenfalls keine Markierung der PAH mit Sa.
Zur reproduktionstoxischen Wirkung der PAH liegen, auer fr Benzo[a]pyren, kaum
Daten vor. Zu Naphthalin gibt es zwei Berichte ber transplazentare Vergiftungen beim
Menschen. Naphthalin, Benzo[a]anthracen und Dibenzo[a,h]anthracen bewirken bei
der Ratte nach subkutaner Applikation vaginale und intraplazentare Blutungen. Diese
Verbindungen und auch Chrysen fhren bei der F1-Generation (Ratte, Maus) zu Tod
der Feten und Induktion der Benzo[a]pyren-Hydroxylase in der Leber. Benzo[a]pyren
zeigt bei Maus und Ratte eine starke embryotoxische Wirkung und beeintrchtigt bei
der Maus die Fertilitt.
Basierend auf seinem hohen krebserzeugenden Potential und analytischer Erfahrung
wurde in der Vergangenheit Benzo[a]pyren als Bezugsgre bzw. Leitkomponente fr
die krebserzeugende Wirkung eines Gemisches und zur Abschtzung von allgemeinen
und insbesondere Arbeitsplatz-bedingten Gesundheitsrisiken benutzt. Entsprechend
wurden mit Gesetzeskraft Grenzwerte sowie Empfehlungswerte in verschiedenen Ln-
dern festgelegt. Es zeigt sich aber, dass diese Komponente aufgrund ihres variablen
Wirkungsanteils nicht bedenkenlos als Leitkomponente auf verschiedene Emissions-
arten, sondern allenfalls nur auf ein bestimmtes Gemisch angewendet werden kann,
sofern ein konstantes PAH-Profil fr dieses Gemisch gefunden wird. Die an verschie-
denen Arbeitspltzen gemessenen PAH-Profile (Herstellung von Graphitelektroden,
Herstellung und Verarbeitung von Feuerfestmaterial) weisen ebenfalls erheblich unter-
schiedliche relative Benzo[a]pyren-Gehalte mit Schwankungen um den Faktor 5 auf.
Dass sich der Wirkungsanteil des Benzo[a]pyrens am krebserzeugenden Gesamtpoten-
tial als Gemisch-abhngig erweist, ist aus den unterschiedlichen PAH-Profilen leicht
erklrbar.
Aufgrund (1) des unterschiedlichen Wirkungsanteils von Benzo[a]pyren fr das auf die
Fraktion der PAH mit vier und mehr Ringen bezogene krebserregende Gesamtpoten-
tial und (2) der Variabilitt von PAH-Profilen und somit des relativen Gehaltes von
Benzo[a]pyren an den Gesamt-PAH erscheint die Beschrnkung eines toxikologisch
begrndeten Grenzwertes auf eine einzige Komponente, wie sie z. Zt. praktiziert wird,
fragwrdig oder doch zumindest verbesserungsfhig. Fr eine Anzahl von PAH liegen
vergleichbare Werte bezglich ihrer kanzerogenen Wirkung vor. Es muss jedoch ein-
schrnkend festgestellt werden, dass diesen zum Teil unterschiedliche Testsysteme
zugrunde liegen (intrapulmonale Applikation bei Ratten sowie epikutane Applikation
bei der Maus). Die relativen Wirkungen unterscheiden sich allerdings nicht allzu sehr,
so dass es nicht zu erheblichen Fehleinschtzungen kommt. Die Ergebnisse aus Versu-
chen der intrapulmonalen und epikutanen Applikation bei Ratte und Maus wurden mit-
einander verglichen und die aus mehreren Studien hergeleiteten Wirkungspotentiale fr
verschiedene PAH aufgelistet. Um dem variablen Anteil des Benzo[a]pyrens in einem
betrachteten Gemisch Rechnung zu tragen, wird zur Bewertung der krebserregenden
Wirkstrke eines PAH-Gemisches vorgeschlagen, einen Summenparameter im Sinne
eines Dosis-Additions-Modells auf der Basis von Wirkungsquivalenten aus Kanze-
rogenittsuntersuchungen am Nager zu errechnen. Die Frage ist gegenwrtig noch
nicht zu entscheiden, ob sich die kanzerogenen Wirkstrken einzelner PAH wirklich zu
einem Gesamtpotential addieren oder ob synergistische Effekte wie die Induktion
bestimmter CYP-Enzyme, durch beispielsweise selbst nicht oder nur schwach kanze-
rogene PAH wie Benzo[k]fluoranthen, zu beradditiven Effekten fhren, die auf einer
vermehrten Bildung von proximalen und ultimalen Kanzerogenen beruhen.
Die vorgeschlagene Vorgehensweise setzt die Proportionalitt der ueren und der
inneren Belastung als ein wichtiges Kriterium voraus. Dies kann in erster Nherung fr
die kanzerogenen PAH mit vier bis sechs Ringen angenommen werden. Darber hinaus
sollte der zugrundeliegende Wirkungsmechanismen vergleichbar sein. Die Diversitt
des Wirkungsmechanismus ist insbesondere bei der Diskussion toxischer quivalenz-
faktoren bei polyhalogenierten Aromaten neben den Unterschieden in der Bioverfg-
barkeit und Pharmakokinetik ein wichtiger Kritikpunkt. Ein vergleichbarer Wirkungs-
mechanismus wird auch fr nitro(amino)aromatische Verbindungen aufgrund unter-
schiedlicher Organotropie und Geschlechtsabhngigkeit als nicht gegeben angesehen.
Als Konsequenz der hier diskutierten Befunde wird empfohlen, zuknftig im Zuge
einer PAH-Analyse die in Tabelle 16 aufgelisteten Einzelverbindungen routinemig
zu bestimmen. Im Vergleich zu den gegenwrtig hufig ausgewhlten Analyten (EPA-
Liste; Tabelle 15) werden in dem vorliegenden Vorschlag mehrere weit verbreitete
krebserregende PAH bercksichtigt. Die Auswahl einzelner PAH basiert auf (1) ihrer
kanzerogenen Wirkung, soweit diese bislang im Tiermodell getestet wurde, und (2)
ihrer hohen Konzentration in der Arbeitswelt. Darber hinaus wird vorgeschlagen,
Phenanthren und Pyren zu bestimmen, da deren Metaboliten heute vielfach fr das
humane Biomonitoring benutzt werden. Fr die Bestimmung wurde ein Verfahren ent-
wickelt. Auch ist eine krebserregende Eigenschaft von Naphthalin bei Nagern bei inha-
lativer Exposition belegt. Whrend weibliche wie mnnliche Ratten Neoplasien im
Nasenepithel zeigen, wird in der Lunge von weiblichen Musen die Bildung alveola-
rer und bronchialer Adenome beobachtet. Bercksichtigt man zustzlich die generell
hohe Konzentration des Naphthalins in der Umwelt, so wre dessen routinemige
Bestimmung ebenfalls wnschenwert. Fr Leitkomponenten von Substanzen mit einer
Methylen- oder Methylbrcke oder Alkylsubstituenten (Methylpyrene, 4H-Cyclopen-
ten[def]chrysen) sowie fr Naphthalin sind noch keine gesicherten Wirkungsfaktoren
erarbeitet worden, und es besteht somit dringender Forschungsbedarf fr deren Bestim-
mung, aufgrund der zu fordernden Vergleichbarkeit am besten im Lungenimplanta-
tionsmodell. Sobald entsprechende Daten verfgbar werden, knnen die existierenden
Werte ergnzt oder gegebenenfalls korrigiert werden.
Die auf einem Summenparameter basierende Wirkgre der kanzerogenen Wirkung
von PAH wre etwa um den Faktor 10 hher anzusetzen als der auf Benzo[a]pyren
gegrndete Wert, da in den meisten Gemischen Benzo[a]pyren nur etwa ein Zehntel
der gesamten krebserregenden Wirkung ausmacht. Fr Gemische, in denen
Benzo[a]pyren weniger als 10% des Wirkungsanteils ausmacht, muss der oben ange-
fhrte Grenzwert allerdings entsprechend nach unten korrigiert werden.
Tab. 15. PAH-Analyten und quivalenzfaktoren der USEPA 1984
Verbindungen quivalenzfaktoren
Acenaphthen 0
Acenaphthylen 0
Anthracen 0
Benzo[a]anthracen 1
Benzo[b]fluoranthen 1
Benzo[k]fluoranthen 1
Benzo[ghi]perylen 0
Benzo[a]pyren 1
Chrysen 1
Dibenzo[a,h]anthracen 1
Fluoranthen 0
Fluoren 0
Indeno[1,2,3-cd]pyren 1
Naphthalin 0
Phenanthren 0
Pyren 0
Die hier (s. Tabelle 16) vorgeschlagenen bzw. ausgewhlten PAH mssen als vorlufig
angesehen werden, da die kanzerogene Wirkung vieler vorkommender PAH bislang
nicht untersucht wurde. Unter ihnen mgen sich weitere hochaktive Komponenten
befinden, die zur Gesamtwirkung der PAH-Fraktion erheblich beitragen knnten (z. B.
PAH mit Molgewichten=302; Gruppe der Dibenzopyrene). Darber hinaus kommen
Vertreter aus der Gruppe der methylen-berbrckten PAH, wie 4H-Cyclopenta-
[def]chrysen, und der methyl-substituierten PAH, wie 5-Methylchrysen oder 6- und 11-
Methylbenzo[a]pyren, in Betracht. Die kanzerogenen Wirkungen dieser Verbindungen
sind gut untersucht, sie empfehlen sich somit als Leitkomponenten. Ihr Vorkommen in
relevanten Matrices muss allerdings noch untersucht werden.
Die Kommission schlgt vor, zur Bestimmung der Wirkungsintensitt von PAH-Gemi-
schen vorlufig vorrangig die in Tabelle 16 unter Aktualisierter Vorschlag genann-
ten PAH heranzuziehen und die entsprechenden dort aufgefhrten quivalenzfaktoren
zugrundezulegen.
Tab. 16. Zur routinemigen Bestimmung vorgeschlagene relevante PAH-Analyten
Verbindungen quivalenzfaktoren Literatur
(aktualisierter Vorschlag)
Anthanthren 0,1 Deutsch-Wenzel et al. 1983 b
Benzo[a]anthracen 0,1 Nisbet und LaGoy 1992
Benzo[b]fluoranthen 0,1 Nisbet und LaGoy 1992
Benzo[j]fluoranthen 0,1 Nisbet und LaGoy 1992
Benzo[k]fluoranthen 0,1 Nisbet und LaGoy 1992
Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen 0,01 Wenzel-Hartung et al. 1990
Benzo[a]pyren 1 Nisbet und LaGoy 1992
Chrysen 0,01 Nisbet und LaGoy 1992
Cyclopenta[cd]pyren 0,1 Malcolm und Dobsen 1994
Dibenzo[a,h]anthracen 1 Nisbet und LaGoy 1992
Dibenzo[a,l]pyren 10 Collins et al. 1998
Dibenzo[a,e]pyren 1 Collins et al. 1998
Dibenzo[a,h]pyren 10 Collins et al. 1998
Dibenzo[a,i]pyren 10 Collins et al. 1998
Indeno[1,2,3-cd]pyren 0,1 Nisbet und LaGoy 1992
Naphthalin 0,001 Nisbet und LaGoy 1992
Phenanthren 0,001 Nisbet und LaGoy 1992
Pyren 0,001 Nisbet und LaGoy 1992
1-Methylpyren 0,1 Rice et al. 1987
1)
1)
Aufgrund der Daten knnte man dem 1-Methylpyren einen quivalenzfaktor von 0,1 zuordnen,
mit den Einschrnkungen, dass 1-Methylpyren und Benzo[a]pyren nur in einer einzigen Dosis
geprft wurden, und dass die neugeborene Maus vergleichsweise wenig Sulfotransferasen expri-
miert.
Anhang
Im Anhang sind Tabellen aus dem EHC-Band 202 Selected non-heterocyclic polycyc-
lic aromatic hydrocarbons (WHO 1998) enthalten. Da davon ausgegangen werden
kann, dass die Angaben in den Tabellen von der WHO berprft wurden, wurde auf
eine nochmalige, auf der angegebenen Literatur basierenden berprfung verzichtet.
Tab. A1. Akute Toxizitt von PAH
Verbindung Spezies Applika- LD
50
Literatur
tionsart (mg/kg KG)
oder LC
50
(mg/m
3
)
Benzo[a]pyren Maus p.o. <1600 Awogi und Sato 1989
Maus i.p. ca. 250 Salamone 1981; Salamone
et al. 1981
Maus i.p. <1600 Awogi und Sato 1989
Ratte s.c. 50 Montizaan et al. 1989
Chrysen Maus i.p. <320 Simmon et al. 1979
Naphthalin Ratte inhalativ >500 mg/m
3
USEPA 1978
(8 h)
Ratte p.o. 1250 Sax und Lewis 1984
Ratte () p.o. 2200 Gaines 1969
Ratte () p.o. 2400 Gaines 1969
Ratte p.o. 9430 USEPA 1978
Ratte p.o. 1110 Montizaan et al. 1989
Ratte () dermal <2500 Gaines 1969
Ratte () dermal >2500 Gaines 1969
Ratte i.p. ca. 1000 Bolonova 1967
Ratte i.p. ca. 1600 Plopper et al. 1992
Maus () p.o. 354 Plasterer et al. 1985
Maus () p.o. 533 Shopp et al. 1984
Maus () p.o. 710 Shopp et al. 1984
Maus s.c. 5100 Sandmeyer 1981
Maus s.c. 5100 Shopp et al. 1984
Maus s.c. 969 Sax und Lewis 1984
Maus i.p. 150 Sax und Lewis 1984
Maus i.p. 380 Warren et al. 1982
Maus () i.p. ca. 400 Plopper et al. 1992
Maus i.v. 100 Sax und Lewis 1984
Hamster () i.p. ca. 800 Plopper et al. 1992
Meerschweinchen p.o. 1200 Sax und Lewis 1984
Tab. A1. Fortsetzung
Verbindung Spezies Applika- LD
50
Literatur
tionsart (mg/kg KG)
oder LC
50
(mg/m
3
)
Phenanthren Maus p.o. 700 Montizaan et al. 1989
Maus p.o. 1000 Montizaan et al. 1989
Maus i.p. 700 Simmon et al. 1979
Maus i.v. 56 Montizaan et al. 1989
Pyren Maus i.p. 514 (7 d) Salamone 1981; Salamone
et al. 1981
Maus i.p. 678 (4 d) Salamone 1981; Salamone
et al. 1981
KG: Krpergewicht; i.p.: intraperitoneal; i.v.: intravens; p.o.: oral; s.c.: subkutan
Tab. A2. Akute Toxizitt von Naphthalin
Spezies, Exposition Befunde Literatur
Stamm,
Anzahl pro
Gruppe
KG: Krpergewicht; i.p.: intraperitoneal; p.o.: oral
Maus
(k. w. A.)
Kaninchen
(k. w.A.)
Katze
(k. w. A.)
Hund,
1
Hund
(k. w. A.)
Maus,
Swiss
Webster,
435,
0,1 mg/l, 4 h;
inhalativ
10003000 und
3000 mg/kg KG; p.o.
10003000 mg/kg
KG; p.o.
400 und 1800 mg/kg
KG; p.o.
10002000, 4000 oder
5000 mg/Tier; p.o.
50, 100, 200, 300 und
400 mg/kg KG; i.p.
bronchiolare Nekrose
10003000 mg/kg KG: Trbung der
Cornea
3000 mg/kg KG: Tod nach 24 h
10003000 mg/kg KG: letal
400 mg/kg KG: Schwche, ausgeprgte
Anmie
1800 mg/kg KG: Schwche, Erbrechen,
Diarrhoe, geringfgige Anmie;
vollstndige Erholung innerhalb von 12
Wochen
10002000 mg/Tier: leichte Diarrhoe
4000 mg/Tier: ausgeprgte Diarrhoe
dosisabhngige bronchiolare Nekrose
300 mg/kg KG: geschwollene Zellen in
der Trachea
400 mg/kg KG: Zytotoxizitt im
Riechepithel
Buckpitt und
Franklin 1989
Flury und Zernik
1935
Flury und Zernik
1935
Zuelzer und Apt
1949
Flury und Zernik
1935
Plopper et al.
1992
Tab. A3. Subakute und subchronische Toxizitt von Naphthalin
Stamm,
Anzahl pro
Gruppe
KG: Krpergewicht; i.p.: intraperitoneal; p.o.: oral
Maus,
Swiss-
Webster,
Maus,
CD-1,
40112,
/
Maus,
CD-1,
/
Ratte
(k. w. A.)
Ratte
(k. w. A.)
Ratte
(k. w. A.)
Kaninchen
(k. w. A.)
Hund,
1
7 Tage, 50, 100,
oder 200 mg/kg KG
und Tag; i.p.
14 Tage,
27, 53 oder 267
mg/kg KG und Tag;
7 d/w; p.o.
90 Tage,
5,3; 53 oder 133
mg/kg KG und Tag;
7d/w; p.o.
4660 Tage,
1 g/kg Futter
11 Wochen,
150 mg/kg KG und
Tag (die ersten drei
Wochen), 200220
mg/kg KG und Tag
(die folgenden 11
Wochen); p.o.
100 Tage,
2 g/kg Futter
4660 Tage,
1 g/kg Futter
7 Tage,
0,22 g/kg KG und
Tag
Buckpitt und
Franklin 1989;
OBrien et al.
1989
Shopp et al.
1984
Shopp et al.
1984
USEPA 1984
Kawai 1979
White und
White 1939
USEPA 1984
Zuelzer und Apt
1949
keine signifikanten nderungen in der
Morphologie der Lunge; Toleranz
gegen 300 mg/kg KG an Tag 8
bei allen Gruppen geringe Vernderungen
bei den hmolytischen Parametern; bei der
humoralen Immunantwort keine Effekte
27 oder 53 mg/kg KG: keine signifikan-
ten Effekte
267 mg/kg KG: Mortalitt 510% (/);
signifikant reduziertes Krpergewicht
/, Gewichtsreduktion um 30% beim
Thymus , signifikante Gewichtsreduk-
tion bei der Milz , Anstieg des Lungen-
gewichtes (k. w. A.)
keine beobachtbaren Effekte an der Lunge
oder immuntoxische Wirkung, signifikant
verringerte relative Milzgewichte
Beobachtung von Katarakten
reduzierte Krpergewichtsentwicklung
und Futteraufnahme, vergrerte Leber
mit Zelldem und Schdigung des Leber-
parenchyms; Anzeichen von Entzndun-
gen in der Niere
Wachstumshemmung; vergerte und
verfettete Lebern
Beobachtung von Katarakten
Diarrhoe, Schwche, Appetitlosigkeit,
Ataxie, sehr ausgeprgte Anmie;
Erholung innerhalb von 12 Wochen
Tab. A4. Embryotoxische Wirkung von PAH im Tierexperiment
Stamm,
Anzahl pro
Gruppe
Benzo[a]anthracen
Ratte,
2 (k. w. A.)
Ratte,
Sprague
Dawley
Benzo[a]pyren
Maus,
White Swiss,
9
Maus,
C57BI/6N,
AKR/J,
617
Maus,
C57BI/6, AKR,
530
Maus,
C57BI/6,
DBA/2,
20
Maus,
CD-1
Ratte,
17
Wolfe und
Bryan 1939
Welch et al.
1972
Rigdon und
Neal 1965
Legraverend
et al. 1984
Shum et al.
1979
Hoshino et al.
1981
MacKenzie
und Angevine
1981
Wolfe und
Bryan 1939
GD 111 oder 115,
5 mg/Tier und Tag;
s.c.
GD 19;
60 mg/kg KG;
Schlundsonde
GD 5 oder GD 10
bis Wurf,
150 mg/kg KG;
Futter
GD 2GD 10,
120 mg/kg KG;
Futter
GD 7, GD 10 oder
GD 12,
50300 mg/kg KG;
i.p.
GD 8,
150 oder 300 mg/kg
KG;
i.p.
GD 716,
10, 40, 160 mg/kg
KG;
Schlundsonde
GD 111 oder GD
16,
5 mg/Tier;
s.c.
F0: GD 10 und GD 12 ausgeprgte
vaginale Blutung;
GD 14: intraplazentare Blutung
F1: Tod der Feten und Resorption bis
zu GD 18
F1: Induktion der Benzo[a]pyren-
Hydroxylase in der Leber (12 gegen-
ber <0,2 Units bei den Kontrollen)
F1: keine Fehlbildungen
F1: gesteigerte intrauterine Toxizitt
und Fehlbildungen in Ah
d
/Ah
d
-
Embryonen verglichen mit Ah
b
/Ah
d
-
Embryonen in trchtigen Ah
d
/Ah
d
-
Musen (Effekt nicht beobachtet in
trchtigen Ah
b
/Ah
d
-Musen)
200 mg/kg KG: F1 gesteigerte Rate an
Totgeburten, Resorptionen, Fehlbildun-
gen (4fach hher in trchtigen C57BI-
als in AKR-Musen)
150 und 300 mg/kg KG: bei F0
gesteigerte fetale Mortalitt (auer
DBA/2 DBA/2 Nachkommen);
reduziertes Foetengewicht, steigende
Anzahl cervikaler Rippen
300 mg/kg KG: bei F1 Zunahme an
Fehlbildungen C57BI/6 C57BI/6)
F0: keine Toxizitt
F1: keine Toxizitt
F0: GD 10 und 12: starke vaginale
Blutung; Tag 14: intraplazentare
Blutung
F1: fetaler Tod und Resorption bis
Tag 18
Stamm,
Anzahl pro
Gruppe
Ratte,
Sprague
Dawley
Ratte,
Sprague
Dawley,
10 15
Chrysen
Ratte,
Sprague
Dawley
Ratte,
Sprague
Dawley
Ratte
(k. w. A.)
Naphthalin
Maus,
CD-1,
50
Maus,
CD-1
Ratte,
Sprague
Dawley,
1015
Welch et al.
1972
Bui et al. 1986
Welch et al.
1972
Welch et al.
1972
Wolfe und
Bryan 1939
Plasterer et al.
1985
Hardin et al.
1987
Hardin et al.
1981
GD 19,
60 mg/kg KG;
Schlundsonde
GD 68 oder
GD 611,
50 mg/kg KG;
s.c.
GD 19,
60 mg/kg KG;
Schlundsonde
GD 19,
60 mg/kg KG;
Schlundsonde
GD 18 oder GD
118,
5 mg/Tier;
s.c.
GD 714,
300 mg/kg KG;
Schlundsonde
GD 613,
300 mg/kg KG;
Schlundsonde
GD 115,
395 mg/kg KG;
i.p
ber <0,2 Units in der Kontrolle)
F1: signifikanter Anstieg Anzahl der
Resorptionen und Verlust an Feten;
reduziertes Fetengewicht
Hydroxylase in der Leber (6 gegenber
<0,2 Units bei den Kontrollen)
ber <0,2 Units bei den Kontrollen)
F0: GD 10 und GD 12 starke vaginale
Blutung;
GD 14: intraplazentare Blutung
F1: tote Feten und Resorption bis zu
GD 18
F0: signifikante Erhhung der Morta-
litt um 15%; signifikante Reduzierung
in der Krpergewichtsentwicklung
F1: signifikante Reduzierung bei
Anzahl Lebendgeburten; keine Fehl-
bildungen
F0: Anstieg der Mortalitt 10/50
(Kontrolle: 0/50); signifikante Redu-
zierung bei der Krpergewichtsent-
wicklung
F1: signifikante Reduzierung Anzahl
Lebendgeburten pro Wurf
F0: keine Toxizitt
F1: keine Toxizitt
KG: Krpergewicht; i.p.: intraperitoneal; s.c.: subkutan
Dibenzo[a,h]anthracen
Tab. A5. Effekte von Benzo[a]pyren auf die Fertilitt im Tierexperiment (WHO 1998)
Stamm,
Anzahl pro
Gruppe
Maus,
White Swiss,
5,
Maus,
White Swiss,
565,
Maus,
DBA/2N,
15
Maus,
DBA/2N,
Maus,
B6N und D2N,
5,
Maus,
C57BI/6N (B6),
DBA/2N (D2),
(B6D2)F1
(F1; heterozygote
Kreuzung),
bis zu 30 Tagen
vor Verpaarung;
37,5; 75 oder 150
mg/kg KG und Tag;
Futter
20 Tage vor
Verpaarung;
37,5; 75 oder 150
mg/kg KG und Tag;
Futter
Tag 14 vor
Verpaarung;
10, 100, 200 oder
500 mg/kg KG;
einmalig i.p.
Tag 21 vor Ttung;
5, 10, 50, 100 oder
500 mg/kg KG;
einmalig i.p.
Tag 13 vor Ttung;
100 mg/kg KG;
einmalig i.p.
Tag 14 vor Ttung;
10 mg/rechtes Ovar;
einmalig i.o.
150 mg/kg KG: NOEL;
Parameter: Sperma im Lumen der
Hoden; Anzahl der Nachkommen;
kein Einfluss auf die Fertilitt
150 mg/kg KG. NOEL;
Parameter: Anzahl der Nachkommen;
kein Einfluss auf die Fertilitt
3,4 mg/kg KG: Schwellenwert
(extrapoliert aus Dosis-Wirkungs-
kurve)
10, 100 mg/kg KG: dosisabhngige
Abnahme der Anzahl der Nach-
kommen
25,5 mg/kg KG: 50%-Effekt-Dosis
200, 500 mg/kg KG: vollstndig
unfruchtbar
dosisabhngige Zunahme der
Zerstrung unentwickelter Oozyten
2,7 mg/kg KG: Schwellenwert
(extrapoliert aus Dosis-Wirkungs-
kurve)
24,5 mg/kg KG: 50%-Effekt-Dosis
500 mg/kg KG: 100% Zerstrung
100 mg/kg KG: signifikante Zunahme
der Zerstrung unentwickelter
Oozyten bei beiden Genotypen;
Effekt bei B6N-Musen ausgeprgter
als bei D2N-Musen
10 mg/Ovar: vermindertes Ovarien-
gewicht (D2); vermindertes Ovarien-
volumen (D2 und F1); verminderte
antrale Follikel (Durchmesser
2,5 mm) (F1); verminderte kleine
Follikel (D2 und F1)
Rigdon und
Neal 1965
Rigdon und
Neal 1965
Mattison et al.
1980 b
Mattison et al.
1980 a
Mattison und
Nightingale
1980
Mattison et al.
1989
KG: Krpergewicht; i.o.: intraovariale Injektion; i.p.: imtraperitoneal
Stamm,
Anzahl pro
Gruppe
Maus,
C57BI/6N,
5,
1, 2, 3 und 4
Wochen vor
Ttung;
1, 5 10, 50, 100 oder
500 mg/kg KG;
einmalig i.p.
1 mg/kg KG: NOELAnzahl
Corpora lutea/Ovar
1,6 mg/kg KG: ED
50
Anzahl Corpora
lutea/Ovar
1500 mg/kg KG: dosis- und zeitab-
hngige Verminderung der Ovarien-
volumen, des Gesamtvolumens und
der Anzahl Corpora lutea/Ovar
(fr den letzten Parameter war nach
1 Woche die ED
50
1,6 mg/kg KG);
Effekt vorbergehend in den Niedrig-
dosen-Gruppen unter 100 mg/kg KG
reversibel in 3 Wochen), aber nicht
reversibel in den beiden Hochdosis-
gruppen (100 und 500 mg/kg KG)
nach 4 Wochen.
500 mg/kg KG: 35% Mortalitt
Swartz und
Mattison 1985;
Miller et al.
1992
Tab. A6. Wirkungen von Benzo[a]pyren auf die postnatale Entwicklung im Tierexperiment (WHO
1998)
Stamm,
Anzahl pro
Gruppe
Maus,
non-inbred,
Maus,
C3H/Anf,
25,
Maus,
CD-1,
Gesamtdauer
Trchtigkeit,
1 Tropfen einer
0,5%igen Lsung
zweimal pro Woche;
F1F4 behandelt mit
Benzo[a]pyren,
1mal pro Woche,
2mal pro Woche;
dermal
GD 1113 oder GD
1618,
100 oder 150 mg/kg
KG;
i.p.
GD 716,
10, 40, 160 mg/kg
KG und Tag;
Schlundsonde
F1F4: bei den Nachkommen in Vergleich
zu den Kontrolltieren frhere Entwicklung
von Papillomen und Karzinomen mit
einem Maximum bei der zweiten Genera-
tion; anwachsende Inzidenz an Papillomen
und Karzinomen in allen Generationen
verglichen mit den in utero unbehandelten
Tieren
F1: kein Unterschied bei Geburtenrate,
Wurfgre oder Nachkommenschaft ver-
glichen mit Kontrollen; ausgeprgte
Unterdrckung der anti-SRBC (Shep Red
Blood Cells) PFC (Plaque Forming
Cell)-Antwort bis zu 78 Wochen;
1113fache Zunahme bei Tumorinziden-
zen (Leber, Lunge, Ovarien) nach 5678
Wochen.
10 mg/kg KG: bei F1 merklich vermin-
derte Fertilitt (bei 20%) und reduzierte
Hodengewichte (bei 34%); 34% Sterilitt
bei den weiblichen Tieren;
40 und 160 mg/kg KG: bei fast allen
Tieren Fertilitt verringert, Hodengewicht
reduziert, Sterilitt bei den weiblichen
Tieren
Andrianova
1971
Urso und
Gengozian
1980
MacKenzie
und Angevine
1981
KG: Krpergewicht; i.o.: intraovarial; i.p.: intraperitoneal
Tab. A7. Mutagenitt von PAH bei Salmonella (WHO 1998)
Stamm Ergebnis mit Literatur
metabolischer
Aktivierung
Anthanthren
TA98 + Hermann 1981
TA100 + LaVoie et al. 1979
Andrews et al. 1978
TA98 - Tokiwa et al. 1977
TM677 + Kaden et al. 1979
Benzo[a]anthracen
TA100 + Epler et al. 1979
Bartsch et al. 1980
TA98, TA100 + McCann et al. 1975 a
Coombs et al. 1976
Simmon 1979
Salamone et al. 1979 a, b
TA1535, TA1538 - Rosenkranz und Poirier 1979
TA100 + Pahlman und Pelkonen 1987
TA98, TA100 + Hermann 1981
Carver et al. 1986
TA100 + Bartsch et al. 1980
TA100 + Baker et al. 1980
TA98, TA100 + Bos et al. 1988
TA98, TA100, TA1535, TA1537 + Probst et al. 1981
TA98, TA100, TA1537, TA1538 Dunkel et al. 1984
TA1535 - Dunkel et al. 1984
TA98, TA100 + Florin et al. 1980
TA1537, TA1538 - Teranishi et al. 1975
TA98 + Tokiwa et al. 1977
Benzo[b]fluoranthen
TA98 + Hermann 1981
Hecht et al. 1980
TA100 + Amin et al. 1985
TA98, TA100 - Mossanda et al. 1979
Benzo[j]fluoranthen
Hecht et al. 1980
metabolischer
Aktivierung
Benzo[k]fluoranthen
Hecht et al. 1980
TA98 + Hermann et al. 1980
Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen
TA98, TA100 + Grimmer et al. 1989
TA98, TA100, E. coli PKM101 - Karcher et al. 1981
(modifizierter Ames-Test)
TA100 + Misra und Amin 1990
TA100 (1,2-Dihydrodiolform) - Misra und Amin 1990
TA100 (3,4-Dihydrodiolform) + Misra und Amin 1990
TA98 (2,1-d-Isomer) + Pool et al. 1989
TA98 (2,3-d-Isomer) + Pool et al. 1989
TA98 (1,2-d-Isomer) - Pool et al. 1989
Benzo[a]pyren
TA100 + Andrews et al. 1978
TA98, TA100 + LaVoie et al. 1979
TA98, TA100, TA1537, TA1538 + McCann et al. 1975 a, b
TM677 + Rastetter et al. 1982
TM677 + Babson et al. 1986
TA97, TA98, TA100 + Sakai et al. 1985
TA98, TA100 + Prasana et al. 1987; Simmon 1979;
Glatt et al. 1987
TA1535, TA1538 + Rosenkranz und Poirier 1979
TA100 + Norpoth et al. 1984; Alzieu et al. 1987;
Carver et al. 1986; Bos et al. 1988; Her-
mann 1981; Bruce und Heddle 1979;
Marino 1987; Alfheim und
Ramdahl 1984
TA98 + Lee und Lin 1988
TA97, TA98, TA100 + Marino 1987
TA97, TA98, TA100 + Sakai et al. 1985
TA98, TA100 + Devanesan et al. 1990
TM677 + Skopek und Thilly 1983
TA98, TA100, TA1535, TA1537,
TA1538 + Dunkel et al. 1984
metabolischer
Aktivierung
TA98, TA100 + Lfroth et al. 1984
TA98, TA100 + Florin et al. 1980
Chrysen
TA100 + McCann et al. 1975a; LaVoie et al. 1979
TA98 + McCann et al. 1975 a
TA100 + Wood et al. 1977 a
TA100 + Epler et al. 1979; LaVoie et al. 1979
TA100 + Salamone et al. 1979 a, b
TA1535, TA1536, TA1537, Simmon 1979
TA1538 -
TA98, TA100 + Bhatia et al. 1987
TA1535, TA1538 - Rosenkranz und Poirier 1979
TA97, TA100 + Sakai et al. 1985
TA98, TA100 + Bos et al. 1988
TA98 + Hermann 1981
TA100 + Carver et al. 1986
TA100 + Florin et al. 1980
Cyclopenta[cd]pyren
TA98 + Wood et al. 1980
TA98, TA100, TA1537, TA1538 + Eisenstadt und Gold 1978
TM677 + Kaden et al. 1979; Cavalieri et al.
1981 a
TA98 + Reed et al. 1988
TA100 + Andrews et al. 1978; Epler et al. 1979;
McCann et al. 1975 a, b
TA100 + Salamone et al. 1979 a, b
TA98 + Baker et al. 1980
TA98 + Hermann 1981
TA100 + Wood et al. 1978
TA100 + Pahlman und Pelkonen 1987;
Carver et al. 1986
metabolischer
Aktivierung
TA98, TA100, TA1537, TA1538 + Probst et al. 1981
TA100 + Platt et al. 1990
TA100 + Lecoq et al. 1989
TA1537, TA1538 - Teranishi et al. 1975
Dibenzo[a,e]pyren
TA1537, TA1538 + Teranishi et al. 1975
TA98 bzw. TA100 + bzw. Devanesan et al. 1990
Dibenzo[a,h]pyren
TA100 LaVoie et al. 1979
TA98, TA100 + Wood et al. 1981
Dibenzo[a,l]pyren
TA98, TA100 + Karcher et al. 1984
TA98 + Hermann 1981
TA98 bzw. TA100 + bzw. Devanesan et al. 1990
Indeno[1,2,3-cd]pyren
TA98 + Hermann et al. 1980
TA100 + Rice et al. 1985
Naphthalin
TA98, TA100, TA1535, TA1537 - Florin et al. 1980
TA98, TA100, TA1535, TA1537, - McCann et al. 1975 a
TA1538
TA98, TA100, TA1535, TA1538 - Purchase et al. 1976
TA98 - Ho et al. 1981
TM677 - Kaden et al. 1979
G46, E. coli K 12 - Krmer et al. 1974
TA98, TA100 - Epler et al. 1979
TA98, TA100 - Mamber et al. 1984
TA97, TA98, TA100 - Sakai et al. 1985
TA100 - Pahlman und Pelkonen 1987
TA98, TA100 - Bos et al. 1988
Phenanthren
TA100 + Oesch et al. 1981
TA100 - Wood et al. 1979
metabolischer
Aktivierung
TA98 - LaVoie et al. 1979, 1980
TA100 - LaVoie et al. 1981
TA98, TA100 - Probst et al. 1981
TA100 - LaVoie et al. 1979, 1980; Gelboin und
Tso 1978; McCann et al. 1975 a
TA98, TA100, TA1535, TA1537 McCann et al. 1975 a
TA100 + Carver et al. 1986
TM677 - Kaden et al. 1979
TA97 + Sakai et al. 1985
TA98, TA100 Bos et al. 1988
TA1535, TA1536, TA1537, TA1538 - Simmon 1979
TA1535, TA1538 Rosenkranz und Poirier 1979
TA98, TA100, TA1535, TA1537, Dunkel et al. 1984
TA1538
TA98, TA100 - Florin et al. 1980
Pyren
TA98 - Ho et al. 1981; Rice et al. 1988 a
TA98, TA100, - McCann et al. 1975 a; LaVoie et al.
1979
TA1535, TA1537 - Ho et al. 1981
TA1537 + Bridges et al. 1981
TA98, TA100 - Salamone et al. 1979 a, b
TA98, TA100 - Probst et al. 1981
TA97 + Sakai et al. 1985
TA98. TA100 Bos et al. 1988
TA100 - Carver et al. 1986; Hermann 1981
TA98, TA100 + Bhatia et al. 1987
TA98, TA100, TA1535, TA1537, - Dunkel et al. 1984
TA1538
TA98, TA100 - Florin et al. 1980
Zur Untersuchung der durch PAH hervorgerufenen DNA-Schdigung bei Prokaryon-
ten sei auf die Tabelle 82 in der WHO-Monographie (WHO 1998) verwiesen.
Tab. A8. DNA-Schdigung durch PAH bei Eukaryonten (WHO 1998)
Substanz, Endpunkt Metabolische Ergebnis
b)
Literatur
Testsystem Aktivierung
a)
Benzo[a]anthracen
primre UDS + Probst et al. 1981
Rattenhepatozyten
primre Rattenhepatozyten R + Tong et al. 1983
HeLa-Zellen UDS +/ + Martin et al. 1978
Brustdrsen-Epithelzellen DS Mane et al. 1990
Ratte oder Mensch
Hamsterbacke-Epithelzellen DS Nagabhushan et al. 1990
periphere Blutlymphozyten DA + Gupta et al. 1988
des Menschen
Benzo[b]fluoranthen
Epithelzellen der DA + Autrup und Autrup 1986
Mundschleimhaut der Ratte
Leukozyten des Menschen DA + + Roggeband et al. 1994 a
Benzo[j]fluoranthen
Epithelzellen der DA + Autrup und Autrup 1986
Benzo[k]fluoranthen
Benzo[b]naphtho[2,1-d]-
thiophen
(in der entsprechenden
Tabelle bei WHO 1998
nicht aufgefhrt)
et 1989
Rattenhepatozyten
(1,2-d-Isomer, 2,1-d-
Isomer, 2,3-d-Isomer)
(DNA-Strangbrche)
Zelllinie Chinesischer Pool et al. 1989
Hamster
(DNA-Strangbrche)
(1,2-d-Isomer, 2,1-d-
Isomer, 2,3-d-Isomer)
Benzo[a]pyren
primre Rattenhepatozyten UDS + Probst et al. 1981
primre Rattenhepatozyten R + Williams et al. 1982
C3H/10T1/2 Maus Clon 8 Lubet et al. 1983
(DNA-Strangbrche)
Epithelzellen der Trachea DA, UDS + Roggeband et al. 1994 b
von Hamster oder Ratte
b)
Literatur
a)
HeLa-Zellen UDS +/ + Martin et al. 1978
Hautfibroblasten des R + Milo et al. 1978
Menschen
Brustdrsenzellen des + Leadon et al. 1988
Menschen (oxidative
DNA-Schdigung)
Fibroblasten des UDS + + Agrelo und Amos 1981
Menschen
Fibroblasten WI-38 des UDS +/ + Robinson und Mitchell
Menschen 1981
Brustdrsen-Epithelzellen R + Mane et al. 1990
von Ratte oder Mensch
DA + Harris et al. 1984
Embryozellen des R + Casto 1979
Syrischen Hamsters
Epithelialzellen der + Nagabhushan et al. 1990
Hamsterbacke
(Hemmung
der DNA-Synthese)
Epithelialzellen der DA + Autrup und Autrup 1986
periphere Lymphozyten DA + Gupta et al. 1988
des Menschen
primre Rattenhepatozyten DA + Monteith und Gupta 1992
primre Hepatozyten DA + Monteith und Gupta 1992
des Menschen
Kalbsthymus-DNA DA + Bryla und Weyand 1991
primre epidermale DA, UDS + Gill et al. 1991
Keratinozyten der Maus
primre Rattenhepatozyten R + Tong et al. 1983
(SCE)
Chrysen
primre Rattenhepatozyten R Tong et al. 1983
Leukozyten des Menschen DA + Roggeband et al. 1994 a
Cyclopenta[cd]pyren
Leber- oder Lungengewebe DA + Beach und Gupta 1991
der Ratte
Kalbsthymus-DNA DA + + Beach und Gupta 1994
primre Epithelzellen der UDS + Lake et al. 1978
Vorhaut des Menschen
HeLA-Zellen UDS +/ + Martin et al. 1978
b)
Literatur
a)
Embryozellen des R Casto 1979
Syrischen Hamsters
primre Rattenhepatozyten UDS + Probst et al. 1981
Leber-DNA der Maus DA + + Lecoq et al. 1991
Bronchialzellen des DA + Harris et al. 1984
Menschen
Embryozellen des B B + Kuroki und Heidelberger
Hamsters 1972
C3H10T1/2-Mouse-Clone- DA + Nesnow et al. 1994
8-Zellen
Phenanthren
Syrischen Hamsters
Epithelialzellen der Vorhaut UDS Lake et al. 1978
des Menschen
primre Rattenhepatozyten UDS Probst et al. 1981
Hautfibroblasten des R Milo et al. 1978
Menschen
Pyren
Syrischen Hamsters
Epithelzellen der Vorhaut UDS Lake et al. 1978
des Menschen
primre Rattenhepatozyten UDS Probst et al. 1981
HeLa-Zellen UDS +/ Martin et al. 1978
Fibroblasten-Zelllinie UDS +/ + Robinson und Mitchell
WI38 des Menschen 1981
primre Rattenhepatozyten R Williams et al. 1982
Hautfibroblasten des R C Milo et al. 1978
Menschen
Hautfibroblasten des UDS + Agrelo und Amos 1981
Menschen
primre Rattenhepatozyten R Tong et al. 1983
periphere Lymphozyten DA Gupta et al. 1988
des Menschen
R: DNA-Reparatur; DA: DNA-Addukte; UDS: unplanmige DNA-Synthese; SCE: Schwester-
Chromatid-Austausch; B: Untersuchung der Bindung des Epoxids an das h-Protein; Bindung Faktor
8 hher im Vergleich zur Muttersubstanz; C: Versuch ohne metabolische Aktivierung, Erhhung der
Arylhydrocarbonhydroxylase-Aktivitt und der Zellproliferation, DNA-Schdigung durch interme-
dire Metaboliten
metabolische Aktivierung
a)
: +: mit metabolischer Aktivierung; : ohne metabolische Aktivierung;
+/: mit und ohne metabolische Aktivierung
Ergebnisse:
b)
:+: positiv; : negativ; : nicht eindeutig. Bei der entsprechenden Tabelle wird in WHO
1998 darauf hingewiesen, dass positive Ergebnisse nur angegeben werden, wenn positiv nur mit
metabolischer Aktivierung.
Tab. A9. Wirkung von PAH bei Drosophila melanogaster (WHO 1998)
Substanz Endpunkt Ergebnis Literatur
Benzo[a]anthracen
SLRL + Fahmy und Fahmy 1973
somatische Mutation Fahmy und Fahmy 1980
SLRL Zijlstra und Vogel 1984
SMART + Frlich und Wrgler 1990
R + Fujikawa et al. 1993
Benzo[a]pyren
SLRL Vogel et al. 1983
somatische Mutation + Fahmy und Fahmy 1980
SLRL Zijlstra und Vogel 1984
SLRL Valencia und Houtchens 1981
somatische Mutation + Batiste-Alentorn et al. 1991
SMART + Frlich und Wrgler 1990
SLRL Valencia und Houtchens 1981
R + Fujikawa et al. 1993
Pyren
R Fujikawa et al. 1993
somatische Mutation: spontane nderung der Augenpigmentierung durch Effekte auf einen Locus in
der Stammzelllinie; SLRL: Sex-Linked Recessive Lethal Mutation; SMART: Somatic Mutation and
Recombination Test; R: DNA-Reparatur
Tab. A10. Chromosomale Effekte von PAH in Sugetierzellsystemen in vivo; mit einbezogen sind
DNA-Bindung und Addukte sowie Spermienanormalitten (WHO 1998)
Substanz, Ergebnis Literatur
Testsystem
Benzo[a]anthracen
Chinesischer Hamster, Knochenmark: SCE + Roszinsky-Kcher et al. 1979
Chinesischer Hamster, Knochenmark: CA Roszinsky-Kcher et al. 1979
Long-Evans-Ratte, Knochenmark: CA Sugiyama 1973
Chinesischer Hamster, Knochenmark: + Pter et al. 1979
MN, CA
NMRI-Maus, + Pter et al. 1979
Metaphase-II-Oocyten: CA
Maus,
gastrointestinale Epithelzellen: Reddy et al. 1991
Kernanomalien
Ratten,
Lunge: DNA-Addukte, SCE, MN + Whong et al. 1992
Maus,
Haut: DNA-Bindung + Reddy et al. 1984
Ratte, + et 1995
Knochenmark und Milzzellen: MN
Benzo[b]fluoranthen
Chinesischer Hamster, Knochenmark: SCE + Roszinsky-Kcher et al. 1979
Chinesischer Hamster, Knochenmark: CA Roszinsky-Kcher et al. 1979
Maus, + Weyand et al. 1987
Haut: DNA-Bindung
Ratte, + Ross et al. 1991; Ross et al. 1992
Lunge, Leber und periphere Lymphozyten:
DNA-Addukte
Ratte, + Ross et al. 1991; Ross et al. 1992
Lunge, Leber, periphere Blutlymphozyten,
Ganzblut-Kulturen: SCE
Maus, gastrointestinale Epithelzellen: + Reddy et al. 1991
Kernanomalien
Ratte, periphere Blutlymphozyten: SCE, MN + Bryant et al. 1991
Maus, gastrointestinale Epithelzellen: + Reddy et al. 1991
Kernanomalien
Maus, Haut: DNA-Bindung + Amin et al. 1991
Maus, Haut: DNA-Addukte, MN, UDS + Winker et al. 1995
Benzo[j]fluoranthen
Maus, Lunge und Leberzellen: DNA-Addukte + Weyand und LaVoie 1988
Maus, Haut: DNA-Addukte + Weyand et al. 1993
Benzo[k]fluoranthen
Maus, Haut: DNA-Bindung + Weyand et al. 1987
Maus, Lunge und Leberzellen: DNA-Addukte + Weyand und LaVoie 1988
Testsystem
Benzo[b]naphtho[2,1-d]thiophen
(in der entsprechenden Tabelle bei
WHO 1998 nicht aufgefhrt)
Maus, Knochenmark: MN + Grimmer et al. 1989
Maus, Haut: DNA-Addukte + Hughes und Phillips 1993
Benzo[a]pyren
Maus, Dominant-Letal-Test + Epstein 1968
Maus, Dominant-Letal-Test + Generoso et al. 1982
Maus, Fellflecken-Test + Russell 1977
Maus, Fellflecken-Test + Davidson und Dawson 1976
Ratten, Hepatozyten: UDS Miralis et al. 1982
Maus, Keimzellen: UDS Sega 1979
Maus, Haut: DNA-Bindung + Weyand et al. 1987; Rice et al. 1984
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: + bzw. + Roszinsky-Kcher et al. 1979
CA bzw. SCE
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: bzw. + Bayer 1978
CA bzw. SCE
Maus, CA, vererbbare Translokationen Generoso et al. 1982
Maus, Knochenmark: MN + Salamone 1981; Salamone et al.
1981
Maus, Knochenmark: MN Bruce und Heddle 1979
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: Bayer 1978
MN
Maus, Spermienanormalien + Topham 1980
Maus, Spermienanormalien + Bruce und Heddle 1979
Chinesischer Hamster als Wirtstier fr V79: + Sirianni und Huang 1978
SCE
Maus, epidermiale Zellen: DNA-Addukte + Albert et al. 1991 a, b
Maus, Knochenmark: MN + Shimada et al. 1990
Maus, Keratinozyten: MN + He und Baker 1991
Maus, Lungenzellen und Leberzellen: + Weyand und LaVoie 1988
DNA-Addukte
Maus, Leber, Lunge und Magen: + Cummings et al. 1991
DNA-Addukte
Ratte, periphere Lymphozyten: SCE + Li et al. 1991
Maus, Knochenmark: MN + Mavourin et al. 1990
Maus, Knochenmark: MN + Kliesch et al. 1982
Maus, Knochenmark: MN + Harper und Legator 1987
Maus, periphere Blutzellen: MN Oshiro et al. 1992
Maus, gastrointestinale Epithelialzellen: + Reddy et al. 1991
Kernanomalien
Testsystem
Maus, Knochenmark: SCE + Wielgosz et al. 1991
Ratte, periphere Blutlymphozyten: SCE, + Willems et al. 1991
DNA-Addukte
Ratte, Leberzellen: DNA-Addukte + Willems et al. 1991
Ratte, periphere Blutlymphozyten: CA Willems et al. 1991
Chinesischer Hamster, Lungenzellen: CA + Matsuoka et al. 1979
Maus, Haut Epithelialzellen: DNA-Bindung + Hughes und Phillips 1991
Mensch, periphere Lymphozyten: + Haugen et al. 1986
DNA-Addukte
Ratte, Lunge, Leber und periphere + Ross et al. 1991
Lymphozyten: DNA-Addukte
Maus, Knochenmark: MN + Awogi und Sato 1989
Maus, Haut: DNA-Bindung + Reddy et al. 1984
Maus, Haut: DNA-Addukte + Oueslati et al. 1992
Maus, Ratte, Knochenmark: MN + Shimada et al. 1992
Maus, Knochenmark:CA + Adler und Ingwersen 1989
Chrysen
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: + Roszinsky-Kcher et al. 1979
SCE
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: Roszinsky-Kcher et al. 1979
CA
NMRI-Maus, Metaphase II Oocyten + Basler et al. 1977
Maus, Keratinozyten: MN + He und Baker 1991
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: + Roszinsky-Kcher et al. 1979
SCE
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: Roszinsky-Kcher et al. 1979
CA
Ratte, periphere Blutlymphozyten: SCE, MN Bryant et al. 1990
Maus, Haut: DNA-Bindung + Lecoq et al. 1991
Ratte, Knochenmark und Milzzellen + Zhong et al. 1995
Ratte, Lunge: DNA-Addukte, MN, SCE + Whong et al. 1994
Maus, Haut: DNA-Addukte, MN, UDS + Winker et al. 1995
Dibenzo[a,e]pyren
Maus, Haut Epithelialzellen: DNA-Bindung + Hughes und Phillips 1991
Indeno[1,2,3-cd]pyren
Maus, Haut: DNA-Bindung + Weyand et al. 1987
Maus, Haut Epithelialzellen: DNA-Bindung + Rice et al. 1990
Testsystem
Naphthalin
Maus, Knochenmarkzellen: MN Harper et al. 1984
Phenanthren
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: Bayer 1978; Roszinsky-Kcher et al.
CA 1979
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: + Bayer 1978; Roszinsky-Kcher et al.
SCE 1979
Chinesischer Hamster, Knochenmarkzellen: Bayer 1978
MN
Pyren
Maus, Knochenmarkzellen: SCE Paika et al. 1981
Maus, Knochenmark: MN Salamone 1981; Salamone et al.
1981
Maus, Knochenmarkzellen: MN Tsuchimoto und Matter 1981
Maus, als Wirtstier fr V79-Zellen: SCE Sirianni und Huang 1978
Maus, Keratinozyten: MN He und Baker 1991
Maus, periphere Blutzellen: MN Oshiro et al. 1992
Maus, gastrointestinale Epithelzellen: Reddy et al. 1991
Kernanomalien
Maus, Spermienabnormalien Topham 1980
Maus, Haut: DNA-Bindung Reddy et al. 1984
SCE: Schwester-Chromatid-Austausch; MN: Micronukleus-Test; CA: Chromosomenaberrationen;
UDS: unplanmige DNA-Synthese. Ergebnis: +positiv; nicht eindeutig; negativ
Tab. A11. Wirkung von PAH auf morphologische Transformation von Sugetierzellen in vivo
Testsystem
Benzo[a]pyren
Hamsterembryonen, transplazentare + Quarles et al. 1979
Exposition
Phenanthren
Hamsterembryonen, transplazentare Quarles et al. 1979
Exposition
Ergebnis: +: positiv; : negativ
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