CONTENIDO DE CIDOS GRASOS, FENOLES Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE EN

CULTIVO DE CALLOS DE Thevetia peruviana (Pers.) K. Schum

Rincn-Prez, Jack Andrs
1*
, Gutirrez-Miceli, Federico A.
2

1
Estudiante de la Maestra en Ciencias en Ingeniera Bioqumica.
2
Profesor-Investigador en el Instituto Tecnolgico de Tuxtla Gutirrez.
Instituto Tecnolgico de Tuxtla Gutirrez, Carretera Panamericana, km. 1080. C.P. 29050, Tuxtla Gutirrez, Chiapas, Mxico.
*
Autor de correspondencia: jack.andres.rincon@gmail.com
Resumen: El incremento en el consumo de productos industrializados est relacionado con el incremento en la
contaminacin, esto ha llevado a generar investigaciones sobre nuevas fuentes renovables y sostenibles, el cultivo in vitro
surge como una alternativa de obtener productos de inters (en farmacia, medicina, cosmtica, antimicrobial, bioinsecticida
y biocombustible) que son difciles de obtener por sntesis qumica. Se propagaran callos de Thevetia peruviana en medio
Schenk & Hildebrandt (SH) suplementado con 2 mg/L de cido 2,4- diclorofenoxiactico (2,4-D) y 0.5 mg/L de cinetina
(KIN). Se pretende inducir el contenido de cidos grasos y fenoles para lo cual se utilizar un diseo de superficie de
respuesta 3 niveles: 3^2 por triplicado el cual estudiar los efectos de 2 factores cido jasmnico (AJ) y cido abscsico
(ABA) en 27 corridas.
Palabras clave: Elicitacin, cido jasmnico, cultivo in vitro, cido abscsico
Introduccin: La industrializacin de productos como
medicamentos, cosmticos, combustibles y agroqumicos ha
conllevado a que por su elaboracin se est contaminando el
planeta ya que estos son producidos a partir de derivados del
petrleo. Las plantas son una buena fuente de compuestos
sostenibles capaces de igualar o superar a los productos derivados
del petrleo. La planta T. peruviana puede producir ciertos
compuestos que pueden ser utilizados para fabricar medicamentos
para controlar enfermedades cardiacas e inhibicin contra virus de
la inmuno deficiencia humana tipo 1 (HIV-1) (Tewtrakul et al.,
2002). Esta planta tiene principios activos pueden ser utilizados
como alternativa para la fabricacin de jabones y lociones para el
cuidado de la piel. A partir de la semilla de T. peruviana se extrae
aceite el cual puede ser utilizado como biocombustible (Betiku &
Ajala, 2014) y tambin puede ser utilizado como aceite de cocina
(Ibiyemi et al., 1995) Los compuestos fenlicos representan un
grupo importante de metabolitos secundarios en plantas estos
compuestos estn recibiendo gran atencin ya que se cree que por
su actividad antioxidante pueden ayudar a prevenir enfermedades
como el cncer y de problemas. Las propiedades antioxidantes de
compuestos naturales como compuestos fenlicos de plantas son
muy importantes porque pueden ser usados en medicina,
alimentos y cosmticos (Mishra et al., 2012). El presente trabajo
tiene por objetivo analizar el metabolismo de cidos grasos,
fenoles y determinar actividad antioxidante en cultivo de callos de
Thevetia peruviana con el propsito de comprobar la capacidad de
elicitacin del cido jasmnico (AJ) y cido abscsico (ABA) y
adems aportar bases de conocimiento para futuras
investigaciones.
Materiales y Mtodos:
Extraccin de cidos grasos y fenoles
Se tomaran muestras de callos friables de 30 das y sern
deshidratados en un liofilizador a una temperatura constante de -
40C durante 48 h. Para la extraccin se usaran 100 mg de
biomasa seca y se colocara con 50 mL de solvente en ebullicin
durante 1 h y luego ser filtrado y concentrado a 10 mL, utilizando
como solventes metanol para la extraccin de fenoles y hexano
para la extraccin de cidos grasos (Estrada-Zuiga et al., 2010).
Cuantificacin de cidos grasos
Extractos concentrados de hexano sern derivatizados para
producir metil esteres de cidos grasos, cada muestra de
concentrado (0.5 mL) ser esterificada con H
2
SO
4
-MeOH en
ebullicin (1:2; 3mL) durante 3 horas y luego se dejara enfriar y
se transferir a un embudo de separacin. Luego cada muestra se
enjuagara con agua destilada y por ltimo se le adicionara 2 mL
de hexano. Los anlisis cuantitativos sern llevados a cabo por
cromatografa de gases con detector de espectrometra de masas
(Shehata et al., 1979).
Determinacin de fenoles totales
Diferentes concentraciones de cido glico y extractos
metanlicos (100 L c/u) sern pipeteados en tubos de ensayo.
Luego 2 mL de agua destilada se agregaran a cada tubo seguido
por 200 L de reactivo de Folin-Ciocalteu. Despus de 3 min se
adicionara 1 mL de Na
2
CO
3
al 15 % y se incubara en agitacin por
2 h a 24-26 C. La determinacin de cada reaccin se realizara con
absorbancia 760 nm (Slinkard & Singleton, 1977).
Ensayo DPPH actividad antirradical
Se tomaran muestras 250, 125, 50, 25, 10 y 5 mg/mL. Luego 1 mL
de 0.3 mM de solucin de metanol y DPPH se adicionara a 2.5 mL
de las diferentes concentraciones de muestras. La reaccin se
llevara a cabo a temperatura ambiente. Despus de 30 min la
absorbancia se medir a 517 nm (Mensor et al., 2001).
Resultados esperados
Se espera obtener ms del 63 % de lpidos que es lo que sea
reportado hasta el momento en semilla, adems dar el perfil de
cidos grasos, fenoles y su actividad antioxidante, concluyendo
cul es el elicitor ms eficiente para la induccin/acumulacin de
cidos grasos y compuestos fenlicos.
Referencias
Betiku, E., & Ajala, S. O. (2014). Modeling and optimization of
Thevetia peruviana (yellow oleander) oil biodiesel synthesis
via Musa paradisiacal (plantain) peels as heterogeneous base
catalyst: A case of artificial neural network vs. response
surface methodology. Industrial Crops and Products, 53(0),
314322.
Estrada-Ziga, M. E., Arano-Varela, H., Buenda-Gonzlez, L.,
& Orozco-Villafuerte, J. (2012). Fatty acids, phenols content,
and antioxidant activity in Ibervillea sonorae. Revista de
Ingeniera Qumica, 11(1), 89-96.
Mensor, L. L., Menezes, F. S., Leito, G. G., Reis, a S., dos
Santos, T. C., Coube, C. S., & Leito, S. G. (2001). Screening
of Brazilian plant extracts for antioxidant activity by the use of
DPPH free radical method. Phytotherapy Research 15(2),
12730.
Mishra, K., Ojha, H., & Chaudhury, N. K. (2012). Estimation of
antiradical properties of antioxidants using DPPH assay: A
critical review and results. Food Chemistry, 130(4), 1036
1043.
Shehata, A.Y., De Man, J.M. and Alexander, J.C. (1979). A single
and rapid method for the preparation of methyl esters of fats in
milligram amounts for gas chromatography. Canadian
Institute of Food Technology Journal, 3, 85-89.
Slinkard, K., & Singleton, V. L. (1977). Total phenol analysis:
automation and comparison with manual methods. American
Journal of Enology and Viticulture, 28(1), 49-55.
Tewtrakul, S., Nakamura, N., Hattori, M., Fujiwara, T., &
Supavita, T. (2002). Flavanone and flavonol glycosides from
the leaves of Thevetia peruviana and their HIV-1 reverse
transcriptase and HIV-1 integrase inhibitory activities.
Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 50(5), 6305.