Modificacin Estructural y antioxidante de Trigo pptidos modificados por el calor y a la

peroxidacin lipdica Malondialdehdo Producto

Resumen: El trigo los pptidos, los pptidos activos biolgicos derivados de los alimentos,
tiene una serie de acciones biolgicas, incluyendo antiobesidad, antimicrobiano,
angiotensina I y de la enzima de conversin de la efectos inhibitorios en especies de
mamferos. Estudios recientes han demostrado que algunos pptidos trigo puede mostrar el
notable potencial antioxidante contra la peroxidacin de los lpidos o cidos grasos, pero el
efecto de la oxidacin en sus actividades antioxidantes est claro. En el presente estudio,
hemos demostrado que el calor y malandialdehyde (MDA) -oxidado trigo pptidos perder su
la hidrofobicidad de la superficie y reduce el consumo de energa, y muestran una
relativamente baja radical libre de actividad in vitro. Estas modificaciones tambin lugar a la
paulatina formacin de agregados en el trigo p tidos e inducir a ms especies reactivas
de oxgeno (ROS) produccin en vivo. Estos hallazgos indican que la oxidacin pueden
influir en las propiedades funcionales y modificar directamente la estructura de trigo,
pptidos y conducir a la prdida de su potencial antioxidante tanto in vitro como in vivo, lo
que proporciona una nueva explicacin de algunos de los posibles riesgos para la salud de
alimentos oxidados en humanos. Keywords: actividad antioxidante, radicales libres
actividad secuestrante, oxidacin, las especies reactivas del oxgeno, el trigo pptidos.

Introduccin oxidacin de las protenas es una consecuencia natural del metabolismo aerbico de
las clulas. Modificacin oxidativa de residuos de aminocidos de las protenas a menudo
conducen a alteraciones en las protenas funciones tales como gelificacin emulsificacin,
viscosidad, solubilidad, y capacidad de retencin de agua (Wang y Xiong 1998). Oxidacin tambin
se ve facilitado por los procesos, tales como el calor, molienda, trituracin, en el que se introduce
oxgeno molecular y mezclar los oxidantes sensibles con los componentes de los alimentos
(Korhonen y otros 1998).
Daos directos de las protenas por especies reactivas de oxgeno (ROS) ha sido bien
establecido en numerosos estudios biomdicos que involucran los tejidos vivos en
patolgico o extraordinarias condiciones fisiolgicas , como se ha comentado en varios
estudios recientes (Dean y otros, 1997; Stadtman y Berlett 1997). Los agentes oxidantes
presentes en los tejidos musculares son capaces de generar un nmero de ROS, que lleva a
las modificaciones oxidativas del genoma, protenas, carbohidratos estructurales, y los
lpidos, en este ltimo caso, se produce peroxidacin lipdica. Tappel (1980) inform de que
malandialdehyde (MDA) oxidativo generado durante destruccin de hidroperxidos lipdicos
pueden reaccionar con grupos amino de las protenas y producir fuertes intermolecular
enlaces cruzados de la base de Schiff. Por otra parte, reacciona con bases del ADN, la MDA
puede causar lesiones mutagnicas que pueden estar involucrados en la patologa de
diversas enfermedades en humanos ( Spiteller 2001).
Por lo tanto, es razonable que tenga en cuenta que estos cambios oxidativos en protenas,
tienen como consecuencia la prdida de funcionamiento y calidad nutricional de productos
alimenticios terminados, se podra causar daos fisiolgicos en humanos. Por lo tanto, una
mayor investigacin en esta rea est garantizado.
Recientemente, hay un inters creciente para identificar propiedades antioxidantes en
muchas fuentes naturales. Algunos pptidos derivados de protena hidrolizada alimentos
han demostrado tener notables actividades antioxidantes contra la peroxidacin de los
lpidos o cidos grasos (Kitts y Weiler 2003). Trigo de hidrolizados proteicos utilizados como
aditivos alimentarios tradicionales se sabe que estn asociados con diversas acciones
fisiolgicas (Tsezi y otros 2005). Hay evidencia que indica que el germen de hidrolizados
proteicos (WGPH), preparado con Alcalase2.4L FG mostr una notable actividad
secuestrante de radicales libres , tales como DPPH, superxido, radicales hidroxilo.
Adems, WGPH tambin exhibieron una notable reduccin de la alimentacin y el fuerte
efecto quelante de Fe2+ (Zhu y otros 2006). Estos datos proporcionan evidencia de que
algunos pptidos trigo muestran el potencial antioxidante in vitro. Sin embargo, poco se
conoce sobre los efectos de las modificaciones oxidativas en el trigo los pptidos, o en su
actividad antioxidante total . Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar los efectos
de la modificacin oxidativa de pptidos trigo despus de la exposicin al calor o
peroxidacin lipdica (MDA oxidado), y los efectos de estos pptidos oxidado en el radical
libre de actividad el anlisis in vitro e in vivo .

MATERIALES Y METODOS
Materiales
Trigo los pptidos fueron adquiridos de Shanghai Bangcheng Biotech Co. , Ltd. (Shanghai,
China). ,-difenil-- picrilhydrazilo (DPPH), 2-desoxi-d-ribosa, cido ascrbico, 5-amino-2,3
-dihidro-1,4-phthalazinedione (luminol), 1 -anilino-8-naph-thalenesulfonate sal magnsica
(ANS), peroxidasa de rbano picante (HRP), las normas y los pptidos de cromatografa de
lquidos de alta resolucin (HPLC ) fueron adquiridos De Sigma Chemical Co. (St. Louis,
Missouri, EE.UU. ). Todos los dems productos qumicos utilizados en los experimentos
fueron de grado analtico.

Modificacin de trigo los pptidos con calor y MDA dos sistemas de oxidacin se utilizaron
en el presente estudio. Trigo seco pptidos se calienta a 100 por 30, 60 y 90 minutos,
respectivamente. A continuacin, secado al aire y almacenado en 4. La preparacin de
MDA solucin madre (200 mM) y la modificacin de los pptidos con trigo oxidados MDA
estaban de acuerdo con el mtodo descrito por Wu y otros (2009). Brevemente, el trigo
pptidos solucin (20 mg/mL, suspendido en 0,05 mol/l de tampn fosfato, pH 7,4 ) se
mezcla con una serie de diferentes concentraciones de MDA, y, a continuacin, cerrar
hermticamente y agitar por incubar 25 en la oscuridad durante 24 h. La concentracin
final de MDA fue de 0 (control), 0.2 , 20 y 200 mm . Despus de la incubacin, la temperatura
de los pptidos solucin se ajust a 0 a 4 por bao de hielo. El exceso que no ha
reaccionado MDA fue retirado de los pptidos tras la incubacin por un 3-d 4 en dilisis
contra agua desionizada, la oxidada pptidos trigo soluciones fueron liofilizados y
almacenados a 4C.

Medicin de la hidrofobicidad de la superficie del la hidrofobicidad de la superficie de trigo
pptidos muestras se determinaron como se describe anteriormente (Sorgentini y Wagner
1999). Muestra se dispers en tampn fosfato 0,01 M (pH 8,0 ) para obtener 0,3 mg/mL
protena. Una serie de diluciones de esta dispersin se hicieron con el mismo buffer, para
obtener una amplia gama de concentraciones de protenas (0,05 a 0,3 mg/mL). Las
soluciones de muestras se centrifugaron a 10000 x g durante 15 min (4) y 4 mL de
sobrenadante reaccion con 100 l de ANS (8 mm de 0,01 Mphosphate buffer, pH 8.0 )
durante 15 minutos. La relativa intensidad fluorescente (RFI) de cada solucin de muestra se
midi con un fotn de escrutinio spectrofluorometer FluoroMax-3 (Horiba Jobin Yvon Inc. ,
Edison, N. J. , EE.UU.). De excitacin (390 nm) y de la reduccin de las emisiones (488 nm)
cortes de 5 nm para obtener el fluorospectrum. El RFI los valores de las concentraciones de
protenas y la pendiente (So = RFI/ %protenas) de la lnea de regresin fue designada como
la hidrofobicidad de la superficie. Por triplicado el trigo pptidos se midieron las muestras .
Reduce el consumo de energa el poder reductor ensayo de trigo pptidos se midi segn el
mtodo de Oyaizu (1986). Un volumen de 2 mL de cada una de las muestras se aade a 2 mL
de buffer 2,5 Mphosphate (pH 6.6 ) y 2 ml de 1% ferricianuro potsico. La mixturewas
incubados a 50 de 20 min. a continuacin, 2 mL de 10% cido tricloroactico (TCA) fue
aadido a la mezcla de reaccin. Un volumen de 2,5 mL de cada mezcla se mezcla con 2,5 ml
de agua destilada y 0,5 mL de 0,1 % cloruro frrico en un tubo de ensayo. Despus de 10
minutos, el tiempo de reaccin la absorbancia de la solucin resultante se midi en 700 n.
m. Por triplicado las pruebas fueron llevadas a cabo por cada una de las muestras. Una
mayor absorbancia de la mezcla de reaccin se indica una mayor reduccin de la
alimentacin .