INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO

DE LA CÉLULA

Silvia Márquez - Lionel Valenzuela Pérez - Gladys Gálvez - Luis A.

Fernández - Cecilia Bocchino

NIVELES DE ORGANIZACIÓN

Fig. 1.1. Niveles de organizacion de la materia

A los seres vivos se los define por sus características, una

de éstas es su organización. Esta organización biológica
representa el patrón complejo que nos muestra el camino
que ha seguido la evolución, desde formas sencillas a otras
más complejas.

Los seres vivos están formados por materia. La materia

está formada por elementos (92 elementos naturales, como
el Cloro, por ejemplo) y se caracteriza por poseer
determinadas propiedades intensivas, tales como el punto
de fusión, punto de ebullición, conductividad eléctrica, etc.
Los elementos están formados por átomos. Un átomo es la
porción más pequeña de un elemento que conserva sus
propiedades químicas. Las investigaciones de los físicos han
descubierto un variado número de partículas subatómicas
(Nivel Subatómico), para nuestros fines mencionaremos
sólo tres : protones, neutrones y electrones. Los protones
son partículas con carga positiva; los electrones, en cambio,
tienen carga negativa y masa muy pequeña; los neutrones
son partículas neutras, sin carga, y su masa es casi idéntica
a la de los protones; los protones y neutrones forman casi
toda la masa de un átomo y se localizan en el núcleo
atómico. Si combinamos un protón y un electrón se forma un átomo de Hidrógeno, entidad
con propiedades diferentes a las de un protón y un electrón (Nivel Atómico). Si
combinamos átomos de Hidrógeno entre sí obtenemos Hidrógeno molecular (H 2), que es un
gas incoloro; si, en cambio, combinamos el H2 con Oxígeno, otro gas, obtenemos agua, una
molécula (Nivel Molecular) cuyas propiedades todos conocemos y que no son las mismas que
las del H2 y el O2 y que también difieren de las propiedades de las partículas subatómicas y
de los átomos que éstas forman.

La vida surgió a partir de átomos y moléculas.

Si combinamos moléculas entre sí, formamos grandes y complejas moléculas: las

macromoléculas, como las proteínas y los ácidos nucleicos (Nivel Macromolecular). Estas
macromoléculas constituyen la materia prima que forman los virus (Nivel Prebiótico o
Supramolecular) y las células (Nivel Celular). En el Nivel Subcelular múltiples moléculas se
ensamblan y dan lugar a estructuras especializadas como los organoides (mitocondrias,
cloroplastos, etc). Podemos decir que la vida aparece como propiedad definitoria en el Nivel
Celular, o de otro modo, la célula es la porción más sencilla de la materia viva que es capaz
de realizar todas las funciones imprescindibles para la vida.

En la mayor parte de los individuos pluricelulares, las células se organizan de acuerdo a sus
características y funciones conformando tejidos como el conectivo, muscular, epitelial,
nervioso (Nivel Tisular). Los tejidos están ordenados en estructuras funcionales,
denominadas órganos como el corazón y los pulmones en los animales, o las hojas y las
raíces en las plantas. Las funciones biológicas básicas se llevan a cabo por un sistema o
aparato, que es una asociación coordinada de tejidos y órganos. Los organismos o individuos
pluricelulares están formados por sistemas que actúan en forma coordinada y rigurosa.

Existen otros niveles de organización biológica, además de los nombrados anteriormente,

donde las propiedades provienen de la relación entre los organismos. Por ejemplo, el Nivel
de organización POBLACIÓN reúne a todos los individuos de una misma especie que viven
en un mismo lugar, en el mismo tiempo, y que comparten el mismo hábitat. Estas poblaciones
interactúan de distinta manera con otras poblaciones del lugar constituyendo una
COMUNIDAD, por ejemplo la población de seres humanos de la ciudad de Buenos Aires y el
conurbano, aprovecha para alimentarse a las distintas poblaciones de animales y plantas de
la zona y se halla parasitada por las mismas poblaciones de parásitos intestinales.

Esta comunidad comparte el mismo lugar físico que presenta características particulares.
La unión de estos factores físicos con los factores biológicos constituyen los
ECOSISTEMAS.

Todos los ecosistemas de la Tierra están relacionados, directa o indirectamente. Es por

ello que un cambio drástico o continuo de alguno de ellos indefectiblemente acarreará
cambios en los restantes. Del mantenimiento de un equilibrio entre los distintos
ecosistemas, depende la vida en el planeta.

Tabla 1.1- Niveles de Organización

1. Nivel Subatómico
2. Nivel Atómico
3. Nivel Molecular (Monosacáridos, Aminoácidos, Nucleótidos, etc.)
4. Nivel Macromolecular (Polisacáridos, Proteínas, Acidos nucleicos, Lípidos complejos, etc. )
5. Nivel Prebiótico o Supramacromolecular (Virus )
6. Nivel Subcelular (Organoides: Mitocondrias, Cloroplastos, Ribosomas, etc.)
7. NIVEL CELULAR {Célula Procarionte, Célula Eucarionte) Individuos Unicelulares:
Bacterias, Algas unicelulares, Levaduras, Protozoos, etc.
8. Nivel Tisular (Tejidos: Conectivo, Epitelial, Muscular, etc.)
9. Organos (Corazón. Pulmones. Estómago, etc.)
10. Sistemas y Aparatos (Aparato Circulatorio, Sistema digestivo, etc. )
11. Organismos(Individuos Pluricelulares, Animales y Vegetales Superiores).
12. Población
13. Comunidad.
14. Ecosistema
15. Universo
Durante el desarrollo de nuestra materia, nos ocuparemos de los niveles de organización
más sencilla y haremos hincapié en el Nivel Celular de Organización.

ORGANIZACIÓN CELULAR

TEORÍA CELULAR

La célula es la unidad de vida más pequeña. Es la unidad anatómica y fisiológica de todos los
seres vivos. Dos científicos alemanes el botánico Mattias Schleiden (1804-1881) y el
zoólogo Theodor Schwann (1810-1882) fueron los primeros en señalar que "Los cuerpos de
las plantas y de los animales están compuestos por células y por productos celulares "
enunciando el postulado inicial de la Teoría Celular

Posteriormente, Rudolph Virchow (1821-1902) amplio la Teoría Celular y afirmó: " Todas las
células proceden de otra preexistente". Por lo tanto, las células no surgen por generación
espontánea a partir de materia inanimada.

Otra importante conclusión de la Teoría Celular afirma que todas las células actuales,
tienen un origen común. La evidencia más importante, sobre el origen común de todas las
formas celulares, radica en las similitudes básicas de sus estructuras y principalmente de
su composición molecular.

Tabla 1.2 – Postulados de la Teoría Celular

1- Todos los seres vivos están formados por células y productos celulares (unidad anatómica)
2- Las funciones de un ser vivo son el resultado de la interacción de las células que lo
componen (unidad fisiológica)
3- Toda célula sólo puede tener origen en una célula progenitora.
4- Toda célula tiene la información hereditaria de el organismo del cual forma parte, y esta
información pasa de una célula progenitora a una célula hija.

CARACTERÍSTICAS DE LAS CÉLULAS

Todas las células están cubiertas por una membrana externa, llamada membrana
plasmática, que las separa de otras células y del medio circundante con el cual intercambian
materia y energía. Este intercambio esta altamente regulado y es selectivo. De esta forma
la membrana plasmática debe actuar no sólo como limite celular sino también como barrera
selectiva. Por lo tanto la célula, mantiene una composición química muy ordenada y
diferente a la del entorno.

Todas las células poseen un metabolismo o conjunto de reacciones químicas, que posibilitan
el mantenimiento de la vida. Este metabolismo para sustentarse necesita de una o más
fuentes de energía. Las células, necesitan de distintivos tipos de moléculas energéticas:

* Monedas energéticas, como el ATP

* Moléculas combustibles, como la glucosa o los ácidos grasos

* Moléculas de reserva de energía, como el glucógeno o el almidón

Dentro de las reacciones para obtener e interconvertir diferentes forma de energía, son
muy importantes las reacciones de oxido-reducción o reacciones REDOX. En este tipo de
reacciones es esencial la participación de las coenzimas de oxido-reducción, como el NAD+
y el FAD.

Todas las células, almacenan en forma de ADN, ácido desoxirribonucleico, a información

necesaria para controlar sus actividades (reproducción, metabolismo), y para establecer su
propia estructura. El ADN, es un polímero formado por una secuencia lineal, de monómeros,
llamados nucleótidos. Esta secuencia de nucleótidos, especifica una secuencia de
aminoácidos (estructura primaria de una proteína). La especificidad de la secuencia de
aminoácidos determinada por la secuencia de bases del ADN esta regida por el código
genético. La secuencia de bases del ADN, que codifica una proteína, es un GEN. Las
proteínas, son moléculas que llevan a cabo gran parte de las funciones celulares. Muchas
proteínas son enzimas, moléculas encargadas de dirigir y regular el metabolismo celular. Las
enzimas aceleran las reacciones químicas, haciéndolas compatibles con la vida. De esta
manera las enzimas, dirigen la síntesis y degradación de todas las moléculas biológicas,
incluidos lípidos, glúcidos, proteínas y los mismos ácidos nucleicos. De esta forma, el ADN al
almacenar la estructura de las enzimas y otras proteínas reguladoras, ejerce el control del
metabolismo celular.

El ADN utiliza un segundo ácido nucleico, el ARN, ácido ribonucleico, como intermediario. A
partir de la secuencia de bases del ADN, que codifica una proteína, se sintetiza una
secuencia de bases de ARN. Este proceso es llamado transcripción. EL ácido ribonucleico
encargado de transportar la información, recibe la denominación de ARN mensajero. Este
ARN mensajero, porta la información necesaria para la síntesis de proteínas, proceso
llamado traducción, el cual tiene lugar en el citoplasma con la intervención de dicho ARNm,
los ribosomas y el ARNt que porta los aminoácidos.

Las células para perpetuarse necesitan reproducirse. Esto significa que la información
almacenada en el ADN debe duplicarse para poder ser transmitida a las células hijas. El
ADN tiene la excepcional característica de ser una molécula capaz de autorreplicarse, es
decir de generar una copia de si misma. Este proceso es llamado duplicación o replicación.

DIMENSIONES DE LAS CÉLULAS

¿Por qué son tan pequeñas las células? Las células deben captar alimento y otros materiales
a través de su membrana plasmática y deben eliminar los productos de desecho, generados
en las distintas reacciones metabólicas rápidamente antes de que estos se acumulen hasta
niveles tóxicos para la supervivencia celular. Por lo tanto, las células son pequeñas, de
modo que en ellas las moléculas recorren distancias cortas, lo que acelera las actividades
celulares.

Además, a mayor superficie celular, mayor es el transporte de moléculas a través de la

membrana, siendo importante para la continuidad de los procesos metabólicos la proporción
superficie celular sobre volumen celular. Supongamos una célula de forma cúbica, cuanto
más grande es, su superficie crece proporcionalmente lado x lado, es decir a la segunda
potencia de la longitud de un lado, en cambio el volumen celular aumenta proporcionalmente
a la tercera potencia. Por lo tanto, el volumen celular aumenta más que su superficie a
medida que la célula crece, determinando el limite superior al tamaño de la célula en
cuestión. Está célula sólo podrá iniciar el proceso de división celular (previa duplicación de
su ADN) o perecerá.

Por otra parte, debemos recordar que en las células el material Genético (localizado en el
núcleo, en células eucariontes), posee un área limitada de influencia sobre el citoplasma
circundante, que es el que incrementa marcadamente su tamaño durante el crecimiento
celular, siendo otra limitante del tamaño celular la relación núcleo/citoplasma.

CÉLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS

CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES

Todas las células se parecen y responden a un patrón común por más diversas que sean. Las
células de organismos pluricelulares son diferentes en su función, por ser distintas
estructuralmente, pero todas concuerdan con un patrón común. Por ejemplo, aquellas
especializadas en la síntesis de lípidos, tendrán mayor desarrollo del retículo
endoplasmático liso y serán distintas de las neuronas especializadas en la transmisión del
impulso nervioso, cuya especialización es tan grande que pierden su capacidad de
reproducirse.

A pesar de las semejanzas y diferencias entre las células y que todas cumplen con los
postulados de la Teoría Celular, se distinguen dos grandes tipos de células:

PROCARIOTAS (sin núcleo verdadero) y EUCARIOTAS (con núcleo).

Tabla 1.3- Principales características comunes entre células eucariotas y procariotas

1- En ambos tipos celulares el ADN es el material genético.
2- Ambos tipos celulares poseen membranas plasmáticas como límite celular.
3- Poseen ribosomas para la síntesis proteica.
4- Poseen un metabolismo básico similar
5- Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.

Los eucariontes son organismos cuyas células poseen un sistema de endomembranas

(membranas internas) muy desarrollado. Estas membranas internas forman y delimitan
organelos donde se llevan a cabo numerosos procesos celulares. De hecho él más
sobresaliente de estos organelos es el núcleo, donde se localiza el ADN. Justamente, el
término eucarionte, significa núcleo verdadero (eu: verdadero, carion: núcleo). Por lo tanto,
las células eucariontes, poseen diversos compartimentos internos, rodeados por
membranas. De esta forma es más eficiente reunir a los sustratos y sus enzimas, en una
pequeña parte del volumen celular total. Además de conseguirse una mayor velocidad, las
membranas favorecen la aparición de estructuras reguladoras que orientan el flujo de
moléculas y su posterior conversión en otros productos. Ciertos procesos como la
fotosíntesis y la cadena respiratoria están altamente organizados gracias a la localización
de las enzimas en diferentes estructuras de membrana. Por otra parte, las membranas
también impiden la aparición de sustratos en forma inespecífica en distintas regiones de la
célula, ya que actúan como barrera selectiva. En cuanto al tamaño, podemos decir que en
promedio una célula eucarionte es diez veces mayor que una célula procarionte. En cuanto al
material genético, podemos decir que el ADN eucariota posee una organización mucho más
compleja que el ADN procarionte.

Las células procariontes carecen de núcleo y generalmente son mucho menores que las
células eucariontes. El ADN de las células procariontes no está rodeado por una membrana,
pero puede estar limitado a determinadas regiones denominadas nucleoides. Las células
procariontes, al igual que las células eucariontes, poseen una membrana plasmática, pero
carecen de membranas internas, que formen organelos. Sin embargo, debemos precisar que
en algunas células procariontes, la membrana plasmática forma laminillas fotosintéticas.

Las células procariontes poseen una característica única, una pared de peptidoglicanos, un
gran polímero de glúcidos y aminoácidos.

Tabla 1.4- Características Diferenciales entre el Modelo Celular Procariótico y

Eucariótico
Característica Célula Procariótica Célula Eucariótica
Núcleo No posee membrana nuclear Posee membrana nuclear
Cromosomas Un único cromosoma circular Posee uno o más cromosomas
y desnudo lineales unidos a proteínas
(cromatina)
ADN extracromosómico Puede estar presente como Presente en organelas
plásmidos
Organelas citoplasmáticas No posee Mitocondrias y cloroplastos,
(los cloroplastos presentes
sólo en células vegetales)
Membrana plasmática Contiene las enzimas de la Semipermeable, sin las
cadena respiratoria, también funciones de la membrana
puede poseer los pigmentos procariótica
fotosintéticos
Sistema de endomembranas No posee Presenta REG, REL, Golgi,
lisosomas, vacuolas y vesículas.
Pared celular Capa rígida de peptidoglucano No poseen pared de
(excepto micoplasmas) peptidoglucano. Pueden poseer
una pared de celulosa o quitina
Esteroles Ausentes (excepto Generalmente presentes
micoplasmas)
Citoesqueleto Ausente Presente. Formado por
filamentos proteicos.
Exocitosis y Endocitosis Ausente Presente
Ribosomas 70 S en el citoplasma 80 S en el retículo
endoplásmico y en el citosol
División Fisión Binaria (amitosis) Mitosis - Meiosis
Tamaño 0,2 a 10 mm Siempre superior a 6 mm

ESTRUCTURA DE LAS CÉLULAS PROCARIÓTICAS

Fig. 1.2- Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

BACTERIAS, MICOPLASMAS Y ALGAS CIANOFÍCEAS

Cuadro 1.1- Estructura de una Célula procarióta

Las bacterias pueden definirse como organismos unicelulares procariontes que se

reproducen por fisión binaria. Contienen toda su información genética en un único
cromosoma bacteriano circular. También poseen sistemas productores de energía y
biosintéticos necesarios para el crecimiento y la reproducción. Poseen como característica
particular una pared rígida de peptidoglicanos. Son generalmente de vida libre y poseen
ADN extracromosómico en forma de plásmidos, estos codifican genes de resistencia a
antibióticos o factores "sexuales" como los pili.

Los micoplasmas son las bacterias mas pequeñas de vida independiente. Son muy flexibles y
deformables por lo que atraviesan los filtros de esterilización. Entre sus características
principales se encuentran: a) carecen de pared celular, b) en su membrana plasmática
poseen esteroles, que no son sintetizados por la bacteria sino que son absorbidos del medio
de cultivo o del tejido donde se desarrolla.. Los micoplasmas son resistentes a la penicilina
(carecen de pared de peptidoglucano) y por la misma razón no toman la coloración de Gram.
Las cianobacterias, anteriormente llamadas algas cianofíceas (azulverdosas), son bacterias
Gramnegativas. Se encuentran presentes en estanques, lagos, suelo húmedo, cortezas de
árboles, océanos y algunas en fuentes termales. La mayor parte de las cianobacterias son
autótrofos fotosintéticos. Contienen clorofila a, que también se encuentra en plantas y
algas. La clorofila a y pigmentos accesorios se localizan en membranas fotosintéticas,
llamadas laminas internas o laminillas fotosintéticas. Muchas especies de cianobacterias
fijan nitrógeno, este proceso enriquece el suelo.

En la Tabla 1.4 se aprecian las diferencias más importantes entre las células procariotas
(bacterias) y eucariotas

PLÁSMIDOS

Un plásmido es una molécula de ADN extracromosómico que se replica en forma autónoma,

por lo que al igual que el cromosoma es un replicón. Puede haber hasta 50 copias de un
plásmido en una bacteria. Funcionalmente los plásmidos son elementos genéticos accesorios,
es decir que la bacteria puede vivir sin ellos. Sin embargo, la información que contienen
puede contribuir a la adaptación de la bacteria al medio y a la evolución de la misma. Los
plásmidos pueden contener genes que codifican factores de resistencia a antibióticos (los
plásmidos R) y factores de patogenicidad como exotoxinas. La evolución bacteriana a través
de los plásmidos es factible, ya que pueden ser intercambiados entre distintas bacterias
(por ejemplo, el plásmido F). Es decir que ciertos genes pueden transferirse de una
bacteria otra mediante el pasaje de plásmidos, a este mecanismo se lo denomina
conjugación. Para que la conjugación pueda llevarse a cabo las dos bacterias deben ponerse
en contacto físico . Esto es posible debido a que una de las bacterias, posee pili sexuales
(pelos) en su envoltura. Estos pili se encuentran codificados en el mismo plásmido F
(plásmido conjugativo). La bacteria que transfiere el plásmido es la que posee pili y se la
denomina F+, la célula receptora es F-.

TRANSPOSONES

Los transposones son elementos genéticos movibles, que se encuentran presentes en los
procariontes (aunque también en las células eucariontes). El descubrimiento de los
transposones se lo debemos a Barbara McClintock. Los transposones son fragmentos de
ADN que se mueven de una localización a otra del cromosoma. Esta transposición es
catalizada por una enzima llamada transposasa. El gen de la transposasa esta incluido
dentro del mismo transposón. Los transposones al ser elementos móviles, dentro del
genoma, pueden provocar mutaciones al insertarse en nuevas regiones del ADN.

PARED CELULAR. BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS

Por fuera de la membrana celular, se encuentra una pared celular rígida de peptidoglicano,
que esta presente en todas las bacterias excepto los micoplasmas. La presencia de la pared
protege a la bacteria de la diferencia de presión osmótica entre el medio interno de la
bacteria y el medio exterior. De no existir la pared la bacteria estallaría. Además la pared
cumple funciones de protección como por ejemplo contra sustancias tóxicas .

Existen dos tipos de pared bacteriana que pueden diferenciarse por la Tinción de Gram
(siglo XIX). El primer grupo de bacterias son aquellas capaces de retener el colorante
cristal violeta luego de la decoloración con alcohol-cetona. Estas bacterias son llamadas
Grampositivas. El segundo grupo esta conformado por aquellas bacterias incapaces de
retener el colorante luego del tratamiento decolorante, por lo tanto son llamadas
Gramnegativas.

LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMPOSITIVAS

Fig. 1.3- Esquema de la parecelular de una bacteria Grampositiva

La pared celular de las Grampositivas es más gruesa que la de los Gramnegativas. Posee
peptidoglicano, ácidos teicoicos y lipoteicoicos. El componente fundamental es la mureína,
un peptidoglicano que solo se encuentra en los procariontes. La mureína consiste en una
cadena lineal de dos azúcares alternados N-acetilglucosamina y ácido acetilmurámico. A
cada residuo de ácido murámico se encuentra unido un tetrapéptido compuesto de D- y L-
aminoácidos. Aproximadamente un tercio de los tetrapéptidos presentes participan de la
unión lateral entre cadenas adyacentes de mureína. La pared celular es biológicamente
estable, resiste el ataque de las enzimas de los mamíferos, excepto de la lisozima que la
degrada. La síntesis de la pared puede ser afectada por antibióticos como la penicilina. Los
ácidos teicoicos son el principal determinante antigénico de las bacterias Grampositivas y
por lo tanto definen la individualidad inmunológica de estas bacterias.

LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMNEGATIVAS

Fig. 1.4- Esquma de la pared celular de una bacteria Gramnegativa

El espesor de la pared celular de una bacteria Gramnegativas es considerablemente menor

que el de una Grampositivas. La cantidad de mureína es mucho menor en los Gramnegativas.
Los ácidos teicoicos no están presentes en las bacterias Gramnegativas. A ambos lados de
la fina pared de mureína se encuentra un gel periplásmico, que define al llamado periplasma
(antes llamado espacio periplasmático).

Por fuera del periplasma se encuentra una estructura exclusiva de las Gramnegativas, la
denominada membrana externa. Si bien es estructuralmente similar a una bicapa lipídica,
su composición es diferente de la de otras membranas biológicas. Esta bicapa es muy
asimétrica, la semicapa interna esta compuesta por fosfolípidos, pero la semicapa externa
esta compuesta por lipopolisacáridos (LPS), altamente tóxico para el ser humano
(endotoxina).

Para obtener nutrientes las bacterias Gramnegativas, poseen porinas que son proteínas que
forman poros en la membrana externa.

CÁPSULAS

Por fuera de la membrana externa de las Gramnegativas y de la gruesa pared de las

Grampositivas, se encuentra presente, en algunas bacterias, una cápsula o matriz
exopolisacárica, formada por un gel hidrofílico. En general esta cápsula o matriz esta
formada por polímeros de azúcares. Las cápsulas permiten a las bacterias evadir los
mecanismos de defensa de los organismos pluricelulares, también tienen funciones de
adherencia a epitelios permitiendo de esta manera colonizar los tejidos del huésped.

ESTRUCTURA DE LAS CÉLULAS EUCARIÓTICAS

Cuadro 1.2- Estructura de una Célula eucarióta

Fig.1.5- Esquema de la ultraestructura tridimencional de una célula animal y sus principales

componenetes

Presentan este modelo celular, los organismos de los reinos Protista, Hongos, Plantas y
Animales.

Si bien existe una gran diversidad entre estas células, el modelo básico es similar,
presentando como estructura sobresaliente el núcleo celular.

NÚCLEO CELULAR

Las diversas partes de una célula eucariótica interactúan de forma integrada. Esto es
posible
porque existe un centro primordial de control: el núcleo celular. Una membrana doble, la
envoltura nuclear (constituida por dos unidades de membrana), controla el transporte, muy
selectivo, de sustancias entre el núcleo y el citoplasma. El pasaje se realiza a través de los
poros nucleares. La envoltura nuclear posee ribosomas adheridos a la cara citoplasmática y
una estructura proteica en su parte interna llamada lamina nuclear, que sirve como
esqueleto al núcleo.

En el interior del núcleo, se encuentra el material genético (ADN) asociado a proteínas

básicas llamadas histonas, formando una estructura fibrilar muy enrollada denominada
cromatina y el nucleolo, sitio de ensamblaje de los ribosomas (estructuras esenciales para
la síntesis de proteínas, formados por ARN ribosomal y proteína). El ARN ribosómico se
sintetiza en el nucleolo, y las proteínas ribosómicas en el citoplasma, para pasar después al
núcleo y de allí al nucleolo, donde se unen al ARN ribosomal para formar los ribosomas.

Tabla 1.5- Características del Núcleo Celular y sus Componentes

Estructura : Núcleo Celular Descripción Función
Núcleo Estructura rodeada por una Regular la función celular.
doble membrana con poros. Control del metabolismo,
Contiene cromatina/cromosomas reproducción (ciclo celular) y
y nucleolo. diferenciación celular.
Envoltura Nuclear Estructura formada por dos Continuación del REG. Posee
unidades de membrana unidas a poros que regulan el pasaje
nivel de los poros nucleares. entre núcleo y citoplasma
Nucleolo Cuerpo granular en el núcleo, que Sitio de síntesis del RNA
consiste en ARN y proteínas. ribosómico y de ensamble de
los ribosomas.
Cromatina ADN asociado a proteínas, tanto Empaquetamiento
estructurales (histonas) como a (plegamiento) de ADN. El
proteínas regulatorias. La ADN compone los genes.
cromatina es visible durante la Funciones regulatorias de la
interfase celular transcripción genética.
Cromosomas ADN asociado a proteínas, en Contienen los genes que son
estado superenrrollado. Visible las unidades de información,
en forma de estructuras que rigen las funciones y
cilíndricas cuando la célula se estructura celular.
divide, ya sea en mitosis o
meiosis.

Rodeando al núcleo encontramos el CITOPLASMA, coloide donde predominan como

constituyentes agua, iones, enzimas y donde se encuentran incluidos los organelos celulares.
El citoplasma se encuentra separado del ambiente exterior por la membrana plasmática.

MEMBRANA PLASMÁTICA

Estructuralmente esta compuesta por una bicapa fosfolipídica. El colesterol esta presente
en las células animales, pero esta ausente, en general, en plantas, hongos y procariontes
(salvo micoplasmas). La membrana plasmática también contiene múltiples proteínas con
diversas funciones. Podemos dividirlas en dos grandes grupos: a) proteínas integrales de
membrana y b) proteínas periféricas de membrana. Las primeras atraviesan la membrana
de lado a lado, mientras que las segundas están en contacto con la membrana, pero no la
atraviesan. Algunas son enzimas reguladoras, otras receptores hormonales. Existen
también proteínas transportadoras y canales reguladoras del movimiento de iones y
moléculas a través de la membrana plasmática, de allí su enorme especificidad. Otra
función importante de la membrana es la comunicación intercelular y el reconocimiento de
diversos tipos de molécula (hormonas, virus, anticuerpos, toxinas, etc.) que interactúan con
ella. En general esta función es llevada acabo por glucoproteínas y glucolípidos, que se
encuentran solo en el lado externo de la membrana plasmática. Se cree que los glúcidos
juegan un importante papel en la adhesión entre células. A esta capa, de glucolípidos y
glucoproteínas se la denomina glucocálix.

SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS

Este sistema se compone de sistemas membranosos interconectados entre sí, como el

retículo endoplalmático liso o agranular (REL), el retículo endoplasmático rugoso o granular
(REG) y el aparato de Golgi. Estas estructuras permiten la circulación de sustancias
siempre dentro de formaciones limitadas por membrana interactuando por medio de
vesículas.

Tabla 1.6 - Organización del Sistema de endomembranas

Estructura Descripción Función
Retículo endoplasmático Membranas internas en forma Síntesis de Proteínas
rugoso (REG) de sacos aplanados y túbulos. destinadas a
Con ribosomas adheridos a su secreción(exportación) o a la
superficie externa. La incorporación de membranas.
envoltura nuclear es parte del
REG.
Retículo endoplasmático liso Membranas internas donde Sitio de biosíntesis de lípidos y
(REL) predominan los túbulos. Sin detoxificación de
ribosomas adheridos. medicamentos.
Aparato de Golgi Pilas de sacos membranosos Modificación de proteínas
aplanados (dictiosomas). (glicosilación). Empaquetamiento
Funcional y estructuralmente de proteínas secretadas.
polarizado. Clasificación de las proteínas
que se distribuyen a membrana
plasmática, secreción o
lisosomas.
Lisosomas Vesículas (sacos) Contienen enzimas hidrolíticas,
membranosas que desdoblan materiales
ingeridos, secreciones y
deshechos celulares.
Vacuolas Sacos membranosos Transporte de materiales,
principalmente, en plantas, deshechos y agua.
hongos y algas.

ORGANELAS
Tabla 1.7 - Principales organoides membranosos de la célula eucarionte
Estructura Descripción Función
Mitocondria Organelas semiautónomas. Poseen Metabolismo aeróbico. Sitio
ADN y ribosomas tipo procarionte. de muchas de las reacciones
Una doble membrana les sirve de de la respiración celular. Allí
envoltura. La membrana interna se realizan el ciclo de Krebs,
forma las crestas mitocondriales. la cadena respiratoria y la
fosforilación oxidativa. Es
decir la transformación de la
energía de lípidos o glucosa
(moléculas combustibles) en
ATP (moneda energética).
Cloroplasto Organela semiautónoma. Posee La clorofila capta la energía
ADN y ribosomas tipo procarionte. luminosa para formar ATP y
Una doble membrana envuelve a otros compuestos con gran
los tilacoides. La clorofila, se cantidad de energía. Estos
encuentra en las membranas compuestos altamente
tilacoidales. energéticos sirven para
sintetizar, glucosa a partir de
CO2.
Microcuerpos (Peroxisomas) Vesículas membranosas que Sitio de muchas reacciones
contienen diversas enzimas metabólicas. Enzimas que
relacionadas con el metabolismo protegen de la toxicidad del
del oxigeno y el peróxido de oxigeno, por ejemplo la
hidrogeno. No poseen ADN ni catalasa.
ribosomas

RIBOSOMAS Y POLIRRIBOSOMAS

Son estructuras redondeadas que a diferencia de las anteriores, carecen de unidad de

membrana.

Están constituidos por dos subunidades, mayor y menor separadas entre sí. Ambas
subunidades se unen cuando leen una molécula de ARNm. Las subunidades están formadas
por ARNr y proteínas, siendo ensambladas en el nucleolo. Cuando hay varios ribosomas
unidos a una molécula de ARNm, lo denominamos polirribosoma.

La función de los ribosomas es sintetizar proteínas.

CITOESQUELETO

El citoesqueleto es una red de fibras proteínicas. Esta red es dinámica encontrándose en

constante cambio. Sus funciones, son esenciales para las células eucariontes y abarcan
motilidad celular, forma, diferenciación, reproducción, regulación, etc.

Tabla 1.8 - Organización General del citoesqueleto

Estructura Descripción Función
Microtúbulos Tubos huecos compuestos por Sostén estructural,
 participan en el movimiento
la forma monomérica de la de organelas y la división
proteína tubulina. (monómero celular (aparato mitótico),
globular) componentes de cilios,
flagelos y centríolos.
Sostén estructural,
Estructura sólida en forma de
Filamentos de actina participan en el movimiento
huso consistente en la proteína
(microfilamentos) de la célula y sus organelos y
actina. (monómero globular)
en la división celular.
Sostén estructural. Forman
Proteínas filamentosas, en
redes que conectan la
Filamentos intermedios forma de tubos. Compuestas
membrana plasmática con la
por monómeros fibrosos.
envoltura nuclear.
El huso mitótico se forma
entre los centríolos durante
Pares de cilindros huecos,
la división de células
localizados cerca del centro de
Centríolos animales, fija y organiza los
la célula, formados por
microtúbulos. Están
microtúbulos.
ausentes en las plantas
superiores.
Movimiento de algunos
Proyecciones relativamente
organismos unicelulares. Se
cortas que se extienden desde
Cilios utiliza para mover
la superficie celular.
materiales en la superficie
Compuestas por microtúbulos.
de algunos tejidos.
Proyecciones largas
Locomoción celular de
compuestas por microtúbulos.
Flagelos espermatozoides y algunos
Cubiertos por membrana
organismos unicelulares.
plasmática

Fig. 1.6- Esquema de componentes del citoesqueleto

CÉLULA EUCARIÓTICA ANIMAL Y VEGETAL

Fig. 1.7- Esquemas de una célula vegetal (izquierda) y tridimencional de un cloroplasto con
sus componentes (derecha)

Cuadro 1.3- Modelos básicos de célula eucarióta

Las células eucariontes poseen dos modelos estructurales básicos: a) células autótrofas
fotosintéticas y b) células heterótrofas.

Las células autótrofas son aquellas que sintetizan su propio alimento, es decir sus propias
moléculas combustibles. En este caso las células eucariontes vegetales son células
autótrofas fotosintéticas, por lo tanto utilizan la luz solar como fuente de energía.
Transforman la energía solar en energía química, este proceso es llamado fotosíntesis. La
fotosíntesis en las células vegetales se lleva a cabo en un organelo membranoso llamado
cloroplasto. Dentro del cloroplasto se encuentran sacos membranosos apilados,
denominados tilacoides, en cuyas membranas encontramos el pigmento llamado clorofila,
esencial para la fotosíntesis.

Las células heterótrofas son aquellas que no sintetizan su propio alimento sino que
necesitan una fuente externa de energía tanto como de materiales de construcción de sus
propias moléculas. Las células animales (y los hongos), son células eucariontes heterótrofas.

Las células animales y las células vegetales poseen unas organelas membranosas llamadas
mitocondrias, donde se lleva acabo la respiración celular. En este proceso son rotos los
enlaces de alta energía de las moléculas combustibles orgánicas. Esta energía liberada es
utilizada para la síntesis de las monedas energéticas como el ATP. El ATP es esencial para
las diferentes funciones celulares. Para que este proceso se lleve a cabo dentro de las
mitocondrias es necesaria la presencia de oxigeno.
Por lo tanto en ambos tipos celulares son necesarias las mitocondrias , para obtener
energía química en forma de ATP a partir de las moléculas combustibles. Pero es diferente
el origen

de las moléculas orgánicas utilizadas como combustibles. En el caso de las células vegetales
(autótrofas), ellas sintetizan sus propias moléculas combustibles en los cloroplastos, en el
proceso de fotosíntesis. En cambio las células animales (heterótrofas), necesitan una
fuente externa de moléculas energéticas que sirvan como combustible celular.

Tabla 1.9 - Principales diferencias entre células animales y células vegetales

Estructura Célula animal Célula vegetal
Pared celular constituida por
Pared celular Ausente
celulosa.
Aparato mitótico (Huso
Astral Anastral
acromático )
Centríolos Presente Ausente
Vacuolas grandes, puede ser
Vacuolas Vacuolas pequeñas
una grande central
Metabolismo Heterótrofo Autótrofo
Mitocondrias Presentes Presentes
Cloroplastos Ausentes Presentes
Fig. 1.8- Esquema de la ultraestructura de una célula animal idealizada
Fig. 1.9- Esquema de la ultraestructura de una célula vegetal idealizada
VIRUS

Hacia fines del siglo pasado se formulo la teoría de que cada enfermedad era producida por
un germen específico. Hasta ese momento los patólogos estaban convencidos de que para
cada enfermedad seria posible encontrar el microorganismo responsable, utilizando las
siguientes técnicas: a) observación del germen con la ayuda del microscopio, b) cultivo
sobre un medio nutritivo y c) retención por filtros. Sin embargo, en 1892, Iwanowski (o
Ivanovsky?) pudo demostrar que el agente productor de la enfermedad del mosaico de
tabaco pasaba a través de los filtros para bacterias y no podía ni verse ni cultivarse. Luego
en 1898 Beijerinck, determinó que la enfermedad del mosaico del tabaco era provocada por
un nuevo agente infeccioso a los que denomino virus filtrables (virus: palabra de origen
latino que significa veneno). Los virus están ampliamente distribuidos en la naturaleza y
afectan a todo tipo de organismos, tanto del reino animal, vegetal o protista.

CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES DE LOS VIRUS

La estructura de los virus esta integrada por dos tipos de macromoléculas: ácidos nucleicos
y proteínas, los que forman las partículas virales o viriones. Básicamente existen dos tipos
de partículas virales: partículas virales simples (virus desnudo) o partículas virales
envueltas (virus envuelto). El virus desnudo consta de un ácido nucleico (genoma) asociado a
proteínas y una cubierta proteica o cápside. Por otra parte los virus envueltos añaden a
esta estructura básica una envoltura lipoproteica de origen celular. La función de la cápside
es de servir al ácido nucleico como protección y vehículo.

Postulado de Lwoff

"Únicamente serán considerados virus aquellos agentes infecciosos cuya partícula

elemental contenga un solo tipo de ácido nucleico". Es decir poseen ARN o ADN, pero no
ambos tipos de ácidos nucleicos funcionales a la vez. Por lo tanto los virus pueden ser ADN
o ARN virus. Debido a la estructura simple de virus, para su multiplicación dependen en
forma absoluta de la célula huésped que infectan. Por lo tanto consideraremos a los virus
como parásitos intracelulares obligados.

REPLICACIÓN VIRAL

La célula huésped, una vez infectada, sintetizará nuevas moléculas de ácido nucleico viral,
ya que el genoma viral tomara el control de las actividades metabólicas de la célula. Bajo
este control, también se producirán gran cantidad de proteínas virales. De esta manera el
ensamblado de nuevas partículas virales provendrá de la asociación de las nuevas moléculas
de ácido nucleico viral con las proteínas. Este proceso es muy diferente de la reproducción
celular, tanto de los procariontes como de los eucariontes. Por lo tanto es mas apropiado
hablar de REPLICACION VIRAL.

LOS VIRUS COMO PARÁSITOS INTRACELULARES

Hasta el momento no se ha podido demostrar que ningún virus aislado pueda utilizar o
almacenar energía mediante procesos similares a la respiración, tampoco pueden sintetizar
proteínas. Es decir no tienen metabolismo propio, dependiendo en forma absoluta del medio
ambiente celular.

El parasitismo de los virus se ejerce a nivel genético, ya que el genoma viral dentro de la
célula desplaza al genoma de la célula hospedadora del control celular.

PROVIRUS

Anteriormente hemos explicado que los virus, infectan las células y hacen replicas de si
mismos. Luego abandonan la célula huésped y pasan a otra, recomenzando su ciclo. Pero
también puede ocurrir que el genoma viral se integre al ADN del huésped. Cuando el genoma
viral se integra al genoma celular y se replica junto con este se lo denomina PROVIRUS. Un
provirus puede activarse espontáneamente o bien expuesto a diversos estímulos, una vez
activado puede inducir la producción de virus completos. Los provirus pueden modificar la
morfología celular y su metabolismo, esto puede deberse a la producción de alguna proteína
viral. Estos cambios en la estructura celular, generalmente asociados a cambios en la
membrana celular, inducidos por un provirus reciben el nombre de transformación. En
algunos casos estas células transformadas por los provirus pueden ser cancerosas.

LOS VIRUS COMO AGENTES INFECCIOSOS

El parasitismo celular obligado es la causa básica por la cual un virus puede causar daño. La
relación que establece un virus y su célula huésped es variable. El resultado de la
interacción depende tanto del virus en cuestión como de la célula huésped. Por ejemplo, se
denominan virus citocídicos , a los que como resultado de su multiplicación, producen una
rápida inducción hacia la muerte celular. Por otra parte se encuentran los virus no
citocídicos, que son aquellos que no provocan la muerte celular. Ejemplos de virus no
citocídicos serian los virus moderados y los virus oncogénicos. Los virus moderados son
aquellos que producen partículas virales y no producen la muerte celular. Han llegado con la
célula huésped a un estado de equilibrio más o menos estable. Luego están los virus
oncogénicos, capaces de estimular la división celular, estos cambios pueden ser
irreversibles si la célula pierde la capacidad de regular su ciclo celular. Este estado se
denomina transformación celular.

Los virus no citocídicos pueden causar dos tipos de infecciones:

1- Las infecciones latentes, donde el virus permanece sin manifestarse, alojado en células
no productoras. Ante determinados estímulos, estrés, enfermedades, exposición a la luz
solar, el virus se reactiva, recomenzando la síntesis de ácidos nucleicos y proteínas virales.
Ejemplos: L Herpes simplex, Varicela zoster.

2- Las infecciones crónicas, donde de una persona enferma siempre es posible obtener
virus infeccioso, aun por periodos muy prolongados de tiempo. Por ejemplo, virus de la
hepatitis B, Epstein-Barr, virus de la rubéola.
Fig. 1.10- Virus del Mosaico del Tabaco (ARN virus) y Bacteriófago T4 (ADN virus)

MORFOLOGÍA VIRAL

Los virus poseen gran variedad de formas y tamaños. Por ejemplo los virus que al
microscopio electrónico aparecen aproximadamente esféricos se denominan isométricos. En
estos virus el ácido nucleico esta rodeado por una cápside (caja) proteica. Las subunidades
estructurales que forman la cápside, visibles al microscopio electrónico, se denominan
capsómeros. A su vez los capsómeros están formados por subunidades proteicas. La cápside
por su naturaleza antigénica es la que determina la identidad viral.

El ácido nucleico viral no se encuentra desnudo, sino que esta asociado a proteínas distintas
de las de la cápside, cuya función puede ser estructural (plegado del ADN) o enzimática
(polimerasa). Al conjunto de ácido nucleico y proteínas asociadas se lo denomina "core". Por
ultimo diremos que los virus donde la cápside rodea directamente al ácido nucleico (es decir
que no hay un "core" evidente), el conjunto de cápside y ácido nucleico recibe la
denominación de nucleocápside.

GENOMA VIRAL

El genoma, que puede encontrase en los distintos tipos de virus, puede sistematizarse de
acuerdo a diversos criterios:

1- Tipo de ácido nucleico: ADN o ARN

2- Polaridad o sentido: + o - (aplicado principalmente a los ARN virus)

3- Número de cadenas: monocatenario o bicatenario

4- Genoma circular o desnudo

5- Genoma entero o fragmentado

Debemos recordar que las cadenas de un ácido nucleico de doble cadena, son de polaridad
(sentido) opuesto. Por convención se considera que si una tiene sentido + la otra será -.
De acuerdo a este criterio se considera que un virus es + (o cadena +), cuando su genoma
monocatenario tiene la misma polaridad que un ARNm. Es decir el mismo genoma viral,
puede actuar dentro de la célula como ARNm y llevar a cabo directamente la síntesis de
proteínas virales. Los "virus +", pueden infectar con el ácido nucleico solo, salvo los
retrovirus que siendo +, necesitan una transcriptasa reversa asociada al genoma para poder
infectar. Por el contrario, se denomina "virus -" cuando el genoma no puede actuar
directamente como mensajeros. El ARN - puede actuar como molde, para la síntesis de
ARN +, el ARNm viral.

Fig. 1.11- Esquema y microfotograía electrónica de un Bacteriófago

BACTERIÓFAGOS

Los Bacteriófagos son virus específicos de las bacterias. Bacteriófagos, significa que se
"alimenta" o multiplica a expensas de bacterias.

Los Bacteriófagos que infectan células huésped, pueden establecer dos tipos de procesos:

1- Ciclo Lítico: en este tipo de ciclo el virus produce inmediatamente gran cantidad de
ácidos nucleicos virales y proteínas de la cápside. Estos se ensamblan produciendo nuevas
partículas virales que son liberadas al medio al producirse la lisis celular.

2- Ciclo Lisogénico: en este ciclo la relación entre célula huésped y virus, puede prolongase
por periodos variables de tiempo. El virus integra su genoma al cromosoma bacteriano,
replicándose conjuntamente el ácido nucleico del parásito y el del huésped. Un virus
bacteriano integrado al cromosoma se denomina profago. Por lo tanto el profago se replica
junto con el ADN bacteriano. En determinadas circunstancias (por ejemplo ruptura del
ADN bacteriano por luz ultravioleta o agentes químicos), el profago se activa, y comienza la
producción de ácido nucleico viral y proteínas virales, produciendo luego la lisis celular. Las
bacterias que portan profagos se denominan lisogénicas. Los Bacteriófagos que pueden
integrarse como profagos y que no lisan inmediatamente a las células se denominan fagos
atenuados.
Fig. 1.12- Esquema del Ciclo Lítico Viral (de multiplicacón) y del Ciclo Liso´genico Viral

LOS VIRUS COMO VECTORES

Los virus pueden servir como vehículos (vectores), para transferir material genético de una
célula a otra. Este fenómeno se denomina transducción. Durante el ciclo lítico, el ADN del
huésped queda fragmentado y alguno de esos fragmentos puede ser tomado al azar y
quedar dentro de la cápside. De esta forma, cuando el virus infecta una nueva célula,
transporta genes de una antigua célula huésped a otra nueva.

VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (HIV)

El SIDA (síndrome de inmunodeficiencia humana), es una enfermedad infecciosa crónica

producida por el virus HIV. Esta enfermedad esta caracterizada por una deficiencia
inmunológica progresiva, con la expresión clínica de infecciones oportunistas y/o tumores.

El HIV es un retrovirus. Los retrovirus son virus cuyo material genético es ARN. Una vez
que el virus ha penetrado en una célula, una enzima llamada retrotranscriptasa, produce
ADN a partir del ARN viral. El ADN recién sintetizado viaja al núcleo y se integra al ADN
cromosómico . En este punto la infección se ha hecho permanente , y la forma integrada del
virus se denomina provirus. El HIV es un LENTIVIRUS. Por lo tanto su ciclo vital
intracelular (ciclo de infección) puede prolongarse por años. Sus genomas son complejos y
sus mecanismos regulatorios son solo parcialmente conocidos. Los Lentivirus causan
infecciones crónicas.

El sistema inmune del hombre reconoce las proteínas del HIV como antígenos y produce
anticuerpos contra ellas. Por lo tanto una persona infectada tendrá circulando en sangre
anticuerpos contra las proteínas del HIV. En este aspecto se basa el test de diagnóstico
más utilizado en la actualidad: el test de ELISA (inmunoensayo ligado a enzima).

Fig. 1.13- Esquema del Virus de la Inmunideficiencia Hunama (HIV)

El virión del HIV, esta recubierto por una membrana lipídica, por lo tanto se trata de un
virus envuelto. De la membrana sobresalen glicoproteínas: la gp41 y la gp120. La membrana
compuesta por lípidos y proteínas recubre el núcleo (core) del virión, formado por las
proteínas p28 y p24. En el core se encuentran el ARN del virus y la enzima transcriptasa
inversa.

Ciclo Vital Intracelular de un retrovirus

Empieza cuando un virión o partícula vírica , se une a la superficie externa de una célula
susceptible. Este primer estadio del ciclo se lo denomina adsorción. Luego el virus fusiona
su envoltura lipoproteica con la membrana celular, introduciendo en la célula su
nucleocápside junto con el ARN que constituye su dotación genética. En cada partícula viral
se encuentran dos cadenas de ARN vírico. A este proceso se lo conoce como penetración.

La enzima transcriptasa inversa es una ADN polimerasa que primero produce una copia de
ADN simple cadena que a continuación se copia a si misma obteniéndose ADN doble cadena.
Por lo tanto este ADN doble cadena se obtuvo a partir de ARN. La síntesis del ADN doble
cadena ocurre junto con la degradación del ARN original. El ADN doble cadena (provirus),
emigra hacia el núcleo y se integra en el propio ADN celular. La integración de este ADN
doble cadena en el cromosoma del huésped es necesaria para la síntesis de nuevas
moléculas de ARN, por la ARN polimerasa celular, ya que el virus carece completamente de
la maquinaria metabólica necesaria para realizar la transcripción y la síntesis de proteínas
necesarias para la cápside y la misma transcriptasa reversa.

Fig. 1.14- Esquema del Ciclo Vital Intracelular de un Retrovirus

VIRUS DE LA HEPATITIS B (VHB)

La hepatitis B en si misma, es un problema sanitario grave y muy extendido . Pero encierra

una amenaza peor. El virus que la produce es el carcinógeno humano más importante
después del tabaco. Trescientos millones de personas , la mayoría habitantes con escasos
recursos asistenciales, están crónicamente infectados con el virus y tienen una
probabilidad muy elevada de contraer cáncer de hígado. En el tercer mundo, el virus suele
transmitirse de madre a hijo, durante el primer mes de vida, y principalmente durante el
nacimiento. Si el pequeño es niña, se convertirá probablemente en portadora crónica y
transmitirá el virus de la hepatitis B (VHB) a su descendencia cuando alcance la edad fértil.
En cambio en los países desarrollados su incidencia es mayor en adultos, que por su
profesión tienen contacto directo con la sangre (cirujanos, enfermeras, dentistas), los
receptores de sangre u hemoderivados o personas que reciben tratamientos de diálisis o
drogadictos intravenosos.

El virus de la hepatitis B (VHB) es mucho más contagioso que el HIV.

EXPERIMENTO DE FRENKEL-CONRAT Y SINGER

Fig. 1.15- Esquema del experimento de Frenkel - Conrat y Singer

Este experimento demostró que el ARN es el material genético del virus del mosaico del
tabaco. Los resultados del experimento son extensibles a otros tipos de virus con genoma a
ADN.

VIROIDES

Los viroides son agentes infecciosos que poseen al igual que los virus un solo tipo de ácido
nucleico y son parásitos absolutos, pero y esta es la gran diferencia con los virus, carecen
de cápside y envoltura. Por lo tanto los viroides están constituidos solo por una secuencia
de nucleótidos, además los viroides carecen de información para la síntesis de proteínas, en
cambio los virus siempre poseen dicha información.

PRIONES
Las partículas infecciosas llamadas priones, están constituidas únicamente por una proteína
de aproximadamente 250 aminoácidos. Es decir carecen completamente de ácidos
nucleicos. Es esta la razón por la cual fue resistida durante mucho tiempo, la hipótesis de
que las proteínas por si solas podían ser la causa de enfermedades infecciosas. De acuerdo
al dogma imperante hasta 1980, las enfermedades transmisibles (infecciosas) necesitaban
material genético, para que la infección se asentara en el huésped. Hasta ese momento eran
los virus los agentes infecciosos más pequeños conocidos, y todos ellos poseen ADN o ARN
como material genético necesario para codificar sus proteínas y dirigir la replicación viral
en el huésped.

Pero ahora sabemos que las partículas proteínicas infecciosas (priones), pueden ser el
sustrato de diversas enfermedades, hereditarias o contagiosas. Este comportamiento dual
tanto infeccioso como hereditario era desconocido. Posteriormente se descubrió que los
priones se multiplican por una vía increíble y desconocida hasta ese momento: convierten
proteínas normales en MOLECULAS INFECCIOSAS, con solo alterar la estructura
proteica.

Las encefalopatías espongiformes transmisibles (EET), son las enfermedades

degenerativas del sistema nervioso central que afectan a animales y seres humanos
causadas por los priones. Se denominan espongiformes ya que el cerebro adquiere un
aspecto parecido al de una esponja. Las EET que sufren los seres humanos son el Kuru (o
muerte de la risa), la enfermedad de Creutzfeldt -Jakob (ECJ), el síndrome de Gerstman-
Straussler-Scheinker (GSS) y el insomnio Familiar Fatal (IFF); las EET de animales,
incluyen el scrapie (del ingles to scrape, raspar, por la tendencia de los animales infectados
a rasparse contra postes , troncos o cercas para combatir la picazón) de ovejas y cabras, la
enfermedad de agotamiento crónico de mulas y ciervos en cautiverio y la encefalitis
espongiforme bovina (EEB), o enfermedad de la vaca loca.

Las EET se caracterizan por su prolongado periodo de incubación (en el hombre puede
tener un periodo de incubación de 30 o mas años), generalmente asociadas a declives
progresivos de las funciones motoras y cognitivas (enfermedad activa), y por su evolución
inevitablemente fatal. Las EET en el ser humano generalmente aparecen en personas de
edad avanzada.

Aparentemente todas las EET son causadas por el cambio en la estructura de una proteína
normalmente presente en las membranas celulares, denominada proteína priónica (PrP). La
forma anormal de la PrP se designa PrPsc (scrapie), para diferenciarla de la forma normal
llamada PrPc (celular). La secuencia de aminoácidos (estructura primaria) de la PrPc y la PrPsc
es idéntica lo que varia es su conformación (plegamiento en el espacio). De acuerdo a esta
teoría la proteína alterada (PrPsc), puede unirse a la proteína normal (PrPc) y cambiar su
conformación, transformándola a su vez en una proteína alterada. De esta forma se
propagaría la enfermedad y se generarían nuevas proteínas infecciosas. De esta forma el
pasaje de la forma normal a la patológica es catalizada por el mismo prión (PrPsc), por lo
tanto solo hace falta una pequeña cantidad de este para provocar la transformación de
toda la proteína normal, ya que se trata de un fenómeno de crecimiento exponencial.

Recientemente , se ha aceptado que los priones pueden ser transmitidos, posiblemente por
comida, inoculación directa en el cerebro, piel, músculo o estómago. Por esto la epidemia de
EEB, ocurrida en Gran Bretaña provoco un enorme interés en todo el mundo.
Desafortunadamente han aparecido en ese país una nueva variedad de la ECJ (casos en
personas mucho mas jóvenes que lo usual), lo que probaría una relación causal entre la EEB
y los casos seres humanos. El gobierno británico tuvo que admitir la posibilidad de que la
aparición de estos extraños casos de la ECJ hubieran sido provocados al ingerirse carne
vacuna infectada (tejido nervioso).

Al principio habíamos hablado de la dualidad de los priones, por un lado partículas

infecciosas y por el otro responsables de enfermedades hereditarias. Esto es naturalmente
confuso. Por ejemplo, ciertas enfermedades priónicas como la GSS, son hereditarias. Esta
enfermedad tiene una herencia autosomal y dominante, lo cual significa que si un padre
desarrolla la enfermedad , los hijos tienen un 50 por ciento de probabilidades de
desarrollarla. La explicación a estos hechos vino dado por el descubrimiento de mutaciones
génicas puntuales en la secuencia de nucleótidos del gen que codifica la PrP . Estos genes
mutados provocan cambios en la secuencia de aminoácidos de la proteína PrP. Estos cambios
podrían incrementar la probabilidad de la transformación de la proteína PrP mutante de una
forma normal a una anormal patógena. Diferentes mutaciones en el gen provocarían
diferentes proteínas mutantes, con mayor o menor tendencia a transformarse en la forma
aberrante patógena. Esto explica también las distintas enfermedades priónicas
hereditarias, la ECJ esporádica , un 15 por ciento de los casos hereditaria y la GSS
autosomal dominante.

Tabla 1.10- Principales Enfermedades causadas por Priones

Enfermedad Síntomas típicos Vía de Propagación Distribución
Kuru Pérdida de Infección, Nueva Guinea
coordinación, probablemente por
demencia canibalismo 2600 casos
ECJ Demencia, pérdida de De ordinario 1 persona por millón en
coordinación desconocida todo el mundo
(esporádica)
100 familias
En un 15 por ciento de identificadas (forma
los casos hereditaria, heredada)
por mutación del gen
que determina la Forma infecciosa 80
proteína PrP casos

Raramente por
infección (por ejemplo
por un transplante u
otro tratamiento
medico)
EGSS Pérdida de Herencia de una 50 familias
coordinación, mutación en gen de la identificadas
demencia PrP
IFF Trastornos del Sueño, Herencia en una 9 familias identificadas
insomnio demencia mutación del gen de la
PrP

TÉCNICAS DE ESTUDIO DE LA CELULA

UNA COMBINACIÓN DE MÉTODOS AYUDA AL ESTUDIO DE LA CÉLULA

El desarrollo de la biología celular y molecular se produce en forma paralela a la invención

de instrumentos y técnicas biofísicas y bioquímicas que extienden los sentidos a nuevos
límites y acrecientan el conocimiento de la estructura y funcionamiento de la célula. El
acceso a este tipo de conocimiento resulta dificultoso pues las células son pequeñas y
transparentes. El ojo humano sólo puede discriminar dos puntos separados por más de 0,1
mm ó 100 micrómetros (mm). La mayoría de las células son mucho más pequeñas y se
necesita del microscopio óptico cuyo límite de resolución es de 0,2 mm. Para estructuras
más pequeñas, que midan entre 0,4 y 200 nanómetros (nm), se requiere del microscopio
electrónico. Para mayores detalles, consulte la Tabla 1a.2

Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean corrientemente en

microscopia no son las de uso cotidiano. En la siguiente tabla se expresan aquellas unidades
y sus equivalencias:

Tabla 1.11-Medidas utilizadas en microscopia

Unidad Símbolo Equivalencia en metroUtilización principal en citología
(m)
Centímetro cm 0,01 metro Objetos macroscópicos a simple vista.
Huevos grandes.
Milímetro mm 0,001m Objetos macroscópicos a simple vista.
Células muy grandes.
Micrómetro mm 10-6 m Microscopia de luz (óptica)

Casi todas las células y organelos

grandes.
Nanómetro nm 10-9 m Microscopia electrónica.

Organelas pequeñas, macromoléculas

grandes.
Angstrom Å 10-10 m Microscopia electrónica. Métodos de
difracción de rayos X. Moléculas y
átomos.

Por lo tanto: 1m=102 cm=102 mm=103 mm=106 nm=109

Por otra parte, la mayoría de los componentes de la célula viva son transparentes debido a
su alto contenido de agua. Al disecarla no presenta un significativo contraste. Entonces la
tinción selectiva de ciertos componentes celulares resuelve el problema del contraste. Sin
embargo la mayoría de estas técnicas conduce a la muerte de la célula y aún más, a cambios
químicos y morfológicos que no se encuentran en las células activas y en la matriz
extracelular.

Cabe destacar que algunos pigmentos del citoplasma y de organoides vegetales pueden
absorber determinadas longitudes de onda (l) [1] y no necesitan de previo tratamiento para
su observación al microscopio óptico.
Para el estudio de la célula viva se emplean técnicas ópticas especiales como, por ejemplo,
la microscopia de contraste de fase o la de interferencia.

Fig. 1.16 – Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de organización a nivel

microscópico.

En el nivel macromolecular, la difracción de rayos X resulta ser la técnica más adecuada

para estudiar la configuración molecular de proteínas, de ácidos nucleicos y de algunos
entes prebióticos tales como los virus.

Los compuestos químicos que constituyen la célula pueden ser detectados, descriptos y
localizados dentro y fuera de la célula mediante métodos adaptados de la Química
Analítica.

Las técnicas aislamiento y separación específica de células, organelas y macromoléculas y el

preparado de cultivos celulares para el estudio detallado son herramientas invalorables
para el avance de la biología celular y molecular.

LOS MICROSCOPIOS PROVEEN VENTANAS PARA EL MUNDO DE LA CÉLULA

Fig. 1.17- Esquema de un Microscopio Óptico

El descubrimiento y estudio temprano progresó con la invención y mejora de los

microscopios en el siglo XVII. Los microscopios de varios tipos son aún herramientas
indispensables para el estudio de las células.

Los microscopios primeramente usados en el Renacimiento tanto como los que son utilizados
en los laboratorios hoy, son microscopios ópticos. La luz visible pasa a través de la
muestra y de las lentes de vidrio por donde la luz es refractada (“doblada”) de tal manera,
que la imagen del espécimen es amplificada cuando se proyecta en el ojo.

Dos valores importantes en microscopia son el aumento y el poder de resolución .

Entendemos por aumento a las dimensiones aparentes de los objetos comparados con su
tamaño real. El poder de resolución es la medida de la nitidez de la imagen; es la capacidad
del instrumento para brindar imágenes distintas de dos puntos cercanos.

El microscopio óptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2mm, la medida de una
pequeña bacteria. Esta resolución es limitada por la longitud de onda de la luz visible usada
para iluminar la muestra. Los microscopios ópticos o de luz pueden aumentar efectivamente
alrededor de 1000 a 1500 veces el tamaño de la muestra real; si se incrementase el
aumento la imagen proyectada sería borrosa. La mayoría de las mejoras en microscopia de
luz del comienzo de este siglo ha involucrado nuevos métodos para aumentar el contraste.
Sin estas técnicas sería imposible para el ojo humano el conocimiento del mundo celular.

La mayoría de las organelas son demasiado pequeñas para ser visualizadas por la
microscopia de luz. La Biología Celular avanzó rápidamente hace un poco más de cincuenta
años con la introducción del microscopio electrónico. En lugar de luz visible, el microscopio
electrónico utilizó un haz de electrones [2] a través de la muestra. El poder de resolución
está inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiación que un microscopio
usa y un haz de electrones tiene longitudes de onda mucho más cortas que la luz visible.
Para mayores precisiones al respecto, consulte el cuadro 1.4

Cuadro 1.4- Poder de resolución del Microscopio

En cualquier tipo de microscopio, el poder de resolución depende de la longitud de onda (l) y
de la apertura numérica (AN) del objetivo (la capacidad de colectar la luz). Así, el límite de
resolución, que es la distancia mínima que debe existir entre dos puntos para que puedan ser
discriminados como tales, y responde a la siguiente ecuación:

Límite de resolución=0,61 l /AN

A su vez,

AN = n . seno a

donde, n es el índice de refracción del medio que atraviesa el haz y a es el ángulo de

apertura

Nótese que el límite de resolución es inversamente proporcional al poder resolutivo del

instrumento, de modo tal que cuanto mayor sea éste, menor será el límite de resolución
conseguido.

Fig. 1.18- Comparación entre un Microscopio Óptico y Electrónico

La mayoría de los microscopios electrónicos modernos pueden lograr una resolución de 0,2
nm, unas 1000 veces mejor que la obtenida con el microscopio óptico.

Los biólogos usan el término ultraestructura celular para referirse a la anatomía celular
cuando se resuelve por un microscopio electrónico.

Hay dos tipos de microscopio electrónico: el microscopio electrónico de transmisión (MET)

y el microscopio electrónico de barrido (MEB):

• El MET permite develar la ultraestructura de las células y de la matriz extracelular. El

haz de electrones es desviado por un campo electromagnético (que actuaría como lente). En
este tipo de microscopia se requiere que las muestras tengan un grosor de 100 nm.

• El MEB es especialmente útil para estudios de superficie del espécimen. El haz de

electrones explora la superficie de la muestra la que usualmente se recubre con una
película de oro. El haz excita a los electrones sobre la superficie de la misma muestra y
estos electrones secundarios se recolectan y enfocan sobre una pantalla. Esto forma una
imagen de la topografía del espécimen. Un importante atributo del MEB es su gran
profundidad de campo, la cual resulta en una imagen tridimensional.

El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero el MO ofrece
muchas ventajas especialmente para el estudio de la célula viva. Una desventaja de ME es
que los métodos químicos y físicos usados para preparar la muestra, no sólo matan a las
células sino que puedan introducir artefactos, estructuras peculiares vistas en
micrografías que no existe en una célula viva.

La preparación de la muestra para el MO y el ME resulta similar si se trabaja con las

células muertas.

En la tabla 1.9 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de microscopia para la
preparación de la muestra:

Tabla 1.12 -Técnicas para Preparar una Muestra en Microscopia Óptica y Electrónica
Paso
OBTENCIÓN: Se hace
cuidadosamente con
instrumental adecuado.
FIJACIÓN: se destina a
impedir la autodegradación
enzimática (autólisis)de las
células tratando de evitar, en
lo posible, la alteración de las
estructuras originales y su
autodigestión.
Microscopia Óptica
Pueden usarse fijadores
químicos (formol, etanol,
metanol o mezclas fijadoras).
También se utilizan métodos
físicos como la desecación, el
calor seco, el frío o la
congelación.
Microscopia Electrónica
Se realiza con
paraformaldehido, con
tetróxido de osmio o,
últimamente, con
glutaraldehido, en soluciones
acuosas de pH neutro y
concentración salina semejante
al medio. Luego se lava la pieza
y se post-fija con tetróxido de
osmio durante una hora; el
osmio se une a estructuras
lipoproteicas (membranas
 celulares) ofreciendo mayor
contraste en la imagen. Esto se
conoce como coloración o
contrastado.
DESHIDRATACIÓN: retira elPasajes sucesivos por Baños con alcohol o acetona.
agua de las piezas fijadas,alcoholes de concentración
para que luego puedan sercreciente.
incluidas en un elemento que es
insolubles en solventes
acuosos.
ACLARACIÓN Se realiza para eliminar de la No requiere
muestra restos de alcohol y
toda sustancia hidrosoluble.
Se impregna la muestra con
un solvente no acuoso,
orgánico y soluble en
parafina, como xileno, tolueno
o benceno.
INCLUSIÓN Se incluye el material en Se utilizan resinas sintéticas
parafina o celoidina tipo epoxi que luego de secarse
previamente calentada, la que se transforman en un material
al solidificarse sirve de muy duro, apto para que se le
sostén de la muestra y efectúen cortes
posibilita su corte. Se forma extremadamente delgados.
el taco.
CORTE Es lo suficientemente delgado Debe obtenerse un corte de la
como para ser atravesado por muestra tal que el haz de
la luz. Esto se logra utilizando electrones logre atravesarla.
el micrótomo con el que se El ultramicrótomo realiza
realiza cortes uniformes del cortes de 20 a 100 nm de
tejido a un dado espesor. espesor con cuchillas de vidrio
o diamante.
REHIDRATACIÓN Se retira la parafina con xilol
y se lava con alcoholes de
concentración creciente. Al
ser los colorantes solubles en
agua resulta indispensable
rehidratar
COLORACIÓN Las células y los tejidos son
coloreados para lograr
mayores contrastes
facilitando la observación. La
coloración de hematoxilina-
eosina es una de las más
comúnmente utilizadas. Tiñe
el núcleo de azul y el
citoplasma de rosa.
MONTAJE El corte se monta sobre un Estas muestras se montan en
 portaobjetos. El pequeñas grillas de cobre
cubreobjetos puede colocarse
El corte se coloca sobrepor encima para proteger el
ciertas clases de estructuras. preparado. Este puede
conservarse durante décadas
si el cubreobjetos se sella.
CONTRASTADO La pieza se impregna en
acetato de uranilo, citrato de
plomo u otras sustancias.

Las diferencias más notables de los principales componentes del MO y del ME y sus
características singulares se especifican en la siguiente tabla.

Tabla 1.13 - Diferencias entre el MO y ME

MICROSCOPIO ÓPTICO CARACTERÍSTICA MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
De interferencia de rayos 1) IMAGEN DADA POR De dispersión de electrones
luminosos MECANISMO:
Simple con aire 2) TUBO Al vacío con gran diferencia de
potencial
Luz (fotones) 3) FUENTE Filamento de tungsteno
(electrones)
Lentes: Ocular, objetivo y 4) ELEMENTOS Bobinas electromagnéticas
condensador
Células vivas o muertas 5) ESTUDIAN Células muertas
Coloreadas o no 6) OBSERVACIÓN DE LA Distintas tonalidades de gris. En
IMAGEN la actualidad se ven imágenes
"sombreadas" electrónicamente.
0,25m 7) LIMITE DE RESOLUCIÓN 3 Å a 5 Å (teórico)

10 Å (en la práctica)
5.500 Å (término medio) 8) LONGITUD DE ONDA 0,056 Å
500 X a 1500 X 9) AUMENTO (el signo X 30.000 X a 1.000.000 X
significa aumento)
Carnoy u otros fijadores 10) FIJACIÓN Bicromato de potasio, tetróxido
de osmio, formaldehído.
Parafina o coloidina 11) INCLUSIÓN Acrílicos o resinas de epoxi.
Con el micrótomo. (cuchilla 12) CORTES Con ultramicrótomo. (cuchilla de
de acero). Cortes de 10m diamante o vidrio) Cortes de 100
a 500 Å.
De vidrio 13) PORTAOBJETO Placas de Colodion, aluminio o
berilio.
Nivel microscópico: 14) NIVEL DE OBSERVACIÓN Nivel submicroscópico:

ESTRUCTURA ULTRAESTRUCTURA

LAS CÉLULAS VIVAS PUEDEN SER OBSERVADAS A TRAVÉS DEL MICROSCOPIO

Se pueden utilizar ingeniosamente las propiedades ondulatorias de la luz aumentando el
contraste de las estructuras transparentes. Así surgieron varias clases de microscopios
ópticos convirtiéndose en herramientas destacadas en el estudio de la célula. Más aún, si se
considera la posibilidad de que algunos componentes de la célula puedan perderse o
distorsionarse durante la preparación de la muestra. En consecuencia, el examen de la
célula viva (sin fijación ni congelación) resulta útil.

Los microscopio de contraste de fase y de interferencia son sistemas ópticos especiales

que logran intensificar la escasa interferencia [3] y proporcionan mayor contraste que el
obtenido con un MO común.

En el microscopio de campo oscuro, el haz luminoso se proyecta oblicuamente y los sistemas

de lentes detectan la luz reflejada por la muestra que se ve como un objeto brillante
contra un fondo oscuro, lográndose un gran relieve de rasgos de la célula que son invisibles
en el MO.

El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a nivel molecular
de las células y los tejidos no sólo en las células vivas sino en preparados post-mortem.
Ciertos componentes celulares y tisulares se comportan peculiarmente cuando la luz
polarizada (luz que gira únicamente en un plano) los atraviesa.

LAS ORGANELAS PUEDEN AISLARSE PARA ESTUDIARLAS MÁS PROFUNDAMENTE

La descripción de las diversas organelas dentro de la célula revela poco acerca de su

función. La Biología Celular actual desarrolla la integración de la Citología con la Bioquímica,
es decir el estudio de la estructura celular junto con el análisis de los procesos químicos de
la vida (metabolismo). El fraccionamiento celular ha sido particularmente importante en
esta ciencia.

El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las células separando las organelas
principales de modo que, sus funciones individuales puedan ser estudiadas. El instrumento
usado para fraccionar las células es la centrífuga capaz de girar a diversas velocidades. La
más poderosa, llamada ultracentrífuga puede dar vueltas tan rápidamente como 80000
revoluciones por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partículas de 500000 veces
mayores que la fuerza de la gravedad (500000g).
Fig. 1.19- Esquema del Proceso de Fraccionamiento Celular

El fraccionamiento celular comienza con la homogeneización, o sea la ruptura de la célula. El

objetivo es romper las células sin dañar severamente sus organelas. El homogenato se
centrifuga lográndose la separación de las partes de la célula en dos fracciones: el pellet
que consiste en las estructuras más grandes depositadas en el fondo del tubo y el
sobrenadante constituido de partes más pequeñas suspendidas en el líquido por encima del
pellet. El sobrenadante es transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez. El proceso es
repetido incrementando la velocidad en cada paso. De esta manera se consigue recolectar
componentes más pequeños de los sucesivos pellets.

Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.

El fraccionamiento celular permite preparar los componentes específicos de la célula tanto

cualitativa como cuantitativamente.

LAS POBLACIONES CELULARES PUEDEN SER SEPARADAS POR EL CITÓMETRO DE

FLUJO

Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a las células una
tras otra. Un determinado tipo celular emitirá fluorescencia, previo tratamiento con
fluorocromo (pigmento fluorescente). Esto permite la discriminación y, por lo tanto, la
separación de las células así tratadas de acuerdo a la fluorescencia que emitan.
LAS CÉLULAS VIVAS PUEDEN SER ESTUDIADAS MEDIANTE EL CULTIVO CELULAR

Con el objetivo de preservar toda la información que sea posible sobre todos los tipos
celulares, se han desarrollado técnicas de disociación de las células.

En los primeros tiempos, la técnica consistía en colocar un explante de un pequeño trozo de

tejido en un medio compuesto por suero sanguíneo, extracto de embriones y solución salina.
Hoy se conocen los requerimientos nutricios de las células eucariontes. Se las mantienen y
hacen crecer en un medio sintético enriquecido de suero. Se distinguen tres tipos de
cultivos:

• Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido se separa en

condiciones asépticas y se corta en pequeños trozos y se los trata con tripsina (enzima
proteolítica) que disocia los agregados celulares y genera una suspensión de células libres
que se cultivan en un medio apropiado.

• Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con tripsina de un cultivo

primario, seguido de un nuevo cultivo en una caja de Petri.

• Cultivos de líneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga debido a las condiciones

cancerosas de las células. Entre las más usadas se encuentran las células HeLa. A pesar de
tales anomalías son muy útiles para el estudio del cáncer.

LAS MOLÉCULAS ORGÁNICAS SON ESTUDIADAS DENTRO Y FUERA DE LA

CÉLULA

A nivel molecular, los organismos están formados por relativamente pocos tipos de
compuestos. El agua constituye alrededor del 70% de la mayoría de los seres vivos. De los
demás compuestos, los principales son los glúcidos, los lípidos, las proteínas y los
nucleótidos, muchos de ellos combinados para formar los ácidos nucleicos, ácido
ribonucleicos (ARN) y ácido desoxirribonucleico(ADN). Aunque hay muchos otros
compuestos presentes, estas cuatro categorías constituyen la mayoría de las moléculas
orgánicas de los seres vivos y son los actores de los procesos metabólicos. Por lo tanto, su
localización y función dentro de la célula como un estudio más detallado fuera de ella se
hace necesario.

Algunos ejemplos de técnicas para el estudio, la ubicación y la cuantificación de moléculas

orgánicas se mencionan a continuación:

RECONSTRUCCIÓN DE IMÁGENES A PARTIR DE ELECTROMICROGRAFÍAS

Las microfotografías electrónicas poco claras de cristales de moléculas o estructuras

supramoleculares se colocan en la trayectoria de un haz de rayos láser para obtener un
diagrama de difracción óptica. Este diagrama es procesado por un programa de
computación consiguiendo la reconstrucción de las moléculas individuales en las fases y
amplitudes correspondientes a un área de la microfotografía.

DIFRACCIÓN DE RAYOS X
Este método consiste en el bombardeo de la molécula por un delgado haz de rayos X y
provoca la dispersión (difracción) de la radiación a través de los electrones de los átomos
de la muestra. Este haz disperso debe alcanzar una placa fotográfica. La estructura
molecular tridimensional se deduce de las posiciones y las intensidades de las manchas
registradas en la placa fotográfica.

LOS MÉTODOS CITOQUÍMICOS

Los compuestos químicos se identifican "in situ" por medio de métodos citoquímicos.

Este objetivo es cualitativo y cuantitativo y muchas veces persigue el estudio de los

cambios dinámicos producidos en el contenido químico celular en las distintas etapas del
metabolismo.

Para ello, el compuesto químico debe ser:

a) inmovilizado en posición original e,

b) identificado por un procedimiento específico para el compuesto o para un grupo químico

característico que posea.

Los métodos físicos y reacciones químicas similares a las implementadas en Química

Analítica pero adaptadas a tejidos se usan para llevar a cabo este tipo de identificación.

LAS DIVERSAS MOLÉCULAS DE LA CÉLULA PUEDEN LOCALIZARSE POR LAS

TÉCNICAS INMUNOHISTOQUÍMICAS

Cuando los vertebrados superiores, los animales e incluso el hombre, son expuestos a la
actividad de los microorganismos o a moléculas ajenas a sus ultraestructuras, ya sea
naturalmente o por inyección, aquellos sintetizan anticuerpos. Estos son proteínas que
pueden fijarse selectivamente a los materiales extraños que desencadenaron su síntesis.
Por lo tanto, el organismo produce tantos anticuerpos como partículas extrañas (antígenos)
son reconocidas. Así, se puede obtener una gran variedad de anticuerpos.

Los anticuerpos son herramientas experimentales muy versátiles para reconocer y

manipular células y moléculas. Si un animal de una especie determinada es inyectado con un
componente celular o molecular de otra especie, el primero logra fabricar anticuerpos
capaces de reconocer y fijar fuertemente aquel componente (el del segundo animal). A
estos anticuerpos se acoplan colorantes fluorescentes que son visibles al MO. De modo
similar, con el M.E. se pueden detectar moléculas trazadoras acopladas en anticuerpos. De
esta manera, los componentes celulares y moleculares quedan “teñidos” en forma
diferencial por los anticuerpos que se fijan a ellos.

Como todavía no se han presentado los aspectos fundamentales de las moléculas orgánicas,
otros métodos fisicoquímicos de más fina determinación, purificación y cuantificación de
las biomoléculas se mencionarán en las próximas unidades. Como se verá, dichas técnicas
son de uso corriente en el diagnóstico médico rutinario.

CUESTIONARIO DE AUTOEVALUCIÓN
1. ¿Cuál de los siguientes organoides no forman parte del Sistema de Endomembranas?:

a. envoltura nuclear

b. cloroplasto

c. aparato de Golgi

d. retículo endoplasmático

2. Un determinado veneno destruye el citoesqueleto. ¿Cuál de las siguientes funciones

sería afectada directamente?:

a. la división celular

b. la respiración celular

c. la fotosíntesis

d. la síntesis de proteínas

3. ¿Cuál de las siguientes organelas está presente en la célula animal y vegetal?:

a. cloroplasto

b. pared celular

c. mitocondria

d. centríolos.

4. ¿Qué organela está presente en una célula procarionte?:

a. mitocondria

b. ribosoma

c. cloroplasto

d. retículo endoplasmático

5. ¿En qué parte de la mitocondria aparecen las crestas?

6. ¿Qué organela carece de membrana?

7. ¿En qué parte de la bacteria se realiza la respiración?

8. Si Ud. tuviera que argumentar acerca de que los virus son organismos vivos, ¿qué
características estructurales y funcionales del virus podría utilizar para apoyar su
argumentación?
9. ¿Qué tipo de células pensaría Ud. que alcanzarían el mayor tamaño: una célula muy
aplanada o una esférica? ¿Por qué?

10. ¿Por qué casi todas las células casi siempre son microscópicas?

11. ¿Cuáles son las propiedades fundamentales que comparten todas las células? Describa
la importancia de cada una de ellas.

12. Compare en un cuadro las diferencias estructurales, funcionales y metabólicas entre

las células procariontes y eucariontes.

13. ¿Qué propiedades distinguen a un virus de una bacteria?

14. Enumere los pasos de la infección viral, y describa brevemente cada paso.

15. Utilizando el Sistema Métrico Decimal resuelva las equivalencias en metros de: a) 1 nm;
b) 1 mm.

16. Indique el poder de resolución del: a) M.O.; b)M.E.T.; c)M.E.B.

17. ¿Cuántas veces son mayores los aumentos del M.E. en relación a los del M.O.?

18. ¿A qué es igual el poder de resolución?:

a. AN / 0.61 x l

b. 0.61 x l / AN

c. 0.61 / AN x l

d. 0.61 x AN /l.

19. ¿Qué compuesto se usa como fijador en microscopia electrónica? ¿Y en microscopia

óptica?

20. Explique qué técnicas utilizaría para crear suficiente contraste cuando se usa el M.O. y
el M.E.

21. ¿Qué tipo de microscopios se usan para la observación de la células vivas?

22. ¿Cuáles son las ventajas de estudiar las células con el M.E.T. y el M.E.B.?

23. ¿Cuándo utilizaría la microscopia de contraste de fase? ¿Por qué?

24. ¿Para qué se utiliza la técnica de fraccionamiento celular? ¿Qué se obtiene en cada
paso?

25. ¿Qué es un anticuerpo? ¿Por qué es una herramienta útil en la investigación biológica?

26. ¿Para qué se utiliza la difracción de rayos X?

27. Cuando una célula de forma esférica crece, los mm2 de superficie de la membrana
plasmática por mm3 del volumen celular:

a. decrece

b. aumenta

c. se mantiene constante

d. se vuelve más delgada

28. El microscopio de interferencia es:

a. una variante del M.O.

b. una variante del M.E.

c. útil cuando se colorea la muestra

d. utilizado para visualizar átomos

29. La ultracentrífuga se emplea en:

a. citometría de flujo

b. b) microscopia electrónica

c. fraccionamiento celular

d. difracción de rayos

30. Las muestras de células vivas o preparados fijados se pueden estudiar indistintamente
con:

a. microscopia electrónica

b. microscopia de interferencia

c. microscopia de luz polarizada

d. difracción de rayos X.

BIBLIOGRAFÍA

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 Solomon y col. (1998) . Biología de Villee. 4ª. Ed. Mex. McGraw-Hill. Interamericana

[1] La longitud de onda (l) es la distancia entre dos puntos consecutivos que vibran en fase.
Siempre que dos puntos estén separados por una distancia igual a la que recorre la onda en
un período, o a un múltiplo de ella, los dos puntos vibrarán en fase.

[2] Los electrones pueden considerarse como una variedad de radiación de pequeña longitud
de onda.

[3] Interferencia: Es un fenómeno físico producido entre ondas cuyos "picos" y "valles" no
coinciden, es decir no están en fase.