UNIVERSIDAD DE LA SABANA

FACULTAD DE MEDICINA
MORFOFISIOLOGIA II
FISIOLOGIA SANGUINEA
DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR
(VSG), EL HEMATOCRITO, CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA EN LA
SANGRE Y CONTEO DE CELULAS ROJAS Y BLANCAS DE LA SANGRE.
1. PRERREQUISITOS
I Composicin qumica de la sangre.
II Propiedades fsicas de la sangre
III Fisiologa del glbulo rojo
2. COMPETENCIAS A DESARROLLAR DURANTE LA PRCTICA
I. Realizar la toma de muestra de sangre venosa.
II. Determinar la !" #m$todo seg%n &introbe'
III. (edir el )ematocrito #microm$todo con tubo capilar'
I. Determinar la concentracin de *emoglobina en la sangre #m$todo de la
cianometa*emoglobina o de Drab+in'.
3. PROCEDIMIENTOS
I TOMA DE LA MUESTRA DE SANGRE VENOSA
a' (,-.RI,/.!0
1"uantes desec*ables
12eringa desec*able de 3ml con aguja.
1-orniquete
1,lgodn 4 alco*ol antis$ptico
1-ubo de ensa4o #con anticoagulante .D-, en cantidad suficiente para 3 ml de sangre'
b' R.,C-I5!0
1,nticoagulante .D-,0 678 ml de una solucion al 869 #p:v' para cada 3 ml de sangre.
c' PR5C.DI(I.;-50
1 ,plique el torniquete sobre el brazo del voluntario a quien se le va a e<traer la
sangre7 con una presin moderada7 4 *aga que el voluntario apriete 4 afloje el
pu=o varias veces.
1 .scoja una vena adecuada en el pliegue del codo 4 desinfecte con algodn
embebido en alco*ol la piel sobre la vena.
1 Deje secar el alco*ol 4 luego puncione la vena7 teniendo cuidado de que el bisel
de la aguja quede *acia arriba7 *asta cuando encuentre retorno sanguneo *acia
la jeringa.
1 !uccione la sangre *acia la jeringa lentamente7 4 cuando *a4a llenado
apro<imadamente > ml7 retire lentamente el torniquete mientras termina el
llenado de la jeringa.
1 Retire cuidadosamente la aguja de la vena 4 aplique una torunda !"# de
algodn sobre el sitio de puncin.
1 Retire con prontitud la aguja de la jeringa 4 transfiera cuidadosamente la sangre
al tubo con .D-,7 mezclando varias veces.
1 Desec*e la aguja en el guardi?n. Desec*e la jeringa 4 las torundas de algodn en
el recipiente rojo. Desec*e el empaque de las jeringas en la caneca verde.
II DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION
GLOBULAR (VSG).
1 P$%&"%'%() .n la sangre a la cual se le *a a=adido anticoagulante7 los glbulos
rojos sedimentan *asta formar una columna empaquetada en la parte inferior del
tubo7 fenmeno conocido como eritrosedimentacin7 debido a la ma4or
densidad eritrocitaria con respecto al plasma #8.6@>18.88A g:ml 4 8.6B318.6BC7
respectivamente'. /a velocidad con que esto sucede se llama7 velocidad de
sedimentacin globular (VSG)
.<isten tres grandes factores que determinan la !"0 #8' Formacin de
agregados eritrocitarios en pila de monedas #Drouleau<E'7 #B' concentracin de
fibringeno en el plasma 4 #F' concentracin de alb%mina en el plasma.
#8' Formacin de rouleau<0 el plasma se opone al movimiento de sedimentacin
globular7 de forma directamente proporcional a la viscosidad plasm?tica 4 al
?rea de eritrocitos en contacto con el plasma. ,l formar una pila de varios
eritrocitos7 al ?rea de contacto se reducir?7 disminu4endo la resistencia
plasm?tica a la sedimentacin. .sta formacin de columnas eritrocitarias7 es
el principal factor que aumenta la !"7 4 depende de cambios en el plasma
que disminu4an las fuerzas electrost?ticas de repulsin que *abitualmente
e<isten entre los eritrocitos. Cambios en el conteo de eritrocitos tambi$n
modifican la formacin de rouleau<7 siendo m?s r?pida entre menos
eritrocitos e<istan 4 viceversa.
#B' Concentracin de fibringeno0 .l fibringeno disminu4e las fuerzas
electrost?ticas de repulsin entre eritrocitos7 favoreciendo la formacin de
rouleau<7 4 por lo tanto la !" aumenta en relacin casi lineal 4
directamente proporcional con la concentracin plasm?tica de fibringeno.
.l fibringeno7 junto con otras protenas como la protena C reactiva7
ferritina7 ceruloplasmina7 entre otras7 conforma el grupo de las protenas de
respuesta aguda7 por su aumento agudo e inespecfico ante da=o tisular 4
procesos inflamatorios7 con el consecuente aumento de la !". !in embargo
el fibringeno tambi$n se eleva durante la gestacin7 lo cual se relaciona con
aumento de la vsg en mujeres gestantes.
#F' Concentracin de alb%mina0 /a alb%mina retarda la !" al incrementar la
densidad plasm?tica. ,s7 en enfermedades inflamatorias tiende a disminuir la
concentracin de alb%mina7 mientras que enfermedades *ep?ticas o en estado de
desnutricin crnica7 disminu4e su produccin 4 en enfermedades renales
aumenta su p$rdida7 conllevando a aumento de la !".
/a !" tiene tres etapas definidas0 #8' un periodo inicial de algunos minutos en la cual
no *a4 sedimentacin7 pero se forma el rouleau<.
#B' un periodo entre F6 minutos 4 F *oras7 en el cual sucede la sedimentacin a una tasa
pr?cticamente constante.
#F' un periodo final con una tasa lenta de sedimentacin7 con el final empaquetamiento
globular en el fondo del tubo. /a etapa B es la m?s significativa7 por lo cual se usa en la
pr?ctica clnica el valor de !" al cabo de la primera *ora. .n el laboratorio la !" se
mide como la longitud de la columna de plasma que se encuentra por encima de la
columna de c$lulas rojas. Por consiguiente la !" se e<presa como mm:*ora.
TABLA 1
VALORES DE REFERENCIA DE VSG, M*TODO DE +INTROBE.

Nios (Hasta los 10 aos) 0-10 mm/1a hora
Hombres menores de 50 aos 0-10 mm/1a hora
Mujeres menores de 50 aos 0-16 mm/1a hora
Mujeres gestantes 0-30 mm/1a hora
Hombres mayores de 50 aos 0-0 mm/1a hora
Mujeres mayores de 50 aos 0-30 mm/1a hora

1D!,!$-%&#"%.& /! 0# VSG.
(G.!-R,0 1sangre venosa anticoagulada con .D-,
(,-.RI,/.!0 1-ubo de eritrosedimentacin seg%n &introbe. .s un tubo de vidrio7 de
8873 cm de largo7 4 F mm de di?metro interno con escala en milmetros a lo largo del
tubo.
1C?nula de &introbe. .s una aguja met?lica roma7 de 83 cm de largo para llenar los
tubos de eritrosedimentacin con la a4uda de una jeringa.
12eringa #de vidrio o de pl?stico'
1!oporte para tubos de &introbe.
1Reloj.
1 "uantes desec*ables
1 -orundas de algodn
PROCEDIMIENTO)
a' Coloque la c?nula de &introbe en la jeringa.
b' !uccione apro<imadamente 873 cm de sangre7 manteniendo vertical la jeringa.
c' /lene el tubo de &introbe de sangre. Para esto introduzca la c?nula *asta el fondo del
tubo 4 e<pulse lentamente la sangre7 mientras que simult?neamente saca la c?nula7
cuidando que no queden burbujas de aire dentro del tubo 4 evitando que se riegue la
sangre. /lene el tubo *asta la marca D6E superior. !i *a4 e<ceso de muestra por encima
de este valor7 retire el e<ceso con un poco de algodn.
;5-,0 .ntre muestra 4 muestra lave la jeringa 4 la c?nula7 primero con agua corriente
4 luego con (01"%.& #0%&# antes de la siguiente determinacin.
d' Coloque el tubo en el soporte para tubos de &introbe7 cuidando que quede en estricta
posicin vertical.
e' Registre el tiempo 4 mida la eritrosedimentacin cada 83 minutos7 *asta completar H6
minutos de lectura. /a !" es el n%mero de mm de plasma libre que van quedando por
encima de la columna de eritrocitos.
f' )aga unta tabla 4 una grafica de la !" contra el tiempo.
g' ,nalice los datos obtenidos.
2I&,!$'$!,#"%.& /! 0( $!10,#/()
/a diferencia de valores de !" representados en la tabla 87 puede representar menos
concentracin de eritrocitos en mujeres adultas que en *ombres de edad
correspondiente.
.l incremento de !" durante la gestacin se relaciona con aumento de la
concentracin de fibringeno durante este periodo7 en especial despu$s del segundo
semestre.
.l aumento de la !" por encima de los valores de referencia para cada grupo7 suele
representar7 en ausencia de anemias no *ipocrmicas7 da=o tisular7 de origen
inflamatorio o infeccioso o neopl?sico7 generalmente por el aumento de las protenas de
respuesta aguda7 en especial fibringeno7 47 en casos de inflamacin crnica7 quiz?s por
la *ipoalbuminemia que esto causa.
5tras causas de *ipoalbuminemia7 como trastornos *ep?ticos7 4 mas frecuentemente la
desnutricin tambi$n presentan aumento de la !".
Como 4a se mencion7 en presencia de anemia tambi$n se eleva la !"7 aunque se
discute si las anemias *ipocrmicas se comporten igual puesto que en este caso
disminu4e la densidad eritrocitaria7 lo cual conllevara a disminucin de !".
III MEDICION DEL HEMATOCRITO
2P$%&"%'%() /a palabra hematocrito proviene de dos palabras griegas que significan
sangre 4 separar.
Cuando la sangre anticoagulada se centrifuga *asta empacar en el fondo del tubo7 el
porcentaje de volumen ocupado por los elementos formes se denomina *ematocrito. Por
ejemplo7 si al centrifugar 86 cc de sangre7 el volumen ocupado por los eritrocitos es de
>7F ml7 el *ematocrito es de >F9.
.<isten m%ltiples factores que modifican los valores de *ematocrito7 entre los cuales se
tienen0
a' .fecto de la edad0 .ste es el factor que m?s modifica el *ematocrito. ,s los
ma4ores valores de *ematocrito son los del reci$n nacido7 con valores que
oscilan entre >H 4 H697 reflejo del aumento progresivo durante la vida
intrauterina. B> a >@ *oras despu$s del nacimiento7 sucede una *emlisis
fisiolgica intensa7 con disminucin marcada del *ematocrito7 que es progresivo7
siendo a los tres meses el m?s bajo de toda la vida del *umano. De all en
adelante el *ematocrito comienza un ascenso lento7 pero sostenido7 con valores
similares entre g$nero *asta los 8B a=os de edad apro<imadamente #pubertad'7 a
partir de lo cual se evidencian cambios entre g$neros7 tanto del *ematocrito7 la
concentracin de *emoglobina 4 el conteo eritrocitario. #ver tabla B'
b' .fecto del g$nero0 , partir de la pubertad7 4 durante toda la vida f$rtil7 el
*ombre posee *ematocrito7 concentracin de *emoglobina 4 conteo eritrocitario
ma4ores que la mujer7 para edad correspondiente.
.ste efecto parece ser debido al efecto estimulante de la eritropo4esis de la
testosterona. .n *ombres de edad avanzada7 la diferencia de estos par?metros
disminu4e con respecto a las mujeres. #ver tabla F'
c' .fecto de la "estacin0 .n la mujer gestante el *ematocrito7 la *emoglobina 4 el
conteo eritrocitario disminu4en7 principalmente durante los dos primeros
trimestres de gestacin7 para luego ascender durante el tercero. .l valor de
*ematocrito referenciado es de FA9 durante los dos primeros trimestre 4 de >69
al final de la gestacin.
d' .fecto de la altitud de residencia0 /a estancia en altitud genera aumento del
*ematocrito7 la concentracin de *emoglobina 4 del conteo eritrocitario7 que se
evidencia despu$s de 31A das de permanencia7 reflejando una aumento de la
eritropo4esis7 como respuesta a la *ipo<ia *ipob?rica de la altitud. .sta respuesta
tambi$n se presenta en las mujeres gestantes7 4 en todos los casos es
proporcional a la altitud sobre el nivel del mar. #ver tabla F'
e' .fecto del entrenamiento fsico0 .n los deportistas de fondo7 que requieren un
alto consumo de o<geno7 el entrenamiento se acompa=a de aumento la masa
eritrocitaria 4 del volumen plasm?tico7 pero con ma4or proporcin del segundo7
lo cual se refleja en una disminucin del *ematocrito7 el conteo eritrocitario 4 la
concentracin de *emoglobina con respecto al individuo no entrenado7 lo cual
sucede a pesar del efecto de la altura.
.stos cambios suceden tras entrenamiento crnico7 pero en sesiones de ejercicio
agudo7 puede presentarse aumento del *ematocrito7 la concentracin de
*emoglobina 4 el conteo eritrocitario debido a *emoconcentracin.
f' .fecto de la gravedad0 .n condiciones de microgravedad e<iste un aumento del
*ematocrito7 la concentracin de *emoglobina 4 del conteo eritrocitario debido a
la disminucin del volumen plasm?tico. ,l regresar a la tierra7 #8"'7 los
par?metros regresan a sus valores previos al vuelo.
1M!/%"%.& /!0 3!-#,("$%,()
(G.!-R,0 1sangre venosa anticoagulada con .D-,.
(,-.RI,/.!0
1 "uantes desec*ables
1-ubos capilares de vidrio.
1Plastilina
1Regla milim$trica.
1-orundas de algodn
R.,C-I5!0 ninguno.
EQUIPOS0 (icrocentrfuga para *ematocrito.
PR5C.DI(I.;-50 a' /lene el tubo por capilaridad *asta apro<imadamente I
partes de su longitud.
b' !elle uno de los e<tremos del tubo con plastilina.
c' Coloque los tubos capilares en la microcentrfuga.
d' Centrifugue los tubos capilares durante 3 minutos.
e' (ida en el tubo capilar con la regla milimetrada la altura total de la columna de
sangre 4 la altura de la columna de eritrocitos.
.l valor del *ematocrito se calcula con la siguiente frmula0
#,ltura eritrocitos:altura total' J 866
f' -ransfiera los datos a una tabla.
g' Descarte los tubos capilares en el guardi?n.
*' .scriba los datos en la *oja de laboratorio 4 analcelos .
1I&,!$'$!,#"%.& /! 0( $!10,#/() Como 4a se mencion7 el *ematocrito presenta
variaciones fisiolgicasK sin embargo puede modificarse en estados no fisiolgicos7
lo cual permite su uso en diagnstico clnico.
)ematocrito disminuido0 .sto puede deberse a disminucin de la masa de
eritrocitos7 sin disminucin del volumen plasm?tico7 como en las anemias7 o por
aumento del volumen plasm?tico7 como en la retencin anormal de lquidos
#*emodilucin'.
)ematocrito aumentado0 .sto puede deberse a un incremento de la masa de
eritrocitos #poliglobulia o policitemia' sin cambios en el volumen plasm?tico7 como
en el caso de enfermedades pulmonares 4:o cardiacas crnicas7 que cursan con
*ipo<ia. -ambi$n puede e<istir policitemia de origen tumoral7 por proliferacin
anormal eritroide7 como en la policitemia rubra vera. /a otra situacin que eleva el
*ematocrito es la disminucin del volumen plasm?tico #des*idratacin'7 sin
disminuir la masa eritrocitaria7 tal como sucede en la diarrea o quemaduras.
Cuando disminu4e tanto el volumen eritrocitario como el plasm?tico de forma
paralela7 el *ematocrito no se modifica7 tal como en los primeros minutos de
*emorragia aguda.
IV DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA
EN SANGRE.
P$%&"%'%() /a *emoglobinemia se define como la concentracin de *emoglobina en
la sangre total7 4 constitu4e uno de los ndices m?s importantes de la funcin
*ematolgica 4 respiratoria.
/as t$cnicas actuales se basan principalmente en el *ec*o de liberar la *emoglobina
de los eritrocitos 4 ponerla en solucin para transformarla en alguno de sus
derivados 4 su posterior medicin espectrofotom$trica.
/as variaciones fisiolgicas de la *emoglobina est?n sujetos b?sicamente a las
mismas del *ematocrito. #er tablas B 4 F'
M!/%"%.& /! 0# H!-(40(5%&!-%#)
(G.!-R,0 1!angre venosa anticoagulada con .D-,. #B6 ul'
MATERIALES)
1"uantes desec*ables
1-ubos de ensa4o.
1Pipeta graduada de 3 ml.
1(icropipeta ajustada para dispensar B6 ul.
1Puntas pl?sticas para pipeta.
1-ubos para lectura en espectrofotmetro.
REACTIVOS)
!olucin seg%n Drab+in #contiene bicarbonato de sodio 8g7 ferricianuro de potasio
6.B g7 cianuro de potasio 6.63 g7 agua destilada 8 litro'.
NOTA) ESTE ES UN REACTIVO TO6ICO POR SU CONTENIDO DE
CIANURO. MANEJESE CON PRECAUCION.
1Patrn de *emoglobina con ttulo conocido
.LGIP5!0 .spectrofotmetro.
PR5C.DI(I.;-50 a' Pipetear 3 ml de reactivo de Drab+in a un tubo de ensa4o 4
marcar como DmuestraE #8 tubo para cada muestra de sangre'.
b' -omar B6 ul de sangre de la muestra7 con la micropipeta7 limpiando mu4 bien con
algodn el e<ceso del e<terior de la punta de pipeta7 4 dispensarla en el tubo con el
reactivo de Drab+in7 luego de lo cual se debe *omogenizar la solucin.
c' Deje reposar durante 86 minutos.
d' !eleccione como longitud de onda 3>6 nm en el espectrofotmetro.
e' Gsando el tubo DblancoE lleve la absorbancia del equipo a cero.
f' /ea la absorbancia del tubo muestra 4 regstrela.
g' Calcule la concentracin de *emoglobina de la muestra usando la siguiente
ecuacin0
)b M #,bsorbancia de la muestra: absorbancia del patrn' J -tulo del patrn #g:dl'
*' -ransfiera los datos a la *oja de resultados 4 analcelos.
I&,!$'$!,#"%.& /! 0( $!10,#/() /a *emoglobina se comporta en t$rminos
generales como el *ematocrito7 siendo su interpretacin an?loga al mismo. ,s
)emoglobina disminuida se presenta en casos de anemia o de *emodilucin7 4
*emoglobina aumentada en situaciones de poliglobulia 4 de *emoconcentracin.
V CONTEO DE GLOBULOS ROJOS.
P$%&"%'%() /os glbulos rojos son el componente celular m?s abundante en la
sangre. !u funcin comprende el transporte de o<geno 4 de di<ido de carbono 4
regulacin del p) sanguneo7 todo gracias a la accin de su principal componente7 la
*emoglobina. /as variaciones fisiolgicas del conteo de glbulos rojos est?n
determinadas por las mismas circunstancias que el *ematocrito 4 la
*emoglobinemia. #er tablas B 4 F'.
Nndices eritrocitarios0 .stos son F valores que se calculan a partir de relaciones entre
el conteo de glbulos rojos7 el *ematocrito 4 la *emoglobinemia7 los cuales
permiten evaluar las caractersticas funcionales del eritrocito #componente
circulante' 4 de la m$dula sea #componente productivo'7 los cuales se usan como
criterios diagnsticos en la clnica para diferentes enfermedades *ematolgicas7
principalmente cuando est? implicada la anemia.
/os ndices eritrocitarios son0
1 5/G(.; C5RPG!CG/,R (.DI5 #C('0 .ste es el volumen promedio
de un glbulo rojo. !e calcula al dividir el *ematocrito entre el conteo de
glbulos rojos #dado en los millones de glbulos rojos por cada microlitro' 4
multiplicando esto por 860
C( M #*ematocrito:millones de glbulos rojos por microlitro' < 86
!u valor normal est? entre @3 4 866 f/ #8 < 86
183
/'. alores menores a @3 f/ se
denominan (ICR5CI-5!I! 4 valores superiores a 866 f/ se denominan
(,CR5CI-5!I!.
/as microcitosis se presentan en casos de anemias por deficiencia de *ierro
principalmente7 pero tambi$n se presenta en anemias asociadas a enfermedades
crnicas7 anemias *emolticas7 talasemias 4 anemia siderobl?stica. /a macrocitosis se
presenta en anemia asociada a la deficiencia de vitamina O8B como causa principal7
pero tambi$n se presenta en casos de *emlisis autoinmune.
.<iste un tipo de anemia normoctica7 en la cual el C( no se altera7 4 se presenta en
pacientes con insuficiencia renal crnica 4 en pacientes con *emorragias agudas. .n
algunas anemias apl?sicas7 o anemia por deficiencia de vitamina C tambi$n se puede
presentar normocitosis.
1 1 ).(5"/5OI;, C5RPG!CG/,R (.DI, #)C('0 .ste ndice es la
cantidad promedio de *emoglobina que *a4 en cada glbulo rojo. !e calcula al
dividir la *emoglobinemia entre el conteo de glbulos rojos #dado en los
millones de glbulos rojos por cada microlitro' 4 multiplicando esto por 860
)C( M #*emoglobinemia:millones de glbulos rojos por microlitro' < 86
!u valor normal est? entre BH 4 FF pg #8 < 86
18B
g'.
alores de )C( inferiores a BH pg se denominan )IP5CR5(I,7 la cual suele estar
asociada a los estados donde se presenta microcitosis #anemia ferrop$nica es la m?s
frecuente7 anemia *emoltica7 anemia en enfermedades crnicas'. alores de )C(
superiores a FF pg se denominan )IP.RCR5(I, 4 se presentan en anemia asociada
deficiencia de vitamina O8B7 aunque est? puede cursar tambi$n con normocromia7 o
incluso en estados mu4 avanzados con *ipocroma. ,dem?s en deficiencia de vitamina
C en eritropo4esis acelerada tambi$n se presenta *ipercromia.
1C5;C.;-R,CI5; D. ).(5"/5OI;, C5RPG!CG/,R (.DI, #C)C('0 .ste
ndice se describe como el porcentaje del volumen de un eritrocito ocupado por la
*emoglobina7 4 se calcula al dividir la *emoglobinemia entre el *ematocrito 4 multipliar
esto por 8660
C)C( M #*emoglobinemia:*ematocrito' < 866
.l valor normal de la C)C( se encuentra entre F6 4 F39.
alores por debajo del lmite inferior se asocian a estados ferrop$nicos7 o anemias
*emolticas7 o por talasemia. alores incrementados por encima de F39 se observan en
ciertos trastornos cong$nitos como la esferocitosis7 los cuales no son frecuentes.
.<iste otro dato de referencia para el estudio de los glbulos rojos7 conocido como
,;C)5 D. DI!-RIOGCI5; D. O,;D, #RD&'7 el cual mide la variacin en el
tama=o eritrocitario circulante. .n la sangre e<isten en condiciones fisiolgicas glbulos
rojos de diferentes tama=os7 pues los eritrocitos pierden normalmente volumen a medida
que envejecen. ,s que el RD& en condiciones normales se encuentra entre 8818>9.
alores superiores al 8>9 se denomina ).-.R5".;.ID,D.
.ste valor es importante para valorar en general la respuesta medular a ciertas
circunstancias7 pues cuando la m$dula sea est? activa7 suele presentarse aumento del
RD&7 mientras que en condiciones de mala actividad medular7 se presenta RD&
normal.
(G.!-R,0 1!angre venosa anticoagulada con .D-,. #B6 ul'
(,-.RI,/.!0
1"uantes desec*ables
1-ubos de ensa4o.
1Pipeta graduada de 8 ml.
1(icropipeta ajustada para dispensar 3 ul.
1Puntas pl?sticas para pipeta.
1Pipetas Pasteur
1 C?mara de conteo celular seg%n ;eubauer #ver figura 8'
1 Cubreobjetos.
R.,C-I5!0
1!olucin de "oPer0 #sulfato sdico H7B39 p:v7 ?cido ac$tico glacial 8H7HH v:v'.
.LGIP5!0 (icroscopio.
Figura 8. C?mara de conteo celular seg%n ;eubauer. -omada 4 modificada a partir
de #B'
PR5C.DI(I.;-50 a' Pipetee 8 m/ de la solucin de "oPer en un tubo de ensa4o
limpio 4 marcado.
b' Pipetee 3 u/ de muestra en el tubo con el reactivo de "oPer7 mezcle suavemente
4 deje reposar durante 3 minutos. .sto nos permite obtener una dilucin 80B66.
c' -ome la c?mara de conteo 4 c%brala con un cubreobjetos7 teniendo precaucin de
no manc*arla con los dedos.
d' .ncienda el microscopio7 cierre el diafragma 4 coloque la c?mara en el
microscopio7 con el objetivo 86Q busque la cuadrcula 4 familiarcese con ella.
e' Con la pipeta Pasteur tome una alcuota de la mezcla que realiz 4 colquela en el
borde de la c?mara7 dejando que esta se llene por capilaridad.
f' Cuente los eritrocitos en las zonas demarcadas para ello. !e deben contar en total
3 ?reas de 676> mm
B
7 es decir @6 cuadros peque=os. #er figura 8'. Para evitar
errores de conteo7 un glbulo rojo que toque el borde izquierdo o superior de un
cuadro se incluir? dentro de este7 mientras que si toca el borde inferior o derec*o7 no
se incluir?.
C70"10() Cada cuadro grande de la c?mara de ;eubauer representa 8 mm
B
. .l
cuadro grande del centro tiene a su vez B3 cuadros medianos de 676> mm
B
. Cada
cuadro mediano se subdivide a su vez en 8H cuadros peque=os7 de 6766B3 mm
B
. .ste
cuadro grande es el determinado para el conteo de glbulos rojosK de $l se tomar?n
los cuatro cuadros de las esquinas 4 el del centro7 para tal determinacinK es decir se
tomar?n @6 cuadros peque=os. .sto nos da un ?rea de conteo de 67B mm
B
. Dado que
la profundidad de la c?mara es de 678 mm7 el volumen contado sera de 676B mm
F
.
.ste valor se multiplica por 36 para calcular el n%mero de eritrocitos en 8 mm
F
7 4
este valor se multiplica por B66 para compensar la dilucin 80B66 al mezclar con el
reactivo7 lo cual nos da un factor total de 86666 para saber el conteo total de
eritrocitos por cada microlitro en la muestra analizada0
Conteo de glbulos rojos #millones:u/' M glbulos rojos contados en los @6
cuadros peque=os Q 86666.
g' .scriba los datos en la *oja de laboratorio 4 *aga el respectivo an?lisis
I&,!$'$!,#"%.& /! 0( $!10,#/() .l conteo de glbulos rojos se comporta en
t$rminos generales como el *ematocrito 4 la *emoglobinemia7 siendo su
interpretacin an?loga al mismo. ,s conteos eritrocitarios disminuidos se
encuentran en anemia o *emodilucin7 mientras que conteos eritrocitarios elevados
se encuentran en policitemia 4 *emoconcentracin.
TABLA 2
VALORES FISIOLOGICOS DE PARAMETROS HEMATIMETRICOS
DEPENDIENDO DE LA EDAD
EDAD HCTO % CONTEO ERITROCITARIO X 10
6
/UL Hb g/dl
!ord"n 5#3 $/-5#3 %#63 $/-0#%& 1'#1 $/-1#'
1 dia 5(# $/- 6#6 5#30 $/-0#55 1&#% $/-#1
3 d)as 5%#5 $/-6#3 5#06 $/-0#60 1(#5 $/-#1
' d*as 5%#& $/- 6# 5#1 $/-0#6 1(#( $/-#1
3 meses 33#1 $/- #6 3#'6 $/-0#3% 11#% $/-0#&
6 meses 3%#( $/-#5 %#%( $/-0#%1 11#6 $/-0#&
1 ao 3%#5 $/-%#1 %#'5 $/-0#51 11#1 $/-1#'
aos 35#( $/-3#0 %#'' $/-0#% 11#' $/-1#%
5 aos 3'# $/-#5 %#65 $/-0#%6 1#' $/-1#0
10 aos 3(#5 $/-#( %#(0 $/-0#%' 13# $/-1#
1 aos 3&#' $/-3#3 %#& $/-0#51 13#6 $/-1#%
TABLA 3
VALORES FISIOLOGICOS DE PARAMETROS HEMATIMETRICOS
RELACIONADOS CON LA ALTURA
ALTITUD
(m snm)
GENERO Y
EDAD
HEMATOCRIT
O %
HEMOGLOINA
(g/dl)
CONTEO ERITROCITARIO
! 10
6
/ul
0-50 Nios %0#& $/- 1#0 13#0 $/- 1#%3 %#%5 $/- 0#10
Mujeres
adultas %1#5 $/- 1#5 13#1 $/- 0#6 %#33 $/- 0#1%
Hombres
adultos %'#0 $/- 0#5 15#5 $/- 1#%0 5#03 $/- 0#10
'50 Nios %%# $/- #( 1%# $/- 0#(% %#66 $/- 0#3%
Mujeres
adultas %#0 $/- #3 13#% $/- 0#&1 %#%1 $/- 0#5
Hombres
adultos %&# $/- 1# 16# $/- 1#10 5#11 $/- 0#%
1350 Nios %3#5 $/- 1#0 1%#5 $/- 0#5' %#(0 $/- 0#30
Mujeres
adultas %#' $/- 1#% 1%#3 $/- 0#&3 5#1' $/- 0#0
Hombres
adultos %(#' $/- 1#0 16#' $/- 0#50 5#%5 $/- 0#30
1(00 Nios %5# $/- 1#5 15#1 $/- 0#(1 %#&' $/- 0#30
Mujeres
adultas %#% $/- 1#0 1%#5 $/- 1#1' %#'( $/- 0#31
Hombres
adultos %&#% $/- #& 1'# $/- 0#(3 5#6 $/- 0#%
550 Nios %5#% $/- #5 15# $/- 0#51 5#0' $/- 0#&
Mujeres
adultas %5#3 $/- # 15#5 $/- 0#51 %#&3 $/- 0#%
Hombres
adultos 51#1 $/- #% 16#5 $/- 1#00 5#61 $/- 0#(
VI CONTEO DE GLOBULOS BLANCOS
(G.!-R,0 1!angre venosa anticoagulada con .D-,. #B6 ul'
(,-.RI,/.!0
1"uantes desec*ables
1-ubos de ensa4o.
1Pipeta graduada de 8 ml.
1(icropipeta ajustada para dispensar 36 ul.
1Puntas pl?sticas para pipeta.
1Pipetas Pasteur
1 C?mara de conteo celular seg%n ;eubauer #ver figura 8'
1 Cubreobjetos.
R.,C-I5!0
1!olucin de -ur+0 #acido ac$tico glacial B9 v:v7 solucin de violeta de genciana
89 v:v'.
.LGIP5!0 (icroscopio.
PR5C.DI(I.;-50 a' Pipetee 8 m/ de la solucin de -ur+ en un tubo de ensa4o
limpio 4 marcado.
b' Pipetee 36 u/ de muestra en el tubo con el reactivo de -ur+7 mezcle suavemente
4 deje reposar durante 3 minutos. .sto nos permite obtener una dilucin 80B6.
c' -ome la c?mara de conteo 4 c%brala con un cubreobjetos7 teniendo precaucin de
no manc*arla con los dedos.
d' .ncienda el microscopio7 cierre el diafragma 4 coloque la c?mara en el
microscopio7 con el objetivo 86Q busque la cuadrcula 4 familiarcese con ella.
e' Con la pipeta Pasteur tome una alcuota de la mezcla que realiz 4 colquela en el
borde de la c?mara7 dejando que esta se llene por capilaridad.
f' Cuente los leucocitos en las zonas demarcadas para ello. !e deben contar en total
> ?reas de 8 mmB7 es decir H> cuadros medianos. #er figura 8'. Para evitar errores
de conteo7 un glbulo blanco que toque el borde izquierdo o superior de un cuadro
se incluir? dentro de este7 mientras que si toca el borde inferior o derec*o7 no se
incluir?.
C70"10() Cada cuadro grande de la c?mara de ;eubauer representa 8 mm
B
. Cada
cuadro grande de cada esquina se divide a su vez en 8H cuadros medianos7 cada uno
con un ?rea de 676HB3 mm
B
. .sto nos da un ?rea de conteo de > mm
B
. Dado que la
profundidad de la c?mara es de 678 mm7 el volumen contado sera de 67> mm
F
. .ste
valor se multiplica por B73 para calcular el n%mero de eritrocitos en 8 mm
F
7 4 este
valor se multiplica por B6 para compensar la dilucin 80B6 al mezclar con el
reactivo7 lo cual nos da un factor total de 36 para saber el conteo total de leucocitos
por cada microlitro en la muestra analizada0
Conteo de glbulos blancos #miles:u/' M glbulos blancos contados en los H>
cuadros medianos Q 36.
g' .scriba los datos en la *oja de laboratorio 4 *aga el respectivo an?lisis.
BIBLIOGRAFIA
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ED+ARD ACERO, MARIA INES MALDONADO, JULIO C MARTINEG,
HOJA DE LABORATORIO
1. RESULTADO DE ERITROSEDIMENTACIHN.
+,-M./ (s) 15 30 %5 60
0-1,M-N+23,/N 45/67528
M7-0+82 1(mm)
0-1,M-N+23,/N 45/67528
M7-0+82 (mm)
GRAFICA DE ERITROSEDIMENTACION.
2. RESULTADO DE HEMATOCRITO
M7-0+82 1 M7-0+82
25+782 1- 52 M7-0+82
25+782 1- 52 3/57MN2 1-
-8,+8/3,+/0
925/8 1-5 H-M2+/38,+/
3. RESULTADO DE HEMOGLOBINA
M7-0+82 1 M7-0+82
260/8623,2 1-5 .2+8/N
+,+75/ 1-5 .2+8/N (g/d5)
260/862N3,2 1 -52 M7-0+82
+,+75/ 1- 52 M7-0+82 (g/d5)
E. CONTEO DE GLOBULOS ROJOS
M7-0+82 1 M7-0+82
45/675/0 8/:/0 -N -5 37218/ 1
45/675/0 8/:/0 -N -5 37218/
45/675/0 8/:/0 -N -5 37218/ 3
45/675/0 8/:/0 -N -5 37218/ %
45/675/0 8/:/0 -N -5 37218/ 5
+/+25 45/675/0 8/:/0 -N 5/0 5
37218/0
+/+25 ./8 10000
I. CONTEO DE GLOBULOS BLANCOS

M7-0+82
1 M7-0+82
45/675/0 652N3/0 -N -5 37218/ 1
45/675/0 652N3/0 -N -5 37218/
45/675/0 652N3/0 -N -5 37218/ 3
45/675/0 652N3/0 -N -5 37218/ %
+/+25 45/675/0 652N3/0 -N 5/0 5
37218/0
+/+25 ./8 50
PR."G;-,! D. .!-GDI50
8. RLu$ entendi por velocidad de sedimentacin globularS
B. RLu$ relacin tienen la velocidad de sedimentacin globular 4 el *ematocritoS
F. )aga una gr?fica donde demuestre cmo se modifican durante la vida el
*ematocrito7 la *emoglobina7 el conteo eritrocitario 4 los ndices eritrocitarios.
>. Calcule los ndices eritrocitarios en las muestras que estudi. ,nalcelos. .scriba
las diferencias que *a4 en estos ndices entre *ombres 4 mujeres.
3. RLu$ variaciones fisiolgicas modifican el conteo de glbulos blancos 4 cmo lo
*acenS