Un examen superficial de la literatura de la ingeniera bioqumica puede dar la
impresin de que hay un nmero ilimitado de diseos de biorreactores. Sin embargo, una inspeccin ms cercana revela que casi todos estos diseos se dividen en tres clases fundamentales: Reactores de tanque agitado (STR), que cuentan con agitacin mecnica interna (fig. 17.9A) Columnas de burbujas, que se basan en la introduccin de aire u otro gas (burbujeo) de agitacin (fig. 17.9B) reactores de puente areo, que tienen ya sea una un bucle externo (fig. 17.9D) interna (fig. 17.9C); o la mezcla y la circulacin del fluido de cultivo en estos reactores son los resultados del movimiento de un gas introducido (por lo general aire ), lo que hace que las diferencias de densidad dentro de las diferentes partes del biorreactor. El tradicional, y con mucho, el ms utilizado, es el bioreactor STR. Este tipo de biorreactor tiene varias ventajas sobre otras configuraciones de biorreactores. Cuenta con las condiciones de operacin altamente flexible. Es fcilmente disponible comercialmente. Se proporciona una transferencia eficiente del gas a las clulas microbianas que crecen, o, en palabras de los ingenieros de fermentacin, el coeficiente volumtrico de transferencia de masa, ELK de ROS es elevado. Se ha utilizado ampliamente por los ingenieros de fermentacin y microbilogos para el cultivo de una variedad de microorganismos. En un ROS, de gas, normalmente aire, se aade al medio de cultivo bajo presin a travs de un dispositivo llamado un rociador, el cual puede ser un anillo con muchos agujeros pequeos o un tubo con un nico orificio.Aunque los anillos de borboteo generan burbujas ms pequeas y por lo tanto crean una mejor distribucin inicial de gas, tubos de burbujeo se prefieren a menudo en muchas aplicaciones a pequea escala (<20 litros), ya que son menos propensos a obstruirse. Una dispersin a fondo del gas dentro del biorreactor requiere uno o ms impulsores (agitadores) adems de la burbujeador. La agitacin mecnica del medio de cultivo por los rodetes rompe burbujas ms grandes en otros ms pequeos, las burbujas se dispersa por todo el medio, y aumenta el tiempo de residencia de las burbujas en el biorreactor. A altos niveles de agitacin, el tamao medio de las burbujas en grandes biorreactores es esencialmente independiente del tamao de los agujeros en el tubo rociador. El tipo de impulsor, su velocidad de rotacin, y las propiedades fsico- qumicas de la fase lquida son factores importantes que dan lugar a la dispersin de gas eficiente. En grandes biorreactores, sin embargo, si la distribucin inicial de gas desde el rociador no es uniforme en todo el tanque, incluso agitacin vigorosa puede no crea un ambiente de gas homognea. Debido a la naturaleza corrosiva o abrasiva de muchos medios de cultivo y los procedimientos de esterilizacin, los RTS se construyen normalmente a partir de acero inoxidable o vidrio. Las unidades de vidrio se limitan generalmente a biorreactores a escala de laboratorio que tienen una capacidad <50 litros. Una limitacin en el tamao de un biorreactor es la capacidad del sistema para eliminar eficientemente el calor que se genera como consecuencia de cualquiera de los dos el metabolismo de las clulas en crecimiento o la entrada de energa por agitacin. El exceso de calor eleva la temperatura y altera el estado fisiolgico de las clulas, y disminuye el rendimiento del producto. El calor puede ser eliminado mediante el uso de una camisa de refrigeracin alrededor del recipiente de reaccin o por serpentines internos. Aunque serpentines de refrigeracin internos son ms eficaces que las chaquetas en mantener la reaccin de fermentacin cerca de la temperatura deseada, que pueden se ensucian (recubierto) con microorganismos, lo que impide enfriamiento, y que a veces interfieren con la agitacin adecuada del caldo de fermentacin. La contaminacin de una fermentacin con hongos o bacterias suele ser desastroso. Por lo tanto, biorreactores estn diseados para que puedan ser esterilizados, por lo general con vapor a presin. No debe haber espacios muertos internos o superficies que escapan contacto con el vapor de agua durante la esterilizacin. Todos los sellos, sondas, vlvulas y tambin deben ser fcilmente esterilizable de vapor. Cuando un bioreactor est diseado, un trade-off se hace a menudo entre un conjunto completo de puertos para las sondas, lo que permite el seguimiento de los parmetros de la fermentacin, y menos puertos, lo que hace el mantenimiento de la esterilidad ms fcil. El alto nivel de agitacin del medio de cultivo durante una reaccin de fermentacin a menudo causa una considerable formacin de espuma. Excesiva de espuma puede mojar el filtro en el puerto a travs del cual sale el aire introducido el biorreactor, con lo que tanto la disminucin de la corriente de aire y proporcionar una va potencial para la entrada de clulas contaminantes. Cualquiera de los agentes qumicos o interruptores mecnicos de espuma antiespumante se puede utilizar para controlar la formacin de espuma. Sin embargo, los agentes qumicos pueden disminuir el grado de crecimiento microbiano mediante la prevencin de la transferencia de oxgeno o, en algunos casos, por la inhibicin de las enzimas celulares. Por otra parte, si un compuesto antiespumante no se quita antes del procesamiento aguas abajo, que puede contaminar el producto final. Formacin de espuma tambin se puede controlar proporcionando suficiente "espacio de cabeza" en el biorreactor, es decir, el espacio por encima del lquido en el que las burbujas pueden disipar. En la prctica, a continuacin, el "volumen de trabajo," o el volumen real de la cultura, en un ROS es tpicamente slo aproximadamente el 75% del volumen total del biorreactor. Muchas de las consideraciones que se aplican a los ROS tambin se aplican a los reactores de neumticos, tales como columnas de burbujas y biorreactores de transporte areo. As, por ejemplo, la esterilidad, pH constante, y la temperatura constante son componentes clave de cualquier fermentacin, independientemente de la configuracin precisa del biorreactor. Las configuraciones de columnas de burbujas y biorreactores de transporte areo darles algunas ventajas sobre los ROS. Estos reactores neumticos son ms eficientes que los RTS energa porque la agitacin es proporcionada por la inyeccin de una corriente de --- aire u otro gas si los microorganismos anaerobios estn siendo cultivadas --- en lugar de por un agitador mecnico. Adems, con la eliminacin del eje del mezclador en estas unidades, hay un sitio de menor potencial de entrada de microorganismos contaminantes. Reactores neumticos generan un entorno de menor cizalladura que hacen los ROS. Adems, en los reactores de puente areo, el esfuerzo cortante se distribuye de manera ms uniforme a travs del recipiente que en los RTS. La reduccin de las fuerzas de cizallamiento es importante por las siguientes razones. microorganismos genticamente modificados son a menudo ms susceptibles a la lisis cuando se exponen a tensin de cizallamiento que son organismos no modificados, debido a la carga metablica adicional de la sntesis de una protena extraa a menudo hace que los microorganismos genticamente modificados para formar paredes celulares debilitadas. Una respuesta celular frecuente a las fuerzas de cizallamiento se disminuye la sntesis de todas las protenas celulares, incluyendo la protena recombinante. El esfuerzo cortante puede alterar las propiedades fsicas y qumicas de las clulas de modo que las etapas de procesamiento aguas abajo se vuelven ms difciles de realizar. Por ejemplo, las condiciones de fermentacin inadvertidamente pueden aumentar la cantidad de polisacridos de la superficie de un microorganismo que produce y, como consecuencia, pueden cambiar las condiciones para la cosecha y la lisis eficaz de estas clulas, lo que hace ms difciles de purificar la protena diana. En las columnas de burbujas, el aire se introduce a alta presin cerca de la parte inferior, pero las burbujas ms pequeas se unen en los ms grandes a medida que suben a travs de la columna, lo que lleva a la distribucin desigual de gas. Adems, el uso de aire a alta presin tiende a causar excesiva formacin de espuma en el medio. Estos inconvenientes limitan la flexibilidad o eficaz gama de condiciones de funcionamiento, as como el tamao potencial de columnas de burbujas. Biorreactores puente areo, sin embargo, pueden adaptarse fcilmente para cualquier planta piloto o de los procesos de fermentacin a gran escala. En un reactor de transporte areo, el gas se introduce en la parte inferior de un canal vertical (elevador). Tanto el gas y el flujo de lquido hasta el tubo de subida hasta que llegan a un espacio abierto en la parte superior (gas - separador de lquido), en donde el gas es al menos parcialmente desacoplado del lquido. La Produccin a gran escala de protenas a partir de microorganismos recombinantes 705 lquido desgasificado, que es ms denso que el lquido gasificado, desciende en un canal vertical separada (tubo vertical de bajada) y se mueve a lo largo de la base del reactor hasta que llega a la parte inferior de la tubera vertical. De esta manera, se continuamente se distribuye el fluido de cultivo y las clulas alrededor del biorreactor. Hay dos tipos principales de biorreactores de transporte areo: los que tienen un solo contenedor, con refuerzos internos que crean canales de circulacin de lquido del interior (reactores de bucle interno) (fig. 17.9C) y los que tienen un bucle externo para que el lquido circula a travs de la cultura canales independientes, separados (reactores de bucle externo) (fig. 17.9D). Reactores de transporte areo interno de circuito son de diseo sencillo, pero una vez que se construyen, el volumen y la velocidad de circulacin son fijos para todos los procesos de fermentacin. Por el contrario, el bucle externo de los reactores airlift externa de bucle puede ser cambiado o modificado, por ejemplo, mediante la alteracin de su volumen, para adaptarse a los requisitos de diferentes fermentaciones fcilmente. Biorreactores puente areo son generalmente ms eficiente que columnas de burbujas, especialmente para los ms densos o ms suspensiones viscosas de microorganismos. En los reactores de transporte areo, la mezcla es generalmente mejor, y coalescencia de burbujas no es un problema tan grande como lo es en columnas de burbujas. En extremadamente grandes fermentadores de transporte areo, tales como el fermentador 1.500.000 litros construido por Imperial Chemical Industries, Ltd, en Inglaterra para la produccin de protena de una sola clula, se necesita una cantidad considerable de tiempo para una celular para completar un ciclo completo a travs del reactor. Para evitar que las clulas se conviertan en sustrato agotado mientras estn atravesando el biorreactor, hay mltiples puntos de inyeccin para la introduccin de sustrato a lo largo de la longitud de la unidad.