L1-ML-001 Manual de Laboratorio de Analisis Clinicos

Universidad Autnoma de Baja California
Facultad de Medicina y Psicologa

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ML Manual de Laboratorio de Anlisis Clnicos

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GC-FR-012 Rev. 3

Manual de Laboratorio de Anlisis Clnicos

Clave de la materia 12764

Plan de estudios 2010-1

Laboratorio 1

Autor o autores: QFB. Anglica Zelene Valerio Naranjo
QFB. Xavier Villarino Valdivia

Elabor Revis Autoriz
QFB. Xavier Villarino Valdivia
QFB. Anglica Zelene Valerio
MC Christian Rodrguez Arroyo Dr. Alfredo Renn Gonzlez Ramrez


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NDICE

Sesin Nombre de la sesin Pagina
1 Encuadre / Clasificacin y Separacin de RPBI generados en el
Laboratorio y bioseguridad en la prctica mdica.
4
2 Control de calidad / Toma de muestras 13
3 Citologa hemtica (frmula blanca) 15
4 Citologa hemtica (frmula roja) 17
5 Recuento de plaquetas y Pruebas de coagulacin 19
6 Tipo sanguneo y Pruebas cruzadas 21
7 Prueba de embarazo y VIH 23
8 Examen general de orina 25
9 Espermograma 27
10 Qumica sangunea 29
11 Enzimologa clnica 31
12 Electrolitos sricos 33
13 Evaluacin prosttica 35
14 Frmacos de abuso 37
15 Toxicologa Industrial 39


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PROLOGO
La informacin para la orientacin de un estudio en la fase pre-examen, la toma de muestra, el proceso, as mismo el control
de calidad interno y el conocimiento del control de calidad externo, finalizando con la fase pos-examen, conociendo los
intervalos de referencia y los mtodos en los que se procesan los estudios solicitados para el apoyo de un estudio mdico.
El desarrollo de este manual lleva al estudiante a desarrollar destrezas en el laboratorio de anlisis clnicos, relacionando los
conocimientos de otras materias anteriormente cursadas dando aplicacin a estos en clnica.

I. INTRODUCCIN
Es de suma importancia que el alumno conozca de manera general los procesos y la normatividad que aplica en el laboratorio
clnico.
El alumno de medicina debe de conocer la toma de muestra de los diferentes especmenes, desarrollar destreza en la toma de
muestra sangunea con sistemas que aseguren la calidad de la muestra, conocer los intervalos de referencia los procesos de
reaccin Antgeno-Anticuerpo en las pruebas de laboratorio clnico, la interpretacin de los estudios de los diferentes lquidos
corporales, as como el apoyo que brinda el laboratorio en la toxicologa

II. COMPETENCIA GENERAL DE LA ASIGNATURA

Identificar los procesos fisiolgicos, empleando los fundamentos bioqumicos y tcnicas de laboratorio para la interpretacin
clnica de trastornos de la salud, con una actitud de cooperacin, compromiso y respeto.

III. REGLAMENTO DE LABORATORIO

Para el logro de las competencias del Laboratorio de Anlisis Clnicos, es necesario que el usuario respete el reglamento general
de los laboratorios que puede consultar en la pgina electrnica de la Facultad adems es necesario que deba:


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IV. PROGRAMACION DE PRCTICAS

1. Sesin No. 1: Encuadre, Clasificacin y Separacin de Residuos Peligrosos Biolgico-
Infecciosos (RPBI) generados en el Laboratorio y bioseguridad en la prctica mdica.

2. Competencia a desarrollar en la sesin.

Manejar los RPBI, identificndolos, separndolos, disponindolos en los recipientes adecuados y anotando en la bitcora
correspondiente, para mantener el sitio de trabajo como est consignado en la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 y la gua
de cumplimiento de la NOM y evitar la contaminacin y los accidentes, con responsabilidad, disciplina y honradez.

3. Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo.

a) Que el alumno identifique y disponga los residuos peligrosos biolgico-infecciosos (RPBI) en la estacin de destreza y
evaluacin de RPBI con una eficiencia del 100%.
b) Calidad de las notas de su cuaderno de prcticas.
c) Calidad del reporte.

4. Fundamento terico e informacin de apoyo.
En la realizacin de las prcticas del Laboratorio de Anlisis Clnicos, se generan RPBI por lo que es importante conocer y
aplicar las Normas Oficiales Mexicanas en especial la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 y la gua de cumplimiento de la
Norma Oficial Mexicana. Los generadores de RPBI son los lugares pblicos, sociales o privados, fijos o mviles cualquiera
que sea su denominacin, que estn relacionados con servicios de salud y que presten servicios de atencin mdica ya
sea ambulatoria o para internamiento de seres humanos y utilizacin de animales de bioterio o zooterio. En las reas de
generacin de los establecimientos generadores, se debern separar y envasar todos los residuos peligrosos biolgico-
infecciosos, de acuerdo con sus caractersticas fsicas y biolgicas infecciosas, conforme a la Norma Oficial Mexicana.
Durante el envasado, los residuos peligrosos biolgico-infecciosos no debern mezclarse con ningn otro tipo de residuos
municipales o peligrosos. Los generadores y prestadores de servicios, adems de cumplir con las disposiciones legales
aplicables deben: cumplir con las disposiciones correspondientes a las siguientes fases de manejo, segn el caso:
a) Identificacin de los residuos.
b) Envasado de los residuos generados.
c) Almacenamiento temporal.
d) Recoleccin y transporte externo.
e) Tratamiento.
f) Disposicin final.


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El laboratorio debe contar con sealamientos y letreros alusivos a la peligrosidad de los mismos, en lugares y formas
visibles, el acceso a esta rea slo se permitir al personal responsable de estas actividades. Algo importante para
considerar es minimizar la generacin de RPBI identificando y segregando los materiales que NO los contengan, por
ejemplo: papel de envoltura de gasa estril, envoltura de la jeringa, protector de las agujas, etc. En el desarrollo de las
actividades se deber separar adecuadamente los materiales que son reciclables, depositndolos en los recipientes
destinados para su posterior tratamiento y recuperacin (Ejemplo: tubos de ensayo, matraces, etc.). En el manejo de
RPBI se debern utilizar los implementos de proteccin personal para su manejo e identificar los sitios designados en el
laboratorio para depositarlos.
En esta prctica se envasaran los residuos biolgicos peligrosos basndonos en la clasificacin de estos, por sus
caractersticas como lo menciona la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 segn corresponda al tipo de contenedor y color.
Los RPBI que se genera en el desarrollo de una prctica en el laboratorio de Anlisis Clnicos (Microbiologa, Parasitologa,
Biologa Celular, Patologa, Histologa) pueden ser los siguientes: En el desarrollo de la prctica se generan tubos con
sangre, jeringas, algodones, como se realiza el envasado de los residuos segn la clasificacin.

Los tubos con las muestras de sangre en recipientes hermticos Rojo, si los tubos son de plstico se pueden envasar en
una bolsa Roja y depositar en el rea de almacn temporal dentro del laboratorio para que posteriormente pase al rea
de almacn temporal general de la Facultad.

Cultivos y cepas que se generan en diferentes prcticas se envasaran en bolsa de plstico roja, cumpliendo las
especificaciones que marca la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002.

Patolgicos en este laboratorio se pueden generar lquidos patolgicos, los que se envasaran en recipientes rgidos
amarillos y cuando fuesen slidos patolgicos se envasaran en bolsa amarilla, para depositarlo en el almacn temporal
del laboratorio.

Los punzocortantes se envasan en contenedor rgido rojo como los portaobjetos, cubreobjetos, agujas, lancetas, estos se
depositan en el rea de almacn temporal del laboratorio. En caso de tener algn incidente respecto a los RPBI se debe
de seguir el manual de contingencia donde se cuenta con las instrucciones dependiendo del incidente que se trate y se
soluciona con el material para esta contingencia que se encuentra en el laboratorio.

Residuos no anatmicos se generan guantes gasas, abate lenguas, cubre bocas, etc., los cuales se envasan en bolsa roja
en la rea de almacn temporal del laboratorio.

TABLA No. 1: ENVASADO DE RPBI

Denominacin Estado fsico Envasado Descripcin

Sangre
Lquido

La sangre y sus componentes, slo en su forma lquida,
as como sus derivados no comerciales, incluyendo las
clulas progenitoras, hematopoyticas y las fracciones
celulares o acelulares de la sangre resultante
(hemoderivados),
Suero y plasma tubo de vidrio.


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Envase Rojo Hermtico
Sangre

Slido y
lquidos en
recipientes con
tapa
Bolsa roja
Cogulo, suero y plasma en tubo de plstico con
tapadera.
Cultivos y cepas
de agentes
infecciosos

Slido

Bolsa roja
Cultivos en caja y placas de Microescan
Slido
Recipiente hermtico
Cultivos en Tubos de vidrio
Slidos

Bolsa roja
Guantes contaminados, medios de transporte, asas de
plstico.
Lquido
Recipiente hermtico
Colorantes y lquido de enjuague de tinciones.

Patolgicos

Slido/lquido

Bolsa Amarilla / Envase
amarillo
Biopsias, rganos, animales, tejidos.


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El rea temporal de depsito se encuentra previamente sealada en el Laboratorio con el smbolo universal que lo identifica,
todos los recipientes que contienen RPBI deben ser colocados en estos sitios.

Ejemplos de reas temporales (RPBI) previamente sealadas en el laboratorio

Residuos no
anatmicos

Slido
Bolsa Roja

Gasas, hisopos, papel, guantes, algodn que se
encuentre empapado de sangre u otro contaminante,
Tiras reactivas, asas de plstico, placas de reaccin,
cubetas de plstico para el espectro, jeringas, pipetas
transfer de plstico, abate lenguas

Residuos
punzocortantes

Slido

Envase rojo hermtico para
punzocortantes

Lancetas, agujas, agujas de bolsa de sangra, capilares
de hematocrito, aplicadores, tubos rotos, portaobjetos y
cubreobjetos, puntillas, jeringas de insulina.


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De acuerdo a la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 el personal responsable del manejo de los RPBI (sangre, cultivos y
cepas de agentes infecciosos, patolgicos, residuos no anatmicos y objetos punzocortantes), realiza otras actividades
como es: recoleccin y transporte al almacn general (por el personal de mantenimiento), almacenamiento y entrega a la
empresa tratadora elaboracin de registros, bitcoras, reportes, capacitacin, monitoreo, disposicin y tratamiento
interno y externo.

Cules son las recomendaciones para llevar a cabo la recoleccin y el transporte
interno de los RPBI?

1.- Recoleccin y Transporte Interno: Consiste en la recoleccin y el traslado de los desechos desde los sitios de
generacin hasta el almacenamiento temporal y final.

Cules son los requisitos para el almacenamiento temporal?

Una vez realizada la recoleccin interna por el personal encargado, se debern transportar los residuos al rea especfica
denominada almacn temporal, (menos los generadores de RPBI clasificados en el nivel I de acuerdo con la NOM-087-
SEMARNAT-SSA1-2002). Esta rea sirve para el acopio y almacenamiento de los residuos, mismos que sern almacenados
dentro de los carros de recoleccin y debern estar rotulados con el smbolo universal de riesgo biolgico, con la leyenda
RESIDUOS PELIGROSOS BIOLGICO-INFECCIOSOS.


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Cul es el periodo de almacenamiento temporal mximo de acuerdo al nivel del
establecimiento generador?

Existen tres niveles de generacin de residuos segn la Norma Oficial Mexicana NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 y los
periodos de almacenamiento temporal estn sujetos al nivel de generacin de los R.P.B.I. como se muestra a
continuacin.

TABLA No. 2: NIVELES DE GENERACIN DE RESIDUOS

NIVEL I NIVEL II NIVEL III
Unidades hospitalarias de 1 a 5 camas e
instituciones de investigacin con
excepcin de los sealados en el Nivel III.
Laboratorios clnicos y bancos de sangre
que realicen anlisis de 1 a 50 muestras al
da.
Unidades hospitalarias psiquitricas.
Centros de toma de muestras para
anlisis clnicos.
Unidades hospitalarias de 6 hasta 60
camas;
Laboratorios clnicos y bancos de
sangre que realicen anlisis de 51 a
200 muestras al da;
Bioterios que se dediquen a la
investigacin con agentes biolgico-
infecciosos, o
Establecimientos que generen de 25
a 100 kilogramos al mes de RPBI.
Unidades hospitalarias de ms de
60 camas;
Centros de produccin e
investigacin experimental en
enfermedades infecciosas;
Laboratorios clnicos y bancos de
sangre que realicen anlisis a ms
de 200 muestras al da, o
Establecimientos que generen
ms de 100 kilogramos al mes de
RPBI.


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Qu se debe hacer para realizar la recoleccin y transporte externo de los RPBI?

La recoleccin y el transporte externo de los RPBI, deber realizarse conforme a lo dispuesto en los ordenamientos
jurdicos aplicables y adems cumplir con lo siguiente:

1. Slo podrn recolectarse los residuos que cumplan con el envasado, embalado y etiquetado o rotulado como se
establece en la Norma.

2. Los residuos peligrosos biolgico-infecciosos no debern ser compactados durante su recoleccin y transporte.

3. Los contenedores deben ser desinfectados y lavados despus de cada ciclo de recoleccin.

4. Los vehculos recolectores deben ser de caja cerrada y hermtica, contar con sistemas de captacin de escurrimientos,
y debern contar con sistemas de refrigeracin para mantener los residuos a una temperatura mxima de 4 C.

5. Adems los vehculos con capacidad de carga til de 1,000 kg o ms debern operar con sistemas mecanizados de
carga y descarga.

6. Durante su transporte, los RPBI sin tratamiento no debern mezclarse con ningn otro tipo de residuos.

En qu consiste el tratamiento de RPBI?

Los RPBI sern tratados por mtodos fsicos o qumicos que garanticen la eliminacin de microorganismos patgenos y
deben hacerse irreconocibles para su disposicin final en los sitios autorizados.

Cuando un objeto tiene agentes biolgico-infecciosos se dice que es un objeto sptico. Cuando una cosa est libre de
estos agentes se dice que es un material asptico, es decir, que hay asepsia. Cuando se aplican medidas para eliminar a
estos agentes se dice que se aplica antisepsia. Estas medidas pueden ir desde el aseo o limpieza, la higiene, la
desinfeccin, o la esterilizacin.

Los mtodos de tratamiento que apliquen tanto a establecimientos generadores como a prestadores de servicio dentro o
fuera de la instalacin del generador, requieren autorizacin previa de la SEMARNAT, sin perjuicio de lo establecido por la
Secretara de Salud de conformidad a las disposiciones aplicables a la materia.

Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines
teraputicos.

Norma Oficial Mexicana NOM-010-SSA2-1993, Para la prevencin y control de la infeccin por Virus de la
Inmunodeficiencia Humana.


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Norma Oficial Mexicana NOM-013-SSA2-1994, Para la prevencin y control de las enfermedades bucales.

Norma Oficial Mexicana NOM-036-SSA2-2002, Prevencin y control de enfermedades. Aplicacin de vacunas, toxoides,
sueros, antitoxinas e inmunoglobulinas en el humano.

5. Equipo, Instrumental, Material e insumos.

a) Recipientes y bolsas especiales para depsito de RPBI
b) Jeringas, tubos, gasas, asas de inoculacin, caja petri y todo el material que potencialmente pueda generarse en los
diferentes laboratorios.

6. Metodologa de la sesin.

a) Identifique y separe los materiales de acuerdo a la tabla 1.

b) Identifique y los diferentes niveles de generacin de residuos segn la Norma Oficial Mexicana NOM-087-SEMARNAT-
SSA1-2002 y los periodos de almacenamiento temporal en la Facultad de Medicina y Psicologa de la UABC

C) Identifique el rea de depsito de los RPBI en el Laboratorio y construir una estacin para evaluacin la destreza del
alumno, clasificando el conjunto de materiales generados en el laboratorio con los recipientes y bolsas para su adecuado
almacenamiento.

7. Bibliografa.

a) Exposure to Blood, What Healthcare Personnel Need to Know. Disease Control and Prevention National Center for
Infectious Diseases Divison of Healthcare Quality Promotion and Division of Viral Hepatitis. Junio del 2003.
http://www.cdc.gov/ncidod/dhqp/pdf/bbp/Exp_to_Blood.pdf

b) NORMA Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Proteccin ambiental Salud ambiental - Residuos peligrosos
biolgico-infecciosos - Clasificacin y especificaciones de manejo. Secretara de Medio Ambiente y Recursos
Naturales [en lnea]. [Fecha de acceso 20 de enero de 2003].
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html

c) La gua de cumplimiento de la Norma Oficial Mexicana NOM-087. Colaboracin entre la Secretara de Medio
Ambiente y Recursos Naturales, la Procuradura Federal de Proteccin al Ambiente, la Secretara de Salud, y la
Comisin Federal para la Proteccin contra Riesgos Sanitarios. [Fecha de acceso martes 14 de abril del 2009].
http://www.cofepris.gob.mx/work/sites/cfp/resources/LocalContent/1909/5/GuiaNOM087.pdf


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d) Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines
teraputicos. Secretara de Salud. [Fecha de acceso 18 de julio de 1994].
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/003ssa23.html

e) Norma Oficial Mexicana NOM-010-SSA2-1993, Para la prevencin y control de la infeccin por Virus de la
Inmunodeficiencia Humana. Secretara de Salud. [Fecha de acceso 18 de julio de 1994].
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/010ssa23.html

f) Norma Oficial Mexicana NOM-013-SSA2-1994, Para la prevencin y control de las enfermedades bucales. Secretara
de Salud. [Fecha de acceso 11 de enero de 1999]. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/m013ssa24.html

g) NORMA Oficial Mexicana NOM-036-SSA2-2002, Prevencin y control de enfermedades. Aplicacin de vacunas,
toxoides, sueros, antitoxinas e inmunoglobulinas en el humano. Secretara de Salud. [Fecha de acceso 17 de julio de
2003]. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/036ssa202.html


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1. Sesin No. 2: Control de calidad / Toma de muestras

2. Competencia a desarrollar en la sesin
Destreza en la tcnica para toma de muestras sanguneas, por puncin venosa y as elegir el tubo idneo para la
recoleccin de la muestra el sistema de tubos al vaco y su cdigo de colores, considerando la importancia de la fase
pre examen para obtener resultados de calidad.

Cada alumno:

A fin de esquematizar el cdigo de colores de los tapones de los tubos al vaco, har una tabla con los siguientes
encabezados:
Color Aditivo Uso

Presentar por escrito algunas consideraciones sobre la Norma Oficial Mexicana estudiada en esta sesin.


TOMA DE MUESTRAS
La sangre para anlisis puede ser obtenida de venas, arterias o capilares. La muestra que se utiliza con mayor
frecuencia es la obtenida por puncin venosa. En nios pequeos frecuentemente se utiliza la puncin en la piel para
obtener sangre capilar. La puncin arterial se utiliza principalmente para obtener muestra para anlisis de gases en
sangre. Actualmente es ms utilizado el sistema de tubos evacuados (es decir, al vaco), aunque tambin se puede
utilizar una aguja y jeringa. Es responsabilidad de mdicos y personal de laboratorio tener la habilidad, conocimientos
y paciencia para realizar la puncin venosa con el mnimo de molestias al paciente.

a) Solucin de alcohol al 70 %(solucin desinfectante).
b) Torundas de algodn
c) Torniquete
d) Sistema de tubos al vaco con agujas y sujetador y/o jeringas con agujas.
e) Recipientes y bolsas especiales para depsito de R.P.B.I.
f) Jeringas, tubos...


Tcnica de puncin venosa:
1. Posicionar al paciente apropiadamente para tener un acceso fcil y cmodo a la fosa ante cubital.


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2. Preparar el equipo a utilizar: tubos de recoleccin, torniquete, jeringas, agujas, material para la asepsia, etc.
3. Pedir al paciente que cierre su puo para hacer sus venas ms palpables.
4. Seleccionar una vena apropiada para la puncin. Las venas de la fosa ante cubital, en particular la mediana
cubital y la ceflica son las preferidas. En caso necesario se pueden utilizar las venas de la mueca, tobillos y manos.
Si un brazo tiene una lnea intravenosa, utilizar el otro brazo para la recoleccin de la muestra.
5. Esterilizar el sitio de la puncin con una torunda impregnada en solucin alcohlica desinfectante, iniciando
en el sitio de la puncin y siguiendo hacia afuera en movimiento circular. Permita que seque el rea. No toque esta
rea con ningn objeto no estril.
6. Colocar el torniquete arriba de la zona de puncin, nunca dejndolo por ms de un minuto.
7. Fijar bien la vena tanto abajo como arriba de la zona de puncin, utilizando su pulgar y el ndice o el dedo
medio.
8. Realice la puncin, penetrando la piel a un ngulo aproximado de 15, con el bisel de la aguja hacia arriba,
procurando minimizar la incomodidad al paciente. Jale el mbolo de la jeringa suavemente o llene los tubos al vaco
en este momento.
9. Libere el torniquete tan pronto como la sangre empiece a fluir.
10. Despus de haber tomado la muestra, pedir al paciente que abra su puo. No permita que el paciente abra y
cierre repetidamente el puo.
11. Coloque una torunda de algodn estril ligeramente sobre el sitio, retire la aguja y aplique presin
12. Coloque una banda adherible al sitio o sobre el algodn.
13. Mezcle los tubos con anticoagulante.
14. Descarte el material contaminado de forma apropiada.
15. Asegrese que el paciente se encuentre en buenas condiciones y que no est sangrando antes de permitirle
que se retire.

Adems
a) Identifique y separe los materiales de acuerdo a la tabla 1.
b) Identifique y envase los materiales en los recipientes adecuados de acuerdo a la tabla 2.
c) Identifique el rea de depsito de los R.P.B.I. en el Laboratorio.

7. Bibliografa.

a) Edward R. Ashwood y Carl A. Burtis: Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5a. Edicin, EUA, W.B. Saunders
Company. 2000.
b) National Committee for Clinical Laboratory Standards: Standard for evacuated tubes for blood specimen collection,
NCCLS Standard ASH-1, 2a. Edicin, EUA, 1980.
c) http://www.cdc.gov/ncidod/dhqp/pdf/bbp/Exp_to_Blood.pdf
d) http://msds.ehs.cornell.edu/msdssrch.asp


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1. Sesin No. 3: Citologa hemtica: Frmula blanca.

Interpretar y formular juicios de los parmetros en un recuento de leucocitos en resultados en intervalos normales
as como en los intervalos fuera de referencia que en un futuro lee servir para dar seguimiento o interpretacin de
un estado de salud de un paciente.

a) Reporte por equipo con los resultados obtenidos
b) Discusin del desarrollo de la prctica y de los resultados obtenidos.
c) Cuestionario (entrega individual):
1) Dibujar el rayado de Neubauer a escala sealando claramente todas sus medidas.
2) Explique cmo calcul su resultado de leucocitos totales.
3) Haga un dibujo de neutrfilo segmentado, neutrfilo en banda, linfocito, monocito, eosinfilo y basfilo.
4) Enumere algunas causas clnicas que pudieran explicar resultados fuera del rango de referencia en cada una
de las determinaciones efectuadas (es decir: leucopenia/leucocitosis, neutropenia/neutrofilia, bandemia, etc.)
5) Preguntas adicionales efectuadas cada semestre por su profesor.

La biometra hemtica la podemos dividir en el estudio de los glbulos blancos (frmula blanca) y el estudio de los
eritrocitos (frmula roja). La frmula blanca incluye el recuento total y diferencial de los leucocitos; es de gran
utilidad en el diagnstico de muchas enfermedades, y se utiliza como indicador del progreso del paciente en
infecciones.
Es necesario que el alumno conozca las metodologas para la realizacin de una frmula blanca, as como la forma de
reportar los resultados y su interpretacin.


MUESTRA: Sangre total utilizando EDTA como anticoagulante.

EQUIPO:
Microscopio Agitador mecnico Hematocitmetro de Neubauer

MATERIAL:
Portaobjetos Pipeta para blancos-(Thoma)

INSTRUMENTAL:
Contador de teclas (piano)


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INSUMOS:
a) Solucin de Turk
b) Aceite de inmersin
c) Colorantes para tincin de Wright o Wright-Giemsa

RECUENTO TOTAL DE LEUCOCITOS:

a) Mezcle la muestra de sangre.
b) Diluya 0.5 partes de sangre en una pipeta para blancos con 9.5 partes de diluyente de Turk.
c) Mezcle por aproximadamente 2 minutos, elimine las tres primeras gotas.
d) Llene la cmara de recuento siguiendo la parte central y espere aproximadamente 1 min.
e) Cuente los leucocitos en los cuatro cuadros grandes de las esquinas.
f) Calcule el nmero total de leucocitos por milmetro cbico.

CLCULO (por milmetro cbico o mililitro)

a) Tomando en cuenta el volumen entre la cmara y el cubre-hematocitmetro.

(10 microlitros) (Dilucin 20) (Por el nmero de clulas contadas) = Total de clulas
Numero de cuadros contados (4) (leucocitos)

RECUENTO DIFERENCIAL:

Haga un frotis sanguneo y permita que seque.

1. Fije y tia el frotis.
2. Registre en un contador de teclas cada leucocito que observe hasta que haya contado 100 leucocitos.
3. Examine la morfologa de los eritrocitos y la morfologa y nmero de plaquetas presentes.

7. Bibliografa.

a) BARBARA A. BROWN: Hematology: Principles and Procedures, 5ta. Edicin, EUA, Lea & Febiger, 1993.

b) JOHN BERNARD HENRY: Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 20a. Edition, EUA,
W.B.Saunders Company, 2001.


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1. Sesin No. 4: Citologa hemtica: Frmula roja.

Interpretar y formular juicios de una frmula roja con los ndices hemticos, los resultados fuera de los intervalos de
referencia en los recuentos y diferenciacin de esto. As como la interpretacin y utilizacin de los ndices hemticos
en la valoracin y clasificacin de las anemias.

a) Reporte por equipo con los resultados obtenidos.
b) Discusin del desarrollo de la prctica y de los resultados obtenidos.
1. Qu significan las siglas en ingls CBC, WBC y RBC?
2. Defina los trminos poiquilocitosis y anisocitosis. Presente ejemplos con imgenes.
3. Qu son los ndices hemticos, cmo se determinan( frmula) y cul es su utilidad?
4. Enumere algunas ventajas al realizar el hemograma con equipo electrnico.
5. Compare sus resultados obtenidos manualmente y con instrumentos. Explique las diferencias.
6. Preguntas adicionales eleboradas cada semestre por su profesor.

La frmula roja consiste generalmente en la determinacin de la concentracin de hemoglobina, el hematocrito y los
ndices hemticos. Con el surgimiento de los contadores electrnicos de clulas se ha incluido tambin el recuento
total eritrocitos. Es necesario examinar la morfologa celular en un frotis observado con el microscopio. La biometra
hemtica es quiz el procedimiento realizado con mayor frecuencia en un laboratorio de anlisis clnicos y es uno de
los anlisis que brinda mayor Informacin sobre el estado de salud de paciente. En particular, la frmula roja es
necesaria para el manejo de las anemias.


MUESTRA:
a) Sangre total utilizando EDTA, mezcla de oxalatos o heparina como anticoagulante.

EQUIPO:
a) Centrfuga para microhematocrito.
b) Lector de tubos de microhematocrito o regla
c) Contador celular electrnico
MATERIAL:
a) Plastilina o mechero para sellar un extremo del capilar


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b) Tubos capilares para hematocrito.


DETERMINACIN DEL HEMATOCRITO Mtodo manual:

a) Mezcle la muestra de sangre.
b) Llene aproximadamente 2/3 de un tubo capilar con la muestra.
c) Selle un extremo del tubo con plastilina o con la llama del mechero.
d) Centrifuge por 5 minutos a 11,500-15,000 rpm.
e) Registre el resultado.

CONCENTRACIN DE HEMOGLOBINA, NUMERO DE ERITROCITOS, HEMATOCRITO, INDICES HEMATICOS:

a) Siga las instrucciones del manual del fabricante del equipo electrnico.

7. Bibliografa.
a) BARBARA A. BROWN: Hematology: Principles and Procedures. 5a. Edicin, EUA, Lea & Febiger, 1993.
b) JOHN BERNARD HENRY: Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 20a. Edicin, EUA,


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1. Sesin No. 5: Recuento de plaquetas y Pruebas de coagulacin.

Realizar estudios de laboratorio para determinar la hemostasia de un paciente, valorando la utilidad de conocer
estos parmetros y los valores de referencia ya que son de suma importancia en una valoracin pre-quirrgica,
padecimientos hepticos y en enfermedades del proceso hemostsico.

b) Discusin del desarrollo de la prctica y de los resultados obtenidos
1. Explique algunas causas de trombocitopenia y de trombocitosis.
2. Haga un esquema en forma de cascada que muestre la interaccin entre los factores de la coagulacin.
3. Enumere al menos 4 causas que prolonguen el tiempo de protrombina.
4. Preguntas adicionales elaboradas cada semestre por su profesor.

La hemostasis es el proceso que retiene la sangre dentro del sistema vascular. Cuando se presenta una herida en un
vaso sanguneo, el proceso hemosttico est diseado para repararlo y detener la hemorragia. La primera respuesta
al sangrado es la vasoconstriccin, despus las plaquetas se agregan y adhieren al vaso daado para inhibir el
sangrado. Los factores de la coagulacin se activan, interactuando para formar la fibrina y el cogulo que detiene el
sangrado. Posteriormente se inicia la lisis lenta del cogulo y la reparacin total. El laboratorio de anlisis clnicos
aporta al mdico mucha informacin para la valoracin de la hemostasis y la coagulacin.


MUESTRA: Sangre total utilizando EDTA como anticoagulante y Plasma citratado.

EQUIPO:
a) Microscopio
b) Bao de agua a 37C
c) Cronmetro

INSTRUMENTAL:
a) Contador electrnico de plaquetas

INSUMOS:
Disparador mecnico de lanceta Papel filtro circular
Lanceta Mezcla de cloruro de calcio-tromboplastina
Torundas con alcohol Plasma control en el rango normal y anormal


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RECUENTO DE PLAQUETAS:
a) Siga las instrucciones del manual del contador celular electrnico.

TIEMPO DE SANGRADO (Mtodo de Duke):
a) Limpie el lbulo de la oreja con una torunda con alcohol y permita que seque.
b) Efecte una puncin profunda con la lanceta, inicie el cronmetro.
c) Con el papel filtro absorba la sangre cada 30 segundos sin tocar la herida.
d) Cuando cese el sangrado, pare el reloj y registre el tiempo de sangrado.

TIEMPO DE PROTROMBINA/TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL:
a) Siga las instrucciones del fabricante de los reactivos.

7. Bibliografa.

a) BARBARA A. BROWN: Hematology: Principles and Procedures, 5a. Edicin, EUA, Lea & Febiger, 1993.

b) JOHN BERNARD HENRY: Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 20a. Edicin, EUA,


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1. Sesin No. 6: Tipo sanguneo y pruebas cruzadas.

Realizar la tipificacin de un grupo y Rh sanguneo, valorando la importancia de una prueba cruzada como un factor
trascendental para llevar a cabo una transfusin sangunea.

Discusin del desarrollo de la prctica y de los resultados obtenidos
Cuestionario (entrega individual):
1. Complete la siguiente tabla:
GRUPO SANGUINEO ANTIGENOS EN EL ERITROCITO ANTICUERPOS (AGLUTININAS)
O ni A ni B anti-A y anti-B
A
B
AB
2. Mi grupo sanguneo es: ________________, por lo que tericamente puedo donar sangre a los siguientes grupos:
_________________________ y puedo recibir transfusin de los siguientes grupos: ___________________________

Anualmente se realizan millones de transfusiones sanguneas, por lo que la aplicacin ms importante de la
inmunohematologa es en la transfusin sangunea segura. Una segunda aplicacin es el conocimiento de la
patognesis, diagnstico y prevencin de la inmunizacin Rh asociada al embarazo. Adems de sus aplicaciones en la
medicina clnica, la inmunohematologa hace importantes contribuciones en las reas de gentica humana,
antropologa, criminologa

MUESTRA: Sangre total del donador y suero del receptor.

EQUIPO:
Microscopio Centrfuga Bao Mara a 37C

INSTRUMENTAL:
a) Tubos de ensayo, placas de vidrio y/o portaobjetos
b) Pipetas de transferencia

INSUMOS:
a) Sueros hemoclasificadores anti-A, anti-B y anti-D
b) Suero de Coombs (antiglobulina humana)
c) Aplicadores de madera


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DETERMINACIN DE GRUPOS SANGUNEOS:
Prueba en placa o portaobjetos:
a) Colocar separadamente una gota de suero anti-A, anti-B y anti-D.
b) Al lado de stas depositar una gota de sangre venosa o capilar.
c) Con un palillo de madera distinto, mezclar y extender aprox. 2 cm
d) Mover de forma circular la placa para favorecer la mezcla.
e) Observe si existe aglutinacin macroscpica antes de 3 minutos.
f) En caso de resultado dudoso, examine la mezcla en el microscopio con objetivo 10X.
g) Interprete y registre sus resultados.

Prueba en tubo:
a) Centrifugar la sangre venosa y descartar el plasma.
b) Preparar una suspensin entre 2-5 % de eritrocitos con solucin salina isotnica.
c) Colocar una gota de anti-A, de anti-B y anti-D en tres diferentes tubos previamente rotulados A, B y Rh
d) Agregar una gota de la suspensin de eritrocitos a cada tubo y mezclar.
e) Incubar a 37C durante 5 minutos.
f) Centrifugar a 1,000 rpm durante 1 minuto.
g) Agitar suavemente y observar si existe aglutinacin macroscpica, pudindose confirmar al microscopio.
h) Interprete y registre sus resultados.

PRUEBA CRUZADA MAYOR:
a) En un tubo coloque 1 gotas del suero del receptor y 1 gotas de suspensin al 5% de eritrocitos lavados del
donador. Rotule el tubo PRUEBA Mayor
b) En un tubo coloque 1 gotas del suero del receptor y 1 gotas de suspensin de eritrocitos del receptor. Rotule
este tubo como TESTIGO
c) Mezcle y centrifugue a 1,000 rpm durante 15 seg.
d) Mover suavemente el sedimento y observar si hay aglutinacin.
e) Colocar 2 gotas de albumina.
f) Centrifugar por 15 seg.
g) Si los resultados son negativos, dbilmente positivos o dudosos, incubar los tubos a 37C por 30 min.
h) Centrifugar y observar si existe aglutinacin. Si la reaccin contina sien do negativa, positiva dbil
o dudosa, lavar los eritrocitos 4 veces.
i) Despus del ltimo lavado se decanta la solucin salina dejando slo 1 o 2 gotas para resuspender los
eritrocitos. Agregar 1 gota de suero de Coombs a cada tubo, mezclar bien y centrifugar a 1,000 rpm 1 min.
j) Mover suavemente el sedimento y observar si existe aglutinacin. Para confirmar reacciones dbiles,
observar al microscopio.
k) La presencia de aglutinacin se interpreta como prueba positiva (incompatibilidad).
l) En el tubo testigo no debe haber aglutinacin.

7. Bibliografa.
a) BEATRIZ BAYARDO PEREZ, Apuntes de Anlisis Clnicos, 5a. Edicin, Mxico, Universidad de Guadalajara, 1978.
b) IOVINE ENRIQUE y SELVA ALEJANDRO: El Laboratorio en la Clnica, 2a. Edicin, Argentina, Editorial Mdica
Panamericana, 1979


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1. Sesin No. 7: Prueba embarazo / HIV

Comprender el fundamento de la tcnica de formacin del complemento antgeno anticuerpo desarrollada en el
laboratorio por medio de una prueba inmunolgica cualitativa para poder solicitar al laboratorio algn examen
juzgando la importancia de comprender las bases de dichas pruebas.

Reporte por equipo con los resultados obtenidos
Discusin del desarrollo de la prctica y de los resultados obtenidos.
1. Investigue al menos 12 anlisis de laboratorio cuyo fundamento sea la reaccin inmunolgica.
2. Qu significa ELISA?
3. Explique en qu consiste la prueba de Western-Blot y porqu es necesaria.
4. Definir sensibilidad y especificidad.
5. Explique la ventaja de utilizar una prueba de embarazo que determine la fraccin de la HGC sobre una que
detecte la HGC ntegra.

Muchas tcnicas en el laboratorio de anlisis clnicos utilizan la reaccin antgeno-anticuerpo como herramienta para
detectar y/o cuantificar constituyentes de la sangre o de otros fluidos corporales.
En la mayora de los inmunoensayos, la muestra del paciente contiene el antgeno (analito), y el anticuerpo se
adiciona como reactivo para detectar o medir el antgeno.
Por otra parte, en los casos de enfermedad infecciosa, determinaciones serolgicas, pruebas de alergias y pruebas
para anticuerpos autoinmunes, es la medicin del anticuerpo en la muestra del paciente la que es clnicamente
importante. En estos casos, se utiliza como reactivo un antgeno de composicin conocida.


MUESTRA:
a) Suero

INSUMOS:
a) Conjunto de reactivos para determinacin de prueba de embarazo.
b) Conjunto de reactivos para practicar prueba de HIV.

NOTA: Dependiendo de los reactivos se solicitar especficamente el material


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El alumno leer ntegramente el inserto del fabricante de los reactivos (uso, fundamentos, descripcin de los
componentes, requerimientos de muestra, almacenamiento, estabilidad, procedimiento, control de calidad,
interpretacin, etc.).
Se realizarn las pruebas siguiendo estrictamente las instrucciones del fabricante.

7. Bibliografa.

a) ENGVALL, E.: Enzyme immunoassay ELISA and EMIT, Methods in Immunology, 70:419-439, EUA, 1980
b) LAWRENCE KAPLAN, AMADEO PESCE y STEVEN KAZMIERCZAK: Clinical Chemistry, Theory, Analysis, Correlation, 4a.
Edicin, EUA, Mosby, 2003.


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1. Sesin No. 8: Examen general de orina

Interpretar el resultado de un anlisis de orina en el que podr obtener informacin de posibles patologas de vas
urinarias, as como la importancia del conocimiento de la fase pre-analtica de este estudio, siendo este estudio uno
de los que proporcionan mucha informacin sobre el estado de filtracin y funcionamiento del rin.

Reporte por equipo de los resultados obtenidos
Cuestionario (entrega individual)
1. Qu significan en microscopa las siglas en ingls: lpf y hpf?
2. Presente una correlacin clnica para cada uno de los anlisis efectuados
3. Dibuje elementos que con mayor frecuencia se identifican en un examen microscpico del sedimento urinario

EXAMEN FSICO:
El examen fsico de la orina incluye la determinacin de su color, aspecto y gravedad especfica. La observacin de
stas caractersticas provee informacin preliminar respecto a algunas enfermedades como sangrado glomerular,
enfermedad heptica, errores innatos del metabolismo e infeccin en el tracto urinario. Estos resultados pueden
utilizarse para confirmar o explicar algunos resultados del examen qumico y microscpico de la orina.

EXAMEN QUMICO:
Las tiras reactivas para el examen de la orina proveen un mtodo rpido y sencillo para practicar anlisis qumicos de
significado clnico, incluyendo el pH, protena, glucosa, cuerpos cetnicos, sangre, bilirrubina, urobilingeno, nitritos,
estearasa leucocitaria y gravedad especfica.

EXAMEN MICROSCPICO:
El examen microscpico del sedimento urinario constituye un procedimiento de gran utilidad en el estudio del rin.
Podemos observar cristales orgnicos e inorgnicos poco solubles, clulas como eritrocitos, leucocitos y clulas del
urotelio epitelial, as como material de naturaleza proteica insoluble como los cilindros, adems podramos encontrar
bacterias, levaduras, parsitos y muchos otros componentes.


MUESTRA: Muestra de orina fresca, de preferencia la primera de la maana.

EQUIPO: Cliniteck (lector de tiras reactivas)


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MATERIAL: Recipiente para recoleccin de orina Tiras reactivas para anlisis qumico de la orina
Portaobjetos y cubreobjetos

INSTRUMENTAL: Tubos cnicos graduados Refractmetro Centrfuga Microscopio

INSUMOS: Papel para limpiar microscopio

EXAMEN FSICO:
1) Color y aspecto:
Mezcle la muestra, utilice un tubo claro, observe contra un fondo blanco, utilice buena iluminacin, registre el color y
el aspecto.

2) Gravedad especfica:
Siguiendo las instrucciones del fabricante, determine gravedad especfica por varios mtodos (refractmetro y/o
reaccin en tira reactiva). Compare los resultados obtenidos por diferentes mtodos.

EXAMEN QUMICO:
a) Sumerja la tira reactiva en una muestra de orina bien mezclada, no centrifugada a temperatura ambiente.
b) Remueva el exceso de orina tocando la tira reactiva con la pared del recipiente.
c) Espere el tiempo especificado para cada reaccin.
d) Compare el color de las zonas de reaccin en la tira con el esquema de colores proporcionado por el
fabricante de la tira, utilizando buena iluminacin. Puede utilizarse un lector automtico de tiras reactivas.

EXAMEN MICROSCPICO
a) Mezcle la muestra y coloque 10 ml en un tubo de centrfuga
b) Centrifugue a 2,000 rpm durante 2 minutos
c) Decante, dejando en el tubo 1.0 ml de orina y re suspenda el sedimento
d) Coloque una gota de este sedimento entre porta- y cubreobjetos
e) Observe con objetivos de 10X y 40X
f) Registre y reporte sus hallazgos

7. Bibliografa.

a) HABER M.: Urinary Sediment: A Textbook Atlas, 1a. Edicin, EUA, American Society of Clinical Pathologists,
1981.
b) SUSAN KING y MARJORIE SCHAUB: Urinalysis and Body Fluids, 4a. Edicin, EUA, F.A. Davis Company, 2001


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1. Sesin No. 9: Espermograma

Interpretar las caractersticas generales del lquido espermtico, as como el de las personas que se someten a una
vasectoma valorando la importancia de la fase pre-analtica para obtener informacin de calidad del estudio. El
estudio de las clulas espermticas es de suma importancia en casos de infertilidad.

1. Qu instrucciones da Usted al paciente para una adecuada recoleccin de muestra para
espermatobioscopa?
2. En qu consiste la prueba de Sims-Huhner?
3. Cul es el protocolo a seguir para la valoracin post-vasectoma?

El examen del semen usualmente se practica como parte del protocolo del estudio de la pareja con problemas de
fertilidad. Por su relativa simplicidad, frecuentemente se solicita antes de someter a la mujer a estudios que son ms
complicados. Adems el laboratorio clnico realiza estudios post-vasectoma y anlisis forenses.

MUESTRA:
Se recolecta la muestra despus de un perodo de abstinencia sexual de 3 das, preferentemente por masturbacin.

EQUIPO: Cmara de Neubauer

MATERIAL: Recipiente para la recoleccin de la muestra y otro idntico medir la muestra

INSTRUMENTAL:
a) Microscopio
b) Tubos de 12 x 75
c) Pipetas de transferencia
d) Micropipetas de 10 y 100 uL
e) Probeta graduada de 10 ml
f) Pipetas volumtricas de 5 y 10 ml
g) Portaobjetos y cubreobjetos
h) Varilla de vidrio
i) Contador manual de clulas

INSUMOS: Papel para determinacin de pH Colorantes para Tincin Giemsa.


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VOLUMEN: Utilice el otro recipiente igual al de la recoleccin de muestra, y vierta agua hasta el mismo volumen de l a
muestra, despus vaciar el agua a la probeta para obtener el volumen.
Alternativamente, puede utilizar una probeta graduada o un tubo cnico para centrfuga graduado.

VISCOSIDAD Y TIEMPO DE LICUEFACCION: La licuefaccin debe ser total antes de 30 minutos. Para valorar la
viscosidad, sumergir una varilla de vidrio en la muestra y medir la longitud del filamento (normal: 5-10 mm); otro
criterio es que debe gotear libremente.

pH: Utilice un papel indicador de pH

MOTILIDAD: Valorarla entre los 30 y 60 minutos del eyaculado, una vez licuada la muestra. Colocar una gota de
semen entre porta- y cubreobjetos y observar con el objetivo 40X. El porcentaje de espermatozoos con movimiento
progresivo puede estimarse despus de observar aproximadamente 20 campos.
La motilidad puede clasificarse en la escala A, B, C, D, indicando A movimiento rpido progresivo, B lento, C in situ y
D inmvil.

RECUENTO: El mtodo de conteo est basado en el manual de la OMS. 10 micras de lquido seminal se coloca en un
porta y se cubren con un cubreobjetos. Se observa en objetivo 40x del microscopio, se observa cantidad de clulas
espermticas y se decide en base a la cantidad si se elije una dilucin de 1:50, 1:20, 1:10. Se realiza con solucin
salina. Elegida la dilucin se coloca una gota de esta en la cmara de Neubauer, se observa en el cuadrante central y
segn la cantidad de clulas espermticas encontradas en un cuadrito de este cuadrante se hace el conteo.

< A 10 espermas se procede a contar 25 cuadritos.
10 a 40 espermas se cuenta 10 cuadritos.
De 40 se cuenta 5 cuadritos.
Para realizar el clculo se considera el factor que le corresponda.

METODO ALTERNO: Utilizar la cmara de Neubauer con una dilucin de la muestra 1:20 con agua corriente.

MORFOLOGIA: Teir un frotis delgado utilizando el mtodo de Giemsa, Wright o Papanicolaou. Observar con
objetivo de inmersin y reportar como porcentaje.

7. Bibliografa.
a) SUSAN KING y MARJORIE SCHAUB: Urinalysis and Body Fluids, 4a. Edicin, EUA, F.A. Davis Company, 2001
b) WORLD HEALTH ORGANIZATION: WHO Laboratory Manual for the Examination of Human Semen and
Sperm-Cervical Interaction. 1a. Edicin, Inglaterra, Cambridge University Press, 1999.


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1. Sesin No. 10: Qumica sangunea.

Interpretar los resultados cuantitativos de algunos analitos de inters clnico en la investigacin de patogenias y
seguimiento de control en un paciente.Conocer la influencia de las variables pre-analticas para stos anlisis.

3 .Mecanismos de evaluacin y Evidencia de desempeo.
Reporte por equipo de los resultados obtenidos en todas las mesas
1. Haga un esquema de los componentes internos de un espectrofotmetro.
2. Explique la ley de Lambert-Beer
3. Escriba la(s) reaccin(es) que practic para convertir su analito en un producto colorido.
4. Preguntas adicionales elaboradas cada semestre por su profesor

Muchas de las determinaciones efectuadas en el laboratorio clnico se basan en la medicin de la energa radiante
emitida, transmitida, absorbida o reflejada bajo condiciones controladas. En esta sesin calcularemos la
concentracin en sangre de algunos metabolitos midiendo absorbancia y/o transmitancia con un espectrofotmetro.

MUESTRA:
Suero

EQUIPO:
a) Espectrofotmetro
b) Autoanalizador

INSTRUMENTAL:
a) Micropipetas
b) Tubos de ensayo
c) Pipetas serolgicas

INSUMOS:
Conjunto de reactivos para determinacin de diferentes analitos


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Cada equipo realizar la determinacin de un analito diferente, informando sus resultados al resto de los equipos.
ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA: En la siguiente sesin, se efectuarn las mismas determinaciones en forma
automatizada.

7. Bibliografa.

a) EDWARD R. ASHWOOD y CARL A. BURTIS: Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5a. Edicin, EUA, W.B.
Saunders Company. 2000.
b) LAWRENCE KAPLAN, AMADEO PESCE y STEVEN KAZMIERCZAK: Clinical Chemistry, Theory, Analysis,
Correlation, 4a. Edition, EUA, Mosby, 2003.


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1. Sesin No. 11: Enzimologa clnica / Automatizacin

Valorar la importancia del monitoreo mediante la medicin de la actividad enzimtica de rganos y tejidos para el
diagnostico del pacientes, con algunas situaciones en los rganos, en tejidos que se expresan al realizar las
mediciones enzimticas.

Reporte por equipo de los resultados obtenidos
1. Enumere 10 enzimas sricas con su importancia en el diagnstico.
2. Explique la diferencia entre un mtodo de medicin enzimtica de punto final y un mtodo cintico.
3. Enumere 5 ventajas que se obtengan con la automatizacin en el laboratorio clnico.

ENZIMOLOGA CLNICA:
El laboratorio de enzimologa clnica est interesado principalmente en determinar los cambios en la
actividad de enzimas que son predominantemente intracelulares (enzimas no plasma especficas) por lo que
normalmente se encuentran en muy bajas concentraciones en el suero. Estas enzimas se liberan cuando las clulas
se daan o mueren; Midiendo los cambios de actividad de stas enzimas en la enfermedad, es posible inferir la
localizacin y la naturaleza de los cambios patolgicos en algunos de los tejidos del cuerpo.

AUTOMATIZACIN:
Actualmente, la mayora de los laboratorios de anlisis clnicos realizan parte de sus procedimientos de
manera automatizada (es decir, mediante la mecanizacin de los procesos analticos).

MUESTRA:
Suero

EQUIPO:
a) Bao Mara a 37C
b) Autoanalizador
c) Espectrofotmetro


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INSTRUMENTAL:
a) Micropipetas
b) Tubos de ensayo
c) Pipetas serolgicas

INSUMOS:
Conjunto de reactivos para determinacin de diferentes analitos.

Cada equipo practicar la determinacin de la actividad srica de dos enzimas, una de ellas con un mtodo
de punto final y otra de ellas con un mtodo cintico.
ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA: Segn los reactivos y protocolos que se tengan en el laboratorio, realice la
cuantificacin de algunos analitos en el autoanalizador.

7. Bibliografa.

Correlation, 4a. Edicin, EUA, Mosby, 2003.


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1. Sesin No.12: Evaluacin prosttica

Interpretar los valores prostticos en pacientes de acuerdo a la edad o sintomatologa del individuo para la
deteccin de alteraciones prostticas, ya que es uno de los estudios que ha tomado mucha importancia en la
prevencin de cncer de prstata.


a) Reporte por equipo de los resultados obtenidos.
1. Describa la serie de reacciones que se llevaron a cabo.
2. Explique la utilidad de la determinacin de APE total y libre
3. Por qu es controversial el uso generalizado de esta prueba?
4. Haga una relacin de otras molculas que se utilicen como marcadores tumorales y el tejido que ayudan a valorar.

ANTIGENO PROSTTICO ESPECFICO:
Es una enzima producida por las clulas de la glndula prosttica. Niveles bajos se encuentran normalmente en la
sangre del hombre. El cncer de prstata y otras condiciones no cancerosas (prostatitis, hiperplasia benigna de
prstata) pueden aumentar los niveles de APE.

MUESTRA:
a) Sueros de pacientes masculinos mayores de 50 aos.

MATERIAL:
a) Material para toma de muestra

INSTRUMENTAL:
a) Micropipetas

INSUMOS:
a) Conjunto de reactivos para la determinacin de APE total y libre.


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interpretacin, etc.)
Se realizar el anlisis siguiendo estrictamente las instrucciones del fabricante.

7. Bibliografa.
c) RIES LAG, EISNER MP, KOSARY CL, HANKEY BF, MILLER BA, KLEGG L, MARIOTTO A, FEUER EJ, EDWARDS BK
(eds), SEER Cancer Statistics Review, 1975-2001, National Cancer Institute EUA, 2004.


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1. Sesin No. 13: Electrolitos sricos

Aplicar los conocimientos de la valoracin electroltica en los pacientes con patologas de acidosis o alcalosis para
elaborar un modelo mental de los fenmenos bioqumicos presentes en el organismo.

Reporte por equipo con los resultados obtenidos.
1. Qu alteraciones en los resultados de electrolitos nos ocasiona una muesra hemolizada?
2. Haga una correlacin clnica de los valores anormales de Na, K y Cl.
3. Cul es la utilidad mdica de la determinacin de niveles sricos de litio?

Son dos los mtodos analticos utilizados:

FLAMOMETRIA:
La muestra se diluye y es aspirada hacia una flama de aire-propano que suministra suficiente energa en forma de
calor para excitar a los iones de sodio, potasio y litio. Cuando estos iones trmicamente excitados regresan a su nivel
basal, emiten luz que se mide con un fotodetector. La intensidad de la energa radiante es directamente proporcional
a la concentracin de los iones en la muestra. El uso de esta tcnica ha disminuido en los ltimos aos, aunque se
sigue considerando el mtodo de referencia.

ELECTROQUIMICA (Electrodos ion-selectivos):
Esta metodologa es la ms utilizada y se basa en la potenciometra, es decir, en la medicin de una diferencia de
potencial (voltaje) entre dos electrodos (un electrodo de medicin, llamado ion selectivo y un electrodo de
referencia).


MUESTRA:
Suero libre de hemlisis.

EQUIPO:
Controles en los niveles bajo, normal y alto para cada electrolito.


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INSTRUMENTAL:
a) Pipetas serolgicas y micropipetas
b) Flammetro y/o analizador con electrodos de ion selectivo.
INSUMOS: Soluciones estndar de sodio, potasio, litio y cloro.

Siguiendo las instrucciones del fabricante, el alumno practicar la determinacin de electrolitos sricos, utilizando l a
metodologa disponible en el laboratorio.

7. Bibliografa.
c) WANG J: Electro analytical Techniques in Clinical Chemistry and Laboratory. Medicine, 1a. Edition, EUA, VCH
Publishers, 1988.


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1. Sesin No. 14: Frmacos de abuso

Interpretar los resultados de una valoracin en orina, para la bsqueda de metabolitos de drogas de abuso, en el
ambiente laboral, cuestiones legales (familiares, penales, etc.) requisitos escolares o por sospecha en particular. Es
muy importante contar con trabajadores en un estado ntegro, para tener menos accidentes y mejores resultados de
desempeo laboral.

Cuestionario (entrega individual)
1. Cul es el fundamento del mtodo de la cromatografa de gases/ espectrofotometra de masas?
2. Por qu es el mtodo GC/MS el ideal para hacer la confirmacin de un resultado positivo preliminar
de drogas en orina?
3. Discuta ventajas y desventajas de la utilizacin de otras muestras (cabello, suero, saliva, etc.) para este estudio.
4. Enumere algunos ejemplos de frmacos para los cuales el laboratorio es especialmente til en la medicin de los
niveles teraputicos (o txicos) en suero.
5. Preguntas adicionales elaboradas por su profesor.

La adiccin y abuso del alcohol y otros frmacos afectan a un nmero importante de la poblacin de muchos pases
incluyendo el nuestro. El alcohol es la sustancia de abuso ms comn en la civilizacin occidental y los patrones del
comportamiento con el alcohol son similares con otras substancias como la marihuana. Cocana, benzodiacepinas,
opiceos y otros frmacos.
Muchas empresas utilizan un anlisis para detectar el uso de stas sustancias antes de contratar a un trabajador
que pudiera poner en riesgo la seguridad de la empresa.
Efectuaremos un anlisis inmunocromatogrfico para la deteccin cualitativa de las drogas y/o sus metabolitos en
la orina.
Es un inmunoensayo competitivo en el cual el frmaco y sus metabolitos en la muestra de orina compiten con
molculas del frmaco qumicamente marcadas por un nmero limitado de anticuerpos fijadores. Se utilizan
anticuerpos especficos para cada clase de frmaco por identificar.
Los resultados obtenidos con estas metodologas se deben considerar como preliminares y deben ser confirmados
por otros mtodos como GC/MS (cromatografa de gases/espectrofotometra de masas).


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MUESTRA:
a) Orina reciente a temperatura ambiente

MATERIAL:
a) Recipientes para muestra de orina
b) Cronmetro

INSTRUMENTAL:
a) Pipetas de transferencia

INSUMOS:
b) Conjunto de reactivos para deteccin de frmacos de abuso.
c) Controles positivos para cada frmaco analizado.

interpretacin, etc.). Se realizar la prueba siguiendo estrictamente

7. Bibliografa.
c) PRICE C. y NEWMAN D. (eds): Principles and Practices of Immunoassays, 2a. Edicin, EUA, Stockton Press,
1997.


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1. Sesin No. 15: Toxicologa industrial

Interpretar la deteccin de una muestra de sangre u orina en trabajadores con exposicin a diversos qumicos, con
la finalidad de establecer posibles riesgos a la salud.
1. Enumere al menos 10 txicos industriales o de exposicin profesional que el laboratorio clnico cuantifique.
2. Cules son los lmites mximos permisibles de nivel de plomo en sangre en trabajadores expuestos?

El laboratorio de anlisis clnicos con capacidad para la realizacin de anlisis toxicolgicos aporta informacin
prctica al mdico ocupacional sobre los riesgos de salud, evaluacin de la exposicin y para el seguimiento del
personal en tratamiento.
MUESTRA:
a) Sangre total, suero u orina, segn el anlisis a practicar.

INSUMOS:
a) Los indicados por el fabricante del conjunto de reactivos a utilizarse.

Segn la disponibilidad de reactivos y equipo, seguir fielmente el protocolo establecido para el anlisis a realizar.

ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA: Visitar un laboratorio que realice exmenes toxicolgicos y conocer algunas de sus
metodologas.

7. Bibliografa.
a) EDWARD R. ASHWOOD y CARL A. BURTIS: Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5a. Edicin, EUA,
W.B. Saunders Company. 2000.
b) www.osha.gov
c) www.stps.gob.mx


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VI. TABLA DE CAMBIOS

Tabla de Cambios

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Fecha
Descripcin

0 31/ENE/2011 Alta
1 27/JUL/2012 Se adecua al formato GC-FR-012 Rev. 3

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Facultad de Medicina y Psicologa

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