4-1

4 Materiales y Mtodos

En esta seccin se presentarn los materiales y mtodos de las distintas
etapas del proceso, que van desde la extraccin del aceite, la transesterificacin,
la caracterizacin de los productos obtenidos por sta reaccin y la
comprobacin de los productos (biodiesel y glicerol). El diagrama de bloques de
este procedimiento se presenta en la Figura 4-1.

Figura 4-1.- Diagrama de bloques del proceso.
4-2
4.1 Proceso de extraccin del aceite de Higuerilla (Ricinus
communis L.)

Las plantas de Higuerilla se presentan en forma de arbustos con un tamao
de 5-6 m. Se caracterizan por ser glabras (lampias), por tener tallos huecos que
se ponen duros y leosos en la parte baja de la planta, por tener una corteza
suave, por vivir uno o varios aos y por su savia que es clara y acuosa. Tambin
cuentan con estpulas largas que se unen a la vaina y cubren a las yemas. Los
pecolos son de 12-30 cm, las hojas de 20 a 35 cm o ms de largo y ancho. Las
semillas tienen un tamao de 2-3 cm con una cubierta espinosa firme pero
herbcea y son explosivamente dehiscentes (dcese cuando la parte exterior del
fruto de la planta se abre naturalmente para que salga la semilla). Cuentan con 3
almendras por semilla con tamao de 1.5-2.5 cm, moteadas, oblongas, con una
carncula sobresaliente (Figura 4-2). [19]

La composicin de cidos grasos en el aceite de Higuerilla es la siguiente
[21]:
cido Palmtico: 1 - 3 %
cido Esterico: 1-3 %
cido Olico: 2-8 %
cido Linolnico: 52-56 %
cido Linolico conjugado: 30-33 %

La semilla de Higuerilla contiene aceite el cual no se puede extraer con
simplemente triturarlo, por lo que hay que llevar a cabo un proceso de extraccin
el cual permita despojar a la semilla del aceite que se encuentra contenida en
ella. Se sabe que esta semilla contiene aceite por la literatura consultada y
porque al momento de comprimirla, ya sea con la palma de la mano o los dedos,
se experimenta una sensacin grasosa.
4-3





Figura 4-2.- Planta de Higuerilla.

4-4
4.1.1 Expeler

El Expeler es un extrusor destinado a la compresin de semillas para
extraccin de aceite. La extrusin debe realizarse con una combinacin de
cscara-almendra para que se forme una pasta dura que se pueda comprimir,
sta pasta beneficia al hecho que se compacta ms, a diferencia si fuera pura
almendra, y propicia a una extraccin de aceite. El Expeler utilizado es un Komet
modelo CA 59G, IBG Monforts GmbH & Co., Mnchengladbach, Alemania
(Figura 4-3), el cual cuenta con un embudo donde se vierte la muestra, una
manija que hace girar un tornillo el cual a su vez comprime la muestra al ir
avanzando por el conducto, una serie de orificios por donde se drena el aceite, y
los dados (abertura del orificio de salida) por donde sale la pulpa o torta sin
aceite; los dados varan del 1 al 5, teniendo el 1 una abertura de 4 mm, el 2 de 5
mm, el 3 de 6 mm, el 4 de 8 mm y el 5 de 10 mm siendo la ms grande. Este
modelo es manual, no cuenta con rotor elctrico.


Figura 4-3.- Expeler de tornillo.
4-5
Una evaluacin preliminar fue realizada en esta etapa del proceso de
investigacin. La metodologa consta de los siguientes pasos: obtencin de la
materia prima, clasificacin preliminar, pesaje, reduccin de tamao,
clasificacin posterior y mezclas; los cuales se explicarn a continuacin.

Obtencin de la materia prima: Esta consisti en semilla que se recogi
del arbusto que lleva el nombre de Higuerilla (Ricinus communis), un 80
% del total de la materia prima utilizada se obtuvo en la zona de La Mora
en Banamichi, Sonora, y el 20% restante en la colonia Soleil Residencial
en Hermosillo, Sonora.

Clasificacin preliminar: Una vez que se contaba con la materia prima se
realiz una separacin de las semillas de la basura (piedras, ramas y
tierra), as como de la almendra que ya haba salido de la cscara de la
semilla. La semilla y la almendra separada se depositaron en bolsas, para
llevar un control y disponer de ellas.

Pesaje: Aqu bsicamente se tomo la semilla clasificada anteriormente y
se hicieron 5 muestras de 500 g cada una, para despus de ser trituradas
contabilizar la relacin de cscara a almendra con la que cuenta la
semilla.

Reduccin de tamao: En esta etapa se utiliz un molino manual para
triturar cada una de las 5 muestras por separado (Figura 4-4). El molino
contaba con una abertura de trituracin de 4mm, por lo que toda semilla
quedaba triturada, mas no destrua la total integridad de la almendra, lo
que facilitaba la eliminacin de la cscara en la clasificacin posterior.


4-6
Clasificacin posterior: Similar a la clasificacin preliminar, solo que en
esta etapa se separ la cscara de la semilla de la almendra de cada
muestra de 500 g, lo cual facilitara el siguiente paso. Se utilizaron
tamices con aberturas 7/16'', 5/16'', 1/4'' y malla 100 (sistema ASTM) con
el fin de facilitar el proceso de clasificacin (Figura 4-5). Se contabilizan
los pesos de la almendra y cscara de cada muestra y se promedian las 5
muestras. Se determin el % de humedad de la semilla (AACC, 1990;
mtodo 44-19).

Mezclas: Esta es la parte final del primer mtodo utilizado. Una vez que
ya se obtuvo la cscara separada de la almendra se prosigui a extraer el
aceite en el Expeler. Se realizaron mezclas de estas dos en base al %
que contena la semilla de cscara y almendra, que para este caso fue
una relacin de 1:1 de cscara y almendra.



Figura 4-4.- Molino manual para nixtamal y granos.
4-7


Izquierda: malla 100 (ASTM). Derecha: abertura 1/4''
Figura 4-5.- Tamices.


4.1.2 Extraccin por solventes

La extraccin por solventes es una operacin unitaria que consiste en
utilizar un solvente para extraer triacilgliceroles de la semilla. Se da una difusin
del solvente en la materia prima que contiene al aceite, dando una solucin de
aceite en solvente, despus se recupera el solvente por evaporacin y
condensacin del mismo, lo cual deja al aceite separado. Este ltimo mtodo se
escogi ya que el utilizado con el Expeler no proporcion resultados
satisfactorios. En la Figura 4-6 se puede apreciar un equipo Soxhlet con 6
unidades (matraces, lixiviadores, enfriadores), en la cual todos los componentes
son Pyrex, a nivel laboratorio para la extraccin de aceites por medio de
solventes. Como solvente se utiliz hexano (3 lts) marca J. T. Baker, con una
pureza de 99.8%, y ter de petrleo (3 lts) marca Analit, con una pureza de
99.9%; adems se utiliz hielo y 6 dedales.
4-8


Figura 4-6.- Equipo para extraccin por solventes.



En este mtodo al igual que el del Expeler se hizo una evaluacin
preliminar de la metodologa. Para poder empezar a hacer la extraccin de
solventes se debe preparar la muestra como se realiz en los pasos 1-5 del
mtodo con el Expeler, por ello se omitirn en este apartado. El procedimiento
consiste en lo siguiente:

1. Se introduce la muestra de almendra pura o con cscara, esto dependa
de cuanto se mezcl (cscara-almendra) en las pruebas del Expeler, en
los dedales hasta que el cupo fuera mximo. Para evitar que se
derramara la muestra se sellaba el dedal con grapas y se colocaba en el
lixiviador.

4-9
2. Posteriormente el solvente, hexano o ter de petrleo, se introduce en el
matraz y en el lixiviador manteniendo una relacin de 2:1
aproximadamente, 200 ml en el matraz y 100 ml en el lixiviador.

3. Al momento de terminar de armar el Soxhlet se hace recircular agua
helada (para esto se utiliza el hielo) debido a que la temperatura que
alcanzaba el solvente al momento de evaporarse eran mayores a 60 C y
el agua a temperatura ambiente no alcanzaba a condensar todo el
solvente por lo que haba prdidas considerables de solvente.

4. Ya encendido, se dejaba recircular hasta que se extrajera el mximo
aceite posible en la mnima cantidad de tiempo, 5 horas promedio. Este
tiempo se estableci en 5 horas, debido a que en un tiempo mayor se
obtena una cantidad considerablemente menor a la obtenida en las
primeras 5 horas.

5. Al finalizar las 5 horas haba que retirar el dedal con la muestra y obtener
la mayor cantidad de solvente para reutilizarlo. Lo que ya no se poda
recuperar, debido a que los vapores no lograban ascender hasta el
enfriador, haba que evaporarlo, por lo que se desarmaba el Soxhlet y se
dejaba solo el matraz en la placa de calentamiento para terminar de
despojar al aceite del poco solvente que restaba.

6. Una vez el solvente evaporado de los 6 matraces se proceda a juntarlo
en un vaso de precipitado. La materia prima una vez despojada de la
mayora del aceite, se guardaba por si posteriormente se requera mas
aceite, el cual se tendra que someter a un tiempo de extraccin mayor.

4-10
4.2 Transesterificacin

Esta etapa es fundamental en el proceso para obtener biodiesel. Consiste en
sustituir un alcohol de cadena larga (glicerol), por uno de cadena corta, como
metanol, mediante el uso de un catalizador, como hidrxido de sodio, para
obtener los steres deseados. El catalizador no se recupera sino que produce
jabn, debido a una reaccin de saponificacin. El equipo utilizado consisti de
un regulador de temperatura PolyScience modelo 210, un reactor de 600 ml
con chaqueta de calentamiento Schott Duran conectado a este regulador, un
condensador el cual impide que escapen los vapores de metanol, un termmetro
para monitorear la temperatura deseada, un agitador, una placa de agitacin y
un matraz Pyrex de 125 ml de capacidad (Figura 4-7).


Figura 4-7.- Equipo para llevar a cabo la reaccin de transesterificacin.
4-11
Antes de iniciar la transesterificacin se realizaron ciertos clculos para
obtener algunos datos, todos ellos para facilitar cualquier operacin que los
implicara. A continuacin se presentan cada uno de estos.

La densidad del aceite de Higuerilla obtenida en esta investigacin es de
0.97678 g/cm
3
a temperatura ambiente, comparada a la de la literatura (0.9707
g/cm
3
) es similar. El clculo de la densidad se llev a cabo con un picnmetro de
30 ml y una balanza analtica Mettler Toledo modelo AB204-S. Adems se
determin que 8.339x10
-5
moles de cidos grasos libres son los que contiene 1 g
de este aceite, es decir se requirieron de 3.33573x10
-3
g de NaOH por cada
gramo de aceite para despojar a los cidos grasos libres. Esta ltima medicin
se realiz al agregar agua y unas gotas de fenolftalena a un matraz con una
muestra de aceite en constante agitacin, la cual se titul con hidrxido de sodio.
El hidrxido de sodio utilizado es la cantidad de cidos grasos libres con los que
cuenta el aceite debido a una reaccin de neutralizacin entre el cido y la base.

Las cantidades de metanol (marca Fermont, con una pureza de 99.9%) e
hidrxido de sodio (marca PQF, en forma de lentejas, con una pureza de 97%)
utilizadas para hacer la mezcla eran de 75 ml y de 0.1-0.5 g respectivamente. De
esta mezcla se tomaba una cantidad que oscilaba entre 4 y 60 ml, y se inclua
en el reactor donde se llevaba a cabo la transesterificacin con una cantidad de
aceite de 25-60 ml. La temperatura utilizada fue de 61 C aproximadamente
dado que se quera evitar que el metanol se evaporara en gran medida, su punto
de ebullicin es 64.7 C, aunque el sistema estuviera cerrado porque el tiempo
contacto de esta mezcla metanol-hidrxido de sodio debe ser el mayor posible
para obtener mejores resultados, tambin se utiliz un agitador para favorecer el
contacto de esta mezcla con el aceite. El tiempo de transesterificacin fue de 4
horas. El tiempo de evaporacin de remanente de metanol fue de 1 hora o hasta
que todo se evaporara, esto dependa de la cantidad de metanol que se utiliz,
entre ms cantidad mayor el tiempo. El remanente se evaporaba dentro de una
campana de extraccin para impedir la inhalacin y/o contacto con estos gases.
4-12
4.3 Caracterizacin del biodiesel

A travs de la caracterizacin se pueden conocer las propiedades fsicas y
qumicas de los compuestos, como el biodiesel. En este apartado se analizarn
densidades y viscosidades a diferentes temperaturas, as como el poder
calorfico del biodiesel. Tambin se analizarn las viscosidades y densidades del
agua destilada, diesel de petrleo y aceite de higuerilla sin procesar, con el fin
de analizar todas las muestras bajo el mismo procedimiento. Las densidades y
viscosidad del agua destilada se utilizaran como referencia para calcular la
viscosidad relativa de las dems sustancias.

El equipo utilizado para medir densidad y viscosidad consisti de
picnmetros de diferente volumen (10, 25, 30 ml) en funcin de la disponibilidad
de muestra, un viscosmetro de Cannon-Fenske, una balanza Sartorius modelo
PT-120, un bao a temperatura constante CANNON Instrument Company
modelo CT-1000 y un termmetro. El equipo ya montado se puede apreciar en la
Figura 4-8.



Figura 4-8.- Equipo para medicin de densidades y viscosidades.

4-13
La viscosidad y densidad del biodiesel se crea que podran variar
dependiendo de si cuenta o no con cidos grasos libres, por lo que para saber si
afectan o no dichos cidos se hicieron las mediciones de estas propiedades. La
forma de remover los cidos grasos libres consisti en hacer un lavado del
biodiesel con agua destilada en una proporcin de 1:1. El proceso inicia agitando
las fases de agua destilada y biodiesel por 3 minutos (tiempo suficiente para
mezclar las fases), despus se remueve el exceso de agua y se centrifuga; una
vez centrifugado, utilizando una pipeta se succiona el biodiesel sin cidos grasos
libres del jabn. La centrifugacin se llev a cabo utilizando una centrfuga
Baxter modelo Biofuge 17 R, a una velocidad de 7900 rpm durante 10 min por
cada muestra analizada (Figura 4-9).


Figura 4-9.- Centrfuga Baxter, modelo Biofuge 17 R.

Por otra parte se midi el poder calorfico del biodiesel con y sin cidos
grasos libres para compararlos entre s, y con el diesel de petrleo. El equipo
utilizado fue un calormetro que consiste de un matraz de bola con fondo plano,
200 ml de agua destilada, papel aluminio, una mecha, un picnmetro
4-14
(contenedor de biodiesel) y un termmetro (Figura 4-10). El experimento se
realiz de manera sencilla, solo haba que notar el cambio de temperatura en el
agua, el cambio de masa en el biodiesel y utilizar la frmula siguiente:

(1)

donde Q es el calor ganado, Cp es la capacidad calorfica, m la masa y T es el
cambio de temperatura. Se utiliz un tiempo de 4 minutos para todas las
pruebas realizadas, con el fin de apreciar un cambio de temperatura notorio en
el agua; adems se realizaron pruebas con etanol para conocer la prdida de
calor aproximado en el sistema utilizado. Con estas prdidas se puede calcular
el total de energa liberada por el biodiesel.


Figura 4-10.- Calormetro.
4-15
4.3.1 Anlisis estadstico

Los valores obtenidos del estudio de viscosidad se analizaron mediante la
prueba t de Student para comprobar si existen o no diferencias estadsticamente
significativas entre las medias de los datos para las muestras de biodiesel con y
sin cidos grasos libres. Para distinguir esta diferencia entre medias, fue
seleccionando un nivel de significancia de 0.05 (p<0.05). La determinacin de
este resultado se hizo por triplicado. Todos los anlisis fueron realizados con el
paquete estadstico G-Stat Student versin 2.0. [20]
4-16
4.4 Comprobacin de productos

Un paso importante en el desarrollo de esta investigacin es el hecho de
saber si ocurri algn cambio del aceite a productos en el proceso de
transesterificacin, por lo que para comprobarlo se recurri, para el caso del
glicerol, al mtodo de cromatografa lquida (HPLC, high performance liquid
chromatography) utilizando un detector de ndice de refraccin de un equipo
HPLC marca Varian (Figura 4-11) con una columna Aminex modelo HPX-87P
y un integrador marca Shimadzu modelo C-R3A. Para el caso del biodiesel se
utiliz el mtodo de espectroscopa infrarroja, mediante un espectrmetro marca
Perkin Elmer modelo Spectrum GX, con la caracterstica que es un sistema FT-
IR (infrarrojo-transformada de Fourier).


Figura 4-11.- Equipo de cromatografa liquida (HPLC).


4-17
Previo a la determinacin de la presencia de glicerol, se hizo una curva de
calibracin a partir de la preparacin de 5 muestras, con concentraciones de
21.676, 17.3408, 13.0056, 8.6704 y 4.3352 g/L de glicerina marca Racel,
qumicamente pura. Una vez preparadas las muestras se procedi a inyectarlas
al HPLC en orden creciente de concentracin en intervalos de 5 minutos
aproximadamente con una cantidad de 20 L por muestra. El flujo de la fase
mvil se estableci en 0.45 ml/min, la temperatura de la columna fue de 55 C, la
presin de 80 atm, el detector de ndice de refraccin trabaj a 35 C; la
impresin se hizo con un factor de atenuacin de 10, una velocidad de impresin
de datos de 2 mm/min y un tiempo de espera de 1 hora para obtener resultados.

El cromatograma para la realizacin de la curva de calibracin se
presenta en la Figura 4-12. Cada uno de los picos indica una muestra,
presentadas de arriba a abajo es de menor a mayor concentracin, y el nmero
representa el tiempo en minutos de cuando se detect despus de haber sido
inyectada la muestra. Para elaborar la curva de calibracin tambin se tom en
cuenta el rea bajo cada curva presentadas en el cromatograma, la informacin
se encuentra en la Tabla 4-I. Con estos datos y las concentraciones se hizo una
grfica (Figura 4-13) donde se presenta la curva de calibracin, la ecuacin de la
lnea de tendencia y el coeficiente de correlacin lineal. Cuando el coeficiente
cuenta con una proximidad a 1, refleja resultados precisos debido a que la
relacin de las dos variables sigue un comportamiento lineal.

4-18

Figura 4-12.- Cromatograma de glicerol para curva de calibracin.




Tabla 4-I.- rea de glicerol bajo la curva presentada en el cromatograma.
Muestra Glicerol Tiempo (min) Concentracin (g/L) rea (ua)
1 27.018 4.3352 4162567
2 34.652 8.6704 8162679
3 40.135 13.0056 11982062
4 45.238 17.3408 12907212
5 49.602 21.676 20178520
ua = unidades arbitrarias


4-19





ua = unidades arbitrarias
Figura 4-13.- Curva de calibracin del glicerol.





Se descartaron los valores de la muestra con concentracin 17.3408 g/L
ya que hubo un error al momento de crear la mezcla y no se lleg a esta
concentracin sino una cercana a 13.0056 g/L. La finalidad de realizar esta
curva de calibracin es que sirve para encontrar la concentracin de glicerol que
contienen las muestras que resultaron de la transesterificacin, utilizando solo el
rea bajo la curva que reporta la impresin del HPLC junto con el integrador.

4-20
Se prepararon 3 muestras para determinar la concentracin de glicerol,
agregando una masa de 1.0452 g, 0.8054 g y 1.8738 g de la fase ms densa de
la transesterificacin (Figura 5-3) obtenida de las corridas 3T, 4T y 5T (T de
transesterificacin) respectivamente a un volumen de 100 ml de agua destilada,
cuyas concentraciones eran de 10.452, 8.054, 18.738 g/L respectivamente. Para
poder utilizarlas en el HPLC necesitan tener un pH de 6-7 para que no afecte al
equipo. Estas muestras tenan un pH alrededor de 9.0 debido a que an tena
NaOH en esa fase, para reducirlo se utiliz HCl 4 M en pequeas cantidades. Al
momento de analizarlas se utilizaron los mismos parmetros que para la
elaboracin de la curva de calibracin, la diferencia fue el tiempo, ahora solo era
de 35 min dado que se espera que los picos se obtengan a los 27 min despus
de haber sido ingresada la muestra.

Para el caso de los metilsteres (biodiesel), se utiliz el mtodo de
espectroscopa infrarroja que consiste en generar un haz de luz infrarroja y
dividirlo en 2. Uno pasa a travs de la muestra y el otro por una referencia que
puede ser una sustancia en la que esta disuelta la muestra, o las 2 placas
prensadas sin muestra de referencia; ambos haces se devuelven al detector,
pero antes pasan por un separador que alterna cual de los dos haces pasa por
el detector. Las seales se comparan y se registra la cantidad de energa
absorbida en cada longitud de onda. Esto puede lograrse usando una
transformada de Fourier para medir todas las longitudes de onda a la vez. A
partir de esto, se puede trazar un espectro de transmitancia o absorbancia, el
cual muestra a cuales longitudes de onda la muestra absorbe el haz de luz
infrarroja, y permite una interpretacin de cuales enlaces estn presentes.

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