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ANTIGENOS FEBRILES COLOR

(Para pruebas Widal y Weil-Felix)
USO:
La suspensin de antgenos de color Plasmatec sirve para
identificar y cuantificar anticuerpos especficos en el suero
humano con ciertas salmonellas, Ricketsias y Brucillas
patgenas
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Para uso de diagnostico solamente
nicamente para uso profesional.
Advertencias para Salud y Seguridad:
Todas las muestras de los pacientes y los reactivos deben ser
tratados como potencialmente infecciosos y el usuario debe
utilizar guantes protectores, careta y batas de laboratorio
cuando la prueba este siendo realizada.
Los elementos que no sean desechables deben ser
esterilizados despus de su uso a travs de un mtodo
apropiado. Los elementos desechables deben ser tratados
como desechos altamente peligrosos y deben ser incinerados.
Si alguno de estos materiales se derrama, estos deben ser
absorbidos y destruidos como se ha explicado anteriormente.
El sitio donde se vierte debe ser esterilizado con un
desinfectante o con alcohol al 70%.
Los reactivos de control contienen suero de conejo. El
producto tambin contiene sales buffer. Incluyendo sodio
azido y tiomersal como preservativos Ver la hoja de
seguridad de material.No inhale o ingiera aerosoles Lave con
abundante agua.
Precauciones Analticas:
No modifique el procedimiento de esta prueba.
De ninguna manera diluya o modifique los reactivos.
Permita que todos los reactivos y las muestras estn a
temperatura ambiente (18 30 C) antes de usarlos
No intercambie reactivos de diferentes lotes o tipos.
COMPOSICION
Presentacin
Antgenos Febriles de Color Plasmatec
FA/002 Salmonella tfico H 5 ml
FA/004 Salmonella H paratfico A 5 ml
FA/006 Salmonella H paratfico B 5 ml
FA/008 Salmonella H paratfico C 5 ml
FA/010 Salmonella tfico O 5ml
FA/011 Salmonella tfico Vi 5ml
FA/012 Salmonella O paratfico A 5 ml
FA/014 Salmonella O paratfico B 5 ml
FA/016 Salmonella O paratfico C 5 ml
FA/018 Brucella abortus 5 ml
FA/020 Brucella melitensis 5 ml
FA/022 Proteus OX2 5 ml
FA/024 Proteus OX19 5 ml
FA/026 Proteus OXK 5 ml
FA/030 Control Positivo 0.5 ml
FA/032 Control Negativo 0.5 ml
FA/040 Estuche de Antgenos Febriles 8x5 ml (FA/002-FA/016)
FA/042 Estuche de Antgenos Febriles 8x5 ml (FA/002-FA/016)
con control positivo (FA/030) y control negativo (FA/032)
Inserto del Estuche
ALMACENAMIENTO Y VIDA UTIL.
Almacene entre 2
o
C - 8
o
C. Sensibles a la luz. No refrigere.
Bajo estas condiciones las caractersticas y el funcionamiento
del estuche se mantendrn por 36 meses desde la fecha de
fabricacin.
Ver fecha de expiracin en la etiqueta del estuche. Los
reactivos deben ser desechados si estn contaminados o no
muestran una actividad correcta con los controles
Los reactivos en cada estuche han sido estandarizados para
producir su propia reaccin y los reactivos no deben ser
intercambiados con aquellos que correspondan a otros lotes.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO INCLUIDOS
Tubos Pequeos para pruebas
Pipetas
Laminas de reaccin con fondo blanco
PREPARACION DE LA MUESTRA
Utilice suero fresco obtenido por centrifugacin de los tejidos
sanguneos. La muestra puede ser almacenada entre 2
o
C - 8
o
C por 48 horas antes de realizar la prueba. Para periodos ms
largos de tiempo el suero debe ser congelado. El suero
haematico, lipaemico o contaminado debe ser desechado.
PROCEDIMIENTO
Principio
Los Antgenos Febriles Plasmatec son adecuados para ambas
tcnicas, rpida en lmina y aglutinacin en tubo para
determinar en suero humano estas aglutininas. La suspensin
de antgenos de color Plasmatec son bacterias muertas
unidas al color para la lectura de las pruebas de aglutinacin.
Los antgenos de color azul son especficos para los antgenos
somticos O mientras que los de color rojo son especficos
para los antgenos flagelares H.
TITULACION RAPIDA EN LMINA
Usando pipeta, dispense 0.08 ml, 0.04ml, 0.02ml, 0.01ml y
0.005 ml de suero sin diluir en los crculos de reaccin.
Mezcle el reactivo y agregue una gota de la suspensin del
antgeno en cada alcuota de suero.
Mezcle bien usando un palillo y rote la lmina.
LEA DESPUS DE UN MINUTO.
Aglutinacin en algn crculo indica resultados que deben ser
probados en tubo.
0.08 ml = 1:20, 0.04 ml = 1:40, 0.02 ml = 1:80, 0.01 ml
= 1:160, 0.005 ml = 1:320
La prueba rpida en lmina ofrece una aproximacin de los
resultados esperados de la prueba en tubo.
NOTA: Es necesario realizar todas las diluciones en la prueba
en lmina para evitar el efecto PROZONA donde
concentraciones elevadas de suero pueden dar resultados
negativos pero nuevas diluciones pueden dar resultados
positivos.
PRUEBA DE AGLUTINACIN EN TUBO
Marque 8 tubos plsticos pequeos.
Usando una pipeta, dispense 1,9 ml de solucin salina en el
primer tubo, y 1.0 ml en los siete restantes.
Usando pipeta agregue 0.1 ml de suero del paciente sin diluir
en el primer tubo. Mezcle.
Usando pipeta, dispense 1 ml del primer tubo en el segundo
tubo y mezcle.
Contine este mtodo doblando las diluciones hasta el sptimo
tubo. Descarte 1.0 ml del tubo sptimo. El octavo tubo
contendr solamente solucin salina como control y no debe
contener ningn suero.
Mezcle el reactivo y agregue 1 gota del antigeno apropiado en
cada tubo y mezcle bien.
Incube como sigue:
Antgenos O y Proteus: 50 C por 4 horas
Antgenos H: 50C por 2 horas
Antgenos Brucella: 37 C por 24 horas
Es de vital importancia, que cuando los tubos son colocados en
el bao de agua, el nivel debe estar aproximadamente 2/3
sobre el nivel del contenido del tubo. Esto mantendr la
temperatura dentro del tubo y evitar resultados falsos.
Examine los tubos despus del tiempo de incubacin y observe
aglutinacin, el titulo debe ser tomado del ltimo tubo que
muestre aglutinacin.
INTERPRETACIN
Se ha encontrado que algunos serotipos de salmonella poseen
antgenos somticos del mismo tipo. Aglutinacin de alguno de
los antgenos de salmonella con suero humano debe no
obstante ser tomados como prueba de infeccin por un
organismo particular, mejor dicho como una infeccin por un
organismo de estructura antignica similar.
Los tubos no deben ser ledos despus de los tiempos de
incubacin recomendados para eliminar la posibilidad de
resultados falsos. El ltimo tubo que muestre signos de
aglutinacin debe ser tomado como el titulo de la prueba. Para
resultados negativos, todos los tubos deben permanecer
libres de aglutinacin alguna. Ttulos superiores a 1:80 son
significativos y pueden reflejar infeccin reciente, pero pueden
encontrarse ttulos bajos en algunos pacientes.
PRESERVATIVOS
Las suspensiones de antgeno contienen 0.1% de formaldehdo
y 0.01 % mertiolate. Los sueros controles contienen 0.1 % de
azida de sodio.
DESARROLLO Y CARACTERISTICAS
Las capacidades generalmente aceptadas de las funciones de
la prueba Widal utilizando antgenos febriles es 70%
especificidad y sensitividad. Las pruebas serolgicas en los
diagnsticos de infecciones de salmonella tiene limitaciones
importantes, los tejidos de una muestra son usualmente los
preferidos.
CONTROL DE CALIDAD INTERNO
Los controles son provedos en el estuche y deben ser
utilizados en intervalos regulares para confirmar que la prueba
esta trabajando satisfactoriamente.
REFERENCIAS:
1. Huddleson. I.F and Bell (1928) J infect. Dis. 42 242
2. Freter, R. (1980) Man of Cli. Imm. 2nd Ed. A.S.M.
Washington DC 460-453
3. Weil. E and felix. A. Wein Klin, 29 974 (1916)
4. Cruikshank, R (1965) Med Mic 11th Ed 907
PFA.V3 9/4/03