ESPECIAL BIOMEDICINA

EL PEZ CEBRA, AL SERVICIO DE LA INVESTIGACI ON EN C ANCER

Mara L. Cayuela Fuentes , Francisca Alcaraz P erez y Monique Angeln Flageu
Grupo de Telomerasa, C ancer y Envejecimiento en el Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca-FFIS.
E-mail: cayuelamarialuisa@gmail.com
Introducci on:
Qu e hace un pez como t u en un artculo sobre
c ancer como este? Mientras para la mayora de per-
sonas el pez cebra, un pez tropical llamado as por
sus rayas, no deja de ser m as que una mascota popu-
lar, para los cientcos se ha convertido en un nuevo
modelo de laboratorio que complementa al modelo
cl asico de rat on.
El embri on de pez cebra no llega a medir m as de 1
mm, mientras que el adulto mide entre 3-4 centme-
tros. Los machos y las hembras son f acilmente reco-
nocibles (gura 1). Precisamente su peque no tama no
es una de las ventajas que tiene para los laborato-
rios de investigaci on, ya que se puede tener mayor
cantidad de animales en menos espacio y su mante-
nimiento es relativamente barato (entre 100 y 1000
veces menos que el coste de mantenimiento de rato-
nes de laboratorio).
Figura 1.
Cada hembra puede depositar m as de 200 embrio-
nes por semana. Estos embriones, que se desarrollan
fuera de la madre protegidos por una membrana (el
corion), son transparentes y su organog enesis ocurre
en 24 horas. Todo un milagro de la divisi on y diferen-
ciaci on celular!. Lo demuestra cuando lo comparamos
con el desarrollo embrionario humano, donde des-
pu es de 22 horas tras la fecundaci on s olo se ha pro-
ducido una divisi on celular y cinco das despu es de
la fecundaci on somos un blastocisto con 200 c elulas
multipotentes. Mientras el embri on de pez cebra ha
eclosionado al tercer da y se ha convertido en toda un
larva al quinto da despu es de la fecundaci on. En un
mes se le considera que es un juvenil y en tres meses
pude reproducirse de manera continua, manteni endo-
se f ertiles durante m as de 18 meses, asegurando un
suministro constante de embriones con pocos indivi-
duos. El pez cebra llega al nal de su vida entre los
dos a nos y los tres a nos y medio.
Figura 2.
Muchas son las ventajas de este peque no verte-
brado con el que compartimos un ancestro com un y
del que divergimos evolutivamente hace 400 millones
de a nos. Gracias al desarrollo de herramientas como
la secuenciaci on completa de su genoma y el estudio
global de los patrones de expresi on g enica ha permi-
tido poner de maniesto el alto grado de semejanza
gen etica y siol ogica con el ser humano en procesos
fundamentales. Uno de esos procesos es el c ancer,
donde no solo se conservan la mayora de genes im-
plicados en este proceso si no que adem as tambi en
se encuentran alterados de una manera similar a
las rutas gen eticas tpicamente desreguladas en los
tumores humanos. Esta semejanza no solo ocurre a
nivel molecular, a nivel histopatol ogico las neoplasias
de los peces son bastante similares al c ancer en hu-
mano. (gura 2).Por otro lado, el pez cebra no es buen
modelo para todos los tipos de tumores. El pez no
tiene tejido mamario, y tiene branquias en lugar de
pulmones. Pero aunque el pez cebra no pueda ser un
modelo directo para el c ancer de mama y de pulm on,
seguramente el mecanismo molecular que lo produce
se conserva en otros tipos de tumores. Pero que es
lo que lo convierte en un modelo atractivo para la
investigaci on en general y el c ancer en particular?
Fundamentalmente tres aspectos;
F acil manipulaci on gen etica: Para que un organis-
mo pueda ser modelo de una enfermad como el c ancer,
es necesario que se pueda manipular /alterar los ge-
nes implicados en este proceso. Afortunadamente ha
habido un fuerte impulso por parte de la comuni-
dad cientca por desarrollar t ecnicas alrededor del
modelo que permiten hacer animales transg enicos o
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mutantes con relativa facilidad. Esto permite a los
investigadores estudiar el efecto de la sobreexpre-
si on/inhibici on de genes.
Por otro lado y gracias a su r apida organog ene-
sis y angiog enesis (en 24 horas) se pueden realizar
estudios transitorios (durante 7 das) introduciendo
f acilmente (por microinyecci on) ARN-m o ADN en
embriones de pez cebra antes de las primeras divisio-
nes, con lo que se consigue que las c elulas del embri on
fabriquen la protena correspondiente. De manera
opuesta, tambi en se puede reducir los niveles norma-
les de producci on de protenas, por ejemplo utilizando
morfolinos (que son oligonucleotidos modicados que
se unen al ARN-m) y evitan la sntesis de protena.
Todo ello ha permitido la evaluaci on r apida de la fun-
ci on de genes diana sin la necesidad del construir
un modelo estable, lo que supone menos esfuerzo y
una manera preliminar de discriminar los genes con
m as o menos implicaci on o relevancia. Siempre en el
contexto de un organismo completo Los estudios de
la funci on de determinadas diana, tanto en modelos
estables como en expresiones transitorias, se realizan
in vivo y son f acilmente observables mediante la in-
troducci on de protenas uorescentes en las c elulas
de inter es. Estas protenas emiten luz de color verde,
roja, azul (seg un la protena introducida) cuando es
estimulada con luz y se pueden combinar entre si.
Figura 3.
Su transparencia. La transparencia del embri on
ha permitido el desarrollo de t ecnicas innovadoras
de observaci on basadas en la utilizaci on de protenas
uorescentes o colorantes vitales que permiten la
observaci on de fen omenos en vivo y en directo. Me-
diante el uso de lneas transg enicas que expresan
tales mol eculas no solo se puede identicar grupos de
c elulas, sino tanbien organos e incluso procesos tu-
morales. La transparencia del embri on ha permitido
identicar la din amica de expansi on de una leucemia
in vivo al ser sobre-expresado un oncogen fusiona-
do al gen GFP (gura 3). Los cambios morfol ogicos o
funcionales en organos internos pueden por tanto ser
detectados sin tener que sacricar o diseccionar a los
organismos. Y aunque la transparencia del modelo
era s olo durante los primeros estadios de desarrollo,
actualmente existe una lnea mutante que es trans-
parente durante todo su ciclo de vida, la lnea llamada
Casper, lo que permite una mejor monitorizaci on de
los procesos descritos.
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Escrutinios a gran escala
La llave de su exito y su mayor ventaja quiz a se
deba a la posibilidad de realizar experimentos a gran
escala (gura 4) , ya que permite generar plataformas
encaminadas al an alisis sistem atico de compuestos
qumicos con potencial terap eutico.
Por el n umero de su descendencia y su tama no (1
mm) se puede hacer experimento a una escala im-
pensable en vertebrados. Todo ello, junto con el uso
de marcadores uorescentes, los peces transparentes
r apidamente han sido combinados con el escrutinio
a gran escala. Es importante decir que no cabe pen-
sar en una aproximaci on similar con roedores, cuyo
desarrollo ocurre in utero y tiene una descendencia
limitada de embriones. Por su parte, los resultados
obtenidos de cultivos celulares, se resienten de la fal-
ta de contexto, tanto en lo que se reere al tipo de
tejido como a la fase del desarrollo. Adem as la ma-
yora de lneas celulares cuentan con mutaciones con
lo que no se parte de unas condiciones nativas u opti-
mas para los ensayos.
Sin embargo, el mayor ahorro es el de compuestos
qumicos. Varias larvas pueden vivir en un volumen
de lquido del tama no de una gota de agua por lo que
s olo se necesitan cantidades mnimas de los compues-
tos por ensayo.
Por este camino se han identicado nuevos genes
y compuesto qumicos que regulan la proliferaci on
descontrolada de c elulas, o que aumentan la prolife-
raci on de las c elulas madre hematopoy eticas, aumen-
tando el exito de los autotransplante en pacientes con
leucemias. Una esperanza de tratamiento para las
personas con c ancer.
Figura 4.
Se han establecido multitud de modelos para di-
ferentes tipos de c ancer, como melanomas, de hgado,
leucemias etc. Estos modelos, acoplados con la posi-
bilidad de evaluar el efecto de numerosos compuestos
qumicos, tienen un grandioso potencial terap eutico y
abre una nueva etapa al tratamiento del c ancer.
Los tumores de pez cebra, aunque similares a los
humanos, rara vez hacen met astasis. La met astasis
es un proceso complejo en el cual las c elulas del tumor
primario invaden los tejidos vecinos. Sin embargo
cuando transplantamos c elulas tumorales humanas
te nidas con un colorante vital para monitorizarlas en
embriones de pez cebras, estas s que son capaces de
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colonizar otros nichos La met astasis es la responsable
aproximadamente del 98% de las muertes por c ancer
y no hay de momento tratamiento terap eutico para
prevenirlo. As que de nuevo el pez cebra se pone al
servicio de la biomedicina, y estamos utilizando estos
embriones xenotrasplantados para la b usqueda de
compuestos que sean capaces de inhibir la met asta-
sis de las c elulas tumorales. Se tratar a de encontrar
alg un compuesto para un tratamiento generalizado
en pacientes con c ancer (gura 4).
El lmite con el pez cebra y sus aplicaciones pare-
ce hallarse solo en la imaginaci on de los cientcos y
su capacidad para generar nuevos modelos en el pez
cebra que modelen alg un aspecto del c ancer.
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