Reaprender o ABC

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Reaprender o ABC
O correcto desenvolvimento da flor necessita dos genes
ABC e dos genes SEPALLATA (inicialmente
designados AGAMOUS LIKE...)
Nature - Yanofsky et al. 2000
Pela impossibilidade de converter folhas em
rgos florais....
35S::AP3 35S::PI flor com os 2 crculos exteriores
de ptalas e os 2 interiores com estames.

Com o 35S::AP3::GUS surge expresso do GUS em toda a flor mas
no fora da flor


necessrio qualquer outro factor para induzir a
funo de B fora das flores.

(experincias que utilizaram uma construo que
activa a transcrio activation tagging)
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SEP AGAMOUS LIKE...
b) Triplo mutante sep1, sep2, sep3

d) Duplo mutante B e C
A perda de funo dos genes SEP individualmente no exibe nenhum
fentipo notvel, mas uma mutao tripla produz um fentipo igual a
um mutante duplo B e C, ou seja, consiste inteiramente de spalas e
possui um desenvolvimento indeterminado.
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Isto permite fazer 2 concluses:
1 - Os 3 genes SEP so necessrios para o correcto
desenvolvimento das ptalas, estames e carpelos
2 - Estes genes funcionam redundantemente.
- Se realmente for redundante, qual
a vantagem selectiva, a nvel
evolutivo, de manter 3 cpias
funcionais do mesmo gene?
- SEP3 tem diferente expresso de
SEP1 e 2 o que sugere diferente
funo
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Interaces moleculares entre ABC e SEP
1 - A transcrio dos genes independente nos mutantes ABC o RNA dos
genes SEP acumula-se normalmente, e nos triplos sep, a expresso dos genes
ABC normal.
2 Interaco entre protenas as protenas com domnio MADS ligam-se in
vitro como dmeros (homo ou hetero) no entanto in vivo estas combinaes
no so conhecidas.
Ligao - CArGbox
Em Arabidopsis AG liga-se como homodmero ou como
heterodmero com SEP1, mas AP3 e PI s formam
heterodmeros entre si e no com os genes SEP o que exclui
a possibilidade da heterodimerizao como explicao da
necessidade dos genes SEP e classe B para formao de
ptalas e de estames. (2000)
Identificando quais os genes de uma biblioteca de cDNA de flor que
interactuam com o complexo
AP3/PI verificou-se que interagem com AP1 e com SEP3

Assim, possvel que as protenas MADS das flores funcionem
atravs de interaces protena-protena

Como as protenas MADS formam dmeros entre si,
a formao de tetrmeros aumentar a
capacidade de ligao s CArG boxes
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AG no interage com AP3/PI directamente mas apenas
atravs de SEP3

AP1 interage com SEP3 (possuem domnios activadores de
transcrio localizados no domnio C)


E como podem formar homodmeros, um destes dmeros
suficiente para fornecer o domnio de activao do
AP3 -PI

As protenas MADS podem-se associar em complexos
maiores do que dmeros
3 modelos que mostram como as protenas ABC e SEP interactuam umas
com as outras e com o DNA (sequncia conservada CArG box) para
direccionar a transcrio dos genes que determinam a identidade dos rgos
florais.
a - modelo quaternrio onde se postula que o
domnio C-terminal das protenas MADs medeia
a interaco entre os dmeros.
b um factor tercirio interage via domnio C-
terminal, alterando ou especificando a ligao
ao DNA
c os dmeros ligam-se a sequncias CArG box
adjacentes no envolvendo interaces entre
protenas.
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Folhas vegetativas de plantas trangnicas triplos mutantes
35S::PI;35S::AP3;35S::AP1 ou 35S::PI;35S::AP3;35S::SEP3
so transformadas em rgos petalides e nos mutantes

35S::PI;35S::AP3;35S::SEP3;35S::AG
so transformadas em rgos estaminides.
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Isto mostra a existncia de complexos tercirios e
quaternrios de interaces protena-protena como
base molecular do funcionamento do modelo
ABC-SEP
A expresso especfica dos genes SEP3 nas flores,
restringe a aco dos genes ABC s flores.
Nature 2001
LEAFY interage com UFO para
activar os genes da classe B - AP3
e PI

LEAFY interage com WUS para
activar AG
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LFY activa os genes de identidade floral juntamente com um
co-activador, WUS para a classe C e UFO para o gene AP3 da
classe B.
Os mutantes ufo apresentam tambm problemas no
posicionamento dos orgos florais.
WUS episttico para AG no que respeita a determinao
floral, pois WUS necessrio para o meristema manter o seu
estado proliferativo.
Current Biology Nov 2004
SEP4

Mutantes sep4 no apresentam fentipo mas um mutante sep1,
sep2, sep3 e sep4 apresenta os rgos todos tipo folhas.
Isto indica os genes SEPALLATA como responsveis tambm pelo
desenvolvimento das spalas.

SEP4 tambm gene de identidade de meristema floral
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Modelo actualizado de aco dos genes hometicos
florais

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O modelo
QUARTETO
Tambm
actualizado








Nature 2005
Expresso dos mRNAs dos genes ABCE
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Modelo
QUARTETO
Reaprender o ABC
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Flower Development
The Arabidopsis Book,
Number 8 2010.

URL:
http://www.bioone.org
/doi/full/10.1199/tab.0
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Fim do meristema de Inflorescncia. O meristema gasto com a
formao dos carpelos.
AG desliga o organizing center, pois reprime WUS
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WUS e AG - negative feedback loop
WUS activa a transcrio de AG, que por sua
vez reprime a expresso de WUS